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猪瘟病毒E^(rns)蛋白RNase活性与免疫抑制功能的相关性研究 被引量：1
1
作者 赵天生 张悦之 夏燕华 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第3期124-127,138,共5页
猪瘟病毒Erns蛋白是具有多功能的结构蛋白,具有RNase活性和免疫抑制功能。为阐明猪瘟病毒Erns蛋白RNase活性与免疫抑制间的相关性,对决定RNase活性的2个关键氨基酸进行基因突变(297H→K和346H→K),使Erns丧失RNase活性。荧光素酶报告基... 猪瘟病毒Erns蛋白是具有多功能的结构蛋白,具有RNase活性和免疫抑制功能。为阐明猪瘟病毒Erns蛋白RNase活性与免疫抑制间的相关性,对决定RNase活性的2个关键氨基酸进行基因突变(297H→K和346H→K),使Erns丧失RNase活性。荧光素酶报告基因系统研究发现,失去RNase活性的Erns蛋白仍能抑制由新城疫病毒诱导的IFN-β启动子的活化作用。表明Erns蛋白的免疫抑制功能并不依赖于RNase活性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 Erns蛋白 rnase活性 免疫抑制
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HSV-1 UL41基因编码蛋白的RNase活性及其调控 被引量：1
2
作者 何天琼 程安春 汪铭书 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第5期633-638,共6页
单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type-1,HSV-1)UL41基因编码一种皮层蛋白,该蛋白质具有核糖核酸酶(ribonuclease,RNase)活性,能特异性地降解一些宿主和病毒信使RNA(messenger RNA,m RNA),参与宿主免疫逃逸,与其他蛋白质相互作用... 单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type-1,HSV-1)UL41基因编码一种皮层蛋白,该蛋白质具有核糖核酸酶(ribonuclease,RNase)活性,能特异性地降解一些宿主和病毒信使RNA(messenger RNA,m RNA),参与宿主免疫逃逸,与其他蛋白质相互作用调控其RNase活性。该文概述了HSV-1UL41基因编码蛋白的RNase活性及其调控机制,以期为该基因的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 HSV-1 UL41基因 编码蛋白 rnase活性
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猪瘟病毒E^(rns)基因RNase酶活性位点的定点突变对其原核表达的影响 被引量：3
3
作者 白霞 李润成 +2 位作者 余兴龙 丁建 黎满香 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期568-571,共4页
利用重组PCR技术将猪瘟病毒兔化弱毒株(Hog cholera virus lapinized Chinese strain,HCLV)Erns编码区30位His残基密码子CAT突变为Pro残基密码子CCC,将突变后的基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建成重组质粒pETmErns,并将此重组... 利用重组PCR技术将猪瘟病毒兔化弱毒株(Hog cholera virus lapinized Chinese strain,HCLV)Erns编码区30位His残基密码子CAT突变为Pro残基密码子CCC,将突变后的基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建成重组质粒pETmErns,并将此重组子转入宿主菌BL21(DE3)plysS中,在IPTG的诱导下表达重组转化菌.结果:突变的mErns基因能在pET表达系统成功表达.用Western blotting检测表明,所表达的蛋白是猪瘟病毒特异性的,但克隆于pET-28a(+)中未突变的Erns基因却不能表达,说明Erns基因的RNA酶活性是影响该基因在Escherichia coli中表达的因素之一. 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E^ms基因 定点突变 rnase酶活性 原核表达
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水稻XIOsPR10蛋白的原核表达及其RNase活性研究
4
作者 郭迟鸣 毛倩 +7 位作者 王丽娟 李东霄 杨晓坡 郭立佳 汪卫 李敏 郝国静 陈亮 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期39-42,共4页
PR10(病程相关蛋白10)类蛋白与植物的抵御外来病害及系统获得性抗性(SAR)有着紧密联系,而且许多PR10类蛋白都具有RNase活性,并通过这种活性抵抗外源病害。根据获得的XIOsPR10基因,将其构建到pET28a中,通过原核表达及磁珠纯化获得目的蛋... PR10(病程相关蛋白10)类蛋白与植物的抵御外来病害及系统获得性抗性(SAR)有着紧密联系,而且许多PR10类蛋白都具有RNase活性,并通过这种活性抵抗外源病害。根据获得的XIOsPR10基因,将其构建到pET28a中,通过原核表达及磁珠纯化获得目的蛋白,通过RNA消化实验证实XIOsPR10重组蛋白具有RNase活性,进一步揭示了XIOsPR10蛋白的功能。 展开更多
关键词 防御 PR10类蛋白 rnase酶活性
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油茶自交不亲和S-RNase基因鉴定与分子特征分析 被引量：4
5
作者 江南 谭晓风 +1 位作者 徐艳 周俊琴 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1521-1535,共15页
植物自交不亲和性(SI,self-incompatibility)中SSI和GSI主要受S位点控制。油茶属于后期自交不亲和(LSI,late-acting self-incompatibility)植物,油茶自交不亲和性已成为油茶产业发展的制约因素。为探究油茶自交不亲和分子机制,本研究以... 植物自交不亲和性(SI,self-incompatibility)中SSI和GSI主要受S位点控制。油茶属于后期自交不亲和(LSI,late-acting self-incompatibility)植物,油茶自交不亲和性已成为油茶产业发展的制约因素。为探究油茶自交不亲和分子机制,本研究以前期研究的油茶雌蕊转录组数据和已完成基因注释的油茶良种华硕全基因组数据中获得的5条S-RNase(CoSRNase)基因组序列为基础设计引物,从10个油茶品种的叶片DNA中扩增CoS-RNase外显子,结合雌蕊CoS-RNase的cDNA全长克隆预测CoS-RNase氨基酸多态性位点,共获得28条CoS-RNase等位基因。基因结构分析显示CoS-RNases基因包含4个外显子和3个内含子;cDNA全长1141 bp,ORF 717 bp,编码238个氨基酸,进化分析显示CoS-RNase与茶树CsS-RNase同源性最大;序列分析确定CoS-RNases具有T2 RNase蛋白家族的两个保守结构域和活性位点,同时有与苹果、梨等S-RNase相同的作用位点:降解RNA的组氨酸(His,119位)位点和解聚肌动蛋白的脯氨酸(Pro,156位)位点;体外重组蛋白实验表明CoS-RNase蛋白具有RNase活性,能抑制花粉管的生长;qRT-PCR分析CoS-RNase在油茶花粉中几乎不表达,其他各组织中均有表达,同时在自花授粉和异交授粉后花柱和子房中的表达模式与花粉管生长规律相吻合。以上结果说明CoS-RNase很可能直接参与了油茶的自交不亲和性反应,是调控油茶自交不亲和性反应的重要因子。本研究可为进一步探索油茶自交不亲和性反应的分子调控提供理论基础。 展开更多
关键词 油茶 后期自交不亲和性 CoS-rnase等位基因 rnase活性 基因表达
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乙型肝炎病毒靶向核糖核酸酶及其突变体的原核表达和活性分析
6
作者 李英辉 黄豫晓 +2 位作者 赵亚 刘军 薛采芳 《生物技术通讯》 CAS 2008年第2期194-196,共3页
目的:研究原核表达的乙型肝炎病毒(HBV)靶向核糖核酸酶(RNase)及其突变体(点突变失去RNase活性)的活性。方法:将构建的靶向核糖核酸酶及其突变体基因克隆入原核表达载体pET32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白(HBV核心蛋... 目的:研究原核表达的乙型肝炎病毒(HBV)靶向核糖核酸酶(RNase)及其突变体(点突变失去RNase活性)的活性。方法:将构建的靶向核糖核酸酶及其突变体基因克隆入原核表达载体pET32a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白(HBV核心蛋白与人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素的融合蛋白)的表达;表达产物经包涵体纯化、SDS-PAGE和Western印迹鉴定,将纯化的蛋白用透析方法复性;以酵母tRNA为作用底物,应用复性的蛋白进行RNase活性分析。结果:纯化和复性了HBV靶向核糖核酸酶及其突变体;复性的HBV靶向核糖核酸酶可以降解酵母tRNA且具有剂量依赖性,而复性后的突变的靶向核糖核酸酶体不具有RNase活性。结论:原核表达的HBV靶向核糖核酸酶具有较强的RNase活性,为探索HBV靶向核糖核酸酶抑制乙肝病毒复制的机理奠定了基础。 展开更多
关键词 靶向核糖核酸酶 原核表达 rnase活性 乙型肝炎病毒
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小麦代换系幼苗根系对低磷胁迫的生理响应暗示的染色体效应 被引量：6
7
作者 米少艳 路斌 +3 位作者 张颖 杜欢 白志英 李存东 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1204-1211,共8页
【目的】以CS(Chinese Spring,中国春)–Synthetic 6x代换系为材料,研究小麦代换系幼苗根系对低磷胁迫的生理响应,并对相关性状进行染色体定位,为小麦耐低磷基因型的遗传改良提供理论依据。【方法】将母本中国春、父本Synthetic 6x以及... 【目的】以CS(Chinese Spring,中国春)–Synthetic 6x代换系为材料,研究小麦代换系幼苗根系对低磷胁迫的生理响应,并对相关性状进行染色体定位,为小麦耐低磷基因型的遗传改良提供理论依据。【方法】将母本中国春、父本Synthetic 6x以及代换系种子放于培养皿,于光照培养箱中培养5 d,选择长势一致的健壮幼苗去掉胚乳,移入Hoagland营养液(p H=6.0)中培养。两叶一心时进行处理,设置正常供磷为对照(磷浓度为2 mmol/L)和低磷胁迫(磷浓度为20μmol/L)两个处理,四叶一心时对不同磷处理下代换系幼苗的根冠比、根系活力、酸性磷酸酶(APase)和核糖核酸酶(RNase)活性等生理指标进行测定。【结果】低磷胁迫下,小麦代换系苗期根冠比显著升高,APase和RNase活性增强,根系活力降低;与母本中国春相比,4A、4B、6B、1D、2D和7D代换系根冠比和相对根冠比显著或极显著升高,1A、2A、3A、5A、3B、7B、2D、3D、5D和7D代换系的根系活力和相对根系活力显著或极显著增高,4A、1D和4D代换系根系的酸性磷酸酶活性及相对磷酸酶活性均显著或极显著升高,2A、6B、4D代换系根系的RNase活性和相对RNase活性显著或极显著增高。【结论】低磷胁迫下,Synthetic 6x的4A、4B、6B、2D和7D染色体上可能存在诱导根冠比升高的基因;1A、2A、3A、5A、3B,7B、2D、3D、5D和7D染色体上可能存在诱导根系活力增强的基因;4A、1D和4D染色体上可能存在诱导根系酸性磷酸酶活性增强的基因;2A、6B和4D染色体上可能存在诱导根系RNase活性增强的基因。即Synthetic 6x的第四染色体(4A、4B、4D)上可能存在调控根系相关特性的关键基因。 展开更多
关键词 低磷胁迫 小麦代换系 根系活力 APase和rnase活性 染色体效应
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