Chicken Embryo Inhibition Test of Recombinant Freeze-drying Chicken Interferon against Newcastle Disease Virus( NDV) F_(48)E_(10)

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作者 Guo Shijin Wang Yanping +5 位作者 Fu Shijun Zhang Zhimei Xu Qianqian Miao Lizhong Dong Lin Shen Zhiqiang 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2015年第2期113-115,共3页

The paper was to study the inhibitory effect of recombinant freeze-drying chicken interferon against Newcastle disease virus （NDV） F48E10. Nine-day-old chicken embryos were inoculated with recombinant freeze-drying ... The paper was to study the inhibitory effect of recombinant freeze-drying chicken interferon against Newcastle disease virus （NDV） F48E10. Nine-day-old chicken embryos were inoculated with recombinant freeze-drying chicken interferon via allaotoic sack, while 10-day-old chicken embryos were inoculated with NDV F48E10, and in vivo protective efficacy of interferon on chichen embryos was studied. The results showed that the recombinant freeze-drying chicken interferon at the dose of 1.28 mg/embryo reached the protection ratio of 90% on chicken embryo infected by F48E10. 展开更多

关键词 recombinant freeze-drying chicken interferon chicken embryo F48E10 Protection ratio

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口服表达胸腺肽和鸡干扰素融合蛋白的重组乳酸乳球菌对鸡肠道菌群影响的研究 被引量：2

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作者 刘增琪 王贺 +6 位作者 胡洪娇 崔子扬 邱宇 张素华 崔红玉 王云峰 何高明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1045-1053,共9页

为构建表达胸腺肽和鸡γ干扰素融合蛋白(Tα1-cIFN-γ)的重组乳酸乳球菌并检测其作为口服免疫增强剂对鸡外周血单个核细胞(PBMC)的增殖活性及鸡肠道菌群的影响,本研究将鸡胸腺肽(Tα1)和鸡干扰素(cIFN-γ)的编码基因序列(去除干扰素信... 为构建表达胸腺肽和鸡γ干扰素融合蛋白(Tα1-cIFN-γ)的重组乳酸乳球菌并检测其作为口服免疫增强剂对鸡外周血单个核细胞(PBMC)的增殖活性及鸡肠道菌群的影响,本研究将鸡胸腺肽(Tα1)和鸡干扰素(cIFN-γ)的编码基因序列(去除干扰素信号肽编码基因序列),并按照宿主菌乳酸乳球菌NZ3900株的基因组优化密码子后,以经G4S-linker连接的Tα1-cIFN-γ基因为模板,采用PCR扩增携带表达载体p NZ8149同源臂及HA标签的目的基因序列(Tα1-cIFN-γ-HA);通过PCR扩增携带Tα1-cIFN-γ-HA基因序列同源臂的全长p NZ8149载体序列,利用同源重组的方式将这两段基因连接构建重组质粒p NZ8149-Tα1-cIFN-γ-HA,并经PCR和测序鉴定正确后电转化乳酸乳球菌NZ3900感受态细胞中,构建重组乳酸乳球菌p NZ8149-Tα1-cIFN-γ-HA/NZ3900(r L.lactis-Tα1-cIFN-γ)并经PCR和测序鉴定;将重组乳酸乳球菌r L.lactis-Tα1-cIFN-γ经乳酸链球菌素(Nisin)诱导6 h~7 h,离心超声破碎后取上清采用western blot鉴定Tα1-cIFN-γ的表达。结果显示,r L.lactis-Tα1-cIFN-γ经PCR扩增到3185 bp的目的基因片段,测序结果显示目的片段完全正确;且在约25 ku处出现特异性条带,与目的蛋白Tα1-cIFN-γ大小相符,利用BCA蛋白测定试剂盒构建标准曲线,对Tα1-cIFN-γ绝对定量显示其含量为31μg/m L。以重组乳酸乳球菌裂解液(含重组蛋白40μg/m L,重组菌2×10^(9)cfu/mL)经口服免疫21日龄SPF鸡,并于28日龄加强免疫一次,于首免后2周、4周、7周采血分离PBMC,并分别采用Con A+Ionomycin、Con A+PMA及LPS刺激后,采用CCK-8法检测鸡PBMC的增殖活性。结果显示,经刺激后的各实验组鸡于首免后2周、4周、7周PBMC的增殖活性均极显著高于阴性对照组(口服PBS的鸡)(P<0.001、P<0.0001、P<0.0001);7周后剖杀各组鸡取其盲肠粪便样品经PCR扩增16S rDNA基因的保守区V3~V4基因序列,采用高通量测序并采用SIMCA软件、MOTHUR程序、AMDIS软件等对测序结果进行beta多样性、alpha多样性、菌群结构组成以及菌种重要性的LEf Se分析。beta及alpha多样性分析结果显示,实验组和阴性对照组鸡盲肠粪便样品测序结果分散于不同象限;且两组间样品的alpha多样性存在明显差异,表明实验组鸡具有更大的菌种丰度。菌群结构和组成分析结果显示,口服r L.lactis-Tα1-cIFN-γ显著改变了鸡盲肠肠道菌群门水平和属水平的结构和组成,其中厚壁菌门的乳酸杆菌属、普拉梭菌属和黏液真杆菌属等有益菌群显著增加;而拟杆菌门中的瘤胃菌属、另枝菌属等机会致病菌属显著减少。菌种重要性的LEf Se分析结果显示,与阴性对照组相比,口服r L.lactis-Tα1-cIFN-γ对SPF鸡肠道菌群的组成有显著影响,来自杆菌纲、乳杆菌目、乳杆菌科、乳杆菌属和厚壁菌门等有益菌成为肠道菌群内的重要菌种。上述结果首次表明,口服r L.lactis-Tα1-cIFN-γ不仅显著提高鸡PBMC的增殖活性等细胞免疫反应,而且还可以改善肠道菌群结构和组成,提高有益菌属的丰度,降低机会致病菌的丰度。本研究为天然绿色新型口服免疫增强剂和免疫佐剂的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 胸腺肽 鸡干扰素 重组乳酸乳球菌 16S rDNA 肠道菌群

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共表达H_9亚型禽流行性感冒病毒血凝素基因和鸡Ⅱ型干扰素基因的重组鸡痘病毒及其免疫效力 被引量：25

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作者 程坚 刘秀梵 +3 位作者 彭大新 刘红旗 吴艳涛 张如宽 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期52-58,共7页

为了构建更为安全有效的抗低致病性H9亚型禽流行性感冒 (流感 )的基因工程疫苗 ,将包含有H9亚型禽流感病毒分离株的血凝素 (HA)基因、鸡Ⅱ型干扰素 (IFN Ⅱ )全长cDNA序列及调控其转录的鸡痘病毒早晚期启动子 (PE/L)的基因片段 ,定向插... 为了构建更为安全有效的抗低致病性H9亚型禽流行性感冒 (流感 )的基因工程疫苗 ,将包含有H9亚型禽流感病毒分离株的血凝素 (HA)基因、鸡Ⅱ型干扰素 (IFN Ⅱ )全长cDNA序列及调控其转录的鸡痘病毒早晚期启动子 (PE/L)的基因片段 ,定向插入鸡痘病毒转移载体 1175的痘苗病毒启动子P7.5的下游 ,得到HA和IFN Ⅱ基因分别处于P7.5及PE/L转录调控下的重组转移载体 1175HAIFN。以脂质体转染法将 1175HAIFN转染至已感染鸡痘病毒 2 82E4疫苗株 (wt FPV)的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中。 1175HAIFN与wt FPV基因组DNA之间的同源重组产生了重组鸡痘病毒rFPV HA IFN Ⅱ。通过在含X gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获得并纯化rF PV HA IFN Ⅱ。以间接免疫荧光法和细胞病变抑制试验证实 ,纯化的rFPV HA IFN Ⅱ感染的CEF能以非融合的方式同时表达HA和具有抗VSV活性的鸡IFN Ⅱ。动物试验表明 ,rFPV HA IFN Ⅱ能显著抑制静脉攻毒后 1日龄SPF鸡及含抗FPV母源抗体的商品鸡从泄殖腔排毒 ,且能减轻单表达HA的重组鸡痘病毒 (rFPV HA)抑制 1日龄SPF雏鸡增重的副作用。 展开更多

关键词 H9亚型禽流行性感冒病毒 重组鸡痘病毒 鸡Ⅱ型干扰素 血凝素

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重组鸡γ-干扰素在昆虫细胞中的高效表达 被引量：10

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作者 孔桂美 许金俊 +2 位作者 秦爱建 金文杰 刘岳龙 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期697-701,共5页

将鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因克隆到载体pFASTBAC1中,构建转移载体pFASTBAC1-ChIFN-γ,然后转化DH10Bac感受态大肠杆菌,通过位点特异性转座,将ChIFN-γ基因整合到Bacmid穿梭载体中,构建表达质粒Bacmid-ChIFN-γ;通过脂质体将表达质粒转... 将鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因克隆到载体pFASTBAC1中,构建转移载体pFASTBAC1-ChIFN-γ,然后转化DH10Bac感受态大肠杆菌,通过位点特异性转座,将ChIFN-γ基因整合到Bacmid穿梭载体中,构建表达质粒Bacmid-ChIFN-γ;通过脂质体将表达质粒转染Sf9昆虫细胞,用间接免疫荧光试验鉴定重组鸡γ-干扰素(rChIFN-γ)的表达;通过水泡性口炎病毒感染鸡胚成纤维细胞(CEF)的细胞病变抑制试验,检测rChIFN-γ的活性.研究结果表明,感染重组杆状病毒的Sf9细胞能高效表达rChIFN-γ,且当每个细胞的感染量为1个病毒时,细胞在感染96h后,rChIFN-γ基因表达产物的活性最高,达到106～107.2U/mL.以rChIFN-γ进行对新城疫病毒(NDV)F48E8株、禽流感H5N1病毒(AIV-H5)和马立克氏病病毒(MDV)GA株的抗病毒活性试验,发现rChIFN-γ对AIV-H5和MDV GA株病毒有明显的抑制其致细胞病变作用,但对NDV F48E8株病毒在体外不能抑制其致细胞病变作用,仅能在病毒滴度上表现抑制效果. 展开更多

关键词 重组鸡γ-干扰素 杆状病毒 表达 抗病毒作用

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表达鸡γ-干扰素和传染性支气管病毒S1基因的重组鸡痘病毒疫苗对鸡外周血T淋巴细胞动态分布影响的研究 被引量：12

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作者 孙永科 田占成 +4 位作者 王云峰 刘胜旺 童光志 智海东 王玫 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期539-543,共5页

机体的免疫应答是一个复杂的生物学过程,它以体液和细胞免疫为主,二者相互影响,相互作用,而构成了一个动态整体。本研究通过FACS技术检测SPF鸡接种共表达IBVS1基因和鸡γ-干扰素基因的重组鸡痘病毒疫苗后外周血中CD4+、CD8+和TCRδγ+... 机体的免疫应答是一个复杂的生物学过程,它以体液和细胞免疫为主,二者相互影响,相互作用,而构成了一个动态整体。本研究通过FACS技术检测SPF鸡接种共表达IBVS1基因和鸡γ-干扰素基因的重组鸡痘病毒疫苗后外周血中CD4+、CD8+和TCRδγ+三种亚类T淋巴细胞的数量的变化,初步探讨了干扰素对鸡外周血中T淋巴细胞亚类动态分布的影响。结果表明,含有干扰素基因的重组鸡痘病毒能显著增高机体特异性的CD8+和TCRδγ+T淋巴细胞水平,CD4+T淋巴细胞比例则要低于其他的疫苗免疫组。 展开更多

关键词 T淋巴细胞 鸡γ-干扰素 传染性支气管病毒 重组鸡痘病毒

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因和鸡II型干扰素基因在重组鸡痘病毒中的共表达 被引量：9

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作者 孙永科 田占成 +5 位作者 王云峰 童光志 智海东 刘胜旺 王玫 杨增岐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期800-806,共7页

将鸡II型干扰素(ChIFNγ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到纯化... 将鸡II型干扰素(ChIFNγ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到纯化的能够同时表达鸡II型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγS1。rFPV-ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1周后,可以检测到针对传染性支气管炎病毒S1基因的ELISA抗体,重组病毒接种鸡的CD4+、CD8+和γδTCR阳性T淋巴细胞的百分比含量显著高于非免疫对照鸡(P<0.05);免疫4周后用传染性支气管炎LX4强毒株攻击,rFPV-ChIFNγS1免疫组仅有1只出现轻微的呼吸道症状(1/16),而非免疫对照组则有16只发病(16/16),并有2只出现死亡(2/16),表明rFPV-ChIFNγS1对接种鸡可以产生良好的保护效果。 展开更多

关键词 传染性支气管炎病毒 鸡Ⅱ型干扰素 重组鸡痘病毒

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重组鸡干扰素对E.tenella卵囊免疫后肠上皮组织结构的影响 被引量：6

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作者 叶秀华 蔡建平 +1 位作者 吴志光 汪明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期484-486,共3页

取AA肉鸡,在其7日龄和14日龄时分别给予柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊进行首免和二免,并同时肌肉注射5 000 U重组鸡γ干扰素(rCh IFN-γ)后,于21日龄以同源E.tenella攻虫。试验结果表明,rCh IFN-γ协同球虫活卵囊免疫可减少由于... 取AA肉鸡,在其7日龄和14日龄时分别给予柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊进行首免和二免,并同时肌肉注射5 000 U重组鸡γ干扰素(rCh IFN-γ)后,于21日龄以同源E.tenella攻虫。试验结果表明,rCh IFN-γ协同球虫活卵囊免疫可减少由于球虫病造成的体质量下降,降低OPG值和肠道病变记分,提高抗球虫指数(AC I);同时还发现,rCh IFN-γ能够显著增加肠道绒毛高度、肠隐窝深度、刷状缘厚度(=α0.05)。由此表明,rCh IFN-γ可以减轻由于球虫感染所造成的肠道黏膜损伤,促进肠道的吸收功能,进而减轻球虫病所造成的增重损失,对球虫活卵囊疫苗的免疫有一定的免疫增强效果。 展开更多

关键词 鸡球虫活卵囊 免疫 重组鸡γ干扰素 肠黏膜上皮结构

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表达MDVgB和/或鸡γ干扰素基因的重组鸡痘病毒免疫效力试验 被引量：5

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作者 彭大新 刘秀梵 +3 位作者 吴艳涛 高崧 程坚 周春红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期177-182,共6页

将表达鸡 干扰素基因、表达MDVgB基因、共表达MDVgB和鸡 干扰素基因的重组鸡痘病毒进行组合免疫 ,观察在SPF鸡、狼山鸡中的免疫保护作用。在狼山鸡中随rFPV gB剂量的减少 ,保护效力逐渐下降 ,而在SPF鸡中 10 4 与 10 6PFU的rFPV gB提... 将表达鸡 干扰素基因、表达MDVgB基因、共表达MDVgB和鸡 干扰素基因的重组鸡痘病毒进行组合免疫 ,观察在SPF鸡、狼山鸡中的免疫保护作用。在狼山鸡中随rFPV gB剂量的减少 ,保护效力逐渐下降 ,而在SPF鸡中 10 4 与 10 6PFU的rFPV gB提供相同的保护效力 ,但存在减缓增重的副反应 ;在所有的疫苗组合中 ,由10 6PFU的rFPV gB、10 5PFU的rFPV IFN Ⅱ和 40 0 0PFUHVT组成三价疫苗的保护效力最高且不影响增重 ,表明鸡 干扰素既可降低重组鸡痘病毒的减缓增重的副反应 ,又具有免疫佐剂作用 ,与重组鸡痘病毒及HVT配合成疫苗是预防MD有效的冻干制剂。 展开更多

关键词 马立克氏病 重组鸡痘病毒 鸡γ干扰素 糖蛋白B 保护效力

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重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白对鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响研究 被引量：4

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作者 杨晓璐 闫若潜 +6 位作者 吴志明 刘梅芬 张代宝 张书阳 王淑娟 赵雪丽 刘毅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期175-178,共4页

为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白（rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白）对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白（第2组）和rChIFN-α蛋白（第3组）注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试... 为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白（rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白）对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白（第2组）和rChIFN-α蛋白（第3组）注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试验组鸡外周血T淋巴细胞（PBLC）中CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋百分含量以及CD4^＋/CD8^＋比值进行检测。结果表明,与对照组相比,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白在鸡体内接种后3～14d均可明显提高鸡外周血T淋巴细胞中CD3^＋CD4^＋细胞百分含量,降低CD3^＋CD8^＋细胞的百分含量,提高CD4^＋/CD8^＋比值;接种后3～7d期间,第2组鸡的CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋细胞含量及CD4^＋/CD8^＋比值与PBS对照组（第1组）相比差异均极显著（P〈0.01）,第3组与第1组相比差异均显著（P〈0.05）。以上结果表明,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白接种鸡体后均可显著影响鸡PBLC中淋巴细胞亚群百分含量,提高CD4^＋/CD8^＋比值,增强机体的细胞免疫功能;重组融合蛋白对鸡淋巴细胞亚群百分含量、CD4^＋/CD8^＋比值影响程度和细胞免疫功能的增强作用优于rChIFN-α蛋白;重组融合蛋白在体内发挥了鸡α干扰素和白细胞介素-2对细胞免疫功能的协同增强作用。 展开更多

关键词 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白 重组鸡α干扰素蛋白 T淋巴细胞亚群 CD4^+/CD8^+比值 免疫功能

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重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性评价方法研究 被引量：4

10

作者 杨晓璐 闫若潜 +4 位作者 李勤楠 赵雪丽 谢彩华 刘梅芬 张书阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期3153-3159,共7页

为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应... 为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性;采用细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在DF1细胞上抑制水疱性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)增殖活性;采用MTS法分别测定重组融合蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,重组融合蛋白可以与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应;重组融合蛋白在DF1细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV活性高于抗IBDV活性,且均明显高于rChIFN-α蛋白对照;不同浓度的重组融合蛋白均具有明显的促鸡PBLC和脾淋巴细胞增殖活性,且其促增殖活性明显高于rChIFN-α蛋白对照。本研究成功建立了重组融合蛋白体外活性检测评价方法,为进一步探究重组融合蛋白在鸡体内协同作用奠定基础。 展开更多

关键词 鸡α干扰素 鸡白细胞介素-2 重组融合蛋白 体外活性

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口服重组鸡α-干扰素对鸡新城疫病毒感染和疫苗免疫的影响 被引量：6

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作者 吴静 李玉峰 +2 位作者 马秀丽 林树乾 宋敏训 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第12期183-185,共3页

通过点眼、滴鼻的方式使SPF鸡感染新城疫La Sota株,感染8 h后在饮水中添加1000 U/mL重组鸡α-干扰素,每只鸡每天饮用干扰素剂量为20000 U,分别饮用不同时间。于感染后第7天采集气管组织,制备病理切片。结果显示,连续3 d以上饮用重组鸡α... 通过点眼、滴鼻的方式使SPF鸡感染新城疫La Sota株,感染8 h后在饮水中添加1000 U/mL重组鸡α-干扰素,每只鸡每天饮用干扰素剂量为20000 U,分别饮用不同时间。于感染后第7天采集气管组织,制备病理切片。结果显示,连续3 d以上饮用重组鸡α-干扰素的试验鸡,其气管的病理损伤可得到明显改善;检测饮用重组鸡α-干扰素后试验鸡的新城疫抗体效价,结果表明口服高剂量的干扰素可明显下调新城疫抗体的滴度。 展开更多

关键词 重组鸡α-干扰素 新城疫 口服 组织病理变化 HI抗体滴度

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重组鸡干扰素-γ对脂多糖引起的肉鸡免疫应激的影响 被引量：2

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作者 陈鹏 单安山 +1 位作者 孙进华 程宝晶 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期126-132,共7页

文章旨在研究前期注射重组鸡干扰素-γ(rChIFN-γ)对肉鸡免疫应激的影响。将40羽14日龄肉鸡随机平均分成A、B、C和D 4组。于14、21、28和35日龄给A组和B组肉鸡静脉注射PBS缓冲液1mL.只-1,C组同期静脉注射含rChIFN-γ50μg的PBS缓冲液1mL... 文章旨在研究前期注射重组鸡干扰素-γ(rChIFN-γ)对肉鸡免疫应激的影响。将40羽14日龄肉鸡随机平均分成A、B、C和D 4组。于14、21、28和35日龄给A组和B组肉鸡静脉注射PBS缓冲液1mL.只-1,C组同期静脉注射含rChIFN-γ50μg的PBS缓冲液1mL.只-1,D组同期静脉注射含rChIFN-γ100μg的PBS缓冲液1mL.只-1。于36、38、40日龄,给B、C、D组的肉鸡腹腔注射含有大肠杆菌脂多糖(LPS,按体质量以250μg.kg-1计算)的PBS缓冲液1mL.只-1造模,A组同期腹腔注射PBS缓冲液1mL。记录36日龄至41日龄肉鸡的体质量和采食量,测定第3次注射脂多糖(40日龄)12h肉鸡的血常规和T淋巴细胞刺激指数,并于第3次注射脂多糖后12、24和36h,测定肉鸡血清白细胞介素-1(IL-1)、皮质酮(CORT)的含量。研究表明:(1)在整个免疫应激时期(36～41日龄),A组的平均日增体质量(P<0.01)和平均日采食量(P<0.05)均要高于B、C、D 3组,A组的料重比要显著低于B、C、D 3组(P<0.05);(2)第3次注射脂多糖后12h,C组和D组的白细胞总数显著高于A组和B组(P<0.05);(3)第3次注射脂多糖后12h,C组和D组的淋巴细胞刺激指数显著高于A组和B组(P<0.05);(4)第3次注射脂多糖后12h,A组的CORT含量显著低于B组(P<0.05),第3次注射脂多糖后24h,A组的CORT含量低于B组(P<0.01)、C组(P<0.05)和D组(P<0.05),第3次注射脂多糖后36h,A组显著低于B组(P<0.05);(5)第3次注射脂多糖12h后,A组IL-1显著低于B组(P<0.05),第3次注射脂多糖24h后,A组极显著低于其它各组(P<0.01)。结果显示,前期注射rChIFN-γ,可以缓解免疫应激导致的肉鸡血清中IL-1和皮质酮升高,提高免疫应激时期肉鸡的细胞免疫功能,缓解免疫应激对肉鸡的负面影响。 展开更多

关键词 肉鸡 重组鸡干扰素-γ 脂多糖 免疫应激

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重组鸡γ-干扰素对肉鸡生长性能和免疫功能的影响 被引量：3

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作者 陈鹏 孙进华 +1 位作者 代丽 单安山 《中国家禽》 北大核心 2011年第11期11-14,共4页

为研究注射重组鸡γ-干扰素(rChIFN-γ)对肉鸡生长性能和免疫功能的影响,将90只健康14日龄AA肉仔鸡随机分为3组:对照组、试验组Ⅰ和试验组Ⅱ。于14、21和28日龄每只鸡皮下注射含rChIFN-γ50μg(试验组Ⅰ)和100μg(试验组Ⅱ)的PBS缓冲液1... 为研究注射重组鸡γ-干扰素(rChIFN-γ)对肉鸡生长性能和免疫功能的影响,将90只健康14日龄AA肉仔鸡随机分为3组:对照组、试验组Ⅰ和试验组Ⅱ。于14、21和28日龄每只鸡皮下注射含rChIFN-γ50μg(试验组Ⅰ)和100μg(试验组Ⅱ)的PBS缓冲液1mL,对照组同期每只注射PBS缓冲液1mL。每次注射rChIFN-γ7d后,对各组肉鸡进行翅下静脉采血,并于35日龄剖杀肉鸡摘取免疫器官。研究表明:①35日龄试验组Ⅰ的淋巴细胞刺激指数极显著高于对照组(P<0.01);②35日龄试验组Ⅱ的胸腺指数显著高于对照组(P<0.05);③35日龄试验组Ⅰ的白细胞介素-2水平显著高于其他各组(P<0.05);④35日龄试验组Ⅰ的TNF-α水平显著高于其他各组(P<0.05)。肉鸡每7天注射一次rChIFN-γ,可提高35日龄肉鸡的免疫机能,促进肉鸡免疫器官的生长发育。 展开更多

关键词 重组鸡γ-干扰素 生长性能 免疫器官指数 细胞因子

原文传递

鸡γ-干扰素在杆状病毒系统中的表达 被引量：2

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作者 戴华 季琰 +3 位作者 郑佳玉 徐正中 潘志明 焦新安 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期810-813,共4页

目的:获得具有生物学活性的重组鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)。方法:应用RT-PCR方法扩增ChIFN-γ基因cDNA,将其克隆入杆状病毒表达系统的转移载体pFastBac1,构建重组质粒pFast-ChIFN-γ,通过位点特异性转座,将ChIFN-γ基因整合到Bacmid穿梭载... 目的:获得具有生物学活性的重组鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)。方法:应用RT-PCR方法扩增ChIFN-γ基因cDNA,将其克隆入杆状病毒表达系统的转移载体pFastBac1,构建重组质粒pFast-ChIFN-γ,通过位点特异性转座,将ChIFN-γ基因整合到Bacmid穿梭载体中,构建重组质粒pBac-ChIFN-γ并转染昆虫细胞Sf9,采用间接免疫荧光试验(IFA)、ELISA试验鉴定重组ChIFN-γ的表达,通过细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性。结果:IFA、ELISA与细胞病变抑制试验结果显示,重组ChIFN-γ在杆状病毒系统中获得表达,其抗病毒活性达5×103～1×104U/mL。结论:重组ChIFN-γ的获得为其开发应用提供了重要的生物材料。 展开更多

关键词 鸡γ-干扰素 杆状病毒 重组蛋白

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干扰素γ在鸡体内的消长规律 被引量：2

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作者 王立红 王鸿英 +3 位作者 张立新 邢克智 张军 李睿义 《天津农学院学报》 CAS 2007年第4期13-17,共5页

以不同剂量的重组cIFNγ对SPF鸡进行免疫注射,用ELISA法检测cIFNγ在体内的消长。研究结果表明:注射给药后2 h即可在多个器官中检测到cIFNγ;8～24 h,cIFNγ在体内的分布达到高峰;2～4 d后,cIFNγ在体内的分布显著下降;cIFNγ的注射剂... 以不同剂量的重组cIFNγ对SPF鸡进行免疫注射,用ELISA法检测cIFNγ在体内的消长。研究结果表明:注射给药后2 h即可在多个器官中检测到cIFNγ;8～24 h,cIFNγ在体内的分布达到高峰;2～4 d后,cIFNγ在体内的分布显著下降;cIFNγ的注射剂量与血药浓度并不呈线性相关,但高剂量的cIFNγ具有显著诱导体内自身cIFNγ表达的能力,尤其是诱导脾脏和淋巴器官中cIFNγ的表达;在高剂量cIFNγ的作用下,鸡体内cIFNγ可维持30 d以上。在接种新城疫疫苗后的2～8 d,也可在鸡的各个组织和器官中检测到cIFNγ低剂量的表达。 展开更多

关键词 重组cIFNγ 鸡 分布 消长

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略阳乌鸡ɑ干扰素原核表达载体构建及诱导条件优化 被引量：1

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作者 杜伟立 张涛 +1 位作者 王令 路宏朝 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期51-56,共6页

为了探索略阳乌鸡α干扰素在大肠杆菌中高效表达的诱导条件,试验采用PCR获得略阳乌鸡α干扰素成熟肽段的编码区DNA序列,将其克隆至载体p ET-32a的HindⅢ和XhoⅠ位点间,并通过菌落PCR和测序鉴定获得的鸡α干扰素的原核表达载体p ET-32a-C... 为了探索略阳乌鸡α干扰素在大肠杆菌中高效表达的诱导条件,试验采用PCR获得略阳乌鸡α干扰素成熟肽段的编码区DNA序列,将其克隆至载体p ET-32a的HindⅢ和XhoⅠ位点间,并通过菌落PCR和测序鉴定获得的鸡α干扰素的原核表达载体p ET-32a-Ch IFN-α。将p ET-32a-Ch IFN-α转化至大肠杆菌Rosetta菌株,通过筛选获得阳性克隆,进而分别对诱导表达时间、诱导剂浓度等条件进行筛选,获得了略阳乌鸡α干扰素的最佳表达条件。结果表明:成功构建p ET32aCh IFN-α质粒和重组菌株,最适诱导表达条件为诱导温度37℃,诱导剂IPTG浓度0.2 mmol/L,诱导时间5 h,诱导时机OD600值为0.448时。说明构建略阳乌鸡α干扰素的原核表达菌株成功,并且实现了α干扰素的高效表达。 展开更多

关键词 略阳乌鸡 Α干扰素 重组载体 原核表达 诱导条件优化

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重组鸡α-干扰素对新城疫病毒复制的影响

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作者 李玉峰 吴静 +2 位作者 李峰 刘巍 宋敏训 《家禽科学》 2006年第7期8-10,共3页

毕赤酵母表达鸡α-干扰素经纯化后,以50000U、5000U和500U分别与200ELD50新城疫病毒疫苗株LaSota和中等毒力Q株等量混合,接种9～10日龄SPF鸡胚,记录鸡胚死亡情况并测定尿囊液HA效价,结果表明,高浓度重组干扰素可使病毒致死鸡胚时间延长... 毕赤酵母表达鸡α-干扰素经纯化后,以50000U、5000U和500U分别与200ELD50新城疫病毒疫苗株LaSota和中等毒力Q株等量混合,接种9～10日龄SPF鸡胚,记录鸡胚死亡情况并测定尿囊液HA效价,结果表明,高浓度重组干扰素可使病毒致死鸡胚时间延长,并使Q株在尿囊液中的HA效价下降2～3个滴度。 展开更多

关键词 重组鸡α-干扰素 新城疫病毒 HA效价

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多等温加速试验预测重组鸡α干扰素的稳定性

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作者 高应瑞 刘珂飞 +1 位作者 孟铁健 由天立 《天津农业科学》 CAS 2016年第9期60-62,共3页

在3种温度下对大肠杆菌表达重组鸡α干扰素进行了多等温加速稳定性试验和2℃保存的稳定性考察,预测重组鸡α干扰素的稳定性,为制品有效期的确定提供依据。采用多等温加速试验,将制品放在3种不同温度下孵放,定期取出样品,测定效价,根据... 在3种温度下对大肠杆菌表达重组鸡α干扰素进行了多等温加速稳定性试验和2℃保存的稳定性考察,预测重组鸡α干扰素的稳定性,为制品有效期的确定提供依据。采用多等温加速试验,将制品放在3种不同温度下孵放,定期取出样品,测定效价,根据制品的效价下降情况推算其在有效期内的稳定性。结果显示:用加速降解有关公式可以求出在2℃存放1年后的残余效价为226 492 682单位,下降率为9.9%,与实测值228 000 957单位基本吻合;2年后的残余效价为203 868 551单位,下降率为18.9%。即2℃保存2年后效价保持在80%以上,推算的结果与试验值较吻合,产品稳定性良好。 展开更多

关键词 多等温加速试验 重组鸡α干扰素 稳定性

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重组鸡α干扰素抑制H9N2禽流感病毒在鸡胚中增殖的研究 被引量：3

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作者 赵雨 周炜 +4 位作者 符修乐 查映丽 赵俊 俞海洋 王明丽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期352-355,共4页

为检测重组鸡α干扰素（rChIFN-α）抑制H9N2禽流感病毒（AIV）在鸡胚中的增殖效力,本研究将rChIFN-α按其抗病毒效价高低分为4个组（10-7 U/mL、10-6 U/mL、10-5 U/mL和10^4 U/mL）,同时设置阴性对照组和病毒对照组。各实验组再依次按... 为检测重组鸡α干扰素（rChIFN-α）抑制H9N2禽流感病毒（AIV）在鸡胚中的增殖效力,本研究将rChIFN-α按其抗病毒效价高低分为4个组（10-7 U/mL、10-6 U/mL、10-5 U/mL和10^4 U/mL）,同时设置阴性对照组和病毒对照组。各实验组再依次按照给药时间不同又分为“先给药再接种病毒组”、“同时给药和接种病毒组”及“先接种病毒再给药组”3个小组进行试验,通过检测H9N2 AIV血凝效价的变化、H9N2 AIV HA基因拷贝数以及各组EID50评价rChIFN-α对H9N2 AIV增殖抑制效力。结果显示,除低剂量组以外,各剂量组与病毒对照组相比,结果均可以显著降低鸡胚尿囊液中H9N2 AIV的血凝效价（p〈0.01）,同时能够显著减少H9N2 AIV基因的拷贝数（p〈0.01）及显著降低EID50（p〈0.01）。表明中等剂量（10-5 U/mL）及更高剂量的rChIFN-α在鸡胚中能够显著抑制H9N2 AIV的增殖。本研究为rChIFN-α今后在临床中抗AIV治疗的实际应用提供了相关实验依据。 展开更多

关键词 重组鸡α干扰素 鸡胚 禽流感病毒 H9N2亚型

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重组鸡α-干扰素对鸡免疫功能的影响 被引量：6

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作者 常凯 马凤龙 单虎 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第14期15-17,共3页

选取80只10日龄的肉仔鸡,随机分成4组,每组20只。第1组为对照组,第2～4组为试验组,分别肌注0.1倍剂量(1000U)、1倍剂量(1万U)和10倍剂量(10万U)的鸡α-干扰素。试验期间并对其免疫器官指数、淋巴细胞转化率、白介素-2含量、血清补体总... 选取80只10日龄的肉仔鸡,随机分成4组,每组20只。第1组为对照组,第2～4组为试验组,分别肌注0.1倍剂量(1000U)、1倍剂量(1万U)和10倍剂量(10万U)的鸡α-干扰素。试验期间并对其免疫器官指数、淋巴细胞转化率、白介素-2含量、血清补体总活性进行测定。结果表明:1倍剂量(1万U)组鸡的免疫器官指数、淋巴细胞转化率、白介素-2含量、血清补体总活性均高于其他三组。 展开更多

关键词 重组 鸡α-干扰素 鸡 免疫功能

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