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抗凝、溶栓双功能水蛭素12肽-瑞替普酶融合蛋白的模拟、构建与表达
被引量：
9
1
作者
余蓉
韦利军
+2 位作者
李灵玲
高玲
吴梧桐
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2007年第3期168-172,共5页
将水蛭素12肽通过柔性肽(Gly)3与r-PA连接,以期望获得既具有抗凝活性,又具有溶栓活性的新型基因工程蛋白质分子。采用计算机辅助分子设计手段模拟了该融合蛋白的分子结构与其活性区可以正常发挥功能。构建并表达了兼有溶栓和抗凝活性的...
将水蛭素12肽通过柔性肽(Gly)3与r-PA连接,以期望获得既具有抗凝活性,又具有溶栓活性的新型基因工程蛋白质分子。采用计算机辅助分子设计手段模拟了该融合蛋白的分子结构与其活性区可以正常发挥功能。构建并表达了兼有溶栓和抗凝活性的瑞替普酶(r-PA)与水蛭素12肽双功能融合基因。通过两轮加端PCR获得水蛭素12肽与r-PA通过柔性肽(Gly)3连接得到的融合基因,再克隆到pET-21a载体上,经测序正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,融合蛋白约占菌体总蛋白的12%,以包涵体形式存在,经过体外复性后,融合蛋白的纤溶比活达到8 400.5 IU/mg,抗凝比活达到930.2 ATU/mg,具有较高的溶栓抗凝双功能活性。该双功能融合蛋白有望成为治疗血栓疾病的新型药物。
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关键词
瑞替普酶
水蛭素
12
肽
溶栓
抗凝
下载PDF
职称材料
水蛭素12肽与低分子量单链尿激酶融合基因的构建、表达及产物特性分析
2
作者
刘凤云
李秀珍
+1 位作者
李风知
程度胜
《生物技术通讯》
CAS
1996年第3期114-117,共4页
用化学合成的方法合成了水蛭素12肽基因的编码序列,通过DNA重组技术将水蛭素12肽基因片段与低分子量单链尿激酶cDNA片段连接构建了融合基因。融合基因在大肠杆菌中获得表达。体外实验结果表明,表达的融合蛋白具有溶纤活性和抗凝活性。
关键词
水蛭素
12
肽
低分子量单链尿激酶
溶纤活性
抗凝活性
下载PDF
职称材料
题名
抗凝、溶栓双功能水蛭素12肽-瑞替普酶融合蛋白的模拟、构建与表达
被引量：
9
1
作者
余蓉
韦利军
李灵玲
高玲
吴梧桐
机构
中国药科大学生命科学与技术学院
四川大学华西药学院
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2007年第3期168-172,共5页
文摘
将水蛭素12肽通过柔性肽(Gly)3与r-PA连接,以期望获得既具有抗凝活性,又具有溶栓活性的新型基因工程蛋白质分子。采用计算机辅助分子设计手段模拟了该融合蛋白的分子结构与其活性区可以正常发挥功能。构建并表达了兼有溶栓和抗凝活性的瑞替普酶(r-PA)与水蛭素12肽双功能融合基因。通过两轮加端PCR获得水蛭素12肽与r-PA通过柔性肽(Gly)3连接得到的融合基因,再克隆到pET-21a载体上,经测序正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,融合蛋白约占菌体总蛋白的12%,以包涵体形式存在,经过体外复性后,融合蛋白的纤溶比活达到8 400.5 IU/mg,抗凝比活达到930.2 ATU/mg,具有较高的溶栓抗凝双功能活性。该双功能融合蛋白有望成为治疗血栓疾病的新型药物。
关键词
瑞替普酶
水蛭素
12
肽
溶栓
抗凝
Keywords
reteplase
,
12 peptides of hirudin
,
thrombolysis
,
anticoagulation
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
水蛭素12肽与低分子量单链尿激酶融合基因的构建、表达及产物特性分析
2
作者
刘凤云
李秀珍
李风知
程度胜
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
1996年第3期114-117,共4页
基金
国家自然科学基金
文摘
用化学合成的方法合成了水蛭素12肽基因的编码序列,通过DNA重组技术将水蛭素12肽基因片段与低分子量单链尿激酶cDNA片段连接构建了融合基因。融合基因在大肠杆菌中获得表达。体外实验结果表明,表达的融合蛋白具有溶纤活性和抗凝活性。
关键词
水蛭素
12
肽
低分子量单链尿激酶
溶纤活性
抗凝活性
Keywords
Peptide
12
derived from
hirudin
Low molecular weight single-chain urokinase Fibrinolytic activity Anticoagulant activity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗凝、溶栓双功能水蛭素12肽-瑞替普酶融合蛋白的模拟、构建与表达
余蓉
韦利军
李灵玲
高玲
吴梧桐
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2007
9
下载PDF
职称材料
2
水蛭素12肽与低分子量单链尿激酶融合基因的构建、表达及产物特性分析
刘凤云
李秀珍
李风知
程度胜
《生物技术通讯》
CAS
1996
0
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职称材料
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引证文献
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