S-亚硝基谷胱甘肽对小鼠肠急性缺血再灌注损伤后肠屏障功能的影响 被引量：2

1

作者 彭科 许超 +3 位作者 于敏 孙力华 肖卫东 杨桦 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第6期724-726,729,共4页

目的探讨S-亚硝基谷胱甘肽（GSNO）预处理对小鼠肠急性缺血再灌注（I/R）所致的肠黏膜屏障损伤的影响。方法6~8周龄雄性C57BL/6小鼠24只,分为Sham组、I/R组、I/R＋GSNO组,每组8只。采用夹闭肠系膜上动脉30min,再灌注6h作为小鼠肠I/R模... 目的探讨S-亚硝基谷胱甘肽（GSNO）预处理对小鼠肠急性缺血再灌注（I/R）所致的肠黏膜屏障损伤的影响。方法6~8周龄雄性C57BL/6小鼠24只,分为Sham组、I/R组、I/R＋GSNO组,每组8只。采用夹闭肠系膜上动脉30min,再灌注6h作为小鼠肠I/R模型。苏木素-伊红（HE）染色观察小肠组织形态学的变化;免疫组织化学观察肠上皮细胞间紧密连接蛋白claudin-1的表达情况;Western blot检测claudin-1蛋白水平变化。结果 HE染色显示,与Sham组比较,I/R组肠黏膜明显肿胀,绒毛部分脱落、变粗,绒毛倒伏、断裂,而I/R＋GSNO组肠黏膜无明显肿胀,绒毛完整,形态接近正常;免疫组织化学观察显示I/R刺激可造成肠上皮表面claudin-1连续性明显破坏,阳性表达率明显降低,I/R＋GSNO组肠上皮claudin-1连续性明显恢复,阳性染色显著增加;肠上皮claudin-1蛋白定量分析显示：与Sham组比较,I/R组及I/R＋GSNO小肠上皮紧密连接蛋白claudin-1表达分别下降32.5%,13.8%（P〈0.05）;与I/R组比较,I/R＋GSNO组小鼠肠上皮紧密连接蛋白claudin-1表达上调27.8%（P〈0.05）。结论小肠急性I/R刺激可造成明显的肠黏膜损伤及肠上皮间紧密连接的显著破坏;GSNO预处理可通过上调claudin-1表达,有效缓解I/R对肠黏膜结构与肠上皮屏障功能的损伤。 展开更多

关键词 s-亚硝基谷胱甘肽 肠黏膜屏障 紧密连接蛋白 肠缺血再灌注

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S-亚硝基谷胱甘肽对舱室内大鼠颅脑爆炸伤后继发性脑损伤的作用 被引量：2

2

作者 许明伟 许民辉 +3 位作者 赖西南 王丽丽 张子焕 崔红 《创伤外科杂志》 2010年第6期491-495,共5页

目的观察S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)在舱室内大鼠颅脑爆炸伤后继发性脑损伤中的作用,探讨其在舱室颅脑爆炸伤防治中的临床应用价值。方法 88只SD大鼠完全随机分为正常对照组(n=8)、单纯致伤组(n=40)和致伤+GSNO治疗组(n=40);采用二硝基重氮... 目的观察S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)在舱室内大鼠颅脑爆炸伤后继发性脑损伤中的作用,探讨其在舱室颅脑爆炸伤防治中的临床应用价值。方法 88只SD大鼠完全随机分为正常对照组(n=8)、单纯致伤组(n=40)和致伤+GSNO治疗组(n=40);采用二硝基重氮酚(DDNP)纸质点爆源在模拟装甲舱室爆炸,建立颅脑爆炸伤模型。伤后1、6、12、24、48小时取标本。测定脑组织中肿瘤坏子因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)浓度;丙二醛(MDA)浓度及超氧化物岐化酶(SOD)活性;观察脑组织病理学变化。结果致伤组伤后1小时脑组织TNFα-、IL-1β、MDA浓度均明显升高(P<0.01),伤后12小时升高达峰值(P<0.01),伤后48小时脑组织TNF-α、IL-1β浓度仍显著高于正常对照组(P<0.01)。致伤组伤后1小时脑组织SOD活性即显著降低(P<0.01),致伤后12小时降低至最低值(P<0.01),伤后48小时仍低于正常值。致伤组脑血管内皮细胞肿胀、脑水肿、神经元变性、坏死明显;给予GSNO治疗后各时间点脑组织TNF-α、IL-1β、MDA浓度均较致伤组明显降低,SOD活性明显增高(P<0.01或P<0.05)。治疗组脑水肿、神经元变性、坏死等表现均较单纯致伤组轻。结论舱室颅脑爆炸伤后可导致大鼠严重的继发性脑损伤;而早期给予GSNO可明显减轻脑组织炎性损伤和氧化损伤,减轻脑水肿及神经元变性、坏死,从而减轻继发性脑损伤。 展开更多

关键词 颅脑损伤 爆炸伤 冲击波 s-亚硝基谷胱甘肽

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S-亚硝基谷胱甘肽对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增生的影响 被引量：1

3

作者 李秀华 徐标 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1027-1028,1040,共3页

目的 :探讨脂溶性NO前体药物S -亚硝基谷胱甘肽 (GSNO)对血管紧张素 -Ⅱ (AT -Ⅱ )诱导的培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法 :体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞 ,用同位素掺入法测定其增殖率的变化 ,观察不同浓度AT -Ⅱ对血... 目的 :探讨脂溶性NO前体药物S -亚硝基谷胱甘肽 (GSNO)对血管紧张素 -Ⅱ (AT -Ⅱ )诱导的培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法 :体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞 ,用同位素掺入法测定其增殖率的变化 ,观察不同浓度AT -Ⅱ对血管平滑肌细胞增殖的影响以及不同浓度的GSNO对AT -Ⅱ作用的预防和逆转作用。结果 :AT -Ⅱ可以使血管平滑肌细胞的吸光度A值 (MTT法测定 )、[3H]-胸腺嘧啶核苷 ( [3H]-TdR)的掺入量、细胞数量明显高于对照组 (P <0 0 5 )。而用GSNO干预后 ,与对照组相比AT -Ⅱ的上述作用被明显抑制 (P <0 0 5 )。结论 :GSNO可以抑制AT -Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 血管紧张素类 一氧化氮 血管平滑肌细胞 细胞增殖 s-亚硝基谷胱甘肽 大鼠

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S-亚硝基谷胱甘肽对PGF2α诱导心肌肥大的抑制作用 被引量：1

4

作者 邱红梅 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第18期2304-2305,2307,F0002,共4页

目的从细胞水平研究一氧化氮(Nitric oxide,NO)供体S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)对前列腺素F2α(PGF2α)所致心肌肥大的影响,并初步探讨其作用原理。方法利用培养的新生大鼠心肌细胞,以细胞直径大小、蛋白质含量为心肌... 目的从细胞水平研究一氧化氮(Nitric oxide,NO)供体S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)对前列腺素F2α(PGF2α)所致心肌肥大的影响,并初步探讨其作用原理。方法利用培养的新生大鼠心肌细胞,以细胞直径大小、蛋白质含量为心肌肥大反应指标,观察药物的抗心肌肥大效应;分别用比色法和荧光法检测细胞NO浓度和游离钙浓度(〔Ca2+〕i),分析其可能的作用原理。结果PGF2α10-7mol/L使心肌细胞明显增大,蛋白质含量明显增加,并使〔Ca2+〕i显著升高,但对NO含量无明显影响。与PGF2α组比较,GSNO10-4mol/L明显使心肌细胞直径、蛋白质含量和〔Ca2+〕i减少;同时使NO浓度明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GSNO可抑制PGF2α诱导的心肌细胞肥大,该作用可能与其释放NO,使心肌细胞局部NO含量增加,从而降低细胞内钙有关。 展开更多

关键词 s-亚硝基谷胱甘肽 前列腺素F2Α 心肌肥大 一氧化氮 钙

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S-亚硝基谷胱甘肽对腹部创伤大鼠肠黏膜屏障的影响 被引量：3

5

作者 丁凯 虞文魁 +5 位作者 冯涛 徐琳 吴波 谌达程 李秋荣 李宁 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2015年第1期42-45,共4页

目的:探讨S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对腹部创伤大鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法:建立腹部创伤大鼠模型,将24只大鼠随机分为对照组(腹部创伤组)和GSNO组(腹部创伤模型+GSNO干预,50μg/kg),每组12只。分别在第1、6和24 h检测肠黏膜紧密连接... 目的:探讨S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对腹部创伤大鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法:建立腹部创伤大鼠模型,将24只大鼠随机分为对照组(腹部创伤组)和GSNO组(腹部创伤模型+GSNO干预,50μg/kg),每组12只。分别在第1、6和24 h检测肠黏膜紧密连接蛋白(Occludin、Zo-1、Claudin1/2)的表达水平;FITC-葡聚糖(FD4)对大鼠体内肠黏膜屏障的通透性;肠壁中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的数量。结果:GSNO作用1 h和6 h,血浆中FD4水平显著低于对照组(P<0.05);GSNO处理6 h、24 h,肠黏膜屏障中紧密连接蛋白Claudin、Occludin、Zo-1表达水平均显著高于对照组(P<0.01);GSNO作用6 h和24 h时,GFAP阳性细胞数均显著低于对照组(P<0.01)。结论:使用GSNO干预,可改善腹部创伤大鼠的肠黏膜屏障通透性增加和肠屏障功能损害。 展开更多

关键词 腹部创伤 s-亚硝基谷胱甘肽 肠黏膜屏障完整性 肠胶质细胞 胶质纤维酸性蛋白

原文传递

基于数据库动物实验数据评价S-亚硝基谷胱甘肽治疗鼠大脑中动脉闭塞效果 被引量：1

6

作者 彭一帆 山院飞 芦文丽 《山东医药》 CAS 2020年第27期43-46,共4页

目的基于数据库的动物实验数据系统评价S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)治疗鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)的效果。方法以S-Nitrosoglutathione、GSNO、stroke、middle cerebral artery occlusion、MCAO、animal disease models,以及S-亚硝基谷胱甘肽... 目的基于数据库的动物实验数据系统评价S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)治疗鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)的效果。方法以S-Nitrosoglutathione、GSNO、stroke、middle cerebral artery occlusion、MCAO、animal disease models,以及S-亚硝基谷胱甘肽、GSNO、脑卒中、大脑中动脉闭塞、缺血再灌注、动物疾病模型等中、英文检索词,计算机检索美国国立医学图书馆生物医学信息检索系统(Pub Med)、荷兰医学文摘(EMBASE/SCOPUS)、Cochrane图书馆,以及中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网中国知识基础设施工程(CNKI)、万方数据库等数据库发表的关于GSNO治疗MCAO模型的随机对照动物实验,检索时间为1990年1月1日至2020年3月1日。采用脑卒中治疗专业学术圆桌会议(STAIR)和Stata 16.0统计软件进行文献质量评价,采用Meta分析GSNO治疗鼠大脑中动脉闭塞的效果。结果共获得1875篇中英文文献,经剔除重复和不符合纳入标准者,最终纳入7项动物实验共计113只大脑中动脉闭塞模型鼠[实验组63只(给予GSNO)、对照组(常规饮食)50只]。与对照组相比,实验组模型鼠神经功能(Bederson评分)改善(SMD=-1.58;95%CI:-2.23^-0.93;P=0.00),而脑梗死率、脑梗死灶体积组间差异无统计学意义。结论GSNO可有效改善大脑中动脉闭塞模型鼠的神经功能。 展开更多

关键词 s-亚硝基谷胱甘肽 脑卒中 脑缺血再灌注 动物实验

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S-亚硝基谷胱甘肽对亚油酸过氧化和苯乙烯聚合的抑制作用的研究

7

作者 金景 吴隆民 张自义 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期524-527,共4页

研究了S 亚硝基谷胱甘肽 (GSNO)对偶氮二异丁腈 (AIBN)引发亚油酸过氧化和苯乙烯聚合的抑制作用 .GSNO的抑制作用可能归结为反应中生成的氮氧自由基的抑制活性 .EPR证据表明 ,含有AIBN和GSNO的DMSO溶液在无氧和 5 0℃下 ,生成了谷胱甘... 研究了S 亚硝基谷胱甘肽 (GSNO)对偶氮二异丁腈 (AIBN)引发亚油酸过氧化和苯乙烯聚合的抑制作用 .GSNO的抑制作用可能归结为反应中生成的氮氧自由基的抑制活性 .EPR证据表明 ,含有AIBN和GSNO的DMSO溶液在无氧和 5 0℃下 ,生成了谷胱甘肽巯基 ,2 氰基 2 丙基氮氧自由基 . 展开更多

关键词 s-亚硝基谷胱甘肽 亚油酸 过氧化 苯乙烯 聚合 抑制作用 阻聚 氮氧自由基 一氧化氮 脂质过氧自由基

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S-亚硝基谷胱甘肽在创伤修复中的应用进展

8

作者 石嫒 贾含香 +5 位作者 容德昌 刘玲童 黄胜 朱红敏 伍莉 王军 《生物技术》 CAS 2024年第1期114-119,共6页

创伤修复的治疗对缩短恢复时间、减少患者痛苦和预防并发症至关重要。S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)作为一氧化氮的天然供体,具有抗菌、抗炎和促进细胞增殖的作用,已逐渐成为创伤修复再生领域的研究热点。因此,了解GSNO... 创伤修复的治疗对缩短恢复时间、减少患者痛苦和预防并发症至关重要。S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)作为一氧化氮的天然供体,具有抗菌、抗炎和促进细胞增殖的作用,已逐渐成为创伤修复再生领域的研究热点。因此,了解GSNO在创伤修复中的作用机制可为将来开发治疗创伤的新疗法提供有力的依据。该文总结了GSNO在促进创伤修复中的研究进展,重点描述其抗菌活性、抗炎症反应和促进细胞增殖等方面的作用机制,还阐述了GSNO治疗创伤修复研究中的应用,以期为后续的深入研究提供思路。 展开更多

关键词 创伤修复 s-亚硝基谷胱甘肽 一氧化氮 抗菌 水凝胶 微纳米材料 抗炎 细胞增殖

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一氧化氮供体S-亚硝基谷胱甘肽对储存期内机采血小板代谢的影响 被引量：2

9

作者 庄立 邓刚 钟发德 《临床血液学杂志（输血与检验）》 CAS 2017年第6期917-920,共4页

目的:探讨一氧化氮供体S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对储存期内机采血小板代谢的影响。方法:随机采集机采血小板6份,每份150~170ml,混匀后无菌分装于血小板专业保存袋中,共5袋,每袋30~35ml,4个试验组(向各组中每1袋血小板加入不同浓度GSNO溶... 目的:探讨一氧化氮供体S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对储存期内机采血小板代谢的影响。方法:随机采集机采血小板6份,每份150~170ml,混匀后无菌分装于血小板专业保存袋中,共5袋,每袋30~35ml,4个试验组(向各组中每1袋血小板加入不同浓度GSNO溶液5ml,最终浓度依次为5、10、100和200μmol/L)和1个对照组(加入等量的无菌生理盐水),于(22±2)℃震荡保存7d,分别在第1、3、5、7天取血小板2ml进行血小板常规指标、血气分析、MTS等指标检测。结果:对照组NO浓度随时间增加而小幅增长,试验组中,高浓度组(100、200μmol/L)在第3天达到顶峰,低浓度组(5、10μmol/L)在第5天达到顶峰。血小板pH值在第7天保存期中呈下降趋势,且保存至第7天时仍符合血小板储存期末pH值要求。2组pH、MPV、PDW、pCO2、pO2、cHCO3等指标比较差异无统计学意义(P=0.07,P=0.47,P=0.59,P=0.15,P=0.64,P=0.06),随时间增长对照组和处理组pH、pCO2、cHCO3均逐渐降低趋势,而pO2L、MPV、PDW呈逐渐升高趋势。随GSNO浓度增大,Lac含量递减;随时间增长,Lac含量逐渐增加。保存期内血小板2组MTS活性随时间增长而递减,GSNO处理的血小板与对照组相比均差异无统计学意义(P=0.18,P=0.08,P=0.24,P=0.51)。结论:血小板保存过程中加入NO供体GSNO,一定程度上可以抑制血小板代谢,减少乳酸形成,改善血小板功能。 展开更多

关键词 一氧化氮供体 血小板保存 s-亚硝基谷胱甘肽

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S-亚硝基谷胱甘肽抑制血小板凋亡的体外研究

10

作者 华琳 俞露 +1 位作者 贺云蕾 邓刚 《预防医学》 2018年第5期463-466,470,共5页

目的探讨一氧化氮(NO)供体S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对储存期内机采血小板细胞凋亡的影响。方法 6份机采血小板,每份分装到2个血小板保存袋,随机分到实验组和对照组,实验组加入GSNO(终浓度为100μmol/L),对照组加入无菌生理盐水。于(22
... 目的探讨一氧化氮(NO)供体S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对储存期内机采血小板细胞凋亡的影响。方法 6份机采血小板,每份分装到2个血小板保存袋,随机分到实验组和对照组,实验组加入GSNO(终浓度为100μmol/L),对照组加入无菌生理盐水。于(22±2)℃震荡保存,分别于第1、3、5、7天取血小板进行扫描电镜观察,采用流式细胞仪检测血小板凋亡情况,采用蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白表达。结果实验组血小板NO含量高于对照组(P<0.05)。血小板扫描电镜图显示,实验组血小板显微形态在外形、减少聚集等方面均优于对照组。在血小板保存过程中,乳酸含量不断累积(P<0.05),葡萄糖含量不断消耗(P<0.05),PS膜外翻的血小板数量不断增加(P<0.05);且实验组血小板乳酸、葡萄糖含量和PS膜外翻阳性率均低于对照组(P<0.05);凋亡相关蛋白Bax、Bcl-x L和Bak表达水平均未随保存时间延长而发生显著变化(P>0.05),两组上述三种蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在血小板保存过程中加入NO供体GSNO,可在一定程度上抑制血小板细胞凋亡,减少血小板贮存损伤。 展开更多

关键词 一氧化氮供体 血小板 s-亚硝基谷胱甘肽

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S—亚硝基谷胱甘肽对大鼠肝微粒体谷胱甘肽硫转移酶的激活及机制研究

11

作者 史强 楼宜嘉 《中国药理通讯》 2003年第1期56-56,共1页

关键词 s-亚硝基谷胱甘肽 大鼠 肝微粒体 谷胱甘肽硫转移酶 激活 机制

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活性氮对肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶1修饰激活的研究进展 被引量：2

12

作者 史强 楼宜嘉 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期297-300,共4页

活性氮导致肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶1(MGST1)修饰激活是近年来研究热点之一,由于其半胱氨酸(Cys49)可感受亲电子剂等而被修饰,担任"感受器"角色,行使对机体的保护作用。以过氧亚硝酸盐和S-亚硝基谷胱甘肽为代表的活性氮,可引... 活性氮导致肝脏微粒体谷胱甘肽转移酶1(MGST1)修饰激活是近年来研究热点之一,由于其半胱氨酸(Cys49)可感受亲电子剂等而被修饰,担任"感受器"角色,行使对机体的保护作用。以过氧亚硝酸盐和S-亚硝基谷胱甘肽为代表的活性氮,可引起MGST1的酪氨酸(Tyr92)和Cys49发生若干种修饰,包括硝基化、S-亚硝酰化、谷胱甘肽化、巯基氧化等,均可介导酶激活,其中Tyr92的硝基化修饰可望揭示MGST1的"第二个感受器",与机体对硝基化应激的保护机制相关。 展开更多

关键词 微粒体 肝 谷胱甘肽转移酶 过氧亚硝酸盐 s-亚硝基谷胱甘肽

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谷胱甘肽存在条件下NO_2^-对玉米植株干旱胁迫的缓解作用 被引量：2

13

作者 徐一馨 王飞 +1 位作者 张成双 慕自新 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第6期41-47,54,共8页

【目的】研究谷胱甘肽(GSH)还原亚硝酸钠(NaNO2)生成S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)所释放NO对玉米幼苗抗旱性的影响。【方法】以玉米品种"郑单958"为供试材料,采用盆栽试验,分别用NO-2+GSH合成的不同浓度GSNO(50,250,500,800,1 000... 【目的】研究谷胱甘肽(GSH)还原亚硝酸钠(NaNO2)生成S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)所释放NO对玉米幼苗抗旱性的影响。【方法】以玉米品种"郑单958"为供试材料,采用盆栽试验,分别用NO-2+GSH合成的不同浓度GSNO(50,250,500,800,1 000μmol/L)熏蒸处理三叶期的玉米幼苗,通过控制浇水进行干旱胁迫,以未经GSNO处理的玉米幼苗(0μmol/L GSNO)为干旱对照,通过测定干旱胁迫期间玉米的生长、生理指标,分析GSNO对干旱胁迫条件下玉米植株生长、抗氧化酶活性、膜脂过氧化程度的影响。【结果】干旱胁迫7d后,50~1 000μmol/L GSNO处理的玉米幼苗较干旱对照生长更好,其中500μmol/L GSNO处理玉米幼苗的株高、茎粗和叶面积分别较干旱对照提高32.26%,45.83%和53.13%。GSNO处理能够显著增强干旱胁迫玉米幼苗的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸氧化酶(APX)的活性,相应减少过氧化氢(H2O2)和超氧阴离子(O-·2)含量,降低膜脂的过氧化伤害。GSNO处理还能够维持干旱胁迫下玉米幼苗光合色素的相对稳定性,降低离体叶片的失水速率,其变化趋势表现为500μmol/L<50μmol/L<1 000μmol/L。【结论】GSNO处理能明显改善玉米的抗旱性,其发挥作用的最佳浓度为500μmol/L。 展开更多

关键词 玉米 谷胱甘肽 s-亚硝基谷胱甘肽 干旱胁迫

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稳定低表达GSNOR细胞系Neuro-2a的构建及其对S-亚硝基化的影响

14

作者 严洁萍 韩臻平 +5 位作者 李婷婷 王思懿 高立 罗双 李汉兵 黄萍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1547-1552,共6页

目的:探讨转染慢病毒载体构建稳定低表达S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(S-nitrosoglutathione reductase,GSNOR)的小鼠神经母细胞瘤Neuro-2a细胞系,并考察稳定低表达GSNOR对S-亚硝基化修饰水平的影响。方法:构建靶向GSNOR的慢病毒载体,用LipoF... 目的:探讨转染慢病毒载体构建稳定低表达S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(S-nitrosoglutathione reductase,GSNOR)的小鼠神经母细胞瘤Neuro-2a细胞系,并考察稳定低表达GSNOR对S-亚硝基化修饰水平的影响。方法:构建靶向GSNOR的慢病毒载体,用LipoFiter脂质体转染Neuro-2a细胞,并用嘌呤霉素筛选稳定低表达GSNOR的细胞系。光镜观察Neuro-2a细胞的形态变化,CCK-8法检测转染不同时间后的细胞活力,RT-qPCR和Western blot检测GSNOR的mRNA和蛋白表达水平。生物素转换法检测转染后Neuro-2a细胞内总S-亚硝基化蛋白水平。结果:HBLV-m-ADH5-shRNA1-PURO慢病毒载体序列与目的序列结果一致,提示慢病毒载体构建成功。嘌呤霉素筛选后,光镜观察Neuro-2a细胞形态良好,CCK-8实验结果显示在24、48、72和96 h时点细胞活力无显著差异,提示转染对细胞活力无明显影响。转染第2、4和6代后细胞内GSNOR mRNA水平分别是空载病毒组的37.02%、40.66%和30.13%,均显著降低(P<0.01),GSNOR蛋白表达水平较空载病毒组亦显著下降(P<0.01)。此外,稳定低表达GSNOR的Neuro-2a细胞中蛋白S-亚硝基化修饰水平显著上调(P<0.01)。结论:稳定低表达GSNOR的Neuro-2a细胞系构建成功,GSNOR低表达可上调胞内总蛋白的S-亚硝基化修饰水平。 展开更多

关键词 s-亚硝基谷胱甘肽还原酶 慢病毒 Neuro-2a细胞 s-亚硝基化

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血必净注射液对心脏骤停/心肺复苏后大鼠神经功能及生存情况的影响机制

15

作者 黄德庆 高玉广 +5 位作者 张元侃 王政林 邓海霞 黄夏冰 庞延 吴林 《中国药房》 CAS 北大核心 2024年第6期653-658,共6页

目的基于S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)/S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)途径探讨血必净注射液对大鼠心脏骤停(CA)/心肺复苏(CPR)后神经功能及生存情况影响的潜在机制。方法以室颤法建立CA/CPR大鼠模型,以假手术组大鼠为参照,采用高通量测序分... 目的基于S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)/S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)途径探讨血必净注射液对大鼠心脏骤停(CA)/心肺复苏(CPR)后神经功能及生存情况影响的潜在机制。方法以室颤法建立CA/CPR大鼠模型,以假手术组大鼠为参照,采用高通量测序分析挖掘两者差异表达基因,并结合酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测其海马组织中GSNOR、GSNO含量;筛选血必净注射液活性成分,并与GSNOR进行分子对接。将同法造模成功的大鼠分为模型组(30只)、抑制剂(GSNOR抑制剂)组(30只)、血必净组(30只)、血必净+抑制剂组(30只),并设置假手术组(30只),分别于药物首次干预后3h、24h、3d时进行神经功能评价及生存情况记录,并检测上述时间点各组大鼠海马组织中GSNOR、GSNO含量,分析GSNOR、GSNO含量与大鼠改良的神经系统损害严重程度评分表(mNSS)评分的相关性。结果GSNOR编码基因是模型组与假手术组间的差异表达基因之一;与假手术组比较,模型组大鼠海马组织中GSNOR含量显著升高,而GSNO含量显著降低(P<0.05)。血必净注射液中去甲丹参酮、鼠尾草酚酮等活性成分与GSNOR蛋白的结合能均低于-6 kcal/mol,以氢键连接为主。动物实验结果显示,模型组大鼠各时间点的mNSS评分和海马组织中GSNOR含量均显著高于假手术组(P<0.05),生存率和GSNO含量均显著低于假手术组(P<0.05);各给药组大鼠上述指标均显著改善,且血必净组mNSS评分显著低于抑制剂组,抑制剂组GSNOR、GSNO含量的变化较血必净组更明显,血必净+抑制剂组各指标均显著优于血必净组和抑制剂组(P<0.05)。GSNOR含量与mNSS评分呈正相关,GSNO含量与mNSS评分呈负相关(P<0.05)。结论血必净注射液可以改善CA/CPR后大鼠的神经功能,提高其生存率,该作用可能与下调GSNOR并上调GSNO有关。 展开更多

关键词 血必净注射液 心脏骤停 心肺复苏 s-亚硝基谷胱甘肽 s-亚硝基谷胱甘肽还原酶

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GSNOR的原核表达及亚硝基化修饰对其活性的影响

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作者 张林林 韩毅 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第10期1425-1429,共5页

S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)能不可逆降解S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO),富含多个保守半胱氨酸位点,在植物生长、抵御病原菌、耐热性以及细胞死亡等方面发挥重要作用。NO常通过对目标蛋白的半胱氨酸残基进行亚硝基化修饰,进而发挥信号转导... S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)能不可逆降解S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO),富含多个保守半胱氨酸位点,在植物生长、抵御病原菌、耐热性以及细胞死亡等方面发挥重要作用。NO常通过对目标蛋白的半胱氨酸残基进行亚硝基化修饰,进而发挥信号转导的作用。为了研究NO能否亚硝基化GSNOR及该修饰对GSNOR活性的影响,文章利用拟南芥GSNOR基因的全编码序列(coding sequence,CDS)构建原核表达载体PET-28a(+)-GSNOR,转入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)后,诱导表达得到带有6×His标签的融合蛋白,利用镍柱分离纯化得到酶活高达140 U/mg的GSNOR融合蛋白,蛋白质量浓度为0.77μg/μL。1 mmol/L NO供体2-(N,N-二乙基氨基)-二氮烯-2-氧二乙铵盐(DEA/NO)和GSNOR蛋白孵育后,运用生物素转换技术(biotin switch technique,BST)检测到NO的处理使得GSNOR发生了亚硝基化,还原剂二硫苏糖醇(DTT)可明显削弱蛋白的亚硝基化水平。并且测定NO处理后GSNOR蛋白的酶活,结果显示,NO处理后的GSNOR酶活降低,二硫苏糖醇(DTT)可使酶活恢复。结果表明NO通过亚硝化可降低GSNOR的活性,暗示了NO可能通过修饰GSNOR从而负调控NO水平的信号转导机制。 展开更多

关键词 s-亚硝基谷胱甘肽还原酶 原核表达 一氧化氮 翻译后修饰 亚硝基化

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不同浓度NO对缺氧心肌细胞损害的影响 被引量：7

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作者 张铭 黄跃生 张琼 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1017-1019,共3页

目的利用外源性一氧化氮（nitric oxide，NO）供体S-亚硝基谷胱甘肽（S-nitrosoglutathione，GSNO）对比观察不同浓度NO对缺氧心肌细胞活力的影响。方法培养4—6d心肌细胞分为常氧组（N）、缺氧组（H）和缺氧＋GSNO组（H＋G）；H＋G组... 目的利用外源性一氧化氮（nitric oxide，NO）供体S-亚硝基谷胱甘肽（S-nitrosoglutathione，GSNO）对比观察不同浓度NO对缺氧心肌细胞活力的影响。方法培养4—6d心肌细胞分为常氧组（N）、缺氧组（H）和缺氧＋GSNO组（H＋G）；H＋G组依照加入GSNO浓度的不同又分为3组：缺氧＋GSNO30μmol／L组（H＋G30）、缺氧＋GSNO200μmol／L组（H＋G200）、缺氧＋GSNO4000μmol／L组（H＋G4000）。分别观察其对缺氧（1％O2、5％CO2和94％N2）4h心肌细胞损害的影响。结果缺氧引起培养心肌细胞上清LDH活性增加，细胞存活率（MTY法）降低，H＋G30组和H＋G4000组损伤加重，H＋G200组损伤减轻。结论一定浓度范围内的NO具有细胞保护效应。 展开更多

关键词 缺氧 NO s-亚硝基谷胱甘肽 保护作用

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微生物甲醛脱氢酶的研究进展 被引量：4

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作者 张婧 年洪娟 陈丽梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期50-53,57,共5页

甲醛脱氢酶(FADH)属于中等锌链醇脱氢酶家族中的一员,存在于绝大多数原核生物以及所有的真核生物中,是微生物中主要用于甲醛解毒的酶。近年来一些研究确定甲醛脱氢酶还具有S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)的活性,用于调节内源性NO的动态... 甲醛脱氢酶(FADH)属于中等锌链醇脱氢酶家族中的一员,存在于绝大多数原核生物以及所有的真核生物中,是微生物中主要用于甲醛解毒的酶。近年来一些研究确定甲醛脱氢酶还具有S-亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)的活性,用于调节内源性NO的动态平衡。对微生物甲醛脱氢酶的结构,生理生化特性,基因克隆以及在环保上的应用方面进行综述。 展开更多

关键词 微生物 甲醛脱氢酶 甲醛解毒 s-亚硝基谷胱甘肽还原酶 NO调节

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GSNO对人肺腺癌A549细胞的作用 被引量：3

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作者 余红民 吴桂梅 +4 位作者 潘智华 李滔涛 王炳花 居培 杨向东 《中国当代医药》 2015年第17期8-10,14,共4页

目的观察S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对人肺腺癌A549细胞的作用,为GSNO作为药物来治疗肺癌提供依据。方法培养的A549细胞分别给予0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L GSNO 5个剂量,并分别培养24、48、72 h,应用CCK8试剂检测IC50;应用CCK8试剂... 目的观察S-亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对人肺腺癌A549细胞的作用,为GSNO作为药物来治疗肺癌提供依据。方法培养的A549细胞分别给予0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L GSNO 5个剂量,并分别培养24、48、72 h,应用CCK8试剂检测IC50;应用CCK8试剂检测二硫苏糖醇(DTT)逆转GSNO作用的给药时间点;应用原位凋亡荧光检测试剂盒检测GSNO给药组和GSNO联合DTT给药组中A549细胞的凋亡情况。结果 GSNO分别处理24、48、72 h后检测,结果 IC50分别为18.174、2.020、1.836 mmol/L;在GSNO给予20、40 min后给予DTT,结果 OD值显著提高(P<0.05),因而确定DTT给药时间点为GSNO给药后20 min;GSNO给药组显示凋亡细胞大量增加,GSNO联合DTT给药组则逆转了A549细胞的大量凋亡。结论 A549细胞凋亡可能是GSNO抑制细胞生长的一个重要机制,GSNO诱导的A549细胞凋亡可能与巯基-亚硝基化修饰作用有关。GSNO能促使A549细胞凋亡,该过程对于人肺腺癌的治疗具有明显的指导意义。 展开更多

关键词 s-亚硝基谷胱甘肽 二硫苏糖醇 A549 肺癌

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子痫前期的发病机制及临床治疗 被引量：8

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作者 史翠霞 曹伟 《中国医药科学》 2015年第8期25-28,39,共5页

子痫前期是一种严重的具有不同临床表现的多系统疾病。目前研究发现,虽然没有明确的因果关系,内皮功能障碍以及一氧化氮生物利用度的降低可能会在发病的病理生理学中发挥重要作用。缺乏可以针对潜在的病理生理变化和逆转内皮功能障碍的... 子痫前期是一种严重的具有不同临床表现的多系统疾病。目前研究发现,虽然没有明确的因果关系,内皮功能障碍以及一氧化氮生物利用度的降低可能会在发病的病理生理学中发挥重要作用。缺乏可以针对潜在的病理生理变化和逆转内皮功能障碍的治疗方法,往往会导致胎儿的医源性早产,引起新生儿发病率和死亡率的增高,以及产妇发病率和死亡率的增加。针对一氧化氮—可溶性鸟苷酸环化酶途径的各成分的药物可以有助于增加NO的生物利用度。此综述的目的是概述子痫前期在临床研究的治疗方法,重点是对一氧化氮供体包括有机硝酸盐和S-亚硝基硫醇,L-精氨酸,NO内源性前体;c GMP的分解抑制剂,包括西地那非,以及NO供体代谢新型抑制剂等。本研究概述了每种治疗模式的优点和局限性,并且对于子痫前期的既定治疗方案进行了探索。 展开更多

关键词 子痫前期 血管内皮功能障碍 一氧化氮 一氧化氮供体 有机硝酸盐 s-亚硝基谷胱甘肽 L-精氨酸 西地那非

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