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S100A6 gene have a positive influence on the growth and proliferation of gastric cancer cell MKN45 被引量:1
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作者 Lin Zhang Yanhong Hou +3 位作者 Nan Li Mengwei Wang Benyan Wu Kai Wu 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2009年第9期520-525,共6页
Objective: S100A6 (a.k.a., calcyclin) is over-expressed in several human tumors, including gastric carcinoma, human melanoma, pancreatic carcinoma, squamous cell carcinoma, malignant fibrous histiocytoma (MFH), a... Objective: S100A6 (a.k.a., calcyclin) is over-expressed in several human tumors, including gastric carcinoma, human melanoma, pancreatic carcinoma, squamous cell carcinoma, malignant fibrous histiocytoma (MFH), and carcinomas of the thyroid, breast, and colon. However, little is known about the role S100A6 plays in gastric adenocarcinoma. In the present study, we intended to investigate the influence of S100A6 on the growth, proliferation, apoptosis, invasion and cell cycle of the gastric cancer cell MKN45. Methods: As an important member of S100 family, S100A6 cDNAwas subcloned into a constitutive vector pcDNA3.1 followed by transfection in gastric cancer cell line MKN45 by using liposome. Then stable transfectants were selected and appraised. The apoptosis and cell cycles of these clones were analyzed by using flow cytometric assay. The growth and proliferation were analyzed by cell growth curves and colony-forming assay respectively. The S100A6 stable expression clones (MKN-S100A6) were detected and compared with their control groups respectively. Results: MKN- S100A6 grew faster than MKN45 and MKN-PC (MKN45 transfected with pcDNA3.1 vector). The cell counts of MKN-SI00A6 in the fifth, sixth and seventh days were significantly more than those of control groups (P 〈 0.05). Cell cycle analysis showed that proportions of MKN-S100A6 in G0-G1 and G2-M were different significantly with those of its control groups respectively (P 〈 0.05). The apoptosis rate of MKN-S100A6 was significantly lower than those of control groups (P 〈 0.05). Results of colony-forming assay showed that the colon formation rate of MKN-S100A6 was higher than those of control groups (P 〈 0.05). Conclusion: S100A6 can promote the growth and proliferation of gastric cancer cells. It can help tumor cell maintain malignant phenotype. In gastric cancer, S100A6 could be thought as a tumor-enhancing gene in some distance, but its role could be complicated. 展开更多
关键词 gastric cancer s100a6 gene cell apoptosis cell cycle
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S100A6基因沉默对人食管癌Eca109细胞增殖活性和迁移能力的影响 被引量:6
2
作者 陆文铨 邱彦 +2 位作者 庞涛 陶霞 陈万生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期49-54,共6页
目的观察S100A6基因沉默对人食管癌Eca109细胞增殖活性及迁移能力的影响。方法查找人S100A6mRNA序列,设计针对其编码区的siRNA序列;根据siRNA序列设计合成shRNA并构建shRNA重组表达载体;用阳离子脂质体转染重组质粒至Eca109细胞,于转染... 目的观察S100A6基因沉默对人食管癌Eca109细胞增殖活性及迁移能力的影响。方法查找人S100A6mRNA序列,设计针对其编码区的siRNA序列;根据siRNA序列设计合成shRNA并构建shRNA重组表达载体;用阳离子脂质体转染重组质粒至Eca109细胞,于转染后48h,采用real-time PCR法检测细胞中S100A6mRNA表达量,蛋白质印迹法检测细胞中S100A6蛋白表达量;MTT法检测细胞增殖活性,绘制细胞生长曲线;通过细胞划线法检测基因沉默对于肿瘤细胞迁移能力的影响。结果成功构建了针对S100A6基因的shRNA真核表达载体;通过脂质体转染的方法可在Eca109细胞内高效沉默S100A6,细胞转染后48h,与未转染细胞比较,S100A6 mRNA表达量降低,且差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),蛋白表达量检测结果与mRNA检测结果一致;S100A6基因沉默可明显抑制对数生长期Eca109细胞增殖活性,与未转染细胞比较,差异有统计学意义(P<0.01);S100A6基因沉默可明显抑制对数生长期Eca109细胞迁移能力。结论通过shRNA表达载体途径可在Eca109细胞中有效沉默S100A6基因,S100A6基因沉默能够显著抑制Eca109细胞增殖活性及迁移能力。 展开更多
关键词 食管肿瘤 s100a6 基因沉默 细胞增殖 细胞迁移
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S100A6基因对胃癌细胞生物学特性的影响 被引量:5
3
作者 张林 侯艳红 +3 位作者 李楠 王孟薇 吴本俨 吴凯 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期285-289,共5页
目的探讨S100A6基因对于胃癌细胞增殖状态、细胞周期、凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法将S100A6基因插入载体pcDNA3.1构建PC-S100A6真核表达载体。以脂质体介导转染MKN45胃癌细胞建立稳定转染细胞系(MK... 目的探讨S100A6基因对于胃癌细胞增殖状态、细胞周期、凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法将S100A6基因插入载体pcDNA3.1构建PC-S100A6真核表达载体。以脂质体介导转染MKN45胃癌细胞建立稳定转染细胞系(MKN-S100A6),而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验法等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化。同时设立空载体转染组和空白细胞组为对照。结果与转染pcDNA3.1空载体及空白MKN45胃癌细胞相比,转染PC-S100A6载体的稳定表达细胞株生长显著加快,前5日细胞计数差异有统计学意义(P<0.05),后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示PC-S100A6转染组处于G2-M期的细胞比例显著高于未处理的MKN45细胞和转染pcDNA3.1空载体的MKN45细胞(P<0.05),而处于S期的细胞比例显著低于其他两组(P<0.05),其他各期细胞比例差异均无统计学意义。流式细胞仪法检测细胞凋亡结果显示各组细胞的凋亡比例均为0.8%左右,统计学检验差异无统计学意义(P>0.05)。平板克隆形成实验结果显示PC-S100A6转染组平均克隆形成率显著高于其他两组(P<0.05),细胞迁徙实验结果提示PC-S100A6转染组穿膜率显著高于其他两组(P<0.05)。结论S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖及分裂作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例,可能具有促进细胞分裂作用,但对细胞凋亡的影响作用较小。S100A6基因可能加强胃癌细胞侵袭转移能力。总之该基因对维持细胞恶性表型有一定意义。 展开更多
关键词 胃癌 s100a6基因 细胞周期 转染
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血清S100A6检测对卵巢上皮性癌的诊断价值 被引量:4
4
作者 郑福利 张颖 王建 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第5期22-23,27,共3页
目的 探讨血清S100A6对卵巢上皮性癌的诊断及疾病进展临床诊断的指导价值.方法 采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测40例卵巢上皮性癌患者、20例卵巢良性肿瘤患者及20例正常体检者血清中S100A6的浓度.结果 卵巢癌与良性卵巢肿瘤,正常... 目的 探讨血清S100A6对卵巢上皮性癌的诊断及疾病进展临床诊断的指导价值.方法 采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测40例卵巢上皮性癌患者、20例卵巢良性肿瘤患者及20例正常体检者血清中S100A6的浓度.结果 卵巢癌与良性卵巢肿瘤,正常对照患者相比,S100A6血清浓度显著升高,差异具有统计学意义(t=2.66,P<0.01).中晚期(Ⅲ+Ⅳ期)卵巢癌患者S100A6血清浓度显著高于早期(Ⅰ+Ⅱ期)卵巢癌患者(t=4.68,P<0.001).与高分化和中分化相比,低分化的卵巢癌患者S100A6血清浓度显著升高,差异有统计学意义(t=2.49,P<0.05).出现淋巴结转移的卵巢癌患者中S100A6血清浓度显著高于淋巴结无转移的卵巢癌患者(t=4.02,P<0.01).S100A6血清平均浓度与病理类型无关(t=1.8,P>0.05).结论 血清S100A6的血清浓度与卵巢癌病情发展相关,S100A6有望成为监测卵巢上皮性癌病情发展的分子标志物. 展开更多
关键词 卵巢癌 钙结合蛋白s100a6 临床诊断
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降低S100A6基因表达对胃癌细胞生物学特性影响的研究 被引量:2
5
作者 张林 黄海力 +2 位作者 王孟薇 吴本俨 吴凯 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第2期220-225,共6页
目的:初步探讨S100A6基因对于胃癌细胞生长、增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法:S100A6基因的RNAi载体通过脂质体介导法转染S100A6基因高表达SGC7901细胞,后经G418压力筛选法获得稳定... 目的:初步探讨S100A6基因对于胃癌细胞生长、增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法:S100A6基因的RNAi载体通过脂质体介导法转染S100A6基因高表达SGC7901细胞,后经G418压力筛选法获得稳定转染的细胞系,经过RT-PCR法、免疫细胞化学法及Western-bloting法证实。对稳定表达株进行鉴定,而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化,每种检测实验均设立RNAi载体稳定转染细胞组、IMG800空载体稳定转染细胞组和空白SGC7901细胞组。结果:稳定的S100A6基因RNAi细胞系经过RT-PCR法、免疫细胞化学法及Western-bloting法证实,mRNA抑制率可达75%左右,蛋白产物的抑制率达85%左右。与转染IMG800空载体及空白SGC7901胃癌细胞相比转染S100A6 RNAi载体的稳定表达细胞株生长减慢,各时间点细胞计数显著低于对照组(P<0.05);后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示S100A6 RNA干扰组G0-G1期比例显著高于对照组,而G2-M及S期比例显著低于对照组(P<0.05),其它各期细胞比例均无显著差异。平板克隆形成实验结果显示S100A6 RNA干扰组克隆形成率显著低于对照组(P<0.05);,细胞迁徙实验结果提示S100A6 RNA干扰组穿膜率显著低于对照组(P<0.05)。结论:S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例可能具有促进细胞分裂作用,并可促进胃癌细胞侵袭转移。降低S100A6基因表达可能抑制胃癌细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 胃癌 s100a6基因 细胞周期 RNA干扰
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S100A6基因过表达慢病毒载体的构建、转染及鉴定 被引量:1
6
作者 李洁 胡进 +3 位作者 马力天 叶欣 南岩东 吴大方 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第2期127-131,共5页
目的构建S100A6基因重组慢病毒质粒,经293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,并感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达。方法 PCR扩增S100A6基因序列,将目的基因与酶切线性化载体p Len O-DCE定向连接,转化E.Coli DH5α感受态细胞,对阳性重... 目的构建S100A6基因重组慢病毒质粒,经293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,并感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达。方法 PCR扩增S100A6基因序列,将目的基因与酶切线性化载体p Len O-DCE定向连接,转化E.Coli DH5α感受态细胞,对阳性重组子进行DNA测序及比对。将构建成功的目的质粒和辅助包装质粒共转染293T细胞生产病毒液,荧光显微镜观察报告基因在293T细胞中的荧光表达,判断重组慢病毒的感染效率。用得到的病毒液转染人肺腺癌A549细胞,real-time PCR和Western blot检测转染A549细胞后S100A6蛋白和S100A6 mRNA的表达。结果测序提示重组慢病毒质粒构建成功;荧光显微镜观察显示在包装细胞中获得较高的转染效率。real-time PCR检测显示A549细胞中有S100A6 mRNA表达;Western blot显示S100A6蛋白在A549细胞中稳定表达。结论成功构建S100A6基因慢病毒表达载体,并成功感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达,为S100A6基因功能及特性的研究和探索提供了实验基础。 展开更多
关键词 慢病毒载体 A549细胞 s100a6基因
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肺腺癌细胞S100A6基因siRNA慢病毒载体构建及鉴定 被引量:1
7
作者 李小龙 姜华 +1 位作者 金发光 南岩东 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第20期2907-2912,共6页
目的:构建肺腺癌细胞S100A6基因siRNA慢病毒载体并鉴定。方法:慢病毒载体(pL enR-GPH)构建靶向S100A6基因的RNA干扰重组体,用以建立S100A6基因稳定沉默的肺腺癌A549细胞株。结果:PCR鉴定结果显示3个扩增的阳性片段均已插入pL enR-GPH载... 目的:构建肺腺癌细胞S100A6基因siRNA慢病毒载体并鉴定。方法:慢病毒载体(pL enR-GPH)构建靶向S100A6基因的RNA干扰重组体,用以建立S100A6基因稳定沉默的肺腺癌A549细胞株。结果:PCR鉴定结果显示3个扩增的阳性片段均已插入pL enR-GPH载体,测序结果证实三个重组慢病毒载体SH1、SH2、SH3的插入序列完全正确,重组慢病毒载体转染到293T细胞中包装成病毒颗粒,将其感染肺癌A549细胞后,RT-PCR和Western blot检测结果均证实三组重组体感染的细胞内S100A6 mRNA和蛋白的表达受到不同程度的抑制,沉默效率分别为98.29%、84.05%及78.24%。结论:成功构建了S100A6基因RNAi慢病毒重组载体,并建立了其稳定表达的肺腺癌A549细胞株,为探讨S100A6基因对肺腺癌生物学行为的影响提供了可靠的细胞模型。 展开更多
关键词 s100a6基因 siRNA慢病毒载体 RNA干扰 A549细胞
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S100A6基因表达对肺腺癌细胞组织的影响
8
作者 蔡洲 肖琛嫦 梅燕 《智慧健康》 2021年第13期185-187,共3页
目的探讨S100A6基因表达对肺腺癌细胞组织的影响。方法收集2017年5月至2018年2月某院收治的34例肺腺癌患者的正常肺组织、癌旁组织及肺腺癌组织标本,A549肺腺癌细胞由上海中科院提供。比较S100A6基因在正常肺组织、癌旁组织及肺腺癌组... 目的探讨S100A6基因表达对肺腺癌细胞组织的影响。方法收集2017年5月至2018年2月某院收治的34例肺腺癌患者的正常肺组织、癌旁组织及肺腺癌组织标本,A549肺腺癌细胞由上海中科院提供。比较S100A6基因在正常肺组织、癌旁组织及肺腺癌组织的表达量、阳性组和阴性组的细胞增殖率、穿膜细胞数、细胞凋亡率及细胞周期分布。结果S100A6基因在正常肺组织、癌旁组织、肺腺癌组织的表达量分别为(0.247±0.069)、(0.486±0.213)、(0.796±0.328)。阳性组的细胞增殖率、穿膜细胞数均明显高于阴性组,细胞凋亡率显著低于阴性组,差异具有统计学意义(P<0.05)。阳性组肺腺癌细胞S期占(56.27±0.93)%,G2-M期占(4.92±0.36)%,阴性组肺腺癌细胞S期占(42.53±0.71)%,G2-M期占(18.01±0.42)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。阳性组和阴性组的G0-G1期肺腺癌细胞比例无显著差异(P>0.05)。结论S100A6基因在肺腺癌细胞组织内过度表达,能够促进癌细胞增殖,抑制癌细胞凋亡,并通过提高癌细胞迁移能力促使癌灶扩散。 展开更多
关键词 s100a6基因 肺腺癌 细胞增殖 穿膜细胞数 细胞凋亡 细胞周期
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S100A6基因干扰对A549肺腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:6
9
作者 南岩东 姜华 +1 位作者 金发光 杨拴盈 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2016年第3期161-166,共6页
目的 探讨S100A6基因干扰对A549肺腺癌细胞生物学行为的影响.方法 构建S100A6基因RNAi载体,慢病毒转染A549肺腺癌细胞,共分为3组,①空载体对照组:转染不携带S100A6基因RNAi的空载质粒;②阴性对照组:未转染任何质粒;③S100A6 RNA干扰... 目的 探讨S100A6基因干扰对A549肺腺癌细胞生物学行为的影响.方法 构建S100A6基因RNAi载体,慢病毒转染A549肺腺癌细胞,共分为3组,①空载体对照组:转染不携带S100A6基因RNAi的空载质粒;②阴性对照组:未转染任何质粒;③S100A6 RNA干扰组:携带S100A6基因RNAi的质粒.应用实时聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting鉴定S100A6基因和蛋白表达;采用四甲基偶氮唑蓝、迁移试验和流式细胞仪分别检测细胞增殖、浸润、细胞周期及细胞凋亡等生物学特性.结果 S100A6基因干扰后A549肺腺癌细胞S100A6 mRNA的表达(0.009±0.001)较阴性对照组(0.049 ±0.005)和空载体对照组(0.030 ±0.006)均有明显下降,差异均有统计学意义(=57.56,P=0.000;t=48.21,P=0.000).S100A6基因干扰后A549肺腺癌细胞S100A6蛋白的表达(0.107±0.002)较阴性对照组(0.341 ±0.005)和空载体对照组(0.311 ±0.006)均有明显下降,差异均有统计学意义(t=37.34,P=0.000;=27.51,P=0.001).48 h细胞增殖能力:RNA干扰组(0.230 ±0.008)较阴性对照组(0.292 ±0.038)和空载体对照组(0.307 ±0.013)降低,差异均有统计学意义(t=25.31,P=0.003;t=29.42,P=0.001).细胞浸润能力:RNA干扰组细胞的穿膜细胞数(11.40个±1.36个)较阴性对照组(26.80个±1.83个)和空载体对照组(25.80个±1.93个)降低,差异有统计学意义(t=29.44,P=0.001;t=23.17,P=0.005).细胞周期:RNA干扰组的S期细胞比例(28.26%±0.38%)显著低于空载体对照组(44.73%±0.66%)和阴性对照组(45.15%±1.69%),差异有统计学意义(t=63.69,P=0.000;t =71.55,P=0.000),RNA干扰组的G2-M期细胞比例(26.99%±0.29%)显著高于阴性对照组(13.26% ±0.49%)和空载体对照组(12.41%±0.46%),差异有统计学意义(t=56.31,P=0.000;t =51.39,P=0.000).RNA干扰组细胞凋亡率(8.90%±0.48%)与阴性对照组(5.84%±0.21%)和空载体对照组(5.99%±0.37%)比较,差异均有统计学意义(t=51.34,P=0.000;t=47.27,P=0.000).结论 S100A6基因参与肺腺癌细胞的增殖、浸润、细胞周期、细胞凋亡等生物学过程,与肿瘤发生、发展、转移等密切相关,有望作为肺腺癌诊断和治疗新的分子靶标. 展开更多
关键词 肺肿瘤 细胞增殖 RNA干扰 浸润 s100a6基因
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胃癌及其转移灶中S100A6基因的表达 被引量:4
10
作者 黄海力 吴本俨 +3 位作者 朱旭东 尤纬缔 王卫华 王孟薇 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期506-510,共5页
目的分析S100A6在胃癌发展过程中的作用,研究配对胃癌组织以及转移灶中S100A6基因mRNA和蛋白的表达。方法应用实时定量逆转录聚合酶链反应(QRT—PCR)检测20例配对胃癌组织中S100A6mRNA的表达,构建208例胃癌患者配对胃癌组织及转移... 目的分析S100A6在胃癌发展过程中的作用,研究配对胃癌组织以及转移灶中S100A6基因mRNA和蛋白的表达。方法应用实时定量逆转录聚合酶链反应(QRT—PCR)检测20例配对胃癌组织中S100A6mRNA的表达,构建208例胃癌患者配对胃癌组织及转移淋巴结病灶的组织芯片,采用免疫组化方法检测S100A6蛋白的表达,并分析其与临床病理因素以及预后之间的相关性。结果QRT—PCR检测结果显示,20例配对胃癌中,有14例的S100A6mRNA转录水平升高,平均升高倍数为2.25倍。免疫组化检测结果显示,S100A6在正常胃黏膜中的表达阳性率为34.3%,在癌灶中表达阳性率为84.1%,在淋巴结转移灶中表达阳性率为90.9%,癌灶和淋巴结转移灶表达高于正常胃黏膜(P〈0.05)。65.5%的胃癌组织中S100A6表达较对应正常胃黏膜升高。癌灶中S100A6表达与肿瘤大小和侵袭程度相关,肿瘤越大表达越高(P=0.022),侵袭越深表达越高(P=0.000),未发现S100A6表达与其他临床病理因素之间的相关性。S100A6表达与预后无关,但相对于正常胃黏膜,癌灶中S100A6表达升高者的预后比表达下降者差。结论S100A6表达上调是胃癌早期事件,与胃癌的发生、发展相关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 s100a6基因 基因表达
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S100A6、annexin A2和c-myc在多发性骨髓瘤中的表达及意义 被引量:2
11
作者 包红雨 王建宁 +1 位作者 孟庆齐 宋敏 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期967-973,共7页
目的:探讨S100A6、膜联蛋白A2(annexin A2,AnxA2)及c-myc在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者中的表达及其临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR法检测28例MM患者化疗前后及20例对照组(外周血白细胞或血小板计数略低于正常,骨髓检... 目的:探讨S100A6、膜联蛋白A2(annexin A2,AnxA2)及c-myc在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者中的表达及其临床意义。方法:应用实时荧光定量PCR法检测28例MM患者化疗前后及20例对照组(外周血白细胞或血小板计数略低于正常,骨髓检查正常者)骨髓单个核细胞中S100A6、AnxA2及c-myc mRNA的表达,分析MM患者S100A6、AnxA2及c-myc mRNA表达间的关系。将S100A6 si RNA转染至MM U266细胞后,分别应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测S100A6、AnxA2及c-myc mRNA和蛋白的表达。结果:MM患者骨髓单个核细胞中S100A6、AnxA2及c-myc mRNA的表达水平均高于对照组(P值均<0.05),化疗前MM患者骨髓单个核细胞中S100A6、AnxA2及c-myc mRNA的表达水平均高于化疗后(P值均<0.05),伴髓外转移的MM患者骨髓单个核细胞中S100A6、AnxA2及c-myc mRNA的表达水平均高于不伴髓外转移的患者(P值均<0.05),并且S100A6 mRNA的表达水平与AnxA2 mRNA、c-myc mRNA表达水平均呈正相关(r=0.585,P=0.001;r=0.540,P=0.004)。S100A6 si RNA转染后,MM U266细胞中S100A6、AnxA2及c-myc mRNA和蛋白的表达水平均下调(P值均<0.05)。结论:S100A6在MM骨髓中的表达水平较高,且与AnxA2和c-myc的表达呈正相关。S100A6可能与MM的发生、进展和髓外转移相关。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 骨髓细胞 基因表达 s100a6 膜联蛋白A2 C-MYC
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