含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶2表达变化对肝纤维化大鼠肝组织中细胞外信号调节激酶1/2活性的影响

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作者 郝礼森 潘恩亮 +5 位作者 季景秀 苗笑佳 蒋美钰 王薇 刘甜 高莹莹 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第12期1642-1647,共6页

目的:探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)表达变化对肝纤维化大鼠肝组织中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)活性的影响。方法:健康雄性SD大鼠160只被随机分为五组(对照组、模型组、Ad-GFP组、Ad-SHP2组及Ad-shRNA/SHP组),每组32只... 目的:探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)表达变化对肝纤维化大鼠肝组织中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)活性的影响。方法:健康雄性SD大鼠160只被随机分为五组(对照组、模型组、Ad-GFP组、Ad-SHP2组及Ad-shRNA/SHP组),每组32只。除对照组(腹腔注射0.9%氯化钠溶液)外,其余四组构建四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型,并将表达绿色荧光蛋白(GFP)的空病毒Ad-GFP、表达野生型SHP2及GFP的腺病毒Ad-SHP2、表达GFP及靶向SHP2的短发夹RNA(shRNA)的腺病毒Ad-shRNA/SHP自大鼠尾静脉分别注射入Ad-GFP组、Ad-SHP2组及Ad-shRNA/SHP2组大鼠,各组分别于造模第2、4、6、8周选取8只大鼠留取肝组织标本。采用HE染色观察大鼠肝组织病理学变化;采用Masson三色染色检测大鼠肝组织胶原沉积;采用实时荧光定量PCR检测大鼠肝组织SHP2、ERK1 mRNA表达;采用免疫组织化学染色检测SHP2蛋白表达;采用Western blot检测ERK1和p-ERK1蛋白表达。结果:大鼠肝纤维化模型成功构建,在各造模时间点,与模型组及Ad-GFP组大鼠肝组织胶原沉积比较,Ad-SHP2组均加重,而Ad-shRNA/SHP2组均减轻。导入野生型SHP2基因后大鼠肝组织的SHP2 mRNA及蛋白表达明显升高(均P<0.05),而导入靶向SHP2的shRNA后大鼠肝组织的SHP2 mRNA及蛋白表达明显降低(均P<0.05)。在各造模时间点(第2、4、6、8周),模型组、Ad-GFP组、Ad-SHP2组及Ad-shRNA/SHP2组大鼠肝组织ERK1 mRNA及蛋白表达以及p-ERK1蛋白表达高于对照组(均P<0.05),但上述四组大鼠肝组织的ERK1 mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(均P>0.05);而在各时间点与模型组及Ad-GFP组大鼠肝组织p-ERK1蛋白表达比较,Ad-SHP2组升高(均P<0.05),Ad-shRNA/SHP2组降低(均P<0.05),模型组与Ad-GFP组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:大鼠纤维化肝组织中SHP2过表达可通过促进ERK1/2磷酸化增强ERK1/2活性,而SHP2低表达则可通过抑制ERK1/2磷酸化降低ERK1/2活性。 展开更多

关键词 肝纤维化 含sh2结构域的蛋白酪氨酸酶2 细胞外信号调节激酶1/2 大鼠 磷酸化细胞外信号调节激酶1/2

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含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1在肝脏疾病中的研究现状 被引量：1

2

作者 雷淑娟 文良志 +1 位作者 张新 谢渭芬 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1128-1133,共6页

蛋白酪氨酸磷酸化修饰广泛存在于真核细胞内,作为一种基础调节机制参与调节细胞的增殖、凋亡、分化、迁移等多个生命过程。蛋白酪氨酸磷酸化改变可影响肝脏炎症、肝纤维化、肝癌等多种肝脏疾病。含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)... 蛋白酪氨酸磷酸化修饰广泛存在于真核细胞内,作为一种基础调节机制参与调节细胞的增殖、凋亡、分化、迁移等多个生命过程。蛋白酪氨酸磷酸化改变可影响肝脏炎症、肝纤维化、肝癌等多种肝脏疾病。含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP-1)属于非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶,是维持体内蛋白酪氨酸磷酸化水平的关键因子。近年来SHP-1在肝脏疾病中的研究取得了重大进展,本文主要就SHP-1在肝脏疾病中的研究现状作一综述。 展开更多

关键词 含sh2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶类 酪氨酸磷酸化 肝脏疾病

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SH2结构域:一个潜在的药靶

3

作者 傅用增 来鲁华 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期194-196,共3页

众多包含SH2结构域(Src homology 2 domain)的蛋白质在细胞内信号传导过程中起到重要作用,它们通过SH2结构域特异性结合包含磷酸化酪氨酸的蛋白质。SH2结构域保守的结构特征和重要的功能使它成为一种潜在的药物作用靶标。基于其结合靶... 众多包含SH2结构域(Src homology 2 domain)的蛋白质在细胞内信号传导过程中起到重要作用,它们通过SH2结构域特异性结合包含磷酸化酪氨酸的蛋白质。SH2结构域保守的结构特征和重要的功能使它成为一种潜在的药物作用靶标。基于其结合靶蛋白序列设计的SH2结构域的抑制剂为治疗胞内信号通路异常引起的疾病提供了很好的方向。本文简述了SH2结构域的结构特征,结合特异性和抑制剂设计的进展。 展开更多

关键词 sh2结构域 磷酸化酪氨酸 多肤类似物 基于结构的药物设计

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SHP-2蛋白NSH2结构域的原核表达和同位素标记

4

作者 牛皋 郭江峰 +1 位作者 高晓莲 张耀洲 《浙江理工大学学报（自然科学版）》 2010年第4期630-635,共6页

SHP-2蛋白是一种含有两个SH2结构域的磷酸酶。SHP-2的N端SH2结构域是细胞因子或病毒因子激活该蛋白的分子内靶点。对shp2基因进行信息学分析,设计引物通过PCR克隆出人SHP-2蛋白N端SH2结构域(NSH2)的DNA序列。重组到原核表达载体pGEX-2T... SHP-2蛋白是一种含有两个SH2结构域的磷酸酶。SHP-2的N端SH2结构域是细胞因子或病毒因子激活该蛋白的分子内靶点。对shp2基因进行信息学分析,设计引物通过PCR克隆出人SHP-2蛋白N端SH2结构域(NSH2)的DNA序列。重组到原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功高效率表达了可溶性NSH2蛋白。对蛋白进行15N同位素标记和纯化,并浓缩获得达到进行核磁滴定法结构研究的蛋白样品。 展开更多

关键词 shP-2 sh2结构域 同位素标记 HSQC

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Grb7蛋白SH2结构域的表达及其纯化的方法

5

作者 张丹 赵敏迪 高友鹤 《蚌埠医学院学报》 CAS 2012年第4期376-379,共4页

目的:探讨Grb7蛋白SH2结构域的表达及其纯化的方法。方法:将Grb7蛋白SH2结构域编码基因与谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签编码基因构建为融合基因,插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆酶切位点EcoRⅠ与XhoⅠ之间,挑选测序正确的质粒将其转染... 目的:探讨Grb7蛋白SH2结构域的表达及其纯化的方法。方法:将Grb7蛋白SH2结构域编码基因与谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签编码基因构建为融合基因,插入原核表达载体pGEX-4T-1的多克隆酶切位点EcoRⅠ与XhoⅠ之间,挑选测序正确的质粒将其转染至BL 21感受态细胞内,感受态细胞于37℃摇培至其OD值达到0.6～0.8后,经0.2 mmol/L IPTG 25℃过夜诱导表达融合蛋白,MALDI-TOF质谱检测蛋白纯化产物,SPR生物传感器(Biacore 3000)检测纯化蛋白与天然配体磷酸化肽段的相互作用。结果:GST-Grb7 SH2结构域融合蛋白在裂解菌液的上清液中存在,500 ml LB/Amp菌液可纯化得到415μg GST-Grb7 SH2结构域融合蛋白,MALDI-TOF质谱图上可见明显目的蛋白峰,Biacore 3000检测到纯化蛋白可结合不同浓度的磷酸化肽段配体。结论:运用改进的GST融合蛋白纯化方法可得到具有一定纯度及生物学活性的GST-Grb7 SH2结构域融合蛋白,为该蛋白结构域后续功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 生长因子受体结合蛋白质7 sh2结构域 谷胱甘肽巯基转移酶 基因表达 纯化

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SH2结构域2A在胰腺癌中的表达及对其吉西他滨耐药的影响

6

作者 陈景宇 禹鹏飞 +3 位作者 刘攀 张旭 王玉柱 秦涛 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第4期728-731,共4页

目的探讨SH2结构域2A(SH2D2A)对胰腺癌(PDAC)吉西他滨(GEM)耐药的影响。方法利用Kaplan-Meier Plotter和GEPIA平台探讨SH2D2A在PDAC的表达,对PDAC患者总体存活率(OS)和无病生存期(DFS)的影响;选取郑州大学人民医院手术切除的40例PDAC组... 目的探讨SH2结构域2A(SH2D2A)对胰腺癌(PDAC)吉西他滨(GEM)耐药的影响。方法利用Kaplan-Meier Plotter和GEPIA平台探讨SH2D2A在PDAC的表达,对PDAC患者总体存活率(OS)和无病生存期(DFS)的影响;选取郑州大学人民医院手术切除的40例PDAC组织和癌旁组织,蛋白质印迹法(Western blot)分析组织中SH2D2A蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blot分析购自上海细胞典藏委员会的人正常胰腺导管上皮细胞HPDE、人胰腺癌细胞系SW1990、MIA PaCa-2、PANC-1、HPAFⅡ和BxPC-3中SH2D2A蛋白和mRNA表达水平;短发卡RNA(shRNA)构建稳定敲低SH2D2A细胞株,分为实验组(Sh组)和对照组(NC组);qPCR和Western blot分析两组细胞SH2D2A的表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞的药物半数抑制浓度(IC50);集落形成实验、CCK-8、流式细胞术和肿瘤成球实验分析GEM处理后细胞的增殖、凋亡和肿瘤干性;组间数据比较采用t检验。结果生信分析显示SH2D2A高表达患者的OS、DFS明显缩短(P均<0.01)。PDAC组织中SH2D2A蛋白表达高于癌旁组织[0.88±0.27比0.36±0.07,t=6.416,P<0.05]。SW1990、MIA PaCa-2、PANC-1、HPAFⅡ和BxPC-3中SH2D2A表达水平高于HPDE[mRNA:5.86±0.45、3.47±0.27、4.74±0.37、2.38±0.18、2.54±0.20比1.00±0.08,t=15.780、12.280、14.490、9.040、9.632,P均<0.05;蛋白:2.24±0.11、1.67±0.07、1.81±0.18、1.31±0.08、1.53±0.17比1.00±0.01,t=18.110、16.400、7.320、6.406、5.220,P均<0.05]。Sh组SH2D2A表达水平低于NC组[mRNA:0.15±0.03、0.14±0.03比1.01±0.07,t=17.970、18.570,P均<0.05;蛋白:0.35±0.02、0.30±0.02比1.00±0.08,t=11.690、14.300,P均<0.05]。Sh组IC50低于NC组[18.27±0.04、16.54±0.10比25.81±0.32,t=45.280、54.850,P均<0.05];Sh组细胞第4天的吸光度值低于NC组[1.20±0.06、1.02±0.08比2.22±0.08,t=17.440、18.490,P均<0.05];Sh组细胞集落数量低于NC组[367.70±31.50、331.00±58.66比738.00±101.50,t=7.211、9.676,P均<0.05];Sh组细胞凋亡比例高于NC组[(28.59±3.44)%、(22.68±1.78)%比(17.67±0.38)%,t=5.166、4.375,P均<0.05];Sh组细胞成球大小小于NC组[8.79±1.43、7.63±1.23比45.31±11.85,t=4.772、5.191,P均<0.05]。结论SH2D2A在人PDAC中表达上调,并参与调控PDAC对吉西他滨的耐药。 展开更多

关键词 胰腺癌 化疗耐药 吉西他滨 sh2结构域2A

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SHP2表达变化对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织中Akt表达的影响 被引量：1

7

作者 郝礼森 王薇 +5 位作者 季景秀 蒋美钰 苗笑佳 高莹莹 莫艳波 王静 《国际消化病杂志》 CAS 2024年第1期29-35,共7页

目的 探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)过表达及低表达对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织中蛋白激酶B(Akt)的影响。方法选取160只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、AdGFP组、Ad-SHP2组和Ad-shRNA/SHP2组,每组3... 目的 探讨含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)过表达及低表达对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝组织中蛋白激酶B(Akt)的影响。方法选取160只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、AdGFP组、Ad-SHP2组和Ad-shRNA/SHP2组,每组32只。采用腹腔注射CCl4法构建大鼠肝纤维化模型,经大鼠尾静脉分别将表达绿色荧光蛋白(GFP)的空病毒Ad-GFP、表达野生型SHP2及GFP的腺病毒Ad-SHP2、表达GFP并携带靶向SHP2的短发夹RNA(shRNA)的腺病毒Ad-shRNA/SHP2注入大鼠体内。各组分别于造模第2、4、6、8周随机选取8只大鼠,留取肝组织标本。采用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠肝组织中SHP2、Akt的mRNA表达水平,采用蛋白质印迹法检测各组大鼠肝组织中SHP2、Akt及磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白表达水平,采用H-E染色法观察各组大鼠肝组织的病理变化,采用Masson三色染色法观察各组大鼠肝组织的胶原沉积情况。结果 靶向SHP2的shRNA及外源性野生型SHP2基因成功导入肝纤维化大鼠体内,并使大鼠肝组织中SHP2呈低表达或过表达。与模型组及Ad-GFP组比较,Ad-SHP2组大鼠的肝纤维化程度加重,而Ad-shRNA/SHP2组大鼠的肝纤维化程度则减轻。在同一造模时间点(第2、4、6、8周)对各组大鼠肝组织中Akt的m RNA和蛋白表达水平,以及p-Akt蛋白表达水平进行比较,结果显示Ad-GFP组、Ad-SHP2组、Ad-shRNA/SHP2组及模型组均显著高于对照组(P均<0.05),而各时间点的Ad-GFP组、Ad-SHP2组、Ad-shRNA/SHP2组及模型组的Akt表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05);与模型组及Ad-GFP组大鼠肝组织中p-Akt表达水平相比较,AdshRNA/SHP2组在各时间点均显著降低(P均<0.05),Ad-SHP2组在各时间点均显著升高(P均<0.05),模型组与Ad-GFP组的p-Akt表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 在CCl4诱导的大鼠肝纤维化病程中,肝组织中SHP2过表达可通过促进Akt磷酸化增强Akt的活性,而肝组织中SHP2低表达则可通过抑制Akt磷酸化减弱Akt的活性。 展开更多

关键词 含sh2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2 肝纤维化 蛋白激酶B

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SH2结构域识别磷酸化酪氨酸的分子机制及其生物学作用 被引量：1

8

作者 高诗娟 高友鹤 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期427-429,共3页

由约100个氨基酸残基组成的SH2结构域特异性识别配体上磷酸化酪氨酸及其C端的3～6个氨基酸残基。其对配体的识别特性取决于特定的空间结构。SH2结构域广泛存在于蛋白酪氨酸激酶、磷酸酶、磷酯酶、信号接头蛋白及转录因子等蛋白分子内,... 由约100个氨基酸残基组成的SH2结构域特异性识别配体上磷酸化酪氨酸及其C端的3～6个氨基酸残基。其对配体的识别特性取决于特定的空间结构。SH2结构域广泛存在于蛋白酪氨酸激酶、磷酸酶、磷酯酶、信号接头蛋白及转录因子等蛋白分子内,而参与调控相应的信号传导通路。SH2结构域所介导的信号通路的异常会导致多种遗传病及肿瘤的发生。因此对其配体识别特性的研究及相应的靶分子模拟物的研究受到生物学家及药学家的青睐。 展开更多

关键词 sh2结构域 信号传导 磷酸化酪氨酸

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3BP2中SH2结构域的晶体结构及其与来源于FRS2α的肽的复合物晶体结构研究(英文)

9

作者 崔莹 宋旭 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期1147-1154,共8页

提出了一个3BP2的 Src 同源区2结构域(SH2)不同于其他 SH2结构域的全新肽链结合模式,它与 FRS2来源的多肽结合于不同的氨基酸残基.实际上,该 SH2结构域与该短肽的三个重要残基相结合形成完美的几何互补,通过 BioCore 实验验证,这三个氨... 提出了一个3BP2的 Src 同源区2结构域(SH2)不同于其他 SH2结构域的全新肽链结合模式,它与 FRS2来源的多肽结合于不同的氨基酸残基.实际上,该 SH2结构域与该短肽的三个重要残基相结合形成完美的几何互补,通过 BioCore 实验验证,这三个氨基酸最好是Y-E-N. 展开更多

关键词 sh2结构域 复合物晶体结构 多波长反常反射 3BP2 FRS2α

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5-苯基-1,3,4-噻二唑衍生物的合成及含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)抑制活性研究 被引量：1

10

作者 于丽杰 冯勃 +6 位作者 王智佳 高立信 张纯 Rajendran Satheeshkumar 李佳 周宇波 王文龙 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2021年第8期3097-3105,共9页

作为细胞信号转导通路的关键节点分子,含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)是潜在的抗肿瘤靶点.已知的SHP1抑制剂屈指可数.设计并合成了11个5-苯基-1,3,4-噻二唑衍生物.活性测试结果表明,部分衍生物对SHP1显示了一定强度的抑制活性.其中... 作为细胞信号转导通路的关键节点分子,含SH2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶1(SHP1)是潜在的抗肿瘤靶点.已知的SHP1抑制剂屈指可数.设计并合成了11个5-苯基-1,3,4-噻二唑衍生物.活性测试结果表明,部分衍生物对SHP1显示了一定强度的抑制活性.其中,化合物5b[IC50=(1.33±0.16)μmol/L]对SHP1显示了中等强度的抑制活性,对PTP1B和TCPTP不显示抑制活性,对SHP2显示了2倍的选择性,为发现新型SHP1抑制剂提供了新的骨架类型. 展开更多

关键词 5-苯基-1 3 4-噻二唑衍生物 含sh2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶1(shP1) 抑制剂 构效关系

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人源性基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3结构域的克隆、表达及纯化

11

作者 金玉莲 金宁一 +2 位作者 项泽萍 任云霞 陈庆森 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期9-13,共5页

利用RT-PCR技术将人源性PLC-γ1中的SH2-SH2-SH3结构域基因扩增并克隆到载体pGEX-2T中,经热激反应转化到大肠杆菌BL21菌株内,在低温(33℃)下、利用IPTG诱导表达构建的重组基因的高效表达体系,利用谷胱甘肽琼脂糖(sepharose)4B纯化得到... 利用RT-PCR技术将人源性PLC-γ1中的SH2-SH2-SH3结构域基因扩增并克隆到载体pGEX-2T中,经热激反应转化到大肠杆菌BL21菌株内,在低温(33℃)下、利用IPTG诱导表达构建的重组基因的高效表达体系,利用谷胱甘肽琼脂糖(sepharose)4B纯化得到高表达的重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot检测表明,PLC-γ1的SH2-SH2-SH3结构域重组基因可在低温(33℃)条件下在E.coliBL21细胞中稳定完整表达,但是在较高温度下(37℃)会产生SH2-SH2-SH3结构域不完全表达的现象。上述研究结果为人源性重组基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3结构域的深入研究和广泛应用奠定了基础。 展开更多

关键词 人源性PLC-γ1 sh2-sh2-sh3结构域 基因克隆 表达

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SHIP2、EGFL7表达与肺癌患者临床病理参数及预后的关系

12

作者 陈慧芬 谢艳萍 +1 位作者 梁亦贤 朱文娟 《现代实用医学》 2023年第8期1015-1018,共4页

目的探讨肺癌组织含SH2结构域的Ⅱ型肌醇5’-磷酸酶(SHIP2)、类表皮生长因子域7(EGFL7)表达与肺癌患者临床病理参数及预后的关系。方法回顾性收集湖州市第一人民医院2019年1-12月收治的76例肺癌患者,均以免疫组织化学SP法检测组织中SHIP... 目的探讨肺癌组织含SH2结构域的Ⅱ型肌醇5’-磷酸酶(SHIP2)、类表皮生长因子域7(EGFL7)表达与肺癌患者临床病理参数及预后的关系。方法回顾性收集湖州市第一人民医院2019年1-12月收治的76例肺癌患者,均以免疫组织化学SP法检测组织中SHIP2、EGFL7蛋白的表达情况,采用Kaplan-Meier法和多变量Cox回归分析SHIP2、EGFL7与肺癌患者预后的关系。结果肺癌组织中SHIP2、EGFL7蛋白高表达率均高于癌旁组织(均P<0.05);SHIP2、EGFL7高表达与低表达组TNM分期、淋巴结转移差异均有统计学意义(均P<0.05);SHIP2、EGFL7高表达组3年生存率均低于低表达组(均P<0.05);TNM分期、淋巴结转移、SHIP2及EGFL7高表达均为影响肺癌患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论肺癌患者癌组织中SHIP2、EGFL7均为高表达,并与TNM分期及淋巴结转移有关,是影响预后的独立危险因素。 展开更多

关键词 肺癌 含sh2结构域的Ⅱ型肌醇5'-磷酸酶 类表皮生长因子域7 预后

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肺癌患者癌组织中SHIP2、PLEK2蛋白表达水平及其临床预后意义 被引量：2

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作者 周宇 《实用癌症杂志》 2023年第2期187-191,共5页

目的分析肺癌患者癌组织中含SH2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2(SHIP2)、Pleckstrin2(PLEK2)蛋白表达水平及其临床预后意义。方法收集97例肺癌患者的癌组织标本及其癌旁组织(距肿瘤边缘4 cm处)标本。应用免疫组织化学染色法检测所有标本组... 目的分析肺癌患者癌组织中含SH2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2(SHIP2)、Pleckstrin2(PLEK2)蛋白表达水平及其临床预后意义。方法收集97例肺癌患者的癌组织标本及其癌旁组织(距肿瘤边缘4 cm处)标本。应用免疫组织化学染色法检测所有标本组织中SHIP2、PLEK2蛋白表达水平。采用χ^(2)检验分析肺癌患者癌组织中SHIP2、PLEK2蛋白表达与临床病理特征的关系,多因素Cox回归分析影响肺癌患者预后的相关因素。结果癌组织中SHIP2、PLEK2蛋白高表达率均明显高于癌旁组织(61.86%vs 30.93%,63.92%vs 32.99%;P<0.05)。SHIP2、PLEK2蛋白表达与肺癌患者的TNM分期、淋巴结转移存在显著关系(P<0.05)。SHIP2高表达、低表达组患者3年生存率分别为31.67%(19/60)、59.46%(22/37),PLEK2高表达、低表达组患者3年生存率分别为33.87%(21/62)、57.14%(20/35),SHIP2、PLEK2高表达、低表达组3年生存率比较均存在差异(P<0.05)。单因素分析结果显示:TNMⅢ期、淋巴结转移、SHIP2高表达、PLEK2高表达肺癌患者3年生存时间均明显缩短(P<0.05)。多因素Cox分析结果显示,TNMⅢ期、淋巴结转移、SHIP2高表达、PLEK2高表达均为影响肺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论肺癌患者癌组织中SHIP2、PLEK2蛋白表达均为高表达,并与肺癌TNM分期、淋巴结转移有关,SHIP2高表达、PLEK2高表达的肺癌患者预后较差,二者有望作为评价肺癌患者预后的生物标志物。 展开更多

关键词 含sh2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2 Pleckstrin2 肺癌 预后

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四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化肝组织中SHP2表达与在体肝星状细胞活化及增殖的关系

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作者 张朋垒 张明婷 +5 位作者 郝礼森 靳丽敏 潘恩亮 何宇 苗笑佳 王薇 《肝脏》 2023年第5期549-553,共5页

目的探讨四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化肝组织及在体肝星状细胞(HSC)的含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)表达变化与在体HSC活化及增殖的关系。方法随机将50只健康雄性SD大鼠分为对照组(10只)、模型组(40只),采用腹腔注射四氯化碳法... 目的探讨四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化肝组织及在体肝星状细胞(HSC)的含SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)表达变化与在体HSC活化及增殖的关系。方法随机将50只健康雄性SD大鼠分为对照组(10只)、模型组(40只),采用腹腔注射四氯化碳法构建大鼠肝纤维化模型,Masson三色及HE染色检测大鼠肝组织的病理组织学变化,免疫组织化学染色检测大鼠肝组织的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及SHP2表达,SHP2与α-SMA免疫荧光双标记检测大鼠肝组织中活化HSC的SHP2表达。结果与对照组大鼠肝组织的α-SMA阳性表达积分光密度值(IOD)(0.09±0.01)相比,造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织的α-SMA阳性表达IOD(0.13±0.01、0.18±0.01、0.24±0.02、0.28±0.02)显著增加(P<0.05),并随着造模时间延长逐渐升高(P<0.05),即在体HSC的活化及增殖逐渐加快(α-SMA是HSC的活化标志)。造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织的SHP2阳性表达IOD(0.23±0.01、0.27±0.01、0.30±0.01、0.33±0.01)较对照组(0.19±0.01)显著增加(P<0.05),且逐渐升高(P<0.05)。SHP2与α-SMA免疫荧光双标记检测显示,造模不同时间(2周、4周、6周、8周)大鼠纤维化肝组织中表达SHP2的活化HSC占总的活化HSC的百分比(54%±3%、62%±2%、73%±4%、86%±3%)逐渐升高(P<0.05)。结论在四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化模型中,肝组织及在体HSC的SHP2表达与在体HSC的活化及增殖呈显著正相关。 展开更多

关键词 肝纤维化 肝星状细胞 含sh2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶2 细胞增殖

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重组腺病毒表达的融合蛋白SH2-caspase 8对K562细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 王林 李会 +4 位作者 刘章玲 祖白玲 黄峥兰 向华 冯文莉 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期612-616,共5页

目的研究表达融合蛋白SH2-caspase 8的重组腺病毒AdE-SH2-caspase 8-HA-GFP(SC)对BCR/ABL阳性的慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡的影响。方法将重组的腺病毒SC转染K562细胞(SC组),分别设突变AdE-SH2m-caspase 8-HA-GFP(SmC)组、病毒空载体... 目的研究表达融合蛋白SH2-caspase 8的重组腺病毒AdE-SH2-caspase 8-HA-GFP(SC)对BCR/ABL阳性的慢性粒细胞白血病K562细胞凋亡的影响。方法将重组的腺病毒SC转染K562细胞(SC组),分别设突变AdE-SH2m-caspase 8-HA-GFP(SmC)组、病毒空载体AdEGFP(CMV)组和PBS对照组。用荧光显微镜和流式细胞仪(FCM)检测病毒转染效率,western blot检测融合蛋白及凋亡相关蛋白caspase 3、多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)的表达情况,用光学显微镜观察经瑞氏染色后的细胞形态,FCM和DNA梯度电泳检测细胞凋亡情况。结果 FCM和荧光显微镜检查结果显示,重组腺病毒在K562细胞中的转染效率较高;融合蛋白SH2-caspase 8-HA和SH2m-caspase 8-HA可在K562细胞中表达;瑞氏染色后SC组出现明显的凋亡形态改变;FCM检测结果表明,SC组与SmC组、CMV组和PBS组相比较,其早期凋亡细胞明显增高(t分别为6.945、19.083和16.470,P均<0.05),DNA梯度电泳检测结果发现SC组和SmC组可出现细胞凋亡特异性的梯度条带,western blot结果表明,SC组和SmC组凋亡相关蛋白caspase 3、PARP活化片段的表达水平升高。结论重组腺病毒SC表达的SH2-caspase 8融合蛋白能明显诱导K562细胞的凋亡。 展开更多

关键词 细胞凋亡 sh2结构域 半胱天冬酶8（caspase 8） 融合蛋白 K562细胞

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快速构建蛋白质结构域克隆库的方法 被引量：1

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作者 马素参 黄海明 +3 位作者 彭隽敏 俞强 任瑞宝 高友鹤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期537-541,共5页

对蛋白质组学的研究有许多不同的切入方法 .从研究的生物学意义和可行性考虑 ,提出从蛋白结构域入手进行蛋白质组学研究 .SH2 (Srchomology 2 )结构域是细胞信号转导中重要的元件之一 ,人SH2结构域共有约 12 0种 ,对其进行研究将深刻揭... 对蛋白质组学的研究有许多不同的切入方法 .从研究的生物学意义和可行性考虑 ,提出从蛋白结构域入手进行蛋白质组学研究 .SH2 (Srchomology 2 )结构域是细胞信号转导中重要的元件之一 ,人SH2结构域共有约 12 0种 ,对其进行研究将深刻揭示细胞信号转导的规律 .为了得到人所有的SH2结构域序列及克隆 ,首先在公共数据库里检索出了人所有的SH2结构域序列 ,利用国际上现有的共享资源IMAGE(IntegratedMolecularAnalysisofGenomesandTheirExpression)克隆为PCR模板 ,解决了从cDNA文库中难以克隆低丰度结构域的问题 .利用有方向性的TOPO克隆技术提高克隆效率 ,从而快速高效地构建了包括 6 0个SH2结构域的克隆库 .克隆库可以方便地转换到GATEWAY系统具有各种用途的载体上 。 展开更多

关键词 蛋白质结构域 克隆库 结构域蛋白质组学 sh2结构域 细胞信号转导

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SHIP2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义 被引量：2

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作者 周小娟 张俊杰 +1 位作者 谭国林 刘勇 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2011年第5期321-326,共6页

目的探讨含SH2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2(SH2 domain containing 5’-inosi-tol phosphatase-2,SHIP 2)蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组织化学技术检测SHIP2蛋白在54例喉鳞癌组... 目的探讨含SH2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2(SH2 domain containing 5’-inosi-tol phosphatase-2,SHIP 2)蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组织化学技术检测SHIP2蛋白在54例喉鳞癌组织及16例喉癌旁黏膜组织中的表达。结果 SHIP2蛋白在喉鳞癌组织中表达显著升高,其表达与喉鳞癌T分期、临床分期、转移及复发密切相关(P<0.05);生存分析表明SHIP2高表达组与低表达组患者5年无瘤生存率分别为19.2%和64.3%,5年总生存率分别为26.9%和85.7%,两组差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素分析示SHIP2表达水平为喉鳞癌预后的独立影响因素。结论 SHIP 2蛋白可能在喉鳞癌的发生、发展中发挥了重要作用,且具有预后评估价值。 展开更多

关键词 喉肿瘤 癌 含sh2结构域的Ⅱ型肌醇5’-磷酸酶2 转移 免疫组化

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SHP-2的生物学作用及与血液肿瘤细胞关系的研究进展 被引量：1

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作者 白炎亮 孙慧 《肿瘤基础与临床》 2007年第4期359-361,共3页

关键词 shP-2 sh2结构域 信号转导 血液病

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miR-484通过SORBS2/MEK-ERK通路调控乳腺癌细胞增殖、转移和自噬

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作者 潘鑫 刘析璘 郭敏 《生命科学研究》 CAS 2024年第2期103-112,127,共11页

为了分析miR-484在乳腺癌组织和细胞中的表达情况,研究miR-484在乳腺癌细胞增殖、转移和自噬过程中的作用机制,首先,采用GEO数据库分析乳腺癌组织中差异表达miRNA谱,并用实时荧光定量PCR在临床乳腺癌组织及其配对的癌旁组织中检测miR-48... 为了分析miR-484在乳腺癌组织和细胞中的表达情况,研究miR-484在乳腺癌细胞增殖、转移和自噬过程中的作用机制,首先,采用GEO数据库分析乳腺癌组织中差异表达miRNA谱,并用实时荧光定量PCR在临床乳腺癌组织及其配对的癌旁组织中检测miR-484的表达情况;其次,利用miR-484模拟物、抑制剂检测miR-484对MCF-7乳腺癌细胞增殖、转移和自噬能力的影响;再次,预测miR-484的调控基因并进行验证,同时构建Sorbin和SH3结构域包含蛋白2(Sorbin and SH3 domain-containing protein 2,SORBS2)过表达载体,检测SORBS2对乳腺癌细胞增殖、转移和自噬能力的影响;最后,用Western-blot分析miR-484调控下MCF-7细胞中丝裂原活化的胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase,MEK)/p-MEK和胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/p-ERK的蛋白质含量变化。结果显示,miR-484在乳腺癌组织及细胞中高表达,具有提高乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力以及降低乳腺癌细胞自噬能力的作用;而且,miR-484可通过下调SORBS2并激活MEK/ERK通路参与乳腺癌的发生发展。 展开更多

关键词 乳腺癌 miR-484 Sorbin和sh3结构域包含蛋白2(SORBS2) 转移 自噬

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血清miR-138-5p,SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度的相关性研究

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作者 高阿芳 郑梅 胡钦 《中国循证心血管医学杂志》 2024年第7期818-821,共4页

目的探讨血清微小RNA-138-5p(miR-138-5p)、Sorbin和SH3结构域连接蛋白2(SORBS2)水平与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者斑块稳定性及病变程度的相关性。方法取2022年7月至2024年1月于石家庄市人民医院收治的131例老年冠心病患... 目的探讨血清微小RNA-138-5p(miR-138-5p)、Sorbin和SH3结构域连接蛋白2(SORBS2)水平与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者斑块稳定性及病变程度的相关性。方法取2022年7月至2024年1月于石家庄市人民医院收治的131例老年冠心病患者,根据超声结果确定血管腔内的斑块情况分为稳定组52例和不稳定组79例;根据冠状动脉造影结果进行Gensini评分,结合病变范围分为单支病变组42例,双支病变组46例和三支病变组43例。另外选取同期在本院进行体检的49例健康者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)对两组血清miR-138-5p和SORBS2水平检测,采用Pearson法和Spearman法分析血清miR-138-5p和SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度相关性。结果不稳定组血清miR-138-5p低于稳定组、对照组,且稳定组低于对照组。不稳定组血清SORBS2高于稳定组和对照组,且稳定组高于对照组(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,老年冠心病患者血清miR-138-5p水平与SORBS2水平呈负相关(P<0.05)。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血清miR-138-5p水平是老年冠心病患者不稳定斑块形成的保护因素,三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清SORBS2水平是老年冠心病患者不稳定斑块形成的危险因素(P<0.05)。与单支病变组相比,双支病变组、三支病变组患者血清miR-138-5p水平降低,其中三支病变组降低更显著(P<0.05),血清SORBS2水平、Gensini评分升高,其中三支病变组升高更多(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,老年冠心病患者血清miR-138-5p水平与Gensini评分呈负相关,血清SORBS2水平与Gensini评分呈正相关。结论血清miR-138-5p和SORBS2水平与老年冠心病患者斑块稳定性及病变程度密切相关。 展开更多

关键词 冠状动脉粥样硬化性心脏病 微小RNA-138-5p Sorbin和sh3结构域连接蛋白2

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