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白藜芦醇通过下调PRMT5表达抑制肝胆管癌SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和细胞周期
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作者 沈兴艳 孙象军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期219-223,共5页
目的:探究白藜芦醇(Res)通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法:常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞... 目的:探究白藜芦醇(Res)通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法:常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞术和WB法分别检测Res处理后PRMT5 mRNA在LO2和SMMC-7721细胞中的表达,Res对SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡,以及PRMT5、cyclin D1和cyclin E1蛋白表达的影响。结果:PRMT5在SMMC-7721细胞中呈高表达(P<0.01);20、40、80μmol/L Res均能明显抑制PRMT5 mRNA和蛋白在SMMC-7721细胞中的表达(均P<0.01),抑制SMMC-7721细胞的增殖能力(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05),阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期并促进其凋亡(P<0.01),明显抑制SMMC-7721细胞中周期蛋白cyclin D1、cyclin E1蛋白的表达(P<0.01)。结论:PRMT5在SMMC7721细胞中呈高表达,Res可有效抑制SMMC-7721细胞的增殖和侵袭能力并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PRMT5表达相关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 肝胆管癌 smmc-7721细胞 蛋白质精氨酸甲基转移酶5 增殖 侵袭 细胞周期 凋亡
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圣草次苷抑制肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖和迁移:基于激活ROS/MAPKs信号轴
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作者 周慧 张雨晴 +3 位作者 甘超 范喜瑞 戚之琳 齐世美 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期412-419,共8页
目的探讨圣草次苷通过ROS/MAPKs信号轴调控肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的作用机制。方法分别用0、25、50、100、150、200、250、300μg/mL圣草次苷处理肝癌SMMC-7721细胞系24 h后,CCK-8法检测细胞活性;不同浓度的圣草次苷(100、200、30... 目的探讨圣草次苷通过ROS/MAPKs信号轴调控肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的作用机制。方法分别用0、25、50、100、150、200、250、300μg/mL圣草次苷处理肝癌SMMC-7721细胞系24 h后,CCK-8法检测细胞活性;不同浓度的圣草次苷(100、200、300μg/mL)处理细胞后,运用划痕实验分别在24、48、72 h检测划痕愈合率,Transwell实验检测细胞迁移率,克隆形成实验检测细胞增殖能力,DAPI染色观察细胞核形态变化,Western blot检测侵袭蛋白E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9、凋亡因子PARP和Pro-caspase 3以及MAPKs通路p-JNK、p-P38、p-ERK信号分子;用(分别为2、5、10μmol/L)ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SB203580和P38抑制剂SP600125预先处理细胞2 h,再用200μg/mL圣草次苷处理细胞24 h,Western blot检测凋亡蛋白PARP的切割情况;分别用N-乙酰-半胱氨酸(NAC)(30μmol/L)或圣草次苷(100、200、300μg/mL)单独或共处理细胞后,通过DCFH-DA荧光探针法分别在15、30、60 min检测内源性活性氧(ROS)水平。结果圣草次苷在50μg/mL范围内,对细胞活力基本无影响(P>0.05);圣草次苷能够显著抑制SMMC-7721细胞的划痕愈合(P<0.01),细胞迁移(P<0.01)和克隆形成(P<0.01),在300μg/mL浓度时作用最显著;圣草次苷明显减少侵袭蛋白N-cadherin、MMP-2、MMP-9的蛋白表达量(P<0.01),上调E-cadherin的蛋白表达量(P<0.05);圣草次苷诱导SMMC-7721细胞发生显著的凋亡形态学变化,Pro-caspase 3表达降低,PARP切割增多(P<0.01);圣草次苷在300μg/mL刺激30 min时ROS表达水平较高,NAC(30μmol/L)处理后,细胞内ROS表达水平下降明显;圣草次苷能够显著诱导MAPKs信号途径JNK、P38和ERK的磷酸化(P<0.01),U0126和SB203580能够增强圣草次苷诱导的PAPR切割,而SP600125逆转圣草次苷诱导的PARP切割。结论圣草次苷通过促进细胞内ROS的合成,诱导MAPKs信号通路的活化,调控肝癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移和凋亡。 展开更多
关键词 圣草次苷 smmc-7721 ROS MAPKS
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miR-3682-3p通过调控PI3K/AKT信号通路影响SMMC-7721人肝癌细胞的增殖、侵袭和凋亡 被引量:2
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作者 利民 韩思源 +5 位作者 李苏明 郑超 舒苗江 龚祖元 张涛 杨森 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第2期135-140,共6页
目的分析miR-3682-3p与PI3K/AKT信号通路在肝细胞癌发展中的关系,以期为肝细胞癌的治疗提供新的思路。方法通过qRT-PCR分析MIHA人正常肝细胞和SMMC-7721人肝癌细胞中miR-3682-3p与PI3K/AKT的表达水平。通过转染不同质粒将SMMC-7721人肝... 目的分析miR-3682-3p与PI3K/AKT信号通路在肝细胞癌发展中的关系,以期为肝细胞癌的治疗提供新的思路。方法通过qRT-PCR分析MIHA人正常肝细胞和SMMC-7721人肝癌细胞中miR-3682-3p与PI3K/AKT的表达水平。通过转染不同质粒将SMMC-7721人肝癌细胞分为miR-3682-3p mimic组、miR-3682-3p mimic NC组、miR-3682-3p inhibitor组和miR-3682-3p inhibitor NC组,采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-3682-3p与PI3K的相互作用关系。采用蛋白免疫印迹、qRT-PCR、流式细胞术、细胞划痕和Transwell实验分析不同实验组细胞的增殖、侵袭和凋亡情况。结果miR-3682-3p能够靶向调控PI3K/AKT信号通路,miR-3682-3p表达能够激活PI3K/AKT信号通路,肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强,凋亡减少。而抑制miR-3682-3p表达后,PI3K/AKT通路受到抑制,肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱,凋亡增加。结论PI3K是miR-3682-3p的直接靶点,miR-3682-3p通过激活PI3K/AKT通路促进SMMC-7721人肝癌细胞的体外转移活性。 展开更多
关键词 miR-3682-3p PI3K/AKT smmc-7721 肝癌
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红藤脂酸钠对人肝癌细胞系SMMC-7721体外抑瘤作用的实验研究 被引量:2
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作者 刘涛 王执民 韦建学 《介入放射学杂志》 CSCD 2005年第4期401-403,共3页
目的研究中药制剂红藤脂酸钠在体外对人肝癌细胞系SMMC-7721的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法MTT法测定SMMC-7721细胞生长的抑制百分率,并运用AnnexinV法和TUNEL法检测凋亡发生率。结果MTT法测得对照组与红藤脂酸钠处理组吸光... 目的研究中药制剂红藤脂酸钠在体外对人肝癌细胞系SMMC-7721的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法MTT法测定SMMC-7721细胞生长的抑制百分率,并运用AnnexinV法和TUNEL法检测凋亡发生率。结果MTT法测得对照组与红藤脂酸钠处理组吸光值(A值)分别为:对照组(0.385±0.03),红藤脂酸钠处理组中的250μg/ml组(0.31±0.019)、500μg/ml组(0.199±0.022)、1mg/ml组(0.15±0.033)和2mg/ml组(0.048±0.026);各组间比较有显著性差异(P<0.01)。AnnexinV法测定红藤脂酸钠(1mg/ml作用1h)处理后细胞凋亡90%,对照组细胞凋亡17.36%。TUNEL法测定红藤脂酸钠(1mg/ml作用1h)处理后细胞凋亡(60.3±6.0)%,与对照组细胞凋亡(6.6±3.5)%相比,差异有显著性(P<0.01)。结论红藤脂酸钠在体外对7721细胞生长有明显的抑制作用,其作用机制可能主要是诱导肿瘤细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 红藤脂酸钠 人肝癌细胞系smmc-7721 细胞凋亡 smmc-7721 体外抑瘤作用 人肝癌细胞系 酸钠 红藤 实验研究 ANNEXIN
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同源小鼠SMMC/B与SMMC/C珠蛋白β肽链胰酶肽段变化的比较
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作者 宋树奎 胡开元 朱善宏 《实验动物科学》 1991年第4期10-13,共4页
目前生物医学应用的纯化小鼠,多采用近亲交配纯化法。其新的生物学性状的获得是由于在近交繁殖过程中获得了新的基因型。因此了解这种小鼠的遗传关系、基因纯度和基因变异,对于小鼠的培育和使用都具有十分重要的意义。本文拟对本校培育... 目前生物医学应用的纯化小鼠,多采用近亲交配纯化法。其新的生物学性状的获得是由于在近交繁殖过程中获得了新的基因型。因此了解这种小鼠的遗传关系、基因纯度和基因变异,对于小鼠的培育和使用都具有十分重要的意义。本文拟对本校培育的两株同源近交小鼠Hbb基因的遗传特性和相互关系的研究结果加以讨论。 展开更多
关键词 近交繁殖 遗传特性 珠蛋白 近亲交配 遗传关系 凝胶过滤层析 smmc/B smmc/C 生物医学应用 纯化法
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胂酸基乙酸与10-羟基喜树碱对肝癌细胞SMMC-7721生长的协同抑制作用
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作者 罗波 郑小莉 +1 位作者 王琼 李洪 《泸州医学院学报》 2005年第2期123-125,共3页
目的:了解胂酸基乙酸(ASAC)与10 -羟基喜树碱(10 -HCPT)对肝癌细胞SMMC - 772 1细胞生长的协同抑制效果。方法:两药组合和单药以不同浓度分别作用于生长良好的SMMC - 772 1细胞,分别在第2 4h、4 8h和72h终止作用,以MTT实验测定每组药物... 目的:了解胂酸基乙酸(ASAC)与10 -羟基喜树碱(10 -HCPT)对肝癌细胞SMMC - 772 1细胞生长的协同抑制效果。方法:两药组合和单药以不同浓度分别作用于生长良好的SMMC - 772 1细胞,分别在第2 4h、4 8h和72h终止作用,以MTT实验测定每组药物对SMMC - 772 1细胞的抑制率大小。结果:协同作用组比单药组的抑制效果好。在第4 8h和72h协同组有显著性差异(P <0 .0 5 )。结论:ASAC与10 -HCPT这两种促癌细胞凋亡的药物对SMMC - 772 1细胞生长具有周期协同抑制作用。 展开更多
关键词 肝癌细胞smmc-7721 10-羟基喜树碱 协同抑制作用 胂酸基乙酸 smmc-7721细胞 抑制效果 细胞生长 MTT实验 显著性差异 癌细胞凋亡 不同浓度 协同作用 HCPT 72h 24h 抑制率 药物
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蟾蜍灵对肝癌细胞SMMC 7721的细胞毒作用及生长相关基因表达的影响 被引量:42
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作者 陈小义 呼文亮 +2 位作者 徐瑞成 陈莉 钱进 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期293-296,共4页
为探讨蟾蜍灵的抗癌作用机理 ,以肝癌SMMC772 1细胞为靶细胞 ,应用噻唑蓝还原法检测细胞毒作用 ,双荧光染色法和DNA电泳技术检测细胞凋亡与坏死 ;免疫组织化学方法检测细胞生长相关基因p2 1waf1/cip1和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达 .... 为探讨蟾蜍灵的抗癌作用机理 ,以肝癌SMMC772 1细胞为靶细胞 ,应用噻唑蓝还原法检测细胞毒作用 ,双荧光染色法和DNA电泳技术检测细胞凋亡与坏死 ;免疫组织化学方法检测细胞生长相关基因p2 1waf1/cip1和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达 .结果表明 ,0 .0 1μmol·L- 1及以上浓度蟾蜍灵对SMMC772 1细胞具有显著细胞毒作用 ,形态学和DNA片段化检测证实蟾蜍灵诱导的细胞死亡以凋亡为主 ;p2 1waf1/cip1在蟾蜍灵诱导下表达上调 ,同时PCNA的表达下降 ,两者呈负相关 (P <0 .0 1) .提示蟾蜍灵通过上调p2 1waf1/cip1表达 ,下调PCNA表达 。 展开更多
关键词 蟾蜍灵 细胞毒性 肝癌 增殖细胞核抗原 基因表达 细胞系 smmc7721细胞 细胞凋亡
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三种蟾毒单体对SMMC-7721和BEL-7402人肝癌细胞生长的抑制作用 被引量:57
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作者 苏永华 尹西才 +2 位作者 谢觉民 高波 凌昌全 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期393-395,共3页
目的:探讨蟾蜍中主要蟾毒内酯类成分蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基的抗肝癌作用及机制。方法:以SMMC-7721、BEL-7402人肝癌细胞为靶细胞,以丝裂霉素为阳性对照药物,应用四甲基偶氮唑盐比色法、锥虫蓝染色和DNA染色分析法观察这3种蟾... 目的:探讨蟾蜍中主要蟾毒内酯类成分蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基的抗肝癌作用及机制。方法:以SMMC-7721、BEL-7402人肝癌细胞为靶细胞,以丝裂霉素为阳性对照药物,应用四甲基偶氮唑盐比色法、锥虫蓝染色和DNA染色分析法观察这3种蟾毒单体对肝癌细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。结果:蟾毒灵和华蟾酥毒基对上述肝癌细胞具有明显生长抑制作用,华蟾酥毒基较蟾毒灵作用略弱,但两者达到相同生长抑制效果所需浓度均低于丝裂霉素,酯蟾毒配基只有在较高浓度下才显示对肝癌细胞的生长抑制作用;不同浓度蟾毒灵、华蟾酥毒基对人肝癌细胞细胞膜具有破坏作用;可使人肝癌细胞阻止于G2/M期,使处于S期的细胞比例降低,并有明显诱导肝癌细胞凋亡作用。结论:蟾毒灵、华蟾酥毒基对上述人肝癌细胞具有明显生长抑制作用,具有对肝癌细胞膜的直接破坏作用和诱导凋亡作用;酯蟾毒配基抗肿瘤作用较弱。 展开更多
关键词 蟾毒单体 smmc—7721 BEL—7402 肝癌 细胞生长 抑制作用
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莪术挥发油抑制人肝癌细胞株SMMC-7721生长的实验研究 被引量:37
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作者 王娟 王顺启 +2 位作者 倪虹 陈力 宋文芹 《天津中医药》 CAS 2003年第1期48-51,共4页
[目的]探讨莪术挥发油对肝癌细胞生长抑制的作用机制。[方法]用荧光显微镜观察药物作用前后细胞形态学的变化 ,采用噻唑氮蓝 (MTT)法检测莪术油对细胞生长的抑制作用 ,并用流式细胞仪检测细胞周期的阻滞及凋亡率。[结果]MTT结果表明莪... [目的]探讨莪术挥发油对肝癌细胞生长抑制的作用机制。[方法]用荧光显微镜观察药物作用前后细胞形态学的变化 ,采用噻唑氮蓝 (MTT)法检测莪术油对细胞生长的抑制作用 ,并用流式细胞仪检测细胞周期的阻滞及凋亡率。[结果]MTT结果表明莪术油浓度与细胞生长抑制率成正比。荧光显微镜观察结果显示 ,1.0mg/mL的莪术挥发油作用24h后可有效诱导肝癌细胞凋亡 ,细胞形态产生明显的凋亡特征 ,细胞核凹陷或固缩成均一的致密物。流式细胞仪检测结果表明 ,莪术油作用后细胞凋亡率可达28.15 % ,细胞周期被阻滞在S期。[结论]莪术挥发油可抑制肝癌细胞SMMC_7721的生长 ,诱导凋亡及阻滞细胞周期是其抑制生长的重要机制。 展开更多
关键词 莪术挥发油 肝癌细胞 噻唑氮蓝 细胞生长 流式细胞仪 抑制 细胞形态学 smmc—7721
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九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用 被引量:15
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作者 陶小军 王佩贤 +3 位作者 杨孝江 姚鸿萍 刘静 曹永孝 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期574-577,共4页
目的:研究九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用。方法:C57BL/6小鼠足跖接种稀释3倍的Lewis肺癌细胞悬液20μl制备肺转移模型,灌胃给药14d后,截下荷瘤足,计算原位抑癌率,继续给药至25d,计算肺转移集落数和转移抑制... 目的:研究九节龙皂苷I对小鼠Lewis肺癌和裸鼠肝癌SMMC-7721的抑制作用。方法:C57BL/6小鼠足跖接种稀释3倍的Lewis肺癌细胞悬液20μl制备肺转移模型,灌胃给药14d后,截下荷瘤足,计算原位抑癌率,继续给药至25d,计算肺转移集落数和转移抑制率;BALB/c/nu裸鼠背部皮下接种肝癌SMMC-7721细胞5×106个/ml复制人肝癌实体瘤模型,连续给药16d,动态测量肿瘤体积、体重,画肿瘤生长曲线,实验结束后,剥离瘤块,计算抑瘤率。结果:九节龙皂苷I25mg/kg^100mg/kg对小鼠Lewis肺癌原位癌抑制率和肺转移均分别在40.5%~54.0%和45.4%~69.1%之间,对裸鼠肝癌SMMC-7721实体瘤的抑制率在45.6%~56.3%之间。结论:九节龙皂苷I对Lewis肺癌转移瘤和裸鼠肝癌SMMC-7721均有抑制作用。 展开更多
关键词 Lewis肺癌 抑制作用 九节龙 裸鼠 肝癌smmc-7721细胞 皂苷 C57BL/6小鼠 BALB/c 抑制率 转移模型 细胞悬液 灌胃给药 皮下接种 连续给药 肿瘤体积 动态测量 生长曲线 肺转移 实体瘤 抑癌率 人肝癌 抑瘤率 原位癌 转移瘤
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β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡 被引量:72
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作者 李庆勇 姜春菲 +2 位作者 张黎 邱伟 孟祥东 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1173-1175,共3页
目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒... 目的研究β-谷甾醇、豆甾醇诱导人肝癌细胞SMMC-7721的凋亡作用。方法 MTT法观察β-谷甾醇、豆甾醇对细胞增殖的抑制作用;激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率、细胞内活性氧ROS、钙离子Ca2+含量、线粒体膜电位ΔΨm变化。结果β-谷甾醇、豆甾醇均明显抑制SMMC-7721细胞增殖,使细胞形态发生典型凋亡变化,凋亡率和细胞内Ca2+、ROS的含量均显著增加,线粒体膜电位降低。β-谷甾醇使细胞周期阻滞在G2/M期,而豆甾醇则同时阻滞在S期和G2/M期。结论β-谷甾醇、豆甾醇具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 豆甾醇 凋亡 人肝癌细胞smmc-7721
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基因HC56对人肝癌细胞(SMMC7721)基因表达水平的影响 被引量:8
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作者 万大方 蒋惠秋 +3 位作者 任功一 魏 霖 覃文新 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期438-440,共3页
目的 观测新发现的HC56基因对培养的人肝癌细胞SMMC-7721基因表达的影响。方法 用含HC56 cDNA的重组表达载体转染 SMMC-7721细胞后,由细胞总RNA反转录为cDNAs,与Atlas人类cDNA表达方阵膜片杂交,通过molecular image system分析软件对暴... 目的 观测新发现的HC56基因对培养的人肝癌细胞SMMC-7721基因表达的影响。方法 用含HC56 cDNA的重组表达载体转染 SMMC-7721细胞后,由细胞总RNA反转录为cDNAs,与Atlas人类cDNA表达方阵膜片杂交,通过molecular image system分析软件对暴光强度进行密度扫描定量(以看家基因β-actin对照校正)。结果HC56转染的肝癌7721细胞有3个基因(C-myc,CAMP dependent proteinkinasetypel beta regulatory subunit β,thymosin β-10)表达上调,3个基因(Glutathione perotidase,fos-related antigen-2,zinc fingerprotein l)表达下调。结论HC56基因转染对体外培养的肝癌细胞的基因表达有不同的影响。本文为进一步研究HC56基因的功能提供了线索。 展开更多
关键词 肝癌 HC56基因 基因表达差异 实验研究 smmc7721
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卟啉氮芥对人肝癌细胞SMMC7721的光动力杀伤作用 被引量:12
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作者 陈志龙 张黎明 +1 位作者 孙结 樊军文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期271-273,共3页
目的 :研究新单体化合物卟啉氮芥的光化疗抗肿瘤作用。 方法 :用结晶紫染色法测定卟啉氮芥对人肝癌细胞SMMC772 1的光动力抑制效应 ,用测定培养上清乳酸脱氢酶 (L DH )活性方法研究光动力作用对人肝癌细胞 SMMC772 1细胞膜的作用 ,用 3H... 目的 :研究新单体化合物卟啉氮芥的光化疗抗肿瘤作用。 方法 :用结晶紫染色法测定卟啉氮芥对人肝癌细胞SMMC772 1的光动力抑制效应 ,用测定培养上清乳酸脱氢酶 (L DH )活性方法研究光动力作用对人肝癌细胞 SMMC772 1细胞膜的作用 ,用 3H - Td R掺入法研究光动力作用对人肝癌细胞 SMMC772 1DNA合成的影响。 结果 :卟啉氮芥 (5μg/ml,培养 1h)可使人肝癌细胞 SMMC772 1D值明显降低、经光激发可使培养上清 L DH活性显著升高 ;可使体外培养人肝癌细胞SMMC772 1的 3H- Td R掺入量显著下降、经光激发可使体外培养人肝癌细胞 SMMC772 1的 3H- Td R掺入量进一步显著下降。结论 :卟啉氮芥可显著抑制人肝癌细胞 SMMC772 1DNA的合成 ;对人肝癌细胞 SMMC772 1有显著的光动力抑制作用 ,可破坏肿瘤细胞的细胞膜 ,抑制肿瘤细胞 DNA的合成。提示卟啉氮芥对肿瘤细胞有显著的光动力杀伤作用 ,具有发展为光化疗抗癌新药的前景。 展开更多
关键词 卟啉类 肝癌细胞 光化学疗法 卟啉氮芥 smmc7721 结晶紫染色法
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刺梨三萜对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响 被引量:28
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作者 黄姣娥 江晋渝 +1 位作者 罗勇 戴支凯 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第13期275-279,共5页
目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(a... 目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)含量的测定分析RRTT对SMMC-7721分化的影响;采用AO/EB染色法和FCM检测RRTT对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响;RT-PCR检测Bad mRNA的表达。结果:RRTT对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。与阴性对照组比,随RRTT剂量的增加,NBT阳性细胞比率增加,AFP含量逐渐降低。RRTT对SMMC-7721细胞凋亡和增殖周期均无明显影响。RRTT作用后,Bad mRNA的表达下调。结论:RRTT具有体外抗SMMC-7721作用,其机制可能通过下调Bad mRNA的表达而诱导细胞分化,而与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡无关。 展开更多
关键词 刺梨 三萜化合物 人肝癌smmc-7721细胞 细胞增殖 细胞分化 细胞凋亡
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实时定量PCR检测氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721中CHOP和GRP78 mRNA表达的影响 被引量:3
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作者 刘颖 孙世龙 +7 位作者 刘晓梅 杜海英 李鹏 杜忠君 孙磊 李阳 徐艳玲 孙志伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期847-850,共4页
目的:观察氯化镉(CdCl2)处理人肝癌SMMC-7721细胞系中CHOP和GRP78mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨氯化镉对肝癌细胞内质网应激的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721细胞为研究模型,细胞暴露于氯化镉浓度为0、5、10、20、30及40μmol... 目的:观察氯化镉(CdCl2)处理人肝癌SMMC-7721细胞系中CHOP和GRP78mRNA表达的改变,在mRNA水平探讨氯化镉对肝癌细胞内质网应激的影响。方法:以人肝癌细胞株SMMC-7721细胞为研究模型,细胞暴露于氯化镉浓度为0、5、10、20、30及40μmol·L-1的培养液中24h,0μmol·L-1组为对照组。采用SYBR荧光实时定量PCR法检测CHOP和GRP78mRNA表达,相对定量采用比较CT值法。结果:随着氯化镉剂量的增加,CHOPmRNA表达水平有逐渐增多的趋势,各组mRNA表达均高于对照组,其中10、20和40μmol·L-1组与对照组比较差异有显著性(P<0.05);GRP78mRNA表达有逐渐增多的趋势,各组mRNA表达均高于对照组,其中5、20和40μmol·L-1组与对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:氯化镉可诱导人肝癌SMMC-7721细胞中CHOP和GRP78mRNA表达增多。 展开更多
关键词 氯化镉 smmc 7721 CHOP 葡萄糖调节蛋白78
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半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响 被引量:12
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作者 韦鹏涯 浦洪琴 +2 位作者 韦星 宾晓芸 李朝敢 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期3020-3022,共3页
目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg.L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg.L-1顺铂(DDP)作... 目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg.L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg.L-1顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P(0.001),细胞凋亡率明显上升(P(0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.01或P<0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。 展开更多
关键词 半枝莲 smmc-7721细胞 细胞凋亡 Bcl-2 Survivin Caspase-3
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Survivin反义核酸对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响 被引量:8
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作者 潘克俭 刘小菁 +2 位作者 杨春蕾 王玉明 王西岩 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期625-629,共5页
Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反... Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反义寡核苷酸可明显降低细胞中surv iv in基因的mRNA含量;W estern印迹显示Surv iv in蛋白水平也被降低。M TT比色实验法检测结果说明人Surv iv in反义寡核苷酸抑制SMM C-7721细胞增殖,抑制率为43%,远高于无义寡核苷酸组和空白对照组。反义寡核苷酸还显著增强SMM C-7721细胞对于抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性,TUNEL法检测结果显示,在较低高三尖杉酯碱浓度下,反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组。本研究结果提示,surv iv in表达的靶向抑制有望应用于肿瘤的辅助治疗之中。 展开更多
关键词 存活素 反义寡核苷酸 smmc-7721细胞 增殖 凋亡
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乳香挥发油抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用 被引量:21
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作者 肖娟 刘选明 +3 位作者 颜冬兰 刘让茹 章为 谭桂山 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 2007年第1期68-72,共5页
目的探讨乳香挥发油体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察乳香挥发油对SMMC-7721的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察SMMC-7721的形态学变化;使用琼脂糖凝胶电泳法检测乳香挥发油对细... 目的探讨乳香挥发油体外抑制人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察乳香挥发油对SMMC-7721的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察SMMC-7721的形态学变化;使用琼脂糖凝胶电泳法检测乳香挥发油对细胞DNA降解的影响;利用流式细胞术分析乳香挥发油诱导SMMC-7721凋亡的凋亡率及对细胞周期的影响;应用间接免疫荧光法观察凋亡调控基因bax和bcl-2蛋白的表达变化。结果乳香挥发油浓度为0.7、0.07、0.007、0.0007、0.00007mg.mL-1作用24h时,能抑制SMMC-7721的生长,并呈浓度依赖性。在浓度为0.07mg.mL-1时,作用48h或72h,电泳结果显示了DNA梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡峰,且细胞被阻滞于G1期。间接免疫荧光法的结果表明,促凋亡蛋白bax的表达增强,抗凋亡蛋白bcl-2的表达无明显变化。结论乳香挥发油能抑制肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并可能通过上调线粒体内bax/bcl-2的表达比例诱导SMMC-7721细胞的凋亡,而且其诱导的凋亡具有细胞周期依赖性。 展开更多
关键词 乳香挥发油 肝癌细胞株smmc-7721 细胞凋亡
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染料木黄酮通过抑制EGFR/ERK通路抗肝癌SMMC7721细胞增殖 被引量:10
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作者 戴红良 贾桂枝 +2 位作者 赵艳 王晶 梁春光 《辽宁医学院学报》 CAS 2015年第1期1-3,21,I0001,共5页
目的探讨染料木黄酮对肝癌细胞SMMC7721增殖的抑制作用及其作用机制。方法以染料木黄酮干预肝癌细胞SMMC7721。MTT法及集落形成实验检测细胞增殖;蛋白质免疫印迹检测染料木黄酮对ERK及EGFR活化的影响;免疫共沉淀法检测染料木黄酮对SMMC7... 目的探讨染料木黄酮对肝癌细胞SMMC7721增殖的抑制作用及其作用机制。方法以染料木黄酮干预肝癌细胞SMMC7721。MTT法及集落形成实验检测细胞增殖;蛋白质免疫印迹检测染料木黄酮对ERK及EGFR活化的影响;免疫共沉淀法检测染料木黄酮对SMMC7721细胞ERK及EGFR间相互作用的影响。结果染料木黄酮能显著抑制肝癌细胞增殖,其抗增殖活性具有浓度依赖性;染料木黄酮还可抑制ERK与EGFR的活化,并抑制ERK及EGFR间的相互作用。结论染料木黄酮可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与其抑制EGFR/ERK通路活化有关。 展开更多
关键词 染料木黄酮 smmc7721 EGFR ERK
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