SEMA3F通过CXCR4/JAK2/STAT3通路抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及血管生成 被引量：3

1

作者 时周云 陈红晶 +1 位作者 钱琳玉 朱玲玲 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第7期1218-1225,共8页

目的:探究信号素3F(semaphorin-3F,SEMA3F)通过趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)/JANUS激酶2(janus kinase 2,JAK2)/信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路对... 目的:探究信号素3F(semaphorin-3F,SEMA3F)通过趋化因子受体4(C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4)/JANUS激酶2(janus kinase 2,JAK2)/信号转导及转录激活蛋白3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及血管生成的调控作用。方法:体外培养人子宫内膜基质细胞系、人子宫内膜癌细胞(Ishikawa、KLE、RL95-2、HEC-1-A)及人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)。构建含有SEMA3F重组质粒的慢病毒载体并转染至Ishikawa细胞,分为对照组(Control)、过表达对照组(Ov-NC)、SEMA3F过表达组(Ov-SEMA3F);将含SEMA3F重组质粒的慢病毒载体与构建的含CXCR4重组质粒的慢病毒载体或STAT3激动剂(Colivelin)共转染至Ishikawa细胞,分为4组:Control组、Ov-SEMA3F组、Ov-SEMA3F+Ov-CXCR4组、Ov-SEMA3F+Colivelin组。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测SEMA3F、CXCR4表达水平;EdU染色检测细胞增殖;划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;Transwell和小管形成实验分别检测Ishikawa细胞上清作用下HUVEC迁移和子宫内膜癌细胞小管形成能力;Western blot分析增殖和转移相关蛋白及CXCR4/JAK2/STAT3通路相关蛋白表达水平。结果:SEMA3F在子宫内膜癌细胞中表达降低(均P<0.01),SEMA3F过表达可抑制细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成(均P<0.001)。SEMA3F过表达可抑制CXCR4/JAK2/STAT3信号通路(P<0.001),CXCR4过表达或STAT3激动剂(Colivelin)可逆转SEMA3F对Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭及Ishikawa细胞上清作用下HUVEC细胞迁移、血管生成能力的抑制作用(均P<0.05)。结论:SEMA3F可通过使CXCR4/JAK2/STAT3通路失活进而抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及血管生成。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 SEMA3F 血管生成 CXCR4/JAK2/stat3通路

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四逆散及其拆方对实验性溃疡性结肠炎大鼠IL-4/STAT6通路的影响 被引量：7

2

作者 卢健 王凌志 +2 位作者 蒋宁 赵令竹 林庶茹 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第8期1845-1847,I0006,共4页

目的:从基因水平进一步探讨四逆散调控实验性溃疡性结肠炎大鼠IL-4/STAT6信号通路的作用机制。方法:将实验动物分为6组,采用免疫法造模,以大鼠IL-4、SOCS1、STAT6的基因表达作为观察与检测指标。结果:四逆散组实验大鼠IL-4、SOCS1表达... 目的:从基因水平进一步探讨四逆散调控实验性溃疡性结肠炎大鼠IL-4/STAT6信号通路的作用机制。方法:将实验动物分为6组,采用免疫法造模,以大鼠IL-4、SOCS1、STAT6的基因表达作为观察与检测指标。结果:四逆散组实验大鼠IL-4、SOCS1表达显著增加(P<0.05),而STAT6显著降低(P<0.05);三个拆方组中,柴芍配伍对IL-4、SOCS1 mRNA表达的影响与四逆散无显著性差异(P>0.05),但STAT6 mRNA的表达显著高于正常组(P>0.05);与柴枳甘组、芍枳甘组比较,柴芍组IL-4、SOCS1 mRNA表达明显升高(P>0.05),STAT6 mRNA的表达显著降低(P>0.05)。结论:四逆散能够通过刺激IL-4、SOCS1 mRNA的表达,抑制STAT6mRNA的表达来调节IL-4/STAT6通路,干预实验性UC。方中柴芍配伍作用明显,主要体现在对IL-4、SOCS1mRNA表达的影响上;柴、芍分别配伍柴枳后,对TL-4/STAT6通路的调节作用明显降低。 展开更多

关键词 四逆散 IL-4/stat6通路 SOCS1 溃疡性结肠炎 实验

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佛司可林通过TLR4/STAT3通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤氧自由基水平和炎症反应的调节作用 被引量：10

3

作者 邓俊超 罗冲 +2 位作者 朱小石 张熔 张渝 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期829-837,共9页

目的研究佛司可林(Forskolin,FS)通过TLR4/STAT3通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤氧(HIBD)自由基水平和炎症反应的调节作用。方法将75只7日龄SD大鼠15只/组随机分为假手术组、模型组、佛司可林低、中、高剂量治疗组,其中模型组和模型加... 目的研究佛司可林(Forskolin,FS)通过TLR4/STAT3通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤氧(HIBD)自由基水平和炎症反应的调节作用。方法将75只7日龄SD大鼠15只/组随机分为假手术组、模型组、佛司可林低、中、高剂量治疗组,其中模型组和模型加药组采用Rice-Vannucci方法建立HIBD模型,假手术组只做创伤不作处理。术后第1天模型加药组大鼠分别接受不同剂量剂量的佛司可林腹腔注射;模型组与假手术组腹腔注射等体积量的生理盐水,1次/d注射7 d。ELISA检测各组大鼠血清中炎症因子水平;HE染色和凋亡TUNEL染色进行脑组织病理学分析;商业试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;免疫组化分析细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达;Western blot分析脑组织中STAT3、TLR4、NF-κB p65、TNF-α、cleaved-caspase-3/9的表达。通过尾静脉注射0.4 mg/kg脂多糖(LPS)激活TLR4通路后,再注射佛司可林分析对HIBD大鼠炎症因子、氧化应激指标及TLR4/STAT3通路蛋白的表达影响。结果与模型组相比,佛司可林治疗后,大鼠的脑组织损伤显著改善,凋亡细胞比例明显降低(P<0.05);同时脑组织液中MDA和LDH的水平明显降低,SOD含量显著上升,ICAM-1的表达和炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β的释放明显受到抑制(P<0.05)。Western blot结果显示,随着佛司可林剂量增加,p-STAT3、TLR4、p-p65和TNF-α表达量显著降低(P<0.05)。此外佛司可林能够抑制LSP激活TLR4通路后p-STAT3、TLR4、pp65和TNF-α的表达,降低脑组织中IL-6的释放,提升SOD的水平含量(P<0.05)。结论佛司可林能够通过TLR4/STAT3通路改善新生大鼠缺血缺氧性脑损伤,降低氧自由基水平和抑制炎症反应。 展开更多

关键词 佛司可林 TLR4/stat3通路 缺血缺氧性脑损伤 氧化应激 炎症反应

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喘可治注射液对COPD大鼠IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响 被引量：3

4

作者 黄纯美 张蓓 +4 位作者 许仕杰 李耿 单丽囡 林旋龄 刘小虹 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期44-48,共5页

目的观察喘可治注射液(CKZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,CKZ高、中、低剂量(CKZ-H、CHZ-M、CKZ-L)组。除正常组外,各组复制COPD大鼠模型,并给予相应药... 目的观察喘可治注射液(CKZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,CKZ高、中、低剂量(CKZ-H、CHZ-M、CKZ-L)组。除正常组外,各组复制COPD大鼠模型,并给予相应药物治疗,观察CKZ对COPD大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12受体(IL-12R)以及肺组织信号转导子和转录激活子4(STAT4)m RNA表达的影响。结果喘可治注射液各剂量组肺组织病理形态均有不同程度的改善,且降低COPD大鼠血清和BALF中IFN-γ、IL-12、IL-12R(除CKZ-L组BALF中IL-12R外)水平(P<0.05,P<0.01),可抑制大鼠肺组织STAT4 m RNA的表达(P<0.01,P<0.05)。结论喘可治注射液能一定程度改善COPD大鼠肺组织病理损害,其作用机制可能与其抑制IFN-γ、IL-12、IL-12R表达,干扰IL-12/IL-12R/STAT4信号通路对靶基因的激活,下调STAT4 m RNA表达,进而调节Th1/Th2分化失衡有关。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 IL-12/IL-12R/stat4信号通路 喘可治注射液 TH1/TH2分化

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红外线局部照射联合皮肤再生医疗技术治疗开腹胃肠外科术后切口感染效果及对IL-4/IL-13/STAT6信号通路影响 被引量：1

5

作者 马柏英 傅旭堂 +1 位作者 陈芃芃 李肃 《世界华人消化杂志》 CAS 2022年第12期521-528,共8页

背景切口感染是开腹胃肠外科术常见并发症及临床亟待解决的问题.红外线局部照射联合皮肤再生医疗技术能通过改善切口局部血液循环,降低致痛化学介质作用,抑制切口过度炎症反应,并通过加快渗出物吸收,缓解局部炎症.目的探讨红外线局部照... 背景切口感染是开腹胃肠外科术常见并发症及临床亟待解决的问题.红外线局部照射联合皮肤再生医疗技术能通过改善切口局部血液循环,降低致痛化学介质作用,抑制切口过度炎症反应,并通过加快渗出物吸收,缓解局部炎症.目的探讨红外线局部照射联合皮肤再生医疗技术治疗开腹胃肠外科术后切口感染效果及对白介素-4(interleukin-4,IL-4)/白介素-13(interleukin-13,IL-13)/转录激活子6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)信号通路影响.方法按照1:1试验设计原则和电脑随机数字表法将2019-03/2021-06我院收治的66例开腹胃肠外科术后切口感染患者,随机分为对照组、实验组进行前瞻性研究,各33例.两组均给予抗菌药物治疗,在此基础上,对照组给予皮肤再生医疗技术,实验组给予红外线局部照射联合皮肤再生医疗技术.比较两组疗效、炎症指标[C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、白细胞(WBC)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]、IL-4 mRNA、IL-13 mRNA、STAT6 mRNA、换药次数、红肿痛缓解时间、病原菌培养转阴时间、住院时间、温哥华瘢痕量表(vancouver scar scale,VSS)评分.结果两组疗效分布情况比较,差异有统计学意义,实验组显效率为75.76%,高于对照组的42.42%(P<0.05);实验组治疗3 d后、治疗5 d后CRP、PCT、WBC、TNF-α低于对照组(P<0.05);实验组治疗3 d后、治疗5 d后IL-4 mRNA、IL-13 mRNA、STAT6 mRNA低于对照组(P<0.05);实验组换药次数、红肿痛缓解时间、病原菌培养转阴时间、住院时间低于对照组(P<0.05);实验组VSS量表色泽、血管、柔软性、厚度、疼痛评分低于对照组(P<0.05).结论红外线局部照射联合皮肤再生医疗技术治疗开腹胃肠外科术后切口感染,能增强疗效,改善炎症反应与切口愈合质量,加快患者临床症状体征缓解和恢复进程. 展开更多

关键词 红外线局部照射 皮肤再生医疗技术 开腹胃肠外科术后切口感染 IL-4/IL-13/stat6信号通路

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五味子乙素对过敏性哮喘小鼠IL-4/IL-13/STAT6通路及气道杯状细胞凋亡的影响 被引量：6

6

作者 白红丽 赵梁育 +1 位作者 郑速征 马志强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1333-1337,共5页

目的:探究五味子乙素对过敏性哮喘小鼠的治疗作用及对IL-4/IL-13/STAT6信号通路的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为6组:空白对照组、模型组、五味子乙素低(20 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组和地塞米松组(2 mg/kg),每组12只。... 目的:探究五味子乙素对过敏性哮喘小鼠的治疗作用及对IL-4/IL-13/STAT6信号通路的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为6组:空白对照组、模型组、五味子乙素低(20 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组和地塞米松组(2 mg/kg),每组12只。除空白对照组外,其他各组均构建过敏性哮喘小鼠模型,造模同时分别灌胃给予相应药物。末次OVA激发24 h后,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子IL-4、IL-13、IFN-γ水平。取出肺脏,计算肺/体质量指数。HE染色检测小鼠肺组织形态学变化,并进行炎症反应评分。TUNEL和PAS染色结合检测小鼠肺组织杯状细胞凋亡率;Western blot检测小鼠肺组织IL-4、IL-13、p-STAT6蛋白表达。结果:与空白对照组相比,模型组小鼠肺组织结构损伤严重,有大量炎症细胞浸润,肺/体质量指数、炎症反应评分、气道杯状细胞凋亡率、BALF中IL-4、IL-13水平及肺组织中IL-4、IL-13、p-STAT6蛋白表达显著升高(P<0.05),IFN-γ水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,五味子乙素各剂量组和地塞米松组肺组织结构较完整,病变程度减轻,肺/体质量指数、炎症反应评分、气道杯状细胞凋亡率、BALF中IL-4、IL-13水平及肺组织中IL-4、IL-13、p-STAT6蛋白表达显著降低(P<0.05),IFN-γ水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖关系。五味子乙素高剂量组和地塞米松组小鼠肺/体质量指数、炎症因子水平(IL-4、IL-13、IFN-γ)、细胞凋亡率及IL-4、IL-13、p-STAT6蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:五味子乙素可能通过抑制IL-4/IL-13/STAT6信号通路减轻过敏性哮喘小鼠炎症反应,缓解肺组织病理损伤。 展开更多

关键词 五味子乙素 过敏性哮喘 IL-4/IL-13/stat6信号通路 炎症反应 气道杯状细胞凋亡

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STAT4基因敲除通过miR-9促进泡沫细胞形成及动脉粥样硬化 被引量：7

7

作者 许莉莉 丁素玲 +5 位作者 张伟伟 朱小伟 朱宝玲 邹云增 杨向东 葛均波 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第5期410-420,共11页

目的探究动脉粥样硬化斑块发生发展过程中信号转导与转录激活因子4(STAT4)信号通路在巨噬细胞分化及泡沫细胞形成中的作用及调控机制。方法将STAT4基因敲除(STAT4-/-)小鼠与载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠进行杂交,筛选出ApoE/STAT4纯... 目的探究动脉粥样硬化斑块发生发展过程中信号转导与转录激活因子4(STAT4)信号通路在巨噬细胞分化及泡沫细胞形成中的作用及调控机制。方法将STAT4基因敲除(STAT4-/-)小鼠与载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠进行杂交,筛选出ApoE/STAT4纯合子双基因敲除(DKO)小鼠,研究新型动脉粥样硬化相关小鼠模型的易感性和机制。将3月龄小鼠分为野生型(WT)、STAT4-/-、ApoE-/-、DKO共4组,经过12周高脂胆固醇饮食喂养,分别采用油红O染色及石蜡切片HE/Masson染色检测主动脉斑块形成情况。采用流式细胞术分析小鼠外周血、骨髓及脾脏髓系细胞各亚群比例。从小鼠骨髓分离CD11b+髓系细胞进行体外培养,采用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)进行诱导,流式分析巨噬细胞不同亚型分化情况。采用实时定量聚合酶链反应(PCR)及Western blot分别检测基因表达水平及蛋白水平。结果ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块局部的CD11b+细胞中可检测到STAT4表达。ApoE-/-及DKO小鼠经12周高脂喂养,油红O染色阳性的主动脉斑块主要分布在主动脉根部至髂动脉分叉处,DKO小鼠的斑块较ApoE-/-小鼠明显增多;HE及Masson染色显示DKO小鼠的主动脉斑块较ApoE-/-小鼠具有更薄的纤维帽及更大的脂质核心,且斑块中的纤维更稀疏,排列也相对更紊乱。体外细胞实验显示STAT4基因敲除可促进CD11b+Gr-1+未成熟髓系细胞的异常动员、巨噬细胞的M1极化以及泡沫化。STAT4基因缺失通过磷酸肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)/核因子κB(NF-κB)通路下调miR-9的表达,上调酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶(ACAT-1)表达,进而促进巨噬细胞的脂质蓄积及泡沫细胞形成,最终加速动脉粥样硬化斑块的发生发展。结论STAT4通过调控免疫炎症反应及脂质代谢,在巨噬细胞分化及泡沫细胞形成过程中发挥关键作用。STAT4相关信号通路可作为未来动脉粥样硬化性疾病的潜在治疗靶点。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 巨噬细胞 泡沫细胞 stat4通路

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基于IL-4/JAK1/STAT6信号通路影响巨噬细胞M2极化探讨培元定喘汤治疗哮喘气道炎症的作用机制

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作者 王珏 刘琪 +1 位作者 张潇予 李竹英 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期4312-4316,共5页

目的:观察培元定喘汤对哮喘小鼠气道炎症及JAK1/STAT6信号通路的影响,探讨培元定喘汤对哮喘气道炎症的作用机制。方法:40只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组10只,除空白组外,模型组、布地奈德组、培元定喘汤组应用卵清蛋白(OVA)雾化及激发... 目的:观察培元定喘汤对哮喘小鼠气道炎症及JAK1/STAT6信号通路的影响,探讨培元定喘汤对哮喘气道炎症的作用机制。方法:40只C57BL/6小鼠随机分为4组,每组10只,除空白组外,模型组、布地奈德组、培元定喘汤组应用卵清蛋白(OVA)雾化及激发的方式建立哮喘小鼠模型。观察各组小鼠的一般状态;ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13及血清中IgE水平;HE染色法观察小鼠肺组织病理形态学的变化;qRT-PCR法检测肺组织中IL-4、JAK1、STAT6、Arg-1 mRNA表达;免疫组化法检测肺组织中Arg-1和CD163的表达;免疫荧光染色检测肺组织IL-4的表达。结果:与模型组比较,布地奈德组和培元定喘汤组病理特征明显减轻;布地奈德组和培元定喘汤组BALF中IL-4、IL-5、IL-13及血清中IgE水平均显著降低(P<0.05),肺组织中IL-4、JAK1、STAT6、Arg-1 mRNA表达均显著降低(P<0.05),肺组织Arg-1及CD163表达显著降低(P<0.05),肺组织中IL-4的荧光强度明显减弱。结论:培元定喘汤可以通过抑制IL-4/JAK1/STAT6信号通路的激活抑制巨噬细胞M2极化,从而达到治疗哮喘气道炎症的作用。 展开更多

关键词 培元定喘汤 哮喘慢性持续期 气道炎症 巨噬细胞M2极化 IL-4/JAK1/stat6信号通路

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多柔比星通过Stat3-Oct-4/CD44途径诱导三阴性乳腺癌4T1细胞干性的产生 被引量：7

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作者 钟瑾怡 成丛丛 +5 位作者 徐金媛 李雪松 张升 张宝刚 王丽华 史立宏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期360-364,共5页

目的:观察多柔比星对三阴性乳腺癌细胞干性的诱导作用并研究其作用机制。方法:用不同终浓度(0、0.05、0.1和0.5μmol/L)多柔比星培养细胞,观察细胞形态及存活情况,筛选出最适多柔比星浓度(0.1μmol/L)用于后续实验。小鼠乳腺癌4T1细胞... 目的:观察多柔比星对三阴性乳腺癌细胞干性的诱导作用并研究其作用机制。方法:用不同终浓度(0、0.05、0.1和0.5μmol/L)多柔比星培养细胞,观察细胞形态及存活情况,筛选出最适多柔比星浓度(0.1μmol/L)用于后续实验。小鼠乳腺癌4T1细胞和人乳腺癌MDA-MB-468细胞经多柔比星(0.1μmol/L)持续刺激4周后分别命名为4T1-DOX和MDA-MB-468-DOX细胞。通过成球实验观察细胞的干性,免疫荧光检测CD133的表达,流式细胞术检测CD44的表达,Western blot检测Stat3、p-Stat3和Oct-4的表达。结果:成球实验发现4T1-DOX细胞成球能力较4T1细胞显著增强,MDA-MB-468-DOX细胞成球能力较MDA-MB-468细胞也显著增强(P <0.05);免疫荧光结果显示CD133在4T1-DOX细胞的表达比4T1细胞明显增高(P <0.05);流式细胞术结果表明CD44在4T1-DOX中表达较4T1细胞显著增高(P <0.05);Western blot结果显示Oct-4及p-Stat3在4T1-DOX细胞中的蛋白水平增高(P <0.05),而总Stat3的表达量未见显著改变。以上结果表明在0.1μmol/L多柔比星持续诱导下4T1细胞干性特征明显增强。加入Stat3抑制剂WP1066后,CD44、Oct-4和p-Stat3的蛋白水平均下降(P <0.05)。结论:多柔比星通过激活Stat3-Oct-4信号通路,使三阴性乳腺癌细胞成球能力增强,4T1细胞干性标志物CD133及CD44表达增多,诱导乳腺癌细胞干性的产生。因此,Stat3-Oct-4通路可能成为三阴性乳腺癌治疗的新靶标。 展开更多

关键词 多柔比星 三阴性乳腺癌 肿瘤干细胞 stat3/Oct-4信号通路

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基于TLR4/TRIF/STAT1通路探讨大蝉草多糖通过增强免疫抑制黑色素瘤细胞的机制

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作者 杨碧萍 朱丽军 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期126-136,共11页

探讨大蝉草多糖(CCPa)通过调节免疫细胞(RAW264.7)活性抑制黑色素瘤细胞(B16F10)的机制。构建RAW264.7和B16F10细胞共培养体系并给予CCPa干预,检测B16F10细胞的增殖能力、凋亡能力和转移能力,明确共培养条件下CCPa对B16F10的抑制作用;另... 探讨大蝉草多糖(CCPa)通过调节免疫细胞(RAW264.7)活性抑制黑色素瘤细胞(B16F10)的机制。构建RAW264.7和B16F10细胞共培养体系并给予CCPa干预,检测B16F10细胞的增殖能力、凋亡能力和转移能力,明确共培养条件下CCPa对B16F10的抑制作用;另外,采用不同浓度CCPa给药RAW264.7,通过检测RAW264.7的细胞活力、细胞吞噬能力、F-actin蛋白表达、免疫因子水平以及TLR4、TRIF、p-STAT1蛋白的表达,明确CCPa增强RAW264.7免疫活性的具体作用机制。研究结果表明,在共培养体系下,CCPa能协同顺铂抑制B16F10细胞的增殖和转移;RAW264.7细胞经CCPa处理后,细胞的吞噬能力,F-actin蛋白的表达以及免疫因子(IFN-β、IL-6)的水平均明显上升(P<0.05),同时,干预后的细胞内TLR4、TRIF、p-STAT1的表达显著上升(P<0.05)。以上结果表明CCPa可通过TLR4/TRIF/STAT1通路增强RAW264.7细胞免疫活性从而有效抑制B16F10细胞。 展开更多

关键词 大蝉草多糖 TLR4/TRIF/stat1通路 免疫 RAW264.7细胞 B16F10细胞

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基于STAT3-CASP4/5通路诱导银屑病细胞焦亡基因调控网络的构建及潜在药物预测 被引量：3

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作者 王家悦 陈朝霞 +5 位作者 王燕 赵京霞 底婷婷 胡雪晴 曲保全 李萍 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第24期8142-8152,共11页

目的 基于基因调控网络分析银屑病中细胞焦亡相关基因的表达模式,并探讨其在银屑病的发生和发展中的作用,以寻找可能的治疗方案。方法 使用NCBI基因表达Omnibus数据库获取银屑病患者皮损区和非皮损区样本的基因表达数据集。利用limma算... 目的 基于基因调控网络分析银屑病中细胞焦亡相关基因的表达模式,并探讨其在银屑病的发生和发展中的作用,以寻找可能的治疗方案。方法 使用NCBI基因表达Omnibus数据库获取银屑病患者皮损区和非皮损区样本的基因表达数据集。利用limma算法筛选出差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并运用WebGestalt对DEGs进行富集分析。收集与细胞焦亡和银屑病相关的共有基因,并利用GENIE3构建共有基因的上游转录调节网络。使用HERB和COREMINE数据库预测可能干预细胞焦亡和银屑病互作机制的中药和化学药。结果 在银屑病的发病过程中,包括半胱氨酸蛋白酶4/5/8(cysteinasparate protease 4/5/8,CASP4/5/8)在内的13个细胞焦亡基因参与了程序性细胞死亡的调节、蛋白酶活性的调控、内肽酶活性的调节以及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的产生等过程。通过识别共享基因,发现这些基因的转录过程受到包括信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)和维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)在内的54个转录因子的调控,共涉及64个转录调控关系。其中,转录因子VDR、钙调蛋白结合转录激活因子2(calmodulin binding transcription activator 2,CAMTA2)和锌指E盒结合同源盒蛋白2(zinc finger E-box binding homeobox2,ZEB2)可能直接调节CASP8的转录过程,而转录因子STAT3、碱性亮氨酸拉链ATF样转录因子2(basic leucine zipper ATF-like transcription factor 2,BATF2)和催乳素调节元件结合蛋白(prolactin regulatory element binding,PREB)可能直接调节CASP4、CASP5的转录过程。此外,发现环孢素、甲氨蝶呤和异维A酸可能通过影响CASP4和CASP8基因的表达来逆转银屑病症状。基于银屑病细胞焦亡基因靶点预测得到99味核心中药,药味以苦、辛、甘为主,药性以寒、温、平为主,归经以肝、肺、脾经为主。结论 进一步丰富了以STAT3为中心的细胞焦亡调控银屑病发生机制的模型。发现VDR和ZEB2转录调节的STAT3-焦孔素E(gasdermin-E,GSDMEC)-CASP8通路以及STAT3-GSDMD-CASP4/5通路共同参与了细胞焦亡过程,并对角质形成细胞的分化和增殖产生影响。基于此通路寻找出作用于细胞焦亡过程的化学药和中药,为治疗银屑病提供新的解决方案。 展开更多

关键词 细胞焦亡 stat3-CASP4/5通路 银屑病 中医药 生物信息学 中药新药开发

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基于IL-4/STAT6通路研究吴茱萸次碱对特应性皮炎模型小鼠的改善作用 被引量：7

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作者 顿耿 祁相焕 +2 位作者 吴德福 臧馥兰 王哲新 《中医学报》 CAS 2022年第12期2643-2648,共6页

目的:研究吴茱萸次碱对特应性皮炎小鼠的作用及其机制。方法:50只4周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、吴茱萸次碱低剂量组和吴茱萸次碱高剂量组,每组10只,除正常组外,其余组小鼠建立特应性皮炎模型。造模成... 目的:研究吴茱萸次碱对特应性皮炎小鼠的作用及其机制。方法:50只4周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、吴茱萸次碱低剂量组和吴茱萸次碱高剂量组,每组10只,除正常组外,其余组小鼠建立特应性皮炎模型。造模成功4 h后,阳性对照组小鼠灌胃给予10 mg·kg^(-1)泼尼松龙溶液,吴茱萸次碱低、高剂量组小鼠灌胃给予10 mg·kg^(-1)、20 mg·kg^(-1)吴茱萸次碱溶液,正常组和模型组小鼠灌胃等量生理盐水,每天1次,连续14 d。末次给药结束后,测定小鼠右耳炎症评分,并测量耳部厚度;ELISA检测小鼠血清中细胞因子干扰素γ(interferon gamma,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-5和免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)的水平;HE染色检测小鼠耳部组织结构的变化;Western Blot检测耳组织中IL-4/信号转导及转录激活因子6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)信号通路相关蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠耳部出现充血水肿、糜烂、干燥脱屑、结痂等炎性症状,皮炎评分、右耳厚度及血清中IL-4、IL-5、IgE的水平显著升高(P<0.05),耳组织IL-4、STAT6和嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)蛋白表达水平显著升高(P<0.05),血清中IFN-γ的水平及耳组织细胞因子信号抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,吴茱萸次碱低、高剂量组小鼠耳部炎性症状减轻,皮炎评分、右耳厚度及血清中IL-4、IL-5、IgE的水平明显降低(P<0.05),耳组织IL-4、STAT6和eotaxin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);血清中IFN-γ的水平及耳组织SOCS1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。HE染色显示:正常组小鼠耳部组织皮肤结构正常完整,无水肿和炎性细胞浸润;模型组小鼠皮肤结构缺失,明显水肿,可见大量炎性细胞浸润;各给药组小鼠耳部组织病理损伤得到显著改善,其中吴茱萸次碱高剂量组小鼠皮肤结构较完整,细胞轻度水肿,少量炎性细胞浸润。结论:吴茱萸次碱可明显改善特应性皮炎小鼠的炎症反应,其作用可能与调节IL-4/STAT6信号通路有关。 展开更多

关键词 特应性皮炎 吴茱萸次碱 IL-4/stat6信号通路 小鼠

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基于网络药理学研究黄龙合剂治疗小儿咳嗽变异性哮喘的机制及实验验证 被引量：1

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作者 纪茜茜 王爱华 隆红艳 《国际中医中药杂志》 2024年第2期196-202,共7页

目的利用网络药理学方法、分子对接技术及体外细胞实验研究黄龙合剂基于IL-4/信号转导和转录激活因子6(STAT6)信号通路治疗小儿咳嗽变异性哮喘(CVA)的作用机制。方法通过TCMSP、HERB数据库及文献检索获得黄龙合剂组方中药的活性成分及... 目的利用网络药理学方法、分子对接技术及体外细胞实验研究黄龙合剂基于IL-4/信号转导和转录激活因子6(STAT6)信号通路治疗小儿咳嗽变异性哮喘(CVA)的作用机制。方法通过TCMSP、HERB数据库及文献检索获得黄龙合剂组方中药的活性成分及作用靶点,检索GeneCards数据库、OMIM数据库、DrugBank数据库、PharmGKB数据库中CVA相关靶点。对药物-疾病靶点取交集,使用STRING数据库构建交集靶点PPI网络,采用Cytoscape 3.9.1进行网络拓扑分析,筛选核心靶点,并构建“疾病-药物-成分-靶点”网络,筛选核心成分。使用Metascape数据库对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。使用PDB蛋白数据库、PubChem、AutoDock及R语言对核心靶点及核心成分进行分子对接验证。培养大鼠原代气道平滑肌细胞,采用Western blot检测细胞质和细胞核中p-STAT6表达。结果得到黄龙合剂治疗CVA的活性成分122个,核心成分包括槲皮素、山柰酚、木犀草素等,核心靶点有JUN、ESR1、TP53、MYC、HIF1α等。GO功能富集分析涉及对外来刺激的反应、对氧气水平的反应、蛋白质磷酸化的正向调控、细胞应激反应的调节等生物过程。KEGG通路富集分析显示,黄龙合剂治疗CVA靶点主要富集于AGE-RAGE信号通路、PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、JAK-STAT信号通路等。分子对接结果显示,核心靶点及药物核心成分有较好的结合活性。细胞实验表明,黄龙合剂可抑制IL-4介导的p-STAT6进入细胞核。结论预测了黄龙合剂治疗CVA的有效成分及靶点,其治疗小儿CVA的作用机制可能与抑制IL-4/STAT6信号通路有关。 展开更多

关键词 药理作用分子作用机制(中药) 咳嗽变异性哮喘 黄龙合剂 网络药理学 分子对接模拟 IL-4/stat6信号通路

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