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应用原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系建立体外骨关节炎模型的效果评价 被引量:1
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作者 刘晓彤 黄悦 +6 位作者 刘旭丹 徐小磊 姜梦琪 杨迎春 何健宜 顾海伦 刘莉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期459-464,共6页
目的通过比较白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)处理对原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力、炎症因子与炎症通路表达水平变化的影响,为骨关节炎体外研究用细胞提供多重选择。方法免疫细胞化学法与甲苯胺蓝染色分别检测... 目的通过比较白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)处理对原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力、炎症因子与炎症通路表达水平变化的影响,为骨关节炎体外研究用细胞提供多重选择。方法免疫细胞化学法与甲苯胺蓝染色分别检测细胞中Ⅱ型胶原与蛋白多糖,鉴定所培养的原代细胞是否为软骨细胞。CCK-8法检测IL-1β(10ng/ml)处理24h、48h、72h对原代软骨细胞增殖活力的影响,IL-1β(1、10、20、40ng/ml)处理24h对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力的影响。IL-1β(10ng/ml)分别处理原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系细胞24h后,ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)与基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达水平。Real-time PCR法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA表达水平。结果所培养的原代细胞为原代软骨细胞。IL-1β(10ng/ml)处理可显著抑制原代软骨细胞增殖活力,但IL-1β(1、10、20、40 ng/ml)处理对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力无明显影响。IL-1β(10ng/ml)处理可使IL-6、MMP-13表达水平及NF-κB mRNA的表达量均显著增加。结论IL-1β作用下原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系均可表现出骨关节炎样炎症反应,二者均可用于骨关节炎的体外实验研究。 展开更多
关键词 骨关节炎 原代软骨细胞 sw1353软骨肉瘤细胞系 核因子-ΚB
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Artemin在软骨肉瘤中的表达及其对内皮细胞增殖和迁移的影响 被引量:6
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作者 胡军 丰育来 周中 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期62-67,共6页
目的:探讨Artemin在软骨肉瘤中的表达水平及其对内皮细胞增殖与迁移的作用及其机制。方法:收集2015年5月至2019年4月南京中医药大学连云港附属医院手术切除的40例软骨肉瘤患者的肿瘤组织标本,分为低(Ⅰ级)、高级别(Ⅱ、Ⅲ级)软骨肉瘤各2... 目的:探讨Artemin在软骨肉瘤中的表达水平及其对内皮细胞增殖与迁移的作用及其机制。方法:收集2015年5月至2019年4月南京中医药大学连云港附属医院手术切除的40例软骨肉瘤患者的肿瘤组织标本,分为低(Ⅰ级)、高级别(Ⅱ、Ⅲ级)软骨肉瘤各20例;对照组为20例因车祸等意外伤截肢患者的正常软骨组织标本。用免疫组化法检测肿瘤组织中Artemin、血管内皮生细胞长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、Ki-67表达水平和CD31^+血管密度。用10 ng/ml的Artemin处理SW1353细胞后,用ELISA实验检测细胞培养上清中VEGF、基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)、基质金属蛋白酶2(matric metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9的含量变化,用Transwell迁移实验和MTT细胞增殖实验分别检测Artemin处理的软骨肉瘤细胞对ECV304细胞增殖和迁移的影响。结果:低级别组软骨肉瘤组织中Artemin和Ki-67表达水平均显著高于对照组(均P<0.01),高级别组软骨肉瘤组织中Artemin表达水平和Ki-67表达率显著高于低级别组(均P<0.01)。Artemin表达与软骨肉瘤组织中VEGF水平和血管密度呈正相关(均P<0.01);Artemin促进软骨肉瘤细胞分泌VEGF,而对SDF-1、MMP2和MMP9分泌无显著的影响;Artemin通过促进软骨肉瘤细胞分泌VEGF,诱导ECV304细胞增殖和迁移(均P<0.01)。结论:Artemin在软骨肉瘤组织中高表达且与VEGF水平和血管密度呈正相关,Artemin能够增强软骨肉瘤细胞诱导血管生成功能。 展开更多
关键词 软骨肉瘤 sw1353细胞 ECV304细胞 ARTEMIN 血管内皮生长因子 血管生成 增殖 迁移
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