阻断炎症因子转化生长因子-β改善细菌脓毒症T细胞增殖抑制的实验研究

1

作者 王小女 张静 +1 位作者 王斌 薛士鹏 《中医临床研究》 2024年第22期64-66,72,共4页

目的:探究炎症细胞因子在脂多糖所致脓毒症免疫麻痹T细胞免疫抑制中的作用。方法:以革兰阴性细菌成分脂多糖诱导脓毒症T淋巴细胞免疫抑制,采用流式细胞分析检测对照组和模型组树突状细胞的促炎细胞因子白细胞介素(Interleukin,IL)-1、I... 目的:探究炎症细胞因子在脂多糖所致脓毒症免疫麻痹T细胞免疫抑制中的作用。方法:以革兰阴性细菌成分脂多糖诱导脓毒症T淋巴细胞免疫抑制,采用流式细胞分析检测对照组和模型组树突状细胞的促炎细胞因子白细胞介素(Interleukin,IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)-α和抗炎细胞因子IL-10、IL-17、转化生长因子(Transforming Growth Factor,TGF)-β的表达情况。结果:与对照组相比,模型组树突状细胞的促炎细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α阳性率显著升高(P<0.05),抗炎细胞因子TGF-β阳性率显著升高(P<0.05),抗炎细胞因子IL-10、IL-17阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。阻断TGF-β可逆转脂多糖诱导的脓毒症T淋巴细胞增殖抑制现象。与模型组相比,αTGF-β+模型组T细胞增殖反应显著升高(P<0.05)。结论:脂多糖所致脓毒症过程中树突状细胞促炎细胞因子IL-1、IL-6和TNF-α表达上调可能参与促炎反应过程。抗炎细胞因子TGF-β表达上调可能参与淋巴细胞凋亡的脓毒症免疫抑制过程。阻断TGF-β,改善细菌脂多糖诱导的免疫麻痹T细胞增殖抑制现象。 展开更多

关键词 细菌脓毒症 树突状细胞 免疫抑制 抗炎细胞因子

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脓毒症小鼠脾脏树突状细胞焦亡及其对炎症反应和免疫功能的影响 被引量：2

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作者 贺鹏翼 董宁 +3 位作者 吴瑶 郝济伟 祝筱梅 姚咏明 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期537-544,共8页

目的 初步观察脓毒症小鼠脾脏树突状细胞(DC)焦亡情况及其与炎性因子水平、DC免疫功能的相关性。方法 70只BALB/c小鼠随机分为假手术组(n=20)、脓毒症模型组(CLP组,n=30)与胱天蛋白酶(CASP)-1抑制剂干预组(CLP+YVAD组,n=20),CLP组和CLP+... 目的 初步观察脓毒症小鼠脾脏树突状细胞(DC)焦亡情况及其与炎性因子水平、DC免疫功能的相关性。方法 70只BALB/c小鼠随机分为假手术组(n=20)、脓毒症模型组(CLP组,n=30)与胱天蛋白酶(CASP)-1抑制剂干预组(CLP+YVAD组,n=20),CLP组和CLP+YVAD组按术后不同时间点分为CLP 12 h组、CLP 24 h组、CLP 48 h组、CLP72 h组及CLP+YVAD24 h组、CLP+YVAD72 h组。所有小鼠于术后预定时间眼眶取血、处死并取脾脏组织。流式细胞仪测定脾脏DC焦亡率及表面标志物(CD80、CD86、MHC-Ⅱ)表达水平,激光共聚焦显微镜观察CASP-1在小鼠脾脏DC中的活化情况,Western blotting检测DC中CASP-1的表达情况,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-12、IL-1β、IL-6浓度;观察CLP术后小鼠死亡情况。提取BALB/c小鼠T细胞与各组小鼠脾脏DC共培养,采用流式细胞仪测定T细胞增殖率,ELISA法检测共培养上清中γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-10浓度。结果 与假手术组比较,DC焦亡率在CLP术后12 h升高(P<0.05),于24 h达高峰(P<0.01),随后呈下降趋势,至72 h仍高于假手术组(P<0.01)。激光共聚焦显微镜观察显示,CLP术后小鼠脾脏DC CASP-1活化明显。Western blotting检测结果显示,DC中焦亡蛋白CASP-1表达在脓毒症早期(12 h和24 h)较假手术组明显上调(P<0.01)。而给予CASP-1特异性抑制剂Ac-YVAD-cmk后,CLP+YVAD 24 h组DC焦亡率较CLP 24 h组下降(P<0.01),CLP+YVAD 72 h组DC表面标志物CD80、MHC-Ⅱ表达水平较CLP 72 h组上调(P<0.01),术后7 d小鼠生存率提高(P<0.01)。ELISA法检测结果显示,CLP小鼠血清TNF-α、IL-12、IL-1β和IL-6浓度在脓毒症早期(24 h)和后期(72 h)均较假手术组明显升高(P<0.01),而CLP+YVAD组血清内上述因子浓度明显下降(P<0.01)。共培养实验结果显示,与DC-CLP 24 h组比较,DC-CLP+YVAD 24 h组T细胞增殖率明显增高(P<0.01),共培养上清中IFN-γ水平下降,而IL-4、IL-10水平上升(P<0.01)。结论 DC焦亡在脓毒症早期启动并持续存在,可能是脓毒症状态下炎性因子水平异常增高和DC免疫功能抑制的病理生理机制之一,且与脓毒症预后不良相关。 展开更多

关键词 脓毒症 炎症反应 免疫抑制 树突状细胞 焦亡

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脓毒症老年小鼠树突状细胞高尔基体应激和自噬水平变化及其对免疫功能的影响 被引量：1

3

作者 樊琪 董宁 +4 位作者 吴瑶 童森 贺鹏翼 祝筱梅 姚咏明 《中国急救医学》 CAS CSCD 2023年第11期868-874,共7页

目的 探究脓毒症状态下老年小鼠脾脏树突状细胞(dendritic cell,DC)功能状态的异常改变及其与高尔基体应激反应和自噬反应的内在联系。方法 不同年龄小鼠(青年鼠8周龄,老年鼠18月龄)分别随机分为假手术组与脓毒症模型组(CLP组)(n=4)。CL... 目的 探究脓毒症状态下老年小鼠脾脏树突状细胞(dendritic cell,DC)功能状态的异常改变及其与高尔基体应激反应和自噬反应的内在联系。方法 不同年龄小鼠(青年鼠8周龄,老年鼠18月龄)分别随机分为假手术组与脓毒症模型组(CLP组)(n=4)。CLP组小鼠于术后24 h处死并取脾脏组织。采用免疫磁珠法分离纯化脾脏DC,流式细胞术检测各组DC表面标志物及共刺激分子(CD80、CD86、MHC-Ⅱ)表达水平。分离纯化不同年龄小鼠脾脏DC,各自分为空白对照组、LPS刺激组(1μg/mL)(n=4)。免疫印迹法检测各组细胞高尔基体应激反应相关蛋白——高尔基体磷蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)、高尔基体重组堆积蛋白2(Golgi reassembly stacking protein of 55 kDa,GRASP55)以及高尔基体自噬相关蛋白高尔基体蛋白亚家族A成员2(Golgi matrix protein,GM130)、微管相关蛋白1A和1B(microtubule-associated proteins 1A and 1B,MAP1LC3B)表达水平。激光共聚焦显微镜检测高尔基体红色荧光探针(Golgi-tracker Red)在各空白对照组中的显示情况。进一步应用抑制高尔基体蛋白转运的莫能菌素(monensin,MON)(1μg/mL)预处理,检测扰乱高尔基体稳态对小鼠DC功能分化的影响。结果 与青年小鼠比较,老年脓毒症模型小鼠脾脏DC活化障碍显著。CLP术后24 h老年小鼠脾脏DC表面标志分子CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达升高水平明显低于青年小鼠(P<0.05)。对比健康小鼠脾脏DC胞内高尔基体的结构功能状态发现,与青年小鼠比较,老年DC胞内高尔基体结构蛋白GRASP55、GM130呈高表达(P<0.001),提示高尔基体结构肿胀;高尔基体外膜蛋白GOLPH3表达减弱(P<0.001),提示蛋白修饰及转运功能低下。分离提取不同年龄小鼠脾脏DC进行体外培养并给予LPS刺激,发现脓毒症老年小鼠DC胞内高尔基体应激反应增强、自噬明显,与DC功能障碍密切相关。给予MON抑制高尔基体蛋白转运,观察到青年、老年小鼠DC胞内高尔基体均发生显著应激与自噬反应,青年小鼠DC免疫功能活化障碍,老年小鼠功能障碍则更为显著。结论 老年小鼠DC中高尔基体结构肿胀且功能受损,造成DC免疫功能活化障碍,与老年脓毒症免疫抑制密切相关。 展开更多

关键词 老年 脓毒症 免疫抑制 树突状细胞(DC) 高尔基体自噬 高尔基体应激 内毒素 莫能菌素

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头孢曲松有潜在加剧脓毒症免疫抑制的风险 被引量：3

4

作者 章德文 何建 《内科急危重症杂志》 2012年第4期212-213,共2页

目的:研究头孢曲松对脓毒症模型小鼠脾脏树突状细胞(DCs)的影响,及其临床意义。方法:96只雄性昆明鼠随机分配入组,正常对照组(A组)40只、脓毒症模型组(B组)32只、头孢曲松治疗组(C组)24只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制模,制模后0、12、24... 目的:研究头孢曲松对脓毒症模型小鼠脾脏树突状细胞(DCs)的影响,及其临床意义。方法:96只雄性昆明鼠随机分配入组,正常对照组(A组)40只、脓毒症模型组(B组)32只、头孢曲松治疗组(C组)24只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制模,制模后0、12、24、48、72h分批处死小鼠,流式细胞计数脾脏DCs及凋亡率。结果:与正常观察组比较,模型组所有观察时间点脾脏DCs数量明显减少,凋亡率增加(均P﹤0.05);给予头孢曲松治疗后脾脏DCs的丢失进一步加剧(P﹤0.05),但凋亡率无显著改变(P﹥0.05)。结论:严重脓毒症时脾脏DCs明显减少。常规使用头孢曲松加剧DCs的丢失,但凋亡率无显著改变,推测源于单核细胞向DCs的分化障碍,从而加剧了免疫抑制和炎症失衡。 展开更多

关键词 脓毒症 DCS 凋亡 头孢菌素 免疫抑制

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脓毒症时树突状细胞的病理改变及临床意义

5

作者 章德文(综述) 何建(审校) 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期644-646,共3页

目前,脓毒症仍然是重症监护室的主要死亡原因,其特征性的免疫功能紊乱尤其是晚期特异性免疫抑制越来越被重视.树突状细胞（DC）是体内功能最强的抗原呈递细胞,能够刺激、诱导初始型T细胞增殖、分化,因此被认为是特异性免疫反应的启动者... 目前,脓毒症仍然是重症监护室的主要死亡原因,其特征性的免疫功能紊乱尤其是晚期特异性免疫抑制越来越被重视.树突状细胞（DC）是体内功能最强的抗原呈递细胞,能够刺激、诱导初始型T细胞增殖、分化,因此被认为是特异性免疫反应的启动者.脓毒症时,DC数量的下降、表达MHCⅡ及其刺激分子能力下降,从而影响T淋巴细胞的活化、分化,直接导致Th1细胞减少,削弱机体的细胞免疫.而通过补充DC或促进其增殖、分化,可以明显改善脓毒症时的免疫抑制状态,提高生存率.因此,针对DC的干预策略可能成为治疗脓毒症的新思路. 展开更多

关键词 脓毒症 树突状细胞(DC) 凋亡 病理改变

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T淋巴细胞凋亡在脓毒症患者免疫抑制和预后中的作用 被引量：22

6

作者 桂海波 杜晓刚 陈雪梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期738-746,共9页

目的：研究脓毒症患者外周血T淋巴细胞亚群和T淋巴细胞凋亡的变化,探讨其在免疫抑制和预后中的作用。方法：收集2014年10月至2015年12月重庆医科大学附属第一医院ICU收治的脓毒症患者55例,随访患者28 d生存率,根据预后不同,分为脓毒症... 目的：研究脓毒症患者外周血T淋巴细胞亚群和T淋巴细胞凋亡的变化,探讨其在免疫抑制和预后中的作用。方法：收集2014年10月至2015年12月重庆医科大学附属第一医院ICU收治的脓毒症患者55例,随访患者28 d生存率,根据预后不同,分为脓毒症患者存活组和脓毒症患者死亡组;同时收集健康志愿者30例为对照组。应用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群计数,分析其与APACHEⅡ评分及预测死亡危险率（R）的相关性;用免疫磁珠分选外周血CD3＋T淋巴细胞,通过流式细胞技术和Tunel法检测细胞凋亡。用脓毒症患者和健康志愿者血清体外刺激Jurkat细胞24 h,采用流式细胞技术和Tunel染色法检测细胞凋亡,Western blot法检测激活型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（cleaved-caspase 3）,B细胞淋巴瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）和髓样细胞白血病-1（myeloid cell leukemia 1,Mcl-1）蛋白表达水平。结果：脓毒症患者存活组、死亡组T淋巴细胞各亚群绝对值计数均明显低于对照组,分别为：CD3＋374.0（274.5～514.0）、154.0（87.5～256.2）、1534.5（1255.0～1756.7）,CD3＋CD4＋198.0（148.5～299.0）、68.0（37.7～108.5）、766.5（629.3～923.5）,CD3＋CD8＋142.0（89.0～184.0）、76.0（48.7～134.5）、600.5（400.2～717.0）（全部P〈0.05）;脓毒症患者死亡组CD3＋、CD3＋CD4＋细胞计数减少均较脓毒症患者存活组更显著,差异具有统计学意义（P=0.011,P=0.005）。脓毒症患者死亡组外周血T淋巴细胞中CD3＋CD4＋细胞占（42.40±5.71）%,较对照组（53.46±9.28）%明显减少（P=0.003）;CD3＋CD8＋细胞占（54.40±4.76）%,较对照组（39.33±7.26）%增加（P=0.003）;CD4＋/CD8＋比值为（0.79±0.17）,较对照组（1.44±0.51）明显下降（P=0.023）。CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋/CD8＋比值与患者APACHEⅡ评分和R均呈负相关关系（全部P〈0.05）。脓毒症患者存活组、死亡组CD3＋T淋巴细胞凋亡率分别为（15.59±0.54）%、（39.57±4.49）%,较对照组（9.53±1.91）%明显增加（P=0.040,P=0.000）,脓毒症患者死亡组较脓毒症患者存活组增加更明显（P=0.000）。脓毒症患者存活组、死亡组血清诱导Jurkat细胞凋亡率分别为（16.60±3.55）%、（32.93±5.89）%,较对照组（8.56±0.89）%明显增加（P=0.049、P=0.000）;Cleaved-caspase3蛋白水平（2.01±0.21,2.68±0.28）较对照组（1.00±0.00）上调（P=0.001、P=0.000）;抗凋亡蛋白Mcl-1（0.77±0.03,0.61±0.01）、Bcl-2（0.68±0.07,0.48±0.03）较对照组（1.00±0.00）明显下调（P=0.000、P=0.000）（P=0.000、P=0.000）;与脓毒症患者存活组比较,脓毒症患者死亡组中Jurkat细胞凋亡、Cleaved-caspase3、Mcl-1、Bcl-2变化更加为明显（P=0.002、P=0.007、P=0.000、P=0.001）。结论：脓毒症患者免疫失衡,T淋巴细胞凋亡增加,T淋巴细胞数明显减少,发生免疫抑制,且与病情严重程度和预后密切相关。 展开更多

关键词 脓毒症 T淋巴细胞 凋亡 免疫抑制 预后

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序列相似性家族134成员B介导的内质网自噬对内毒素/脂多糖诱导的小鼠树突状细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 段昱 姚人骐 +4 位作者 郑丽玉 董宁 吴瑶 姚咏明 戴新贵 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期857-866,共10页

目的探讨序列相似性家族134成员B(FAM134B)介导的内质网自噬对内毒素/脂多糖(LPS)诱导的小鼠树突状细胞(DC)凋亡的影响,为改善创面感染等引起的脓毒症免疫抑制提供依据。方法采用实验研究方法。取第3~10代对数生长期的小鼠DC系DC2.4进... 目的探讨序列相似性家族134成员B(FAM134B)介导的内质网自噬对内毒素/脂多糖(LPS)诱导的小鼠树突状细胞(DC)凋亡的影响,为改善创面感染等引起的脓毒症免疫抑制提供依据。方法采用实验研究方法。取第3~10代对数生长期的小鼠DC系DC2.4进行实验。将DC分为LPS刺激0 h(不刺激)组、LPS刺激6 h组、LPS刺激12 h组、LPS刺激24 h组和LPS刺激72 h组,采用1μg/mL LPS(浓度下同)培养相应时间后,采用蛋白质印迹法检测FAM134B、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)以及转运蛋白SEC61B蛋白表达,并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(样本数为3)。将DC分为进行相应处理的磷酸盐缓冲液(PBS)组与LPS组,培养24 h,采用免疫荧光法检测FAM134B表达情况及其分别与溶酶体探针、LC3B共定位情况,通过透射电子显微镜观察细胞内自噬溶酶体数量。将DC分为转染含FAM134B基因小干扰RNA序列的慢病毒的敲减FAM134B组与转染空载慢病毒的空载体组,转染后72 h,于倒置荧光相差显微镜下观察细胞荧光表达情况,另将仅常规培养的DC设为空白对照组并于相应时间点行相同观察。将DC分为单纯PBS组、单纯LPS组,将成功转染含FAM134B基因小干扰RNA序列的慢病毒的DC分为敲减FAM134B+PBS组、敲减FAM134B+LPS组,将成功转染空载慢病毒的DC分为空载体+PBS组、空载体+LPS组,给予相应刺激并培养24 h,采用蛋白质印迹法检测FAM134B蛋白表达(样本数为3),通过流式细胞术检测细胞凋亡率(样本数为3),行Hoechst染色观测细胞凋亡情况并计算凋亡率(样本数为5),采用蛋白质印迹法检测剪切型胱天蛋白酶3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达并计算Bax/Bcl-2比值(样本数为5)。对数据行单因素方差分析、LSD检验、析因设计方差分析。结果与LPS刺激0 h组相比,LPS刺激12 h组和LPS刺激24 h组细胞中FAM134B蛋白表达均明显升高(P<0.05),LPS刺激6 h组、LPS刺激12 h组、LPS刺激24 h组和LPS刺激72 h组细胞中SEC61B蛋白表达均明显降低(P<0.05),LPS刺激24 h组和LPS刺激72 h组细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值均明显升高(P<0.05),其中LPS刺激24 h组细胞中3个蛋白的变化最显著,将24 h作为后续LPS刺激时长。培养24 h,与PBS组相比,LPS组细胞中FAM134B的表达及其与LC3B及溶酶体探针的共定位均显著增强,自噬溶酶体数量明显增多。空载体组与敲减FAM134B组细胞转染后72 h均表现出高强度荧光,而空白对照组细胞在相应时间点无荧光表现。培养24 h,敲减FAM134B+PBS组细胞中FAM134B蛋白表达较单纯PBS组和空载体+PBS组明显降低(P值均<0.05),敲减FAM134B+LPS组细胞中FAM134B蛋白表达较单纯LPS组和空载体+LPS组显著降低(P值均<0.05),单纯LPS组细胞中FAM134B蛋白表达较单纯PBS组明显升高(P<0.05),空载体+LPS组细胞中FAM134B蛋白表达较空载体+PBS组明显升高(P<0.05)。培养24 h,流式细胞术检测显示,单纯PBS组、单纯LPS组、空载体+PBS组、空载体+LPS组、敲减FAM134B+PBS组与敲减FAM134B+LPS组细胞凋亡率分别为(13.3±0.8)%、(32.6±4.3)%、(17.0±1.5)%、(51.7±3.3)%、(52.4±3.1)%与(62.3±2.6)%。培养24 h,与单纯LPS组和空载体+LPS组相比,敲减FAM134B+LPS组经流式细胞术与Hoechst染色检测的细胞凋亡率以及细胞中剪切型caspase-3蛋白表达、Bax/Bcl-2比值均明显升高(P<0.05);与对应的PBS处理组即单纯PBS组、空载体+PBS组、敲减FAM134B+PBS组相比,单纯LPS组、空载体+LPS组、敲减FAM134B+LPS组经流式细胞术与Hoechst染色检测的细胞凋亡率以及细胞中剪切型caspase-3蛋白表达、Bax/Bcl-2比值均明显升高(P<0.05)。结论小鼠DC中FAM134B介导的内质网自噬在LPS刺激下活化增强并于24 h达活化高峰,且活化的内质网自噬对细胞凋亡具有显著抑制效应。 展开更多

关键词 脓毒症 树突细胞 细胞凋亡 序列相似性家族134成员B 内质网自噬 免疫功能障碍

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脓毒症免疫抑制机制的研究进展 被引量：7

8

作者 付绪哲 柳英杰 +2 位作者 牛明明 陈祺润 王煜 《中国临床研究》 CAS 2023年第5期741-745,共5页

脓毒症发病机制复杂,早期伴随促炎-抗炎机制的出现,会导致过度炎症和免疫抑制,甚至出现长期的免疫紊乱。随着对脓毒症研究的深入,越来越多的证据表明,免疫抑制是脓毒症的重要特征。虽然脓毒症患者免疫抑制的证据越来越多,但脓毒症是如... 脓毒症发病机制复杂,早期伴随促炎-抗炎机制的出现,会导致过度炎症和免疫抑制,甚至出现长期的免疫紊乱。随着对脓毒症研究的深入,越来越多的证据表明,免疫抑制是脓毒症的重要特征。虽然脓毒症患者免疫抑制的证据越来越多,但脓毒症是如何影响机体免疫功能,以及脓毒症的免疫抑制对免疫细胞影响的研究还处于初级阶段。本篇综述将聚焦近年来对脓毒症发病机制的研究,为其临床防治提供理论依据。 展开更多

关键词 脓毒症 过度炎症 免疫抑制 细胞凋亡 自噬 表观遗传 免疫耐受

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脓毒症免疫抑制与免疫刺激治疗的研究进展 被引量：35

9

作者 何雪梅 薄禄龙 姜春玲 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1202-1205,共4页

免疫抑制是脓毒症病理生理机制的重要环节,是导致脓毒症患者后期死亡的主要原因。脓毒症导致的免疫抑制逐渐已被医学界深入认识,其机制涉及免疫细胞凋亡、自噬、细胞代谢重编程、内毒素耐受、中枢神经系统调控以及表观遗传学调控等。积... 免疫抑制是脓毒症病理生理机制的重要环节,是导致脓毒症患者后期死亡的主要原因。脓毒症导致的免疫抑制逐渐已被医学界深入认识,其机制涉及免疫细胞凋亡、自噬、细胞代谢重编程、内毒素耐受、中枢神经系统调控以及表观遗传学调控等。积极调理严重抑制的免疫系统,重建机体免疫平衡状态是改善脓毒症患者预后的关键。在监测免疫状态的条件下,采用胸腺肽α1、-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-7(IL-7)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及抗程序性死亡受体1(PD-1)抗体等进行免疫增强治疗,有望成为脓毒症治疗的新策略。 展开更多

关键词 脓毒症 免疫抑制 凋亡 自噬 细胞代谢 治疗策略

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脓毒症相关免疫抑制:监测与挑战 被引量：3

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作者 薛明 徐静媛 +2 位作者 刘玲 黄英姿 邱海波 《中华重症医学电子杂志》 2016年第3期-,共5页

脓毒症相关免疫抑制是脓毒症患者发生院内获得性感染或死亡的重要原因。脓毒症相关免疫抑制在感染早期即可能发生,主要表现为免疫细胞功能下降,抑制性细胞、凋亡比例增加。及时对脓毒症相关免疫抑制的发生进行监测,有助于全面评价患者病... 脓毒症相关免疫抑制是脓毒症患者发生院内获得性感染或死亡的重要原因。脓毒症相关免疫抑制在感染早期即可能发生,主要表现为免疫细胞功能下降,抑制性细胞、凋亡比例增加。及时对脓毒症相关免疫抑制的发生进行监测,有助于全面评价患者病情,指导免疫调节治疗,从而改善患者的预后。本文就脓毒症相关免疫抑制监测的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 脓毒症 免疫抑制 抗原提呈细胞 T淋巴细胞 细胞凋亡

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脓毒症中树突状细胞作用及其变化的研究进展 被引量：1

11

作者 邹云 李金宝 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2013年第6期568-570,574,共4页

背景 脓毒症是指感染和创伤等原因引起的微生物进入人体诱发剧烈的全身炎症反应,并引起组织器官继发性损伤,是重症监护室（ICU）主要死亡原因之一. 目的 阐述树突状细胞（dendritic cells,DCs）在脓毒症过程中的变化,从而体现出DCs在脓... 背景 脓毒症是指感染和创伤等原因引起的微生物进入人体诱发剧烈的全身炎症反应,并引起组织器官继发性损伤,是重症监护室（ICU）主要死亡原因之一. 目的 阐述树突状细胞（dendritic cells,DCs）在脓毒症过程中的变化,从而体现出DCs在脓毒症中起到的关键作用. 内容 DCs功能障碍是脓毒症免疫抑制的主要原因之一,脓毒症中DCs数量减少,并且以未成熟DCs为主,导致其吞噬抗原的能力减弱；脓毒症小鼠中大多脾脏DCs以成熟形态存但是其分泌细胞因子白细胞介素（interleukin,IL）10和IL-12失衡；脓毒症中DCs刺激T细胞增殖的能力减弱.以上所有变化导致机体不能对外来病原体发生免疫应答,导致机体处于免疫抑制状态. 趋势 增加脓毒症中树突状细胞的数目,改善脓毒症中树突状细胞递呈抗原,分泌细胞因子的能力可能成为治疗脓毒症的潜在靶点之一. 展开更多

关键词 脓毒症 树突状细胞 免疫抑制 凋亡

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核糖体自噬对脂多糖诱导树突细胞凋亡的影响

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作者 郑丽玉 姚人骐 +2 位作者 董宁 吴瑶 姚咏明 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1334-1340,共7页

目的探讨脂多糖(LPS)刺激下NUFIP-1介导核糖体自噬在树突细胞(DCs)凋亡中的作用及意义。方法将培养的树突细胞系DC2.4分为空白对照组及LPS刺激6、12、24、48、72 h组(n=5),LPS各亚组加入1μg/mL LPS培养相应时间。采用Western blot检测... 目的探讨脂多糖(LPS)刺激下NUFIP-1介导核糖体自噬在树突细胞(DCs)凋亡中的作用及意义。方法将培养的树突细胞系DC2.4分为空白对照组及LPS刺激6、12、24、48、72 h组(n=5),LPS各亚组加入1μg/mL LPS培养相应时间。采用Western blot检测各组细胞NUFIP-1及自噬相关蛋白p62和LC3B表达水平,激光共聚焦显微镜检测NUFIP-1在细胞中的表达与定位及其分别与Lyso-tracker、LC3B共定位情况。将载有沉默空载体NS及沉默慢病毒载体NUFIP-1 siRNA感染DC2.4(n=3),以1μg/mL LPS刺激24 h,应用流式细胞分析术检测细胞凋亡情况,并采用Western blot检测凋亡相关蛋白包括胱天蛋白酶(cleaved-caspase-3)和Bcl-2表达水平。多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA),采用LSD-t法进一步进行组间两两比较。以P<0.05为差异有统计学意义。结果Western blot结果提示,LPS刺激不同时间(6、12、24、48、72 h)后DC2.4中NUFIP-1蛋白表达水平呈现先升高后下降趋势,其中LPS 24 h组NUFIP-1表达水平显著高于空白对照组[空白对照组:(0.6786±0.0820);LPS 24 h组:(1.4830±0.1170),P<0.01]。同时,LPS 24 h组p62表达水平显著低于空白对照组[空白对照组:(0.9087±0.1235);LPS 24 h组:(0.3113±0.5571),P<0.01]。LPS 24 h组LC3B-I向LC3B-Ⅱ的转化显著高于空白对照组[空白对照组:(0.5542±0.1248);LPS 24 h组:(2.5310±0.3119),P<0.01]。激光共聚焦显微镜观察显示,NUFIP-1主要定位于细胞核及核周,LPS刺激后其荧光强度于6 h至24 h呈时间依赖性增强,而刺激48、72 h明显减弱。同时,NUFIP-1与Lyso-tracker及LC3B的共定位较空白对照组显著增强。采用慢病毒感染技术感染NUFIP-1 siRNA可显著下调DC2.4 NUFIP-1表达水平,与空白对照组及空载体组比较分析,差异有统计学意义[空白对照组:(0.6627±0.1707);空载体组:(0.6966±0.1107);siRNA组:(0.1428±0.0296),P<0.05]。流式细胞分析术显示,NUFIP-1 siRNA感染组在LPS刺激后较空白对照LPS 24 h组及空载体LPS 24 h组DC2.4凋亡率显著升高[空白对照LPS 24 h组:(47.91%±1.006%);空载体LPS 24 h组:(70.26%±1.011%);siRNA LPS 24 h组:(80.23%±2.094%),P<0.01]。Western blot分析进一步证实,NUFIP-1 siRNA感染组相较空白对照组及空载体组在LPS刺激下DC2.4凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3表达显著增强[空白对照LPS 24 h组:(0.4748±0.0876);空载体LPS 24 h组:(0.2849±0.0418);siRNA LPS 24 h组:(0.9733±0.0525),P<0.01],抗凋亡蛋白Bcl-2表达则明显下调[空白对照LPS 24 h组:(0.7810±0.0490);空载体LPS 24 h组:(0.8292±0.0729);siRNA LPS 24 h组:(0.3957±0.0838),P<0.05]。结论LPS刺激后DC2.4中NUFIP-1介导核糖体自噬明显活化,且对DC2.4凋亡具有显著保护效应。 展开更多

关键词 NUFIP-1 核糖体自噬 脂多糖 脓毒症 免疫功能紊乱 细胞凋亡 树突细胞 免疫抑制

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