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腺病毒介导的靶向性Akt2 shRNA抑制胃癌SGC-7901细胞侵袭的体外研究
1
作者 王平 阮红芳 楼健颖 《实用肿瘤杂志》 CAS 2013年第2期158-161,共4页
目的构建靶向Akt2基因的腺病毒介导的shRNA,观察其转染胃癌SGC-7901细胞后对胃癌细胞侵袭能力的影响。方法构建Akt2基因的靶向性shRNA腺病毒载体,同时将空载腺病毒(pEGFP,空载体组)分别转染SGC-7901细胞。实验分为对照组、空载体组和Akt... 目的构建靶向Akt2基因的腺病毒介导的shRNA,观察其转染胃癌SGC-7901细胞后对胃癌细胞侵袭能力的影响。方法构建Akt2基因的靶向性shRNA腺病毒载体,同时将空载腺病毒(pEGFP,空载体组)分别转染SGC-7901细胞。实验分为对照组、空载体组和Akt2 mRNA组。运用实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法比较Akt2表达的差异;用Transwell检测细胞的侵袭能力。结果与对照组比较,Akt2 shRNA组Akt2 mRNA和蛋白的表达分别是对照组的0.26倍和0.31倍(P<0.05),对照组与空载组无明显差异(P>0.05);Akt2表达下降后,穿透基底膜的细胞数下降>50%。结论 Akt2靶向shRNA能有效抑制胃癌SGC-7901细胞中Akt2的表达,并抑制胃癌细胞的体外侵袭能力。靶向Akt2基因有可能成为治疗胃癌的新途径。 展开更多
关键词 胃肿瘤 病理学 rna干扰 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 遗传学 腺病毒科 遗传学 转染 基因表达调控 肿瘤 肿瘤侵润 肿瘤细胞 培养的
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沉默乙酰肝素酶对人胃癌细胞侵袭迁移能力的影响 被引量：12
2
作者 马秀梅 王栓柱 +1 位作者 于宏 怀娜 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期924-928,共5页
目的:探讨RNA干扰沉默乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因表达对人胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移的影响。方法:根据人HPA基因序列转录RNA的位置及小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,设计了4个靶位点,并构建了4个分别针对靶位... 目的:探讨RNA干扰沉默乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因表达对人胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移的影响。方法:根据人HPA基因序列转录RNA的位置及小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,设计了4个靶位点,并构建了4个分别针对靶位点的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的质粒表达载体,同时合成了阴性和阳性对照质粒表达载体。采用阳离子脂质体法将以上质粒转染入人胃癌SGC-7901细胞,分别采用RT-PCR和Western印迹法检测转染前后HPA mRNA和蛋白表达的变化,选出对HPA沉默效果最佳的质粒,再应用Transwell小室基质侵袭实验和划痕损伤实验分别研究HPA表达沉默后对人胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:质粒载体pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085沉默人胃癌SGC-7901细胞HPA mRNA和蛋白表达的效果最好。pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085转染组中穿透Transwell小室基质的SGC-7901细胞数(289.90±18.11)明显高于对照组(44.00±15.22)(P<0.05),SGC-7901细胞的迁移距离在48、72和96h内pGPU6/GFP/Neo-HPA-1085转染组明显低于对照组(P<0.05)。结论:RNA干扰技术可沉默人胃癌SGC-7901细胞中HPA mRNA和蛋白表达,从而抑制SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力。HPA可能是治疗胃癌侵袭和转移的一个新靶点。 展开更多
关键词 胃肿瘤 基因沉默 rna干扰 乙酰肝素酶 肿瘤侵润
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神经导向分子Semaphorin 5A在人胃癌侵袭和转移过程中作用的研究
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作者 潘国庆 张翔凌 +2 位作者 任俊宇 陆建波 付红梅 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期103-107,共5页
目的探讨神经轴突导向分子Semaphorin5A表达与胃癌患者临床病理特征的关系及其在胃癌侵袭和转移过程中的作用。方法使用免疫组织化学方法检测Semaphorin5A在171例不同性别、年龄、组织学类型和TNM分期胃癌患者组织中的表达。使用Wester... 目的探讨神经轴突导向分子Semaphorin5A表达与胃癌患者临床病理特征的关系及其在胃癌侵袭和转移过程中的作用。方法使用免疫组织化学方法检测Semaphorin5A在171例不同性别、年龄、组织学类型和TNM分期胃癌患者组织中的表达。使用Western印迹方法检测Semaphorin5A在具转移能力的胃癌细胞株（SGC7901和MKN-45）和无转移能力的胃癌细胞株（SNU-1和AGS）中的表达情况。运用RNA干扰技术构建Semaphorin5A—siRNA表达载体并转染胃癌细胞株SGC7901，建立Semaphorin5A稳定低表达的胃癌细胞株，经细胞粘附实验、划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测Semaphorin5A基因沉默后对胃癌细胞粘附、运动和侵袭的影响。结果Semaphorin5A表达水平与胃癌分化程度（x2=6．32，P=0．01）、胃癌淋巴结转移（x2=7．68，P=0．01）和远处转移（x2=13．6，P=0．00）有关，与患者年龄（x2=0．21，P=0．79）、性别（x2=1．79，P=0．15）和胃癌浸润深度无关（x2=1．34，P=0．55）。SGC7901和MKN-45细胞株中Semaphorin5A的表达水平明显高于SNU一1和AGS细胞株（P〈0．01）。Semaphorin5A基因表达沉默可抑制胃癌细胞的粘附、运动和侵袭能力。结论Semaphorin5A可能通过提高胃癌细胞粘附、运动和侵袭能力，在胃癌侵袭和转移过程中发挥促进作用。 展开更多
关键词 信号素类 胃肿瘤 基因表达 rna干扰 肿瘤浸润 肿瘤转移 细胞黏附
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