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从健康人外周血中建立异种抗原特异性的T细胞系初探 被引量：3
1
作者 谢晋 李宁丽 +2 位作者 张冬青 沈佰华 周光炎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期315-317,共3页
目的 :为了探讨异种器官移植中T细胞参与的免疫排斥机理 ,从健康人外周血中试行建立识别猪淋巴细胞抗原特异性的T细胞系方法研究。方法 :通过照光致弱的猪外周血单个核细胞反复刺激人的T淋巴细胞 ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞。... 目的 :为了探讨异种器官移植中T细胞参与的免疫排斥机理 ,从健康人外周血中试行建立识别猪淋巴细胞抗原特异性的T细胞系方法研究。方法 :通过照光致弱的猪外周血单个核细胞反复刺激人的T淋巴细胞 ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞。结果 :获得 2株为TCRαβ+CD3+CD8+细胞 ,另 1株为TCRαβ+CD3+CD4+细胞。结论 :健康人外周血中有识别异种抗原特异性的T细胞系 。 展开更多
关键词 异种细胞抗原 异种移植 t细胞系
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建立猪MHCⅠ类抗原特异性人T细胞系的探讨 被引量：1
2
作者 唐军 张冬青 +4 位作者 沈佰华 周洪 周芸 柳子星 周光炎 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期337-339,共3页
目的　建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法　以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR... 目的　建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法　以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞 ,FACS作表型初步分析。结果　初步测定健康人外周血版纳猪SLAⅠ类P1分子特异性T细胞反应频率约 6 .67× 1 0 - 7,所建 4个T细胞系表型均为TCRαβ+ ,其中 3株以CD4+ 为主 ,1株以CD8+ 为主。结论　利用E .coli表达的纯蛋白抗原可建立间接识别版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原 基因表达 t细胞系 间接识别 器官移植 急性细胞性排斥
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人单核细胞系U_（937）和T细胞系HSB_2细胞的HSV－1感染 被引量：1
3
作者 季晓辉 姚坤 +1 位作者 李焕娣 周瑶玺 《中国病毒学》 CSCD 1995年第3期209-214,共6页
用ＨＳＶ－１接种人单核细胞传代株Ｕ＿（９３７）和Ｔ淋巴细胞传代株ＨＳＢ＿２细胞，通过对病毒滴度、细胞增殖与病变、病毒抗原表达及病毒ＤＮＡ的动态观察，研究了ＨＳＶ－１感染两种细胞的特点。结果发现接种病毒后，Ｕ（９３７）... 用ＨＳＶ－１接种人单核细胞传代株Ｕ＿（９３７）和Ｔ淋巴细胞传代株ＨＳＢ＿２细胞，通过对病毒滴度、细胞增殖与病变、病毒抗原表达及病毒ＤＮＡ的动态观察，研究了ＨＳＶ－１感染两种细胞的特点。结果发现接种病毒后，Ｕ（９３７）细胞仅允许病毒短时间低滴度复制，培养上清中病毒滴度在１２天内降至测不出水平，细胞经过１～２周后增殖受抑、死亡增多，然后又逐渐恢复；用ＬＰＳ持续刺激则能提高病毒感染滴度，延长感染时间，形成短期持续感染。ＨＳＢ＿２细胞允许病毒复制至较高滴度，呈现急性杀细胞性感染；用ＰＨＡ持续刺激也不改变细胞感染的特点。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 感染 单核细胞系 t细胞系
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人树突状细胞的成熟状态体外对Glatiramer acetate特异的T细胞系的调控作用(英文)
4
作者 曹孟德 Alessandra Sanna 肖保国 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期409-415,共7页
为了了解树突状细胞 (DC)成熟状态对Glatirameracetate(GA)特异的T细胞分化的影响 ,在体外条件下 ,分析了从多发性硬化症 (MS)病人外周血单个核细胞诱导的成熟与未成熟的树突状细胞对来自多发性硬化症病人的GA特异的T细胞系增殖及细胞... 为了了解树突状细胞 (DC)成熟状态对Glatirameracetate(GA)特异的T细胞分化的影响 ,在体外条件下 ,分析了从多发性硬化症 (MS)病人外周血单个核细胞诱导的成熟与未成熟的树突状细胞对来自多发性硬化症病人的GA特异的T细胞系增殖及细胞因子产生的影响。结果显示 ,体外条件下 ,从MS病人外周血的单个核细胞易于诱导GA抗原特异的T细胞系 (TCL) ;5 μg/ml的脂多糖 (LPS)在 2 4小时内可有效诱导DC的成熟。同未成熟的DC相比 ,成熟的DC更能有效地刺激GA抗原特异的TCL的增殖 ;GA抗原特异的TCL产生高水平的IL 2 ,IL 4 ,IFN γ ,IL 10及低水平的IL 6 ;成熟DC能促进GA抗原特异的TCL的IL 6和IL 10的分泌 ,但下调IL 2 ,IL 4及IFN γ的产生。结论 :DC的成熟状态调控TCL的增殖及细胞因子的产生。 展开更多
关键词 多发性硬化症 树突状细胞 Glatiramer acetate特异的t细胞系
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Ⅱ型胶原特异性T细胞系与关节炎发病机制的研究 被引量：25
5
作者 奚正德 王利 +5 位作者 柏峻 张继英 沈佰华 余奇文 张雁云 张冬青 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2003年第9期527-530,T001,共5页
目的　建立Ⅱ型胶原特异性T细胞系 ,研究其对关节炎的诱导作用。方法　通过用弗氏完全佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原 (CCⅡ )皮内免疫注射诱导Wistar大鼠胶原诱导性关节炎 (CIA)。取CIA大鼠肠系膜淋巴细胞在体外用CCⅡ刺激扩增、建立CCⅡ反应性... 目的　建立Ⅱ型胶原特异性T细胞系 ,研究其对关节炎的诱导作用。方法　通过用弗氏完全佐剂乳化的鸡Ⅱ型胶原 (CCⅡ )皮内免疫注射诱导Wistar大鼠胶原诱导性关节炎 (CIA)。取CIA大鼠肠系膜淋巴细胞在体外用CCⅡ刺激扩增、建立CCⅡ反应性T细胞系。用3 H TdR掺入试验和流式细胞术分别测定其克隆扩增情况和表型格局。观察T细胞系过继转输后Wistar大鼠关节炎的发生情况 ,同时通过肉眼观察和组织化学法鉴定受体大鼠踝关节的病理特征 ;并用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定血清中抗CCⅡ抗体。结果　成功建立T细胞系。通过用荧光素标记抗体作细胞表型分析显示 :所建细胞系 98 2 %为T细胞 ,其中 89 7%为CD4 + T细胞。过继转输试验结果显示 :当注入细胞为 5× 1 0 7时可导致 5 0 %大鼠产生关节炎 ,抗CCⅡ抗体也较对照组明显升高。结论　成功建立T细胞系 ;T细胞系转移关节炎的结果提示 :T细胞在CIA发病机制中具有重要作用。 展开更多
关键词 Ⅱ型胶原特异性t细胞系 关节炎 发病机制 研究 t淋巴细胞
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髓鞘碱性蛋白(MBP)特异的Wistar大鼠T细胞系的建立 被引量：2
6
作者 周璟 马宝骊 +4 位作者 张家胜 王利 张继英 柏峻 韩晓枫 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期490-493,共4页
目的　建立特异的大鼠T细胞系 ,为T细胞疫苗的研制打下基础。方法　采用足垫皮内注射豚鼠全脊髓匀浆 (GPSCH) 福氏完全佐剂 (CFA)混合乳剂和百日咳疫苗 ,诱导Wistar大鼠EAE模型。腹股沟淋巴结细胞经豚鼠髓鞘碱性蛋白 (GPMBP)反复刺激 ,... 目的　建立特异的大鼠T细胞系 ,为T细胞疫苗的研制打下基础。方法　采用足垫皮内注射豚鼠全脊髓匀浆 (GPSCH) 福氏完全佐剂 (CFA)混合乳剂和百日咳疫苗 ,诱导Wistar大鼠EAE模型。腹股沟淋巴结细胞经豚鼠髓鞘碱性蛋白 (GPMBP)反复刺激 ,3H TdR掺入法筛选针对GPMBP特异增殖的T细胞。FACS检测T细胞表型。RT PCR测定T细胞的细胞因子格局。结果　一次性足垫皮内注射GPSCH CFA混合乳剂可诱导Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)模型 ,并证实了同时注射百日咳疫苗能提高发病率和发病程度。EAE大鼠脑、脊髓组织HE染色见大量淋巴细胞浸润 ,在血管周围形成淋巴鞘 ,但未见脱髓鞘改变。T细胞对GPMBP呈特异性增殖 ,为CD4 +表型。RT PCR结果显示T细胞IL 2和IFN γmRNA表达水平较高 ,TNF α亦低水平表达。结论　Wistar大鼠可用于制备EAE动物模型。GPMBP特异性T细胞系为CD4 +表型 ,呈TH1类细胞因子格局。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 豚鼠 髓鞘碱性蛋白 t细胞系
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人特异性T细胞系间接识别猪抗原 被引量：2
7
作者 沈佰华 谢晋 +3 位作者 李宁丽 张冬青 周洪 周光炎 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期210-212,共3页
SLA (swineleukocyteantigen )特异性CD4+T细胞系和自身APC以及猪PBMC共同孵育时 ,T细胞增殖反应很强 ,而同仅有自身APC或猪PBMC刺激时的T细胞增殖有显著差异。提示抗原特异性CD4+T细胞系以间接途径识别SLA抗原。该识别能被抗人CD4和HL... SLA (swineleukocyteantigen )特异性CD4+T细胞系和自身APC以及猪PBMC共同孵育时 ,T细胞增殖反应很强 ,而同仅有自身APC或猪PBMC刺激时的T细胞增殖有显著差异。提示抗原特异性CD4+T细胞系以间接途径识别SLA抗原。该识别能被抗人CD4和HLAII类抗体阻断 ,而抗SLAII类抗体阻断作用很弱 ,表明HLAII类分子在间接识别中起重要作用 ,这一结果不同于直接从外周血中分离的未经抗原致敏的T细胞。直接识别猪APC递呈的抗原。有可能异种移植初期以直接识别为主导 。 展开更多
关键词 间接识别 t细胞系 异种反应SLA HLA
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多发性硬化症患者APL特异性T细胞系免疫生物学特性分析 被引量：1
8
作者 张冬青 李宁丽 +5 位作者 余奇文 马安伦 张勇 周光炎 JackPAntel YufenQin 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期214-216,共3页
本文报告采用髓鞘碱性蛋白 (MBP )的修饰性肽段配体 (APL )对多发性硬化症 (MS )患者治疗 1年后 ,在细胞克隆水平分析T细胞免疫应答的结果。从 5例患者外周血淋巴细胞中建立了 31个APL特异性T细胞系。首先测定患者和健康人体内APL特异性... 本文报告采用髓鞘碱性蛋白 (MBP )的修饰性肽段配体 (APL )对多发性硬化症 (MS )患者治疗 1年后 ,在细胞克隆水平分析T细胞免疫应答的结果。从 5例患者外周血淋巴细胞中建立了 31个APL特异性T细胞系。首先测定患者和健康人体内APL特异性T细胞的反应频率 ,发现患者中平均为 31 6%± 2 3 7% ,而 10例对照者中仅为 5 %± 2 %。 31株APL反应性T细胞系对APL抗原表现出高度的增殖特异性。同时发现 ,APL特异性T细胞系与MBP优势肽段 (氨基酸 83 99)发生交叉反应的比例 ,患者中为 19 4% (6/ 31) ,而对照组中仅有 4 3% (1/ 2 3)。未发现与MBP优势肽段 83 99有交叉反应。来自MS治疗组的APL特异性T细胞系中 ,67%分泌IL 5和 /或IL 13,表明这些T细胞系具有Th2细胞特性。以上结果提示 ,这一修饰性MBP多肽作为一种治疗性疫苗 ,有可能在体内通过诱导Th2调节细胞 ,下调自身反应性T细胞介导的免疫损伤 ,发挥治疗作用。 展开更多
关键词 MBP APL特异性t细胞系 多发性硬化症 免疫生物学
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小鼠白念珠菌抗原特异性T细胞系的建立和TH1、TH2细胞因子的产生 被引量：1
9
作者 胡雁 章小缓 +1 位作者 Camile S Farah Robert B Ashman 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期43-44,共2页
在念珠菌感染时，TH1细胞分泌IL-12、IFN-γ，可激活或提高中性粒细胞和巨噬细胞抗念珠菌的能力，而TH2细胞分泌的IL-4和IL-10对机体的抗念珠菌有抑制作用。T细胞产生的这些细胞因子对宿主抗念珠菌有重要意义。动物实验证实小鼠对全身... 在念珠菌感染时，TH1细胞分泌IL-12、IFN-γ，可激活或提高中性粒细胞和巨噬细胞抗念珠菌的能力，而TH2细胞分泌的IL-4和IL-10对机体的抗念珠菌有抑制作用。T细胞产生的这些细胞因子对宿主抗念珠菌有重要意义。动物实验证实小鼠对全身和皮肤-黏膜念珠菌感染的敏感程度与其自身的TH1和TH2细胞因子的平衡密切相关。但是，鉴于这些研究之间尚存在着很多矛盾或争议的观点，例如，在小鼠实验中发现，给已感染念珠菌的小鼠注射重组IFN-γ能提高小鼠的生存能力和巨噬细胞在体外的杀念珠菌的能力。但也有实验表明，小鼠在接受了IFN-γ后，对白念珠菌的敏感性增加。我们在细胞因子研究方面仍有大量的工作要做。 展开更多
关键词 tH2细胞因子 白念珠菌 小鼠实验 t细胞系 tH1 抗原特异性 重组IFN-γ 念珠菌感染
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稳定表达人乳头瘤病毒16型E7癌基因HaCaT细胞系的建立及其研究
10
作者 张晓 李伟 +4 位作者 王传新 杨晓静 郑桂喜 张建 阚士锋 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1297-1300,共4页
宫颈癌是世界第二大妇女常见肿瘤。大量流行病学和分子生物学研究证实高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV），尤其是HPV16型在宫颈癌发生、发展进程中起关键作用。HPV16型E7基因编码蛋白与细胞转化和病毒复制的调控有关，... 宫颈癌是世界第二大妇女常见肿瘤。大量流行病学和分子生物学研究证实高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV），尤其是HPV16型在宫颈癌发生、发展进程中起关键作用。HPV16型E7基因编码蛋白与细胞转化和病毒复制的调控有关，在维持转化组织恶性表型的过程中发挥重要作用。本研究选择与宫颈上皮细胞相似的非肿瘤性人永生化表皮细胞（HaCaT）作为研究对象， 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16型 t细胞系 稳定表达 E7 癌基因 高危型人乳头瘤病毒 HPV16型 宫颈癌发生
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识别猪SLA的特异性人T细胞系TCR BV基因取用格局和CDR3结构多样性分析
11
作者 谢晋 李宁丽 +3 位作者 张冬青 沈佰华 张勇 周光炎 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期136-139,共4页
不同T细胞克隆TCR分子的序列不同 ,所识别的抗原特异性也不同。其中第三互补决定区 (CDR3)变异最大 ,是TCR主要的抗原结合部位。本文采用荧光标记半定量PCR技术 ,用DNA测序仪作程序分析 ,了解猪细胞抗原致敏前后的人T细胞群和 5个T细胞... 不同T细胞克隆TCR分子的序列不同 ,所识别的抗原特异性也不同。其中第三互补决定区 (CDR3)变异最大 ,是TCR主要的抗原结合部位。本文采用荧光标记半定量PCR技术 ,用DNA测序仪作程序分析 ,了解猪细胞抗原致敏前后的人T细胞群和 5个T细胞系 2 4个TCRBV基因家族取用格局 ,并以TCRα链C区的基因片断作为内参对取用情况作定量估计。发现首次抗原致敏后培养 2周的T细胞除了BV2 4、BV8和BV10未能检测出 ,其它BV基因都有不同程度的取用。然而 ,5个细胞系的TCRBV基因呈现十分有限的取用格局 ,其中两个CD4+ T细胞系都取用BV12和BV14;3个CD8+ T细胞系中都优势取用BV1,有两个还取用BV19。CD4+ T细胞系和CD8+ T细胞系之间TCRBV无交叉取用 ,提示两类细胞识别的抗原表位存在差异。进一步用变性凝胶扫描分析上述T细胞系取用TCRBV中的CDR3的多样性 ,发现未经抗原致敏的T细胞BV的CDR3结构为多峰型且呈正态分布 ,表明涉及多种结构不同的细胞克隆 ;而抗原特异性T细胞系CDR3除了一个CD8+ T细胞系BV1有两个主峰外其它无例外地都显示单峰或者仅一个主峰 ,这从另一个角度证明建系T细胞的单克隆性。 展开更多
关键词 t细胞系 t细胞受体 BV基因 CDR3 异种移植
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用染色体畸变研究AT细胞系辐射敏感性和适应性反应
12
作者 杜维霞 傅颖华 +1 位作者 曹建平 陈德清 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期225-227,共3页
目的探讨毛细血管扩张运动共济失调症(ataxiatelangiectasia,AT)细胞系的辐射敏感性和对低剂量辐射能否诱导细胞遗传学适应性反应。方法用2cGy60Coγ射线预先照射进入G1期的AT5B1VA(AT)细胞和GM0639(GM)细胞,培养6h后再照射1.0Gy或3.0Gy... 目的探讨毛细血管扩张运动共济失调症(ataxiatelangiectasia,AT)细胞系的辐射敏感性和对低剂量辐射能否诱导细胞遗传学适应性反应。方法用2cGy60Coγ射线预先照射进入G1期的AT5B1VA(AT)细胞和GM0639(GM)细胞,培养6h后再照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线,分析染色体畸变。结果G1期的GM细胞在预照射2cGy60Coγ射线的诱导剂量后能非常显著地降低随后照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发的染色体畸变率,染色体畸变的观察值非常显著地低于预期值(P<0.001),而对AT细胞则没有观察到这种现象,染色体畸变的观察值与预期值差异无统计学意义(P>0.05);另外,1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发AT细胞的各种畸变率(包括着丝粒畸变、无着丝粒畸变和染色单体型畸变)均显著地高于GM细胞(P<0.001)。结论低剂量电离辐射不能诱导AT细胞产生细胞遗传学适应性反应;AT细胞对电离辐射诱发染色体畸变高度敏感,可能是由于不能正确修复DNA双链断裂的结果。 展开更多
关键词 适应性反应 辐射敏感性 t细胞系 ^60Coγ射线 运动共济失调症 低剂量电离辐射 DNA双链断裂 细胞遗传学 Γ射线诱发 At细胞 毛细血管扩张 染色体畸变率 诱导剂量 高度敏感 辐射诱发 G1期 M细胞 着丝粒 辐射能 再照射 统计学
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自身免疫病患者外周血γδT细胞系的功能研究 被引量：6
13
作者 李静 何维 胡愉 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期57-60,共4页
目的　研究自身免疫病人外周血TCRγδ细胞系在微生物及寄生虫抗原刺激下细胞因子的分泌情况。方法　以TCRγδ单克隆抗体固相法体外选择性扩增获得7例胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)及3例类风湿性关节炎(RA)病人外周血TCRγδ细胞系,平均纯... 目的　研究自身免疫病人外周血TCRγδ细胞系在微生物及寄生虫抗原刺激下细胞因子的分泌情况。方法　以TCRγδ单克隆抗体固相法体外选择性扩增获得7例胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)及3例类风湿性关节炎(RA)病人外周血TCRγδ细胞系,平均纯度可达(847±59)%。在体外培养条件下,以植物血凝素(PHA)、结核分枝杆菌(M.tb)、阴道毛滴虫(TV)、人类6型疱疹病毒(HHV6)刺激24h及48h后,测定细胞因子分泌情况。结果　HHV6刺激组IL2的分泌量显著高于其它各实验组;M.tb及HHV6的刺激可导致IFNγ的高产量。TNFα的产生未见有显著性差异。结论　γδT细胞可能通过细胞因子的产生来影响自身免疫病的发生与发展。 展开更多
关键词 自身免疫病 外周血 tCRγδt细胞系
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CpG岛岸甲基化调控人T细胞系中lag3表达 被引量：2
14
作者 郝书民 仇超 +2 位作者 张林霞 张晓燕 徐建青 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期491-495,共5页
目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（1ympho—cyteactivationgene3，lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平，选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分... 目的探讨表观遗传因素DNA甲基化对人T细胞系中淋巴细胞活化基因3（1ympho—cyteactivationgene3，lag3）表达的影响。方法检测不同T细胞系中lag3的表达水平，选定lag3表达高低相对的细胞系组成研究系统。分析lag3启动子和转录区的CpG分布以确定潜在表观调控区（CpG岛和CpG岛岸），分别测定各T细胞系中相关区段的DNA甲基化水平。用5-杂氮胞苷（5-Aza．2＇-deoxycytidine，5-Aza-2’-dc）对细胞系做去甲基化处理，检测z0邸表达水平及DNA甲基化水平的变化。结果lag3表达水平在J．CaM1．6和CEM细胞中极低，在JurkatE6-1细胞中相对较高。不同细胞系中，CpG岛均高度甲基化；CpG岛岸在J．CaM1．6和CEM细胞中高度甲基化，但在JurkatE6—1细胞中甲基化水平较低。5-Aza-2’-dc处理后，J．CaM1．6和CEM细胞中lag3mRNA和蛋白质的表达均显著上调，且伴随CpG岛岸去甲基化；而JurkatE6-1细胞中，未见CpG岛岸甲基化和lag3表达水平的显著变化。5-Aza-2＇-dc处理不能使CpG岛去甲基化。结论CpG岛岸的甲基化与去甲基化是lag3转录的表观调控开关。 展开更多
关键词 DNA甲基化 CpG岛岸 lag3 人t细胞系
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苹果酸舒尼替尼抑制膀胱癌T24细胞系的体外增殖 被引量：4
15
作者 文进 李汉忠 +2 位作者 纪志刚 严维刚 石冰冰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第9期988-990,共3页
目的探讨苹果酸舒尼替尼对人膀胱癌T24细胞系体外增殖的影响。方法取人膀胱癌T24细胞系悬液,分别加入浓度为0.625、1.25、2.5、5、10和20μmol/L的苹果酸舒尼替尼,分别于24、48及72 h进行处理,用细胞毒抑制实验(MTT法)检测药物对其生长... 目的探讨苹果酸舒尼替尼对人膀胱癌T24细胞系体外增殖的影响。方法取人膀胱癌T24细胞系悬液,分别加入浓度为0.625、1.25、2.5、5、10和20μmol/L的苹果酸舒尼替尼,分别于24、48及72 h进行处理,用细胞毒抑制实验(MTT法)检测药物对其生长的影响。结果苹果酸舒尼替尼可浓度依赖地抑制人膀胱癌细胞系T24细胞增殖,当药物浓度>5μmol/L时,苹果酸舒尼替尼与顺铂比较,对T24细胞系具有更强的抑制作用(P<0.05)。这种抑制作用随着药物培育时间延长(24、48、72 h)而增强,表现为IC50值显著降低,但其抑制能力与顺铂比较无显著差别。结论苹果酸舒尼替尼可呈浓度和时间依赖地抑制膀胱癌T24细胞系增殖。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 舒尼替尼 t24细胞系
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稳定表达野生型和突变型DNA聚合酶β的NIH3T3细胞系的建立及其生长特性 被引量：2
16
作者 金戈 杨洪艳 +6 位作者 赵继敏 黄幼田 郑智敏 赵国强 赵勤 吴景兰 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第5期819-822,共4页
目的:建立稳定表达野生型及突变型DNA聚合酶β(polβ)的NIH3T3细胞系。方法:用脂质体转染法分别将野生型和突变型polβ真核表达载体pcDNA3.1-PW和pcDNA3.1-PM3转染入NIH3T3细胞,经G418筛选得到稳定转染细胞系。用RT-PCR、免疫印迹法检... 目的:建立稳定表达野生型及突变型DNA聚合酶β(polβ)的NIH3T3细胞系。方法:用脂质体转染法分别将野生型和突变型polβ真核表达载体pcDNA3.1-PW和pcDNA3.1-PM3转染入NIH3T3细胞,经G418筛选得到稳定转染细胞系。用RT-PCR、免疫印迹法检测转染细胞polβmRNA和POLB蛋白的表达水平,MTT法测转染细胞生长曲线,免疫组化法测增殖细胞核抗原(PCNA),并用流式细胞仪测细胞周期。结果与结论:成功建立了稳定表达野生型及突变型polβ的NIH3T3细胞系。野生型polβ对NIH3T3细胞生长无明显影响,突变型polβ则使NIH3T3细胞生长速度加快,细胞周期发生改变,细胞多被阻滞在S期。 展开更多
关键词 DNA聚合酶Β NIH3t3细胞系 细胞转染
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自身反应性T细胞系免疫生物学活性研究
17
作者 韩淑红 陈蕴涛 +4 位作者 吕平 朱晓辉 张玲 张岩 高晓明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期14-16,共3页
目的　探讨自身反应性T细胞系过继转移对受体小鼠免疫应答的影响 ,为在BXSB小鼠探索T细胞疫苗的可行性奠定基础。方法　应用体外扩增的自身反应性T细胞过继转移给同系小鼠体内 ;3H TdR掺入法检测细胞增殖 ;ELISA检测抗体和细胞因子水平... 目的　探讨自身反应性T细胞系过继转移对受体小鼠免疫应答的影响 ,为在BXSB小鼠探索T细胞疫苗的可行性奠定基础。方法　应用体外扩增的自身反应性T细胞过继转移给同系小鼠体内 ;3H TdR掺入法检测细胞增殖 ;ELISA检测抗体和细胞因子水平。结果　将自身反应性T细胞系过继转移到年轻未发病的同系小鼠体内可以诱导血清中自身抗体和外来抗原反应性抗体以及细胞因子IFN γ水平显著升高 ,可以降低受体小鼠对外来抗原 (OVA)体液免疫应答能力。结论　自身反应性T细胞的过继转移可以影响机体自身免疫应答和对外来抗原的体液免疫应答能力。 展开更多
关键词 自身反应性t细胞系 免疫生物学活性研究 BXSB鼠 系统性红斑狼疮
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建立高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系的研究 被引量：2
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作者 李雅慧 黎怀星 +2 位作者 吴丹 蔡东联 孙树汉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期892-894,共3页
目的:建立一个组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系。方法:(1)采用重组DNA技术将小鼠Retn基因的全长cDNA克隆到质粒pcDNA3的CMV启动子下面而获得一个能在真核细胞内组成性表达小鼠Resistin蛋白的表达载体pcDNA3-mRetn。(2)用电穿... 目的:建立一个组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系。方法:(1)采用重组DNA技术将小鼠Retn基因的全长cDNA克隆到质粒pcDNA3的CMV启动子下面而获得一个能在真核细胞内组成性表达小鼠Resistin蛋白的表达载体pcDNA3-mRetn。(2)用电穿孔转染和G418筛选等方法建立能组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系。(3)诱导细胞分化为脂肪细胞,并用实时荧光RT-PCR法分析这些脂肪细胞内Retn基因mRNA的水平。结果:构建了一个能在真核细胞内表达小鼠Retn基因的表达载体;建立了一个携带有pcDNA3-mRetn载体并组成性地高表达小鼠Retn基因的细胞系。结论:成功地建立了一个组成性地高表达小鼠Retn基因细胞系,为进一步研究Retn基因的功能和小鼠Resistin蛋白的获得奠定了基础。 展开更多
关键词 Resistin蛋白 Retn基因 基因表达 3t3-L1细胞系
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三氧化二砷与传统及新型药物协同抑制皮肤T细胞淋巴瘤细胞系增殖 被引量：2
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作者 李婵娟 郭姗琦 +4 位作者 夏冰 晋鑫 李晓武 屈福莲 张翼鷟 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期1269-1273,共5页
目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)与传统药物地塞米松(Dexamethasone,DXM)、依托泊苷(Etoposide,VP-16)、甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)和新型药物硼替佐米(Bortezomib,BTZ)、组蛋白去乙酰化酶抑制剂-辛二酰苯胺异羟肟酸(sube... 目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)与传统药物地塞米松(Dexamethasone,DXM)、依托泊苷(Etoposide,VP-16)、甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)和新型药物硼替佐米(Bortezomib,BTZ)、组蛋白去乙酰化酶抑制剂-辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilidehydroxamic acid,SAHA)联合对人皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞系Hut-78、Hut-102细胞的增殖抑制作用。方法:不同浓度的As2O3单药或与DXM/VP-16/MTX/BTZ/SAHA联合作用于Hut-78、Hut-102细胞48 h后,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,应用联合指数分析两药是否具有协同效应。结果:As2O3、DXM、VP-16、MTX、BTZ、SAHA单药对Hut-78、Hut-102细胞的增殖均具有显著的抑制作用,呈剂量依赖性,培养48h的半数抑制浓度分别为5μmol/L、500μg/L、2.5μg/L、1μg/L、10μmol/L、2.5μmol/L。As2O3与DXM/VP-16/MTX/BTZ/SAHA联合时具有协同效应,抗肿瘤作用更为显著。结论:As2O3单药及其与DXM/VP-16/MTX/BTZ/SAHA联合在体外可有效抑制CTCL细胞增殖。As2O3是一种很有前景的治疗CTCL的药物,As2O3与DXM/VP-16/MTX/BTZ/SAHA等传统或新型药物联合可为CTCL临床的治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 皮肤t细胞淋巴瘤细胞系 三氧化二砷 化疗药物 硼替佐米 组蛋白去乙酰化酶抑制剂-辛二酰苯胺异羟肟酸 药物协同作用
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人膀胱癌T_(24)细胞系产生IL-6的条件探讨
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作者 田志刚 张捷 +2 位作者 孙汭 张建华 崔正言 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期102-103,共2页
利用IL-6分泌细胞株(人膀胱癌T_(24)细胞),建立了最佳天然IL-6产生条件和IL-6超诱生方法,IL-6分泌量最大可达15 576±1042.3μ/ml。同时对T_(24)细胞连续培养和冻存后IL-6产生水平进行了观察,表明该细胞分泌IL-6的能力十分稳定。
关键词 t24细胞系 IL-6 膀胱肿瘤
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