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龙血素B通过P38MAPK信号通路调控MC3T3-E1成骨分化和骨形成的机制
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作者 李经堂 涂乐佳 +2 位作者 陈淼 魏鹏 周璟瑜 《医学理论与实践》 2024年第7期1081-1084,共4页
目的:探究龙血素B对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1细胞)成骨分化和骨形成的影响以及其通过P38MAPK信号通路调控成骨分化和骨形成的机制。方法:培养MC3T3-E1细胞,加入不同浓度(0、15、30、60、90、120μmol/L)龙血素B,采用CCK8法和... 目的:探究龙血素B对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1细胞)成骨分化和骨形成的影响以及其通过P38MAPK信号通路调控成骨分化和骨形成的机制。方法:培养MC3T3-E1细胞,加入不同浓度(0、15、30、60、90、120μmol/L)龙血素B,采用CCK8法和流式细胞术(FCM)检测不同时间(24h、48h、72h)MC3T3-E1细胞增殖能力和凋亡情况,确定龙血素B促MC3T3-E1细胞成骨最佳的药物浓度及作用时间。培养MC3T3-E1细胞并分为空白组(不作干预),龙血素B组(加入龙血素B共培养),龙血素B+阻断剂组(加入龙血素B和P38抑制剂SB203580共培养),进行干预实验;采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒测定各组细胞ALP活性,qRT-PCR法检测各组细胞骨桥蛋白(OPN)基因、骨钙素(OCN)基因、骨唾液蛋白(BSP)基因表达水平,茜素红染色法观察各组细胞骨形成能力。结果:龙血素B可促进MC3T3-E1细胞增殖并抑制其凋亡,效果与浓度和干预时间相关,在90μmol/L浓度下干预48h促MC3T3-E1细胞生长作用最强;干预结束后第1、3、5天,龙血素B组细胞ALP活性较空白组升高,龙血素B+阻断剂组细胞ALP活性较龙血素B组降低(P<0.05);龙血素B组细胞OPN、OCN、BSP基因表达水平较空白组升高,龙血素B+阻断剂组细胞OPN、OCN、BSP基因表达水平较龙血素B组降低(P<0.05);干预结束后第21天,龙血素B组细胞钙化结节区域面积较空白组增大,龙血素B+阻断剂组细胞钙化结节区域面积较龙血素B组减小(P<0.05)。结论:龙血素B可提高MC3T3-E1细胞增殖活性,并通过激活P38MAPK信号通路促进MC3T3-E1细胞成骨分化和骨形成。 展开更多
关键词 龙血素B P38MAPK信号通路 MC3t3-E1细胞 成骨分化 骨形成
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双膦酸盐修饰生长分化因子5促进MC3T3-E1细胞的成骨分化
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作者 李立斯 张成栋 +5 位作者 李小龙 叶姿妤 蒲超 杨在君 匙峰 肖东琴 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第3期373-379,共7页
背景:生长分化因子5作为骨形态发生蛋白的一员在软骨及骨组织修复领域表现出良好的应用潜力,增强生长分化因子5与骨组织的亲和力是提高蛋白使用效率的关键,因而开发具有骨靶向性的生长分化因子5蛋白具有重要意义。目的:利用双膦酸盐修... 背景:生长分化因子5作为骨形态发生蛋白的一员在软骨及骨组织修复领域表现出良好的应用潜力,增强生长分化因子5与骨组织的亲和力是提高蛋白使用效率的关键,因而开发具有骨靶向性的生长分化因子5蛋白具有重要意义。目的:利用双膦酸盐修饰生长分化因子5并探讨改性后蛋白对小鼠成骨前体细胞生长分化的影响。方法:采用化学交联法将生长分化因子5与帕米膦酸钠偶联,得到偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5,采用傅里叶变换红外光谱、圆二色谱对其基团及结构进行表征,利用ELISA试剂盒测定生长分化因子5与磷酸钙的结合量以及生长分化因子5的体外释放量,用于表征其体外骨靶向性。将生长分化因子5(对照组)、偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5(实验组)分别与成骨前体细胞MC3T3-E1共培养,以单独培养的细胞为空白对照,评价复合物对细胞增殖及分化等的影响。结果与结论:①红外光谱及圆二色谱结果表明,实验成功制备了双膦酸盐/生长分化因子5复合物且蛋白二级结构无显著变化;体外磷酸钙吸附结果表明,偶联帕米膦酸钠后,生长分化因子5与磷酸钙的吸附率增加了约1倍;在半胱氨酸存在条件下,偶联帕米膦酸钠的生长分化因子5的蛋白可释放出来;②CCK-8实验结果显示,实验组培养4,7 d的吸光度值高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养7 d后,实验组碱性磷酸酶表达明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);培养13 d后,实验组钙结节含量明显高于对照组、空白对照组(P<0.0001);qRT-PCR结果检测结果显示,培养7 d后,实验组碱性磷酸酶、骨钙素及Runx2的mRNA表达高于对照组、空白对照组(P<0.01,P<0.001,P<0.0001);③结果表明,双膦酸盐修饰有利于增强生长分化因子5与磷酸钙的结合能力,同时有利于增强其生物活性。 展开更多
关键词 生长分化因子5 双膦酸盐 释放 MC3t3-E1细胞 增殖 分化
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葛根素对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响及机制研究
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作者 白继昌 谈力欣 +2 位作者 刘赞朝 杨洋 朱亚军 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第1期40-45,共6页
目的:探讨葛根素对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的影响及可能的作用机制。方法:将3T3-L1脂肪细胞分为7组,即对照组(control组)、葛根素3μmol/L组、葛根素10μmol/L组、葛根素30μmol/L组、葛根素100μmol/L组、葛根素300μmol/L组和... 目的:探讨葛根素对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的影响及可能的作用机制。方法:将3T3-L1脂肪细胞分为7组,即对照组(control组)、葛根素3μmol/L组、葛根素10μmol/L组、葛根素30μmol/L组、葛根素100μmol/L组、葛根素300μmol/L组和阳性对照组(罗格列酮10μmol/L组,RGZ组),每组6孔。采用MTT法检测细胞增殖,油红O染色法检测细胞分化。利用地塞米松诱导建立3T3-L1脂肪细胞IR模型,并给予不同浓度的葛根素进行干预,测定葡萄糖利用情况,利用细胞转染过表达TLR2(命名为Pue+oe-TLR2组);蛋白质免疫印迹法(western blotting)测定TLR2蛋白水平;酶联免疫吸附试验测定干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果:与control组相比,葛根素各剂量组3T3-L1脂肪细胞的增殖率均无显著变化(P>0.05)。与control组相比,葛根素各剂量组3T3-L1脂肪细胞的分化明显增加(P<0.05)。与control组相比,葛根素各剂量组IR 3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗量显著提高(P<0.05);葛根素各剂量组IR 3T3-L1脂肪细胞中TLR2表达量、IFN-γ分泌量降低,GLUT4和PPARγ的水平升高(P<0.05)。Pue+oe-TLR2组TLR2的相对表达量及IFN-γ分泌量显著高于Pue+oe-NC组,PPARγ、GLUT4的相对表达量显著低于Pue+oe-NC组(P<0.01)。结论:葛根素可提高IR 3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗,缓解IR,其机制可能与抑制TLR2表达进而降低IFN-γ分泌有关。 展开更多
关键词 葛根素 TLR2 干扰素-Γ 3t3-L1脂肪细胞 胰岛素抵抗
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淫羊藿苷在炎症环境下对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响
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作者 韩月 王雨菲 +2 位作者 刘婉晴 董明 牛卫东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第23期3709-3714,共6页
背景:研究表明慢性根尖周炎是常见的炎症性骨破坏疾病之一,淫羊藿苷可以促进成骨分化、抑制骨吸收,可能对慢性根尖周炎引起的骨破坏起到保护作用。目的:探讨在脂多糖刺激的炎症环境下淫羊藿苷对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响。方法:应用... 背景:研究表明慢性根尖周炎是常见的炎症性骨破坏疾病之一,淫羊藿苷可以促进成骨分化、抑制骨吸收,可能对慢性根尖周炎引起的骨破坏起到保护作用。目的:探讨在脂多糖刺激的炎症环境下淫羊藿苷对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响。方法:应用脂多糖刺激MC3T3-E1细胞建立体外炎症环境,采用CCK-8检测脂多糖最佳作用质量浓度及作用时间;CCK-8检测在1μg/mL脂多糖刺激下淫羊藿苷的最佳作用质量浓度;碱性磷酸酶染色、Real-time PCR及Western blot检测炎症环境下淫羊藿苷对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响;Real-time PCR及Western blot检测炎症环境下淫羊藿苷对MC3T3-E1细胞炎症相关因子白细胞介素1β、白细胞介素6表达的影响。结果与结论:①CCK-8结果显示,淫羊藿苷的最佳作用质量浓度为0.1μg/mL;②在炎症环境下,淫羊藿苷增强了碱性磷酸酶的表达,促进了成骨细胞分化;③与脂多糖组相比,脂多糖+淫羊藿苷组成骨相关因子碱性磷酸酶、Runx2表达升高;④与脂多糖组相比,脂多糖+淫羊藿苷组炎症相关因子白细胞介素1β、白细胞介素6表达水平下降;⑤结果提示,脂多糖能导致MC3T3-E1细胞成骨分化能力减弱并加重炎症反应,淫羊藿苷对其具有保护作用。 展开更多
关键词 MC3t3-E1细胞 淫羊藿苷 慢性根尖周炎 脂多糖 成骨分化
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高糖环境下药桑提取物脱氧野尻霉素对MC3T3-E1细胞的影响
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作者 张文杰 冯凯 +3 位作者 陈意磊 吴泽钰 努尔比亚木·麦麦提依明 赵今 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第4期471-479,共9页
目的研究药桑提取物脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)在高糖环境下对MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化的作用。方法取P4代MC3T3-E1细胞,在50 mmol/L的高糖环境下通过细胞毒性检测试剂盒(Cell dountingkit-8,CCK-8)检测不同浓度的DNJ(1... 目的研究药桑提取物脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin,DNJ)在高糖环境下对MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化的作用。方法取P4代MC3T3-E1细胞,在50 mmol/L的高糖环境下通过细胞毒性检测试剂盒(Cell dountingkit-8,CCK-8)检测不同浓度的DNJ(10 mmol/L、1 mmol/L、100μmol/L、10μmol/L、1μmol/L、100 nmol/L、10 nmol/L、1 nmol/L)干预对MC3T3-E1细胞增殖的影响,筛选出后续实验研究的DNJ浓度。取培养至对数生长期的MC3T3-E1细胞,按不同干预方式分为:空白组(完全培养基)、高糖组(50 mmol/L糖浓度的完全培养基)、实验组[50 mmol/L糖浓度的完全培养基+不同浓度DNJ(100、10、1μmol/L)溶液]。使用流式细胞技术检测细胞的凋亡和活性氧,采用ELISA试剂盒检测细胞上清液中AGEs和IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,通过碱性磷酸酶染色及活性检测MC3T3-E1细胞的早期成骨能力的影响,通过茜素红染色和定量检测MC3T3-E1细胞的晚期成骨能力,采用RT-PCR检测IL-1β、IL-6、TNF-α、Bax、Bcl-2、IGF-1、ALP、OCN、OSX、Col-1和Runx2的mRNA表达情况。结果高糖环境下,100、10、1μmol/L的DNJ可以促进MC3T3-E1细胞增殖。与高糖组相比,实验组凋亡率、活性氧含量、细胞上清液中AGEs、IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果表明,与高糖组相比,实验组Bax、IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达降低,Bcl-2、IGF-1、ALP、OCN、OSX、Col-1和Runx2的mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在高糖环境下,一定浓度范围内DNJ能够抑制MC3T3-E1细胞的凋亡和炎症因子的产生,促进成骨细胞的分化。 展开更多
关键词 脱氧野尻霉素 高糖 MC3t3-E1细胞 成骨分化
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低T3综合征并甲亢危象1例
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作者 田盼丽 尚涛 +2 位作者 虎金鹏 李艳萍 李红梅 《宁夏医学杂志》 CAS 2024年第1期40-40,共1页
1 病例资料患者,陆某,女性,52岁,主因“怕热多汗25年,加重伴发热15 d”于2021年2月10日收住我院内分泌科。患者25年前无明显诱因出现怕热多汗,伴有手抖、颈部增粗,偶感眼球酸痛不适,就诊当地医院诊断为甲亢,给予甲巯咪唑片10 mg、2次/d... 1 病例资料患者,陆某,女性,52岁,主因“怕热多汗25年,加重伴发热15 d”于2021年2月10日收住我院内分泌科。患者25年前无明显诱因出现怕热多汗,伴有手抖、颈部增粗,偶感眼球酸痛不适,就诊当地医院诊断为甲亢,给予甲巯咪唑片10 mg、2次/d治疗,自觉上述不适较前缓解。患者平日服药不规律,间断用药,期间未定期复查甲功,半年前自行停药。 展开更多
关键词 甲状腺亢进 t3综合征 危象
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Nesfatin-1对3T3-L1脂肪细胞糖代谢和自噬的影响
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作者 玉斯日古楞 白兆星 +1 位作者 罗雨晨 么宏强 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期37-43,共7页
为探讨厌食肽Nesfatin-1对脂肪细胞糖代谢和自噬的影响,本试验通过体外诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,并在高糖状态下,以Nesfatin-1干预1 h之后,采用非放射性荧光法、ELISA、实时荧光定量PCR和Western blot分别检测脂肪细胞的葡萄糖摄取水... 为探讨厌食肽Nesfatin-1对脂肪细胞糖代谢和自噬的影响,本试验通过体外诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,并在高糖状态下,以Nesfatin-1干预1 h之后,采用非放射性荧光法、ELISA、实时荧光定量PCR和Western blot分别检测脂肪细胞的葡萄糖摄取水平、丙酮酸含量、己糖激酶和磷酸果糖激酶活性以及自噬因子LC3、p62和Beclin-1 mRNA和蛋白表达量。结果显示,3T3-L1前脂肪细胞经过8 d诱导可达到完全分化状态;与对照组相比,经过Nesfatin-1处理后,3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取水平极显著降低(P<0.01),己糖激酶和磷酸果糖激酶的酶活性均非常显著地降低(P<0.001),p62 mRNA和蛋白表达量极显著下降(P<0.01),但丙酮酸含量、Beclin-1 mRNA以及LC3 mRNA和蛋白表达量差异不显著(P>0.05)。结果提示,Nesfatin-1不仅能有效降低3T3-L1脂肪细胞的糖消耗能力,还能上调脂肪细胞的自噬水平。 展开更多
关键词 NESFATIN-1 高糖 3t3-L1脂肪细胞 糖代谢 自噬
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不同成骨诱导体系对MC3T3-E1成骨分化的影响
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作者 管馨 陈安琪 +4 位作者 赖颖真 吴勇敏 翁鑫泽 王伟新 雷奕宣 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期304-309,共6页
目的:明确前成骨细胞MC3T3-E1最佳体外成骨诱导体系。方法:构建不同成骨诱导体系,分别为A组地塞米松0.1μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;B组地塞米松0.01μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;C组地... 目的:明确前成骨细胞MC3T3-E1最佳体外成骨诱导体系。方法:构建不同成骨诱导体系,分别为A组地塞米松0.1μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;B组地塞米松0.01μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;C组地塞米松1μmol/L、抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;D组抗坏血酸50μg/mL及β-甘油磷酸钠10 mmol/L;E组抗坏血酸100μg/mL及β-甘油磷酸钠5 mmol/L。对MC3T3-E1进行为期7 d、14 d的体外成骨诱导,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色对在不同成骨诱导体系作用下MC3T3-E1成骨分化的影响进行分析,通过RT-qPCR检测成骨分化相关基因ALP、Runx2、COL-1、OCN、OPN表达水平,比较不同成骨诱导体系的诱导性能。结果:B、D和E组茜素红定量最优,差异具有统计学意义(P<0.05),诱导7 d的RT-qPCR结果显示C组ALP、Runx2、COL-1的基因表达量最高(P<0.05)。诱导14 d的RT-qPCR结果显示:OCND组表达最高(P<0.05)。结论:地塞米松和抗坏血酸的浓度均对MC3T3-E1的成骨分化产生影响,C组1μmol/L地塞米松、50μg/mL抗坏血酸与10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠早期成骨更佳,选择其作为早期成骨验证,D组50μg/mL抗坏血酸与10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠晚期成骨更佳,但综合考虑,建议B组0.01μmol/L地塞米松、50μg/mL抗坏血酸与10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠成骨诱导体系用于MC3T3-E1体外晚期成骨研究。 展开更多
关键词 MC3t3-E1 成骨分化 诱导体系
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Use of the “Veda-Lab Easy Reader+” for the Determination of T3, T4 and TSH Hormones in the Mountainous Population of Benin: Case of Natitingou
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作者 Pamphile Thierry Houngbo Natacha Aivodji +1 位作者 Rodrigue Akotegnon Alphonse Sezan 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 CAS 2024年第1期39-51,共13页
The thyroid, an endocrine gland located at the base of the neck, produces thyroid hormones (triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4)). The production of these hormones is possible by iodine and other nutrients such as... The thyroid, an endocrine gland located at the base of the neck, produces thyroid hormones (triiodothyronine (T3) and thyroxine (T4)). The production of these hormones is possible by iodine and other nutrients such as selenium and certain vitamins. To assess the thyroid disturbances in the mountain population of Benin, a survey was conducted in Natitingou, a mountain town located in the department of Atacora, in the northwest of Benin, on a sample of thirty (30) adults (15 men and 15 women), most of whom are educated. The results of the questionnaire revealed that 43% of the surveyed population acknowledged having knowledge on the mentioned subject and have dietary habits based on the consumption of seafood, and also legumes (20%). The examination of the serum results of the dosage of T3, T4 and TSH hormones revealed cases of thyroid disturbances in the region (36.32% in men and 44.98% in women). The analysis of a comparative table including the “VEDALAB Easy Reader+” and five (05) other readers, presents the performance, reading techniques, principles, advantages and disadvantages of each device. Pending further studies, some recommendations were made at the end of this study to the academic authorities regarding probable cases of dysthyroidism for which additional examinations are required and an awareness for the improvement of dietary habits. 展开更多
关键词 Thyroid TSH t3 T4 “VEDALAB Easy Reader+”
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低T3综合征与危重症相关性的研究进展
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作者 梁永鑫 汤文彬 +2 位作者 陈宾 刘昌玲 张志 《新医学》 CAS 2024年第3期188-192,共5页
低T3综合征(LT3S)是指与危重症相关的甲状腺激素代谢异常,LT3S无明显的甲状腺功能减退症状,与重度烧伤等多种危重症关系密切。在危重症的发生发展中,许多因素通过影响甲状腺激素分泌、转运及代谢诱发LT3S。LT3S是危重症发展及并发症发... 低T3综合征(LT3S)是指与危重症相关的甲状腺激素代谢异常,LT3S无明显的甲状腺功能减退症状,与重度烧伤等多种危重症关系密切。在危重症的发生发展中,许多因素通过影响甲状腺激素分泌、转运及代谢诱发LT3S。LT3S是危重症发展及并发症发生的危险因素,是评估病情严重程度及预后的良好指标。该文对LT3S发病机制、与危重症的关系及治疗进展进行综述。 展开更多
关键词 t3综合征 危重症 脓毒症 重度烧伤
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温度对过氧化氢抑制前成骨细胞MC3T3-E1细胞增殖和成骨分化的影响
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作者 耿卢婧 孙智欣 +2 位作者 李俞辰 张瑜 史培培 《新乡医学院学报》 CAS 2024年第2期109-114,共6页
目的探讨温度对过氧化氢(H_(2)O_(2))抑制前成骨细胞增殖和成骨分化的影响。方法取对数生长期MC3T3-E1细胞,随机分为0、450、500、550、600、650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预组,分别给予0、450、500、550、600、650μmol·L^(-1... 目的探讨温度对过氧化氢(H_(2)O_(2))抑制前成骨细胞增殖和成骨分化的影响。方法取对数生长期MC3T3-E1细胞,随机分为0、450、500、550、600、650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预组,分别给予0、450、500、550、600、650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)溶液干预2 h。另取对数生长期MC3T3-E1细胞,随机分为对照组、模型组、低温组和高温组。对照组细胞置于37℃、含体积分数5%CO_(2)培养箱中孵育24 h;模型组细胞置于37℃、含体积分数5%CO_(2)培养箱中孵育24 h,并给予H_(2)O_(2)刺激2 h;低温组细胞置于32℃、含体积分数5%CO_(2)培养箱中孵育24 h,并给予H_(2)O_(2)刺激2 h;高温组细胞置于40℃、含体积分数5%CO_(2)培养箱中孵育24 h,并给予H_(2)O_(2)刺激2 h。采用细胞计数试剂盒-8检测各组细胞增殖能力,实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞中Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)和骨钙素(OC)mRNA表达水平,Western blot法检测MC3T3-E1细胞中RUNX2、OPN和OC蛋白表达水平。结果0、450、500μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预组细胞增殖率比较差异无统计学意义(P>0.05);550、600、650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预组细胞增殖率显著低于0、450、500μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预组,且随H_(2)O_(2)浓度增加细胞增殖率显著降低(P<0.05)。为保证后续实验有足够的细胞,选择H_(2)O_(2)的干预浓度为550μmol·L^(-1)。模型组和低温组细胞增殖率显著低于对照组和高温组,低温组细胞增殖率显著低于模型组(P<0.05);对照组与高温组细胞增殖率比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组和高温组细胞中RUNX2 mRNA相对表达量显著高于对照组和低温组,低温组细胞中RUNX2 mRNA相对表达量显著低于对照组(P<0.05);模型组与高温组细胞中RUNX2 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组、低温组和高温组细胞中OPN mRNA相对表达量显著高于对照组,低温组和高温组细胞中OPN mRNA相对表达量显著高于模型组,低温组细胞中OPN mRNA相对表达量显著高于高温组(P<0.05)。模型组、低温组和高温组细胞中OC mRNA相对表达量显著高于对照组,低温组和高温组细胞中OC mRNA相对表达量显著高于模型组(P<0.05);低温组与高温组细胞中OC mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组、低温组和高温组细胞中RUNX2、OPN和OC蛋白相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。低温组细胞中RUNX2、OPN蛋白相对表达量显著低于模型组和高温组,OC蛋白相对表达量显著低于高温组(P<0.05);低温组与模型组细胞中OC蛋白相对表达量比差异无统计学意义(P>0.05)。高温组细胞中RUNX2、OPN和OC蛋白相对表达量显著高于模型组(P<0.05)。结论H_(2)O_(2)可抑制MC3T3-E1细胞增殖和成骨分化,低温可增强H_(2)O_(2)对MC3T3-E1细胞增殖和成骨分化的抑制作用,高温可缓解H_(2)O_(2)对细胞增殖和成骨分化的抑制作用。RUNX2、OPN和OC蛋白可能在温度调控细胞增殖和成骨分化的过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 孵育温度 氧化损伤 成骨细胞 MC3t3-E1细胞 细胞增殖 成骨分化
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祛湿健骨方对MC3T3-E1细胞成骨分化能力的促进作用研究
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作者 刘阗生 热孜亚·艾买提 +3 位作者 阿衣努尔·热合曼 陈媛鑫 卡依沙尔 阿衣努尔·买提斯迪克 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第3期426-429,446,共5页
目的探讨祛湿健骨方对MC3T3-E1细胞的作用机理。方法将祛湿健骨方配成不同浓度溶液(0.005、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4 mg/mL),用不同浓度祛湿健骨方对细胞进行干预,干预48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖率,筛选最佳药物浓度。将MC3T3-E... 目的探讨祛湿健骨方对MC3T3-E1细胞的作用机理。方法将祛湿健骨方配成不同浓度溶液(0.005、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4 mg/mL),用不同浓度祛湿健骨方对细胞进行干预,干预48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖率,筛选最佳药物浓度。将MC3T3-E1细胞制成细胞悬液,随机分为对照组、地塞米松组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,接种至六孔板。待细胞贴壁达到80%后进行造模(对照组不添加药物;地塞米松组使用地塞米松干预;低剂量组、中剂量组、高剂量组分别用相应浓度的祛湿健骨方+地塞米松进行干预)48 h后更换为成骨诱导培养基进行培养。诱导15 d后,测定各组细胞的碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)含量和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨细胞特异性转录因子(Osterix,OSX)蛋白的表达量。结果经CCK-8实验结果对比,药物筛选前3位存活率浓度为0.1 mg/mL(低浓度)、0.2 mg/mL(中浓度)、0.4 mg/mL(高浓度)。与对照组相比,地塞米松组、低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞ALP活性均降低差异有统计学意义(P<0.05);与地塞米松组相比,低剂量组、中剂量组差异无统计学意义(P>0.05),高剂量组细胞ALP活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,中剂量组、低剂量组、地塞米松组细胞的RUNX2、OSX蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组细胞OSX和RUNX2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与地塞米松组比较,高剂量组OSX和RUNX2蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论祛湿健骨方能够促进MC3T3-E1细胞的成骨分化能力,其可能是通过调节RUNX2、OSX等骨形成相关蛋白,以此纠正骨形成与骨吸收的平衡,达到治疗骨质疏松症的作用。 展开更多
关键词 MC3t3-E1细胞 骨质疏松症 成骨分化
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高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响和机制研究
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作者 周春仲 郑伟清 +2 位作者 袁晓怡 欧志坚 姜一平 《系统医学》 2024年第1期6-9,13,共5页
目的探讨高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响和机制。方法本研究选取2022年9月—2023年2月珠海市人民医院·暨南大学附属珠海医院3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,使用MTT法评估高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1细胞增殖的... 目的探讨高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响和机制。方法本研究选取2022年9月—2023年2月珠海市人民医院·暨南大学附属珠海医院3T3-L1前脂肪细胞为研究对象,使用MTT法评估高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1细胞增殖的影响。通过油红O染色检测分析高良姜二苯庚烷化合物对3T3-L1细胞分化的影响。应用实时定量聚合酶链锁反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)方法检测高良姜二苯庚烷化合物对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator Activated Receptorγ,PPARγ)和CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/Enhancer Binding Proteinα,C/EBPα)基因mRNA表达的调控作用。通过Western blot分析检测高良姜二苯庚烷化合物对PPARγ和C/EBPα蛋白表达的影响。结果高良姜二苯庚化合物(0、0.05、0.2、0.4 g/L)在24、48 h对前脂肪细胞的生长表现为增殖趋势,呈现一定的量效关系,其中高良姜二苯庚烷化合物浓度为0.4 g/L时3T3-L1增殖[(7.02±0.35)、(17.23±0.95)g/L]高于与对照组,差异有统计学意义(t=13.794、10.843,P均<0.05)。高良姜二苯庚烷化合物呈剂量依赖性地抑制了3T3-L1细胞的增殖。油红O染色结果显示,高良姜二苯庚烷化合物处理显著抑制了3T3-L1细胞的脂肪细胞分化,并减少了脂滴的积累;100μmol/L处理组,PPARγ和C/EBPα的mRNA表达水平显著降低。高良姜二苯庚烷化合物通过抑制PPARγ和C/EBPα基因的表达,调控了3T3-L1前脂肪细胞的分化过程,从而减少了脂肪滴的积累。结论高良姜二苯庚烷化合物抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,其机制与PPARr/EBPα的低表达有关。 展开更多
关键词 高良姜 二苯庚烷化合物 3t3-L1前脂肪细胞 分化
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The flavonoid glycoside vaccarin inhibits adipogenesis and stimulates lipolysis via Hedgehog signaling in 3T3-L1 adipocytes
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作者 Cui-Cui Zeng Martin G.Banwell +2 位作者 Ping Lan Wei-Min Chen Jing Chen 《Food and Health》 2024年第2期4-13,共10页
Vaccarin,a flavonoid glycoside isolated from Vaccaria segetalis,is non-toxic to 3T3-L1 cells up to concentrations of 200μM.Accordingly,we investigated the effects of this natural product on adipogenesis and lipolysis... Vaccarin,a flavonoid glycoside isolated from Vaccaria segetalis,is non-toxic to 3T3-L1 cells up to concentrations of 200μM.Accordingly,we investigated the effects of this natural product on adipogenesis and lipolysis in 3T3-L1 adipocytes.Our results revealed that vaccarin significantly inhibited lipid accumulation by suppressing the adipogenesis-related transcription factors peroxisome proliferator-activated receptorγ(PPARγ)and the CCAAT/enhancer-binding proteinα(C/EBPα).Specifically,lipid accumulation decreased by up to 27.7±2.7%when 3T3-L1 adipocytes were treated with a 10μM concentration of vaccarin.Mechanistic studies showed that the compound inhibited adipogenesis through activation of the Hedgehog(Hh)signaling pathway and so restoring Smo and Gli1 expression at an early stage of differentiation.In mature 3T3-L1 cells,vaccarin significantly increased the secretion of glycerol into the surrounding medium and thus indicating that it accelerated the degradation of triglycerides.In addition,vaccarin,was shown to enhance lipolysis through stimulation of the transcription levels of lipoprotein lipase,monoglycerides lipase,adipose triacylglyceride lipase,hormone-sensitive lipase and adipose differentiated-related protein.All told,vaccarin suppressed lipid accumulation and enhanced lipolysis during adipocyte differentiation by restoring Hh signaling.As such,it is a phytochemical capable of halting adipocyte hyperplasia and,thereby,ameliorating the effects of obesity. 展开更多
关键词 ADIPOGENESIS LIPOLYSIS Hedgehog signaling Vaccarin 3t3-L1 adipocytes
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人牙周膜干细胞来源外泌体干预成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化 被引量:2
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作者 兰倩 辜仰聪 +2 位作者 肖欣 毕雪婷 李娜 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第1期54-58,共5页
背景:人牙周膜干细胞具有较强的成骨分化能力,人牙周膜干细胞来源外泌体作为牙周膜干细胞分泌的主要成分,对成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响尚不明确。目的:探讨人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响。方法:... 背景:人牙周膜干细胞具有较强的成骨分化能力,人牙周膜干细胞来源外泌体作为牙周膜干细胞分泌的主要成分,对成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响尚不明确。目的:探讨人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响。方法:采用酶消化法分离及培养人牙周膜干细胞,超速离心法提取人牙周膜干细胞来源外泌体,通过透射电镜、粒径分析及Western blot方法对人牙周膜干细胞来源外泌体进行鉴定;CCK8法检测不同质量浓度人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖的影响,茜素红染色观察100 mg/L人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞成骨矿化的影响,Western blot检测100 mg/L人牙周膜干细胞来源外泌体干预前后MC3T3-E1细胞内MEK和ERK的磷酸化水平。结果与结论:①透射电镜观察可见外泌体为脂质双分子层形成的囊泡结构,粒径检测显示外泌体直径分布在50-120 nm,集中在79.86 nm,Western blot检测结果显示提取的外泌体中含有CD81,CD63,TSG101的表达;②与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞的增殖具有促进作用,且作用呈剂量依赖性;③与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体组MC3T3-E1细胞能够形成更多的钙结节;与对照组相比,人牙周膜干细胞来源外泌体组MC3T3-E1细胞内p-MEK及p-ERK蛋白表达量升高;④结果表明,人牙周膜干细胞来源外泌体可以显著促进MC3T3-E1增殖和成骨分化,推测可能与其激活MEK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 牙周膜干细胞 外泌体 成骨细胞 MC3t3-E1细胞 增殖 分化
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微小RNA-214靶向调控PTEN对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化的影响及机制研究 被引量:1
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作者 方宇 董重阳 +4 位作者 高斌礼 李明宇 李伟 郭文 焦志超 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第12期1619-1623,1630,共6页
目的:探讨微小RNA-214(miR-214)靶向调控第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化的影响及机制。方法:将成骨细胞MC3T3-E1分为miR-124 mimic组(转染miR-124 mimic)、miR-124 NC组(转染miR-... 目的:探讨微小RNA-214(miR-214)靶向调控第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化的影响及机制。方法:将成骨细胞MC3T3-E1分为miR-124 mimic组(转染miR-124 mimic)、miR-124 NC组(转染miR-124 NC)、pcDNA3.1-PTEN组(转染pcDNA3.1-PTEN)、miR-124 mimic+pcDNA3.1-PTEN组(转染miR-124 mimic+pcDNA3.1-PTEN)。采用在线生信预测miR-124和PTEN靶向结合位点,通过双荧光素酶报告基因进行验证。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞miR-124和PTEN mRNA表达。采用CCK-8法检测细胞增殖。采用碱性磷酸酶活性测定检测细胞分化能力。采用茜素红染色和骨钙素水平测定检测细胞的矿化。采用Werstern blot检测PTEN、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、骨桥蛋白(OPN)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)水平。结果:与miR-124 NC组比较,miR-124 mimic组野生型PTEN的荧光素酶活性降低(均P<0.05)。与miR-124 NC组比较,miR-124 mimic组miR-124及p-PI3K、p-AKT蛋白表达升高,PTEN mRNA和蛋白、细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、ColⅠ和OPN蛋白、细胞矿化率和骨钙素水平降低,而pcDNA3.1-PTEN组则相反(均P<0.05)。与miR-124 mimic组比较,miR-124 mimic+pcDNA3.1-PTEN组p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低,PTEN mRNA和蛋白、细胞增殖率、碱性磷酸酶活性、ColⅠ和OPN蛋白、细胞矿化率和骨钙素水平升高(均P<0.05)。结论:miR-214通过靶向下调PTEN蛋白表达激活PI3K/AKT信号通路,从而调控成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化。 展开更多
关键词 骨质疏松 微小RNA-214 第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因 磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路 成骨细胞MC3t3-E1 增殖 分化 矿化
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SLA-Bio处理对纯钛表面MC3T3-E1细胞黏附行为的影响 被引量:1
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作者 周冠军 于晴 +2 位作者 赵甜甜 王叶青 梅双 《河北医药》 CAS 2023年第1期52-55,共4页
目的在传统喷砂酸蚀(SLA)处理基础上对纯钛表面进行喷砂、蚀刻和生物矿化(SLA-Bio)处理,观察其表面MC3T3-E1前成骨细胞的黏附铺展行为,以期为纯钛种植体表面改性提供更多研究方向。方法将纯钛片分为SLA组(TiO_(2)砂粒喷砂+HCI/H_(2)SO_... 目的在传统喷砂酸蚀(SLA)处理基础上对纯钛表面进行喷砂、蚀刻和生物矿化(SLA-Bio)处理,观察其表面MC3T3-E1前成骨细胞的黏附铺展行为,以期为纯钛种植体表面改性提供更多研究方向。方法将纯钛片分为SLA组(TiO_(2)砂粒喷砂+HCI/H_(2)SO_(4)混合液酸蚀)和SLA-Bio组(SLA处理后再进行矿化处理14 d),通过SEM-EDS观察钛片表面形貌并分析其表面元素构成。于2组钛片表面接种MC3T3-E1细胞,分别于接种后1 h、6 h、24 h取出钛片,MTT法计算并比较2组钛片表面细胞黏附率,通过荧光染色观察、Image Pro Plus软件分析计算,比较不同表面MC3T3-E1细胞铺展行为及形态因子的差异。结果SLA组钛片表面呈蜂窝状、大小不一、深浅不等的不规则孔洞结构,SLA-Bio组钛片表面可见多孔微纳米球状羟磷灰石(hydroxyapatite,HA)沉积物,球体表面可见针状纳米微粒;MC3T3-E1细胞接种后1 h、6 h、24 h时,SLA-Bio组细胞黏附率均明显高于SLA组(P<0.05),SLA-Bio组细胞形态因子均明显低于SLA组(P<0.05);细胞荧光染色结果显示,与SLA组相比,SLA-Bio组在接种后各个时间段均呈现更好的黏附伸展形态。结论SLA-Bio处理可在纯钛表面形成多孔微纳米球状HA沉积物;SLA-Bio表面较SLA表面更有利于MC3T3-E1细胞的黏附和伸展,可能促进种植体骨结合的过程。 展开更多
关键词 SLA-Bio表面处理 MC3t3-E1细胞 细胞黏附 细胞形态因子
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基于HIF-1α/自噬途径探讨二氯化钴调控3T3-L1脂肪细胞炎症反应及胰岛素抵抗的机制
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作者 岳欣欣 付洋 +3 位作者 李怡然 尹晓燕 于飞 傅全威 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期33-38,共6页
目的探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl_(2))调控3T3-L1脂肪细胞自噬活性从而改善脂肪细胞炎症反应和胰岛素抵抗的机制。方法常规培养和诱导分化3T3-L1脂肪细胞成为成熟的脂肪细胞,CoCl_(2)作为低氧诱导剂在不同时间、不同浓度条件下干预成... 目的探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl_(2))调控3T3-L1脂肪细胞自噬活性从而改善脂肪细胞炎症反应和胰岛素抵抗的机制。方法常规培养和诱导分化3T3-L1脂肪细胞成为成熟的脂肪细胞,CoCl_(2)作为低氧诱导剂在不同时间、不同浓度条件下干预成熟的脂肪细胞,确认CoCl_(2)干预脂肪细胞自噬活性的最佳时间和浓度,随后根据此时间和浓度分组,分为0 h(对照组)、12 h、24 h、48 h CoCl_(2)处理组,收集细胞样本进行相关指标测定。MTT法评价各组细胞存活情况;Western blot分析各组细胞HIF-1α及其下游蛋白葡萄糖转运蛋白Glut-1、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达情况;免疫荧光法检测各组细胞的自噬水平;ELISA法检测各组细胞上清液中炎症因子TNF-α和IL-6分泌情况。结果150μmol/L CoCl_(2)是调控3T3-L1脂肪细胞自噬水平的最佳干预浓度;150μmol/L CoCl_(2)干预成熟的脂肪细胞24 h时,自噬活性水平增高,细胞存活率无显著的减低,脂肪细胞中HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Glut-1蛋白的表达水平也显著升高,但炎症因子TNF-α和IL-6分泌水平无明显增加;48 h时自噬水平减低,细胞存活率出现显著减低,脂肪细胞中HIF-1α、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Glut-1蛋白的表达水平减低,炎症因子TNF-α和IL-6分泌水平出现增加趋势。结论150μmol/L CoCl_(2)可以调控脂肪细胞自噬水平增加,自噬水平的增加以依赖HIF-1α的方式活化,从而使自噬发挥保护脂肪细胞的作用使其免受炎症损伤和改善脂肪细胞胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 HIF-1Α 自噬 3t3-L1细胞 炎症反应 胰岛素抵抗
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米根霉发酵松花粉及对3T3-L1细胞分化和脂质代谢的影响 被引量:1
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作者 王璇 刘其耸 +6 位作者 高福凯 何志勇 秦昉 王召君 陈秋铭 陈洁 曾茂茂 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1-9,共9页
为提升松花粉的减脂功效,通过米根霉发酵以增加其活性成分含量。比较了未发酵松花粉(unfermented pine pollen,NFPP)和发酵松花粉(fermented pine pollen,FPP)对3T3-L1细胞分化和脂质代谢的影响并探讨了其作用机制。结果表明,米根霉发... 为提升松花粉的减脂功效,通过米根霉发酵以增加其活性成分含量。比较了未发酵松花粉(unfermented pine pollen,NFPP)和发酵松花粉(fermented pine pollen,FPP)对3T3-L1细胞分化和脂质代谢的影响并探讨了其作用机制。结果表明,米根霉发酵可以显著增加松花粉中酚类活性成分的含量,5种酚类物质总量从2091.63μg/g提升至3686.62μg/g,其中柚皮素(naringenin,NAR)含量提高了3.27倍(2027.30μg/g)。油红O染色及定量结果表明,FPP能明显减少3T3-L1细胞的脂质积累,同等浓度下优于NFPP。此外,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)结果表明,与NFPP相比,FPP能明显抑制脂肪细胞分化因子CCAAT/增强子结合蛋白α(enhancer binding proteins alpha,C/EBPα)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ),上调脂解因子激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,ATGL),以及促进脂肪酸氧化因子过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma alpha,PPARα)的表达(P<0.05),可能是由于苷酸活化蛋白激酶(amp-activated protein kinase,AMPK)发生了磷酸化(上调p-AMPKα/AMPKα,p-AMPKβ1/AMPKβ1和p-ACC/ACC的比值)。松花粉及其发酵产物中主要酚类成分NAR可以明显减少蛋白PPARγ、C/EBPα,增加PPARα和ATGL的表达(P<0.05),因此可能在FPP的降脂功效上发挥主要作用。综上所述,FPP在减少3T3-L1细胞脂质积累方面具有更好的效果,可能是由于酚类,特别是NAR的增加。研究结果可为更高降脂活性的松花粉产品的开发提供理论指导。 展开更多
关键词 松花粉 发酵 柚皮素 3t3-L1细胞 脂质积累 腺苷酸活化蛋白激
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低T3综合征辨证分型与血清TT3、FT3水平关系的研究 被引量:10
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作者 杨际平 邵颖 +1 位作者 朱传安 郭宗兵 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第10期2449-2451,共3页
目的:研究低T3综合征辨证分型与血清TT3、FT3的相关性,为低T3综合征的中医辨证提供客观依据。方法:选择50例健康体检者为对照组,收集169例低T3综合征患者为低T3综合征组,对其临床症状、体征、甲状腺激素水平,借助现代统计学方法研究低T... 目的:研究低T3综合征辨证分型与血清TT3、FT3的相关性,为低T3综合征的中医辨证提供客观依据。方法:选择50例健康体检者为对照组,收集169例低T3综合征患者为低T3综合征组,对其临床症状、体征、甲状腺激素水平,借助现代统计学方法研究低T3综合征辨证分型与血清TT3、FT3的相关性。结果:低T3综合征组中气血两虚证16例、脾肾阳虚证87例、心肾阳虚证54例,肝肾阴虚证12例,其中脾肾阳虚证87例占51.48%,比例最高;心肾阳虚证组TT3、FT3水平最低,与气血两虚证组、脾肾阳虚证组、肝肾阴虚证组相比差异均有统计学意义(P<0.05);心肾阳虚证组的阳虚症状积分明显高于气血两虚证组、脾肾阳虚证组、肝肾阴虚证组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:低T3综合征中阳虚证占首位,其中脾肾阳虚证所占比例最高,低T3综合征阳虚程度越重,TT3、FT3水平越低,TT3、FT3水平的变化有助于中医辨证。 展开更多
关键词 t3综合征 中医辨证分型 Tt3 Ft3
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