基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路探讨黄连解毒汤对冠状动脉性心脏病小鼠心肌保护作用

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作者 夏铭蔚 左强 +2 位作者 冉永玲 袁良 黄平 《临床和实验医学杂志》 2024年第3期225-229,共5页

目的 研究基于Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路探讨黄连解毒汤对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)小鼠心肌保护作用。方法 50只6周的雄性SD小鼠中取10只作正常对照组,其余小鼠给予高脂饮食建立CH... 目的 研究基于Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路探讨黄连解毒汤对冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)小鼠心肌保护作用。方法 50只6周的雄性SD小鼠中取10只作正常对照组,其余小鼠给予高脂饮食建立CHD模型。采用随机数字表法将40只模型小鼠分为模型组、黄连解毒汤低、中、高剂量组,每组各10只。黄连解毒汤低、中、高剂量组每日分别以10、20、40 g/kg剂量进行灌胃,每日1次,持续6周;正常组、模型组每日给予等量蒸馏水灌胃。干预后采用生化法检测各组总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平,酶联免疫吸附试验检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛、内皮素水平;采用苏木精-伊红染色法观察小鼠心肌细胞病理形态,蛋白质印迹法检测心肌组织中TLR4、NF-κB、NLRP3的表达。比较各组小鼠血脂、心肌组织中抗氧化相关指标和TLR4、NF-κB、NLRP3的表达。结果 模型组、黄连解毒汤低、中、高剂量组血脂水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);黄连解毒汤低剂量组与模型组血脂水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);黄连解毒汤中、高剂量组总胆固醇、甘油三酯、LDL水平均低于模型组,HDL水平高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组、黄连解毒汤低、中、高剂量组心肌组织中SOD水平均低于对照组,丙二醛、内皮素水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);黄连解毒汤低、中、高剂量组SOD水平均高于模型组,丙二醛、内皮素水平均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组心肌纤维排列整齐,横纹清晰且细胞完整,无细胞肿胀、炎症浸润等;模型组心肌纤维排列紊乱,结构发生异常,有严重细胞肿胀、炎症浸润;黄连解毒汤低、中、高剂量组未见心肌纤维断裂,黄连解毒汤中、高剂量组细胞肿胀和炎症浸润情况优于黄连解毒汤低剂量组,黄连解毒汤高剂量组优于黄连解毒汤中剂量组。模型组、黄连解毒汤中、高剂量组TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白表达量均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);黄连解毒汤低、中、高剂量组TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白表达量均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。且黄连解毒汤各剂量组中以上指标变化呈剂量依赖性。结论 黄连解毒汤能降低CHD小鼠血脂水平,保护心肌细胞,其能够通过下调组织TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白表达以调节血脂水平并改善心肌功能,且黄连解毒汤的效果随着剂量的增加而增强。 展开更多

关键词 小鼠 冠状动脉粥样硬化性心脏病 tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路 黄连解毒汤 心肌保护

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破血化瘀、填精补髓方对脑出血模型小鼠脑组织TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响

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作者 乔颖 袁月 +2 位作者 徐三鹏 宋双 李萍 《中医药学报》 CAS 2023年第11期36-42,共7页

目的:探讨破血化瘀、填精补髓方治疗脑出血的相关作用机制。方法:野生型小鼠和Nrf2基因敲除小鼠各90只,采用小鼠尾动脉取血向脑内灌注的方法建立脑出血小鼠模型,造模成功后120只小鼠随机分为野生型模型组、野生型方剂组、Nrf2基因敲除... 目的:探讨破血化瘀、填精补髓方治疗脑出血的相关作用机制。方法:野生型小鼠和Nrf2基因敲除小鼠各90只,采用小鼠尾动脉取血向脑内灌注的方法建立脑出血小鼠模型,造模成功后120只小鼠随机分为野生型模型组、野生型方剂组、Nrf2基因敲除模型组、Nrf2基因敲除方剂组,每组30只。另分别取30只野生型小鼠和Nrf2基因敲除小鼠脑内只插入微量注射针数分钟不注血作为野生型假手术组和Nrf2基因敲除假手术组。造模后对野生型方剂组及Nrf2基因敲除方剂组给予破血化瘀、填精补髓方10.41 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,模型组及假手术组给予等量生理盐水。给药1 d、3 d后检测小鼠的行为学变化及脑含水量变化,3 d后HE染色观察脑组织病理形态学改变,用Western Blot以及免疫组化检测脑组织TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白水平。结果:与野生型假手术组相比,野生型模型组小鼠的神经功能评分、脑含水量、HE染色病理细胞数、免疫组化阳性细胞数以及TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达水平均升高(P<0.05,P<0.01)。与野生型模型组比较,野生型方剂组小鼠上述各指标均明显改善(P<0.05)。相对于野生型模型组小鼠,Nrf2基因敲除型模型组小鼠上述各指标均有明显改善(P<0.05)。结论:破血化瘀、填精补髓方可以通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制氧化反应及炎症反应,从而抑制脑出血后的神经细胞功能损伤,减少继发性脑损伤。 展开更多

关键词 脑出血 破血化瘀、填精补髓方 基因敲除 tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路

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千金子制霜前后提取物对TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响研究 被引量：1

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作者 王慧楠 姜明瑞 +8 位作者 王志成 岳珠珠 魏晓彤 王梦琳 石双慧 张婧秋 陈梦雨 刘芊芊 王英姿 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期780-789,共10页

目的研究千金子制霜前后提取物对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响差异。方法42只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组,千金子生品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.... 目的研究千金子制霜前后提取物对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响差异。方法42只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组,千金子生品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg)和千金子霜品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg),每组6只,连续灌胃7 d。酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达。30只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组、千金子生品组、千金子生品+TAK-242组、千金子霜品组、千金子霜品+TAK-242组,每组6只。各给药组灌胃相应药液(20.98 g/kg),连续7 d,千金子生品+TAK-242组和千金子霜品+TAK-242组于给药第1、5、6、7天给药前30 min腹腔注射TAK-242溶液(3 mg/kg)。采用蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织NLRP3、NF-κB p65蛋白表达,以及NLRP3、IL-1βmRNA表达。结果千金子生品可导致IL-1β和TNF-α大量释放,上调TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达(P<0.05,P<0.01),千金子制霜后对IL-1β、TNF-α分泌,以及TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达的促进作用减弱(P<0.05,P<0.01)。加入TLR4的阻断剂TAK-242后,可抑制NLRP3、NF-κB p65蛋白表达,以及NLRP3、IL-1βmRNA表达(P<0.01)。结论千金子生品可能通过激活TLR4介导的NF-κB/NLRP3通路,促进TNF-α和IL-1β释放,诱导结肠组织产生炎性反应,而制霜后对TLR4/NF-κB/NLRP3通路传导及促炎因子分泌的上调作用明显减弱,提示其制霜减毒的作用机制可能与致炎能力下降及干预TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路有关。 展开更多

关键词 千金子 制霜减毒 tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路 炎性反应 小鼠

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基于TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路研究三叶香茶菜含药血清对枯否细胞活化的影响

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作者 周至品 陈勇 +4 位作者 吴瑞胜 王竟静 覃乐 黄桂东 刘代华 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期2917-2925,共9页

目的研究三叶香茶菜含药血清(isodon ternifolius-containing serum,ITS)通过Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠原代肝枯否细胞(Kupffer cell,KC)活化的... 目的研究三叶香茶菜含药血清(isodon ternifolius-containing serum,ITS)通过Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠原代肝枯否细胞(Kupffer cell,KC)活化的影响。方法分离培养大鼠原代KC,将LPS诱导的大鼠原代KC分为空白对照组、模型对照组、空白血清组、阳性对照组(秋水仙碱含药血清组)、ITS组、TLR4阻断剂组、TLR4阻断剂+ITS组。MTT法检测不同浓度ITS对KC增殖活性的影响;ELISA法检测KC细胞上清液白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;荧光定量聚合应(PCR)、Western blotting和免疫荧光检测KC中TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路中TLR4、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、半胱肽氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、NLRP3 mRNA和TLR4、IκBα、磷酸化IκBα(p-IκBα)、Caspase-1、NLRP3、NF-κBp65蛋白表达情况。结果与模型对照组相比,各药物组KC上清液中IL-1β、IL-18、TNF-α和IL-6含量,以及细胞中TLR4、IκBα、Caspase-1、NLRP3 mRNA和TLR4、IκBα、p-IκBα、Caspase-1、NLRP3、NF-κBp65蛋白的表达均下调或降低(P<0.05或P<0.01);与TLR4阻断剂组比较,TLR4阻断剂+ITS组上述多数指标的改善更加明显。结论三叶香茶菜可能通过下调TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制KC活化,减少炎性因子的表达和释放,从而减轻肝脏炎症损伤。 展开更多

关键词 tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路 枯否细胞 三叶香茶菜 含药血清

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基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨参芪调肾方改善CSE诱导小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的作用机制

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作者 王卉 杨勤军 +3 位作者 周凡超 杨程 童佳兵 李泽庚 《海南医学院学报》 2023年第17期1295-1301,共7页

目的:基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨参芪调肾方(SQTS)改善香烟烟雾提取物(Cigarette smoking extract,CSE)诱导小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)炎症反应的作用机制。方法:以MH-S细胞为研究对象,通过CCK-8法分析SQTS对MH-S细胞的安全性及药效浓... 目的:基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨参芪调肾方(SQTS)改善香烟烟雾提取物(Cigarette smoking extract,CSE)诱导小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)炎症反应的作用机制。方法:以MH-S细胞为研究对象,通过CCK-8法分析SQTS对MH-S细胞的安全性及药效浓度;随后MH-S分为空白组、模型组(8%CSE)和SQTS低、中、高剂量组(40、80、160 mg/L)。ELISA检测细胞上清TNF-α、IL-1β和IL-6含量;DCFH-DA荧光探针法检测细胞中ROS水平;Westernblot检测TLR4/NF-κB/NLRP3通路蛋白的表达,使用TLR4抑制剂TAK-242验证SQTS在TLR4/NF-κB/NLRP3通路上的作用。结果:与空白组比较,CSE组细胞活力降低,炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量增加(P<0.05),ROS荧光表达水平显著升高(P<0.01),TLR4/NF-κB/NLRP3通路蛋白表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,参芪调肾方各剂量组细胞活力升高,以上各指标表达水平均有所降低(P<0.05),且TAK-242各组细胞TLR4/NF-κB/NLRP3通路蛋白减少(P<0.05)。结论:参芪调肾方可减轻CSE诱导的MH-S细胞的炎症反应,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB/NLRP3通路有关。 展开更多

关键词 参芪调肾方 CSE MH-S细胞 tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路 炎症

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基于肠黏膜屏障及TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路探讨燮和饮改善PCOS-IR小鼠炎症反应的影响 被引量：17

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作者 徐雪飞 王恩力 +7 位作者 杨田野 姚景春 龚歆 陈雯玥 刘歆玥 狄广慈 李秀 任青玲 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期90-98,共9页

目的:探讨燮和饮对改善肥胖型多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS-IR),减缓炎症反应的可能作用机制。方法:将60只SPF级雌性C57BL/6J小鼠随机抽取10只,并设为正常组,其余小鼠均采用粪菌混悬液(2 g·kg^(-1))联合来曲唑溶液(0.002 g·... 目的:探讨燮和饮对改善肥胖型多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS-IR),减缓炎症反应的可能作用机制。方法:将60只SPF级雌性C57BL/6J小鼠随机抽取10只,并设为正常组,其余小鼠均采用粪菌混悬液(2 g·kg^(-1))联合来曲唑溶液(0.002 g·kg^(-1))灌胃4周建立PCOS-IR模型。将模型复制成功的动物随机分为模型组,二甲双胍组(0.25 g·kg^(-1))及燮和饮低、中、高剂量组(10,20,40 g·kg^(-1)),给予相应剂量的药物灌胃,每天1次,连续治疗4周。除空白组外,其余各组小鼠在治疗期间持续灌胃粪菌混悬液和来曲唑溶液以维持模型。动物每周称1次体质量;治疗结束后测量空腹血糖(FBG);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清睾酮(T),促卵泡生成素(FSH),促黄体生成素(LH),空腹胰岛素(FINS)水平,计算LH/FSH及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)值;摘取子宫和双侧卵巢称质量后固定,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠结肠组织中Toll样受体4/核转录因子-κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)信号通路及下游炎症相关因子半胱氨酸天冬氨酸水解酶-1(Caspase-1),白细胞介素-1β(IL^(-1)β),紧密连接蛋白-1(ZO-1),闭合蛋白(occludin)表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量显著升高(P<0.01);血清FBG,FINS和HOMA-IR明显升高(P<0.05);血清T,LH/FSH显著升高(P<0.01);子宫脏器比显著降低(P<0.01),卵巢脏器比显著升高(P<0.01),镜下可见卵巢中囊性扩张卵泡及闭锁小卵泡数量明显增多,黄体数量显著减少,卵泡颗粒细胞层减少,卵泡膜显著增厚;结肠组织中ZO-1,occludin的相对表达量显著下调(P<0.01),炎症相关蛋白TLR4,NF-κB,NLRP3,Caspase-1,IL^(-1)β表达量明显上调(P<0.05)。与模型组比较,燮和饮低、中、高剂量组小鼠体质量显著降低(P<0.01);燮和饮中、高剂量组血清FBG,FINS,HOMA-IR明显降低(P<0.05);高剂量组血清T,LH/FSH显著降低(P<0.01);卵巢脏器比明显降低(P<0.05),子宫脏器比显著升高(P<0.05),卵巢中囊状卵泡明显减少,内见黄体,卵巢颗粒细胞正常排列,卵泡膜略增厚;高剂量组结肠组织TLR4,NF-κB,NLRP3,Caspase-1,IL^(-1)β蛋白表达显著下调(P<0.01),ZO-1,occludin蛋白表达量显著上调(P<0.01)。结论:燮和饮调控肠道TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路,减少下游炎症因子释放,通过重建肠黏膜屏障功能及抑制肠道炎症反应,改善肥胖和IR,从而逆转PCOS-IR。 展开更多

关键词 燮和饮 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 炎症 肠黏膜屏障 Toll样受体4/核转录因子-κb/NOD样受体蛋白3(tlr4/nf-κb/nlrp3)信号通路

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低氧通过激活PTEN介导的TLR4/NF-κB/NLRP3通路影响氧化应激、运动HRV及神经内分泌的机制研究 被引量：1

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作者 孔海军 甘胜前 +1 位作者 王凤华 周霞 《山东体育学院学报》 北大核心 2022年第1期88-97,共10页

目的:分析20~40岁青年男性运动心率变异与神经内分泌、氧化应激指标的关联性,并探讨PTEN介导的TLR4/NF-κB/NLRP3通路影响高原氧化应激、运动HRV及神经内分泌的机制。方法:以109名世居帕米尔高原高寒地区及113名世居平原20~40岁青年男... 目的:分析20~40岁青年男性运动心率变异与神经内分泌、氧化应激指标的关联性,并探讨PTEN介导的TLR4/NF-κB/NLRP3通路影响高原氧化应激、运动HRV及神经内分泌的机制。方法:以109名世居帕米尔高原高寒地区及113名世居平原20~40岁青年男性为受试者,定量负荷运动后采集HRV时域及频域数据,RIA法及试剂盒法测定血清热休克蛋白(HSP-70)、5-羟色胺(5-HT)、甲肾上腺素(NE)、谷胱甘肽(GSH-px)、一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、皮质醇(COR)和促肾上腺皮质激素(ACTH)浓度,Western-Bolt检测受试者PTEN及TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路相关蛋白表达。结果:随年龄上升,世居高原及世居平原受试者血清HSP-70水平呈现上升趋势,血清NE、5-HT、COR及ACTH呈下降趋势;血清GSH-px、ROS及MDA水平随年龄增长呈上升趋势,血清NO及SOD呈下降趋势;心率变异时域及频域指标随年龄增长呈现下降趋势。关联性分析结果表明,世居高原及平原20~25岁组、26~30岁组及36~40岁组受试者运动后RMSSD与ROS存在显著关联(P<0.05),31~35岁组受试者运动后RMSSD与ROS不存在显著关联(P>0.05);各年龄组受试者血清HSP-70与血清ROS均存在显著关联(P<0.05);各年龄组受试者血清HSP-70与运动后RMSSD均存在显著负性关联(P<0.05)。随年龄增长,受试者PTEN及p-PTEN蛋白表达呈下降趋势,TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路相关蛋白及其磷酸化水平均呈上升趋势。与平原对照组比较,高原低氧能够显著上调受试者血清PTEN蛋白表达并提高其磷酸化水平,同时显著上调TLR4、NF-κB蛋白表达水平。结论:世居高原及平原受试者氧化应激、神经内分泌及运动心率变异存在增龄性特征,PTEN介导的TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路在上述指标的低氧耐受及增龄性发展中发挥作用。 展开更多

关键词 高原低氧 青年男性 运动心率变异 神经内分泌 氧化应激 PTEN tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路

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连翘酯苷A通过TLR4/NF-κB p65/NLRP3轴对宫内感染所致新生大鼠肺损伤及免疫功能的影响研究 被引量：3

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作者 王云 赵亚丽 +1 位作者 郎明瑶 尹红亚 《重庆医学》 CAS 2022年第17期2891-2895,2900,共6页

目的探讨连翘酯苷A对宫内感染所致新生大鼠肺损伤及免疫功能的影响,以及对Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)p65/NOD样受体3(NLRP3)轴的调节作用。方法40只孕鼠建立宫内感染模型,分为模型组、连翘酯苷A组、脂多糖组和脂多糖^(+)连... 目的探讨连翘酯苷A对宫内感染所致新生大鼠肺损伤及免疫功能的影响,以及对Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)p65/NOD样受体3(NLRP3)轴的调节作用。方法40只孕鼠建立宫内感染模型,分为模型组、连翘酯苷A组、脂多糖组和脂多糖^(+)连翘酯苷A组,每组10只,另取10只孕鼠作为对照组。各组大鼠给予相应药物处理直至分娩,苏木素-伊红(HE)染色观察胎盘病理损伤,测定新生大鼠呼吸频率和肺指数,ELISA检测白细胞介素(IL)-6、IL-8和IL-1β水平,HE染色观察肺组织病理损伤,流式细胞仪检测外周血CD4^(+)和CD8^(+)淋巴细胞比例(CD4^(+)/CD8^(+)),Western blot检测肺组织TLR4、p-p65、NF-κB p65和NLRP3蛋白相对表达水平。结果与模型组比较,连翘酯苷A组新生大鼠呼吸频率、IL-8、IL-6、IL-1β、TLR4、p-p65和NLRP3水平更低,肺指数、CD4^(+)/CD8^(+)更高,差异有统计学意义(P<0.05)。与脂多糖^(+)连翘酯苷A组比较,脂多糖组新生大鼠呼吸频率、IL-8、IL-6、IL-1β、TLR4、p-p65和NLRP3水平更高,肺指数、CD4^(+)/CD8^(+)更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论连翘酯苷A可抑制TLR4/NF-κB p65/NLRP3信号通路改善宫内感染致新生大鼠肺损伤。 展开更多

关键词 宫内感染 肺损伤 连翘酯苷A 脂多糖 免疫 tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路

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龙生蛭胶囊保护脑缺血再灌注损伤大鼠的作用及机制研究

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作者 方欢乐 李晓明 +3 位作者 周亚明 张鑫 刘小溪 陈衍斌 《中国药房》 CAS 北大核心 2024年第7期813-818,共6页

目的探讨龙生蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及机制。方法通过改良线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。实验分为假手术组(仅分离血管不插线栓,予同体积生理盐水)、模型组(造模,予同体积生理盐水)、尼莫地平组(阳性对照... 目的探讨龙生蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及机制。方法通过改良线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。实验分为假手术组(仅分离血管不插线栓,予同体积生理盐水)、模型组(造模,予同体积生理盐水)、尼莫地平组(阳性对照,造模,给药剂量为20 mg/kg)和龙生蛭胶囊低、中、高剂量组(造模,给药剂量依次为0.72、1.44、2.88 g/kg),每组10只。各组大鼠灌胃相应药液/生理盐水,每天1次,连续7 d。末次给药1 h后,采用Zea Longa评分法对各组大鼠的神经功能缺失情况进行评分;ABC-酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;TTC染色观察大鼠脑梗死体积并计算脑梗死体积比;苏木精-伊红染色观察大鼠脑组织病理形态的变化;免疫组化法检测大鼠脑组织NLRP3蛋白阳性表达情况;实时荧光定量PCR法检测大鼠脑组织Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)mRNA表达;Western blot法检测大鼠脑组织TLR4、NLRP3、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)及细胞核内NF-κB蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺失评分,血清TNF-α和IL-6水平,脑梗死体积比,脑组织NF-κB和TLR4 mRNA的相对表达水平,以及脑组织TLR4、NLRP3、p-NF-κB蛋白的相对表达水平及其细胞核内NF-κB蛋白的相对表达水平均显著升高(P<0.01);大鼠脑组织皮层神经细胞间隙增大、水肿明显,可见大量炎性细胞浸润;大鼠脑组织中NLRP3蛋白阳性表达明显增多。与模型组比较,龙生蛭胶囊中、高剂量组及尼莫地平组大鼠以上指标水平均有不同程度逆转,大部分差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);病理形态观察结果明显好转,大鼠脑组织中NLRP3蛋白阳性表达均明显减少。结论龙生蛭胶囊可能通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路,抑制神经炎症反应,从而达到对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。 展开更多

关键词 龙生蛭胶囊 脑缺血再灌注损伤 炎症因子 tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路

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中等强度运动促进脑缺血再灌注大鼠脑功能修复 被引量：2

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作者 李玉辉 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期4761-4766,共6页

为了考察中等强度运动(MIE)对脑缺血再灌注(CIR)大鼠脑功能修复的促进作用。本研究将SpragueDawley (SD)大鼠随机分为假手术组、CIR组和MIE组(n=30),CIR组和MIE组大鼠通过大脑中动脉闭塞(MCAO)建立CIR模型。假手术组大鼠进行相同的手术... 为了考察中等强度运动(MIE)对脑缺血再灌注(CIR)大鼠脑功能修复的促进作用。本研究将SpragueDawley (SD)大鼠随机分为假手术组、CIR组和MIE组(n=30),CIR组和MIE组大鼠通过大脑中动脉闭塞(MCAO)建立CIR模型。假手术组大鼠进行相同的手术,但不结扎中动脉;MIE组大鼠进行为期4周的中等强度跑台运动运动完成后,评价各组大鼠的神经功能缺损评分和脑梗死区域,通过免疫荧光染色对大鼠缺血半影区BrdU和NeuN进行双染色。Western blotting检测大鼠脑缺血半影区TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65、NLRP3、IL-1β和Caspase-1的表达通过单因素方差分析和LSD检验比较假手术组、CIR组和MIE组之间的差异(p<0.05)。研究显示MIE组的梗死面积和神经功能缺损评分显著低于CIR组MIE组大鼠缺血半影区的NeuN+/BrdU+阳性细胞数显著高于CIR组;MIE组大鼠脑缺血半影区中TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3、IL-1β和Caspase-1的表达水平显著低于CIR组。本研究发现中等强度运动通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路来促进脑缺血再灌注后的神经发生,从而改善神经功能并减轻脑梗死。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注 中等强度运动 神经发生 tlr4/nf-κb/nlrp3信号通路

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木瓜总三萜对幽门螺杆菌诱导小鼠胃炎的保护作用研究 被引量：13

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作者 石孟琼 贺君宇 +6 位作者 王晓 舒恒 NGWA Adeline Ngeng 陈烨韬 彭校 张继红 陈茂华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期4782-4792,共11页

观察木瓜总三萜对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导小鼠胃炎保护作用,探寻其可能作用机制。将慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)模型制作成功小鼠随机分为模型组、木瓜总三萜不同剂量(50、100 mg·kg^(-1))组... 观察木瓜总三萜对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导小鼠胃炎保护作用,探寻其可能作用机制。将慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)模型制作成功小鼠随机分为模型组、木瓜总三萜不同剂量(50、100 mg·kg^(-1))组和三联疗法组,另取未感染Hp C57BL/6J小鼠作为正常组;治疗组小鼠分别给予相应的药物,每日1次,连续4周。然后取血和胃组织进行血液中活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、角质细胞趋化因子(keratinocyte chemokines,KC)、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4、IL-10含量,胃组织中LDH、MPO、SOD、GSH-Px、CAT和MDA活性和含量及血液、胃组织和溶酶体中β-葡萄糖醛酸酶、β-半乳糖苷酶、组织蛋白酶B和D活性的检测,HE染色法观察胃组织形态学改变;实时定量PCR法测定胃组织中Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad mRNA表达,Western blot法测定胃组织中TLR4、MyD88、p-IKKβ、p-IκBα、NOD样受体家族3(NOD-like receptor family 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、pro-caspase-1、caspase-1、硫氧还蛋白互作蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)、pro-IL-1β、pro-IL-18、Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad、cytochrome C、凋亡酶激活因子(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)、pro-caspase-9、pro-caspase-3、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase 1,PARP-1]、cleaved-PARP-1及胞浆和胞核中NF-κB p65蛋白表达。结果显示,木瓜总三萜可显著抑制Hp增殖,减轻胃黏膜损伤,改善淋巴细胞浸润和腺体萎缩;降低血液、胃组织中β-葡萄糖醛酸酶、β-半乳糖苷酶、组织蛋白酶B和D活性及溶酶体细胞器胞质中β-葡萄糖醛酸酶、组织蛋白酶D的活性,升高溶酶体细胞器溶酶体中β-葡萄糖醛酸酶、组织蛋白酶D活性;降低血液中ROS、MCP-1、KC、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18和胃组织中MDA含量及MPO、LDH活性,升高血液中IL-4、IL-10含量和胃组织中SOD、CAT和GSH-Px活性;下调胃组织中TLR4、MyD88、Bax、Bad mRNA和蛋白表达,下调胃组织中p-IKKβ、p-IκBα、NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、TXNIP、pro-IL-1β、pro-IL-18、cytochrome C、Apaf-1、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP-1和胞核中NF-κB p65蛋白表达,降低p-IKKβ/IKKβ和p-IκBα/IκBα比值;上调胃组织中Bcl-2、Bcl-xl mRNA和蛋白表达,升高Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bad比值,上调胃组织中pro-caspase-9、pro-caspase-3和胞浆中NF-κB p65蛋白表达。以上研究表明木瓜总三萜对Hp诱导小鼠CAG有显著保护作用,其机制可能与增强内源性抗氧化系统功能、抑制Hp诱导CAG小鼠氧化应激、炎症反应、纠正溶酶体功能障碍及TLR4/NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路炎性激活,进而抑制线粒体介导的细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 胃炎 炎症反应 溶酶体功能 tlr4/nf-κb/nlrp3炎症小体和线粒体凋亡信号通路 木瓜总三萜

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