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LncRNA BANCR表达与TSHR甲基化在BRAFV600E突变的甲状腺乳头状癌中的研究
1
作者 于波 徐宁 +6 位作者 杨博 孙玺媛 姚佳兴 樊伟业 李松埔 窦福林 李扬 《世界肿瘤研究》 CAS 2024年第1期13-19,共7页
目的:探讨长链非编码RNA BANCR表达及TSHR甲基化与BRAFV600E突变的甲状腺乳头状癌的关系。方法:收集60例BRAFV600E突变的甲状腺乳头状癌(PTC)患者癌组织样本60例和癌旁正常甲状腺组织样本60例(简称癌旁组织),上述所有PTC患者已采用荧光... 目的:探讨长链非编码RNA BANCR表达及TSHR甲基化与BRAFV600E突变的甲状腺乳头状癌的关系。方法:收集60例BRAFV600E突变的甲状腺乳头状癌(PTC)患者癌组织样本60例和癌旁正常甲状腺组织样本60例(简称癌旁组织),上述所有PTC患者已采用荧光定量PCR (QPCR)检测分析上述各样本BANCR基因的表达水平,并应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-Specific Polymerase chain reac-tion, MSP)法检测上述各样本中TSHR基因启动子甲基化情况,并分析上述癌组织和癌旁组织中各样本基因表达水平和TSHR甲基化情况与BRAFV600E突变的PTC患者的临床病理特征之间的关系。结果:癌组织组:BANCR相对表达量为(1.55 ± 1.62),高表达率为66.67%,癌旁组织组分别为(0.74 ± 0.63和30%),癌组织显著高于癌旁组织(P < 0.05)。癌组织中,BANCR高表达与肿瘤的颈部淋巴结转移存在显著相关性(P < 0.05)。癌组织组中TSHR甲基化的发生率为93.3% (56/60),癌旁组织组中TSHR甲基化的发生率为18.3% (11/60),TSHR甲基化PTC患者例数显著高于非甲基化PTC患者,差异均具有统计学意义(P均 < 0.01)。癌组织中BANCR的表达水平及TSHR甲基化以及两者联合检测阳性例数均显著高于癌旁组织,差异具有统计学差异(P均 < 0.05),BANCR高表达联合TSHR甲基化对BRAFV600E突变的PTC诊断的灵敏度、特异性和准确性较单项检测均出现上升趋势,但仅灵敏度与单一检测相比差异具有统计学意义(P < 0.05)。结论:BANCR高表达和TSHR甲基化均与BRAFV600E突变的PTC患者颈部淋巴结转移密切相关,与肿瘤的进展相关并提示不良预后。且BANCR高表达联合TSHR甲基化对BRAFV600E突变的PTC临床诊断具有较佳的灵敏度。 展开更多
关键词 BANCR高表达 tshr甲基化 基因突变 BRAFV600E突变
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表达TSHR-A亚单位的腺病毒免疫BALB/c雌性小鼠建立甲亢模型 被引量：5
2
作者 赵泽飞 王曙 +3 位作者 崔九兰 顾雪疆 唐金凤 赵咏桔 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期229-232,共4页
应用表达TSHR-A亚单位的重组腺病毒免疫BALB/c小鼠建立甲亢模型。分别用1010和108病毒颗粒/50μl PBS的腺病毒免疫6~8周雌性BALB/c小鼠,在完成3次免疫后通过检测血清T4、TRAb水平,甲状腺体积及甲状腺病理来鉴定动物模型。在所有接受免... 应用表达TSHR-A亚单位的重组腺病毒免疫BALB/c小鼠建立甲亢模型。分别用1010和108病毒颗粒/50μl PBS的腺病毒免疫6~8周雌性BALB/c小鼠,在完成3次免疫后通过检测血清T4、TRAb水平,甲状腺体积及甲状腺病理来鉴定动物模型。在所有接受免疫的小鼠中,甲亢的发生率为75%,表现为血清T4、TRAb增高,甲状腺体积增大,甲状腺病理表现符合甲亢。低免疫剂量组和高免疫剂量组小鼠血清T4较对照组均显著增高,两组间无显著性差异;低免疫剂量组和高免疫剂量组小鼠血清TRAb水平均显著高于对照组,前者血清TRAb水平低于后者。该模型具有成模率高,稳定性好的特点。低免疫剂量建立的动物模型更符合GD特点。 展开更多
关键词 Graves病(GD) 促甲状腺素受体(tshr) tshr-A亚单位 tshr抗体(TRAb) 小鼠/动物模型
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绵羊季节性繁殖相关基因TSHR外显子多态性研究 被引量：6
3
作者 轩俊丽 马晓萌 +6 位作者 王慧华 曹家雪 魏彩虹 赵福平 马友记 张莉 杜立新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1342-1353,共12页
旨在研究乌珠穆沁羊与湖羊这两种具有不同繁殖性能和发情周期绵羊的促甲状腺激素受体（Thyroid stimulating hormone receptor,TSHR）基因外显子区遗传变异特性及其构建的单倍型在品种间的分布和对mRNA和蛋白质二级结构的影响,为进一步... 旨在研究乌珠穆沁羊与湖羊这两种具有不同繁殖性能和发情周期绵羊的促甲状腺激素受体（Thyroid stimulating hormone receptor,TSHR）基因外显子区遗传变异特性及其构建的单倍型在品种间的分布和对mRNA和蛋白质二级结构的影响,为进一步揭示其对TSHR表达调控的影响及表型效应奠定基础。本研究采用直接测序的方法对中国蒙古系2个绵羊品种共172个个体TSHR基因的遗传变异情况进行分析。共发现了6个突变位点,独立性卡方检验发现SNP1、SNP3、SNP4和SNP5 4个多态位点的基因型在两个绵羊群体间的分布存在极显著差异（P〈0.01）,其中SNP5为错义突变,其余为同义突变;对这4个位点进行连锁不平衡分析发现,SNP3和SNP4两个位点完全连锁,其余位点两两之间存在不同程度连锁关系;生物信息学分析发现不同的单倍型使TSHR基因的mRNA二级结构发生改变,SNP5使受体蛋白的二级结构发生改变。结果提示：（1）TSHR基因外显子区存在4个在两个绵羊品种中具有潜在生物学功能和表型效应的突变位点,可组成H1～H6共6种单倍型,其中H1（CGCC）和H4（TTTG）分别在乌珠穆沁羊和湖羊群体中为优势单倍型,这可能与这两种绵羊不同的发情周期有关。（2）外显子区SNP5位点突变影响mRNA和蛋白质二级结构的稳定性,可能是具有潜在表型效应的重要功能位点。 展开更多
关键词 绵羊 季节性繁殖 tshr基因 多态性
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TSHR基因突变与亚临床型毒性多结节性甲状腺肿的相关研究 被引量：5
4
作者 王凤军 徐曼 +2 位作者 盖宝东 金仲田 张德恒 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期211-213,共3页
目的　探讨 TSH受体 (THSR)基因突变在亚临床型毒性多结节性甲状腺肿 (s TMG)发病中的作用。方法　 9例 s TMG患者和 9例非毒性结节性甲状腺肿 (n TMG)患者 ,手术切除肿大的甲状腺组织 ,用酚 -氯仿-异戊醇法提取基因组 DNA,对目的基因... 目的　探讨 TSH受体 (THSR)基因突变在亚临床型毒性多结节性甲状腺肿 (s TMG)发病中的作用。方法　 9例 s TMG患者和 9例非毒性结节性甲状腺肿 (n TMG)患者 ,手术切除肿大的甲状腺组织 ,用酚 -氯仿-异戊醇法提取基因组 DNA,对目的基因片段进行聚合酶链反应 (PCR)及 DNA测序。结果　在 9例 s TMG患者中 ,发现 3例单碱基插入性突变 ,在 195 0位和 195 1位核酸之间插入了一个胞嘧啶 (C) ,使 6 16位以后氨基酸发生了移码突变 ,9例 n TMG未发生基因突变。结论　 TSHR基因突变可能在 s TMG形成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 tshr基因 基因突变 亚临床型 毒性多结节性甲状腺肿 聚合酶链反应 诊断标准
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绵羊TSHR基因表达及其多态性与季节性发情之间的关系 被引量：3
5
作者 夏青 狄冉 +5 位作者 刘艳琴 刘秋月 王翔宇 胡文萍 马琳 储明星 《家畜生态学报》 北大核心 2020年第3期15-20,共6页
为了探究绵羊TSHR基因表达及其多态性与季节性发情之间的关系,本试验采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)研究TSHR基因在常年发情小尾寒羊和季节性发情苏尼特羊的大脑、下丘脑和垂体组织中的表达情况,比... 为了探究绵羊TSHR基因表达及其多态性与季节性发情之间的关系,本试验采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)研究TSHR基因在常年发情小尾寒羊和季节性发情苏尼特羊的大脑、下丘脑和垂体组织中的表达情况,比较两个绵羊品种的3种组织中TSHR基因的表达差异。同时利用SequenomMassARRAY○R SNP技术检测2组绵羊(常年发情组:小尾寒羊、策勒黑羊和湖羊;季节性发情组:滩羊、苏尼特羊和草原型藏羊)TSHR基因SNP位点(g.89290286A>G和g.89355312G>A)的多态性,并与绵羊季节性发情性状进行关联分析。结果表明,无论在小尾寒羊还是苏尼特羊中TSHR基因下丘脑中表达量均极显著高于大脑和垂体(P<0.01),且苏尼特羊下丘脑中TSHR基因表达量极显著高于小尾寒羊(P<0.01)。绵羊TSHR基因g.89290286A>G和g.89355312G>A位点均存在AA、GA和GG共3种基因型,其中g.89290286A>G位点在小尾寒羊、策勒黑羊和草原型藏羊中表现为中度多态(0.25<PIC<0.5),在滩羊、湖羊和苏尼特羊中表现为低度多态(PIC<0.25),g.89355312G>A位点在6个绵羊品种中表现为中度多态(0.25<PIC<0.5)。TSHR基因上述2个位点的基因型频率在常年发情和季节性发情绵羊品种间差异均达到极显著水平(P<0.01)。综上,TSHR基因的表达可能与绵羊季节性发情有关,其g.89290286A>G和g.89355312G>A位点与绵羊季节性发情性状可能存在一定关联。 展开更多
关键词 绵羊 tshr基因 发情 组织表达
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TSHR基因上新发现SNP及其在GD致病中的评价 被引量：2
6
作者 梁军 高聆 +2 位作者 盛燕 宋怀东 赵家军 《医学研究杂志》 2007年第5期30-33,共4页
目的探讨TSH受体上单核苷酸多态性(SNP)与Graves病(GD)的相关性。方法(1)以一GD家系的12个成员(包括3例患者、9例家系成员)为研究对象,抽提外周血DNA,设计引物,扩增TSHR的全部外显子和部分内含子,PCR产物纯化后测序,对TSH受体的SNP进行... 目的探讨TSH受体上单核苷酸多态性(SNP)与Graves病(GD)的相关性。方法(1)以一GD家系的12个成员(包括3例患者、9例家系成员)为研究对象,抽提外周血DNA,设计引物,扩增TSHR的全部外显子和部分内含子,PCR产物纯化后测序,对TSH受体的SNP进行筛查。(2)应用病例-对照研究方法,检测筛查出的SNP基因型和等位基因变化频率与GD有无相关性。结果共发现8个多态位点,其中第8外显子上的多态位点在SNP库中未见报道,为首次发现。这些多态位点的变化频率在患者与正常组间相比较,无明显统计学差异。结论新发现的SNP及其他多态位点与GD不连锁;提示汉族人TSH受体基因与GD无相关性;该基因的多态位点在不同的人种间存在明显差异。 展开更多
关键词 tshr基因 单核苷酸多态性 GRAVES病
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循环肿瘤DNA中TSHR、RARβ2和RASSF1A启动子甲基化在甲状腺癌早期诊断中的价值 被引量：3
7
作者 黄铀新 罗耀玲 +2 位作者 任志平 张洪 邓俊华 《江西医药》 CAS 2017年第11期1117-1119,1127,共4页
目的研究甲状腺结节患者循环肿瘤DNA中TSHR、RARβ2和RASSF1A启动子甲基化状态,探讨其在甲状腺癌早期诊断中的价值。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)对16例甲状腺癌患者和59例良性甲状腺结节患者循环肿瘤DNA中TSHR、RARβ2和RASSF1A基因... 目的研究甲状腺结节患者循环肿瘤DNA中TSHR、RARβ2和RASSF1A启动子甲基化状态,探讨其在甲状腺癌早期诊断中的价值。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)对16例甲状腺癌患者和59例良性甲状腺结节患者循环肿瘤DNA中TSHR、RARβ2和RASSF1A基因启动子甲基化进行检测,分析其甲基化率与临床病理之间的关系,并评价其临床诊断效能。结果 TSHR在甲状腺癌组甲基化率为56.3%,与良性结节组(37.3%)间差异不显著(P>0.05);RARβ2和RASSF1A在甲状腺癌组甲基化率分别为37.5%和62.5%,均显著高于良性结节组(3.4%,22%),P<0.01。TSHR基因甲基化率在甲状腺癌患者性别、年龄、不同临床分期间均无统计学差异(P>0.05);RARβ2和RASSF1A基因甲基化率在状腺癌患者性别、年龄间无统计学差异,但与不同临床分期有关(P<0.05)。临床诊断效能比较显示:单独检测RASSF1A基因敏感度和Yonden指数最高,而RARβ2特异性最高。三个基因联合检测,其敏感度、特异性和Yonden指数均最高。结论 TSHR、RARβ2和RASSF1A基因异常甲基化与甲状腺癌发生发展相关,三者联合检测有助于甲状腺癌的诊断。 展开更多
关键词 甲状腺癌 甲基化 tshr RARβ2 RASSF1A
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甲状腺乳头状癌中TSHR与NIS基因启动子区甲基化状态与侵袭性相关性研究 被引量：3
8
作者 许敬 郭新海 葛明华 《中国现代医生》 2016年第21期1-5,共5页
目的本研究分析甲状腺乳头状癌中促甲状腺素受体与钠碘转运体基因启动子区甲基化状况,探讨甲状腺功能基因甲基化与甲状腺乳头状癌病理侵袭性之间相关性。方法采用甲基化荧光实时特异聚合酶链反应甲状腺乳头状癌中TSHR与NIS基因启动区异... 目的本研究分析甲状腺乳头状癌中促甲状腺素受体与钠碘转运体基因启动子区甲基化状况,探讨甲状腺功能基因甲基化与甲状腺乳头状癌病理侵袭性之间相关性。方法采用甲基化荧光实时特异聚合酶链反应甲状腺乳头状癌中TSHR与NIS基因启动区异常甲基化情况,探讨该区甲基化与病理参数之间的关系,以及两基因甲基化之间相关情况。结果甲状腺癌中NIS与TSHR基因甲基化均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。TSHR启动区域5’-Cp G岛甲基化分别与病灶多少、颈淋巴结转移及局部侵犯有关(P<0.05),NIS基因启动子区域5’-Cp G岛甲基化分别与患者年龄、多病灶、颈淋巴结转移及病理分期有关(P<0.05),两基因甲基化相关性分析:1TSHR启动子甲基化发生显著高于NIS;2TSHR与NIS基因的启动子区甲基化有关系。结论乳头状甲状腺癌的功能基因TSHR与NIS基因启动区甲基化是常见现象,可能在甲状腺癌的发生发展过程中发挥重要作用,可能与肿瘤侵袭性相关。两组基因甲基化具一定相关性,联合两个基因启动子区域甲基化检测可能更有意义。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌(PTC) 钠/碘协同转运体(NIS) 促甲状腺素受体(tshr) 甲基化 实时荧光定量甲基化-PCR
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细胞因子对人眼眶脂肪细胞分化过程中TSHr表达的影响 被引量：1
9
作者 何剑峰 吴中耀 +2 位作者 杨华胜 颜建华 王莉菲 《广西医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第2期277-279,共3页
目的:探讨细胞因子对体外培养的人眼眶脂肪细胞分化过程中促甲状腺素受体(TSHr)表达的影响。方法:对8例人眼眶脂肪细胞进行分化培养,在培养基质中分别加入IL-2I、L-4I、L-6I、L-10和干扰素-γ(IFN-γ)等细胞因子,12 d收集细胞,通过RT-PC... 目的:探讨细胞因子对体外培养的人眼眶脂肪细胞分化过程中促甲状腺素受体(TSHr)表达的影响。方法:对8例人眼眶脂肪细胞进行分化培养,在培养基质中分别加入IL-2I、L-4I、L-6I、L-10和干扰素-γ(IFN-γ)等细胞因子,12 d收集细胞,通过RT-PCR观察TRHr的表达;放射免疫法检测TSH刺激后细胞内环-磷酸腺苷(cAMP)的含量;油红染色提取法检测细胞内脂肪含量。结果:IL-6I、L-4I、L-10I、L-2等细胞因子处理组的目的条带均强于未处理组(均P<0.01),而IFN-γ组明显弱于其他细胞因子处理组(P<0.01),与未处理组无明显差别(P>0.05)。经细胞因子处理后的培养的人眼眶脂肪细胞对TSH刺激2 h后cAMP的产量以IL-6组为最高,是未给予细胞因子处理组(对照组)的2倍多(P=0.000),IL-4和IL-10,处理组也均有不同程度的增高(P=0.045,P=0.034),IFN-γ处理组对TSH刺激后cAMP的产量则明显低于无细胞因子组(P=0.000),而IL-2处理组则与无细胞因子组的差异无统计学意义(P=0.057)。结论:IL-6、IL-4I、L-10等细胞因子可促进人眼眶脂肪细胞分化过程中TSHr的表达和增加细胞内的脂肪含量,IFN-γ可抑制人眼眶脂肪细胞分化过程中TSHr的表达和降低细胞内的脂肪含量。 展开更多
关键词 眼眶脂肪 细胞因子 tshr Grave眼病
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先天性原发性甲状腺功能减低症50例TSHR基因研究 被引量：1
10
作者 黄晓东 顾学范 +3 位作者 沈永年 张雅芬 叶军 陈瑞冠 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期562-564,共3页
目的探讨促甲状腺激素受体(TSHR)基因在先天性原发性甲状腺功能减低症(甲低)病因学中的地位。方法对50例先天性甲状腺功能减低症患者,从外周血白细胞中提取基因组DNA,采用PCR-SSCP方法对TSHR基因外显子10、6、1进行分析。结果在TSHR基... 目的探讨促甲状腺激素受体(TSHR)基因在先天性原发性甲状腺功能减低症(甲低)病因学中的地位。方法对50例先天性甲状腺功能减低症患者,从外周血白细胞中提取基因组DNA,采用PCR-SSCP方法对TSHR基因外显子10、6、1进行分析。结果在TSHR基因外显子10、6、1中未发现突变。结论已发现的TSHR基因编码区的结构改变,在中国人甲低的病因学中可能不具有重要地位。 展开更多
关键词 先天性甲状腺功能减低症 原发性 tshr基因 单链构象多态性分析
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以Ad-TSHR-289构建Graves病动物模型的研究进展 被引量：1
11
作者 覃海知 黄一薇 +3 位作者 刘强 李承铉 李海洋 谢春光 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2017年第7期1561-1564,共4页
Graves病(GD)动物模型的探索经历了一个漫长的过程,以Ad-TSHR-289诱导的甲亢动物模型是目前较符合GD发病特点且使用广泛的的模型。文章总结近年来国内外相关文献,探讨使用Ad-TSHR-289构建GD动物模型的免疫方案及影响因素,总结该造模方... Graves病(GD)动物模型的探索经历了一个漫长的过程,以Ad-TSHR-289诱导的甲亢动物模型是目前较符合GD发病特点且使用广泛的的模型。文章总结近年来国内外相关文献,探讨使用Ad-TSHR-289构建GD动物模型的免疫方案及影响因素,总结该造模方法的优势及存在的问题,为进一步完善GD动物模型提供依据。 展开更多
关键词 GD动物模型 甲亢 Ad-tshr-289 腺病毒
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TSHR蛋白在恶性肿瘤组织表达及其生物学意义 被引量：2
12
作者 王朝晖 李玉中 宋丽媛 《中国实验诊断学》 2013年第11期2076-2078,共3页
促甲状腺激素受体（thyroid stimulating hor-mone receptor, TSHR）是调控甲状腺细胞生长、分化的主要受体，其异常表达是获得性、遗传性或先天性甲状腺疾病的重要原因之一。近几年有研究发现甲状腺癌常有TSHR表达增加。国外有学者研... 促甲状腺激素受体（thyroid stimulating hor-mone receptor, TSHR）是调控甲状腺细胞生长、分化的主要受体，其异常表达是获得性、遗传性或先天性甲状腺疾病的重要原因之一。近几年有研究发现甲状腺癌常有TSHR表达增加。国外有学者研究发现TSHR—mRNA在肺癌、前列腺癌和结肠癌等呈现过度表达。TSHR蛋白与恶性肿瘤之间的关系至今国内罕见报道。本研究通过检测多种恶性肿瘤组织TSHR蛋白表达，旨在了解TSHR与恶性肿瘤发生发展之间的关系。 展开更多
关键词 恶性肿瘤组织 tshr 肿瘤组织表达 R蛋白 生物学意义 促甲状腺激素受体 receptor 甲状腺细胞生长
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甲状腺乳头状癌组织中TSHR基因启动子甲基化研究 被引量：2
13
作者 唐建东 栗夏莲 《医学研究杂志》 2010年第4期77-79,共3页
目的探讨甲状腺乳头状癌组织中促甲状腺激素受体基因(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)基因启动子区5′端CpE岛甲基化改变的特点与临床特征的关系。方法采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测TSHR基因... 目的探讨甲状腺乳头状癌组织中促甲状腺激素受体基因(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)基因启动子区5′端CpE岛甲基化改变的特点与临床特征的关系。方法采用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测TSHR基因启动子甲基化情况。结果 (1)甲状腺乳头状癌组织中TSHR基因启动子甲基化的发生率为64.7%(22/34),癌旁组织中TSHR基因启动子甲基化的发生率为26.5%(9/34),癌组织中TSHR基因启动子甲基化率显著高于癌旁组织(P<0.05)。(2)有淋巴结转移的甲状腺乳头状癌组织TSHR基因启动子甲基化的发生率为83.3%(15/18),高于无淋巴结转移组43.8%(7/16)(P<0.05)。结论 TSHR基因启动子异常甲基化是甲状腺乳头状癌发展过程中的分子事件之一,可能影响了甲状腺乳头状癌细胞的摄碘的功能。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 tshr基因 甲基化特异性PCR
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TSHr在Graves眼病发病机制中作用的研究进展 被引量：1
14
作者 何剑峰 《广西医学》 CAS 2005年第6期863-866,共4页
关键词 tshr GRAVES眼病 发病机制 研究进展 促甲状腺素受体 自身抗原
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TSHR在甲状腺相关眼病中表达的研究
15
作者 何金 刘会敏 陈静 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期564-564,共1页
目的:检测甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)患者球后组织和眼外肌中是否有促甲状腺激素受体(TSHR)蛋的表达。方法:选用27例TAO患者球后脂肪、结缔组织和眼外肌标本和4例正常脂肪、结缔组织及眼外肌标本,常规石蜡... 目的:检测甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)患者球后组织和眼外肌中是否有促甲状腺激素受体(TSHR)蛋的表达。方法:选用27例TAO患者球后脂肪、结缔组织和眼外肌标本和4例正常脂肪、结缔组织及眼外肌标本,常规石蜡切片,3％H2O2灭活内源性过氧化物酶,pH 6.0柠檬酸缓冲液高压锅修复抗原,加兔抗人TSHR抗体4℃过夜, 展开更多
关键词 tshr 甲状腺相关眼病 表达 发病机制
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实时定量RT-PCR方法检测豚鼠TSHR免疫BALB/c小鼠甲状腺TSHR的表达
16
作者 朱云娟 黄丽娟 +2 位作者 陈宁 沈炳玲 陆凤先 《天津医科大学学报》 2005年第4期509-511,514,共4页
目的:建立外标准法SYBRGREENI实时定量(real-time)RT-PCR方法,以检测豚鼠TSHR分子免疫对BALB/c小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达的影响。方法:取正常BALB/c小鼠甲状腺提取甲状腺总RNA,逆转录后进行PCR,得到333bp扩增产物。经回收纯化后作为real... 目的:建立外标准法SYBRGREENI实时定量(real-time)RT-PCR方法,以检测豚鼠TSHR分子免疫对BALB/c小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达的影响。方法:取正常BALB/c小鼠甲状腺提取甲状腺总RNA,逆转录后进行PCR,得到333bp扩增产物。经回收纯化后作为real-timePCR的标准品,稀释为106、105、104、103、102、101拷贝,制作标准曲线;并同时进行普通PCR,比较其灵敏度。优化反应条件使溶解曲线有特异扩增。检测豚鼠TSHR分子免疫的BALB/c小鼠甲状腺TSHRmRNA的表达。结果:建立的外标准法SYBRGREENI实时定量RT-PCR方法可以灵敏的检测到10copy的核酸,灵敏度为普通PCR的104倍;溶解曲线只有特异峰,溶解温度为82.9℃。没有明显的引物二聚体和非特异峰出现。不同标准点批间变异系数范围为5.8%￣14.3%(n=6)。与对照组比较,TSHR大分子免疫的BALB/c小鼠甲状腺组织TSHRmRNA水平显著升高(P<0.05)。结论:外标准法SYBRGREENI实时定量RT-PCR具有灵敏度高,特异性强,重复性好的特点,比普通PCR更精确地检测出小鼠甲状腺组织TSHRmRNA的水平。 展开更多
关键词 外标准法实时定量RT—PCR tshr MRNA SYBR GREEN I
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促甲状腺素受体膜外区(hTSHR-ECD)在大肠杆菌中的表达和纯化
17
作者 潘德顺 陈伟强 《广东药学院学报》 CAS 2009年第5期519-521,共3页
目的用大肠杆菌表达重组人促甲状腺素受体膜外区(hTSHR-ECD)蛋白,为hTSHR膜外区的研究提供工具。方法从人甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR分离得到TSHR膜外区cDNA,双酶切后插入原核表达载体pRSETC中,进行序列分析;再转化到表达菌BL21中表... 目的用大肠杆菌表达重组人促甲状腺素受体膜外区(hTSHR-ECD)蛋白,为hTSHR膜外区的研究提供工具。方法从人甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR分离得到TSHR膜外区cDNA,双酶切后插入原核表达载体pRSETC中,进行序列分析;再转化到表达菌BL21中表达、纯化、Western blotting分析。结果经SDS-PAGE电泳有一条明显的蛋白带,与预期分子量相符,并用Western blot证实;纯化后,获得单一条带的靶蛋白。结论成功获得高纯度人TSHR膜外区蛋白。 展开更多
关键词 人tshr膜外区 RT-PCR 蛋白质纯化
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TSHR基因T315A位点在不同繁殖特性绵羊群体中的多态性研究 被引量：5
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作者 窦立静 赵赓 +2 位作者 高磊 杨井泉 沈敏 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第4期9-15,共7页
试验以促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)作为影响绵羊季节性繁殖的候选基因开展了多态性分析研究。结果在绵羊TSHR基因CDS区发现了一处c.31A>G突变位点,该突变为错义突变(T315A)。该位点在不同繁殖特性... 试验以促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)作为影响绵羊季节性繁殖的候选基因开展了多态性分析研究。结果在绵羊TSHR基因CDS区发现了一处c.31A>G突变位点,该突变为错义突变(T315A)。该位点在不同繁殖特性(季节性繁殖和常年发情)绵羊群体的基因型和等位基因频率有着明显不同的分布趋势,GG基因型和G等位基因为常年发情的3个绵羊品种(多浪羊、小尾寒羊、湖羊)的优势基因型和优势等位基因;常年发情的3个绵羊群体和季节性繁殖的3个绵羊群体之间等位基因G/A比值存在显著性差异(P<0.05)。研究结果表明该SNP位点上G等位基因与绵羊常年发情性状具有显著的相关性,该位点碱基突变可能导致TSHR构象改变,与TSH结合能力发生变化,进行影响到绵羊的季节性繁殖活动。 展开更多
关键词 tshr 单链构象多态性 季节性繁殖 绵羊
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绵羊TSHR基因多态性及其与繁殖性状关联分析 被引量：2
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作者 寸静宇 刘秋月 +6 位作者 王翔宇 狄冉 胡文萍 张效生 张金龙 赵永聚 储明星 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期50-54,共5页
为探讨TSHR基因多态性与绵羊季节性繁殖和产羔数的关系,本实验采用Sequenom Mass-ARRAY?SNP分型技术检测常年发情的小尾寒羊(407只)、湖羊(101只)、策勒黑羊(48只)和季节性发情的苏尼特羊(21只)、滩羊(22只)、草原型藏羊(161只)TSHR基... 为探讨TSHR基因多态性与绵羊季节性繁殖和产羔数的关系,本实验采用Sequenom Mass-ARRAY?SNP分型技术检测常年发情的小尾寒羊(407只)、湖羊(101只)、策勒黑羊(48只)和季节性发情的苏尼特羊(21只)、滩羊(22只)、草原型藏羊(161只)TSHR基因的单核苷酸多态性(SNP)位点,并进行群体遗传学分析及其与小尾寒羊产羔数的关联分析。结果表明:TSHR基因g.89430525G>A、g.89363881T>C和g.89431097C>G的基因型频率和等位基因频率在常年发情绵羊品种和季节性发情绵羊品种间差异极显著(P<0.01);这3个SNP位点在大多数绵羊品种中表现为中度多态,且在各个绵羊品种中处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05);TSHR基因g.89431097C>G位点的多态性与小尾寒羊第1～3胎的产羔数显著相关(P<0.05),其中CC型母羊的产羔数显著低于CG和GG型母羊(P<0.05)。本研究表明,TSHR基因与绵羊季节性繁殖性状具有较强的相关性,同时参与绵羊季节性繁殖和多羔性状的调控。 展开更多
关键词 绵羊 tshr基因 多羔 季节性繁殖 SNP 关联
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人TSHR膜外区cDNA克隆及真核表达载体的构建 被引量：2
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作者 武敏 施秉银 +4 位作者 伍丽萍 兰玲 吴小燕 张进安 徐莉 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期123-125,共3页
目的通过生物技术获得促甲状腺激素受体膜外区表达载体,为TSHR膜外区的研究提供有力工具。方法从人甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR分离得到TSHR膜外区cDNA,双酶切后插入真核表达载体pcDNA3.1(+)。结果经酶切鉴定、测序分析表明TSHR膜外... 目的通过生物技术获得促甲状腺激素受体膜外区表达载体,为TSHR膜外区的研究提供有力工具。方法从人甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR分离得到TSHR膜外区cDNA,双酶切后插入真核表达载体pcDNA3.1(+)。结果经酶切鉴定、测序分析表明TSHR膜外区片段与GenBank提供的完全相同。结论成功构建了人TSHR膜外区真核表达载体。 展开更多
关键词 人tshr膜外区 RT—PCR 真核表达载体
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