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UC-MSCs腹腔移植对db^-/db^-小鼠血糖和体重的影响 被引量:2
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作者 李翰阳 张尚衡 +4 位作者 王耀坤 王芳芳 张慧明 苏菊香 陈光 《牡丹江医学院学报》 2019年第4期9-11,共3页
目的明确脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对2型糖尿病(T2DM)db^-/db^-小鼠的临床疗效及安全有效的移植途径,旨在为临床应用提供实验与理论数据。方法db/m和db^-/db^-小鼠各10只,每种小鼠各分为2组,db/m对照组,db/m+UC-MSCs组,db^-/db^-模型组... 目的明确脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对2型糖尿病(T2DM)db^-/db^-小鼠的临床疗效及安全有效的移植途径,旨在为临床应用提供实验与理论数据。方法db/m和db^-/db^-小鼠各10只,每种小鼠各分为2组,db/m对照组,db/m+UC-MSCs组,db^-/db^-模型组,db^-/db^-+UC-MSCs组,5只/组。对照组和模型组给予1mL生理盐水腹腔注射;db/m+UC-MSCs和db^-/db^-+UC-MSCs组腹腔注射UC-MSCs为1×10^7个细胞/只鼠,总液体量为1mL。每周固定时间记录餐后血糖与体重,计算各组小鼠生存率。结果与db-/db-模型组小鼠相比,腹腔途径移植UC-MSCs后,db^-/db^-小鼠的血糖水平明显下降,与非移植db^-/db^-小鼠比较差异有显著性,对db/m小鼠无影响;移植与非移植小鼠体重无明显变化。db^-/db^-+UC-MSCs组小鼠出现部分死亡,生存率为75%,其它组小鼠生存率均为100%。结论UC-MSCs腹腔移植途径可有效控制T2DM小鼠血糖变化,对体重变化无明显影响。可为临床治疗提供参考。 展开更多
关键词 uc-mscs 腹腔注射移植途径 db-/db-小鼠 血糖 体重
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UC-MSC联合利妥昔单抗及甲强龙对系统性红斑狼疮免疫炎性易栓状态的影响作用 被引量:8
2
作者 顾蔚 徐开林 +9 位作者 林传明 张育 孙梅 何斌 王方方 裴孝平 陈沛帅 谢晓燕 沈连军 顾键 《血栓与止血学》 2014年第3期121-125,共5页
目的初步探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)联合利妥昔单抗(rituximab,美罗华)与甲强龙对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者免疫炎性易栓状态的干预作用。方法8例SLE患者经肾活... 目的初步探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)联合利妥昔单抗(rituximab,美罗华)与甲强龙对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者免疫炎性易栓状态的干预作用。方法8例SLE患者经肾活检确诊为狼疮性肾炎。予SLE活动指数(SLEDAI积分)评价病情活动程度;流式细胞术(FCM)监测B细胞清除、T细胞亚群及炎症介质表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗心磷脂抗体(ACA)、狼疮抗凝物(LA)水平;以磁珠法检测血凝常规、血浆D二聚体(D-D)、抗凝血酶(AT)等。结果随访第1个月临床症状明显改善,CD19和CD20降至"0";至第3个月全组SLEDAI评分<4分,Th1(IFN-γ)、Th2(IL-4)及CD11b、CD25水平均接近正常;随访至1年上述指标维持在正常值内。结论利妥昔单抗联合UC-MSC所具有的靶向作用,能有效清除外周血致病性B细胞,恢复Th1/Th2免疫平衡状态,减少炎症因子释放,促进机体免疫重建,恢复凝血-抗凝系统平衡,从而改善机体免疫炎性易栓状态。 展开更多
关键词 利妥昔单抗 uc-msc 系统性红斑狼疮 易栓症 靶向治疗
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UC-MSC移植对CIA大鼠炎症因子表达水平的调控作用
3
作者 李慧 顾健 +2 位作者 林传明 顾薇 沈连军 《中国医药导报》 CAS 2012年第36期32-34,共3页
目的观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)移植对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠血清白介素-1(IL-1)、IL-10、IL-17、IL-18表达水平的影响,以探讨UC-MSC移植对CIA大鼠炎症因子的调控作用。方法 90只SD大鼠... 目的观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)移植对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠血清白介素-1(IL-1)、IL-10、IL-17、IL-18表达水平的影响,以探讨UC-MSC移植对CIA大鼠炎症因子的调控作用。方法 90只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、UC-MSC治疗组,每组各30只;采用鸡Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂建立CIA大鼠模型;治疗前后采用关节炎指数(AI)评分对大鼠关节炎症进行评估;以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠治疗前后血清IL-1、IL-10、IL-17、IL-18水平变化。结果模型组血清IL-1、IL-17、IL-18水平均明显高于同期空白对照组,而IL-10水平则低于同期空白对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);UC-MSC治疗组治疗后第1、3周时IL-1、IL-17、IL-18水平低于同期模型组,IL-10水平高于同期模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05);至第5周上述指标与空白对照组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 CIA大鼠存在免疫功能紊乱,其促炎症因子水平显著增高,抑炎症因子降低;UC-MSC能下调CIA大鼠促炎症因子水平,而上调炎症抑制因子,减轻机体免疫性炎症反应,促进疾病缓解。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 胶原诱导型关节炎大鼠 炎症因子 免疫调节
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犬UC-MSC-Exo来源miRNA表达分析及其cfa-miR-34a/-143对血管内皮细胞增殖的影响
4
作者 罗惠娜 罗冬章 +7 位作者 樊全宝 王丙云 詹小舒 陈胜锋 陈志胜 白银山 刘璨颖 计慧琴 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第3期676-685,共10页
试验旨在分离鉴定犬脐带间充质干细胞分泌的外泌体(UC-MSC-Exo),并研究犬UC-MSC-Exo来源miRNA的表达情况及其对血管内皮细胞(VEC)增殖的影响。采用超高速离心法从犬脐带间充质干细胞培养上清中分离外泌体,采用Western blotting、透射电... 试验旨在分离鉴定犬脐带间充质干细胞分泌的外泌体(UC-MSC-Exo),并研究犬UC-MSC-Exo来源miRNA的表达情况及其对血管内皮细胞(VEC)增殖的影响。采用超高速离心法从犬脐带间充质干细胞培养上清中分离外泌体,采用Western blotting、透射电镜和纳米颗粒跟踪分析法(NTA)进行鉴定。通过对犬UC-MSC-Exo中的miRNA进行测序,筛选出2个目标miRNA(cfa-miR-34a和cfa-miR-143)并合成相应的mimic和inhibitor,转染犬VEC;采用荧光显微镜和实时荧光定量PCR法检测mimic和inhibitor转染情况及其转染效率;CCK-8法检测转染mimic和inhibitor对犬VEC增殖能力的影响,并对其靶基因进行预测。结果显示,犬UC-MSC-Exo表达特异性的外泌体表面蛋白CD9、CD63和CD81,粒径集中在100~200 nm,电镜检测成典型的杯状。免疫荧光结果表明,miRNA mimic和inhibitor均已转染进细胞内,并且聚集于细胞质中;实时荧光定量PCR结果表明,转染cfa-miR-34a mimic和cfa-miR-143 mimic后,细胞内cfa-miR-34a和cfa-miR-143表达量分别升高约400和78倍;而转染cfa-miR-34a inhibitor和cfa-miR-143 inhibitor后,细胞内cfa-miR-34a和cfa-miR-143表达量分别降低了77%和83%;CCK-8检测结果表明,cfa-miR-34a和cfa-miR-143在体外可极显著促进血管内皮细胞的增殖(P<0.01)。cfa-miR-34a靶基因预测结果发现,共有195个保守靶位点,与miRDB预测结果共有69个交集靶基因;cfa-miR-143则有448个保守靶基因,其与miRDB预测结果有128个交集靶基因。本试验成功分离得到犬UC-MSC-Exo,且证实目标miRNA cfa-miR-34a和cfa-miR-143在体外可极显著促进VEC增殖。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞(uc-msc) 外泌体 MIRNA 血管内皮细胞 增殖
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UC-MSC移植对CIA大鼠免疫细胞亚群免疫功能的调节作用 被引量:4
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作者 顾健 林传明 +10 位作者 顾蔚 蔡心珍 李邹 任敏敏 孙幸 倪军 沈连军 吴蔚 何斌 孙梅 张育 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期166-170,共5页
本研究旨在观察脐带间充质干细胞(Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,UC-MSC)移植对CIA(collagen typeⅡ-induced Arthritis,CIA)大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、辅助性Th17细胞及中性粒细胞的影响,初步探讨UC-MSC移植对CI... 本研究旨在观察脐带间充质干细胞(Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,UC-MSC)移植对CIA(collagen typeⅡ-induced Arthritis,CIA)大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、辅助性Th17细胞及中性粒细胞的影响,初步探讨UC-MSC移植对CIA大鼠免疫细胞亚群的调节作用。大鼠分为3组:CIA组(模型组),UC-MSC治疗组及空白对照组。经尾静脉给CIA大鼠注射UC-MSC,以流式细胞术(FCM)检测大鼠外周血CD4+CD25+细胞比例及中性粒细胞表面NCD11b表达,以酶联免疫吸附试验(ELISA)观察大鼠血清白介素-17(IL-17)水平。结果表明:模型组大鼠外周血NCD11b平均荧光强度(MFI)及IL-17水平均明显高于同期空白对照组,CD4+CD25+细胞比例则显著降低(P<0.05),UC-MSC治疗组大鼠NCD11b及IL-17水平显著低于模型组(P<0.05),而CD4+CD25+Treg比例升高(P<0.05);至第5周UC-MSC治疗组上述指标均接近于空白对照组(P>0.05)。结论:UC-MSC可上调CIA大鼠外周血Treg比例,抑制Th17细胞分泌IL-17及中性粒细胞的活性,减轻机体免疫性炎症反应,减少促炎因子的释放,诱导机体免疫重建。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 CIA大鼠 TREG细胞 IL-17 免疫调节
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无血清条件下UC-MSCs和BMECs共培养对IGF-Ⅰ表达的影响 被引量:1
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作者 赵艳坤 邵伟 +1 位作者 雒诚龙 余雄 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第2期411-416,共6页
试验旨在探讨无血清条件下脐带间充质干细胞(UC-MSCs)和奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)共培养对类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)表达的影响,将UC-MSCs和BMECs按1∶2直接共培养,对比单纯培养的两种细胞,48h时利用ELISA法检测各组上清IGF-Ⅰ浓度... 试验旨在探讨无血清条件下脐带间充质干细胞(UC-MSCs)和奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)共培养对类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)表达的影响,将UC-MSCs和BMECs按1∶2直接共培养,对比单纯培养的两种细胞,48h时利用ELISA法检测各组上清IGF-Ⅰ浓度水平,再利用Transwell小室将两种细胞分离培养,实时荧光定量PCR检测各组细胞IGF-ⅠR、IGF-ⅠmRNA的表达。结果显示,共培养中IGF-Ⅰ浓度显著高于UC-MSCs组(P<0.05),极显著高于BMECs组(P<0.01);UC-MSCs/BMECs、BMECs/UC-MSCs组IGF-ⅠmRNA表达值均极显著高于单纯培养组(P<0.01),BMECs/UC-MSCs组显著高于UC-MSCs/BMECs组(P<0.05);UC-MSCs/BMECs、BMECs/UC-MSCs组IGF-ⅠR mRNA表达值显著或极显著高于单纯培养组(P<0.05;P<0.01),BMECs/UC-MSCs组较UCMSCs/BMECs组差异显著(P<0.05)。综上,体外无血清培养条件下,UC-MSCs和BMECs共培养可显著提高IGF-ⅠR及IGF-ⅠmRNA表达,IGF-Ⅰ浓度水平和IGF-ⅠR mRNA的表达具有一致性,IGF-Ⅰ主要存在于UCMSCs中。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 奶牛乳腺上皮细胞 无血清 共培养 类胰岛素样生长因子-Ⅰ 实时荧光定量PCR
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Transplantation of UC-MSCs on collagen scaffold activates follicles in dormant ovaries of POF patients with long history of infertility 被引量:63
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作者 Lijun Ding Guijun Yan +20 位作者 Bin Wang Lu Xu Yan Gu Tong Ru Xiaoying Cui Lei Lei Jingyu Liu Xiaoqiang Sheng Bin Wang Chunxue Zhang Yanjun Yang Ruiwei Jiang Jianjun Zhou Na Kong Feifei Lu Huaijun Zhou Yannan Zhao Bing Chen Yali Hu Jianwu Dai Haixiang Sun 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2018年第12期1554-1565,共12页
Premature ovarian failure(POF) is a refractory disease for clinical treatment with the goal of restoring fertility. In this study,umbilical cord mesenchymal stem cells on a collagen scaffold(collagen/UC-MSCs) can acti... Premature ovarian failure(POF) is a refractory disease for clinical treatment with the goal of restoring fertility. In this study,umbilical cord mesenchymal stem cells on a collagen scaffold(collagen/UC-MSCs) can activate primordial follicles in vitro via phosphorylation of FOXO3 a and FOXO1. Transplantation of collagen/UC-MSCs to the ovaries of POF patients rescued overall ovarian function, evidenced by elevated estradiol concentrations, improved follicular development, and increased number of antral follicles. Successful clinical pregnancy was achieved in women with POF after transplantation of collagen/UC-MSCs or UC-MSCs. In summary, collagen/UC-MSC transplantation may provide an effective treatment for POF. 展开更多
关键词 premature ovarian failure collagen scaffold uc-mscs primordial follicle activation GRANULOSA cells FOXO3a FOXO1
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慢病毒载体系统介导hUC-MSC绿色荧光蛋白和荧光素酶共表达技术体系的建立 被引量:3
8
作者 林凤锦 王水良 +4 位作者 黄粱浒 王瑾 祝玲 王庆华 谭建明 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2013年第3期6-11,共6页
目的建立慢病毒载体系统介导的人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶共表达技术体系。方法 GFP和荧光素酶共表达慢病毒载体与相应包装质粒psPAX2和pMD2.G经聚乙烯亚胺介导共转染HEK293T细胞以包装病毒;病毒感染P4代h... 目的建立慢病毒载体系统介导的人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶共表达技术体系。方法 GFP和荧光素酶共表达慢病毒载体与相应包装质粒psPAX2和pMD2.G经聚乙烯亚胺介导共转染HEK293T细胞以包装病毒;病毒感染P4代hUC-MSC 12 h后,再行嘌呤霉素筛选24 h,普通光学显微镜观察细胞形态,荧光显微镜下观察GFP的表达情况,IVIS Kinetic成像系统拍照以观察和记录慢病毒感染后hUC-MSC荧光素酶的表达情况;MTS法行细胞生长曲线作图,同时,普通和实时定量RTPCR法检测细胞周期调控相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E1和p21WAF1/CIP1的表达。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果慢病毒感染并不会造成体外培养hUC-MSC形态的明显改变,而荧光显微镜和IVIS Kinetic成像系统的观察结果则分别证实,GFP和荧光素酶经慢病毒载体系统的介导可在hUC-MSC中成功地共表达。此外,细胞生长曲线作图结果表明,对照和GFP及荧光素酶共表达慢病毒感染后hUC-MSC的生长增殖速率相仿(P>0.01);实时定量RT-PCR法检测结果则显示,与对照慢病毒感染相比,GFP和荧光素酶共表达慢病毒感染后其细胞周期调控相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E1和p21WAF1/CIP1mRNA表达水平分别是对照组的1.11倍(P=0.130)、0.54倍(P=0.000)和0.78倍(P=0.005),表明外源GFP和荧光素酶共表达对体外培养的hUC-MSC生长增殖等表型无显著影响。结论慢病毒载体系统可有效介导外源基因在hUC-MSC中的表达;同时,GFP和荧光素酶在hUC-MSC中的共表达也将极大地方便其体内转归的示踪。 展开更多
关键词 慢病毒 脐带间充质干细胞 绿色荧光蛋白 荧光素酶 外源 基因共表达
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LIF和bFGF对脐带间充质干细胞体外自我维持和更新的影响 被引量:4
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作者 胡文龙 吴平平 +2 位作者 殷嫦嫦 施剑明 殷明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期184-190,共7页
目的:研究LIF联合bFGF对人脐带间充质干细胞hUC-MSC增殖、干性维持及衰老的影响。方法:实验分为4组:对照组加入完全培养基(含10%FBS的α-MEM)常规培养;LIF组,加入含10 ng/ml LIF的完全培养液;bFGF组,加入含10 ng/ml bFGF的完全培养液;... 目的:研究LIF联合bFGF对人脐带间充质干细胞hUC-MSC增殖、干性维持及衰老的影响。方法:实验分为4组:对照组加入完全培养基(含10%FBS的α-MEM)常规培养;LIF组,加入含10 ng/ml LIF的完全培养液;bFGF组,加入含10 ng/ml bFGF的完全培养液;联合组,加入含10 ng/ml LIF和10 ng/ml bFGF的完全培养液。采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)测定各组第4代hUC-MSC生长曲线;在倒置相差显微镜下观察各组hUC-MSC形态变化;β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老情况;RT-PCR检测表达情况。结果:4组细胞生长曲线均近似S形,细胞增殖速率表现为联合组>bFGF组>LIF组>对照组。对照组细胞较早出现衰老,增殖减慢;LIF组细胞早期形态维持较好,但增殖相对缓慢,后期大部分细胞衰老;bFGF组部分细胞呈衰老改变,但增殖较快;联合组细胞增殖迅速,能长期维持hUC-MSC形态特征,仅有少量衰老细胞。RT-PC R显示,LIF和bFGF均能上调PCNA、OCT4、NANOG,下调P16、P21、P53的表达,其联合作用效果更明显。结论LIF联合bFGF不仅可以促进hUC-MSC增殖,维持其干性而且能够延缓hUC-MSC的衰老。 展开更多
关键词 h uc-msc LIF b FGF 自我更新 自我维持
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间充质干细胞与汗腺细胞融合实现汗腺再生的可行性研究 被引量:1
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作者 刘坤坤 赵亚平 +2 位作者 高玮 高慧 谢淼 《河北医药》 CAS 2020年第17期2679-2683,共5页
大面积烧伤患者创面愈合后大量汗腺细胞受损,体内热量难以顺利散发,严重影响患者工作及生活。如何实现大面积深度烧伤创面的汗腺重建,成为目前亟待解决一大难题。融合技术经过几十年的发展已经变得非常成熟,从理论上说利用细胞融合技术... 大面积烧伤患者创面愈合后大量汗腺细胞受损,体内热量难以顺利散发,严重影响患者工作及生活。如何实现大面积深度烧伤创面的汗腺重建,成为目前亟待解决一大难题。融合技术经过几十年的发展已经变得非常成熟,从理论上说利用细胞融合技术可以使任何2个动物细胞通过体细胞杂交而形成新的生物资源。本文就目前干细胞/汗腺细胞融合体实现汗腺再生的可行性进行综述。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞(uc-mscs) 人汗腺细胞(h-SGCs) 融合细胞 聚乙二醇化学融合法 细胞融合技术
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脐带间充质干细胞免疫调节功能的研究进展 被引量:2
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作者 王雨 陈龙菊 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1001-1006,共6页
脐带间充质干细胞(UC-MSC)是由脐带血、脐静脉、脐动脉或华通胶分离培养出来的一类具有自我更新和多向分化潜能的干细胞,具有获取过程无创伤、低免疫源性等优势。UC-MSC的细胞表型并非一成不变,而会受到各种刺激因素的影响。UC-MSC对自... 脐带间充质干细胞(UC-MSC)是由脐带血、脐静脉、脐动脉或华通胶分离培养出来的一类具有自我更新和多向分化潜能的干细胞,具有获取过程无创伤、低免疫源性等优势。UC-MSC的细胞表型并非一成不变,而会受到各种刺激因素的影响。UC-MSC对自然杀伤(NK)细胞、单核细胞、B细胞和T细胞发挥免疫调节作用,其作用机制与核因子κB(NF-κB)和Toll样受体(TLR)信号通路有关。并且,UC-MSC在肿瘤、自身免疫性疾病、急性肾损伤和器官移植等疾病的免疫治疗中发挥重要作用。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞(uc-msc) 免疫特性 免疫调控 综述
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奶牛脐带间充质干细胞的体外培养与鉴定 被引量:5
12
作者 王立文 邵伟 +1 位作者 赵艳坤 余雄 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2099-2104,共6页
【目的】在无菌环境下截取新生牛脐带20 cm,在体外进行原代奶牛脐带间充质干细胞分离培养,建立原代奶牛脐带间充质干细胞分离、培养、传代的方法,并进行形态学观察和多向分化能力检测。【方法】采用多重酶混合消化法,分离出原代奶牛脐... 【目的】在无菌环境下截取新生牛脐带20 cm,在体外进行原代奶牛脐带间充质干细胞分离培养,建立原代奶牛脐带间充质干细胞分离、培养、传代的方法,并进行形态学观察和多向分化能力检测。【方法】采用多重酶混合消化法,分离出原代奶牛脐带间充质干细胞,通过倒置显微镜下观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,向成脂、成骨诱导分化。【结果】培养出了奶牛脐带间充质干细胞。倒置显微镜下观察,细胞形态呈相对均一的梭形,平行排列生长或呈旋涡状生长。能够诱导分化为成脂、成骨细胞。细胞增殖能力强,可多次传代。【结论】胰酶消化法能够快速分离出原代奶牛脐带间充质干细胞,所获得的细胞纯度较高,具有一般间充质干细胞的生物学特性,具有多向分化潜能。 展开更多
关键词 奶牛 脐带间充质干细胞 分离培养
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冻存脐带间充质干细胞的临床前制备 被引量:3
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作者 何洁 赵晶 +3 位作者 王金祥 蔡学敏 庞荣清 潘兴华 《西南国防医药》 CAS 2016年第12期1365-1369,共5页
目的将冻存的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)制备成一种复苏后可直接用于临床的制剂,并进行质量检定。方法从种子细胞库复苏冻存的UC-MSCs,待细胞培养至P3代时,收集UC-MSCs,按照4×107/剂的规格加入含5%人血白蛋白、10%DMSO、85%复方... 目的将冻存的人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)制备成一种复苏后可直接用于临床的制剂,并进行质量检定。方法从种子细胞库复苏冻存的UC-MSCs,待细胞培养至P3代时,收集UC-MSCs,按照4×107/剂的规格加入含5%人血白蛋白、10%DMSO、85%复方电解质溶液的细胞保护液,形成制剂,并对其进行质量检定,包括无菌检测、支原体检测、细胞内外源致病因子检测、内毒素检测、免疫表型检测、稳定性检测、异常免疫学反应检测以及残留物检测。结果制备的UC-MSCs制剂无菌、无支原体污染,无内外致病因子,毒素<2 EU,能抑制异源淋巴细胞的增殖,抑制率随脐带间充质干细胞数量增加而增大。牛血清残留<50 ng/袋,制剂冻存前细胞活性>90%,复苏后活性>85%。结论按照此方法制备的UC-MSCs制剂符合临床治疗要求的质量检定标准。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 制剂 制备 质量检定
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脐带间充质干细胞治疗放射性皮肤损伤 被引量:4
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作者 王东平 刘爱兵 周立冬 《中国美容医学》 CAS 2012年第11X期67-68,共2页
目的:观察脐带间充质干细胞(Mesenchymal stemcell,MSCs注)射治疗放射性皮肤损伤的有效性和安全性。方法:1例双颈部Ⅳ度放射性皮肤损伤患者,损伤面积:左侧12cm×5cm,右侧2cm×5cm。自愿接受损伤局部注射MSCs治疗,注射方法:沿皮... 目的:观察脐带间充质干细胞(Mesenchymal stemcell,MSCs注)射治疗放射性皮肤损伤的有效性和安全性。方法:1例双颈部Ⅳ度放射性皮肤损伤患者,损伤面积:左侧12cm×5cm,右侧2cm×5cm。自愿接受损伤局部注射MSCs治疗,注射方法:沿皮损周围正常皮肤区行真皮下多点注射,每点0.5ml,每点1cm间距。MSCs数:左侧2.64×107个;右侧4×106个。观察注射后第1~12天皮损区的变化并综合分析。结果:MSCs注射后第1天,患者双颈部出血、渗出即停止。第2天,颈部皮肤暗红减轻,双侧颈部局部糜烂好转,见大面干痂形成。第5天,双侧颈部糜烂基本愈合。至第12天颈部皮损完全愈合。治疗过程中患者未出现不良反应。结论:MSCs治疗有望成为治疗难治性、重度放射性皮肤损伤的有效方法。 展开更多
关键词 放射性皮肤损伤 重度 间充质干细胞
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马脐带不同部位间充质干细胞的分离培养及成软骨诱导分化
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作者 唐小云 周桂珍 +4 位作者 周正娜 邓雅迪 张慧 张欣如 王旭光 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第1期70-80,共11页
【目的】通过对比马雌性胎儿同一脐带3个不同部位分离的脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)的增殖率、表面标记分子、多潜能性基因表达和软骨分化潜能的差异性,明确更适合作为分离培养间充质干细胞(mesen... 【目的】通过对比马雌性胎儿同一脐带3个不同部位分离的脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)的增殖率、表面标记分子、多潜能性基因表达和软骨分化潜能的差异性,明确更适合作为分离培养间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的马脐带部位。【方法】采用组织块分离法分离脐带靠近胎儿的部分(近端)、整段脐带的中心(中段)和靠近胎盘部分(远端)3个部分的MSCs,通过绘制细胞生长曲线对比UC-MSCs的增殖能力,通过实时荧光定量PCR检测多潜能性基因和表面标记分子的表达,经软骨诱导检测成软骨分化的潜能。【结果】近端、中段和远端分离得到的MSCs均贴壁生长,呈成纤维状;细胞倍增时间分别为35.4、25.5和34.9 h,且都表达多潜能性基因NANOG(NANOG homeobox)、八聚体结合转录因子(POU class 5 homeobox 1,POU5F1)和Y染色体性别决定区基因盒2(SRY-box transcription factor 2,SOX2),高表达5′-核苷酸外切酶(5′-nucleotidase ecto,CD73)、Thy-1细胞表面抗原(Thy-1 cell surface antigen,CD90)、内皮糖蛋白(endoglin,CD105)和造血祖细胞抗原(CD34 molecule,CD34),低表达单核细胞分化抗原CD14(CD14 molecule,CD14)、B-淋巴细胞表面抗原B4(CD19 molecule,CD19)、蛋白酪氨酸磷酸酶受体C型(protein tyrosine phosphatase receptor type C,CD45)和B细胞抗原受体复合物相关蛋白α链(CD79a molecule,CD79a)。多潜能性基因NANOG相对表达量在P1代中段细胞显著高于近端细胞(P<0.05),POU5F1相对表达量在P5代近端细胞显著高于中段细胞(P<0.05),且极显著高于远端细胞(P<0.01)。CD14、CD19、CD73和CD90的相对表达量在P5代近端细胞均显著或极显著高于中段和远端细胞(P<0.05;P<0.01);CD34、CD79a的相对表达量在P5代远端细胞均显著或极显著高于近端和中段细胞(P<0.05;P<0.01)。近端、中段和远端分离得到的UC-MSCs均可诱导分化为软骨细胞,在诱导分化第14天,近端细胞SOX9的相对表达量极显著高于远端细胞(P<0.01),诱导21 d时远端细胞SOX9的相对表达量极显著高于中段细胞(P<0.01);在诱导第7和14天,中段细胞蛋白聚糖(aggrecan,ACAN)和Ⅱ型胶原蛋白1链(collagen typeⅡalpha 1 chain,COL2A1)相对表达量均极显著高于近端和远端细胞(P<0.01),第21天时显著高于近端和远端细胞(P<0.05)。【结论】马脐带的近端、中段和远端均可用于制备MSCs,都表达多潜能性基因和MSCs表面标记分子,且均可诱导分化为软骨细胞,中段MSCs增殖能力和软骨分化潜能优于近端和远端,更适合用于分离MSCs。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞(uc-mscs) 多潜能性 表面标记分子 成软骨分化
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脐带间充质干细胞移植对胶原诱导型关节炎大鼠炎性趋化因子表达的影响 被引量:1
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作者 康丽莉 于立耘 +6 位作者 倪军 顾健 林传明 沈连军 顾蔚 孙幸 闪丹 《血栓与止血学》 2012年第6期247-250,共4页
目的观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)移植对胶原诱导型关节炎(collagen typeⅡ-induced arthritis,CIA)大鼠模型血清中:血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、内皮细胞生长因... 目的观察脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSC)移植对胶原诱导型关节炎(collagen typeⅡ-induced arthritis,CIA)大鼠模型血清中:血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、内皮细胞生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响,初步探讨UC-MSC移植对CIA大鼠炎性趋化因子的调节作用。方法采用鸡Ⅱ型胶原加完全弗氏佐剂建立CIA大鼠模型,经大鼠尾静脉注射UC-MSC;以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠干预前后血清VCAM-1、SDF-1、VEGF、TNF-α水平变化。结果模型组血清VCAM-1、SDF-1、VEGF、TNF-α水平均明显高于同期空白对照组(P<0.05);经UC-MSC治疗组上述炎症因子水平逐渐降低,至第5周上述指标均接近空白对照组(P<0.05)。结论 CIA大鼠存在免疫功能紊乱,其炎症趋化因子水平显著增高;UC-MSC能下调CIA大鼠炎症趋化因子水平,减轻机体免疫性炎症反应,促进疾病缓解,改善预后。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 胶原诱导型关节炎大鼠 趋化因子 免疫调节
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脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗系统性红斑狼疮的临床疗效及护理体会 被引量:3
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作者 谭慧莉 《中国药业》 CAS 2015年第9期80-82,共3页
目的探讨脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗系统性红斑狼疮的临床疗效并总结护理体会。方法选择2013年1月至2014年7月医院诊治的30例系统性红斑狼疮患者,随机分为对照组和观察组,各15例。对照组采用脐带血间充质干细胞输注治疗,观察... 目的探讨脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗系统性红斑狼疮的临床疗效并总结护理体会。方法选择2013年1月至2014年7月医院诊治的30例系统性红斑狼疮患者,随机分为对照组和观察组,各15例。对照组采用脐带血间充质干细胞输注治疗,观察组采用脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗,两组患者均给予适当的护理措施。结果治疗后3周及6个月,两组患者系统性红斑狼疮疾病活动度评分(SLEDAI评分)均较治疗前显著降低(P<0.05),且治疗后6个月较治疗后3周下降更明显(P<0.05),但组间治疗后同时点差异无统计学意义(P>0.05);两组患者干扰素γ(IFN-γ)及白细胞介素-4(IL-4)水平均较治疗前显著下降(P<0.05),且观察组下降更明显(P<0.05)。两组患者IL-6、IL-8及IL-10水平较治疗前均显著下降(P<0.05),且同组患者治疗后6个月较治疗后3周下降更明显(P>0.05),但组间差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论脐带间充质干细胞联合利妥昔单抗治疗系统性红斑狼疮,具有靶向作用且安全性良好,能有效清除病理性B细胞且减少炎症因子的释放,有效改善机体免疫性炎症的状态。对患者的精心护理也是治疗成功的关键。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 利妥昔单抗 系统性红斑狼疮 临床疗效 护理
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干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后化学发光成像
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作者 阮光萍 刘菊芬 +4 位作者 李自安 王金祥 吕燕波 庞荣清 潘兴华 《西南国防医药》 CAS 2016年第12期1378-1381,共4页
目的研究用化学发光成像的方法观察脐带间充质干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后的情况,代替活体成像仪的可行性。方法用CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒转染树鼩脐带间充质干细胞,用最适浓度的嘌呤霉素筛选,存活的细胞用6孔板... 目的研究用化学发光成像的方法观察脐带间充质干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后的情况,代替活体成像仪的可行性。方法用CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒转染树鼩脐带间充质干细胞,用最适浓度的嘌呤霉素筛选,存活的细胞用6孔板的3个孔培养,贴壁后,3个孔依次加入底物D-荧光素钾盐,用化学发光成像仪拍照,再用软件进行活体成像转换。将转染成功的细胞注入麻醉后的树鼩皮下,树鼩静脉注射底物。结果细胞加入底物后有生物发光,发光强度随底物作用时间延长而减弱。树鼩皮下也观察到发光细胞。结论 CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒能成功转染树鼩脐带间充质干细胞,转染成功的细胞用于动物模型治疗后,可进行活体成像,观察细胞在动物体内的分布。 展开更多
关键词 树鼩 脐带 间充质干细胞 CMV-Luciferase—PGK-Puro慢病毒 转染 化学发光成像
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大剂量人脐带间充质干细胞制剂给予CD-1小鼠的安全性评价
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作者 何洁 赵晶 +5 位作者 王金祥 蔡学敏 朱向情 马丽花 庞荣清 潘兴华 《西南国防医药》 CAS 2016年第12期1362-1365,共4页
目的观察单次大剂量输入自制的人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)制剂的急性反应,为临床研究提供安全保障。方法 60只SPF级CD-1小鼠随机分为阴性对照组、溶剂对照组和制剂组,每组雌雄各半(n=10),制剂组按1×108个细胞/kg的剂量给CD-1... 目的观察单次大剂量输入自制的人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)制剂的急性反应,为临床研究提供安全保障。方法 60只SPF级CD-1小鼠随机分为阴性对照组、溶剂对照组和制剂组,每组雌雄各半(n=10),制剂组按1×108个细胞/kg的剂量给CD-1小鼠单次静脉注射h UC-MSCs制剂,阴性对照组和溶剂对照组分别输注同等容量的0.9%氯化钠注射液和勃脉力A溶液。输注后连续观察小鼠的临床表现、体重和摄食量。观察15 d后,将动物安乐死,进行大体解剖,观察并行组织病理学分析。结果实验期间,制剂组1只小鼠输注细胞的尾尖静脉处出现细胞堆积,引起局部毛细血管堵塞,从而导致尾尖部组织坏死。其余动物均未见异常表现和体重、食量差异,大体解剖和组织学观察未见明显与输注细胞相关的病理改变。结论 h UCMSCs制剂单次静脉注射给予CD-1小鼠无急性毒性反应。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 急性毒性实验 CD.1小鼠
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不同浓度奶牛乳腺上皮细胞和奶牛脐带间充质干细胞共培养对细胞增殖作用的研究
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作者 王立文 邵伟 +3 位作者 赵艳坤 李杨 林静 余雄 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第1期41-45,共5页
研究在不同浓度下奶牛脐带间充质干细胞和奶牛乳腺上皮细胞共培养对共培养体系细胞增殖的影响。将P3代UC-MSCs与P3代BMECs按照浓度比例为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶50、1∶100、1∶1000、2∶1等不同比例随机混合培养,同... 研究在不同浓度下奶牛脐带间充质干细胞和奶牛乳腺上皮细胞共培养对共培养体系细胞增殖的影响。将P3代UC-MSCs与P3代BMECs按照浓度比例为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶50、1∶100、1∶1000、2∶1等不同比例随机混合培养,同时设立UCMSCs与BMECs单纯培养组为对照组,并分别于0h,24h,48h,72h,96h,120h和144h时观察各组细胞的形态变化,用MTT法检测细胞增殖。将UC-MSCs和BMECs按照不同浓度比混合共培养后,细胞生长状态良好,无抑制作用;MTT检测增殖发现各组OD值在72h时均达到最大,其中1∶2浓度组OD值最大,细胞增殖最快。UC-MSCs和BMECs混合共培养,两种细胞之间无抑制作用,生长状态良好,同时能够促进共培养体系的细胞增殖。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 乳腺上皮细胞 细胞共培养 细胞增殖
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