期刊文献+
共找到132篇文章
< 1 2 7 >
每页显示 20 50 100
A Modified Lattice Model of the Reversible Effect of Axial Strain on the Critical Current of Polycrystalline REBa2Cu3O7-δ Films
1
作者 苟晓凡 朱光 《Chinese Physics Letters》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期128-132,共5页
The strain effect on the critical current is one of the most important properties for polycrystalline YBa2 Cu3O7-δ (REBCO, RE: rare earth) films, in which the reversible effect is intrinsic in the range of strain ... The strain effect on the critical current is one of the most important properties for polycrystalline YBa2 Cu3O7-δ (REBCO, RE: rare earth) films, in which the reversible effect is intrinsic in the range of strain 0 and the irreversible strain εirr. By introducing the applied strain, a modified grain boundaries (GBs) in the REBCO film is developed. lattice model combining the strain and misorientation of A good agreement of the calculation on the lattice model with the experimental data shows that the lattice model is able to well describe the reversible effect of axial strain on the critical current of the REBCO film, and provides a good understanding of the mechanism of the reversible effect of the strain. Moreover, the effects of the crystallographic texture of the REBCO film and the residual strain εr on the variation of the critical current with the applied strain are extensively investigated. Furthermore by using the developed lattice model, the irreversible strain εirr of the REBCO film can be theoretically determined by comparing the calculation of the critical current-strain curve with the experimental data. 展开更多
关键词 REBCO A Modified Lattice Model of the reversible Effect of Axial strain on the Critical Current of Polycrystalline REBa2Cu3O FILMS Cu
原文传递
The microstructure evolution and deformation mechanism in a casting AM80 magnesium alloy under ultra-high strain rate loading 被引量:6
2
作者 Pengcheng Guo Xiao Liu +2 位作者 Biwu Zhu Wenhui Liu Liqiang Zhang 《Journal of Magnesium and Alloys》 SCIE EI CAS CSCD 2022年第11期3205-3216,共12页
Ultra-high strain rate impact tests were conducted by Split-Hopkinson pressure bar to investigate the microstructure evolution and impact deformation mechanism of a solution treated casting AM80 Mg alloy at 25, 150 an... Ultra-high strain rate impact tests were conducted by Split-Hopkinson pressure bar to investigate the microstructure evolution and impact deformation mechanism of a solution treated casting AM80 Mg alloy at 25, 150 and 250 ℃ with a strain rate of 5000 s^(-1). The microcrack and dynamic recrystallization(DRX) preferentially nucleate at grain boundary(GB) and twin boundary(TB), especially at the intersections between GBs and TBs, and then propagate along twin direction. In contrast, the adiabatic shear bands preferentially occur at high-density twined regions. At 25 ℃, the dominated deformation mechanisms are basal slip and twinning. As deformation temperature increases to 150and 250℃, the deformation gradually shifts to be dominated by a coordinated mechanism among non-basal slip, twinning and DRX. The flow stress behavior and deformation mechanism indicate that the degree of decrease in flow stress with temperature is associated with the change of deformation mode. 展开更多
关键词 AM80 mg alloy Deformation mechanism ultra-high strain rate TWINNING Dynamic recrystallization
下载PDF
甘薯褪绿矮化病毒西非株系RT-RPA-LFD检测方法的建立与应用
3
作者 王永江 乔奇 +4 位作者 王爽 赵付枚 田雨婷 张德胜 张振臣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期2781-2790,共10页
【目的】利用逆转录酶重组酶聚合酶扩增(reverse transcriptase recombinase polymerase amplification,RT-RPA)结合侧向流层析(lateral flow dipstick,LFD)试纸条技术,建立甘薯褪绿矮化病毒(sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV... 【目的】利用逆转录酶重组酶聚合酶扩增(reverse transcriptase recombinase polymerase amplification,RT-RPA)结合侧向流层析(lateral flow dipstick,LFD)试纸条技术,建立甘薯褪绿矮化病毒(sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)西非株系(west African strain,WA)的RT-RPA-LFD检测方法。【方法】根据SPCSV-WA外壳蛋白基因和热激蛋白基因的保守序列设计并筛选扩增效果好、特异性强的引物和探针。然后对引物和探针的浓度、扩增体系、温度、反应时间等条件进行优化,建立SPCSV-WA的RT-RPA-LFD检测方法。利用该方法对SPCSV-EA、甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)、甘薯潜隐病毒(sweet potato latent virus,SPLV)、甘薯G病毒(sweet potato virus G,SPVG)等常见的甘薯病毒进行检测,验证方法的特异性;将感染SPCSV-WA甘薯叶片样品总RNA进行10倍梯度稀释,分别采用RT-PCR和RT-RPA-LFD进行检测,比较RT-PCR和RT-RPA-LFD方法的灵敏度;对采自田间的甘薯样品和试管苗样品进行RT-RPA、RT-RPA-LFD和RT-PCR检测,验证该方法的实用性。【结果】建立了SPCSV-WA的RT-RPA-LFD检测方法,最适引物为CSV357F/R,探针CSV-CP-Probe(47 bp),引物和探针工作浓度分别为0.2和0.06μmol·L^(-1),温度为42℃,时间5 min。该方法可对SPCSV-WA进行特异性检测,与甘薯上其他常见病毒无交叉反应。RT-RPA-LFD最低可检测到总RNA稀释至10^(-4)溶液,而RT-PCR最低检测到总RNA稀释至10^(-3)溶液,RT-RPA-LFD灵敏度是RT-PCR的10倍。田间采集的22份甘薯样品经RT-PCR、RT-RPA和RT-RPA-LFD检测,均检出11份阳性样品,3种方法检测结果一致。28份试管苗样品的检测结果表明,RT-PCR和RT-RPA-LFD检测结果一致,均检出5份阳性样品。【结论】建立了SPCSV-WA的RT-RPA-LFD检测方法,该方法具有快速、简便、特异、灵敏、可视的特点,既可用于甘薯脱毒试管苗样品的病毒检测,也适用于基层单位田间甘薯病毒样品的现场快速检测。 展开更多
关键词 甘薯褪绿矮化病毒西非株系 逆转录酶重组酶聚合酶扩增 侧向流层析 快速检测 甘薯
下载PDF
PRRSV Nsp4基因突变株对β2M表达的影响
4
作者 康磊 刘珂 +8 位作者 王建忠 尹才 邱亚峰 魏建超 李蓓蓓 邵东华 李宗杰 粟硕 马志永 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期507-514,共8页
[目的]本试验旨在探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp4基因是否在抑制细胞β2M表达方面发挥关键性作用,以进一步研究PRRSV对抗原递呈的免疫抑制机制。[方法]建立PRRSV的反向遗传平台并成功拯救出PRRSV野生毒株SH2020。根据之前对Nsp... [目的]本试验旨在探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp4基因是否在抑制细胞β2M表达方面发挥关键性作用,以进一步研究PRRSV对抗原递呈的免疫抑制机制。[方法]建立PRRSV的反向遗传平台并成功拯救出PRRSV野生毒株SH2020。根据之前对Nsp4基因不同结构域的研究以及氨基酸位点功能预测,在其DomainⅡ和DomainⅢ分别筛选出3个和5个不同的氨基酸位点,并在病毒感染性克隆质粒上对这些位点进行不同的氨基酸替换突变,再将构建好的感染性克隆质粒转染Marc-145细胞以拯救各个Nsp4突变PRRSV病毒,将拯救的PRRSV病毒以MOI=0.02感染PAM细胞,并通过RT-qPCR和Western blot验证PRRSV Nsp4基因是否能够在PAM细胞β2M表达方面发挥作用。[结果]成功拯救出PRRSV D2-5(Nsp4-A80L)突变毒株,并且在Marc-145细胞上的生长动力学特性与野生毒株SH2020相似;而Nsp4基因其余位点突变则会导致PRRSV生长受到显著抑制从而无法进行试验。Western blot和RT-qPCR试验结果证实PRRSV D2-5毒株能够显著促进β2M在Marc-145和PAM细胞的表达,而野生毒株SH2020则表现出了对β2M表达的抑制作用。[结论]Nsp4基因在PRRSV抑制细胞β2M表达方面发挥重要作用,并且Nsp4-A80L突变能够显著促进β2M的表达。 展开更多
关键词 PRRSV NSP4 Β2M 反向遗传平台 突变毒株
下载PDF
外加载荷对热弹性马氏体正-逆相变影响机制的相场模拟研究
5
作者 王丽红 满蛟 +2 位作者 姜一鸣 刘庚根 周建平 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第8期222-228,共7页
本工作建立了一种新的马氏体逆相变的相场模型,以Cu-Al-Ni合金为例,研究了热弹性马氏体正相变和逆相变的演化规律,揭示了热弹性马氏体的形状记忆效应。同时模拟了拉伸释放弹性应变能这种机制对热弹性马氏体相变和热弹性马氏体逆相变的作... 本工作建立了一种新的马氏体逆相变的相场模型,以Cu-Al-Ni合金为例,研究了热弹性马氏体正相变和逆相变的演化规律,揭示了热弹性马氏体的形状记忆效应。同时模拟了拉伸释放弹性应变能这种机制对热弹性马氏体相变和热弹性马氏体逆相变的作用,研究了外加载荷对马氏体逆相变温度As的影响。模拟结果表明:应变能是形状记忆合金马氏体相变的阻力,是其逆相变的驱动力。在马氏体正相变过程中,拉伸载荷释放了应变能,降低了相变阻力,从而对马氏体相变起促进作用;在马氏体的逆相变过程中,由于拉伸载荷降低了马氏体所储存的应变能,因而降低了逆相变过程的驱动力,使合金逆相变As温度升高,进而提高了热弹性马氏体的低温稳定性。模拟结果与实验结果相一致。 展开更多
关键词 相场模拟 弹性应变能 Cu-Al-Ni合金 马氏体逆相变 逆相变起始温度
下载PDF
薄壁件选区激光熔化成形精度控制分析及优化
6
作者 祝世超 丁雨露 +4 位作者 施书杰 龙兵 陈荣华 尹飞鸿 赵景波 《重庆理工大学学报(自然科学)》 CAS 北大核心 2024年第4期100-107,共8页
为了解决薄壁件选区激光熔化成形(selective laser melting,SLM)过程中残余应力引起的变形问题,保证成形精度,以SLM制备的钛合金雷达屏蔽器为研究对象,使用固有应变法对其进行变形分析和应力分析。提出了一种基于体素仿真模型的反变形... 为了解决薄壁件选区激光熔化成形(selective laser melting,SLM)过程中残余应力引起的变形问题,保证成形精度,以SLM制备的钛合金雷达屏蔽器为研究对象,使用固有应变法对其进行变形分析和应力分析。提出了一种基于体素仿真模型的反变形补偿方法,并对其进行实验验证。结果表明:SLM制备的屏蔽器残余应力和位移较大,最大分别达831 MPa和0.61 mm。经过反变形补偿后,屏蔽器表面区域的整体变形量偏差从0.582 mm下降到0.438 mm以内,误差减少24.7%,从而保证了屏蔽器的打印质量。 展开更多
关键词 选区激光熔化 固有应变法 有限元分析 反变形补偿
下载PDF
细菌回复突变试验菌株鉴定方法的比较
7
作者 高梅 汤连升 +3 位作者 郑智勇 马会 秦春雪 曹冲 《癌变.畸变.突变》 CAS 2024年第1期58-65,共8页
目的:对细菌回复突变试验(Ames试验)中的菌株鉴定方法进行比较分析,以期为试验菌株鉴定提供参考。方法:根据Ames试验相关的国家和行业标准、技术规范和指导原则要求,对试验菌株的组氨酸缺陷型鉴定、脂多糖屏障缺陷(rfa突变)鉴定、氨苄... 目的:对细菌回复突变试验(Ames试验)中的菌株鉴定方法进行比较分析,以期为试验菌株鉴定提供参考。方法:根据Ames试验相关的国家和行业标准、技术规范和指导原则要求,对试验菌株的组氨酸缺陷型鉴定、脂多糖屏障缺陷(rfa突变)鉴定、氨苄青霉素抗性(R因子)鉴定、四环素抗性(pAQ1质粒)鉴定和uvrB修复缺陷型(紫外线敏感性)鉴定方法进行了分析对比。结果:鉴定结果表明,TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535等5株菌株生长均需组氨酸,均具有rfa突变,除TA1535外均具有氨苄青霉素抗性,除TA102外均对紫外线敏感和均无四环素抗性。结论:虽然鉴定方法不同,但是判定标准和鉴定结果相同,各个实验室应规定好试验菌株鉴定的方法和频率,为Ames试验结果的真实、可靠提供根本保障。 展开更多
关键词 细菌回复突变试验 体外 遗传毒性 菌株鉴定
下载PDF
逆断层作用下埋地管道屈曲响应分析及预测
8
作者 邱开心 蔡志钦 +3 位作者 肖望强 蔡思捷 林俊泽 陈少锋 《工业安全与环保》 2024年第11期12-17,共6页
地震断层引起的地面永久变形会导致埋地管道屈曲或整体失稳,威胁油气管道的安全。针对跨断层埋地管道屈曲响应的精准预测难题,以断层作用下管道轴向压应变快速增长前的应变作为判断管道局部屈曲的标准,提出了一种跨断层埋地管道屈曲响... 地震断层引起的地面永久变形会导致埋地管道屈曲或整体失稳,威胁油气管道的安全。针对跨断层埋地管道屈曲响应的精准预测难题,以断层作用下管道轴向压应变快速增长前的应变作为判断管道局部屈曲的标准,提出了一种跨断层埋地管道屈曲响应仿真分析及预测方法。通过等效边界弹簧对管道端部的轴向补偿,建立了逆断层作用下埋地管道非线性有限元模型,探究了不同敏感参数下管道的应变响应,基于非线性回归得到了管道屈曲预测修正公式,结合实验对比验证了方法的准确性,为管道穿越逆断层的失效分析和安全设计提供了参考。 展开更多
关键词 逆断层 非线性有限元 管道屈曲 临界应变 预测
下载PDF
应变法在摩阻试验中的应用与研究
9
作者 宗成思 何明星 崔鑫 《上海公路》 2024年第2期99-103,I0012,共6页
预应力孔道的成孔质量和锚下有效预应力是预应力施工技术的重难点。为掌握孔道弯曲半径和关键点定位坐标准确性,以及预应力施工张拉质量,采用应变法对摩阻试验和反拉法的各试验参数进行验证和对比分析。研究成果可为预应力施工张拉质量... 预应力孔道的成孔质量和锚下有效预应力是预应力施工技术的重难点。为掌握孔道弯曲半径和关键点定位坐标准确性,以及预应力施工张拉质量,采用应变法对摩阻试验和反拉法的各试验参数进行验证和对比分析。研究成果可为预应力施工张拉质量的控制提供参考。 展开更多
关键词 锚下有效预应力 摩阻试验 锚口和锚垫板摩阻 孔道摩阻 应变法 反拉法
下载PDF
An approach to evaluate ground surface rupture caused by reverse fault movement 被引量:6
10
作者 赵纪生 陶夏新 +1 位作者 师黎静 王海云 《Earthquake Engineering and Engineering Vibration》 SCIE EI CSCD 2006年第1期29-39,共11页
An approach for estimating ground surface rupture caused by strong earthquakes is presented in this paper, where the finite element (FE) method of continuous and discontinuous coalescent displacement fields is adopt... An approach for estimating ground surface rupture caused by strong earthquakes is presented in this paper, where the finite element (FE) method of continuous and discontinuous coalescent displacement fields is adopted. The onset condition of strain localization is introduced to detect the formation of the slippage line. In the analysis, the Drucker-Prager constitutive model is used for soils and the rate- and state-dependent friction law is used on the slippage line to simulate the evolution of the sliding. A simple application to evaluate the ground surface rupture induced by a reverse fault movement is provided, and the numerical simulation shows good agreement with failure characteristics observed in the field after strong earthquakes. 展开更多
关键词 surface rupture reverse fault localized band slippage line onset and evolution strain localization friction law
下载PDF
SCC evaluation of ultra-high strength steel in acidic chloride solution 被引量:6
11
作者 吴凌飞 李松梅 +1 位作者 刘建华 于美 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2012年第10期2726-2732,共7页
The stress corrosion crack (SCC) susceptibility of ultra-high strength steel AerMet 100 was investigated by slow strain rate technique (SSRT), tensile with polarization and surface analysis technique. The curves o... The stress corrosion crack (SCC) susceptibility of ultra-high strength steel AerMet 100 was investigated by slow strain rate technique (SSRT), tensile with polarization and surface analysis technique. The curves of tf^Cl/tf^W -strain rate are divided into three regions: stress-dominated region, SCC-dominated region, and corrosion-dominated region, so as the curves of εf^Cl/εf^W - strain rate and tm/tf-strain rate. The results of tensile tests with polarization show that the main SCC mechanism of AerMet 100 is anodic dissolution, which controls the corrosion process. The three regions have been discussed according to the relationship between the rate of slip-step formation and the rate of dissolution. Fracture appearances in different environments were analyzed by scanning electron microscopy (SEM). SCC fracture appears as a mixture of intergranular and dimples, while it is totally dimples in the inert environment. The εf becomes the parameter to predict tf because the relationship between εf^Cl/εf^W and tf^Cl/tf^w is a straight line for AerMet 100. 展开更多
关键词 ultra-high strength steel stress corrosion crack slow strain rate technique strain rate anodic dissolution slip-stepformation DISSOLUTION
下载PDF
MICROSTRUCTURAL CHARACTERISTICS ASSOCIATED WITH HIGH- STRAIN-RATE PLASTIC DEFORMATION IN THE ELECTROFORMED COPPER LINER OF SHAPED CHARGES 被引量:4
12
作者 A.L. Fan W.H. Tian +1 位作者 Q. Suns B.S. Wang 《Acta Metallurgica Sinica(English Letters)》 SCIE EI CAS CSCD 2005年第5期620-626,共7页
The microstructures of electroformed copper liners of shaped charges that had undergone high-strain-rate deformation were observed by optical microscopy (OM) and scanning electron microscopy (SEM). Meanwhile, the ... The microstructures of electroformed copper liners of shaped charges that had undergone high-strain-rate deformation were observed by optical microscopy (OM) and scanning electron microscopy (SEM). Meanwhile, the orientation distribution of the grains in the recovered jet was examined by electron backscattering Kikuchi pattern (EBSP) technique. EBSP analysis reveals that the fibrous texture observed in the as-electroformed copper liners disappeared after explosive detonation deformation. OM observation shows that the microstructure evolves system- atically from the jet center to its perimeter during cooling from high temperatures after explosive detonation deformation. This microstructural characteristic is similar to that of solidification, i.e. there exist equiaxed grains in the center of the jet and significant columnar grains around the equiaxed grains. The result reveals that there is melting-related phenomenon in the jet center. Corresponding microhardness variations from the jet center to its perimeter is also determined. All the phenomena can be explained by a strong gradient of temperature across the section of the jet during plastic deformation at high-strain-rate. 展开更多
关键词 JETTING ELECTROFORMATION microstructure hardness ultra-high strain rate deformation
下载PDF
Plate vs reverse shoulder arthroplasty for proximal humeral fractures:The psychological health influence the choice of device?
13
作者 Giuseppe Maccagnano Giuseppe Solarino +6 位作者 Vito Pesce Giovanni Vicenti Michele Coviello Vittorio Saverio Nappi Orazio Valerio Giannico Angela Notarnicola Biagio Moretti 《World Journal of Orthopedics》 2022年第3期297-306,共10页
BACKGROUND Proximal humeral fractures represent the third most common observed osteoporotic fracture;the treatment in three and four-part proximal humeral fractures in patients over 65 years is still controversial.Amo... BACKGROUND Proximal humeral fractures represent the third most common observed osteoporotic fracture;the treatment in three and four-part proximal humeral fractures in patients over 65 years is still controversial.Among the treatments described in literature,open reduction and internal fixation(O.R.I.F)and reverse shoulder arthroplasty(RSA)are gaining an increasing popularity.AIM To investigate the correct treatment for three and four-part proximal humeral fractures according to psychological aspects.METHODS It was conducted a prospective study with a series of 63 patients treated with O.R.I.F.(group A)and with RSA(group B)for three and four-part proximal humeral fractures according to Neer classification system.A conservative treatment group,as control,was finally introduced.One independent observer performed clinical and a psychological evaluation at one(T0),six(T1)and twelve months(T2)postoperatively.The Constant’s score and The Disabilities of the Arm,Shoulder and Hand(DASH score)were used for clinical evaluation,while General Anxiety Disorder-7(GAD-7)and Caregiver Strain Scale(CSS)were used for psychological evaluation.RESULTS At one month follow up in group A the mean values were DASH score 50.8,Constant score 36.1,GAD-7 score 5.4,CSS 5.0.For the group B,the average values at T0 were:DASH score 54.6,Constant score 32.0;GAD-7 score 6.4,CSS 6.2.At six months in group A the average values were DASH score 42.1,Constant score 47.3,GAD-7 score 4.3,CSS 3.9.For the group B,the average values at T1 were:DASH score 39.1,Constant score 43.2,GAD-7 score 5.7,CSS 5.5.At twelve months in the group A,the mean values were DASH score 32.8,Constant score 60.0,GAD-7 score 3.2,CSS 3.1.For the group B shown these mean values:DASH score 33.6,Constant score 52.9,GAD-7 score 4.3,CSS 4.5.We demonstrated a better clinical and psychological outcome at T2 in the group treated with osteosynthesis compared to the group treated with arthroplasty(Constant P=0.049,GAD-7 P=0.012 and CSS P=0.005).A better clinical and psychological outcome emerged in control group at T2 comparing with surgical group(DASH score P=0.014,Constant score P<0.001,GAD-7 P=0.002 and CSS P=0.001).CONCLUSION Both open osteosynthesis and reverse shoulder arthroplasty are valid treatments for proximal humeral fractures.According to the best osteosynthesis results the authors suggested to perform a psychological analysis for each patient in order to choose the appropriate treatment. 展开更多
关键词 Proximal humerus fractures Open reduction and fixation reverse shoulder arthroplasty Psychological health General Anxiety Disorder-7 scale Caregiver strain scale
下载PDF
考虑弹塑性卸荷的柱孔和球孔反向扩张解 被引量:1
14
作者 张家奇 赵春风 +2 位作者 赵程 吴悦 龚昕 《岩土力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第11期3224-3234,共11页
为研究卸荷对灌注桩、隧道等复杂受力岩土结构的影响,建立了考虑弹塑性卸荷的圆孔反向扩张简化解模型。该模型在应力计算中采用了叠加法的思想,在反向塑性区采用了非关联的Mohr-Coulomb准则、塑性区大应变假设和忽略塑性区弹性应变的假... 为研究卸荷对灌注桩、隧道等复杂受力岩土结构的影响,建立了考虑弹塑性卸荷的圆孔反向扩张简化解模型。该模型在应力计算中采用了叠加法的思想,在反向塑性区采用了非关联的Mohr-Coulomb准则、塑性区大应变假设和忽略塑性区弹性应变的假设。研究表明,圆孔反向扩张过程可划分为弹性阶段和两个弹塑性阶段。当孔压重新加至初始值时,不论柱孔还是球孔其半径均未能恢复到初始值,且在孔周存在一定范围的应力薄弱区。与经典原位扩张解相比,当圆孔压力增至一定值后圆孔反向扩张的屈服面发展、圆孔应力变化及孔周应力场将与之趋于一致。忽略塑性区的弹性应变假设会使简化解的土体位移偏小,极限扩张压力偏大,但对应力相关量的计算没有影响。与Tresca解相比,所提模型考虑了内摩擦角的影响,更接近于土体实际。通过数值模拟建立了圆孔反向扩张的平面应变模型,其应力分析结果与理论模型基本一致。 展开更多
关键词 弹塑性卸荷 圆孔反向扩张 圆孔半径 大应变假设 孔周应力场
原文传递
新城疫病毒Mukteswar株反向遗传平台的建立
15
作者 魏家阳 李丽 +7 位作者 王国康 徐英英 曾哲 罗青平 邵华斌 温国元 商雨 潘兹书 《动物医学进展》 北大核心 2023年第2期30-35,共6页
为了建立新城疫疫苗株Mukteswar株的反向遗传操作系统,根据Mukteswar株的基因序列设计了9对引物,扩增获得基因组片段,通过Overlap PCR和In-Fusion无缝克隆的技术,将9个片段拼接和插入至pACNR-T7中,获得了Mukteswar株全长cDNA克隆质粒pAC... 为了建立新城疫疫苗株Mukteswar株的反向遗传操作系统,根据Mukteswar株的基因序列设计了9对引物,扩增获得基因组片段,通过Overlap PCR和In-Fusion无缝克隆的技术,将9个片段拼接和插入至pACNR-T7中,获得了Mukteswar株全长cDNA克隆质粒pAC-Mukteswar。将其和3个辅助质粒(pVAX-NP、pVAX-P和pcDNA-L)共转染至预先感染了痘病毒vTF7-3的BHK-21细胞,成功拯救出重组病毒rMukteswar。对rMukteswar的生长曲线、最小致死剂量的平均致死时间(MDT)等生物学特性进行测定,结果显示rMukteswar具有和野生株相似的增殖特性和毒力。成功建立了新城疫疫苗株Mukteswar的反向遗传操作系统,为研发高效率表达外源病原体蛋白的新城疫载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 新城疫病毒 Mukteswar株 反向遗传操作系统
下载PDF
利用反向遗传学技术构建H5亚型禽流感高产疫苗株 被引量:17
16
作者 刘明 张云 +3 位作者 刘春国 潘蔚绮 刘超男 杨涛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期720-726,共7页
采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的6条内部基因片段,近期分离的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因以及N3亚型参考毒株的神经氨酸酶基因,分别构建了8个基因的转录与表达载体,利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽源... 采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的6条内部基因片段,近期分离的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因以及N3亚型参考毒株的神经氨酸酶基因,分别构建了8个基因的转录与表达载体,利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽源的重组流感病毒疫苗株rH5N3。通过对血凝素蛋白HA1和HA2连接肽处的5个碱性氨基酸(R-R-R-K-K)基因缺失与修饰,从而消除了病毒基因的毒力相关序列,拯救的rH5N3疫苗株对鸡和鸡胚均无致病性,病毒在鸡胚尿囊液和细胞培养上清的HA效价得到极大提高,分别为1:2048和1:512。制备的禽流感疫苗免疫动物后4~5周即可诱导产生高效价的HI抗体,鸡免疫后18周依然保持高水平的HI抗体。重组疫苗不论是对于国内早期分离的禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96还是近期分离的A/Goose/HLJ/QFY/04都能够产生完全的免疫保护作用,免疫鸡攻毒后不发病、不排毒、不死亡。带有N3鉴别诊断标记禽流感疫苗株的研制为H5N1高致病性禽流感的防治提供了新的技术保障。 展开更多
关键词 禽流感病毒 反向遗传学 高产株 疫苗
下载PDF
采用反向遗传学技术构建H5亚型禽流感疫苗株 被引量:5
17
作者 童俊容 刘明 +2 位作者 刘春志 童光志 陈政良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期519-522,526,共5页
目的构建重组H5亚型禽流感疫苗株。方法采用RT-PCR技术,分别扩增鹅源高产禽流感病毒A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)的6条内部基因片段、高致病性禽流感病毒株A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)的血凝素(HA)基因和N3亚型参考株A/Duck/Germany/1215/73... 目的构建重组H5亚型禽流感疫苗株。方法采用RT-PCR技术,分别扩增鹅源高产禽流感病毒A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)的6条内部基因片段、高致病性禽流感病毒株A/Goose/HLJ/QFY/04(H5N1)的血凝素(HA)基因和N3亚型参考株A/Duck/Germany/1215/73(H2N3)的神经氨酸酶(NA)基因,并对HA1和HA2连接肽处的5个碱性氨基酸(R-R-R-K-K)的编码序列进行缺失与修饰,然后分别构建这8个基因的转录与表达载体,将其共转染293T/MDCK混合培养细胞单层,对拯救出的重组病毒进行表型分析。结果利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽流感病毒的疫苗株,其基因序列符合设计要求包括删除HA基因的毒力相关序列,疫苗株的表型为H5N3。结论构建成功重组禽流感疫苗株rH5N3,为制备H5亚型禽流感疫苗打下了坚实的基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 反向遗传学 疫苗株
下载PDF
正交法整体优化差异显示反应体系 被引量:7
18
作者 柳淑芳 杜立新 +2 位作者 朱靖 王爱华 李宏滨 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期836-840,共5页
mRNA差异显示PCR(mRNAdifferentialdisplayPCR ,DDRT PCR)是分离差异表达基因的有效方法 ,但该方法的准确性极易受到外部因素和内部因素的影响。采用正交法优化DDRT PCR反应条件 ,充分考虑到模板浓度、锚定引物浓度、随机引物浓度、dNTP... mRNA差异显示PCR(mRNAdifferentialdisplayPCR ,DDRT PCR)是分离差异表达基因的有效方法 ,但该方法的准确性极易受到外部因素和内部因素的影响。采用正交法优化DDRT PCR反应条件 ,充分考虑到模板浓度、锚定引物浓度、随机引物浓度、dNTPs浓度、镁离子浓度以及Taq酶用量等因素在差异显示反应过程中的交互作用 ,一次PCR反应即可确定最佳反应组合。将筛选出的条件用于DDRT PCR ,得到差显结果假阳性率低 ,重复性和稳定性好 ,而且简化了反应条件的优选程序 ,这表明正交法是优化差异显示反应条件的理想方法。为了进一步简化整个差异显示反应系统的操作程序 ,降低假阳性率 ,研究采用了非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE)和银染显示差异带的方法 ,并用反向Northern法来验证回收条带 。 展开更多
关键词 DDRT-PCR 正交优化 非变性PAGE 银染 反向Northern
下载PDF
反复荷载下预压装配式框架接合部受力性能 被引量:15
19
作者 柳炳康 施法科 +1 位作者 刘海涛 欧国浩 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期71-74,共4页
通过两榀预应力预压装配式梁柱组合体在低周反复荷载下的试验,了解了预压装配式框架节点两侧梁端应变分布及受力状态,确定了梁端组合截面屈服荷载和极限荷载,并给出接合部正截面承载力的计算方法。试验表明,反向加载存在掀起效应。从控... 通过两榀预应力预压装配式梁柱组合体在低周反复荷载下的试验,了解了预压装配式框架节点两侧梁端应变分布及受力状态,确定了梁端组合截面屈服荷载和极限荷载,并给出接合部正截面承载力的计算方法。试验表明,反向加载存在掀起效应。从控制变形和裂缝的角度来考虑,应将承载能力予以折减。 展开更多
关键词 预压装配式框架 低周反复荷载 截面应变分布 承载能力
下载PDF
透射电镜原位拉伸研究金属材料形变机制 被引量:14
20
作者 隋曼龄 王艳波 +1 位作者 崔静萍 李白清 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期219-229,共11页
透射电镜原位拉伸方法是研究材料形变机制的一种直观而有效的手段。将拉伸实验与高分辨透射电镜相结合,通过在原子尺度上直接观察,实时地记录应力应变作用下晶体材料微观结构的演变及位错的产生和运动等,直观地揭示材料在弹性及塑性阶... 透射电镜原位拉伸方法是研究材料形变机制的一种直观而有效的手段。将拉伸实验与高分辨透射电镜相结合,通过在原子尺度上直接观察,实时地记录应力应变作用下晶体材料微观结构的演变及位错的产生和运动等,直观地揭示材料在弹性及塑性阶段的形变机理。本文将重点回顾近年来作者用透射电镜原位拉伸方法在研究金属材料形变机制方面的工作进展。主要包括纳米金属材料的晶界发射和吸收不全位错、晶粒旋转长大等变形机制,及金属材料在变形过程中的几种可逆形变机制。 展开更多
关键词 形变机制 透射电镜 原位拉伸 纳米金属材料 可逆形变
下载PDF
上一页 1 2 7 下一页 到第
使用帮助 返回顶部