铁死亡在HIV-1 gp120 V3环致小胶质细胞炎症中的作用机制研究 被引量：2

1

作者 干李梦 王琳琳 +6 位作者 左勤 颜学勤 潘锐 王会丽 唐海杰 付咏梅 董军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期819-826,共8页

目的:探讨人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症反应与铁死亡的关系,并观察p53和铁死亡对该炎症反应的影响及可能机制。方法:体外培养人源CHME-5小胶质细胞,设立空白组、... 目的:探讨人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症反应与铁死亡的关系,并观察p53和铁死亡对该炎症反应的影响及可能机制。方法:体外培养人源CHME-5小胶质细胞,设立空白组、随机肽段组、HIV-1 gp120 V3环组、HIV-1 gp120 V3环+ferrostatin-1(Fer-1;铁死亡抑制剂)组和HIV-1 gp120 V3环+pifithrin-α(p53抑制剂)组。分别采用HIV-1 gp120 V3环(终浓度2 mg/L)和随机肽段(终浓度2 mg/L)处理CHME-5细胞24 h;Fer-1(终浓度20μmol/L)和pifithrin-α(终浓度10μmol/L)预处理CHME-5细胞2 h,HIV-1 gp120 V3环(终浓度2 mg/L)再处理24 h。ELISA法检测各组细胞上清液中炎症因子水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白[转铁蛋白受体1(transferrin receptor-1,TFR-1)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)]及p53的蛋白表达;酶标仪法检测细胞内亚铁离子(Fe2+)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性。结果:(1)ELISA结果显示,与对照组相比,gp120 V3环组炎症因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平显著升高(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+Fer-1组和gp120 V3环+pifithrin-α组炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著下降(P<0.01);(2)Western blot结果显示,与对照组相比,gp120 V3环组蛋白p53显著上调(P<0.01),铁死亡相关蛋白TFR-1显著上调(P<0.01),SLC7A11和GPX4显著下调(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+pifithrin-α组铁死亡相关蛋白TFR-1显著下降(P<0.05),SLC7A11和GPX4蛋白显著升高(P<0.05);(3)与对照组相比,gp120 V3环组Fe2+含量显著增加(P<0.01),GSH-Px活性显著降低(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+Fer-1组和gp120 V3环+pifithrin-α组Fe2+含量显著下降(P<0.05),GSH-Px活性显著升高(P<0.01)。结论:HIV-1 gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症中存在铁死亡,且抑制铁死亡能减轻炎症。HIV-1 gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症与p53蛋白调控铁死亡有关,抑制p53可减轻铁死亡和炎症反应。 展开更多

关键词 HIv相关神经认知障碍 HIv-1 gp120 v3环 铁死亡 P53蛋白 神经炎症

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姜黄素对gp120 V3环损伤大鼠海马神经元突触体的保护作用 被引量：1

2

作者 龚正 唐红梅 +3 位作者 汪军兵 董军 杨丽娟 邓钦莹 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期127-132,共6页

目的:探讨姜黄素对gp120 V3环所致大鼠海马神经元突触体损伤的保护作用及其机制。方法:采用无血清培养法培养大鼠海马神经元,MTT法确定姜黄素神经元保护性剂量和gp120 V3环神经元毒性剂量。应用Fu-ra-2/AM钙离子探针检测各组突触体内Ca2... 目的:探讨姜黄素对gp120 V3环所致大鼠海马神经元突触体损伤的保护作用及其机制。方法:采用无血清培养法培养大鼠海马神经元,MTT法确定姜黄素神经元保护性剂量和gp120 V3环神经元毒性剂量。应用Fu-ra-2/AM钙离子探针检测各组突触体内Ca2+浓度,透射电镜观察突触体形态改变,体视学方法分析线粒体体密度Vvm、线粒体数密度Nm、线粒体的平均体积Vm。结果:浓度为1μmol/L的姜黄素在48h内对细胞的存活率无明显影响,浓度为2μmol/L的姜黄素作用12 h以及更高浓度,显著抑制细胞存活率(P<0.05);gp120 V3环对大鼠海马神经元的毒性具有时间依赖性,其中各浓度gp120 V3环在作用2～8h范围内对细胞存活率无明显影响,在作用12 h后细胞存活率显著降低(P<0.05),浓度为1 nmol/L的gp120 V3环作用24 h后细胞存活率降低为(85.3±2.8)%,因此采用浓度1 nmol/L gp120 V3环观察其对大鼠海马神经元突触体损伤效应。与对照组相比,gp120 V3环孵育的突触体内线粒体明显肿胀,Vvm、Nm、Vm增大,Ca2+浓度升高(P<0.01);与模型组相比,姜黄素+gp120 V3环组与尼莫地平+gp120 V3环组Vvm、Nm、Vm明显减小(P<0.01),Ca2+浓度降低(P<0.05),差异有统计学意义。姜黄素或尼莫地平单独作用于突触体对其形态及Ca2+浓度无影响。结论:姜黄素对大鼠海马神经元的药理作用具有浓度依赖性;gp120 V3环对大鼠海马神经元的损伤具有时间依赖性。姜黄素可减轻gp120 V3环导致的神经元突触体损伤,减小gp120 V3环引起的突触体内增大的线粒体Vvm、Nm、Vm,其机制可能抑制gp120 V3环过度激活的Ca2+通道,从而降低细胞内升高的Ca2+浓度。 展开更多

关键词 姜黄素 GP120 v3环 海马神经元 突触体 CA2+ HIv相关神经认知紊乱

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V3环缺失的HIV-1 ADA株包膜表达载体构建及鉴定 被引量：1

3

作者 李妍 周海舟 +1 位作者 服部俊夫 凌虹 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2005年第3期208-210,共3页

目的构建V3环缺失的HIV1ADA株包膜糖蛋白表达体系。方法分别设计包膜糖蛋白两端及V3环两端的两对引物,采用重叠延伸剪接法,进行HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失体的构建。得到的PCR产物经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,与pSM载体连接,构建HIV1ADA株... 目的构建V3环缺失的HIV1ADA株包膜糖蛋白表达体系。方法分别设计包膜糖蛋白两端及V3环两端的两对引物,采用重叠延伸剪接法,进行HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失体的构建。得到的PCR产物经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,与pSM载体连接,构建HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失的表达载体(pSMADAΔV3),转化大肠杆菌后筛选阳性克隆,经PCR及基因序列测定进行鉴定。结果获得HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失体PCR产物,构建了其表达载体pSMADAΔV3,经转化和筛选获得了重组菌,经PCR及基因测序结果显示重组质粒序列正确,为预期目的片段。结论成功构建了V3环缺失的HIV1ADA株包膜糖蛋白的表达载体。此结果为进一步构建伪病毒,观察V3环完全或部分缺失对病毒侵入靶细胞过程的影响,为开发阻止HIV1进入靶细胞的药物或疫苗打下基础。 展开更多

关键词 HIv-1 v3环 缺失 重叠延伸剪接法

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人源性抗HIV-1 V3环噬菌体抗体的基因克隆与序列分析

4

作者 毛春生 李季枝 +3 位作者 宋宏彬 于长明 杜桂鑫 王海涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期178-181,共4页

以HIV1gp120V3环的合成环肽为抗原,从人的噬菌体抗体组合文库中,筛选出与HIV1V3肽具有结合活性的人源性噬菌体抗体(Fab段)。用ELISA测定其活性,竞争抑制实验证实了该噬菌体抗体的特异性。序列分析表明,重链基因为IgG1亚类,可变区属VHI亚... 以HIV1gp120V3环的合成环肽为抗原,从人的噬菌体抗体组合文库中,筛选出与HIV1V3肽具有结合活性的人源性噬菌体抗体(Fab段)。用ELISA测定其活性,竞争抑制实验证实了该噬菌体抗体的特异性。序列分析表明,重链基因为IgG1亚类,可变区属VHI亚组,与胚系基因DP88的同源性最高,D区为D33,J区为JH5;轻链为κ亚型,可变区属VLIV亚群,D区为DPK22,J链为JK4胚系。 展开更多

关键词 噬菌体抗体 HIv-1 v3环 核苷酸序列 基因克隆

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HIV-1膜蛋白gp120V3环的神经毒性研究

5

作者 张志丽 陈兵刚 +4 位作者 姜太一 乔录新 吴昊 陈德喜 张玉林 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第1期87-91,共5页

目的体外观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)膜蛋白gp120 V3环的神经毒性。方法通过小鼠大脑皮质原代神经细胞培养条件下TUNEL检测和培养上清乳酸脱氢酶释放试验,结合抗微管蛋白-2(microtubule associated p... 目的体外观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)膜蛋白gp120 V3环的神经毒性。方法通过小鼠大脑皮质原代神经细胞培养条件下TUNEL检测和培养上清乳酸脱氢酶释放试验,结合抗微管蛋白-2(microtubule associated protein-2,MAP-2)免疫荧光试验,观察人重组gp120蛋白神经毒性,并通过蛋白印迹法初步探讨其与凋亡调控蛋白bax与bcl-2的关系。结果重组人gp120 V3环多肽可诱导神经元凋亡和抑制神经突起形成,并呈浓度依赖性。gp120 V3环诱导神经细胞凋亡与抑制bcl-2表达有关。结论 HIV-1膜蛋白gp120 V3环具有神经毒性。 展开更多

关键词 膜蛋白gp120 神经毒性 v3环 凋亡

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p62/NF-κB通路调控HIV-1 gp120 V3环所致小鼠神经炎症的机制研究 被引量：1

6

作者 何翰阳 颜学勤 +7 位作者 温赛娴 干李梦 王琳琳 王会丽 唐海杰 潘锐 付咏梅 董军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期978-985,共8页

目的:探讨自噬关键蛋白p62在HIV-1 gp120 V3环所致小鼠神经炎症中的作用及相关信号分子机制。方法:野生型C57BL6小鼠随机分成4组:空白组、假手术组(人工脑脊液组)、模型组(gp120 V3环组)及gp120 V3环+NF-κB活化阻滞剂BAY 11-7082组,每... 目的:探讨自噬关键蛋白p62在HIV-1 gp120 V3环所致小鼠神经炎症中的作用及相关信号分子机制。方法:野生型C57BL6小鼠随机分成4组:空白组、假手术组(人工脑脊液组)、模型组(gp120 V3环组)及gp120 V3环+NF-κB活化阻滞剂BAY 11-7082组,每组12只。用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力;免疫荧光染色检测海马和皮层Iba-1表达水平;ELISA法检测海马和皮层炎症因子的表达水平;Western blot检测海马和皮层相关蛋白表达水平。结果:(1)Morris水迷宫结果显示,与空白组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.01),平台区域停留时间及穿越平台次数显著减少(P<0.05);与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组小鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.01),平台区域停留时间及穿越平台次数显著增加(P<0.05)。(2)免疫荧光染色结果显示,与空白组相比,模型组海马和皮层Iba-1荧光强度显著增强(P<0.05);与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组海马和皮层Iba-1荧光强度显著降低(P<0.05)。(3)ELISA结果显示,与空白组相比,模型组IL-1β、TNF-α和IL-6水平均显著上调(P<0.05);与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组IL-1β、TNF-α和IL-6水平显著下调(P<0.05)。(4)Western blot结果显示,与空白组相比,模型组p62蛋白表达水平显著上调(P<0.01),p-p65/p65及p-IκB/IκB比值均显著升高(P<0.01);与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组p62蛋白显著下调(P<0.05),p-p65/p65及p-IκB/IκB比值均显著下降(分别P<0.01和P<0.05)。结论:HIV-1 gp120 V3环所致小鼠学习记忆功能障碍的机制可能与通过激活p62/NF-κB信号通路引起神经炎症有关,p62-NF-κB正反馈环的抑制可能会减轻神经炎症。 展开更多

关键词 HIv相关神经认知障碍 HIv-1 gp120 v3环 p62/NF-κB信号通路 神经炎症

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HIV-1中国流行株的生物学表型与V3环序列变异相关性初步研究 被引量：4

7

作者 黑发欣 洪坤学 +5 位作者 宋艳辉 唐海丽 彭虹 徐建青 邢辉 邵一鸣 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第23期1968-1972,共5页

目的　分析我国HIV 1流行株的生物学表型及其与V3环序列变异的相关性。方法　采用传统的共培养方法从HIV 1感染者新鲜外周血单个核细胞 (PBMC)中分离病毒并在MT 2细胞上测定分离株的融合诱导性 ,用表达CD4和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GH... 目的　分析我国HIV 1流行株的生物学表型及其与V3环序列变异的相关性。方法　采用传统的共培养方法从HIV 1感染者新鲜外周血单个核细胞 (PBMC)中分离病毒并在MT 2细胞上测定分离株的融合诱导性 ,用表达CD4和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GHOST( 3)测定毒株的辅助受体利用情况 ,用巢式 聚合酶链反应 (nest PCR)扩增V3环及两侧区序列并对其序列进行测定 ,用GCG软件分析氨基酸序列。结果　在所分析的 5个原代毒株中 ,LTG0 2 13和LTG0 2 14为合胞体诱导型 (SI) ,利用CXCR4辅助受体 ;XJN0 0 2 1、XJN0 0 91和SHXDC0 0 4 1为非合胞体诱导型 (NSI) ,利用CCR5辅助受体。X4 /SI病毒和R5 /NSI病毒在V3环氨基酸序列方面 ,存在明显的区别。CCR5表型中国株第 8、11、18及第 2 5位氨基酸的共同基序为 :8 TXXS/GXXXXXXR/QXXXXXXE/D 2 5 ,CXCR4表型株在这些位置出现碱性氨基酸取代 (第 2 5位除外 ) ,引进正电荷。结论　HIV 1中国流行株的生物学表型与V3环序列变异密切相关 ,V3环上第 8、11、18及第 2 5位积累碱性氨基酸 (或由酸性氨基酸转变为中性氨基酸 ) ,可以使病毒由NSI/R5表型转变为SI/X4表型 。 展开更多

关键词 HIv-1 中国流行株 生物学表型 v3环序列变异 相关性

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辽宁省艾滋病病毒1流行株膜蛋白V3环氨基酸变异特点 被引量：3

8

作者 韩晓旭 尚红 +3 位作者 周立平 王亚男 张子宁 姜拥军 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期704-707,共4页

目的　了解辽宁省艾滋病病毒 1(HIV 1)感染者 艾滋病 (AIDS)患者体内不同亚型HIV 1膜蛋白V3环氨基酸序列特征 ,突变种类特点。方法　提取含有整合HIV 1前病毒的基因组DNA ,巢式聚合酶链反应 (nest PCR)扩增后直接测序 ,并做序列排列比... 目的　了解辽宁省艾滋病病毒 1(HIV 1)感染者 艾滋病 (AIDS)患者体内不同亚型HIV 1膜蛋白V3环氨基酸序列特征 ,突变种类特点。方法　提取含有整合HIV 1前病毒的基因组DNA ,巢式聚合酶链反应 (nest PCR)扩增后直接测序 ,并做序列排列比对、翻译和分析。结果　辽宁省HIV 1感染者感染病毒分属A、B’、C、G四种亚型 ,AIDS患者体内病毒V3环发生与T嗜性 SI表型有关的氨基酸突变形式 (11位出现R ,13位出现S、T、N ,19位出现V ,2 0位出现Y ,2 5、2 9位出现N等 )高于无症状感染组 (P <0 .0 5 ) ,此外还发现GQGR、APGQ、RPGA、GLGR、RPGA等少见的V3环顶端四肽组成形式及第 5位H ,34位S、F等罕见突变形式。结论　辽宁省AIDS人群中 ,A、B、C、G亚型HIV 1毒株V3环各位置出现氨基酸突变情况与国外对B亚型毒株的研究结果总体上相似 ,但发现一些罕见突变和少见V3环顶端四肽组成形式。 展开更多

关键词 辽宁 艾滋病病毒1 流行株 膜蛋白v3环氨基酸 变异特点

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哈尔滨市男男同性恋HIV-1感染者env基因V3环序列分析 被引量：4

9

作者 刘婷 邵冰 +6 位作者 李文静 崔文秀 李航 杜鑫 王永革 王滨有 王福祥 《中华实验和临床感染病杂志（电子版）》 CAS 2013年第4期80-82,共3页

目的了解哈尔滨市感染HIV的男男同性恋者(MSM)HIV-1亚型分布状况,以及env基因V3环序列变异情况。方法采用巢氏PCR扩增HIV-1 env基因V3～V4区并对扩增产物进行测序,利用MEGA、BioEdit软件进行基因序列整理和分析。结果哈尔滨市28例MSM人... 目的了解哈尔滨市感染HIV的男男同性恋者(MSM)HIV-1亚型分布状况,以及env基因V3环序列变异情况。方法采用巢氏PCR扩增HIV-1 env基因V3～V4区并对扩增产物进行测序,利用MEGA、BioEdit软件进行基因序列整理和分析。结果哈尔滨市28例MSM人群HIV-1感染者基因型分布为CRF01-AE 18例(64.29%),CRF07-BC 3例(10.71%),B亚型5例(17.86%)和B’(Thailand B)2例(7.14%),V3环顶端4肽以GPGQ为主14例(50.00%),GPGR 5例(17.86%),GWGR 3例(10.71%)。27例被预测为使用CCR5作为辅助受体,1例不可预测使用何种受体,没有被预测为使用CXCR4作为辅助受体的感染者。结论哈尔滨市MSM感染HIV-1以CRF01-AE为主,V3环顶端的4肽呈现多态性但以GPGQ为主。HIV-1主要为以CCR5作为辅助受体的巨细胞嗜性毒株。 展开更多

关键词 男男同性恋 ENv基因 v3环

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1990～1997年云南IDUs HIV-1B亚型分离株膜蛋白V3环顶端四肽基因序列的变化趋势 被引量：2

10

作者 吴虹 王斌 +3 位作者 方荣 路永波 钱冬萌 曾毅 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期462-464,共3页

目的　观察云南静脉药瘾 (IDUs)HIV 1分离株env基因V3环顶端四肽氨基酸和相应核苷酸序列随时间推移的变化。方法　根据 1990～ 1997年间 6 2株HIV 1分离株env基因C2 V3区DNA序列 ,对HIV 1膜蛋白V3环顶端四肽基因序列 (基序 )及其编码... 目的　观察云南静脉药瘾 (IDUs)HIV 1分离株env基因V3环顶端四肽氨基酸和相应核苷酸序列随时间推移的变化。方法　根据 1990～ 1997年间 6 2株HIV 1分离株env基因C2 V3区DNA序列 ,对HIV 1膜蛋白V3环顶端四肽基因序列 (基序 )及其编码核苷酸进行分析 ,并探讨其随时间推移的变化趋势。结果　 1990～ 1997年间 6 2株HIV 1毒株膜蛋白V3环顶端四肽基序有程度不同的氨基酸变异 ,主要表现在第四位氨基酸的改变 ,变异呈现一定的趋向性。 6 2株云南标本中有 46例(74 2 % )为GPGR ,10例 (16 1% )为GPGQ ,4例 (6 4% )为GPGK ,另有 2例 (3 3% )为GPER且四肽基序编码核苷酸的变异主要表现为A→G的改变。结论　 1990～ 1997年这一时期内 ,云南IDUs特定感染者范围内HIV 1分离株膜蛋白V3环顶端四肽序列已表现出较大的趋向性 ,符合HIV 展开更多

关键词 v3环顶端四肽基因序列 静脉药瘾 艾滋病毒

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中国艾滋病病毒1型流行毒株V_3环序列变异性的研究 被引量：22

11

作者 赵全壁 潘品良 +4 位作者 温宁 邢辉 陈钊 魏民 邵一鸣 《中国性病艾滋病防治》 2002年第4期208-211,共4页

目的 研究中国艾滋病病毒1型(HIV-1)毒株V3环序列的变异性。方法 对中国1996～2000年491例HIV-1感染者env基因C2-V3区经聚合酶链反应(PCR)扩增并测序,测得的序列经DNA软件编辑后,用Wisconsin公司GCG软件包进行分析。结果 从核酸序列可... 目的 研究中国艾滋病病毒1型(HIV-1)毒株V3环序列的变异性。方法 对中国1996～2000年491例HIV-1感染者env基因C2-V3区经聚合酶链反应(PCR)扩增并测序,测得的序列经DNA软件编辑后,用Wisconsin公司GCG软件包进行分析。结果 从核酸序列可以看出,V3环的核苷酸存在着点突变和基因的漂移。各亚型流行株V3顶端的四肽特征主要为:GPGQ 72.6％,GPGR 13％,GPGK 7.6％,其它形式6.7％。在V3环氨基酸序列11、25位点未同时出现带正电荷的氨基酸。基因离散率的分析表明呈现逐年递增趋势。结论 中国V3环顶端四肽序列主要为GPGQ,从1990的10％、1993年的29％上升到2000年的72.6％。而GPGR则从1990年的80％、1993年的57％下降到2000年的13％。更加证明了在中国存在着HIV-1毒株V3区顶端四肽由GPGR向GPGQ漂移的现象。从V3环序列的高度变异性分析表明中国正处于HIV快速流行期。 展开更多

关键词 中国 艾滋病 艾滋病病毒1型 v3环 变异 漂移 基因离散率 AIDS

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广东省不同亚型AIDS病人HIV-1 gp120 V3环基因变异及其利用辅助受体的情况 被引量：8

12

作者 饶嫚 蔡卫平 +2 位作者 魏绍静 肖桂娥 钟剑波 《中国艾滋病性病》 CAS 北大核心 2015年第5期354-357,共4页

目的了解广东省艾滋病病毒（HIV）主要流行亚型及V3环氨基酸的变异特点,并分析病毒株利用辅助受体的情况。方法收集2013-2014年期间,在广州市第八人民医院住院的艾滋病（AIDS）病人的血浆256份,巢式聚合酶链反应（Nested-PCR）方法扩增... 目的了解广东省艾滋病病毒（HIV）主要流行亚型及V3环氨基酸的变异特点,并分析病毒株利用辅助受体的情况。方法收集2013-2014年期间,在广州市第八人民医院住院的艾滋病（AIDS）病人的血浆256份,巢式聚合酶链反应（Nested-PCR）方法扩增env基因C2-C3（HBX2：6972~7365）区并直接测序,用Geen tool软件将基因序列翻译为氨基酸序列进行比对和分析。结果共有214例（83.6%）扩增成功,其中143例（66.8%）为CRF01_AE;45例（21.0%）为B/C重组型;26例（12.1%）为CRF01_AE/B亚型。V3环顶端四肽基序,73.4%（157/214）为GPGQ,11.7%（25/214）为GPGR,8.9%（19/214）为GPGK,2.3%（5/214）为GQGQ,其他为（GPGG、GLGH、GPGS、GPGH）3.7%（8/214）。使用国际上普遍应用的4种软件（PSSMx4r5、SAAC＋BLAS、PSSMsisi、Geno2pheno）分别对V3环顶端四肽基序利用辅助受体的情况进行评估。综合评估结果显示,132例（61.7%）利用CCR5,67例（31.3%）利用CXCR4。在15例（7.0%）无辅助受体评估结果的病例中,14例为CRF01_AE,1例为CRF01_AE/B。研究还发现,71.1%（32/45）B/C重组型的V3四肽基序单一使用PSSMsisi软件的评估结果,与4种软件综合评估结果的一致率为100%。结论目前广东省HIV-1的主要流行株仍是CRF01_AE,其V3环氨基酸高度变异,顶端四肽基序主要是GPGQ。对毒株利用辅助受体的情况,宜采取国际普遍使用的4种软件进行综合分析。 展开更多

关键词 艾滋病病毒Ⅰ型 辅助受体 v3环顶端四肽 CCR5 CXCR4

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广东省人类免疫缺陷病毒1型CRF01＿AE毒株膜区V3环氨基酸序列多态性分析 被引量：3

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作者 何瑞英 廖宝林 +1 位作者 袁小珍 陈伟烈 《中国热带医学》 CAS 2018年第10期984-990,共7页

目的分析广东省人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE毒株膜蛋白第三高变区(V3环)氨基酸序列的特点。方法提取HIV-1 CRF01_AE亚型感染者PBMC中前病毒DNA,巢式PCR扩增HIV-1膜基因c2v3c3区域后测序,对V3环氨基酸序列特征进行分析。结果 73... 目的分析广东省人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE毒株膜蛋白第三高变区(V3环)氨基酸序列的特点。方法提取HIV-1 CRF01_AE亚型感染者PBMC中前病毒DNA,巢式PCR扩增HIV-1膜基因c2v3c3区域后测序,对V3环氨基酸序列特征进行分析。结果 73份样本与HIV-1 CRF01_AE亚型代表毒株聚集在一起、与其他亚型标准毒株分开,进一步证实本研究73例HIV/AIDS患者感染的HIV-1毒株为CRF01_AE亚型。除6个位点氨基酸一致外,73例病人所有V3环序列的其他29个位点分别有2～8个不同的氨基酸出现;GPGQ为V3环顶端四肽的主要形式,占47.9%,其次为GPGK,占15.1%,四肽中未出现多态性的只有第三位氨基酸;预测HIV-1辅助受体为CCR5的有35例,占47.9%,其次为CXCR4的有34例,占46.6%,两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。性传播是广东省CRF01_AE亚型HIV-1感染者的主要感染途径,占54.8%,其次是静脉吸毒,占30.2%。通过性传播途径感染的HIV-1毒株的辅助受体主要为CXCR4,占52.5%,辅助受体为CCR5的占40.0%,两者相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论广东省人类免疫缺陷病毒1型CRF01_AE毒株膜区V3环氨基酸存在较高的多态性,使用CCR5及CXCR4为辅助受体的HIV-1毒株比例相近。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒1型 CRF01_AE亚型 v3环 序列分析

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深圳市2002-2009年HIV-1 CRF01-AE亚型Env基因V3环变异研究

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作者 刘佳 王晓辉 +2 位作者 王国庆 陈琳 程锦泉 《中国预防医学杂志》 CAS 2012年第5期370-372,共3页

目的了解深圳市2002-2009年CRF01-AE亚型Env基因V3环变异特征。方法采用Nested-PCR扩增Env区,对扩增产物进行测序,利用MEGA软件进行基因序列整理和分析。结果从2002-2009年,深圳市CRF01-AE亚型Env基因离散率从9.09%增长至13.13%,呈逐年... 目的了解深圳市2002-2009年CRF01-AE亚型Env基因V3环变异特征。方法采用Nested-PCR扩增Env区,对扩增产物进行测序,利用MEGA软件进行基因序列整理和分析。结果从2002-2009年,深圳市CRF01-AE亚型Env基因离散率从9.09%增长至13.13%,呈逐年递增趋势;共发现10种V3环顶端四肽类型,其中主要类型为GPGQ(77.38%)、GPGR(16.32%),所有类型顶端四肽比例在各年份存在上下波动趋势;每个时间段都有至少91.00%毒株使用CCR5作为辅助受体,1.00%～9.00%毒株不能做出预测,没有可被预测为使用CXCR4为辅助受体的毒株。结论从2002-2009年深圳市CRF01-AE亚型病毒变异随流行时间不断加大;V3环顶端四肽类型中GPGR比例变化最大;深圳地区大部分CRF01-AE毒株为巨噬细胞嗜性。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒I型 CRF01-AE 基因变异 v3环

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HIV-1毒株V3环顶端四肽多态性及原发耐药性研究

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作者 杜鹏 陈国敏 +1 位作者 李泽琳 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期321-323,共3页

目的 探索我国河南省新蔡县既往献血人群中HIV-1病毒流行株env基因V3环顶端四肽多态性和pol基因原发耐药性变异特征.方法 套式聚合酶链反应（Nested-PCR）扩增51例确认HIV阳性样本env、pol基因部分区段并测序,PCR产物纯化后克隆,挑选克... 目的 探索我国河南省新蔡县既往献血人群中HIV-1病毒流行株env基因V3环顶端四肽多态性和pol基因原发耐药性变异特征.方法 套式聚合酶链反应（Nested-PCR）扩增51例确认HIV阳性样本env、pol基因部分区段并测序,PCR产物纯化后克隆,挑选克隆株鉴定为阳性后测序,以MEGA（version 3.0）等软件进行分析.结果 env基因V3环顶端四肽主要为GPGR、GPGQ、GPGK、GQGR;在pol基因PR区未发现有关蛋白酶抑制剂（PIs）的主要耐药性突变位点,在RT区共发现9条序列存在对NRTIs或NNRTIs中的一类药物耐药性突变.结论 GPGR这一典型的欧美B亚型V3环顶端四肽序列比例最高为44.44%;原发性耐药发生的比例较低,药物敏感性资料表明耐药性突变位点多表现为低度耐药性,因此提示我们在对该地区因献血感染HIV的患者在首次治疗时可不必以耐药性检测做指导. 展开更多

关键词 HIv v3环顶端四肽 药物耐受 病毒

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HIV-1早期感染婴儿病毒亚型及env区V3环氨基酸特征分析

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作者 汪静 蒋岩 +2 位作者 吕超 李晶 姚均 《中国艾滋病性病》 CAS 2013年第4期232-235,共4页

目的分析中国I型艾滋病病毒(HIV-1)感染婴儿基因亚型的分布情况,以及env区V3环氨基酸序列特征。方法利用巢式聚合酶链反应(nPCR)扩增HIV-1前病毒脱氧核糖核酸(DNA)env区和pol区的基因序列,使用ChromasPro、MEGA 4.0、BioEdit软件... 目的分析中国I型艾滋病病毒(HIV-1)感染婴儿基因亚型的分布情况,以及env区V3环氨基酸序列特征。方法利用巢式聚合酶链反应(nPCR)扩增HIV-1前病毒脱氧核糖核酸(DNA)env区和pol区的基因序列,使用ChromasPro、MEGA 4.0、BioEdit软件进行HIV-1基因分型以及env区V3环氨基酸序列的特征分析。结果对65名HIV-1感染婴儿的100份干血斑样本(DBS)分别进行HIV-1 env区和pol区扩增,最终扩增成功的样本为63份和84份;其中45名感染婴儿的59份DBS两基因区均扩增成功。依据两基因区域均扩增成功的45名感染婴儿样本进行基因分型,结果为:CRF_BC亚型占73.3%(33/45,包括CRF_07-BC 21份,CRF_BC-08 11份),CRF01-AE亚型占20.0%(9/45),B′亚型占4.4%(2/45),G亚型占2.2%(1/45)。对env区扩增成功的63份样本的V3环顶端四肽特征序列进行分析,结果显示存在5种类型,分别为GPGQ、GPGR、GPGS、GLGR和GQGR,以GPGQ为主。53份样本可能使用CCR5作为辅助受体,3份样本可能使用CXCR4作为辅助受体,7份样本不能做出预测。结论婴儿感染的HIV-1亚型呈现多样性分布;HIV-1V3环顶端氨基酸序列以GPGQ为主;大部分婴儿样本可能使用CCR5作为辅助受体。 展开更多

关键词 婴儿 Ⅰ型艾滋病病毒 亚型 v3环 氨基酸

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HIV-1 gp120 V3区的结构特征及其生物学功能

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作者 田海军 蓝灿辉 +1 位作者 姜世勃 陈应华 《自然科学进展》 北大核心 2003年第1期11-14,共4页

研究表明HIV-1包膜蛋白gp120上的V3环在病毒结合到靶细胞的过程中起着重要的作用。这个区域中的几个氨基酸残基与gp120同辅受体的结合相关联,在HIV-1感染过程的早期,V3环在患者体内诱导针对HIV病毒的抗体应答,并被确定为主要中和决定簇... 研究表明HIV-1包膜蛋白gp120上的V3环在病毒结合到靶细胞的过程中起着重要的作用。这个区域中的几个氨基酸残基与gp120同辅受体的结合相关联,在HIV-1感染过程的早期,V3环在患者体内诱导针对HIV病毒的抗体应答,并被确定为主要中和决定簇。一些针对V3环的抗体具有广泛的中和活性,但是,V3环是HIV包膜蛋白的一个高变区,发生着广泛的变异,综述了V3环的结构特征和变异以及生物学功能,并对V3环的免疫反应进行了探讨。 展开更多

关键词 获得性免疫缺陷综合症 I型人免疫缺陷病毒 HIv-1 包膜蛋白gp120 v3环 结构特征 生物学功能

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一种新型抗逆转录病毒药物——Maraviroc

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作者 徐雨 姚瑜 《国外医药（抗生素分册）》 CAS 2009年第1期25-27,共3页

Maraviroc(又名UK-427857,由辉瑞制药研发,在美国以外使用商品名Selzentry或Celsentri)是获得FDA和EMEA批准的首个新型口服HIV-1抑制剂。该药物被寄望于只对携带R5病毒的患者(即HIV-1感染者中的1个亚群)有效。目前,有关该药物的广泛使... Maraviroc(又名UK-427857,由辉瑞制药研发,在美国以外使用商品名Selzentry或Celsentri)是获得FDA和EMEA批准的首个新型口服HIV-1抑制剂。该药物被寄望于只对携带R5病毒的患者(即HIV-1感染者中的1个亚群)有效。目前,有关该药物的广泛使用主要面临2个问题:一是缺乏简便而适用的R5病毒特异性检测方法,即趋向性测试;其次是对于R5和X4病毒在感染期间的动力学研究还不够。本文探讨了人们应用目前可用的测试法时所面临的困难,以及备选测试方法的潜在作用。 展开更多

关键词 趋向性 趋化因子受体 共受体阻滞剂 v3环序列

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HIV-1包膜糖蛋白V_3环对大鼠海马长时程增强效应的影响 被引量：1

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作者 董军 陆大祥 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期235-238,共4页

目的　探讨人免疫缺陷病毒Ⅰ型 (HIV 1)的包膜糖蛋白V3 环对大鼠海马脑片CA1区的突触传递及可塑性的影响。方法　应用离体脑片记录技术 ,记录大鼠海马CA1区的场兴奋性突触后电位 (fieldexcitatorypostsynapticpotentials,f EPSP) ,研究... 目的　探讨人免疫缺陷病毒Ⅰ型 (HIV 1)的包膜糖蛋白V3 环对大鼠海马脑片CA1区的突触传递及可塑性的影响。方法　应用离体脑片记录技术 ,记录大鼠海马CA1区的场兴奋性突触后电位 (fieldexcitatorypostsynapticpotentials,f EPSP) ,研究了V3 环对高频电刺激Schaffer侧支引起的鼠长时程增强效应 (long termpotentiation ,LTP)的影响。结果　V3 环对高频电刺激 (HFS ,10 0Hz,10 0 0ms× 2 ,串间隔 2 0s,共 2次 )Schaffer侧支引起的大鼠海马CA1区LTP产生抑制作用 ,而对其基础f EPSP没有影响。用浓度为 2 0 0pmol/L的V3 环灌流脑片 ,可引起LTP的维持发生抑制。这种抑制作用可被V3 环特异抗体V3 McAb(4 0ng/ml)所拮抗。结论　V3 环可能是通过抑制海马CA1区的LTP诱发和维持而参与艾滋病痴呆 (HIV 1associateddementia ,HAD) 展开更多

关键词 HIv-1 包膜糖蛋白v3环 大鼠 海马 长时程增强效应 离体脑片记录技术 艾滋病

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我国HIV-1主要流行株外膜蛋白(env)基因V3～V4区变异及其与生物学特性的关系 被引量：25

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作者 邢辉 梁浩 +7 位作者 洪坤学 魏民 赵全壁 冯毅 陈建平 全宇 滕涛 邵一鸣 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期185-189,共5页

目的　研究我国HIV 1主要流行毒株亚型的envV3～V4区变异与生物学特性的关系。方法　应用nested PCR对 1 57份获自我国 1 2个省份的HIV 1毒株env区序列进行扩增 ,并使用ABI 377型测序仪测序 ,然后应用BLAST、GCG和MEGA等生物学软件或程... 目的　研究我国HIV 1主要流行毒株亚型的envV3～V4区变异与生物学特性的关系。方法　应用nested PCR对 1 57份获自我国 1 2个省份的HIV 1毒株env区序列进行扩增 ,并使用ABI 377型测序仪测序 ,然后应用BLAST、GCG和MEGA等生物学软件或程序对env基因V3～V4区序列进行分析。结果　B′亚型毒株V3顶端四肽存在着 4种类型 :GPGR ( 54% )、GPGQ ( 2 8% )、GPGK( 1 6 % )和GPGA( 2 % ) ,B′/C重组毒株全部为GPGQ( 1 0 0 % ) ,CRF0 1 AE重组毒株呈现GPGQ( 95% )和GPGR( 5% )两种类型 ;B′/C和CRF0 1 AE重组毒株V3～V4区及其临近区域N 糖基化位点比B′亚型毒株N 糖基化位点保守。而B′亚型毒株V3环的净电荷分别显著高于B′/C和CRF0 1 AE毒株 (P <0 .0 1 ) ;根据V3环关键氨基酸推测辅助受体使用情况的结果显示 :B′亚型毒株有 9.2 6 %可能使用CCR5,7.4 1 %可能使用CXCR4 ,其余 83.33%不能对辅助受体的使用作出预测。所有B′/C重组毒株被预测可能使用CCR5。CRF0 1 AE重组毒株有 90 .4 8%被预测可能使用CCR5,没有被预测为使用CXCR4的序列 ,9.52 %不能作出预测。结论　B′亚型毒株大部分可能为NSI型 ,少部分可能为SI型 ,而B′/C和CRF0 1 AE重组毒株绝大部分为NSI型。我国主要流行株的V3～V4区尤其是V3环的氨基酸? 展开更多

关键词 生物学特性 流行株 外膜蛋白 基因 NESTED-PCR N-糖基化位点 HIv-1毒株 亚型毒株 CXCR4 可能使用 CCR5 辅助受体 氨基酸变异 enu v3环 流行毒株 方法应用 功能限制 重组 预测 序列 GCG I型 测序 NS

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