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新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)内毒素检查方法比较
1
作者 袁晶 孙也婷 +2 位作者 许馨月 王琳 张立志 《中国药业》 CAS 2024年第4期63-67,共5页
目的为新型冠状病毒(简称新冠病毒)灭活疫苗(Vero细胞)的细菌内毒素检查和质量控制提供技术支持和理论基础。方法利用凝胶法、光度测定法[包括动态浊度(TKA)法、微量动态显色(mKCA)法]测定并比较新冠病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液和成品... 目的为新型冠状病毒(简称新冠病毒)灭活疫苗(Vero细胞)的细菌内毒素检查和质量控制提供技术支持和理论基础。方法利用凝胶法、光度测定法[包括动态浊度(TKA)法、微量动态显色(mKCA)法]测定并比较新冠病毒灭活疫苗(Vero细胞)原液和成品中内毒素浓度。结果3种方法测得的供试品内毒素浓度均符合规定(原液为不超过5 EU/600 SU,成品为每剂≤5 EU),且后2种方法既能用于定性检测也能用于定量检测,特别是mKCA法下鲎试剂用量更少。结论mKCA法是检查该疫苗内毒素浓度的最适宜方法,具有灵敏度高、稳定性强、鲎试剂用量少、数据完整和可追溯、人为操作误差较小的特点。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 灭活疫苗 vero细胞 内毒素 微量动态显色法
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姜黄素抑制PEDV感染Vero细胞的作用研究 被引量：2
2
作者 刘向阳 周扬 +5 位作者 张淑娟 胡霞 王静 张利 雷程红 宋振辉 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期641-648,共8页
为探究姜黄素是否具有抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的作用,本研究以Vero细胞为实验对象,分别设置阴性(空白)对照组、PEDV感染组、姜黄素处理组、姜黄素预处理后感染PEDV组,在PEDV感染后观察细胞病变,利用RT-qPCR、Western-blot、IFA... 为探究姜黄素是否具有抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的作用,本研究以Vero细胞为实验对象,分别设置阴性(空白)对照组、PEDV感染组、姜黄素处理组、姜黄素预处理后感染PEDV组,在PEDV感染后观察细胞病变,利用RT-qPCR、Western-blot、IFA技术和病毒滴度测定法检测PEDV在Vero细胞中的增殖情况。结果显示,与阴性对照组相比,PEDV感染Vero细胞后有明显细胞病变,即细胞拉丝、细胞核固缩并空泡化。与PEDV感染组相比,姜黄素预处理后显著抑制了病毒在细胞内的增殖(P<0.05),降低了病毒感染后的滴度(P<0.05),显著上调了Vero细胞抗病毒细胞因子IFN-α、IFN-β的分泌水平及MX1、ISG15、ZAP的转录水平(P<0.05)。与阴性(空白)对照组相比,PEDV感染后抗病毒细胞因子IFN-α、IFN-β的分泌水平明显上调(P<0.05),但MX1、ISG15、ZAP的转录水平无显著变化(P>0.05);姜黄素处理后除IFN-α分泌水平无明显变化外,IFN-β分泌水平及MX1、ISG15、ZAP转录水平均显著上调(P<0.05)。结果表明,姜黄素能够增强Vero细胞抗病毒细胞因子的抗病毒效果,抑制PEDV在Vero细胞中的增殖,这首次证实了姜黄素具有抑制PEDV感染Vero细胞的抗病毒作用,为防控PEDV有效抗病毒药物的研发提供了参考。 展开更多
关键词 姜黄素 猪流行性腹泻病毒 vero细胞 抗病毒细胞因子
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传染性法氏囊病病毒疫苗株B87在DF-1细胞和Vero细胞感染性研究
3
作者 潘鹏宇 韩金泽 +7 位作者 殷建豪 谢艾伶 吴凤明 刘鼎阔 孙英峰 尤春雪 于晓雪 李留安 《动物医学进展》 北大核心 2023年第2期41-45,共5页
为比较传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)疫苗株B87对DF-1细胞和Vero细胞易感性,对比了IBDV B87株感染两种细胞后的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、病毒基因组dsRNA、半数组织感染量(median tissue cu... 为比较传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)疫苗株B87对DF-1细胞和Vero细胞易感性,对比了IBDV B87株感染两种细胞后的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、病毒基因组dsRNA、半数组织感染量(median tissue culture infective dose,TCID 50)水平、病毒载量及VP2基因表达水平。结果显示,IBDV B87株感染后,DF-1细胞CPE程度高于Vero细胞;DF-1细胞病毒基因dsRNA荧光密度高于Vero细胞;DF-1细胞病毒载量荧光密度高于Vero细胞,且DF-1细胞中病毒滴度(105.423±0.03296 TCID 50/0.1 mL)极显著高于Vero细胞中病毒滴度(102.592±0.03428 TCID 50/0.1 mL,P<0.01),VP2基因表达量显著高于Vero细胞(P<0.05)。说明IBDV B87株对DF-1细胞的感染性高于Vero细胞。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒B87株 DF-1细胞 vero细胞 感染性 细胞嗜性
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过表达HDAC6基因的Vero细胞系建立及其对狂犬病病毒增殖效率评价
4
作者 殷娟斌 张志雄 +5 位作者 王莎莎 马小琴 梁正基 孙跃峰 王相伟 殷相平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期150-155,共6页
为提高狂犬病病毒(rabies virus,RABV)在细胞中的增殖效率,本研究利用慢病毒包装系统构建组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)过表达的Vero/HDAC6细胞系,分析RABV在Vero/HDAC6细胞系与Vero细胞中的复制差异。首先以非洲绿猴... 为提高狂犬病病毒(rabies virus,RABV)在细胞中的增殖效率,本研究利用慢病毒包装系统构建组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)过表达的Vero/HDAC6细胞系,分析RABV在Vero/HDAC6细胞系与Vero细胞中的复制差异。首先以非洲绿猴HDAC6基因为目标构建重组质粒plv-SV40-puro-3×flag-HDAC6,并与辅助质粒pMD2.G和psPAX2共转染至HEK-293T细胞进行慢病毒包装。将包装好的慢病毒感染Vero细胞并通过嘌呤霉素筛选获得过表达HDAC6基因的阳性细胞。利用TCID50和Western-blot技术检测RABV在Vero/HDAC6细胞系中的复制能力。结果表明,过表达HDAC6能够明显促进RABV复制,并且RABV在Vero/HDAC6细胞系中的增殖能力高于野生型细胞。本研究构建的Vero/HDAC6细胞系能显著促进RABV的增殖,为RABV疫苗候选细胞株奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 HDAC6 vero细胞 慢病毒包装 过表达细胞系
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Vero细胞生长过程中葡萄糖消耗量与细胞数量关系的研究
5
作者 简伟 刘永连 +3 位作者 张瑞 郭林 肖海峰 李国顺 《生物化工》 CAS 2023年第4期109-111,118,共4页
目的:建立一种应用于片状载体培养的Vero细胞计数方法。方法:Vero细胞于细胞瓶内培养,分别于24 h、48 h、72 h、96 h和120 h取样检测上清液中葡萄糖含量,同时消化细胞并计数。以葡萄糖累计消耗量为X轴,以细胞收获数量为Y轴,获得葡萄糖... 目的:建立一种应用于片状载体培养的Vero细胞计数方法。方法:Vero细胞于细胞瓶内培养,分别于24 h、48 h、72 h、96 h和120 h取样检测上清液中葡萄糖含量,同时消化细胞并计数。以葡萄糖累计消耗量为X轴,以细胞收获数量为Y轴,获得葡萄糖累计消耗量和细胞数量的关系方程,从而建立一种细胞计数的方法。通过计算反应器中细胞生长消耗的葡萄糖量来计算细胞数量,从而优化控制细胞生长。结果:得到葡萄糖消耗量与细胞数量线性方程为Y=4.107×10~8X;Vero细胞在反应器内培养6 d,累计消耗葡萄糖71.28 g,所获得细胞数量为2.93×10^(10)个。结论:建立了葡萄糖消耗量与细胞数量的线性关系,即每消耗1 g葡萄糖对应的细胞数量为4.107×10~8个,可作为片状载体细胞培养过程中细胞计数的参考。 展开更多
关键词 vero细胞 片状载体 细胞计数方法 葡萄糖
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无血清全悬浮培养Vero细胞系的建立及生物反应器培养参数优化
6
作者 杨惠清 武发菊 +4 位作者 葛玉凤 刘小刚 安芳兰 刘学荣 胡永浩 《动物医学进展》 北大核心 2023年第1期54-59,共6页
为建立无血清全悬浮培养Vero细胞系,并使其在反应器中高密度生长。从美国典型培养物保藏中心(ATCC)引进贴壁培养型Vero细胞,通过降低血清浓度和改变培养液的方式获得1株无血清全悬浮培养型Vero细胞,扩增培养后液氮冻存,建立相应的细胞库... 为建立无血清全悬浮培养Vero细胞系,并使其在反应器中高密度生长。从美国典型培养物保藏中心(ATCC)引进贴壁培养型Vero细胞,通过降低血清浓度和改变培养液的方式获得1株无血清全悬浮培养型Vero细胞,扩增培养后液氮冻存,建立相应的细胞库;复苏细胞后对活力、形态、生长曲线、微生物污染、染色体核型等特性进行检定;通过Box-Behnken试验对生物反应器pH、溶氧和搅拌转速等3个培养参数进行优化,确定最优培养参数。结果显示,筛选的Vero悬浮细胞形态呈圆形、饱满、透亮,大小均匀,呈现较好的悬浮生长状态;生长曲线呈S型;细菌、真菌、支原体及外源病毒检查均为阴性;染色体数目为58或60的占75%;用响应面分析法得出的最优培养参数培养Vero细胞,细胞最高密度可达4.5×10^(6)cells/mL。结果表明,成功筛选出了适应无血清悬浮培养的Vero细胞,通过优化培养参数,可在生物反应器中高密度生长。 展开更多
关键词 vero细胞 细胞驯化 细胞库 生物反应器
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Vero细胞疫苗生产过程中宿主细胞蛋白含量分析 被引量：1
7
作者 田博 丁志芬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期418-421,共4页
目的了解Vero细胞疫苗中间产品中宿主细胞蛋白(Host cell protein,HCP)的含量变化。方法模拟Vero细胞疫苗生产工艺流程,制备Vero细胞HCP,免疫家兔制备Vero细胞HCP免疫血清,经Protein ASepharose CL-4B亲和层析,制备纯化的抗Vero细胞HCPI... 目的了解Vero细胞疫苗中间产品中宿主细胞蛋白(Host cell protein,HCP)的含量变化。方法模拟Vero细胞疫苗生产工艺流程,制备Vero细胞HCP,免疫家兔制备Vero细胞HCP免疫血清,经Protein ASepharose CL-4B亲和层析,制备纯化的抗Vero细胞HCPIgG,通过SDS-PAGE和Western blot分析Vero细胞乙型脑炎疫苗及Vero细胞SARS疫苗各中间产品的蛋白、HCP及病毒抗原成分的含量变化。结果Vero细胞乙型脑炎疫苗和Vero细胞SARS疫苗中间产品中均存在一定量HCP,不同的纯化工艺均可以去除大部分HCP,随着生产工艺的进行,疫苗中间产品中HCP的含量逐渐降低,病毒成分的纯度逐渐增高,但纯化后产品中仍存在少量HCP。结论Vero细胞乙型脑炎疫苗和Vero细胞SARS疫苗均存在一定量HCP。 展开更多
关键词 vero细胞疫苗 中间产品 宿主细胞蛋白 细胞疫苗 细胞蛋白 含量分析 生产过程 vero细胞 宿主 SEPHAROSE
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微载体高密度培养Vero细胞的研究 被引量：22
8
作者 王佃亮 肖成祖 +1 位作者 陈昭烈 黄子才 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期164-170,共7页
微载体是动物细胞高密度培养的有效手段。首先在硅化的方瓶中对Ｃｙｔｏｄｅｘ１、Ｃｙｔｏｄｅｘ３、Ｂｉｏｓｉｌｏｎ、Ｂｅｌｌｃｏ Ｇｌａｓｓ Ｍｉｃｒｏｃａｒｒｉｅｒ、ＣＴ－１、ＣＴ－３、ＭＣ－１、ＣＴ－２８种国产和进口... 微载体是动物细胞高密度培养的有效手段。首先在硅化的方瓶中对Ｃｙｔｏｄｅｘ１、Ｃｙｔｏｄｅｘ３、Ｂｉｏｓｉｌｏｎ、Ｂｅｌｌｃｏ Ｇｌａｓｓ Ｍｉｃｒｏｃａｒｒｉｅｒ、ＣＴ－１、ＣＴ－３、ＭＣ－１、ＣＴ－２８种国产和进口微载体进行了比较和筛选。确定以Ｂｉｏｓｉｌｏｎ作为Ｖｅｒｏ细胞高密度培养的首选微载体。用５００ｍｌ Ｗｈｅａｔｏｎ搅拌瓶探索影响Ｖｅｒｏ细胞高密度培养的条件。 展开更多
关键词 动物 细胞培养 微载体 高密度培养 vero细胞
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国产冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的接种反应及其免疫原性 被引量：16
9
作者 王凌云 孙美平 +4 位作者 张雪春 徐若辉 邹艳杰 左永波 齐华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第12期1115-1117,共3页
目的观察国产冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的接种反应及其免疫原性。方法观察组200例和对照组50例暴露后,按照0、3、7、14、28d免疫程序,分别接种国产、进口冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)。观察组接种疫苗后,观察全身和局部反应情况。... 目的观察国产冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)的接种反应及其免疫原性。方法观察组200例和对照组50例暴露后,按照0、3、7、14、28d免疫程序,分别接种国产、进口冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)。观察组接种疫苗后,观察全身和局部反应情况。采用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)检测观察组和对照组接种后的血清中和抗体水平。结果观察组疫苗接种后,局部红肿、硬结、疼痛、瘙痒发生率分别1.4%、0.8%、17.1%和2.4%;全身反应发热、皮疹、头痛、疲劳乏力和其他反应发生率分别为1.2%、0.4%、2.4%、4.2%和0.3%,且在第7天完全消失。观察组与对照组疫苗首剂接种后7d,抗体阳转率分别为40.3%和37.0%,14d分别为95.5%和97.7%,差异无统计学意义;且首剂接种后45d,抗体阳转率均为100%。观察组和对照组疫苗首剂接种后7、14、45d,血清中和抗体GMT差异无统计学意义,14、45d血清中和抗体GMT均大于0.5IU/ml。结论国产冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)接种反应轻微,并具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 冻干人用狂犬病疫苗 vero细胞 接种反应 免疫原性
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Vero细胞微载体技术规模化培养轮状病毒 被引量：11
10
作者 张永欣 刘馨 +7 位作者 张光明 徐婧雯 李国良 李桂兰 孙明波 衡燮 姬光 孙茂盛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期336-337,348,共3页
目的利用Vero细胞微载体技术规模化培养轮状病毒。方法利用5 L生物反应器进行Vero细胞的微载体培养,待细胞密度达1.5×106个/ml时,以0.05 MOI接种轮状病毒P[2]G3株,于37℃连续培养6 d后收获病毒,期间每天取样观察细胞病变(CPE),并... 目的利用Vero细胞微载体技术规模化培养轮状病毒。方法利用5 L生物反应器进行Vero细胞的微载体培养,待细胞密度达1.5×106个/ml时,以0.05 MOI接种轮状病毒P[2]G3株,于37℃连续培养6 d后收获病毒,期间每天取样观察细胞病变(CPE),并检测病毒感染性滴度。结果在轮状病毒规模化培养的初期,其病毒滴度逐渐升高,至48 h达到最高。在上清中,病毒的滴度为5.5CCID50/ml;在细胞裂解产物中,病毒的滴度为3.75CCID50/ml。结论Vero细胞微载体规模化培养轮状病毒可提高病毒的滴度。 展开更多
关键词 轮状病毒 vero细胞 微载体 滴度
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Vero细胞的微载体培养——放大过程中的接种工艺 被引量：16
11
作者 张立 严春 +2 位作者 范卫民 张元兴 俞俊棠 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期659-663,共5页
概述了用微载体系统培养贴壁细胞放大过程中的接种方法，研究了球转球的工艺条件，并建立了球转球的动力学模型。用此方法成功地在国产５０Ｌ生物反应器中培养Ｖｅｒｏ细胞，细胞密度达１．１×１０７ｃｅｌｓ／ｍＬ。
关键词 细胞培养 vero细胞 接种技术 微载体 放大培养
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国产无佐剂人用Vero细胞狂犬病疫苗接种反应及免疫效果 被引量：11
12
作者 刘华章 黄桂花 +1 位作者 曹庆 潘淮 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期327-328,共2页
目的观察国产无佐剂人用Vero细胞狂犬病疫苗接种反应及免疫效果。方法对93名观察对象采用0、3、7、14和28 d程序进行暴露后免疫,观察免后30 min的即时反应及72 h内的局部和全身副反应,并于第1针免疫后3、7、14和45 d采血,检测血清抗体... 目的观察国产无佐剂人用Vero细胞狂犬病疫苗接种反应及免疫效果。方法对93名观察对象采用0、3、7、14和28 d程序进行暴露后免疫,观察免后30 min的即时反应及72 h内的局部和全身副反应,并于第1针免疫后3、7、14和45 d采血,检测血清抗体水平。结果疫苗接种后均无异常反应,局部及全身一般反应率分别为5.8%和4.5%。免后7 d,血清抗体阳转率达22.58%,14 d达100%;免后7、14和45 d的GMT差异有显著意义;不同性别间免后14和45 d的GMT差异均无显著意义;不同年龄组间GMT14 d差异有显著意义,45 d差异无显著意义。结论国产无佐剂人用Vero细胞狂犬病疫苗安全,免疫效果好。 展开更多
关键词 狂犬病 无佐剂疫苗 vero细胞 接种反应 免疫效果
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斑点杂交法测定Vero细胞DNA残留量的探针选择 被引量：7
13
作者 李加 唐建蓉 +2 位作者 刘景华 曲小肃 董关木 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1892-1895,共4页
目的:为精确检测以Vero细胞为基质的生物制品中宿主细胞残余DNA含量。方法:将提取的Vero细胞DNA分别用不同时间的超声波和 HindⅢ内切酶进行断链处理,电泳和序列分析并确定DNA片段长度,地高辛标记后制备成检测探针,测定已知的不同浓度... 目的:为精确检测以Vero细胞为基质的生物制品中宿主细胞残余DNA含量。方法:将提取的Vero细胞DNA分别用不同时间的超声波和 HindⅢ内切酶进行断链处理,电泳和序列分析并确定DNA片段长度,地高辛标记后制备成检测探针,测定已知的不同浓度的样品DNA和疫苗中DNA残留量。结果:HindⅢ内切酶处理断链后产生172 bp、344 bp、516 bp、688 bp不同长度的DNA,并选取172bp长度的DNA片断和超声波处理30 s的DNA长度为500～750 bp的DNA片断作为检测用探针。结论:两种方法处理的DNA探针检测DNA的灵敏度可达0.1 pg,重复性均较好,超声波处理的探针特异性优于酶切探针,并能成功的应用于疫苗产品中残余宿主细胞DNA的检测。 展开更多
关键词 疫苗 vero细胞 DNA 探针
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用微载体系统培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液 被引量：9
14
作者 王树君 代长海 +5 位作者 张莹 王进 李宇辉 胡晓明 李光谱 于洪涛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期380-382,共3页
目的　采用生物反应器微载体培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液。方法　用 5L生物反应器培养Vero细胞 ,培养至 4d时接种CTN株狂犬病毒 ,在培养全程对细胞生长所消耗的营养物质及代谢产物进行监测及分析。结果　培养 4d后细胞浓度可达 1 ... 目的　采用生物反应器微载体培养Vero细胞生产高滴度狂犬病毒液。方法　用 5L生物反应器培养Vero细胞 ,培养至 4d时接种CTN株狂犬病毒 ,在培养全程对细胞生长所消耗的营养物质及代谢产物进行监测及分析。结果　培养 4d后细胞浓度可达 1 2× 10 7cells ml,培养 3周后的病毒液经ELISA检测A值可达 0 2 1～1 0 6。病毒滴度达 10 - 6 0 ～ 10 - 8 0 LogLD50 ml。病毒液可连续收获 5次。结论　用微载体系统培养Vero细胞可生产高滴度的狂犬病毒液。 展开更多
关键词 微载体系统 vero细胞 狂犬病毒 细胞生长 生物反应器
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β-丙内酯在Vero细胞HFRS疫苗中的应用 被引量：11
15
作者 陈伟 李忠义 +5 位作者 刘江秋 于笑难 薛采芳 蔡群 徐璐 廖辉 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期669-670,共2页
目的　探讨 β -丙内酯灭活双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗的最佳条件。 方法　采用不同终浓度的 β-丙内酯和不同的灭活时间对疫苗进行灭活 ,用细胞培养法进行病毒增殖试验 ,以确定灭活效果。应用高效液相色谱法分析 β -丙内酯... 目的　探讨 β -丙内酯灭活双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗的最佳条件。 方法　采用不同终浓度的 β-丙内酯和不同的灭活时间对疫苗进行灭活 ,用细胞培养法进行病毒增殖试验 ,以确定灭活效果。应用高效液相色谱法分析 β -丙内酯的最佳水解条件和 3批双价vero细胞出血热纯化灭活疫苗 β-丙内酯残留量。检测 3批双价纯化灭活疫苗的免疫效果。结果　疫苗经终浓度为 1∶2 0 0 0和 1∶4 0 0 0的 β -丙内酯作用 2 4h ,均可完全灭活病毒 ;疫苗中的 β-丙内酯在 37℃水浴下 ,随着水解时间的延长 ,其含量逐渐下降 ,水解 2h后已无 β-丙内酯检出 ;3批经 β-丙内酯灭活的双价Vero细胞出血热纯化疫苗均未检出 β-丙内酯残留 ,在家兔体内诱导产生针对汉滩型和汉城型病毒的中和抗体效价均达到 1∶2 0。结论　肾综合征出血热纯化疫苗经终浓度为 1∶4 0 0 0 β -丙内酯 4℃灭活 2 4h ,然后再于 37℃水浴中水解 2h ,既可达到完全灭活病毒且无 β-丙内酯残留的目的 ; 展开更多
关键词 肾综合征出血热 疫苗 vero细胞 β-丙内酯 病毒灭活 高效液相色谱
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应用生物反应器培养Vero细胞制备甲肝病毒 被引量：5
16
作者 孙明波 李国良 +5 位作者 李卫东 张丽旌 徐其武 匡祥晶 姜述德 廖国阳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期740-741,共2页
目的　研究用生物反应器培养Vero细胞制备甲肝病毒W株的可行性。方法　Vero细胞悬浮吸附HAVW株后 ,接种到搅拌式生物反应器中 ,用微载体进行培养 ,对营养物质、代谢产物及病毒的增殖进行分析。结果　经四周的培养 ,病毒收获时 ,细胞密度... 目的　研究用生物反应器培养Vero细胞制备甲肝病毒W株的可行性。方法　Vero细胞悬浮吸附HAVW株后 ,接种到搅拌式生物反应器中 ,用微载体进行培养 ,对营养物质、代谢产物及病毒的增殖进行分析。结果　经四周的培养 ,病毒收获时 ,细胞密度达 1.4× 10 6 ml,甲肝病毒抗原滴度达 1∶64。结论　W株已适应于Vero细胞中 ,用生物反应器培养产毒 。 展开更多
关键词 生物反应器 培养 vero细胞 制备 甲肝病毒 灭活疫苗
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应用生物反应器和微载体培养Vero细胞生产猪流行性腹泻病毒的研究 被引量：5
17
作者 王建超 周燕 +3 位作者 华平 邹勇 谭文松 钱永清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期573-576,共4页
对应用生物反应器系统和微载体培养Vero细胞生产PEDV进行了实验研究,通过分析和比较批培养及换液培养过程中细胞生长、代谢和病毒增殖的相互关系,发现PEDV随着细胞的生长而不断在胞内增殖和积累,72h后Vero细胞需经过一个短暂的停止生长... 对应用生物反应器系统和微载体培养Vero细胞生产PEDV进行了实验研究,通过分析和比较批培养及换液培养过程中细胞生长、代谢和病毒增殖的相互关系,发现PEDV随着细胞的生长而不断在胞内增殖和积累,72h后Vero细胞需经过一个短暂的停止生长阶段,再继续呈指数生长。反应器换液培养的单位培养基细胞产量比批培养提高了28%,比方瓶培养提高了138%,疫苗生产效率显著提高。当接种密度为1 23×105cells/ml时,换液培养至96h时获得了1 74×106cells/ml的高细胞密度,细胞扩增了14 3倍,且单位细胞的病毒产量并不低于静态培养。 展开更多
关键词 生物反应器 微载体 vero细胞 培养 猪流行性腹泻病毒 PEDV 生长 代谢 增殖 接种密度 疫苗
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Vero细胞微载体悬浮培养制备人用狂犬病疫苗的研究 被引量：10
18
作者 顾悦翔 梁本 +3 位作者 褚菊仁 李广善 付琳 朱关福 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1992年第3期100-102,共3页
将“北京”及“CTN”两株中国分离的狂犬病病毒毒株适应于Vero细胞,病毒滴度可达10^(7.5)LD_(50)/ml。应用Veto细胞微载体反应器系统培养病毒,经丙内酯灭活,超滤浓缩制备的疫苗,其效力试验(NIH法)结果优于现行原代地鼠肾细胞培养疫苗。
关键词 vero细胞适应毒株 微载体培养
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轮状病毒P[2]G3株在Vero细胞上的传代适应性 被引量：5
19
作者 张光明 张永欣 +1 位作者 刘馨 孙茂盛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第12期1078-1079,共2页
目的研究轮状病毒P[2]G3株在Vero细胞上的传代适应性,以确定其在Vero细胞上培养的最适条件。方法将P[2]G3株轮状病毒分别以0.01、0.05和0.1MOI接种于Vero细胞,观察细胞病变(CPE)情况,并检测病毒的感染性滴度,确定在Vero细胞上接种病毒... 目的研究轮状病毒P[2]G3株在Vero细胞上的传代适应性,以确定其在Vero细胞上培养的最适条件。方法将P[2]G3株轮状病毒分别以0.01、0.05和0.1MOI接种于Vero细胞,观察细胞病变(CPE)情况,并检测病毒的感染性滴度,确定在Vero细胞上接种病毒的最适MOI。同时观察连续传15代后,各代次病毒的滴度及其基因核酸带型的变化。结果MOI为0.05时,接种病毒后出现CPE及收获时间均较早,病毒的感染性滴度最高,确定接种病毒的最适MOI为0.05。连续传15代,病毒滴度随传代次数的增加而上升,各代次病毒的基因组核酸带型基本一致,且与原代病毒相符。结论轮状病毒P[2]G3株经适应性培养后,可在Vero细胞上稳定传代15代。 展开更多
关键词 轮状病毒 vero细胞 传代 遗传稳定性
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利用生物反应器和Vero细胞培养鸡传染性法氏囊病病毒的研究 被引量：8
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作者 石岗 王宏俊 孙惠玲 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期1134-1138,共5页
通过对血清、pH、接毒量和收毒时间等培养条件的优化 ,确定鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)在Vero细胞上增殖的最佳培养条件为 :血清 2 %,pH 7.0 ,接毒量 5∶10 0 0 0 ,收毒时间为接毒后培养 10 8h。 2 5 0ml自制搅拌瓶和 5L搅拌式生物反... 通过对血清、pH、接毒量和收毒时间等培养条件的优化 ,确定鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)在Vero细胞上增殖的最佳培养条件为 :血清 2 %,pH 7.0 ,接毒量 5∶10 0 0 0 ,收毒时间为接毒后培养 10 8h。 2 5 0ml自制搅拌瓶和 5L搅拌式生物反应器研究结果表明 ,在 2g/L微载体的Vero细胞悬浮培养系统中 ,待细胞刚长满微载体时 ,按照确定的IBDV最佳增殖条件换液培养 ,病毒可在较长一段时间维持高的病毒滴度 ,最高滴度分别可达 8.875和8.5 8(-lgTCID50 ) ,比传统转瓶生产方法至少提高 1个毒价 ,可用于IBDV规模化生产。 展开更多
关键词 细胞培养 鸡 传染性法氏囊病病毒 生物反应器 vero细胞 规模化生产 疫苗
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