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续随子转录因子ElWRI1的鉴定及功能分析
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作者 牛听风 葛丽萍 +2 位作者 苏云婷 王壮琳 李润植 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期458-466,共9页
续随子(Euphorbia lathyris L.)种子可积累大量油脂且富含油酸,WRINKLED1(WRI1)为AP2/EREBP类转录因子,参与调控脂肪酸的合成及种子发育等生命过程。本研究通过对续随子的全基因组鉴定,获得了11个续随子ElWRI1转录因子基因,命名为ElWRI1... 续随子(Euphorbia lathyris L.)种子可积累大量油脂且富含油酸,WRINKLED1(WRI1)为AP2/EREBP类转录因子,参与调控脂肪酸的合成及种子发育等生命过程。本研究通过对续随子的全基因组鉴定,获得了11个续随子ElWRI1转录因子基因,命名为ElWRI1-1~ElWRI1-11。结果显示,它们均具有两个AP2结构域;其编码蛋白均属于不稳定亲水蛋白,无跨膜结构;亚细胞定位预测显示所有WRI1蛋白均位于细胞核。表达分析结果表明,ElWRI1-6与ElWRI1-8在种子发育时期的表达量较高,且后者的表达模式与种子油脂积累模式一致。在本氏烟草(Nicotiana benthamiana L.)叶片中异源过表达ElWRI1-8,叶片中总油脂含量增加,且油酸含量显著上升。研究结果表明ElWRI1-8可能是调控续随子种子油脂和油酸生物合成的一个重要转录因子。 展开更多
关键词 续随子 转录因子 wri1基因 油脂合成 叶片瞬时表达
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油菜基因BnWRI1的克隆及RNAi对种子含油量的影响 被引量:16
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作者 柴国华 白泽涛 +5 位作者 蔡丽 郭学兰 张学江 石磊 董彩华 刘胜毅 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1512-1518,共7页
【目的】阐明油菜基因BnWRI1对其种子含油量的影响。【方法】采用RT-PCR技术从油菜中克隆到BnWRI1基因编码区内384bp的片段,将该片段正反向插入干扰载体pGΩ4ARi中,构建成RNAi表达载体pGΩ4ARi-WRI1,通过花粉管通道法将其转入油菜受体... 【目的】阐明油菜基因BnWRI1对其种子含油量的影响。【方法】采用RT-PCR技术从油菜中克隆到BnWRI1基因编码区内384bp的片段,将该片段正反向插入干扰载体pGΩ4ARi中,构建成RNAi表达载体pGΩ4ARi-WRI1,通过花粉管通道法将其转入油菜受体品种中双9号中,【结果】获得3棵转基因植株,PCR扩增和基因组Southern杂交证实外源片段已整合在受体油菜基因组中。利用半定量RT-PCR和改进的索氏提取法分别检测转基因T1代植株的BnWRI1基因表达量和种子含油量,结果表明:与非转基因对照相比,转基因植株的BnWRI1基因均受抑制,种子含油量有所降低。【结论】采用RNAi技术可使油菜内源基因BnWRI1沉默,表明油菜基因BnWRI1能有效调控种子含油量。 展开更多
关键词 油菜 含油量 wri1基因 花粉管通道法 RNAI
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甘蓝型油菜WRI1基因cDNA的克隆与序列分析 被引量:7
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作者 施春霖 刘聪 +3 位作者 肖旦望 陈社员 官春云 熊兴华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期247-252,共6页
通过RT-PCR方法克隆了甘蓝型油菜湘油15号5个WRI1基因cDNA。测序结果显示,BnWRI1-1大小为1 248 bp,BnWRI1-2和BnWRI1-3大小为1 254 bp,BnWRI1-4、BnWRI1-5大小为1 242 bp;聚类分析结果显示,所克隆WRI1基因cDNA在进化关系上属于AP2/ERF... 通过RT-PCR方法克隆了甘蓝型油菜湘油15号5个WRI1基因cDNA。测序结果显示,BnWRI1-1大小为1 248 bp,BnWRI1-2和BnWRI1-3大小为1 254 bp,BnWRI1-4、BnWRI1-5大小为1 242 bp;聚类分析结果显示,所克隆WRI1基因cDNA在进化关系上属于AP2/ERF转录因子家族,同拟南芥AtWRI1(At3G54320)同处1个分支,并且所克隆基因cDNA来自甘蓝型油菜不同的基因组;通过核苷酸序列比对分析,得到所克隆WRI1基因cDNA单核苷酸变异位点40个;特异性酶切位点分析显示,来源于A基因组的BnWRI1-1、BnWRI1-2、BnWRI1-3第892位与来源于C基因组的BnWRI1-4和BnWRI1-5第880位的核苷酸发生变异,导致Bcl I识别位点的变化;酶切试验结果表明,采用BclI酶可区分甘蓝型油菜的AtWRI1-like WRI1基因的A或C基因组来源。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 wri1基因 CDNA 序列分析
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拟南芥WRI1基因的克隆及其植物反义载体的构建 被引量:1
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作者 吴晓梅 吴雄熊 陈明训 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第3期68-69,79,共3页
应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了拟南芥WRI1基因,并将其克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了该基因全序列。结果表明,该基因全长为1 287 bp。将拟南芥WRI1基因反向克隆到植物表达载体pCambia1... 应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了拟南芥WRI1基因,并将其克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了该基因全序列。结果表明,该基因全长为1 287 bp。将拟南芥WRI1基因反向克隆到植物表达载体pCambia1300的35S启动子下游,构建了该基因的植物反义表达载体。 展开更多
关键词 拟南芥 PCR wri1基因 反义表达载体
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棉花中一个新型转录因子GhWRI1的表达特征与功能分析 被引量:5
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作者 李鑫 王正明 +1 位作者 薛伟 初明光 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期80-86,共7页
AP2(APETALA2)/EREBP(ethylene-responsive element binding protein)是一类特异性存在于植物中的转录因子,在植物中的许多代谢过程都起着十分重要的作用。从棉花中分离并获得了一个新的AP2基因GhWRI1,该基因长1 314 bp,所编码的蛋白含... AP2(APETALA2)/EREBP(ethylene-responsive element binding protein)是一类特异性存在于植物中的转录因子,在植物中的许多代谢过程都起着十分重要的作用。从棉花中分离并获得了一个新的AP2基因GhWRI1,该基因长1 314 bp,所编码的蛋白含有437个氨基酸,分子量约为48 kD,pI为5.77。序列分析结果显示,GhWRI1蛋白含有2个AP2结构域,该蛋白属于AP2家族;与GFP蛋白的融合表达试验结果显示,在洋葱表皮细胞中,GhWRI1是特异性在细胞核中表达的。Real-time RT-PCR数据显示GhWRI1主要在真叶、根、纤维以及种子中表达,而且其在纤维和种子中的表达量是随着发育时间的推移而不断升高的。同时构建了GhWRI1与LUC共表达的载体,通过检测LUC的活性来反映GhWRI1的表达量,试验数据显示,当GhWRI1与LUC共表达后,LUC的活性提高了约20倍。试验结果都显示GhWRI1是一个很强的转录激活子。 展开更多
关键词 wri1基因 转录因子 AP2结构域 转录激活试验 棉花
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WRI1调控植物油脂合成的研究进展 被引量:6
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作者 金龙飞 周丽霞 +1 位作者 曹红星 杨耀东 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期687-698,共12页
油脂是植物主要的储能物质,也是植物质膜的重要组分,同时还参与植物信号传导、气孔开闭、授粉受精、种子萌发、胁迫响应等多个生物学过程。WRINKLED 1(WRI1)是AP2转录因子家族的成员,在油脂合成过程中起重要调控作用。本文综述了近年来W... 油脂是植物主要的储能物质,也是植物质膜的重要组分,同时还参与植物信号传导、气孔开闭、授粉受精、种子萌发、胁迫响应等多个生物学过程。WRINKLED 1(WRI1)是AP2转录因子家族的成员,在油脂合成过程中起重要调控作用。本文综述了近年来WRI1在植物油脂合成中的研究进展,主要包括(1)WRI1的发现、起源和进化特征;(2)WRI1的基因表达特征、基因结构、蛋白质结构和启动子顺式作用元件;(3)WRI1的转录水平和翻译水平调控机制以及下游的靶基因;(4)对WRI1后续的研究思路和应用前景进行展望。本综述内容以期为深入了解WRI1调控植物油脂合成的分子机制提供参考,也为利用WRI1改良油料作物提供理论基础。 展开更多
关键词 wri1 油脂 合成 调控机制 靶基因
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蓖麻RcWRI1的鉴定及表达分析 被引量:3
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作者 吉夏洁 郝青婷 +2 位作者 刘宝玲 薛金爱 李润植 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第4期229-234,共6页
[目的]蓖麻(Ricinus communis L.)是一种重要的工业油料作物。为了鉴定蓖麻WRI1(WRINKLED1)转录因子,搞清蓖麻种子油脂生物合成调控机制。[方法]利用生物信息学工具全基因组鉴定蓖麻RcWRI1蛋白及基因,分析蓖麻RcWRI1蛋白结构特征和功能... [目的]蓖麻(Ricinus communis L.)是一种重要的工业油料作物。为了鉴定蓖麻WRI1(WRINKLED1)转录因子,搞清蓖麻种子油脂生物合成调控机制。[方法]利用生物信息学工具全基因组鉴定蓖麻RcWRI1蛋白及基因,分析蓖麻RcWRI1蛋白结构特征和功能;应用qPCR检测蓖麻RcWRI1基因表达谱。[结果]鉴定获得2种蓖麻RcWRI1蛋白,即RcWRI1-1(446AA)和RcWRI1-2(443AA),均为蓖麻RcWRI1基因(LOC8283400)编码的产物。与拟南芥AtWRI1相似,RcWRI1-1和RcWRI1-2都具有2个高度保守AP2结构域,属不稳定的亲水蛋白,预测其具有调控脂肪酸代谢等功能。RcWRI1-1和RcWRI1-2在蓖麻花、叶、种子和果皮均表达,RcWRI1-1的表达量明显高于RcWRI1-2,且在种子中表达量最高。[结论]蓖麻RcWRI1基因编码两种RcWRI1蛋白(RcWRI1-1和RcWRI1-2),其中RcWRI1-1是主要表达者,在蓖麻叶、花、种子和果皮油脂合成中起重要调控作用。本研究可为种子油脂生物合成调控机制提供理论基础。 展开更多
关键词 蓖麻 转录因子 wri1 油脂合成调控
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拟南芥WRI1转录因子对酿酒酵母脂肪酸合成的影响 被引量:1
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作者 闵文莉 曹喜涛 +5 位作者 季更生 屠洁 李强 陈欣 张国政 武国华 《江苏科技大学学报(自然科学版)》 CAS 2018年第6期873-877,共5页
转录因子是植物体内一类应答环境胁迫所产生的蛋白,通过激活或抑制转录的方式发挥调控作用. WRI1转录因子是油脂合成的关键因子,主要在脂肪酸合成与糖酵解后期发挥调控作用.为了获得高产脂肪酸的酵母菌株,以拟南芥c DNA为模板,PCR扩增... 转录因子是植物体内一类应答环境胁迫所产生的蛋白,通过激活或抑制转录的方式发挥调控作用. WRI1转录因子是油脂合成的关键因子,主要在脂肪酸合成与糖酵解后期发挥调控作用.为了获得高产脂肪酸的酵母菌株,以拟南芥c DNA为模板,PCR扩增得到编码拟南芥WRI1转录因子的基因,经过Spe I/Bam H I双酶切后连接到表达载体上,得到重组质粒p416-Atwri1.将重组质粒用PEG/Li Ac化学转化法转入酿酒酵母BY4742中,通过营养缺陷型培养基进行筛选,挑取阳性菌落并进行摇瓶发酵,采用GC-MS对脂肪酸进行定性和定量分析.结果表明,Atwri1基因在酵母中的表达改变了脂肪酸的组成及含量,与空质粒酵母相比,重组酵母中长链脂肪酸的总含量增加了44. 8%,为以后酿酒酵母生产脂肪酸实现工业化打下基础. 展开更多
关键词 拟南芥 wri1转录因子 酿酒酵母 脂肪酸
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花生WRI1基因家族的全基因组与表达谱分析 被引量:4
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作者 孙金波 石素华 +3 位作者 杨利 李凤丽 王兴军 赵术珍 《花生学报》 北大核心 2020年第1期9-18,共10页
花生(Arachis hypogaea L.)是世界范围内重要的油料与经济作物之一。转录因子WRINKLED1(WRI1)在植物油脂生物合成途径中起着重要作用。尽管花生基因组序列已经公布,但国内外尚缺乏对花生中WRI1基因家族的全基因组分析。本研究从二倍体... 花生(Arachis hypogaea L.)是世界范围内重要的油料与经济作物之一。转录因子WRINKLED1(WRI1)在植物油脂生物合成途径中起着重要作用。尽管花生基因组序列已经公布,但国内外尚缺乏对花生中WRI1基因家族的全基因组分析。本研究从二倍体花生野生种和四倍体栽培种的参考基因组中鉴定出20个WRI1转录因子,经分析表明它们均为亲核蛋白,位于细胞核内,二级结构主要由无规卷曲和α-螺旋组成,20个WRI1基因的结构中含有5~8个内含子。系统发育分析表明,花生WRI1基因与其他物种的WRI1成员有密切关系。转录组数据表明种子中WRI1表达高于其他组织,q RT-PCR结果进一步表明WRI1表达随种子成熟水平逐渐增加。本文对花生基因组中WRI1全基因组的鉴定和表达分析,为进一步探讨WRI1基因在种子发育过程中的功能提供了依据。 展开更多
关键词 花生 wri1转录因子 生物信息学分析 基因表达
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观赏海棠McWRI1基因克隆与分析 被引量:1
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作者 马依依 赵爽 +3 位作者 张杰 田佶 杨明峰 姚允聪 《北京农学院学报》 2017年第4期21-27,共7页
【目的】WRI1是一个参与调控植物种子油脂合成的转录因子,其与下游靶基因启动子区域特异的DNA序列结合,调控植物种子油脂合成相关基因的表达,但其在植物表面蜡质合成中的功能很少报道。【方法】运用PCR技术克隆McWRI1基因全长的cDNA,实... 【目的】WRI1是一个参与调控植物种子油脂合成的转录因子,其与下游靶基因启动子区域特异的DNA序列结合,调控植物种子油脂合成相关基因的表达,但其在植物表面蜡质合成中的功能很少报道。【方法】运用PCR技术克隆McWRI1基因全长的cDNA,实时荧光定量PCR测定McWRI1在苹果属花红、楸子、槟子以及新疆野苹果中的表达,选择楸子作为代表,测定McWRI1与蜡质合成相关基因,如McWAX,McKCS,McKPHMT,McPKM2,McLACS表达的关系,GC-MS测定果皮蜡质成分。【结果】结果表明,McWRI1基因全长1 221bp,共编码406个氨基酸;氨基酸序列比对、系统进化树分析表明McWRI1具有典型的AP2家族结构域;观赏海棠McWRI1与苹果MdWRI1的氨基酸序列一致性较高。在供试的4个苹果种果实中,花红的McWRI1表达量最高,新疆野苹果最低,槟子与楸子居中。以楸子为试材,设置低温处理组,可见低温处理抑制McWRI1的表达,同时下调McWAX,McKCS,McKPHMT和McLACS,并且导致二十三烷、二十九烷、亚油酸、油酸以及十六烷酸-十八烷酯的含量有明显的上升。分析认为,McWRI1可能直接和间接调控超长链脂肪酸的合成、蜡质的脂肪酸的合成以及CoA供给参与观赏海棠果实表面蜡质的合成。 展开更多
关键词 观赏海棠 转录因子 wri1
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紫苏WRI1转录因子的鉴定、表达分析及低温胁迫响应
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作者 黄旭升 周雅莉 +4 位作者 史先飞 高宇 董书言 李润植 王计平 《激光生物学报》 CAS 2022年第5期450-460,共11页
紫苏[Perilla frutescens(L.)Britt.]是一种新型油料经济作物。转录因子WRI1(WRINKLED1)参与调控植物油脂合成积累。为探究紫苏PfWRI1在油脂合成积累及胁迫响应过程中的分子调控机制,通过分子克隆技术分离得到PfWRI1的完整编码区,利用... 紫苏[Perilla frutescens(L.)Britt.]是一种新型油料经济作物。转录因子WRI1(WRINKLED1)参与调控植物油脂合成积累。为探究紫苏PfWRI1在油脂合成积累及胁迫响应过程中的分子调控机制,通过分子克隆技术分离得到PfWRI1的完整编码区,利用生物信息学分析工具和半定量PCR(sqRT-PCR)及实时荧光定量PCR(qRTPCR)技术对序列特征及表达水平等进行分析。结果显示:PfWRI1转录因子属于AP2(APETALA2)超家族,包含2个AP2保守结构域;亚细胞定位预测分析显示,PfWRI1转录因子定位于细胞核;无规则卷曲和α-螺旋是PfWRI1蛋白二级结构中的主要结构元件;系统进化分析表明,PfWRI1与芝麻和油梨WRI1的亲缘关系最近;互作蛋白预测表明,PfWRI1蛋白可能与LEC1(LEAFYCOTYLEDON1)、FATA(fatty acyl-acyl carrier protien thioesterase)、FATB和PDAT(phospholipids:diacylglycerol acyltransferase)等存在互作关系;PfWRI1在紫苏的不同组织中均有表达,随种子成熟其表达量呈现先升高后降低的模式,且在发育中后期(开花后30 d)种子的表达量最高,表明PfWRI1可能在紫苏种子油脂合成中具有调控作用;紫苏幼苗经过低温胁迫后,PfWRI1的表达量在胁迫12 h后显著上调,说明PfWRI1可能参与紫苏幼苗冷胁迫响应。这些结果为进一步研究PfWRI1在紫苏油脂合成积累和胁迫响应中的分子机制及功能奠定了基础,为紫苏和其他油料作物的遗传改良和新品种选育提供了理论依据。 展开更多
关键词 紫苏 wri1转录因子 序列特征分析 表达分析 低温胁迫响应
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<i>Wrinkled</i>1 (WRI1) Homologs, AP2-Type Transcription Factors Involving Master Regulation of Seed Storage Oil Synthesis in Castor Bean (<i>Ricinus communis</i>L.) 被引量:5
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作者 Daichi Tajima Ayami Kaneko +6 位作者 Masatsugu Sakamoto Yumena Ito Nong Thi Hue Masayuki Miyazaki Yushi Ishibashi Takashi Yuasa Mari Iwaya-Inoue 《American Journal of Plant Sciences》 2013年第2期333-339,共7页
Among APETALA2 (AP2)-type plant specific transcription factor family, WRINKLED1 (WRI1), has appeared to be a master gene transcriptionally regulating a set of carbon metabolism- and fatty acid synthesis (FAS)-related ... Among APETALA2 (AP2)-type plant specific transcription factor family, WRINKLED1 (WRI1), has appeared to be a master gene transcriptionally regulating a set of carbon metabolism- and fatty acid synthesis (FAS)-related genes responsible for seed specific triacylglycerols (TAGs) storage in oil plants. B3 type transcription factors, such as ABI3 and FUS3, are known to be involved in seed development, such as seed storage protein synthesis and maturation. Based on the recent whole genome sequence data of castor bean (Ricinus communis L.), putative WRI1 homologs (RcWRI1, RcWRI2) specifically expressed in castor bean seed have been identified by comparing organ specific expression profiles among seed development-related transcription factors, seed storage specific genes (Ricin, RcOleosin) and a set of FAS genes including genes for sucrose synthase (RcSUS2), biotin carboxyl carrier protein (a subunit of acetyl-CoA carboxylase, RcBCCP2) and ketoacyl-acyl carrier protein synthase (RcKAS1). Immunoreactive signals with WRI1, FUS3 and ABI5-related polypeptides were also detected in seed specifically, consistent with the expression profiles of seed development-related genes. The WRI1 binding consensus sites, [CnTnG](n)(7)[CG], designated as the AW-box, were found at the promoter region of RcBCCP2 and RcKAS1. Thus, RcWRI1 possibly play a pivotal role in seed specific TAGs storage during seed development by directly activating FAS -related genes. 展开更多
关键词 AP2 CASTOR Bean Fatty Acid OIL Seed RICINUS communis L. Transcription Factor wri1
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沙棘WRI1转录因子基因的生物信息学分析 被引量:8
13
作者 马倩 李景滨 +1 位作者 阮成江 李荣荣 《湖北农业科学》 2016年第22期5972-5975,5981,共5页
以构建的沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)不同组织转录组数据库为基础,分离得到1个沙棘WRI1转录因子编码基因,命名为Hr WRI1,利用生物信息学方法对其基因结构、理化性质、保守域、信号肽、亚细胞定位、磷酸化位点和高级结构等进行了... 以构建的沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)不同组织转录组数据库为基础,分离得到1个沙棘WRI1转录因子编码基因,命名为Hr WRI1,利用生物信息学方法对其基因结构、理化性质、保守域、信号肽、亚细胞定位、磷酸化位点和高级结构等进行了预测和较为全面的分析。结果表明,该成员含有1 206 bp的完整开放阅读框,编码401个氨基酸组成的不稳定亲水蛋白,无信号肽和跨膜结构域,存在多个磷酸化位点,定位于细胞核中,高级结构以无规则卷曲为主。与不同植物中已报道的同源WRI1转录因子进行多重序列比对后,发现它们在核酸与氨基酸水平均高度同源,并且具有相同的结构域。 展开更多
关键词 沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.) wri1基因 生物信息学
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大豆转录因子WRI1基因的生物信息学分析 被引量:3
14
作者 王巍杰 吴丹 王涛 《湖北农业科学》 2016年第13期3482-3485,3489,共5页
从NCBI查找大豆(Glycine max)基因组中转录因子WRI1基因,通过同源比对在大豆基因组中确定了31个同源基因。利用在线分析工具和生物信息学方法对31个蛋白质进行了初步分析,发现蛋白质的一级结构存在较大差异,二级结构以无规则卷曲和α-... 从NCBI查找大豆(Glycine max)基因组中转录因子WRI1基因,通过同源比对在大豆基因组中确定了31个同源基因。利用在线分析工具和生物信息学方法对31个蛋白质进行了初步分析,发现蛋白质的一级结构存在较大差异,二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主要构成元件,亚细胞均定位于细胞核。保守结构域分析发现,31个蛋白质的高保守区域由大约200个氨基酸残基组成;正选择位点分析发现Glyma08g24420.1和Glyma15g34770.1两个蛋白质序列的第381、382、383个氨基酸位点受到了正选择,进行了适应性进化。 展开更多
关键词 大豆(Glycine max) wri1 生物信息 正选择位点
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甘蓝型油菜WRI1基因cDNA克隆与种子特异性表达载体的构建
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作者 施春霖 刘聪 +3 位作者 肖旦望 邬克彬 陈社员 熊兴华 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期120-125,共6页
WRI1基因所编码的转录因子参与糖酵解和脂肪酸合成,在种子油的积累过程中起着关键作用。在种子中超表达WRI1基因,对提高油菜种子含油量具有重要意义。本研究利用RT-PCR技术,从甘蓝型油菜湘油15号cDNA中分离克隆了5个WRI1基因全长cDNA序... WRI1基因所编码的转录因子参与糖酵解和脂肪酸合成,在种子油的积累过程中起着关键作用。在种子中超表达WRI1基因,对提高油菜种子含油量具有重要意义。本研究利用RT-PCR技术,从甘蓝型油菜湘油15号cDNA中分离克隆了5个WRI1基因全长cDNA序列,选取2种存在明显差异(碱基缺失)的cDNA序列构建植物种子特异性表达载体。为后续转基因研究这种差异是否会造成WRI1基因在提高含油量作用上的差异作准备。通过双酶切和连接反应,分别将WRI1基因和napin启动子基因插入到pBI121载体的GUSA基因和CaMV35启动子基因位置。酶切及PCR检测结果显示,napin启动子和WRI1已插入相应位置,完成2种载体种子特异性表达WRI1基因重组载体pBI121+napin+WRI1的构建,命名为pBI121NW2、pBI121NW4。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 懈朋 克隆 种子特异性表达载体
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油棕油脂合成调控因子WRI1s的挖掘鉴定及表达分析
16
作者 周丽霞 杨蒙迪 +2 位作者 张安妮 曹红星 杨耀东 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第15期4905-4911,共7页
WRI1基因在油棕油脂合成过程中起着重要的调控作用,本研究旨在挖掘油棕WRI1 (EgWRI1)基因,并对其理化性质及组织表达特性进行分析。本研究利用生物信息学方法鉴定获得3个EgWRI1基因,均含有6个内含子,通过染色体定位分析发现EgWRI1-1和Eg... WRI1基因在油棕油脂合成过程中起着重要的调控作用,本研究旨在挖掘油棕WRI1 (EgWRI1)基因,并对其理化性质及组织表达特性进行分析。本研究利用生物信息学方法鉴定获得3个EgWRI1基因,均含有6个内含子,通过染色体定位分析发现EgWRI1-1和EgWRI1-2位于油棕的第5条染色体上,EgWRI1-3位于油棕第10条染色体上。3个基因均含有AP2保守结构域,编码氨基酸数目分别为337、338、367 aa,EgWRI1-1及EgWRI1-3蛋白的等电点均小于7,分别为6.51及6.29,EgWRI1-2蛋白的等电点大于7 (8.31),3个EgWRI1蛋白均为不稳定亲水蛋白,无信号肽,含有多个磷酸化位点,均定位在细胞核中,EgWRI1-1和EgWRI1-3以α-螺旋为主,EgWRI1-2以无规卷曲为主。聚类分析表明在遗传系数为0.625处,3个EgWRI1和ATWRI1同处一个分支,在0.680处,EgWRI1-1和EgWRI1-2的进化关系最近,且与EgWRI1-3聚为一类。定量PCR分析得知EgWRI1-1在中果皮80 d时的表达量最大,EgWRI1-2在果仁95 d中的表达量最大,在其他组织中表达很低或不表达;EgWRI1-3在各组织中的表达量均较低,该结果为深入研究EgWRI1-1和EgWRI1-2在油棕中果皮和果仁脂肪酸合成过程中的调控机理提供参考。 展开更多
关键词 油棕 wri1s基因 生物信息学 表达分析
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转录因子WRI1在主要作物中的研究进展 被引量:7
17
作者 丁霄 杨淑巧 +7 位作者 许琦 杜春芳 吴慎杰 罗晓丽 马燕斌 张安红 孙璇 李朋波 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期697-701,共5页
在高等植物生长发育及对环境变化的应答中,转录因子通过调控启动子的方式来发挥调节作用。转录因子WRI1的靶基因主要参与脂肪酸合成和糖酵解,因而在植物脂肪酸合成和积累中起着重要的作用。本文阐述了近年来植物WRI1转录因子研究进展,... 在高等植物生长发育及对环境变化的应答中,转录因子通过调控启动子的方式来发挥调节作用。转录因子WRI1的靶基因主要参与脂肪酸合成和糖酵解,因而在植物脂肪酸合成和积累中起着重要的作用。本文阐述了近年来植物WRI1转录因子研究进展,主要包括WRI1在糖酵解和脂肪酸合成信号转导途径中的地位以及已克隆的WRI1基因时空表达特点和编码蛋白的结构特点。本文还就转录因子WRI1提高作物含油量的应用前景在棉花(Gossypium hirsutum L.)中的研究提出展望。 展开更多
关键词 转录因子 wri1 脂肪酸代谢
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植物WRI1基因生物信息学分析 被引量:5
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作者 杨先友 黄春颖 +2 位作者 吴建峰 黄有军 张启香 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1140-1151,共12页
植物转录因子WRI1特异性正向调控糖酵解和脂肪酸合成过程,是油料作物遗传育种工作的重要靶基因。本研究通过系统发育分析、基因结构分析和多序列比对,获得如下结论:(1)WRI1基因属于ANT亚族,单独聚为一支,称之为WRI1(ANT-Ⅱ)亚族。WRI1(A... 植物转录因子WRI1特异性正向调控糖酵解和脂肪酸合成过程,是油料作物遗传育种工作的重要靶基因。本研究通过系统发育分析、基因结构分析和多序列比对,获得如下结论:(1)WRI1基因属于ANT亚族,单独聚为一支,称之为WRI1(ANT-Ⅱ)亚族。WRI1(ANT-Ⅱ)亚族基因按照植物的种属亲缘关系进行聚类;(2)WRI1(ANT-Ⅱ)亚族基因具有相似的内含子-外显子结构,且相比于AP2亚族基因,与ANT-Ⅰ亚族基因更相近;(3)WRI1(ANT-Ⅱ)亚族基因AP2保守结构域内的5个关键氨基酸残基可能与该亚族转录因子的DNA结合特异性密切相关。 展开更多
关键词 wri1 系统发育分析 基因结构 关键氨基酸残基
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沙棘hrh-miRn458靶向转录因子WRI1调控油脂合成
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作者 于淼 阮成江 +3 位作者 丁健 李景滨 卢顺光 温秀凤 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期635-648,共14页
转录因子WRI1(WRINKLED 1)在油脂合成过程中发挥重要调控作用,其转录和翻译水平调控机理以及下游的靶基因现已基本明确,但尚未见其转录后调控的报道。为探讨沙棘(Hippophae rhamnoides)hrh-miRn458与转录因子WRI1之间的靶向关系,并阐明... 转录因子WRI1(WRINKLED 1)在油脂合成过程中发挥重要调控作用,其转录和翻译水平调控机理以及下游的靶基因现已基本明确,但尚未见其转录后调控的报道。为探讨沙棘(Hippophae rhamnoides)hrh-miRn458与转录因子WRI1之间的靶向关系,并阐明其在果肉和种子发育过程中的表达模式,通过生物信息学方法预测hrh-miRn458成熟体序列及其与候选靶基因WRI1的结合位点,采用双荧光素酶报告基因检测和RNApulldown技术相结合的方法验证hrh-miRn458与WRI1基因之间的靶向关系,并应用qRT-PCR方法分析hrh-miRn458与WRI1在沙棘不同发育期果肉和种子油脂合成过程中的表达变化。结果表明,生物信息学预测WRI1基因的CDS区第309–327位与hrh-miRn458成熟体序列的15个碱基互补;荧光检测显示pmirGLO-WRI1-WT+hrh-miRn458 mimics显著抑制荧光素酶活性(P<0.001);RNA pull down实验证实hrh-miRn458与WRI1存在互作关系;不同发育期果肉和种子中hrh-miRn458的表达量总体呈先下降后上升趋势,其靶基因WRI1的表达量则呈先上升后降低趋势;同一时期,果肉中hrh-miRn458的表达量明显低于种子,而果肉中的WRI1表达量则明显高于种子。综上,沙棘hrh-miRn458靶向转录因子WRI1,且二者在果肉和种子油脂合成过程中存在负调控关系。研究结果为深入理解沙棘种子油脂合成机制及培育高油品种提供了参考依据。 展开更多
关键词 沙棘 油脂合成 hrh-miRn458 转录因子wri1 QRT-PCR
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The Pumilio RNA-binding protein APUM24 regulates seed maturation by fine-tuning the BPM-WRI1 module in Arabidopsis 被引量:2
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作者 Ruihua Huang Mengling Liu +11 位作者 Guanping Gong Pingzhi Wu Barunava Patra Ling Yuan Hongting Qin Xiaoxu Wang Guohe Wang Huimei Liao Lu Gao Chengwei Yang Hongqing Li Shengchun Zhang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2021年第7期1240-1259,共20页
Pumilio RNAbindingproteinsparticipateinmes-senger RNA(mRNA)degradation and t ranslational repression,but their roles in plant development are largely unclear.Here,we show that Arabidopsis PUMILIO PROTEIN24(APUM24),an ... Pumilio RNAbindingproteinsparticipateinmes-senger RNA(mRNA)degradation and t ranslational repression,but their roles in plant development are largely unclear.Here,we show that Arabidopsis PUMILIO PROTEIN24(APUM24),an atypical Pumiliohomology domaincontaining protein,plays an im-portant part in regulating seed maturation,a major stage of plant development.APUM24 is strongly expressed in maturing seeds.Reducing APUM24 expression resulted in abnormal seed maturation,wrinkled seeds,and lower seed oil contents,and APUM24 knockdown resulted in lower levels of WRINKLED 1(WRI1),a key transcription factor con-trolling seed oil accumulation,and lower expression of WRI1 target genes.APUM24 reduces the mRNA stability of BTB/POZMATH(BPM)family genes,thus decreasing BPM protein levels.BPM is responsible for the 26S proteasomemediated degradation of WRI1 and has important functions in plant growth and development.The 3′untranslated regions of BPM family genes contain putative Pumilio response elements(PREs),which are bound by APUM24.Re-duced BPM or increased WRI1 expression rescued the decient seed maturation of apum242 knock-down mutants,and APUM24 overexpression re-sulted in increased seed size and weight.Therefore,APUM24 is crucial to seed maturation through its action as a positive regulatornetuning the BPMWRI1 module,making APUM24 apromising target for breeding strategies to increase crop yields. 展开更多
关键词 APUM24 ARABIDOPSIS BPM RNAbinding protein seed maturation wri1
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