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WTK1细胞tk基因突变的多重PCR分析 被引量：2
1
作者 王怡净 帅培强 张立实 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期790-793,共4页
目的探讨WTK1细胞tk位点自发和诱发突变体的突变谱和突变热点。方法用甲磺酸甲酯、丝裂霉素C和叠氮钠染毒WTK1细胞后,筛选出tk基因突变集落,用多重PCR方法对WTK1细胞tk基因突变谱进行分析。结果三种受试物均能诱导WTK1细胞tk位点突变频... 目的探讨WTK1细胞tk位点自发和诱发突变体的突变谱和突变热点。方法用甲磺酸甲酯、丝裂霉素C和叠氮钠染毒WTK1细胞后,筛选出tk基因突变集落,用多重PCR方法对WTK1细胞tk基因突变谱进行分析。结果三种受试物均能诱导WTK1细胞tk位点突变频率增高,且存在剂量-反应关系;所分析的突变体中绝大部分缺失tk基因外显子4和5-7。结论三种受试物对WTK1细胞均有致突变作用;tk位点的突变存在明显的突变热点。 展开更多
关键词 多重PCR wtk1细胞 TK基因突变
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甲基磺酸甲酯诱发WTK1细胞tk位点突变试验方法的建立 被引量：3
2
作者 张建清 张立实 王瑞淑 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2003年第2期116-119,共4页
目的 :建立WTK1细胞tk基因突变试验方法 ,为毒理学评价和机制的研究提供实验依据。 方法 :用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)处理WTK1细胞 ,检测tk位点突变率和细胞 p53基因蛋白表达水平的改变。 结果 :MMS可诱导WTK1细胞tk位点突变率增加 ... 目的 :建立WTK1细胞tk基因突变试验方法 ,为毒理学评价和机制的研究提供实验依据。 方法 :用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)处理WTK1细胞 ,检测tk位点突变率和细胞 p53基因蛋白表达水平的改变。 结果 :MMS可诱导WTK1细胞tk位点突变率增加 ,MMS的处理剂量达到10mg·L-1 时 ,tk位点突变率为985.2/106 个细胞 ,并有剂量反应关系。诱发突变率约是自发突变率3～10倍。在tk位点诱发了两种不同表型的突变集落 ,即正常生长突变体(tk_NGmutant)和慢生长突变体(tk_SGmutant) ,但以慢生长突变体为主。MMS处理后 ,WTK1细胞P53蛋白的表达水平增高。 结论 :MMS可以诱发WTK1细胞tk位点的突变率增加 ,MMS处理细胞后 ,P53蛋白的表达水平增高 ,说明WTK1细胞的P53蛋白的功能尚未丧失。该方法的建立 ,为进一步开展tk基因突变试验 。 展开更多
关键词 wtk1细胞 TK基因 突变 甲基磺酸甲酯
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L5178Y和WTK1细胞微核试验在诱变测试中的应用 被引量：2
3
作者 吕晓华 张立实 王瑞淑 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 1999年第3期140-143,共4页
系统比较了一组标准诱变剂诱导Ｌ５１７８Ｙ和ＷＴＫ１细胞的微核反应，结果表明，这两种细胞微核试验方法简便灵敏，有推广价值。两种细胞对受试物的反应各有特点，如同时应用于一个短测系统，可提高筛检诱变物的准确性。
关键词 微核试验 L5178Y细胞 wtk1细胞 诱变剂
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WTK1细胞在tk位点突变和DNA损伤与修复中的应用
4
作者 张建清 张立实 王瑞淑 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2004年第1期1-4,共4页
背景与目的:为WTK1细胞在遗传毒理学可同时应用于基因突变和DNA损伤的研究提供实验依据。材料与方法:分别用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)和过氧化氢(H2O2)处理WTK1细胞,采用tk基因突变试验和单细胞凝胶电泳技术(single Cell GelElectrop... 背景与目的:为WTK1细胞在遗传毒理学可同时应用于基因突变和DNA损伤的研究提供实验依据。材料与方法:分别用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)和过氧化氢(H2O2)处理WTK1细胞,采用tk基因突变试验和单细胞凝胶电泳技术(single Cell GelElectrophoresis,SCGE)对细胞的tk位点突变和过氧化氢诱发的DNA损伤情况进行检测。结果:甲基磺酸甲酯可诱发WTK1细胞tk位点的突变,以诱发染色体畸变为主。过氧化氢诱发了WTK1细胞DNA的损伤,并有剂量反应关系。随着修复孵育时间的延长,彗星细胞尾长和彗星细胞出现率明显下降,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。结论:WTK1细胞可同时应用于tk基因突变和DNA损伤与修复的研究。采用该细胞株可对化合物进行基因突变和DNA损伤进行研究评价。 展开更多
关键词 wtk1细胞 tk位点 突变 DNA损伤 DNA修复
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L5178Y和W TK1细胞微核试验在抗诱变测试中的应用 被引量：2
5
作者 吕晓华 张立实 王瑞淑 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1999年第3期283-285,共3页
为了研究 Ｌ５１７８ Ｙ 和 Ｗ Ｔ Ｋ１ 细胞应用于抗诱变测试系统的可靠性和有效性，按维生素 Ｃ（ Ｖｃ）和叶绿酸铜钠（ Ｃｈｌ）与丝裂霉素 Ｃ（ Ｍ Ｍ Ｃ）的加入顺序，分为同时处理、预处理和后处理三种处理方式，观察 Ｖｃ 和 ... 为了研究 Ｌ５１７８ Ｙ 和 Ｗ Ｔ Ｋ１ 细胞应用于抗诱变测试系统的可靠性和有效性，按维生素 Ｃ（ Ｖｃ）和叶绿酸铜钠（ Ｃｈｌ）与丝裂霉素 Ｃ（ Ｍ Ｍ Ｃ）的加入顺序，分为同时处理、预处理和后处理三种处理方式，观察 Ｖｃ 和 Ｃｈｌ对 Ｍ Ｍ Ｃ诱导两种细胞微核的抑制作用。结果表明：① Ｖｃ 和 Ｃｈｌ本身无诱导两种细胞微核的作用；② Ｖｃ 与 Ｍ Ｍ Ｃ同时处理和预处理，能显著降低 Ｍ Ｍ Ｃ诱导的两种细胞微核率；③０．１２ｍ ｇ／ｍ ｌ Ｃｈｌ与 Ｍ Ｍ Ｃ同时处理和预处理，能显著降低 Ｍ Ｍ Ｃ诱导的两种细胞微核率，但０．０６ｍ ｇ／ｍ ｌ同时处理和预处理仅能显著降低 Ｍ Ｍ Ｃ诱导的 Ｗ Ｔ Ｋ１ 细胞微核率。后处理方式对微核反应无抑制作用。该研究结果与 Ｖｃ 和 Ｃｈｌ在其它抗诱变试验中的结果基本一致，表明 Ｌ５１７８ Ｙ 和 Ｗ Ｔ Ｋ１ 细胞微核试验在抗诱变作用检测方面有较好的应用价值。 展开更多
关键词 L5178Y细胞 wtk1细胞 微核试验 膳食 抗诱变物质
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