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松果菊苷对动脉粥样硬化血管钙化小鼠Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响
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作者 袁媛 贾哲睿 +5 位作者 王晨皓 刘涛 赵军 何丽娟 陶宁 由淑萍 《浙江医学》 CAS 2024年第6期588-593,598,共7页
目的探究松果菊苷对动脉粥样硬化血管钙化小鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将48只7周龄雄性ApoE-/-小鼠采用随机数字表法分为6组,每组8只:分别为模型组,松果菊苷(ECH)12.5、25、50 mg/kg组,辛伐他汀片(Sta)组和对照组,依据不同... 目的探究松果菊苷对动脉粥样硬化血管钙化小鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法将48只7周龄雄性ApoE-/-小鼠采用随机数字表法分为6组,每组8只:分别为模型组,松果菊苷(ECH)12.5、25、50 mg/kg组,辛伐他汀片(Sta)组和对照组,依据不同分组建模及给药。观察小鼠主动脉组织形态学变化,检测小鼠血清中生化指标水平,采用实时荧光定量PCR法检测小鼠主动脉组织β-连环蛋白(β-catenin)mRNA的表达水平,采用Western Blot法检测小鼠主动脉组织β-catenin、Wnt3a、LDL受体相关蛋白5(LRP5)及骨形态发生蛋白2(BMP-2)蛋白表达水平,采用免疫组化法检测小鼠主动脉组织LRP5蛋白表达水平。结果ECH 25、50 mg/kg组及Sta组小鼠主动脉中膜较模型组明显变薄,弹力纤维排列整齐,斑块明显缩小。ECH 25、50 mg/kg组和Sta组TG、TC、LDL-C水平均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。ECH 12.5、25、50 mg/kg组和Sta组HDL-C水平均高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组小鼠主动脉β-cateninmRNA表达水平高于对照组,ECH 12.5、25、50 mg/kg组及Sta组β-cateninmRNA表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组小鼠模型组小鼠主动脉β-catenin、Wnt3a、LRP5及BMP-2蛋白表达水平高于对照组,ECH 25、50 mg/kg组及Sta组小鼠主动脉β-catenin、Wnt3a、LRP5及BMP-2蛋白表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组小鼠主动脉LRP5蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ECH 12.5、25、50 mg/kg组及Sta组LRP5蛋白表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论ECH可以有效改善小鼠动脉粥样硬化血管钙化的发生与发展,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路相关。 展开更多
关键词 松果菊苷 wnt/β-连环蛋白信号通路 APOE-/-小鼠 动脉粥样硬化 血管钙化
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Wnt/β-连环蛋白信号通路在部分器官缺血再灌注损伤中的研究进展
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作者 徐敏 张希洲 谢芬高 《中国现代医生》 2024年第10期106-109,共4页
缺血再灌注损伤是发生在许多器官和疾病中的病理过程,主要包括两个阶段,一是缺血期缺氧诱导的细胞损伤,二是血流恢复后所引起的一系列级联反应。缺血再灌注损伤可加重细胞和组织损伤。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在细胞增殖、... 缺血再灌注损伤是发生在许多器官和疾病中的病理过程,主要包括两个阶段,一是缺血期缺氧诱导的细胞损伤,二是血流恢复后所引起的一系列级联反应。缺血再灌注损伤可加重细胞和组织损伤。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路在细胞增殖、分化、凋亡过程中起重要作用,是一个高度保守的信号级联通路。越来越多的研究发现,激活Wnt/β-catenin信号通路可减轻缺血再灌注损伤。本文就Wnt/β-catenin信号通路在部分器官缺血再灌注损伤中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 wnt/β-连环蛋白信号通路 器官 缺血再灌注损伤
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基于Wnt/β-连环蛋白信号通路和炎症反应探讨通络益肾温阳方对糖尿病肾病大鼠的干预机制
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作者 王月 梅慧 《广西医学》 CAS 2023年第6期666-672,共7页
目的基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路及炎症反应探讨通络益肾温阳方对糖尿病肾病大鼠的干预机制。方法(1)将60只大鼠随机分为对照组、模型组和观察组,每组20只。模型组和观察组采用单次腹腔注射大剂量链脲佐菌素的方法构建糖... 目的基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路及炎症反应探讨通络益肾温阳方对糖尿病肾病大鼠的干预机制。方法(1)将60只大鼠随机分为对照组、模型组和观察组,每组20只。模型组和观察组采用单次腹腔注射大剂量链脲佐菌素的方法构建糖尿病肾病大鼠模型。建模成功后,观察组给予通络益肾温阳方灌胃处理,模型组和对照组给予生理盐水灌胃处理。干预4周后,测量3组大鼠体重及肾重,检测血清尿素氮、血清肌酐、空腹血糖、24 h尿蛋白、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血清转化生长因子β1(TGF-β1)水平,以及肾组织Wnt4、β-catenin的mRNA和蛋白表达水平。(2)通过中药系统药理学数据库与分析平台检索通络益肾温阳方主要中药(山茱萸、山药、炙黄芪、熟地黄)的活性成分,根据口服生物利用度及药物相似性筛选出主要活性成分。选取β-catenin作为受体,选取山茱萸、山药、炙黄芪、熟地黄主要活性成分中口服生物利用度最大的成分(远华蟾蜍精、薯蓣皂苷元、异黄烷酮、豆甾醇)作为配体,运用PyMOL、AutoDock Vina等软件进行分子对接,测定结合能。结果(1)对照组、观察组和模型组大鼠体重依次降低,肾重及血清尿素氮、血清肌酐、空腹血糖、24 h尿蛋白、血清TNF-α、血清TGF-β1水平依次升高,肾组织Wnt4、β-catenin mRNA和蛋白的表达水平也依次升高(均P<0.05)。(2)通络益肾温阳方中,山茱萸的主要活性成分有20个、山药的主要活性成分有16个、炙黄芪的主要活性成分有15个、熟地黄的主要活性成分有2个。分子对接分析结果显示,远华蟾蜍精、异黄烷酮、豆甾醇、薯蓣皂苷元与β-catenin的结合能分别为-5.28、-6.40、-5.67、-5.33。结论通络益肾温阳方可有效改善糖尿病肾病大鼠的肾功能,其可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路及炎症反应,从而减轻肾损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 通络益肾温阳方 wnt/β-连环蛋白信号通路 炎症反应 大鼠
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透骨消痛颗粒对关节软骨细胞wnt/β-连环蛋白信号通路的调控 被引量:8
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作者 刘伯龄 邹吉林 +3 位作者 梁珪清 刘献祥 李西海 吴广文 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第46期8574-8578,共5页
背景:由巴戟天、杭白芍、肿节风和川芎等组成的透骨消痛颗粒能有效延缓关节宏观形态、软骨基质及软骨细胞退变。目的:观察透骨消痛颗粒对软骨细胞wnt/β-连环蛋白信号通路中Wnt4、糖原合成酶3β及β-连环蛋白的影响。方法:将SD大鼠关节... 背景:由巴戟天、杭白芍、肿节风和川芎等组成的透骨消痛颗粒能有效延缓关节宏观形态、软骨基质及软骨细胞退变。目的:观察透骨消痛颗粒对软骨细胞wnt/β-连环蛋白信号通路中Wnt4、糖原合成酶3β及β-连环蛋白的影响。方法:将SD大鼠关节软骨细胞分离培养成功后,人白细胞介素1β诱导软骨细胞退变,取第2代退变软骨细胞,随机分为对照组和透骨消痛颗粒组,后者加入透骨消痛颗粒醇提物,分别培养4,8d后,采用RT-PCR检测2组Wnt4、糖原合成酶3β、β-连环蛋白mRNA表达,采用蛋白印迹法检测Wnt4、糖原合成酶3β及β-连环蛋白表达。结果与结论:采用人白细胞介素1β可诱导软骨细胞退变,软骨细胞退变早期均有Wnt4、糖原合成酶3β及β-连环蛋白表达,但随着时间推移Wnt4、β-连环蛋白表达下降,而糖原合成酶3β表达增高,采用透骨消痛颗粒醇提物干预后均可逆转上述现象。说明透骨消痛颗粒醇提物能诱导软骨细胞转录合成β-连环蛋白和Wnt4蛋白,并抑制糖原合成酶3β表达。 展开更多
关键词 透骨消痛颗粒 软骨细胞 wnt/β-连环蛋白信号通路 白细胞介素1Β 中医药 组织构建
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经典Wnt/β-连环蛋白信号通路在膀胱癌发生与发展中的作用研究进展 被引量:8
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作者 何小龙 朱海琴 高漓 《广西医学》 CAS 2016年第6期838-841,共4页
膀胱癌是全世界九大最常见的恶性肿瘤之一,具有多灶性、易复发性和较高死亡率的生物学特征。经典Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号参与调控肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭和凋亡。现就经典Wnt/β-catenin信号通路在膀胱癌发生、发展中的作... 膀胱癌是全世界九大最常见的恶性肿瘤之一,具有多灶性、易复发性和较高死亡率的生物学特征。经典Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号参与调控肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭和凋亡。现就经典Wnt/β-catenin信号通路在膀胱癌发生、发展中的作用进行综述。 展开更多
关键词 膀胱癌 wnt/β-连环蛋白信号通路 发生 浸润 转移 综述
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miR-200c通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路诱导膀胱癌细胞阿霉素耐药 被引量:2
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作者 刘雷 李轶枭 +1 位作者 万波 曾青 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第5期510-516,共7页
目的:探讨miR-200c表达与膀胱癌细胞阿霉素(DOX)耐药的关系。方法:过表达或抑制miR-200c表达后,检测DOX对膀胱癌细胞(RT4、RT112、T24和TCCSUP)生长抑制作用的变化。Western blot检测miR-200c对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响,检测Wnt/... 目的:探讨miR-200c表达与膀胱癌细胞阿霉素(DOX)耐药的关系。方法:过表达或抑制miR-200c表达后,检测DOX对膀胱癌细胞(RT4、RT112、T24和TCCSUP)生长抑制作用的变化。Western blot检测miR-200c对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响,检测Wnt/β-连环蛋白信号激活剂Wnt3a干预对miR-200c诱导膀胱癌DOX耐药作用的影响。结果:抗miR-200c转染后,T24和RT4细胞DOX的耐药性显著下降。DOX干预后,与对照组细胞相比,抗miR-200c转染组膀胱癌细胞凋亡和S期积累明显增加。此外,抗miR-200c转染组膀胱癌细胞中Dkk1,Kremen2和s FRP2等Wnt/β-连环蛋白信号的负调控蛋白表达明显升高,Wnt/β-连环蛋白信号通路活性明显下降。Wnt3a干预能够拮抗抗miR-200c转染的膀胱癌细胞生长抑制作用。结论:miR-200c表达与膀胱癌细胞DOX耐药密切相关,且Wnt/β-连环蛋白信号通路激活介导了miR-200c诱导的膀胱癌细胞DOX耐药性。 展开更多
关键词 膀胱癌 阿霉素 微小核糖核酸 MIR-200C wnt/β-连环蛋白信号通路
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Wnt/β-连环蛋白信号通路与炎症性肠病关系的研究进展 被引量:1
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作者 陈苗 董雪 +2 位作者 张静 王华 乔成栋 《山东医药》 CAS 2022年第28期101-104,共4页
炎症性肠病是肠道的慢性非特异性炎症性疾病,其根本病因及发病机制尚不明确,目前认为遗传、环境、免疫因素间复杂的相互作用可能是炎症性肠病发病的主要原因。Wnt/β-连环蛋白信号通路能调节肠道干细胞的增殖和分化进程,维持肠上皮细胞... 炎症性肠病是肠道的慢性非特异性炎症性疾病,其根本病因及发病机制尚不明确,目前认为遗传、环境、免疫因素间复杂的相互作用可能是炎症性肠病发病的主要原因。Wnt/β-连环蛋白信号通路能调节肠道干细胞的增殖和分化进程,维持肠上皮细胞的有序结构和肠道内稳态,其功能紊乱与炎症性肠病密切相关。 展开更多
关键词 炎症性肠病 wnt/β-连环蛋白信号通路 克罗恩病 溃疡性结肠炎
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与Wnt/β-连环蛋白信号通路相关的长链非编码RNAs的研究进展 被引量:1
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作者 罗晶 袁杰 《心血管病学进展》 CAS 2018年第3期306-311,共6页
Wnt/β-连环蛋白信号通路调节体内多种生理、病理程序,其表观遗传和转录水平的调控异常会导致心血管系统疾病以及肿瘤等的发生。长链非编码RNA能从表观遗传、转录及转录后等多个水平调节与心脏发育、心血管系统疾病及多种肿瘤相关的基... Wnt/β-连环蛋白信号通路调节体内多种生理、病理程序,其表观遗传和转录水平的调控异常会导致心血管系统疾病以及肿瘤等的发生。长链非编码RNA能从表观遗传、转录及转录后等多个水平调节与心脏发育、心血管系统疾病及多种肿瘤相关的基因及信号通路。同时研究证实一些长链非编码RNA能与Wnt/β-连环蛋白信号通路形成调节网络参与调控心血管系统疾病的发生及肿瘤的侵袭、迁移。本综述主要总结了近年来与Wnt/β-连环蛋白信号通路相关的长链非编码RNA的研究进展以及这些长链非编码RNA在心血管系统疾病中的作用。 展开更多
关键词 wnt/β-连环蛋白信号通路 长链非编码RNA 心血管系统疾病 肿瘤 心脏发育
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基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探究金天格胶囊对肿瘤坏死因子α干预下前成骨细胞生物学功能的影响
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作者 刘丹 黄思柔 +2 位作者 刘璞 李娟 陈琳 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2023年第6期1-7,14,共8页
目的:探讨基于Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路对金天格胶囊在肿瘤坏死因子α(TNF-α)干预下前成骨细胞生物学功能的影响。方法:取第4代MC3T3-E1细胞,将细胞分为正常组、TNF-α组(TNF-α15 ng/mL)、TNF-α+10μg/mL金天格组(T... 目的:探讨基于Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路对金天格胶囊在肿瘤坏死因子α(TNF-α)干预下前成骨细胞生物学功能的影响。方法:取第4代MC3T3-E1细胞,将细胞分为正常组、TNF-α组(TNF-α15 ng/mL)、TNF-α+10μg/mL金天格组(TNF-α15 ng/mL+10μg/mL金天格胶囊)、TNF-α+20μg/mL金天格组(TNF-α15 ng/mL+20μg/mL金天格胶囊)、TNF-α+40μg/mL金天格组(TNF-α15 ng/mL+40μg/mL金天格胶囊)、Dickkopf相关蛋白1(DKK1)组(TNF-α15 ng/mL+40μg/mL金天格胶囊+0.1μg/mL Wnt/β-catenin信号通路抑制剂DKK1)、40μg/mL金天格组(40μg/mL金天格胶囊),各组细胞均使用相应药物共培养24 h。CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞上清白介素-6(IL-6)、IL-1β、IL-10水平;ALP试剂盒法检测细胞ALP活性;茜素红染色观察细胞矿化分化情况;qRT-PCR法和Western-Blot法检测细胞β-catenin、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)表达情况。结果:与正常组相比,TNF-α组细胞存活率、ALP活性、相对吸光度值、钙结节数量、上清IL-10水平、p-β-catenin、p-GSK-3β、RUNX2、OPG表达显著下降,细胞凋亡率、上清IL-6、IL-1β水平、RANKL表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);40μg/mL金天格组细胞存活率、ALP活性、相对吸光度值、钙结节数量、p-β-catenin、p-GSK-3β、RUNX2、OPG表达升高,细胞凋亡率、RANKL表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与TNF-α组相比,TNF-α+10μg/mL金天格组、TNF-α+20μg/mL金天格组、TNF-α+40μg/mL金天格组细胞存活率、ALP活性、相对吸光度值、钙结节数量、上清IL-10水平、p-β-catenin、p-GSK-3β、RUNX2、OPG表达显著升高,细胞凋亡率、上清IL-6、IL-1β水平、RANKL表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);Wnt/β-catenin信号通路抑制剂DKK1逆转了金天格胶囊对TNF-α刺激的前成骨细胞促增值和分化作用,并增加细胞凋亡和炎症反应。结论:金天格胶囊可通过Wnt/β-catenin信号通路抑制TNF-α诱导的前成骨细胞的凋亡和炎症,促进细胞增殖和分化。 展开更多
关键词 wnt/β-连环蛋白信号通路 金天格胶囊 前成骨细胞 生物学功能
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基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探讨少腹逐瘀汤治疗寒凝血瘀型子宫内膜异位症痛经的疗效及其机制
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作者 胡盛书 车丽娟 +2 位作者 傅娇 欧幸甘 邓敦 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第22期4325-4328,4240,共5页
目的:基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探讨少腹逐瘀汤治疗寒凝血瘀型子宫内膜异位症(EMT)痛经的疗效及其机制。方法:选取2020年4月~2022年3月期间广州市中西医结合医院收治的197例EMT痛经患者,按照随机数字表法将患者分为对照组和研究组,... 目的:基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探讨少腹逐瘀汤治疗寒凝血瘀型子宫内膜异位症(EMT)痛经的疗效及其机制。方法:选取2020年4月~2022年3月期间广州市中西医结合医院收治的197例EMT痛经患者,按照随机数字表法将患者分为对照组和研究组,例数分别为98例和99例,对照组患者接受常规治疗,研究组患者在对照组的基础上接受少腹逐瘀汤治疗。观察并对比两组患者的中医证候积分、痛经症状评分、疼痛视觉模拟(VAS)评分、疼痛持续时间、炎症因子、Wnt/β-连环蛋白信号通路相关指标。结果:与对照组治疗后相比,研究组治疗后的经行腹痛、持续性下腹疼痛、性交痛、小腹肿块、痛有定处、得温痛减、经色紫暗或有血块、带下量多色白、形寒肢冷等症状评分、痛经症状评分、VAS评分更低;疼痛持续时间更短;高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Wnt、T细胞因子-4(Tcf-4)、β-连环蛋白(β-catenin)更低(P<0.05)。结论:少腹逐瘀汤治疗寒凝血瘀型EMT痛经,可有效患者的临床症状,具有较好的临床应用价值,可能与降低炎症因子水平、调节Wnt/β-连环蛋白信号通路相关指标有关。 展开更多
关键词 wnt/β-连环蛋白信号通路 少腹逐瘀汤 寒凝血瘀型 子宫内膜异位症 痛经 疗效 机制
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Wnt/β-连环蛋白通路在免疫检查点抑制剂耐药中作用的研究进展 被引量:1
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作者 王晨越 吴莉沙 +2 位作者 汤承博 王进 解伟 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期224-233,共10页
Wnt/β-连环蛋白信号通路是癌症领域最热门的分子靶点之一,与许多恶性肿瘤的发生和发展密切相关.Wnt/β-连环蛋白信号通路还广泛应用于肿瘤免疫调节,异常活化的Wnt/β-连环蛋白与肿瘤免疫抑制微环境密切相关.目前,免疫检查点抑制剂的研... Wnt/β-连环蛋白信号通路是癌症领域最热门的分子靶点之一,与许多恶性肿瘤的发生和发展密切相关.Wnt/β-连环蛋白信号通路还广泛应用于肿瘤免疫调节,异常活化的Wnt/β-连环蛋白与肿瘤免疫抑制微环境密切相关.目前,免疫检查点抑制剂的研究和应用已相当广泛,但是以靶向程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1,PD-1)/程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞抗原4(cytotoxic T lymphocyte antigen-4,CTLA-4)为代表的免疫检查点抑制剂存在患者响应率低和耐药的问题.Wnt/β-连环蛋白的激活会抑制肿瘤微环境CD8^(+)T细胞的浸润,抑制抗肿瘤免疫反应并诱导免疫检查点抑制剂耐药.重点讨论了Wnt/β-连环蛋白信号通路与免疫检查点的关系,并对Wnt/β-连环蛋白抑制剂联合免疫检查点抑制剂治疗恶性肿瘤的研究进展进行综述. 展开更多
关键词 wnt/β-连环蛋白信号通路 免疫检查点 免疫逃逸 免疫抑制微环境
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XAV939对胃癌细胞株MKN-45的增殖及Wnt/β-连环蛋白信号通路的抑制作用 被引量:4
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作者 何庆良 周俊峰 +2 位作者 黄发昆 张琳 王家兴 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2745-2747,共3页
目的 观察XAV939对胃癌细胞株MKN-45增殖及Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路的作用.方法 检测XAV939对胃癌细胞株MKN-45细胞的增殖抑制作用,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测β-catenin和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1) mRN... 目的 观察XAV939对胃癌细胞株MKN-45增殖及Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路的作用.方法 检测XAV939对胃癌细胞株MKN-45细胞的增殖抑制作用,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测β-catenin和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1) mRNA表达,Western blot法检测Axin 1、β-catenin、磷酸化β-catenin(p-β-catenin)和Cyclin D1的表达.结果 不同浓度的XAV939对胃癌细胞株MKN-45细胞增殖的抑制率分别是22.5%、39.1%、52.5%、62.1%(P<0.05);不同浓度的XAV-939处理组的β-catenin、Cyclin D1 mRNA表达下降(分别为0.727±0.031、0.467±0.051、0.353±0.035、0.293±0.031,P <0.05;0.690 ±0.161、0.487±0.231、0.360±0.257、0.216±0.197,P <0.05),β-catenin、Cyclin D1蛋白表达下降而Axin 1和p-β-catenin蛋白表达上升.结论 XAV-939可抑制以胃癌细胞株MKN-45的增殖,机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin通路. 展开更多
关键词 胃癌 wnt/β-连环蛋白信号通路 细胞周期蛋白D1
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长链非编码RNA Crnde通过调节Wnt/β-连环蛋白信号通路影响小鼠成骨细胞增殖的研究 被引量:4
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作者 孙新志 廖鹰 +2 位作者 郭俊杰 姬延辉 刘宏建 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期708-711,共4页
目的观察长链非编码RNA Crnde通过调节Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对小鼠成骨细胞增殖的影响。方法培养MC3T3-E1成骨细胞,随后诱导分化3周,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Crnde表达,应用CRISPR-Cas9方法构建Crnde基... 目的观察长链非编码RNA Crnde通过调节Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对小鼠成骨细胞增殖的影响。方法培养MC3T3-E1成骨细胞,随后诱导分化3周,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Crnde表达,应用CRISPR-Cas9方法构建Crnde基因敲除小鼠模型,同时以野生型小鼠作为对照,分为Crnde基因敲除小鼠组(n=25)和野生型小鼠组(n=25),小鼠处死前12 h腹腔注射BrdU进行染色观察成骨细胞增殖,检测血清1型前胶原N末端(P1NP)和Ⅰ型胶原羧基端交联肽(CTX-Ⅰ)表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测骨组织Wnt和β-catenin蛋白表达,原位缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况,分别运用Osteomeasure系统和MicroCT分析进行骨组织形态计量分析,双荧光素酶报告基因验证Crnde与Wnt蛋白的靶向调节关系。组间比较采用t检验。结果成骨细胞分化过程Crnde表达情况为在诱导的3周时间内,随着时间延长,Crnde表达明显增加,在第3周表达最高(P>0.05);Wnt和β-catenin在Crnde^(-/-)小鼠和正常小鼠中表达情况中,蛋白质印迹法(Western blot)结果显示,Crnde^(-/-)组中Wnt和β-catenin蛋白表达低于WT小鼠组(P<0.05);BrdU免疫荧光染色结果显示,正常对照组小鼠胫骨存在大量BrdU阳性细胞,而Crnde^(-/-)小鼠细胞显著减少;TUNEL染色显示正常对照组小鼠与Crnde^(-/-)小鼠小鼠凋亡成骨细胞数量差异无统计学意义(P>0.05);μCT和Osteomeasure系统结果显示,椎骨的组织形态分析BV/TV,WT组[(19.43±1.53)%],Crnde^(-/-)组[(20.14±1.56)%],Crnde^(-/-)鼠的小梁和皮质骨均显示出低骨量表型,Crnde^(-/-)小鼠的骨形成参数均与野生型小鼠差异有统计学意义(P<0.05);Crnde^(-/-)小鼠血清P1NP和CTX-I分别为(15.62±1.23)μg/L和(12.36±1.12)μg/L,WT小鼠血清P1NP和CTX-Ⅰ分别为(22.81±1.56)μg/L和(16.21±1.21)μg/L,Crnde^(-/-)小鼠组均比WT小鼠组明显下降(P<0.05);双荧光素酶报告基因检测结果显示Crnde模拟物显著降低了野生型组荧光素酶活性(P<0.05),而对突变组荧光素酶活性基本无影响(P>0.05)。结论Crnde通过Wnt/β-catenin信号传导调节骨形成。 展开更多
关键词 长链非编码RNA wnt/β-连环蛋白信号通路 成骨细胞 增殖
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受体互相作用蛋白激酶4通过Wnt/β-连环蛋白信号通路参与乳腺癌侵袭转移的研究 被引量:3
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作者 许瀚 苏静 +1 位作者 王峰 李孟圈 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期724-727,共4页
目的探讨受体相互作用蛋白激酶4(RIPK4)在乳腺癌发生、发展中的作用及其机制。方法收集郑州大学第一附属医院乳腺外科2017年10月至2018年7月手术切除的乳腺癌和癌旁正常组织96例,采用免疫组织化学方法检测RIPK4蛋白在96例乳腺癌和癌旁... 目的探讨受体相互作用蛋白激酶4(RIPK4)在乳腺癌发生、发展中的作用及其机制。方法收集郑州大学第一附属医院乳腺外科2017年10月至2018年7月手术切除的乳腺癌和癌旁正常组织96例,采用免疫组织化学方法检测RIPK4蛋白在96例乳腺癌和癌旁正常组织中的表达及其与乳腺癌临床病理特征间的关系;靶向RIPK4的小干扰RNA(siRNA)瞬时转染乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞,同时以转染阴性对照siRNA和空白细胞为对照,共分为3组:RIPK4 siRNA转染组、空白细胞组和阴性对照siRNA转染组。细胞计数试剂盒(CCK-8)试验和侵袭小室试验检测抑制RIPK4蛋白表达对MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖和侵袭转移能力的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测抑制RIPK4蛋白表达对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。采用方差分析进行组间比较,采用t检验进行两两比较。结果免疫组织化学结果显示RIPK4蛋白在乳腺癌组织中的表达明显增高(71.9%,69/96),与癌旁正常组织比较(21.9%,21/96),差异有统计学意义(χ2=48.188,P<0.01);且RIPK4蛋白异常高表达与乳腺癌患者的TNM分期、组织学类型及淋巴结转移明显相关(χ2=17.524、40.697、9.458,P<0.05);靶向RIPK4的siRNA瞬时转染MCF-7、MDA-MB-231细胞后,CCK-8试验和侵袭小室试验结果显示,MCF-7、MDA-MB-231细胞的增殖和侵袭转移能力降低;进一步试验表明RIPK4 siRNA抑制MCF-7、MDA-MB-231细胞中RIPK4蛋白的表达后,Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin表达随之下降,上皮-间充质转化(EMT)的相关蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达增高而波形蛋白(Vimentin)表达下降。结论 RIPK4蛋白在乳腺癌组织中异常高表达,抑制RIPK4蛋白的表达有可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路相关的EMT的发生降低乳腺癌细胞的增殖、侵袭转移能力。 展开更多
关键词 乳腺癌 受体相互作用蛋白激酶4 wnt/β-连环蛋白信号通路 上皮-间充质转化
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阿托伐他汀对动脉粥样硬化模型兔Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响研究 被引量:3
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作者 李雪霞 于晓玲 《中国药房》 CAS CSCD 2012年第5期405-407,共3页
目的:研究阿托伐他汀对动脉粥样硬化模型兔Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路中调控因子Wnt1、β-catenin、蓬乱蛋白1(dvl-1)的影响,探讨其作用机制。方法:取兔随机分为正常对照组、模型组(高脂饲料)、处理组(高脂饲料+阿托伐他汀2.5... 目的:研究阿托伐他汀对动脉粥样硬化模型兔Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路中调控因子Wnt1、β-catenin、蓬乱蛋白1(dvl-1)的影响,探讨其作用机制。方法:取兔随机分为正常对照组、模型组(高脂饲料)、处理组(高脂饲料+阿托伐他汀2.5mg.kg-1.d-1),每组8只,各组兔给予相应饲料喂养,每日1次,12周后采血并处死,检测各组兔的血脂指标(总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇),观察主动脉硬化斑块的程度,免疫组化法和蛋白质印迹法检测主动脉硬化斑块处Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组和处理组血脂指标明显升高,主动脉硬化斑块的程度明显增强,Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达明显增强(P<0.05);与模型组比较,处理组血脂指标明显降低,主动脉硬化斑块的程度明显减轻,Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达明显降低(P<0.05)。结论:阿托伐他汀可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路中Wnt1、β-catenin及dvl-1蛋白的表达来减轻动脉粥样硬化的程度。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 阿托伐他汀 wnt/β-连环蛋白信号通路
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促红细胞生成素对正畸牙复发大鼠牙周组织改建及Wnt/β-catenin信号通路的影响
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作者 贾慧 康凯 杨磊 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第2期163-167,172,共6页
目的:探究促红细胞生成素对正畸牙复发大鼠牙周组织改建及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:构建大鼠正畸牙移动模型,将48只正畸牙模型大鼠随机分为模型组、促红细胞生成素低(250 IU/kg)、高(500 IU/kg)剂量组、促红细... 目的:探究促红细胞生成素对正畸牙复发大鼠牙周组织改建及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:构建大鼠正畸牙移动模型,将48只正畸牙模型大鼠随机分为模型组、促红细胞生成素低(250 IU/kg)、高(500 IU/kg)剂量组、促红细胞生成素(500 IU/kg)+KYA1797K(Wnt/β-catenin抑制剂,25 mg/kg)组,每组12只;分组后拆除各组大鼠加力装置,另取12只健康大鼠作为对照组(不进行任何处理)。各组大鼠给予相应干预30 d。计算取下加力装置第10、20、30天大鼠正畸牙复发率;苏木素-伊红染色观察牙周组织病理学变化;免疫组织化学染色检测牙周组织骨形态发生蛋白(BMP)2、BMP4表达;荧光定量PCR法和蛋白印迹法分别检测牙周组织Wnt、β-catenin mRNA及蛋白表达水平。结果:对照组大鼠牙周组织中纤维排列紧密,细胞整齐分布;与对照组相比,模型组牙周组织中纤维分散,细胞间排列间隙大,牙槽骨表面有少量成骨细胞排列,没有明显的细胞牙骨质,各时间段正畸牙复发率、牙周组织BMP2、BMP4表达、Wnt、β-catenin mRNA和蛋白水平显著升高(均P<0.05);与模型组相比,促红细胞生成素低、高剂量组大鼠牙周组织中纤维分布逐渐密集,成骨细胞和细胞牙骨质逐渐增多,各时间段正畸牙复发率依次降低,牙周组织BMP2、BMP4表达、Wnt、β-catenin mRNA和蛋白水平依次升高(均P<0.05);KYA1797K能部分逆转高剂量促红细胞生成素对大鼠正畸牙复发的改善作用(均P<0.05)。结论:促红细胞生成素可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,加速骨质生成,促进牙周组织改建,减缓大鼠正畸牙复发。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 正畸牙复发 wnt/β-连环蛋白信号通路 牙周组织改建 骨质生成 大鼠
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活血化瘀方剂对重型颅脑损伤大鼠Wnt/β-连环蛋白信号通路表达的影响 被引量:8
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作者 王景博 韦春珠 +2 位作者 潘茂华 刘鑫杰 潘宇政 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1101-1106,共6页
目的动态观察重型颅脑损伤(sTBI)急性期大鼠神经功能缺损评分(NSS)、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路、脑源性神经营养因子(BDNF)与神经生长因子(NGF)的表达规律,探讨活血化瘀方剂的干预作用.方法将126只雄性SD大鼠按随机数字表法... 目的动态观察重型颅脑损伤(sTBI)急性期大鼠神经功能缺损评分(NSS)、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路、脑源性神经营养因子(BDNF)与神经生长因子(NGF)的表达规律,探讨活血化瘀方剂的干预作用.方法将126只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组(生理盐水2 kg/L)、模型组(生理盐水2 kg/L)、脑蛋白水解物组(BP组,5.6 g/kg)、桃红四物汤组(TH组,10.2 g/kg)、血府逐瘀汤组(XF组,15.6 g/kg)、通窍活血汤组(TQ组,9.6 g/kg)、补阳还五汤组(BY组,28.7 g/kg)7组,每组18只.采用改良Feeney自由落体法建立sTBI大鼠模型;对照组不予创伤处理.各组分别于伤后6 h灌胃相应药物,伤后1、3、7 d进行NSS评分;取大鼠海马组织,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt3a和β-catenin的mRNA表达;采用免疫组化法检测BDNF和NGF的阳性表达.结果与对照组比较,模型组大鼠伤后1 d即出现明显的颅脑损伤症状,表现为NSS评分明显升高,Wnt3a和β-catenin的mRNA表达明显上调,BDNF和NGF阳性表达明显增加,说明sTBI大鼠模型制备成功,并随时间延长呈现一定自我修复能力.与模型组相比,XF组、TQ组和BY组NSS评分于伤后1 d即明显下降(分:6.6±1.5、6.1±2.0、5.7±2.4比9.4±1.5,均P<0.05),而BP组及TH组NSS评分于伤后7 d才明显下降,且TQ组和BY组NSS评分下降幅度较其他药物组更加显著.与模型组比较,BP组海马组织Wnt3a和β-catenin的mRNA表达分别于伤后1 d、3 d明显升高,并随时间延长持续升高;4个活血化瘀方剂组Wnt3a和β-catenin的mRNA表达于伤后1~3 d均有不同程度的波动,但均于伤后7 d明显高于模型组,以BY组升高更为显著〔Wnt3a mRNA(2-ΔΔCt):154.7±4.1比17.4±1.0,β-catenin mRNA(2-ΔΔCt):17.05±0.45比2.74±0.13,均P<0.05〕,其次为TQ组〔Wnt3a mRNA(2-ΔΔCt):126.6±2.8比17.4±1.0,β-catenin mRNA(2-ΔΔCt):8.70±1.19比2.74±0.13,均P<0.05〕.与模型组比较,BP组BDNF和NGF的阳性表达在伤后1 d升高,但3 d达峰值后有所下降;4个活血化瘀方剂组BDNF和NGF的阳性表达于伤后1~3 d均有不同程度的波动,但均于伤后7 d明显高于模型组,其中TQ组和BY组在伤后1 d即明显高于模型组〔BDNF阳性细胞(个/MP):56.4±6.2、61.6±7.0比37.4±2.0,NGF阳性细胞(个/MP):58.4±5.0、62.4±4.4比53.4±3.6,均P<0.05〕,且伤后7 d时升高幅度较其他药物组更为显著.结论桃红四物汤、血府逐瘀汤、通窍活血汤和补阳还五汤对sTBI急性期大鼠的神经再生修复均有一定疗效,但作用强度有所不同,以补阳还五汤和通窍活血汤起效更快、效果更好. 展开更多
关键词 桃红四物汤 血府逐瘀汤 通窍活血汤 补阳还五汤 重型颅脑损伤 wnt/β-连环蛋白信号通路 神经营养因子
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Wnt/β-连环蛋白信号通路负调节蛋白SOST在类风湿关节炎中的研究进展 被引量:5
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作者 王颖旎 武平 +1 位作者 余泽芸 罗云 《现代免疫学》 CAS 北大核心 2021年第5期436-440,共5页
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)作为一种慢性全身性的自身免疫性疾病,以滑膜炎症和增生、局灶性骨侵蚀及关节软骨变薄为特征,最终导致严重的关节损伤和残疾。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路被认为是成人骨和软骨内稳态... 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)作为一种慢性全身性的自身免疫性疾病,以滑膜炎症和增生、局灶性骨侵蚀及关节软骨变薄为特征,最终导致严重的关节损伤和残疾。Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路被认为是成人骨和软骨内稳态的关键调节器,能够影响成骨细胞和破骨细胞的产生及功能,对骨量的调控非常关键。经典Wnt信号通路受到多种细胞因子的调节,其中硬化蛋白(sclerostin, SOST)作为该通路的内源性负调节蛋白,可通过抑制该通路的转导影响新骨形成。该文对SOST结构、作用机制及其对RA的影响进行综述,旨在探讨Wnt/β-连环蛋白/SOST在RA发病机制中的调控作用,为临床治疗RA提供更好的方案。 展开更多
关键词 wnt/β-连环蛋白信号通路 硬化蛋白 类风湿关节炎
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叉头框转录因子F2作用于结肠癌细胞中Wnt/β-连环蛋白信号通路候选靶基因的研究 被引量:1
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作者 张林 刘航 +3 位作者 张媛玲 曾家兴 陈俊豪 丁杰 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第8期1512-1515,共4页
目的筛选叉头框转录因子F2(FOXF2)作用于结肠癌细胞中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的候选靶基因并分析其生物学功能。方法设置干扰FOXF2基因的最佳慢病毒转染获得的HT29细胞为沉默组, 空载慢病毒转染获得的HT29细胞为对照组。... 目的筛选叉头框转录因子F2(FOXF2)作用于结肠癌细胞中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的候选靶基因并分析其生物学功能。方法设置干扰FOXF2基因的最佳慢病毒转染获得的HT29细胞为沉默组, 空载慢病毒转染获得的HT29细胞为对照组。对照组和沉默组各取三个样本行转录组测序分析;富集到Wnt/β-catenin信号通路, 实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)验证该通路的候选靶基因。多组间比较采用单因素方差分析, 两组间比较采用t检验。结果 3组干扰慢病毒沉默HT29细胞中FOXF2的表达效果显著高于空载慢病毒[FOXF2基因信使RNA(mRNA)表达分别为0.29±0.02、0.28±0.05、0.26±0.01比1.00±0.13, FOXF2基因蛋白表达分别为0.20±0.02、0.16±0.01、0.12±0.01比1.00±0.01], 差异有统计学意义(F=75.948、3 549.333, 均P<0.01), 第3组慢病毒沉默FOXF2效果最佳。HT29细胞沉默FOXF2后有389个差异表达基因(DEGs);基因本体论(GO)功能富集分析显示, DEGs显著富集在免疫效应过程、细胞外区域、腺苷酸转移酶活性等功能集团;京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示, DEGs主要涉及EB病毒感染、NOD样受体信号通路及Wnt信号通路等;Wnt/β-catenin信号通路的候选靶基因骨形成蛋白和激活素的跨膜抑制剂(BAMBI)、富含亮氨酸重复序列的G蛋白耦联受体5(LGR5)、富含亮氨酸重复序列的G蛋白耦联受体6(LGR6)和MSTRG.14182(新基因)主要涉及正向调控Wnt信号通路、细胞增殖和迁移等生物学过程。沉默组中BAMBI、LGR5、LGR6 mRNA和蛋白表达显著高于对照组[mRNA表达分别为1.86±0.21比1.00±0.20、1.95±0.11比1.00±0.09、2.06±0.10比1.00±0.03, 蛋白表达分别为1.88±0.02比1.00±0.06、2.08±0.12比1.00±0.04、1.80±0.03比1.00±0.08], 差异有统计学意义(t=-5.066、-11.646、-17.584、-24.100、-14.820、-16.710, 均P<0.01)。结论沉默FOXF2基因的HT29细胞存在较多的差异表达基因, Wnt/β-catenin信号通路的候选靶基因可能参与正向调控Wnt信号通路、细胞增殖及迁移等生物学过程。 展开更多
关键词 叉头框转录因子F2 结肠癌 wnt/β-连环蛋白信号通路 靶基因
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人脐带间充质干细胞通过Wnt/β-连环蛋白信号通路防治大鼠激素性骨质疏松
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作者 王学中 邓爽 +3 位作者 张宇标 刘子林 黄俊 彭昊 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第7期1247-1251,共5页
目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)在防治大鼠激素性骨质疏松(GIOP)方面的疗效及其潜在的分子生物学机制。方法采用光学显微镜、流式细胞技术对HUC-MSCs进行表征和鉴定。成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、地塞米松(DEX)组、DEX+不同比例... 目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)在防治大鼠激素性骨质疏松(GIOP)方面的疗效及其潜在的分子生物学机制。方法采用光学显微镜、流式细胞技术对HUC-MSCs进行表征和鉴定。成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、地塞米松(DEX)组、DEX+不同比例HUC-MSCs组。对照组加入正常培养基,DEX组加入10μmol/L DEX处理,DEX+不同比例HUC-MSCs组加入10μmol/L DEX处理细胞,然后将HUC-MSCs按照1∶1、10∶1、100∶1的比例在共培养小室中与MC3T3-E1非接触式共培养48 h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力。24只SD大鼠随机分成3组(n=8):对照组、模型组、治疗组(HUC-MSCs组)。模型组使用DEX构建GIOP模型,对照组给予等量磷酸盐缓冲液(PBS),治疗组在构建GIOP模型的同时通过尾静脉注射约106个HUC-MSCs进行治疗。8周后取股骨组织样本,采用苏木精-伊红(HE)染色观察空骨陷窝率,脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色评价细胞凋亡。进行Micro CT扫描,测量骨密度(BMD)、单位组织体积的骨量(Bv/Tv)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)、骨小梁数量(Tb.N)等骨质疏松相关指标。提取组织蛋白后,用蛋白印迹法(Western blot)检测通路蛋白表达。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果流式细胞鉴定结果显示,HUC-MSCs高表达CD44(99.9%)、CD73(98.0%)、CD90(100.0%)、CD105(99.6%)、CD166(99.9%),低表达CD14(0.43%)、CD19(1.11%)、CD34(0.89%)、CD45(1.06%)、HLA-DR(0.38%),符合HUC-MSCs表面特异性抗原表达规律。CCK-8显示,模型组较对照组细胞活力明显下降,与HUC-MSCs共培养后可部分恢复MC3T3-E1活力。HE染色对照组、模型组、HUC-MSCs组空骨陷窝率分别为(2.546±1.049)%、(28.720±1.546)%、(13.600±1.012)%。TUNEL染色结果对照组、模型组、HUC-MSCs组TUNEL阳性细胞的比例分别为(2.334±0.789)%、(24.140±4.646)%、(11.610±2.974)%。Micro CT显示模型组BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N均降低,Tb.Sp增加,HUC-MSCs治疗可以一定程度上逆转上述改变。Western blot结果表明,与对照组比较,模型组β-连环蛋白(β-catenin)、Runt相关基因2(Runx2)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)蛋白表达均明显下降,硬化素(SOST)蛋白表达增加,HUC-MSCs治疗组β-catenin、Runx2、BMP-2表达较模型组增加,SOST表达相应减少。结论HUC-MSCs能够通过Wnt/β-catenin信号通路改善地塞米松所致的骨丢失。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 wnt/β-连环蛋白信号通路 骨质疏松 β-连环蛋白 骨形态发生蛋白-2
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