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前列腺癌组织中Wnt5a的表达与血管生成拟态的相关性
1
作者 刘彼得 李循 +3 位作者 王书恒 贾宏亮 张小安 李九智 《肿瘤防治研究》 CAS 2024年第1期43-48,共6页
目的分析前列腺癌Wnt5a与血管生成拟态(VM)的相关性,并评估其与肿瘤干细胞特性和上皮间质转化的关系。方法免疫组织化学法检测50例前列腺癌和50例前列腺增生组织中Wnt5a的表达及前列腺癌组织中CD133、Vimentin和E-cadherin的表达;CD34/... 目的分析前列腺癌Wnt5a与血管生成拟态(VM)的相关性,并评估其与肿瘤干细胞特性和上皮间质转化的关系。方法免疫组织化学法检测50例前列腺癌和50例前列腺增生组织中Wnt5a的表达及前列腺癌组织中CD133、Vimentin和E-cadherin的表达;CD34/PAS双染检测VM的形成。分析组间Wnt5a的表达差异、Wnt5a和VM的临床意义、Wnt5a与VM的相关性及Wnt5a和VM与CD133、Vimentin、E-cadherin的相关性。结果Wnt5a在前列腺癌组织中的表达明显高于前列腺增生组织(P<0.05),Wnt5a的表达与VM正相关(P<0.05),Wnt5a及VM的表达与CD133及Vimentin的表达正相关(P<0.05)。Wnt5a及VM的表达与前列腺癌Gleason评分、输精管侵犯及淋巴转移均正相关(P<0.05),VM与前列腺癌T分期呈正相关(P<0.05)。结论Wnt5a在前列腺癌高表达,并与VM呈正相关,Wnt5a及VM与肿瘤干细胞特性和上皮向间充质转化的标志蛋白的表达具有相关性。 展开更多
关键词 前列腺癌 wnt5a 血管生成拟态 肿瘤干细胞 上皮间质转化
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角质形成细胞Wnt5a调控MMP9参与CRPS-Ⅰ型外周敏化机制研究
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作者 朱贺 闻蓓 +1 位作者 许力 黄宇光 《协和医学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期335-343,共9页
目的探究皮肤角质形成细胞Wnt5a通过靶向调控基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase⁃9,MMP9)的表达参与复杂区域疼痛综合征(complex regional pain syndrome,CRPS)⁃Ⅰ型外周敏化的机制,寻找该慢性疼痛的潜在治疗策略。方法本研究分... 目的探究皮肤角质形成细胞Wnt5a通过靶向调控基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase⁃9,MMP9)的表达参与复杂区域疼痛综合征(complex regional pain syndrome,CRPS)⁃Ⅰ型外周敏化的机制,寻找该慢性疼痛的潜在治疗策略。方法本研究分为两部分,第一部分为体外实验。体外培养人永生化角质形成细胞HaCaT进行氧糖剥夺/复氧(oxygen⁃glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)处理,初步观察OGD/R早期(24 h内)线粒体损伤及膜电位变化,并探究给予不同浓度Wnt5a抑制剂Box5对MMP9的影响。第二部分为动物实验。将大鼠随机分为慢性缺血后疼痛(chronic postischemia pain,CPIP)组、Box5(20)组、Box5(40)组和对照组,每组8只,CPIP组、Box5(20)组、Box5(40)组先建立大鼠患肢缺血再灌注CPIP模型,模拟CRPS⁃Ⅰ型病理生理过程,Box5(20)组和Box5(40)组在此基础上分别足底注射20μmol/L和40μmol/L Box5溶液100μL,对照组和CPIP组则分别注射生理盐水100μL。通过疼痛行为学测定观察4组大鼠2周内不同时间点(D1,D2,D4,D10,D14)机械痛和热痛阈值变化情况。HE染色观察大鼠皮肤炎症浸润及角化情况,免疫荧光染色观察4组MMP9的表达情况,ELISA检测4组背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)的IL⁃1β及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor⁃α,TNF⁃α)水平。结果体外实验:HaCaT细胞进行OGD/R处理后,MMP9平均荧光强度显著增加(P<0.001);透射电镜下观察到OGD/R组出现线粒体明显萎缩,线粒体膜电位检测显示,与对照组相比,OGD/R组提示线粒体膜电位下降明显(P=0.027)。动物实验:与OGD/R组相比,仅Box5(40)组线粒体膜电位上升具有统计学差异(P=0.046)。行为学检测发现CPIP组大鼠术后各时间点(D1,D2,D4,D10,D14)机械痛阈值和热痛阈值均显著降低(P均<0.05)。HE染色提示CPIP组大鼠患足真皮层出现大量炎症细胞浸润,表皮出现过度角化,颗粒层及棘层厚度显著增加(P<0.001)。免疫荧光试验显示,CPIP组角质形成细胞MMP9荧光强度显著增加(P<0.001);与CPIP组相比,Box5(20)组(P=0.002)和Box5(40)组(P<0.001)MMP9荧光强度均显著下降。ELISA检测结果显示,CPIP组IL⁃1β(P=0.048)和TNF⁃α浓度(P=0.002)显著升高;与CPIP组相比,Box5(40)组IL⁃1β(P=0.047)和TNF⁃α浓度(P=0.047)显著下降。结论外周局部缺血再灌注损伤可导致角质形成细胞MMP9过度表达,引起CRPS⁃Ⅰ型外周敏化。靶向抑制Wnt5a/MMP9可逆转CPIP大鼠疼痛行为,为临床治疗慢性痛提供了参考依据。 展开更多
关键词 复杂区域疼痛综合征 角质形成细胞 wnt5a MMP9 外周敏化
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芪玉三龙方通过Wnt5a/β-catenin信号通路逆转上皮—间充质转化抑制肺癌细胞侵袭和转移
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作者 张裕 童佳兵 +1 位作者 李泽庚 高雅婷 《安徽中医药大学学报》 CAS 2024年第2期81-89,共9页
目的从细胞水平探讨芪玉三龙方是否通过Wnt5a/β-catenin信号通路抑制上皮—间充质细胞转化,抑制肺癌转移。方法将重组慢病毒转染小鼠肺癌细胞建立稳定过表达Wnt5a的细胞系,同时构建Wnt5a干扰和空载细胞株。qRT-PCR法检测Wnt5a、β-cate... 目的从细胞水平探讨芪玉三龙方是否通过Wnt5a/β-catenin信号通路抑制上皮—间充质细胞转化,抑制肺癌转移。方法将重组慢病毒转染小鼠肺癌细胞建立稳定过表达Wnt5a的细胞系,同时构建Wnt5a干扰和空载细胞株。qRT-PCR法检测Wnt5a、β-catenin mRNA的表达水平。CCK8、EdU实验检测肺癌细胞的增殖活性,Transwell实验检测肺癌细胞的迁移和侵袭能力。Western blot法检测Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin、E-cadherin、Snail蛋白表达水平。结果与对照组比较,芪玉三龙方组Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著降低(P<0.05)。Wnt5a过表达组中Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平增加(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著增强(P<0.05);Wnt5a干扰组Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平下降(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著下降(P<0.05),明显抑制EMT的发生。芪玉三龙方处理后,Wnt5a过表达组Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平下降(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力得到抑制。结论芪玉三龙方可能通过Wnt5a/β-catenin信号通路逆转上皮—间充质转化,抑制肺癌细胞增殖和转移。 展开更多
关键词 芪玉三龙方 wnt5a Β-CATENIN 信号通路 上皮—间充质转化 增殖 迁移
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基于Wnt5a信号通路探讨放射性^(125)I粒子组织间植入治疗胰腺癌的疗效及机制 被引量：1
4
作者 吴颖 郑凯 +1 位作者 杨冬艳 董德录 《国际老年医学杂志》 2023年第4期390-395,共6页
目的基于Wnt5a信号通路探讨放射性^(125)I粒子组织间植入治疗胰腺癌的疗效及机制。方法(1)选取2020年1月~2021年12月吉林大学中日联谊医院行超声引导经皮穿刺组织学活检证实为胰腺癌,行超声引导放射性^(125)I粒子植入治疗的26例患者(26... 目的基于Wnt5a信号通路探讨放射性^(125)I粒子组织间植入治疗胰腺癌的疗效及机制。方法(1)选取2020年1月~2021年12月吉林大学中日联谊医院行超声引导经皮穿刺组织学活检证实为胰腺癌,行超声引导放射性^(125)I粒子植入治疗的26例患者(26个病灶)作为研究对象。术后2个月CT观察肿瘤大小及空腹血糖的变化,通过免疫组织化学染色检测患者组织标本Wnt5a的表达。(2)通过GEPIA数据库分析179例胰腺癌组织和171例胰腺组织中Wnt5a的mRNA水平差异。(3)体外采用放射线照射胰腺癌Panc-1细胞,通过Western Blot及实时荧光定量PCR检测Wnt5a和线粒体氧化磷酸化复合体亚基的表达变化。结果在植入放射性125I粒子的26个病灶中有20个病灶明显减小,有效率为76.9%,胰腺癌肿瘤得到局部控制。患者术后空腹血糖明显升高,但仍在8.4~11.2 mmol/L范围内。GEPIA数据库的生物信息学分析发现,Wnt5a在胰腺癌组织中的表达明显高于正常组织(P<0.05)。免疫组织化学染色显示胰腺癌组织Wnt5a的表达显著高于癌旁组织。经放射线照射后,胰腺癌细胞Wnt5a的表达明显下调,三磷酸腺苷合酶6、细胞色素C氧化酶亚基4等线粒体氧化磷酸化复合体亚基的mRNA水平升高,而蛋白水平明显下降(P<0.05)。结论放射性125I粒子通过抑制胰腺癌细胞Wnt5a表达,降低线粒体氧化磷酸化复合体亚基翻译,抑制胰腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 胰腺癌 放射性^(125)I粒子 wnt5a 线粒体
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胎盘WNT5A表达异常通过影响滋养细胞侵袭参与子痫前期发生
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作者 郭玲 孙凤萱 +4 位作者 赵洪进 邓建业 宋坤 杜鹏 李艳 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第10期721-727,共7页
目的:探讨WNT5A在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达及其对滋养层细胞侵袭的影响和潜在作用机制。方法:收集27例PE孕妇及38例正常孕妇的胎盘组织,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测WNT5A表达;Transwell侵袭实验检测人重组WNT5A蛋... 目的:探讨WNT5A在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达及其对滋养层细胞侵袭的影响和潜在作用机制。方法:收集27例PE孕妇及38例正常孕妇的胎盘组织,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测WNT5A表达;Transwell侵袭实验检测人重组WNT5A蛋白(200ng/mL)处理对人永生化绒毛外滋养细胞系(HTR8/SVneo)侵袭的影响;Western blot检测WNT5A对人类原代EVT细胞胞浆内活化的β-catenin蛋白水平作用。基于空白对照组和重组BMP2蛋白(25ng/mL)处理组的HTR8/SVneo转录组测序数据,明确BMP2对WNT5A的调控作用,并在HTR8/SVneo和原代人类EVT细胞中,通过RT-qPCR和Western blot分别在mRNA和蛋白水平上验证BMP2对WNT5A和活化β-catenin的调控作用;结合BMP2受体抑制剂DMH-1预处理HTR8/SVneo细胞,验证BMP2调控WNT5A表达所需受体及信号通路。结果:与正常孕妇相比,PE患者胎盘组织中WNT5A水平显著降低。胎盘WNT5A mRNA水平可较好地用于PE诊断,曲线下面积(AUC)为0.844(95%CI为0.74~0.95,P<0.001)。外源性人重组WNT5A蛋白添加可明显提高HTR8/SVneo细胞侵袭力,并抑制EVT细胞内活化β-catenin表达(P<0.05)。人重组BMP2蛋白处理后可降低HTR8/SVneo和EVT细胞中WNT5A表达,提高细胞内活化β-catenin表达水平(P<0.05)。BMP2蛋白处理后可提高HTR8/SVneo细胞磷酸化的SMAD1/5/9蛋白表达,BMP2受体拮抗剂DMH-1预处理可阻断这一上调作用。结论:PE患者胎盘组织中WNT5A表达下调,其表达受到BMP2激活的SMAD1/5/9信号通路调控,并通过影响滋养细胞侵袭,参与PE发生。 展开更多
关键词 wnt5a BMP2 滋养细胞 侵袭 子痫前期
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Wnt5a基因沉默对骨髓间充质干细胞向睾丸间质细胞分化的影响
6
作者 赵伟 郭亚雄 刘春 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第7期980-987,共8页
目的 通过siRNA干扰技术研究Wnt5a基因沉默对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向睾丸间质细胞(LC)分化的初步机制。方法 采用流式细胞仪检测由中国科学院干细胞库提供的Sprague Dawley(SD)大鼠骨髓间充质干细胞株表面蛋白(CD29、CD44、CD45... 目的 通过siRNA干扰技术研究Wnt5a基因沉默对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向睾丸间质细胞(LC)分化的初步机制。方法 采用流式细胞仪检测由中国科学院干细胞库提供的Sprague Dawley(SD)大鼠骨髓间充质干细胞株表面蛋白(CD29、CD44、CD45、CD90)的表达。BMSCs分为NC组、siRNA1组和siRNA2组,分别转染空载siRNA,Wnt5a-siRNA-1,Wnt5a-siRNA-2;采用RT-qPCR法检测Wnt5a-siRNA转染后Wnt5a及Wnt/β-catenin信号轴中LRP-5、β-catenin、TCF mRNA的表达;采用ELISA法检测Wnt5a-siRNA转染后Wnt5a及Wnt/β-catenin信号轴中LRP-5、β-catenin、TCF的蛋白表达;免疫荧光实验通过检测转染3 d的细胞表面标志物3β-羟化类固醇脱氢酶(3β-HSD),分析BMSCs向LC分化水平;倒置显微镜观察转染5 d细胞的形态学变化。ELISA法检测转染后LC的睾酮生成水平。结果 购买的大鼠BMSCs细胞株表面抗体CD29、CD44及CD90阳性表达及CD45阴性表达符合大鼠BMSCs的特异性抗体特征。与NC组比较,siRNA1组和siRNA2组Wnt/β-catenin信号轴中LRP-5、β-catenin、TCF的mRNA及蛋白表达量下降(P<0.05),睾酮分泌量均显著升高(P<0.05)。siRNA1组和siRNA2组LC特异性标记物3β-HSD染色阳性面积百分比明显高于NC组(P<0.01);细胞转染后形态学变化符合LC的形态特点。结论 Wnt5a-siRNA转染BMSCs细胞可显著抑制Wnt5a的mRNA和蛋白表达;Wnt5a基因沉默通过抑制Wnt/β-catenin信号通路发挥促进BMSCs向LC分化的作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 睾丸间质细胞 wnt5a Β-CATENIN 迟发性性腺功能减退症
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止痛健骨方对兔膝骨关节炎关节软骨Wnt5a表达的影响及Wnt5a与软骨T2值的相关性研究 被引量：1
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作者 刘音其 罗慕晴 +6 位作者 黎建宇 高辉 何业文 李平 沈宏荣 钟泽亚 张堃 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第17期2344-2349,共6页
目的研究止痛健骨方对兔膝骨关节炎(KOA)关节软骨中Wnt5a表达的影响及关节软骨中Wnt5a含量与关节软骨T2值的相关性,探讨T2 mapping成像评估治疗疗效的可行性。方法将32只白兔随机分为正常组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组和止痛健骨方组,每... 目的研究止痛健骨方对兔膝骨关节炎(KOA)关节软骨中Wnt5a表达的影响及关节软骨中Wnt5a含量与关节软骨T2值的相关性,探讨T2 mapping成像评估治疗疗效的可行性。方法将32只白兔随机分为正常组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组和止痛健骨方组,每组8只。除正常组外,其余组白兔均采用改良伸直制动法建立KOA模型。制动2周后,止痛健骨方组给予止痛健骨方2.98 g(生药量)/(kg·d)灌胃,硫酸氨基葡萄糖组给予硫酸氨基葡萄糖0.088 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,均1次/d,连续灌胃4周。实验结束后,对兔行右膝关节T2 mapping成像,记录各组关节软骨T2值;取兔右膝关节软骨,番红固绿染色观察软骨损伤情况,免疫组化法检测软骨中Wnt5a表达情况,Spearman相关分析关节软骨中Wnt5a表达量与关节软骨T2值的相关性。结果模型组、止痛健骨方组、硫酸氨基葡萄糖组关节软骨T2值和关节软骨中Wnt5a表达量均明显高于正常组(P均<0.05),止痛健骨方组、硫酸氨基葡萄糖组关节软骨T2值和关节软骨中Wnt5a表达量均明显低于模型组(P均<0.05),止痛健骨方组关节软骨中Wnt5a表达量明显高于硫酸氨基葡萄糖组(P<0.05)。模型组、硫酸氨基葡萄糖组、止痛健骨方组细胞间基质及软骨层有不同程度的破坏或丢失,硫酸氨基葡萄糖组、止痛健骨方组上述病变较模型组轻。相关性分析显示关节软骨中Wnt5a表达量与T2值呈强正相关(r=0.884,P<0.05)。结论止痛健骨方可能通过下调关节软骨中Wnt5a表达而发挥延缓KOA软骨损伤的作用;软骨中Wnt5a表达量与T2 mapping成像有较好的相关性,T2 mapping成像有助于无创评估止痛健骨方对关节软骨损伤的影响。 展开更多
关键词 骨性关节炎 关节软骨 止痛健骨方 wnt5a T2 mapping成像
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miR-144-5p靶向WNT5a对山羊卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响 被引量：1
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作者 刘杰 许香萍 +7 位作者 邓铭 邹娴 江声伟 刘德武 柳广斌 孙宝丽 郭勇庆 李耀坤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2421-2435,共15页
旨在探究miR-144-5p靶向WNT5a对山羊颗粒细胞增殖和凋亡的影响。本研究选用2岁健康雷州母山羊的卵巢颗粒细胞来过表达和抑制表达miR-144-5p及WNT5a,通过荧光定量PCR(real-time qPCR, RT-qPCR)、Western blot、双荧光素酶报告基因、CCK-... 旨在探究miR-144-5p靶向WNT5a对山羊颗粒细胞增殖和凋亡的影响。本研究选用2岁健康雷州母山羊的卵巢颗粒细胞来过表达和抑制表达miR-144-5p及WNT5a,通过荧光定量PCR(real-time qPCR, RT-qPCR)、Western blot、双荧光素酶报告基因、CCK-8等技术来探究miR-144-5p与WNT5a对颗粒细胞增殖和凋亡的影响。结果表明,miR-144-5p在大卵泡颗粒细胞中的表达量极显著高于小卵泡颗粒细胞(P<0.01),WNT5a在大卵泡颗粒细胞中的表达量极显著低于小卵泡颗粒细胞(P<0.01);CCK-8检测发现,miR-144-5p抑制了GCs增殖,过表达miR-144-5p后,抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白表达极显著下调(P<0.01),促凋亡基因BAX的mRNA和蛋白表达极显著上调(P<0.01);Wnt/β-Catenin通路CTNNB1 mRNA和β-Catenin蛋白水平极显著降低(P<0.01);另外,miR-144-5p能靶向WNT5a抑制其表达。同时,CCK-8检测结果表明,WNT5a可促进GCs增殖,过表达WNT5a后,抑凋亡基因BCL-2的mRNA和蛋白水平极显著上调(P<0.01),促凋亡基因BAX的mRNA显著下调(P<0.05)、蛋白水平极显著下调(P<0.01),Wnt/β-Catenin通路CTNNB1 mRNA和β-Catenin蛋白水平极显著提高(P<0.01)。综上所述,在GCs中,miR-144-5p靶向负调控WNT5a的表达,调控Wnt/β-Catenin通路,进而上调BAX/BCL-2的比值来抑制颗粒细胞增殖并促进其凋亡,这可能对山羊的排卵数和产羔数产生一定的影响。 展开更多
关键词 颗粒细胞 miR-144-5p WNT 5a 山羊 繁殖
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姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)下调Wnt5a表达抑制A549人肺癌细胞增殖
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作者 马丽 马童童 +3 位作者 周文静 李娟 李玉云 徐慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期15-20,共6页
目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测... 目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测细胞迁移的情况;Western blot法检测A549细胞PDS5B及无翅基因5a(Wnt5a)的蛋白表达;共同转染PDS5B小干涉RNA(siRNA)及Wnt5a siRNA,TranswellTM检测细胞迁移的情况。结果与转染阴性对照组相比,转染PDS5B siRNA后,PDS5B蛋白表达明显下降且A549细胞增殖能力、细胞集落形成率、迁移能力均明显提高,Wnt5a的表达升高;过表达PDS5B后,则结果相反;共转实验显示Wnt5a可以抵抗PDS5B对A549细胞的抑制作用。结论PDS5B通过下调Wnt5a表达抑制肺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B) A549肺癌细胞 无翅基因5a(wnt5a) 癌细胞生物学
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朝医鹿茸大补汤通过WNT5A和TLR4信号通路交互调节气道重塑的机制研究
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作者 李欢 刘凯月 +4 位作者 黄丹丹 刘若白 李良昌 延光海 郑明昱 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2397-2398,共2页
支气管哮喘(bronchial asthma)属朝医学“哮喘”范畴,是以气道炎症(airway inflammation)和气道重塑[1](airway remodeling)为明显病理标志的呼吸系统疾病。鹿茸大补汤为太阴人哮喘代表方剂,有补肺气益精血的功用。课题组前期研究显示... 支气管哮喘(bronchial asthma)属朝医学“哮喘”范畴,是以气道炎症(airway inflammation)和气道重塑[1](airway remodeling)为明显病理标志的呼吸系统疾病。鹿茸大补汤为太阴人哮喘代表方剂,有补肺气益精血的功用。课题组前期研究显示鹿茸大补汤能够通过WNT5A、TLR4等通路调控哮喘相关蛋白的表达[2],但是对通路间是否存在交互作用尚未验证。故本次利用朝医鹿茸大补汤对WNT5A和TLR4信号通路交互调节的机制进行研究。 展开更多
关键词 哮喘 朝医 气道重塑 wnt5a TLR4 NF-κB
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Wnt5a对肝星状细胞增殖、迁移和衰老的调控作用
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作者 曹雨萌 张荣花 +6 位作者 刘雨潭 张亚楠 赵丹 黄金平 张政 章广玲 李景武 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2023年第2期126-134,共9页
目的寻找抗纤维化的治疗方案和治疗靶点具有重要意义。文章旨在探讨Wnt蛋白家族成员5a(Wnt5a)对肝星状细胞(HSCs)增殖、克隆形成、迁移能力以及衰老的影响。方法构建胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型,利用芯片分析差异表达的基因。用不同浓度... 目的寻找抗纤维化的治疗方案和治疗靶点具有重要意义。文章旨在探讨Wnt蛋白家族成员5a(Wnt5a)对肝星状细胞(HSCs)增殖、克隆形成、迁移能力以及衰老的影响。方法构建胆汁淤积性肝纤维化大鼠模型,利用芯片分析差异表达的基因。用不同浓度的TGF-β1刺激肝星状细胞,将实验分为3组,分别为只加完全培养基的对照组以及用5μg/L和10μg/L TGF-β1刺激的处理组,通过qRT-PCR、Western blot和免疫荧光检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原α1(COL1A1)和Wnt5a的表达。Wnt5a的siRNA(si-Wnt5a)转染LX-2细胞后,通过qRT-PCR和Western Blot检测LX-2细胞中α-SMA、COL1A1、Wnt5a的mRNA和蛋白表达;通过CCK-8、集落形成、Transwell、划痕、β-半乳糖苷酶染色分别检测LX-2细胞的增殖、集落形成、迁移能力以及细胞的衰老情况。利用生物信息学网站预测与Wnt5a有靶向关系的miRNAs,STRING数据库分析与Wnt5a有相互作用的蛋白,并用Cytoscape绘制蛋白-蛋白互作图。结果BDL大鼠芯片结果显示Wnt5a是纤维化肝组织中显著上调的基因之一。10μg/L TGF-β1处理细胞后,LX-2细胞中α-SMA[(10.81±1.82)、(1.57±0.12)]、COL1A1[(9.83±3.27)、(1.41±0.11)]、Wnt5a[(8.17±0.90)、(1.29±0.03)]mRNA和蛋白表达升高(均P<0.05)。Wnt5a的敲降抑制了LX-2细胞中α-SMA、COL1A1和Wnt5a mRNA和蛋白的表达,抑制了LX-2细胞的增殖能力、细胞集落形成能力和迁移能力(均P<0.05),而促进了细胞的衰老(P<0.05)。生物信息学网站预测结果显示Wnt5a与34个miRNAs有靶向关系,STRING数据库分析表明Wnt5a与10个蛋白相互作用密切。结论Wnt5a通过改变细胞的增殖、迁移、衰老等生物学功能,进而实现促进肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 wnt5a 增殖 迁移 衰老
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Wnt5a信号通路在肿瘤中作用机制
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作者 陈越 沈芳荣 陈友国 《医学理论与实践》 2023年第4期569-571,555,共4页
Wnt5a是非典型Wnt通路的重要成员,可与不同的受体结合,参与激活多个非典型的Wnt信号通路。Wnt5a信号通路在正常发育过程发挥着重要的作用,包括增殖、分化、迁移等。Wnt5a信号的异常激活或抑制则成为肿瘤发生发展中重要的一部分,可作为... Wnt5a是非典型Wnt通路的重要成员,可与不同的受体结合,参与激活多个非典型的Wnt信号通路。Wnt5a信号通路在正常发育过程发挥着重要的作用,包括增殖、分化、迁移等。Wnt5a信号的异常激活或抑制则成为肿瘤发生发展中重要的一部分,可作为致癌基因或抑癌基因在不同的肿瘤中发挥不同的作用,本文将对Wnt5a信号在肿瘤中可能的作用机制进行综述。 展开更多
关键词 wnt5a WNT信号 Fzd ROR 肿瘤
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Wnt5a在糖尿病前期及糖尿病中的表达差异及其与糖尿病前期患者免疫炎症的相关性分析
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作者 王婷婷 刘玉苓 +2 位作者 孙佩佩 韩琳 王霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2619-2623,共5页
目的:分析Wnt蛋白家族成员5a(Wnt5a)在糖尿病前期及糖尿病中的表达差异及其与糖尿病前期患者免疫炎症的相关性。方法:将2020年11月至2021年11月期间枣庄市立医院收治的糖尿病前期者64例作为A组,糖尿病患者51例作为B组,体检的健康人群50... 目的:分析Wnt蛋白家族成员5a(Wnt5a)在糖尿病前期及糖尿病中的表达差异及其与糖尿病前期患者免疫炎症的相关性。方法:将2020年11月至2021年11月期间枣庄市立医院收治的糖尿病前期者64例作为A组,糖尿病患者51例作为B组,体检的健康人群50例作为C组。采集3组基线资料,测定Wnt5a水平,分析Wnt5a在糖尿病前期、糖尿病中的表达差异,测定免疫炎症相关指标,分析Wnt5a与糖尿病前期患者免疫炎症的相关性。ROC曲线分析Wnt5a对糖尿病前期、糖尿病的预测价值,确定其截断值,用于临床疾病预测。结果:与B组相比,A组Wnt5a水平、免疫炎症指标Th1、Th17、Th22、IFN-γ、IL-17A、IL-22水平降低(P<0.05)。Logistic回归分析显示空腹血糖、Wnt5a、Th1、Th17、Th22、IFN-γ、IL-17A、IL-22是影响糖尿病前期发生的独立危险因素(P<0.05)。Wnt5a与糖尿病前期患者免疫炎症相关指标Th1、Th17、Th22、IFN-γ、IL-17A、IL-22均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,Wnt5a预测糖尿病前期、糖尿病的AUC值分别为0.921、0.897,AUC均>0.7,表明Wnt5a对糖尿病前期、糖尿病发生的预测价值较高(P<0.05)。结论:Wnt5a在糖尿病前期、糖尿病中的表达具有一定差异,当42.38 pg/ml≤Wnt5a水平<62.50 pg/ml时为糖尿病前期,当Wnt5a水平≥62.50 pg/ml时则说明已经从糖尿病前期过渡至糖尿病,且认为Wnt5a与糖尿病前期患者免疫炎症有关,可能是通过放大糖尿病前期患者局部免疫炎症增加胰岛素抵抗程度,最终导致糖尿病发生。 展开更多
关键词 Wnt蛋白家族成员5a 糖尿病前期 糖尿病 免疫炎症
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肝细胞肝癌中Wnt5a、β-catenin和E-cadherin蛋白的表达及临床意义 被引量：13
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作者 刘晓红 周航波 +3 位作者 马恒辉 周志毅 陆珍凤 周晓军 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期400-403,共4页
目的初步探讨Wnt5 a、β-catenin和E-cadherin的表达与肝细胞肝癌(HCC)发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组化ABC及EnVision方法,检测30例HCC(包括10例尸检样本)癌旁、癌组织中Wnt5a、β-catenin和E-cadherin的表达,结合Ki-67进行... 目的初步探讨Wnt5 a、β-catenin和E-cadherin的表达与肝细胞肝癌(HCC)发生、发展和转移的关系。方法采用免疫组化ABC及EnVision方法,检测30例HCC(包括10例尸检样本)癌旁、癌组织中Wnt5a、β-catenin和E-cadherin的表达,结合Ki-67进行统计学分析。结果对比于癌旁组织,83%(25/30)的HCC癌组织内Wnt5a蛋白低或缺失表达(P<0.001),其异常表达还相关于高的肿瘤分期(P=0.010)、高的Ki-67指数(P=0.013),以及β-catenin(P=0.025)和E-cadherin(P=0.003)的膜下降表达。癌组织中β-catenin膜下降表达相关于E-cadherin的膜下降表达(P=0.047)。80%(24/30)HCC癌组织中E-cadherin膜下降表达,相关于高的肿瘤分期(P=0.048)、高的K i-67指数(P=0.042)和尸检组肿瘤转移的发生(P=0.033)。结论Wnt5a缺失表达是HCC进展中的频发事件,并相关于β-catenin和E-cadherin的异常表达。Wnt5a在HCC中发挥肿瘤抑制基因样的作用,该蛋白极可能是一个有用的HCC预后不良指标。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 wnt5a Β-CATENIN E-CADHERIN
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Wnt5a基因在血液病及白血病细胞株中的表达 被引量：10
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作者 李招权 司维柯 +2 位作者 潘静 袁媛 邹全明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期927-930,共4页
本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:... 本研究观察Wnt5a在部分血液病及白血病细胞株中的表达情况,为进一步研究Wnt5a在血液肿瘤中的作用及其机制打下基础。用人淋巴细胞分离液分离外周血和骨髓单个核细胞,以RT-PCR检测31例病例标本及3种白血病细胞株中Wnt5a的表达。结果表明:5例AML中4例均为阴性或弱阳性,仅1例完全缓解的病例表达呈强阳性。K562、HL-60细胞的Wnt5a表达也为阴性,Jurkat细胞的Wnt5a表达阳性。6例CML的Wnt5a表达均为阴性。4例ALL中3例为表达阳性或弱阳性,1例表达为阴性;2例CLL为阴性表达;2例MM中Wnt5a表达1例为弱阳性,1例为阴性;3例淋巴瘤中有1例为弱阳性,2例为阴性;2例AA、2例IDA、3例ITP、1例ET及PVWnt5a表达均为阳性或弱阳性。结论:在31例血液病标本及髓系白血病细胞株中,除ALL外,有明显的Wnt5a表达缺失或降低,而非恶性血液病例中Wnt5a表达普遍呈阳性,提示Wnt5a的表达下调可能与髓系白血病的发生有关。 展开更多
关键词 wnt5a 血液病 白血病细胞株 基因表达
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哮喘大鼠肺组织中Wnt5a/JNK信号通路相关分子表达增强 被引量：7
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作者 韩亭亭 曹茵茵 +2 位作者 田丽君 冯学斌 王跃嗣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期325-327,332,共4页
目的研究Wnt5a/JNK信号通路相关分子在哮喘大鼠肺组织中的表达。方法将实验大鼠随机分为正常组和哮喘组,成功复制哮喘模型后,通过HE染色观察气道病理改变,实时荧光定量PCR检测肺组织和血液中Wnt5a mRNA的表达,Western blot法检测肺组织... 目的研究Wnt5a/JNK信号通路相关分子在哮喘大鼠肺组织中的表达。方法将实验大鼠随机分为正常组和哮喘组,成功复制哮喘模型后,通过HE染色观察气道病理改变,实时荧光定量PCR检测肺组织和血液中Wnt5a mRNA的表达,Western blot法检测肺组织中磷酸化的c-Jun(p-c-Jun),磷酸化的c-Jun N端激酶(JNK)蛋白的表达。结果与正常组相比,哮喘组支气管黏膜增厚,褶皱增多,管腔狭窄;气管和血管周围有炎细胞的浸润。气道壁与平滑肌层显著变厚。哮喘组大鼠肺组织和血液中Wnt5a mRNA与对照组比较表达上调,p-c-Jun,p-JNK蛋白表达增加。结论哮喘大鼠的Wnt5a、p-JNK、p-c-Jun表达增强。 展开更多
关键词 wnt5a 哮喘 C-JUN N端激酶
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Wnt5a与Syndecan-1在小鼠脓毒症致急性肺损伤中的表达研究 被引量：11
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作者 齐颖 李真玉 +1 位作者 王斌 陈兵 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期43-48,F0003,共7页
目的研究Wnt5a及Syndecan-1的表达在脓毒症致急性肺损伤（ALI）模型中的作用。方法制备脓毒症致ALI动物模型，小鼠随机分为ALI组和对照组。小鼠按时间点分为1、3、5、8、12、24h，每组8只，研究血清Wnt5a及Syndecan-1浓度、血管通透性... 目的研究Wnt5a及Syndecan-1的表达在脓毒症致急性肺损伤（ALI）模型中的作用。方法制备脓毒症致ALI动物模型，小鼠随机分为ALI组和对照组。小鼠按时间点分为1、3、5、8、12、24h，每组8只，研究血清Wnt5a及Syndecan-1浓度、血管通透性及肺组织病理的改变。ALI组腹腔注射大肠杆菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），对照组注射等体积生理盐水，取血保留上清备用，采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（EusA）测定血清Wm5a及Syndecan-1的浓度；小鼠左肺组织进行HE染色，右肺上叶进行匀浆提取蛋白，Westernblot检测Wnt5a蛋白的表达；右肺下叶进行组织mRNA的提取，并进行逆转录及Real—timePCR观察Syndecan-1基因的表达水平；尾静脉注射伊文思蓝（Evansblue，EB）观察肺血管渗透性；透射电镜下观察右中叶肺组织的血管内皮细胞结构改变。结果ALI组的肺组织肺泡壁增厚，血细胞及炎性细胞大量渗出；随着肺损伤程度加重，血清Wnt5a及Syndecan-1浓度逐渐升高，分别在5h及3h达峰值，在24h内维持较高浓度；Wnt5a蛋白表达水平随肺损伤程度加重而表达增加，Syndecan-1 mRNA在3h开始表达上调；甲酰胺中伊文思蓝的浓度随肺损伤程度加重逐渐升高，与对照组比较，电镜下观察到肺血管内皮细胞肿胀显著，细胞内空泡增加，部分细胞内线粒体肿胀，细胞间距增宽，基膜与内皮细胞分离。结论肺脏血管内皮损伤发生在Au早期，血清WntSa与Syndecan-1浓度改变与肺损伤严重程度一致，二者作为ALI的早期生物学标志物为临床液体管理提供一定指导作用。 展开更多
关键词 wnt5a 多配体蛋白聚糖(Syndecan-1) 脂多糖(LPS) 脓毒症 急性肺损伤(ALI) 液体管理
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Wnt5a在肺癌A549细胞球增殖和上皮间质转化中的作用及机制研究 被引量：6
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作者 胡欣春 徐建军 +2 位作者 喻东亮 彭金华 魏益平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第18期1890-1894,共5页
目的研究Wnt5a在A549细胞球增殖和EMT中的作用及相关机制。方法利用无血清培养出A549细胞球后应用流式细胞术对其进行CD133+CD44+表达检测。实验分为对照组、Wn5a组、p38组和Wnt5a+p38组。应用Western blot观察各组Wnt5a、p-p38、β-cat... 目的研究Wnt5a在A549细胞球增殖和EMT中的作用及相关机制。方法利用无血清培养出A549细胞球后应用流式细胞术对其进行CD133+CD44+表达检测。实验分为对照组、Wn5a组、p38组和Wnt5a+p38组。应用Western blot观察各组Wnt5a、p-p38、β-catenin、Vimentin和E-cadherin蛋白的表达变化,并利用MTT和裸鼠成瘤实验观察Wnt5a shRNA慢病毒感染前后A549细胞球的生长抑制率和成瘤能力。结果流式细胞术检测A549细胞球中CD133+CD44+阳性率为60.5%;Wnt5a蛋白在Wnt5a组和Wnt5a+p38组中的表达较对照组明显下调(P<0.05),p-p38蛋白、β-catenin蛋白、Vimentin蛋白在Wnt5a组、p38组和Wnt5a+p38组的表达明显低于对照组(P<0.05),而E-cadherin蛋白在上述3组中的表达显著高于对照组(P<0.05)。Wnt5a shRNA慢病毒感染A549细胞球12、24 h和48 h时抑制率显著高于对照组(P<0.05),并且该细胞的成瘤能力较对照组显著下调。结论下调Wnt5a表达可抑制A549细胞球的增殖及EMT能力,可望成为治疗非小细胞肺癌的靶点。 展开更多
关键词 wnt5a 肺癌干细胞 增殖 上皮间质转化
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补肾活血汤石油醚提取物对BMSCs迁移过程中Wnt5a/PKC通路的影响 被引量：10
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作者 罗辉 吴志方 +4 位作者 沈玮 胡流超 王斌 余丽娟 罗毅文 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2462-2468,共7页
目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾... 目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾活血汤石油醚提取物0、25、50、100、200μg/m L剂量组的细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR检测Wnt5a、蛋白激酶C(PKC)表达情况。结果第3代BMSCs表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,而CD45表达阴性;细胞划痕6 h及12 h后,药物各剂量组细胞迁移速度明显高于空白组(P<0.05,P<0.01);Transwell实验中100μg/m L补肾活血汤石油醚提取物为促细胞迁移最佳剂量,差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR结果显示与空白对照组比较,药物各剂量组的Wnt5a mRNA水平均升高(P<0.05,P<0.01),而与空白对照组的PKC mRNA水平比较,药物只有100μg/m L剂量mRNA表达水平升高(P<0.01);Western blot结果表明药物组各剂量的Wnt5a、PKC蛋白表达较空白对照组都明显升高(P<0.01),均且以100μg/m L剂量最高(P<0.01)。结论补肾活血汤石油醚提取物可以促进BMSCs体外迁移,其作用机制可能与Wnt5a/PKC信号通路有关。 展开更多
关键词 补肾活血汤 信号通路 体外迁移 骨髓间充质干细胞 wnt5a PKC
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Wnt5a在小鼠牙骨质发育中的表达特点及其对成牙骨质细胞分化的影响 被引量：5
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作者 包幸福 倪宇昕 +4 位作者 李莹 郭小凯 王玉琢 方蛟 胡敏 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期461-465,693,共6页
目的:探讨Wnt家族5A蛋白(Wnt5a)在小鼠出生后牙骨质中的表达特点以及其对体外培养成牙骨质细胞分化的影响,阐明Wnt非经典通路调控牙根发育的机制。方法:选择出生后0.5、4.5、10.5、16.5、20.5、24.5、26.5和30.5d昆明小鼠并按以上相应... 目的:探讨Wnt家族5A蛋白(Wnt5a)在小鼠出生后牙骨质中的表达特点以及其对体外培养成牙骨质细胞分化的影响,阐明Wnt非经典通路调控牙根发育的机制。方法:选择出生后0.5、4.5、10.5、16.5、20.5、24.5、26.5和30.5d昆明小鼠并按以上相应时间点分组,每组3只;在相应时间点采用脱臼法处死小鼠,分离下颌第一磨牙及牙周组织。免疫组织化学染色法观察小鼠牙体和牙周组织中Wnt5a的表达特点。将小鼠成牙骨质细胞OCCM30分为实验组和对照组。实验组加入200μg·L^(-1)重组Wnt5a蛋白,对照组无添加;提取细胞总RNA。RT-PCR法检测2组OCCM30细胞中Ocn、Opn、Alp、Bsp、Wnt5a和Runx-2基因的相对表达水平。结果:小鼠出生后0.5d,第一磨牙牙胚中无Wnt5a阳性表达;出生后4.5d,成釉细胞和成牙本质细胞中Wnt5a阳性表达较强;出生后16.5d,可见成牙骨质细胞中Wnt5a呈阳性表达;出生后20.5~30.5d,成牙本质细胞和牙周膜细胞中Wnt5a呈阳性表达。与对照组比较,实验组成牙骨质细胞中Ocn和Alp基因相对表达水平降低(P<0.05)。结论:Wnt5a在牙根发育过程中的表达特点为从无到有,呈现规律性表达;Wnt5a下调分化基因的表达,在牙骨质发育中发挥重要作用。 展开更多
关键词 wnt5a 牙发育 牙骨质 成牙骨质细胞 免疫组织化学
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