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CLONING AND SEQUENCING OF THE ALLOPHYCOCYANIN GENES FROM SPIRULINA MAXIMA (CYANOPHYTA) 被引量:2
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作者 秦松 曾呈奎 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 1998年第S1期6-11,共6页
The genes coding for the α-and β-subunit of allophycocyanin (apcA and apcB) fromthe cyanophyte Spirulina maxima were cloned and sequenced. The results revealed 44.4% of nucleotidesequence similarity and 30.4% of sim... The genes coding for the α-and β-subunit of allophycocyanin (apcA and apcB) fromthe cyanophyte Spirulina maxima were cloned and sequenced. The results revealed 44.4% of nucleotidesequence similarity and 30.4% of similarity of deduced amino acid sequence between them. The aminoacid sequence identities between S. maxima and S. platensis are 99 .4% for α subunit and 100% for βsubunit. 展开更多
关键词 allophycocyanin gene CLONING CYANOPHYTA SPIRULINA MAXIMA
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钝顶节旋藻别藻蓝蛋白基因克隆、分析及重组表达蛋白荧光活性的研究
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作者 毕莹 郭雅琳 +2 位作者 尚孟慧 徐晓婷 臧晓南 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期61-70,共10页
为探究蓝藻藻胆体核心色素蛋白-别藻蓝蛋白单个亚基的光学活性和功能,本研究克隆了钝顶节旋藻(Arthrospira platensis FACHB314)中的脱辅基别藻蓝蛋白基因apcAB及其亚基基因apcA和apcB。节旋藻基因组中apcAB全长共1056 bp,由apcA和apcB... 为探究蓝藻藻胆体核心色素蛋白-别藻蓝蛋白单个亚基的光学活性和功能,本研究克隆了钝顶节旋藻(Arthrospira platensis FACHB314)中的脱辅基别藻蓝蛋白基因apcAB及其亚基基因apcA和apcB。节旋藻基因组中apcAB全长共1056 bp,由apcA和apcB串联组成,中间间隔84 bp。其中,apcA和apcB基因的全长均为486 bp,且均编码161个氨基酸,预测分子量分别约为17.39和17.33 kDa,它们分别编码的α和β亚基均属于Globin_like超级家族,系统进化树分析显示其氨基酸序列在蓝藻和节旋藻中较为保守。将克隆出的亚基基因apcA、apcB分别同前期A.platensis FACHB314中获得的藻蓝胆素合成相关基因ho和pcyA以及色基裂合酶基因(cpcE、cpcF、cpcU、cpcS、cpcT)共同转化至大肠杆菌中,获得重组别藻蓝蛋白亚基菌株E.coli HPEFUSTA、E.coli HPEFUSTB。SDS-PAGE和Western Blot均显示重组菌株中已成功表达别藻蓝蛋白单亚基。荧光检测结果显示,在600 nm波长激发下,两株重组菌株在640 nm处均出现了别藻蓝蛋白特征荧光发射峰。这些结果表明在重组大肠杆菌中表达的脱辅基别藻蓝蛋白的单亚基可以和藻蓝胆素结合,形成有光学活性的别藻蓝蛋白,这为研究蓝藻中藻胆体的组装和功能提供有效的元件,为别藻蓝蛋白在医药、荧光检测方面的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 节旋藻 别藻蓝蛋白基因 重组表达 荧光活性
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坛紫菜别藻蓝蛋白α,β亚基基因的克隆和序列分析 被引量:4
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作者 左正宏 邓元告 +2 位作者 陈奕欣 赵扬 郑微云 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期148-153,共6页
以野生坛紫菜色素体DNA为模板,通过PCR扩增获得编码坛紫菜别藻蓝蛋白α亚基和β亚基的序列及两者之间的间隔序列,该序列全长为1055bp,其中编码α和β亚基的序列均为486bp,间隔序列为83bp,该序列与GenBank收录的其他4种红藻相关序... 以野生坛紫菜色素体DNA为模板,通过PCR扩增获得编码坛紫菜别藻蓝蛋白α亚基和β亚基的序列及两者之间的间隔序列,该序列全长为1055bp,其中编码α和β亚基的序列均为486bp,间隔序列为83bp,该序列与GenBank收录的其他4种红藻相关序列的同源性在75.6%~87.4%,与2种蓝藻的同源性分别为66.9%,68.5%,其中编码区同源性更高。 展开更多
关键词 坛紫菜 别藻蓝蛋白 基因克隆 序列分析
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钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白α、β亚基基因的克隆及其原核表达 被引量:2
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作者 姜晓杰 高金亮 +3 位作者 祁美荣 徐萌杰 王文杰 李炜 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第4期356-359,363,共5页
目的克隆钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白(allophycocyanin,APC)α、β亚基的基因序列,分别构建该蛋白的α和β亚基的原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达。方法 PCR扩增钝顶螺旋藻APC基因(apc)序列,克隆至p GEM-T easy载体中,测序分析插入片... 目的克隆钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白(allophycocyanin,APC)α、β亚基的基因序列,分别构建该蛋白的α和β亚基的原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达。方法 PCR扩增钝顶螺旋藻APC基因(apc)序列,克隆至p GEM-T easy载体中,测序分析插入片段的正确性。以克隆的apc基因为模板,分别扩增APC的α和β亚基的编码基因apc A和apc B,测序分析正确后,分别克隆入表达载体p GEX-4T-1中,构建重组质粒p GEX-4T-apc A和p GEX-4T-apc B。将重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)p Lys S感受态细胞中,IPTG诱导表达,表达产物经Glutathione Sepharose TM 4Fast Flow树脂纯化,Bradford法测定纯化蛋白的浓度。结果成功克隆了钝顶螺旋藻的APCα和β亚基的编码基因apc A和apc B,构建的重组质粒经测序证明构建正确,表达的融合蛋白α-APC-GST和β-APC-GST的相对分子质量均为43 000,其中α-APC-GST主要以可溶性形式存在,表达量占菌体总蛋白的32.1%,纯化后的蛋白纯度达85%,蛋白浓度为0.3 mg/ml;β-APC-GST主要以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的31.4%,纯化后的蛋白纯度达65.4%,蛋白浓度为0.1 mg/ml。结论已成功克隆并在大肠埃希菌中表达了钝顶螺旋藻APC的α和β亚基。 展开更多
关键词 钝顶螺旋藻 别藻蓝蛋白亚基 基因 原核表达
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