Betacellulin与急性药物性肝损伤动物模型的预后指标研究

1

作者 范玉丽 余娇 《肝脏》 2018年第4期316-318,共3页

目的检测急性药物性肝损伤小鼠在诱导发病后不同时间点血清中Betacellulin表达的变化以及此变化是否可作为肝损伤的预后指标。方法利用对乙酰氨基酚(APAP)灌胃野生型昆明鼠诱导急性肝损伤模型,利用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时定量PCR(q... 目的检测急性药物性肝损伤小鼠在诱导发病后不同时间点血清中Betacellulin表达的变化以及此变化是否可作为肝损伤的预后指标。方法利用对乙酰氨基酚(APAP)灌胃野生型昆明鼠诱导急性肝损伤模型,利用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时定量PCR(qPCR)法分别检测不同发病时间点小鼠血清和肝细胞中Betacellulin的水平。结果急性药物性肝损伤小鼠随着发病时间变长,血清内Betacellulin水平逐渐升高。结论发病一定时间后的急性药物性肝损伤小鼠血清Betacellulin明显升高(与诱导发病前相比),与Betacellulin在肝细胞表达变化相一致,提示其可作为急性药物性肝损伤预后的一个标志物。 展开更多

关键词 betacellulin 急性药物性肝损伤 预后

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Betacellulin与胰岛β细胞再生

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作者 李鸿 罗敏 《国际内分泌代谢杂志》 2006年第4期251-253,共3页

Betacellulin(BTC)属表皮生长因子(EGF)家族,在胰腺中高表达,目前认为其可能通过erbB-1e、rbB-4受体或其特异受体促进胰岛细胞的增殖,诱导非胰岛β细胞向β细胞的分化,对糖尿病动物模型的研究显示高血糖可得到缓解。BTC单核苷酸多态性... Betacellulin(BTC)属表皮生长因子(EGF)家族,在胰腺中高表达,目前认为其可能通过erbB-1e、rbB-4受体或其特异受体促进胰岛细胞的增殖,诱导非胰岛β细胞向β细胞的分化,对糖尿病动物模型的研究显示高血糖可得到缓解。BTC单核苷酸多态性可能还与某些人群2型糖尿病的发生有关。BTC已成为近年来逐渐受到关注的与胰岛密切相关的因子。 展开更多

关键词 betacellulin 胰岛 糖尿病 细胞再生

原文传递

大鼠BTCe对体外培养胰岛保护作用及对糖尿病大鼠降糖作用的研究 被引量：1

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作者 李鸿 周伟斌 +9 位作者 李凤英 顾燕云 田璟琰 钱镭 张迪 周文中 吴国亭 骆天红 李果 罗敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1190-1199,共10页

β细胞素(betacellulin,BTC)是目前较受关注的胰岛再生因子,但其促胰腺、胰岛再生的机制不清.BTCe是betacellulin的功能片段,促细胞增殖能力与BTC相同.实验通过原核表达方法获得BTCe蛋白,MTT法证实其促3T3-L1细胞增殖能力.将BTC或BTCe... β细胞素(betacellulin,BTC)是目前较受关注的胰岛再生因子,但其促胰腺、胰岛再生的机制不清.BTCe是betacellulin的功能片段,促细胞增殖能力与BTC相同.实验通过原核表达方法获得BTCe蛋白,MTT法证实其促3T3-L1细胞增殖能力.将BTC或BTCe作用于原代培养的大鼠胰岛,观察其对胰岛分泌的急性及长期影响作用,实时定量PCR及免疫荧光检测胰岛内关键基因的表达.将质粒pcDNA3.1-BTCe注射入链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肌肉中,观察对大鼠血糖的影响作用.加入BTC或BTCe可明显提高体外培养大鼠胰岛的GSIS水平,但实时定量PCR及免疫荧光显示胰岛内4种关键基因的表达并无明显变化;pcDNA3.1-BTCe转染糖尿病大鼠15～20天后血糖出现下降,糖耐量明显改善;免疫荧光显示:胰腺内有大量PDX-1+的导管细胞及胰岛素阳性细胞出现.推测BTC及BTCe对体外长期培养的大鼠胰岛具有一定的保护作用,可能通过促进胰腺内PDX-1+的导管细胞及胰岛素阳性细胞的增殖、诱导对STZ诱导的糖尿病大鼠的高血糖具有一定缓解作用. 展开更多

关键词 betacellulin 克隆 融合蛋白 胰岛 转染 糖尿病

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β细胞素在肝癌中的表达及其与肝癌侵袭能力的相关性研究 被引量：2

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作者 李军 高远 +2 位作者 张光亚 安家泽 窦科峰 《陕西医学杂志》 CAS 2014年第2期158-159,251,共3页

目的:检测β细胞素(BTC)在肝癌组织及癌旁组织中的表达并探讨其与肝癌侵袭能力的相关性。方法:采用免疫组织化学法检测BTC在肝癌组织和癌旁组织中的表达水平。结果:BTC在肝癌组织中的表达与癌旁组织相比存在高表达的现象,且肿瘤直径≥3c... 目的:检测β细胞素(BTC)在肝癌组织及癌旁组织中的表达并探讨其与肝癌侵袭能力的相关性。方法:采用免疫组织化学法检测BTC在肝癌组织和癌旁组织中的表达水平。结果:BTC在肝癌组织中的表达与癌旁组织相比存在高表达的现象,且肿瘤直径≥3cm和有包膜浸润的肝癌组织中BTC也存在高表达的现象,而且这些差异有统计学意义(P<0.05)。结论:BTC表达与肝癌的增殖、侵袭能力密切相关,可能在肝癌发生、发展过程中起着重要的作用。 展开更多

关键词 肝肿瘤 免疫组织化学 Β细胞素

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β细胞素基因-226A>G多态性与糖耐量减低人群的相关性研究 被引量：1

5

作者 邓德耀 袁文丽 +6 位作者 刘春林 赵东岩 杨双娟 高宗鹰 徐红云 李奕平 方芳 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期43-48,共6页

目的探讨β细胞素基因(BTC)-226A>G多态性与云南省昆明地区糖耐量减低人群的相关性。方法根据口服75 g葡萄糖耐量试验(OGTT)将1 076例云南省昆明地区人群分为糖耐量减低组(IGT)、2型糖尿病组(T2DM)和健康对照组(NGT),用稳态模型法胰... 目的探讨β细胞素基因(BTC)-226A>G多态性与云南省昆明地区糖耐量减低人群的相关性。方法根据口服75 g葡萄糖耐量试验(OGTT)将1 076例云南省昆明地区人群分为糖耐量减低组(IGT)、2型糖尿病组(T2DM)和健康对照组(NGT),用稳态模型法胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、稳态模型法β细胞功能指数(HOMA-β)、早期胰岛素分泌指数(ΔI30/ΔG30)等进行组间比较。同时采集血样后提取基因组DNA,应用高分辨率熔解曲线分析方法(HRM)检测BTC基因-226A>G基因型,观察3组人群中基因型和等位基因的分布情况,同时分析糖耐量减低人群中不同基因型相关临床变量的差异性。结果①BTC基因-226A>GGG基因型及A等位基因在T2DM组中的频率分别为0.133和0.657,在IGT组中为0.085和0.715,差异均无统计学意义(P>0.05);G等位基因在T2DM组中为0.343,在IGT组中为0.285,两组之间差异具有统计学意义(P=0.041)。②IGT组-226位点AA基因型和AG+GG基因型的表型间的空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(Fins)、OGTT 2 h血糖(PBG)、OGTT 2 h胰岛素(PINS)、HOMA-IR、HOMA-β和ΔI30/ΔG30比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BTC基因-226A>G多态性可能与云南省昆明地区人群糖耐量减低相关,推测含有G等位基因的糖耐量减低人群更易进展为T2DM。 展开更多

关键词 β细胞素基因 多态性 糖耐量减低 2型糖尿病 高分辨率熔解曲线

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大鼠BTCe蛋白原核表达及功能鉴定

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作者 李鸿 周伟斌 +5 位作者 顾燕云 周文中 张迪 骆天红 李果 罗敏 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期51-53,共3页

目的原核表达获得大量具有生物活性的大鼠BTCe蛋白。方法RT-PCR法从大鼠肾脏中扩增出150bp BTCe片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-BTCe。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法纯化获得融合蛋白,凝血酶酶切后获... 目的原核表达获得大量具有生物活性的大鼠BTCe蛋白。方法RT-PCR法从大鼠肾脏中扩增出150bp BTCe片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-BTCe。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,亲和层析法纯化获得融合蛋白,凝血酶酶切后获得目的蛋白,经SDS-PAGE、Western blot及质谱鉴定。以0.5nmol/L BTCe作用于3T3-L1细胞连续培养4d,MTT法检测其促增殖能力。结果融合蛋白以水溶性形式分泌于大肠杆菌BL-21胞浆中。酶切后的目的蛋白经质谱证实其与BTCe蛋白氨基酸序列相符;作用于3T3-L1细胞可明显促进其增殖。结论大鼠BTCe蛋白在pGEX-4T-2原核表达载体可获得高效表达,所纯化蛋白具有促进3T3-L1细胞体外增殖的作用。 展开更多

关键词 BTCe蛋白 克隆 融合蛋白

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长期体外培养大鼠胰岛的动态研究

7

作者 李凤英 李鸿 +7 位作者 周伟斌 顾燕云 张迪 周文中 骆天红 李果 陈名道 罗敏 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期692-694,F0002,共4页

目的观察长期体外培养大鼠胰岛在分泌功能、基因表达及免疫荧光组织化学染色法的动态变化。方法采用胶原酶灌注消化和nextran密度梯度离心分离、纯化获得大鼠胰岛,连续培养20 d,定期检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS);实时聚合酶链反应(... 目的观察长期体外培养大鼠胰岛在分泌功能、基因表达及免疫荧光组织化学染色法的动态变化。方法采用胶原酶灌注消化和nextran密度梯度离心分离、纯化获得大鼠胰岛,连续培养20 d,定期检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS);实时聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光组织化学染色法检测胰高糖素(Glu)、胰岛素、胰腺十二指肠同源盒基因(PDX)-1、葡萄糖转运蛋白(Glut)-2基因mRNA及蛋白水平的表达。结果连续培养胰岛的GSIS水平持续下降;但RT-PCR及免疫荧光显示随培养时间延长,胰岛内关键基因表达并未见明显减弱。结论长期体外培养大鼠胰岛的胰岛素分泌功能持续下降,并非由胰岛素含量减少所致,可能存在更深层次的原因。 展开更多

关键词 原代培养 胰岛 葡萄糖刺激的胰岛素分泌

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人BTC蛋白表达及生物学活性鉴定

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作者 陈寒蓓 董艳 苏青 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期185-188,共4页

目的获得大量具有生物活性的人成熟β细胞素(BTC)蛋白。方法以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,PCR扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,并按读框克隆入原核细胞表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a(+)-hBTC。重组质粒转化大肠杆菌BL21,经... 目的获得大量具有生物活性的人成熟β细胞素(BTC)蛋白。方法以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,PCR扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,并按读框克隆入原核细胞表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a(+)-hBTC。重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导及亲和层析法纯化获得融合蛋白,运用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。以不同浓度BTC连续5 d作用于NIH3T3细胞,MTT比色法检测细胞增殖能力。结果融合蛋白以水溶性形式分泌于大肠杆菌BL-21胞浆中,其作用于NIH3T3细胞可明显促进细胞增殖。结论人成熟BTC蛋白在pET32a(+)表达系统中得到高效表达,所纯化蛋白具有促进NIH3T3细胞体外增殖的作用。 展开更多

关键词 Β细胞素 克隆 表达载体 纯化蛋白质

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2型糖尿病与β细胞素基因外显子1 Cys7Gly多态性的相关性研究

9

作者 李金金 张喆 +1 位作者 刘德敏 李金娥 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期364-366,共3页

目的探讨β细胞素基因外显子1Cys7Gly多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系。方法采用聚合酶链反应,限制性片段长度多态法检测天津地区211名T2DM患者和102名正常对照者β细胞素基因外显子1基因型,比较两组G等位基因频率差异。结果在BMI≥24kg... 目的探讨β细胞素基因外显子1Cys7Gly多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系。方法采用聚合酶链反应,限制性片段长度多态法检测天津地区211名T2DM患者和102名正常对照者β细胞素基因外显子1基因型,比较两组G等位基因频率差异。结果在BMI≥24kg/m2受试者,对照组G等位基因频率为7.3%,T2DM组为0.4%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论β细胞素基因外显子1Cys7Gly多态性可能与部分国人T2DM发生相关,TG基因型在T2DM发病中可能具有一定保护作用。 展开更多

关键词 Β细胞素 糖尿病 2型 限制性片段长度多态性

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β细胞素基因多态性与2型糖尿病的相关性

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作者 于俊霞 田宁艳 杨渭临 《山西医科大学学报》 CAS 2012年第10期735-738,共4页

目的在陕西人群中筛查β细胞素基因(BTC)外显子1 TGC19GGC、5'非翻译区A-226G的基因多态性,并探讨这两个位点基因多态性与2型糖尿病的相关关系。方法 2型糖尿病患者130例,健康对照96例;分别采用限制性片段长度多态性-PCR、等位基因... 目的在陕西人群中筛查β细胞素基因(BTC)外显子1 TGC19GGC、5'非翻译区A-226G的基因多态性,并探讨这两个位点基因多态性与2型糖尿病的相关关系。方法 2型糖尿病患者130例,健康对照96例;分别采用限制性片段长度多态性-PCR、等位基因特异性引物-PCR对两个位点进行基因多态性的筛查。结果在β细胞素基因外显子1 TGC19GGC中,G等位基因、TG基因型频率在2型糖尿病组与健康对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。在β细胞素基因5'非翻译区A-226G中,G等位基因频率、GG基因型频率在2型糖尿病组与健康对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。两个位点单体型总体分布在2型糖尿病组与健康对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05);利用SHEsis软件分析,两个位点间不存在有意义的连锁不平衡(D'=0.386,r^2=0.009)。结论在陕西人群中,BTC基因外显子1 TGC19GGC、5'非翻译区A-226G存在基因多态性。BTC基因外显子1 TGC19GGC基因多态性与2型糖尿病的发病有相关性;BTC基因5'非翻译区A-226G基因多态性与2型糖尿病的发病无相关性。两个位点不存在有意义的连锁不平衡。 展开更多

关键词 Β细胞素 单体型 连锁不平衡

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大鼠β细胞素蛋白的表达、纯化及生物学活性鉴定 被引量：1

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作者 安家泽 宋振顺 +2 位作者 窦科峰 李开宗 韩骅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期284-286,共3页

目的:获得大量重组大鼠β细胞素并检测其活性。方法:用PCR法从大鼠肾组织中扩增534bp的β细胞素基因片段,并按读框克隆到原核表达载体pET28a(+)中。以构建的重组质粒pET28a-rBTC转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,在IPTG诱导下表达β细胞素蛋... 目的:获得大量重组大鼠β细胞素并检测其活性。方法:用PCR法从大鼠肾组织中扩增534bp的β细胞素基因片段,并按读框克隆到原核表达载体pET28a(+)中。以构建的重组质粒pET28a-rBTC转化大肠杆菌BL-21(DE3)菌株,在IPTG诱导下表达β细胞素蛋白,表达产物用SDS-PAGE和Westernblot检测。采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。结果:经IPTG诱导后,在大肠杆菌中可表达相对分子质量Mr为20000的目的蛋白。目的蛋白主要以包涵体的形式表达;表达量约占菌体蛋白总量的20%～30%。表达的目的蛋白与抗His标签抗体具有良好的反应性。结论:大鼠β细胞素基因在PET表达系统中得到高效表达;蛋白复性后能有效地促进NIH3T3细胞的体外增殖。 展开更多

关键词 Β细胞素 基因克隆 表达 蛋白质纯化

原文传递

大鼠β细胞素基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：1

12

作者 安家泽 宋振顺 +2 位作者 窦科峰 李开宗 韩骅 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第23期2141-2143,共3页

目的 :获得大量重组大鼠β细胞素 (BTC) ,为研究 β细胞素的功能及制备其抗体奠定基础 .方法 :利用PCR方法从大鼠肾组织扩增出 5 4 4bp的β细胞素基因片段并按读框克隆到原核表达载体 pET2 8a(+)上 ,得到重组质粒pET2 8a rBTC ,转化大... 目的 :获得大量重组大鼠β细胞素 (BTC) ,为研究 β细胞素的功能及制备其抗体奠定基础 .方法 :利用PCR方法从大鼠肾组织扩增出 5 4 4bp的β细胞素基因片段并按读框克隆到原核表达载体 pET2 8a(+)上 ,得到重组质粒pET2 8a rBTC ,转化大肠杆菌BL 2 1(DE3)菌株 ,IPTG诱导 β细胞素蛋白表达 ,SDS PAGE和Westernblot检测 .结果 :经IPTG诱导后 ,有明显的目的蛋白表达 ,分子量符合 β细胞素 ;表达的蛋白主要以包涵体形式存在 ;表达量约占菌体蛋白总量的2 0 %～ 30 % ;目的蛋白与抗His标签抗体具有良好的反应原性 .结论 :大鼠 β细胞素基因的克隆与表达为进一步开展 β细胞素蛋白功能和胰腺干细胞的研究奠定了基础 . 展开更多

关键词 Β细胞素 基因克隆 基因表达 pET载体

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不同品种醋炮制元胡对延胡索乙素提取率和固形物的影响 被引量：4

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作者 刘英杰 毛淑杰 +1 位作者 陈金春 陈春生 《浙江中医药大学学报》 CAS 2011年第2期246-248,共3页

[目的]探讨不同品种醋炮制元胡对延胡索乙素提取率和固形物的影响。[方法]选用延胡索正品药材的干燥块茎分别用18℃青花白醋、4℃龙门米醋、镇江米醋、天津翠波米醋、4℃珍极、上海天鱼米醋,按《中国药典》2005版延胡索炮制方法制备:每... [目的]探讨不同品种醋炮制元胡对延胡索乙素提取率和固形物的影响。[方法]选用延胡索正品药材的干燥块茎分别用18℃青花白醋、4℃龙门米醋、镇江米醋、天津翠波米醋、4℃珍极、上海天鱼米醋,按《中国药典》2005版延胡索炮制方法制备:每种醋平行炮制6份,每份500g元胡;采用液相色谱法测定元胡炮制品中延胡索乙素及固形物的含量。[结果]不同品种醋对元胡药材中延胡索乙素提取率的影响:18℃青花白醋>4℃龙门米醋>镇江米醋>天津翠波米醋>4℃珍极>上海天鱼米醋,对固形物得率的影响:上海天鱼米醋>天津翠波米醋>镇江米醋>4℃珍极>4℃龙门米醋>8℃青花白醋,且不同品种醋对元胡药材中延胡索乙素提取率和固形物得率的影响,存在显著性差异(P<0.05)。[结论]不同品种醋炮制元胡可影响其有效成分延胡索乙素的提取率和固形物的得率,从而影响其药用价值。 展开更多

关键词 醋炮制 元胡 延胡索乙素 提取率

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β细胞素下调对肝癌细胞增殖能力的影响及其机制探讨 被引量：1

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作者 李军 白娟 +1 位作者 窦科峰 安家泽 《陕西医学杂志》 CAS 2016年第6期643-645,655,共4页

目的:在肝癌细胞系中通过下调β细胞素(BTC)的表达研究其对肝癌细胞侵袭能力的影响并探究其影响机制。方法:通过siRNA转染下调BTC后,通过Transwell侵袭实验检测SMMC7721和MHCC97-H细胞的侵袭能力变化,并用RT-PCR和Western blot检测与肝... 目的:在肝癌细胞系中通过下调β细胞素(BTC)的表达研究其对肝癌细胞侵袭能力的影响并探究其影响机制。方法:通过siRNA转染下调BTC后,通过Transwell侵袭实验检测SMMC7721和MHCC97-H细胞的侵袭能力变化,并用RT-PCR和Western blot检测与肝癌侵袭能力相关的PI3K/AKT-XIAP信号通路的表达变化。结果:与阴性对照组相比,siRNA下调组中SMMC7721和MHCC97-H细胞的侵袭能力明显降低,PI3K/AKT-XIAP信号通路受到明显抑制。结论:下调BTC表达可能通过抑制PI3K/AKT-XIAP信号通路抑制肝癌细胞的侵袭能力。 展开更多

关键词 肝肿瘤 细胞增殖 Β细胞素 肿瘤抑制蛋白质类

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表皮生长因子样因子在LH峰效应中的作用及临床研究进展 被引量：3

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作者 王光演 牛志宏 冯云 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2014年第6期497-500,共4页

表皮生长因子样因子(epidermal growth factor-like factor)——双调蛋白(amphiregulin,Areg)、上皮调节蛋白(epiregulin,Ereg)和细胞调节素(betacellulin,BTC)通过旁分泌和自分泌方式介导黄体生成素(luteinizing hormone,LH)峰效应,从... 表皮生长因子样因子(epidermal growth factor-like factor)——双调蛋白(amphiregulin,Areg)、上皮调节蛋白(epiregulin,Ereg)和细胞调节素(betacellulin,BTC)通过旁分泌和自分泌方式介导黄体生成素(luteinizing hormone,LH)峰效应,从而诱导卵母细胞减数分裂恢复、卵丘扩展以及排卵。 展开更多

关键词 黄体生成素(LH)峰 双调蛋白(Areg) 上皮调节蛋白(Ereg) 细胞调节素(BTC)

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