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修饰的cry1Ac基因导入籼稻明恢81获得抗虫纯合系 被引量:13
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作者 曾千春 吴茜 +5 位作者 周开达 冯德江 王锋 苏军 IAltosaar 朱祯 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第6期519-524,共6页
采用细胞内定位技术对cry1Ac基因进行修饰 ,其表达产物定位于内质网及衍生自内质网的蛋白体。通过基因枪法成功地将经过修饰的cry1Ac基因导入到优良杂交籼稻恢复系明恢 81中。对潮霉素抗性植株的PCR和Southern检测及ELISA分析证实 ,修饰... 采用细胞内定位技术对cry1Ac基因进行修饰 ,其表达产物定位于内质网及衍生自内质网的蛋白体。通过基因枪法成功地将经过修饰的cry1Ac基因导入到优良杂交籼稻恢复系明恢 81中。对潮霉素抗性植株的PCR和Southern检测及ELISA分析证实 ,修饰的cry1Ac基因已整合到受体水稻品种中并得以表达 ,自交加代结合潮霉素筛选于T2 代获得转基因纯合系。抗虫性测试表明 ,部分转基因纯合系高抗二化螟 (Chilosuppressalis)。 展开更多
关键词 基因导入 籼稻 明恢81 抗虫纯合系 cryl Ac基因 抗虫基因 转基因水稻 基因枪法 生物检测
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苏云金芽孢杆菌cry1基因的PCR-RFLP鉴定分析 被引量:2
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作者 刘汝 闫建平 袁志明 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2005年第1期88-92,共5页
利用PCR RFLP技术对含有已知cry1基因的8株标准菌株和2株遗传工程菌进行了基因分析,证实了该方法的可行性.并在此基础上鉴定了分离保藏的70株B.t菌株的cry1型基因,结合SDS PAGE分析以及室内生物测定结果,讨论了基因型与蛋白表达及毒力... 利用PCR RFLP技术对含有已知cry1基因的8株标准菌株和2株遗传工程菌进行了基因分析,证实了该方法的可行性.并在此基础上鉴定了分离保藏的70株B.t菌株的cry1型基因,结合SDS PAGE分析以及室内生物测定结果,讨论了基因型与蛋白表达及毒力之间的关系. 展开更多
关键词 B.t cryl基因 SDS—PAGE 生物测定
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Cryptochromes mRNA Expression Under Mating and Black light Treatment on Helicoverpa armigera
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作者 倪慧 闫硕 +1 位作者 刘小侠 张青文 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2011年第3期20-23,30,共5页
[ Objective ] The paper was to confirm the effect of mating and black light treatment on cryptochromes mRNA expression of Hclicoverpa armigera. [ Method ] Quantitative real-time PCR ( SYBR Green) technique was appli... [ Objective ] The paper was to confirm the effect of mating and black light treatment on cryptochromes mRNA expression of Hclicoverpa armigera. [ Method ] Quantitative real-time PCR ( SYBR Green) technique was applied to detect the expression of cryptochromes gene ( cryl and cry2 ) of H. armigera under different conditions. Total RNA was extracted from the head of H. armigera, and carried out reverse transcription to synthesize cDNA after digested by DNase I. Specific primers were used to carry out quantitative real-time PCR on cryl, cry2 and EF-Ict gene, respectively. [ Result] The expression of cryl mRNA of H. ar- migera significantly decreased after exposure to black light for 2 h, the mRNA expression of cry2 was smaller than control, they had no significant difference with each other. Mating had significant effect on mRNA expression of cryl and cry2 of H. armigera, and the mRNA expression of cryl and cry2 of male and female adults showed decreasing trend with the prolongation of time after mating. [ Conclusion] The result had important significance for further studying on function of cry gene and the control of cotton bollwonn. 展开更多
关键词 Helicoverpa armigera cryl and cry2 Quantitative real-time PCR Black light MATING China
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小菜蛾对Bt毒素Cry1Ac和Bt制剂抗性的选育及其抗性种群的生物学适应性 被引量:27
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作者 杨峰山 吴青君 +3 位作者 徐宝云 曹丽波 朱国仁 张友军 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期64-69,共6页
用Bt制剂和Bt毒素Cry1Ac分别对源自深圳田间的小菜蛾Plutellaxylostella在室内进行抗性种群选育,获得相对抗性倍数分别为24.36、38.16倍的抗性种群DBM.1Ac_R30和DBM.Bt_R46。对这2个抗性种群及其敏感种群(DBM.Bt_S)的生长发育、存活及... 用Bt制剂和Bt毒素Cry1Ac分别对源自深圳田间的小菜蛾Plutellaxylostella在室内进行抗性种群选育,获得相对抗性倍数分别为24.36、38.16倍的抗性种群DBM.1Ac_R30和DBM.Bt_R46。对这2个抗性种群及其敏感种群(DBM.Bt_S)的生长发育、存活及繁殖特征进行了详细地观察与比较,并以甘蓝为饲喂材料构建了2个抗性实验种群的生命表。结果表明,DBM.1Ac_R30和DBM.Bt_R46种群较DBM.Bt_S种群的产卵量和孵化率下降,幼虫发育历期延长,雌雄比显著降低,雌成虫数量、寿命减少。DBM.1Ac_R30和DBM.Bt_R46种群相对于DBM.Bt_S种群的相对适合度分别为0.75和0.65,抗性种群在繁殖能力上存在明显的生存劣势。 展开更多
关键词 小菜蛾 BT制剂 Bt毒素Cry1Ac 抗性选育 生物学特性
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山羊clock和cry1基因的克隆及其在大脑和垂体中表达差异的研究 被引量:6
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作者 占思远 罗万伟 +7 位作者 程波 蒋婧 李利 王林杰 张红平 王永 龚华斌 邓中宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1716-1722,共7页
本研究旨在探讨生物钟基因clock和cry1在山羊出生后不同时期的大脑和垂体中的表达差异。在出生后30、60、90和120d共屠宰24只南江黄羊羔羊(公母各12只),取其大脑皮质层和垂体组织样品用于抽提RNA,进行分子克隆和实时荧光定量PCR分析。结... 本研究旨在探讨生物钟基因clock和cry1在山羊出生后不同时期的大脑和垂体中的表达差异。在出生后30、60、90和120d共屠宰24只南江黄羊羔羊(公母各12只),取其大脑皮质层和垂体组织样品用于抽提RNA,进行分子克隆和实时荧光定量PCR分析。结果,分离克隆得到了山羊clock基因外显子1到外显子8以及cry1基因外显子6到外显子15的CDS区序列,其长度分别为1 479bp和993bp,其中clock基因部分CDS区序列与绵羊、牛、人和小鼠的对应序列相似性分别为99%、90%、94%和92%,cry1基因部分CDS区序列与绵羊、牛、人和小鼠的对应序列相似性分别为99%、98%、94%和87%。组织表达分析结果表明,性别对clock和cry1基因的表达影响不显著(P>0.05),2个基因在垂体中的mRNA表达量极显著高于大脑中的表达量(P<0.01);在不同时期的垂体组织中,clock和cry1基因表达量均呈现先上升后下降的趋势;在不同时期的大脑组织中,clock基因的表达量趋于波动平衡,呈现上升趋势,cry1基因的相对表达量呈细微的上升趋势。结果提示:clock和cry1基因的CDS区在物种间保守性较高。clock和cry1基因在山羊大脑和垂体组织中起到重要的作用,且其mRNA发育性表达模式具有组织特异性。 展开更多
关键词 山羊 CLOCK基因 cry1基因 分子克隆 实时荧光定量PCR 组织表达
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苏云金芽孢杆菌cry1基因在荧光假单胞菌Pfx-18中的表达特性 被引量:5
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作者 刘子铎 汤江武 +2 位作者 喻凌 孙明 喻子牛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期1-5,共5页
用DIG标记的cry1Aa基因EcoRI-F片段的RNA探针,对筛选的鳞翅目高毒力菌株的质粒进行Southern分析,将cry基因定位在39.3MD质粒上。该质粒经HindⅢ酶解,用同样探针进行杂交,呈现6.5kb和7.1kb两条阳性带,其中7.1kb片段的杂交强度... 用DIG标记的cry1Aa基因EcoRI-F片段的RNA探针,对筛选的鳞翅目高毒力菌株的质粒进行Southern分析,将cry基因定位在39.3MD质粒上。该质粒经HindⅢ酶解,用同样探针进行杂交,呈现6.5kb和7.1kb两条阳性带,其中7.1kb片段的杂交强度明显高于6.5kb片段。将7.1kb片段与多寄主质粒pSUP106连接,转化荧光假单胞菌Pfx-18,获得克隆子LZP-1。克隆基因用PCR鉴定,显示典型的cry1Ab谱带。经SDS-PAGE分析,克隆株表达66kD杀虫晶体蛋白和一些小分子多肽。其发酵液稀释1000倍对三龄小菜蛾幼虫的致死率为33%。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 荧光假单胞菌 CRY基因 小菜蛾
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转Bt基因抗虫玉米植株叶腋处花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态 被引量:7
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作者 邢珍娟 王振营 +1 位作者 何康来 白树雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期163-166,共4页
以表达Cry1Ab杀虫蛋白的两种转Bt基因抗虫玉米MON810和Bt11为材料,采用ELISA方法研究了玉米散粉时沉积在植株叶腋处Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态,比较了两种Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的降解速度.结果表明,Bt玉米花粉中Cr... 以表达Cry1Ab杀虫蛋白的两种转Bt基因抗虫玉米MON810和Bt11为材料,采用ELISA方法研究了玉米散粉时沉积在植株叶腋处Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的田间降解动态,比较了两种Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白的降解速度.结果表明,Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白是逐渐降解的,且降解速度逐渐加快.但两种Bt玉米花粉中Cry1Ab杀虫蛋白降解速度不同,MON810中的Bt杀虫蛋白降解较快,而Bt11中的降解较慢.d15时在MON810叶腋处的花粉中已经检测不到Bt杀虫蛋白,而在Bt11花粉中Bt杀虫蛋白到d18才完全降解.两种Bt玉米花粉中杀虫蛋白的初始含量差异显著,且在各个取样时间内Bt杀虫蛋白的残留量存在显著差异.玉米散粉时留在田间的Bt玉米花粉中的Cry1Ab杀虫蛋白不会在自然界累积. 展开更多
关键词 转BT基因玉米 花粉 CRY1AB杀虫蛋白 叶腋 降解
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转cry1Ab基因水稻田寄生蜂亚群落结构及其优势类群数量动态的研究 被引量:6
8
作者 田俊策 刘志诚 +2 位作者 姚洪渭 叶恭银 彭予发 《环境昆虫学报》 CSCD 2008年第1期1-7,共7页
从寄生蜂的优势度、数量和时间动态等方面,对含cry1Ab基因的Bt水稻对稻田寄生蜂群落的影响作了评价。寄生蜂各科的组成与优势度的分布在Bt稻田和对照间无显著差异,但数量低于对照,其中,优势类群茧蜂数量显著低于对照。从田间动态看,仅... 从寄生蜂的优势度、数量和时间动态等方面,对含cry1Ab基因的Bt水稻对稻田寄生蜂群落的影响作了评价。寄生蜂各科的组成与优势度的分布在Bt稻田和对照间无显著差异,但数量低于对照,其中,优势类群茧蜂数量显著低于对照。从田间动态看,仅在寄生蜂发生的高峰期,Bt稻田中的主要寄生蜂才显著低于对照。因此,Bt水稻对靶标害虫主要寄生蜂尤其是茧蜂可能具一定的负面影响。 展开更多
关键词 BT水稻 CRY1AB基因 寄生蜂群落 茧蜂
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取食转Bt基因抗虫玉米后亚洲玉米螟幼虫中肠的组织病理变化 被引量:6
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作者 徐艳聆 王振营 +1 位作者 何康来 白树雄 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1034-1038,共5页
利用透射显微镜(TEM)观察亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guene)幼虫取食了表达Cry1Ab杀虫蛋白的转Bt基因玉米心叶组织后中肠的组织病理变化,以探讨转Bt基因玉米对亚洲玉米螟的致病机理,为其合理、安全和持续利用提供理论依据。结果表... 利用透射显微镜(TEM)观察亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guene)幼虫取食了表达Cry1Ab杀虫蛋白的转Bt基因玉米心叶组织后中肠的组织病理变化,以探讨转Bt基因玉米对亚洲玉米螟的致病机理,为其合理、安全和持续利用提供理论依据。结果表明:亚洲玉米螟取食Bt玉米后中肠细胞及其细胞器发生了明显的病变。取食Bt玉米12h后中肠细胞开始病变,首先微绒毛脱落、内质网开始肿胀,24h后内质网肿胀、增多,杯状细胞杯腔增大,48h后微绒毛大量脱落,细胞开始空泡化,随着取食时间的增加,细胞空泡化程度加剧,在感染前期细胞间的病变程度差异较大。微绒毛脱落、内质网肿胀断裂是在多数取食Bt玉米的亚洲玉米螟中肠细胞发生的普遍病变。由此表明,人工修饰的Cry1Ab基因导入到玉米染色体组中所表达的杀虫蛋白可使玉米螟幼虫中肠细胞发生病变,最终导致其死亡。 展开更多
关键词 亚洲玉米螟 转BT基因玉米 CRY1AB杀虫蛋白 组织病理变化 透射显微镜
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抗虫/耐草甘膦双价融合基因表达载体的构建及烟草转化 被引量:3
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作者 祁伟彦 孙鹤 +3 位作者 周妮 朱莉 郎志宏 黄大昉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期114-119,共6页
随着植物基因工程的发展,将多个基因转化植株已成为研究的热点之一,利用连接肽进行多个基因融合的策略已引起广泛关注。利用连接多肽2A和LP4/2A分别将抗虫基因Bt(Bacillus thuringiensis,Bt)cry1Ah和耐草甘膦基因mG2-epsps连接起来,构建... 随着植物基因工程的发展,将多个基因转化植株已成为研究的热点之一,利用连接肽进行多个基因融合的策略已引起广泛关注。利用连接多肽2A和LP4/2A分别将抗虫基因Bt(Bacillus thuringiensis,Bt)cry1Ah和耐草甘膦基因mG2-epsps连接起来,构建了4个融合基因表达载体pHAG、pHLAG、pGAH、pGLAH和两个单基因载体pSAh、pSmG2,其中pHAG、pHLAG是Bt cry1Ah基因在前,mG2-epsps基因在后,pGAH、pGLAH是mG2-epsps基因在前,Bt cry1Ah基因在后,分别用2A和LP4/2A作为连接肽,由CaMV35S启动子驱动。利用农杆菌介导法将6个植物表达载体转入烟草,得到再生植株529株。经PCR检测,有261株再生苗为阳性植株,转化率达到49.3%。获得的转基因烟草可用于分析连接肽2A和LP4/2A的剪切效率以及不同基因与连接肽连接位置差异对基因表达的影响。 展开更多
关键词 cry1Ah mG2-epsps 2A LP4 转基因烟草
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转基因高粱Cry1Ab蛋白含量的比较研究 被引量:3
11
作者 张明洲 陈宗伦 +2 位作者 方美明 崔海瑞 夏英武 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期391-394,共4页
通过农杆菌介导法将杀虫晶体蛋白基因cry1Ab导入高粱恢复系115中,共获得13个独立的转基因株系,26株转基因植株,转化率为5.1%;GUS活性、PCR、Southern和Western杂交分析表明,此基因已整合进高粱基因组并得到正确表达。利用ELISA试剂盒测... 通过农杆菌介导法将杀虫晶体蛋白基因cry1Ab导入高粱恢复系115中,共获得13个独立的转基因株系,26株转基因植株,转化率为5.1%;GUS活性、PCR、Southern和Western杂交分析表明,此基因已整合进高粱基因组并得到正确表达。利用ELISA试剂盒测定Cry1Ab蛋白含量,结果表明,不同转基因植株的Cry1Ab蛋白含量有明显差异,最高可达0.850μg/g,占可溶性蛋白的0.016%,还有一些转基因植株中不能表达;同一转基因植株的不同组织中表达量有明显差异,其顺序为:叶>颖壳>籽粒>根>茎;不同部位的叶片也有差异,其顺序为:中部叶>基部叶>新叶。 展开更多
关键词 转基因高粱 Cry1Ab蛋白 CRY1AB基因 农杆菌
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转cry1 Ab基因粳稻对稻田节肢动物群落的影响 被引量:7
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作者 刘志诚 陈洋 +5 位作者 田俊策 卢增斌 舒庆尧 胡萃 彭于发 叶恭银 《生物安全学报》 2011年第1期69-76,共8页
在将稻田节肢动物群落按营养关系分为植食类、寄生类、捕食类、腐食类和其他类等5个功能团的基础上,从功能团优势度、群落结构参数及群落相异性等方面,经2年3点的调查就2个转cry1Ab基因粳稻(Bt粳稻)品系KMD1和KMD2对稻田节肢动物群落结... 在将稻田节肢动物群落按营养关系分为植食类、寄生类、捕食类、腐食类和其他类等5个功能团的基础上,从功能团优势度、群落结构参数及群落相异性等方面,经2年3点的调查就2个转cry1Ab基因粳稻(Bt粳稻)品系KMD1和KMD2对稻田节肢动物群落结构的影响做了评价。结果表明:在大多数情况下,Bt粳稻与对照间各功能团优势度、群落结构参数[物种丰富度(S)、Shannon-Wiener多样性指数(H′)、均匀性指数(J)、优势集中性指数(C)]及其时间动态无明显差异;Bt粳稻与对照间植食类、寄生类、捕食类亚群落,及整个节肢动物群落的相似性也较高。综合分析认为,Bt粳稻对稻田节肢动物群落结构无明显的负面影响。 展开更多
关键词 Bt粳稻 CRY1AB基因 节肢动物 功能团 群落结构
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转双价基因棉田节肢动物群落的稳定性研究 被引量:4
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作者 崔金杰 雒珺瑜 +2 位作者 王春义 李树红 李春花 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第1期8-11,共4页
研究了转双价基因棉田节肢动物群落的稳定性,并分析了昆虫群落多样性的时间格局。结果表明:4种处理棉田昆虫群落的优势集中性指数由高到低依次为常规用药田、常规棉田、B t棉田和双价棉田,均匀度指数依次为B t棉田、双价棉田、常规棉田... 研究了转双价基因棉田节肢动物群落的稳定性,并分析了昆虫群落多样性的时间格局。结果表明:4种处理棉田昆虫群落的优势集中性指数由高到低依次为常规用药田、常规棉田、B t棉田和双价棉田,均匀度指数依次为B t棉田、双价棉田、常规棉田和常规用药田,多样性指数依次为B t棉田、双价棉田、常规棉田和常规用药田;害虫亚群落的优势集中性指数高低依次为常规棉田、常规用药田、B t棉田和双价棉田,均匀度指数依次为双价棉田、B t棉田、常规用药田和常规棉田,多样性指数为双价棉田、B t棉田、常规用药田和常规棉田;天敌亚群落的优势集中性指数依次为B t棉田、常规用药田、常规棉田和双价棉田,均匀度指数依次为双价棉田、常规棉田、常规用药田和B t棉田,多样性指数依次为双价棉田、常规棉田、常规用药田和B t棉田。可见,种植转双价基因棉不会降低昆虫群落的稳定性,昆虫群落、害虫亚群落和天敌亚群落的稳定性反而得到提高,害虫种群和天敌种群趋于稳定。 展开更多
关键词 转双价基因棉 节肢动物群落 稳定性
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电针对自由运行状态小鼠SCN内Cry基因表达的影响 被引量:4
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作者 周奇志 魏焦禄 +7 位作者 蔡定均 张新星 彭晓华 刘旭光 宋开源 赵纪岚 薛红 魏铮 《四川中医》 北大核心 2008年第9期7-10,共4页
目的:研究电针对自由运行状态下小鼠视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)内核心钟基因隐色素基因(cryptochromes gene,Cry)Cry1和Cry2表达的作用,为临床择时针灸效应规律的研究提供分子生物学依据。方法:选用昆明种小鼠,按体重随... 目的:研究电针对自由运行状态下小鼠视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)内核心钟基因隐色素基因(cryptochromes gene,Cry)Cry1和Cry2表达的作用,为临床择时针灸效应规律的研究提供分子生物学依据。方法:选用昆明种小鼠,按体重随机分为空白组、捆绑组、电针组。电针组固定动物后,选"百会"和"长强"针刺,电压1-3V,疏密波,频率2/20Hz,时间15min。捆绑组只固定15min,不予其它特殊处理;空白组不予任何特殊处理。在小鼠进入自由运行(free running,FR)状态第3天于近似昼夜时间(circadian time,CT)6:00(即CT6)应用实时荧光定量RT-PCR方法观测电针对SCN内Cry1和Cry2mRNA表达情况的影响。结果:在CT6针刺,有降低Cry1基因表达的作用和下调Cry2基因表达的趋势。结论:针刺导引节律相位的作用可能与其下调SCN内Cry基因的表达、降低负反馈抑制作用有关。 展开更多
关键词 电针 昼夜节律 视交叉上核 Cry1基因 Cry2基因
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生物钟基因Cry1在消化道腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系 被引量:2
15
作者 刘海军 徐蕾 +4 位作者 凌烈峰 王文军 何雷 冯遵永 章尧 《皖南医学院学报》 CAS 2015年第3期205-208,共4页
目的:探讨生物钟基因Cry1在消化道腺癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学法检测生物钟基因Cry1在63例消化道腺癌组织和对应癌旁组织中的表达,分析两者之间的关系以及Cry1的表达与临床病理特征之间的关系。结... 目的:探讨生物钟基因Cry1在消化道腺癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学法检测生物钟基因Cry1在63例消化道腺癌组织和对应癌旁组织中的表达,分析两者之间的关系以及Cry1的表达与临床病理特征之间的关系。结果:生物钟基因Cry1在63例消化道腺癌组织和对应癌旁组织中表达强度无显著相关性(P>0.05),Cry1的高表达与肿瘤的低分化相关(P<0.05);Cry1的表达定位在细胞核和细胞质中,癌组织和癌旁组织之间的亚细胞分布差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论:生物钟基因Cry1在低分化腺癌中的表达增高以及在癌组织中的亚细胞定位发生改变,提示Cry1蛋白定位在消化道腺癌的发生发展中可能发挥作用,Cry1的表达也可能与肿瘤的恶性程度有关。 展开更多
关键词 生物钟基因 CRY1 消化道腺癌 免疫组织化学
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转cry1Ac+cry2Ab基因棉与转cry1Ac+EPSPS基因棉荒地的生存竞争能力 被引量:10
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作者 张兴华 田绍仁 +2 位作者 张天玉 李捷 乔艳艳 《生物安全学报》 2012年第2期119-124,共6页
【背景】此研究为"十二五"转基因生物新品种培育国家项目中创建新的转基因棉花品种环境安全评价技术而设。【方法】以转双价双Bt抗虫基因(cry1Ac+cry2Ab)棉和转双价抗虫、抗除草剂基因(cry1Ac+EPSPS)棉为观察品种,非转基因棉... 【背景】此研究为"十二五"转基因生物新品种培育国家项目中创建新的转基因棉花品种环境安全评价技术而设。【方法】以转双价双Bt抗虫基因(cry1Ac+cry2Ab)棉和转双价抗虫、抗除草剂基因(cry1Ac+EPSPS)棉为观察品种,非转基因棉赣棉11号为对照品种,在荒地用撒播和3cm深度播种2种方式,于2011年5月~2012年3月对棉花出苗率、株高、生育进程、棉吐絮瓣数、絮瓣脱落率、自生苗等生存竞争能力进行比较,检测、评价其杂草化的风险,并探讨、验证检测技术的可行性。【结果】在荒地条件下,以2种方式播种的转cry1Ac+cry2Ab基因棉和转cry1Ac+EPSPS基因棉与非转基因棉相比,上述各项指标的竞争能力总体上未表现显著优势。【结论与意义】转cry1Ac+cry2Ab基因棉和转cry1Ac+EPSPS基因棉在荒地条件下生长无杂草化风险。同时,研究证明,在荒地自然生态条件下,可以采用撒播和3cm深度播种方法检测新的转基因棉花品种在生存竞争能力上的杂草化风险,在测评上有互为参照效应,为定性评价新的转基因棉花品种的杂草化风险提供了保障。 展开更多
关键词 双价双Bt抗虫基因棉 cry1Ac+cry2Ab基因 双价抗虫 抗除草剂基因棉 5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因 生存竞争能力 杂草化风险
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转Btc-ry1 Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫解毒酶和中肠蛋白酶活性的影响 被引量:4
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作者 崔蕾 王振营 +1 位作者 何康来 白树雄 《生物安全学报》 2011年第1期64-68,共5页
研究了取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫Propylaea japonica(Thunberg)体内解毒酶和中肠蛋白酶活性的影响。利用饲喂结合比色方法,比较龟纹瓢虫取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉和非转基因玉米花粉后体内α-乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶... 研究了取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫Propylaea japonica(Thunberg)体内解毒酶和中肠蛋白酶活性的影响。利用饲喂结合比色方法,比较龟纹瓢虫取食转Bt-cry1Ah基因玉米花粉和非转基因玉米花粉后体内α-乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶、中肠总蛋白酶、类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶的酶活性。结果发现:在解毒酶方面,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫4龄幼虫和蛹的α-乙酸萘酯酶活性显著低于取食非Bt玉米花粉的龟纹瓢虫(对照组),取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的乙酰胆碱酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性在各个发育时期与对照相比均无显著差异。在中肠蛋白酶方面,与对照组相比,取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的总蛋白酶和强碱性类胰蛋白酶活性在各个发育时期均无显著差异;但取食Bt玉米花粉的龟纹瓢虫的弱碱性类胰凝蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活性在蛹期显著低于取食非Bt玉米花粉的龟纹瓢虫。由此可见,龟纹瓢虫取食含有Cry1Ah杀虫蛋白的玉米花粉后,体内代谢解毒酶和中肠蛋白酶与Cry1Ah杀虫蛋白相互作用,可能会引起某些酶活性的变化。因此,转cry1Ah基因玉米花粉对龟纹瓢虫的潜在影响还需要进一步的研究。 展开更多
关键词 转Bt-cry1 Ah基因玉米 花粉 龟纹瓢虫 解毒酶 中肠蛋白酶 酶活性
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抗Bt(Cry1B)毒素单链抗体在sf9昆虫细胞中的表达及活性测定 被引量:1
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作者 徐重新 张霄 +4 位作者 张存政 刘媛 谢雅晶 黄鹰 刘贤金 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第5期985-991,共7页
通过构建pFastBacTM HT-A-scFv重组质粒,并将重组质粒化转DH10BacTM Escherichia coli感受态细胞,进行蓝白斑筛选,获得阳性克隆.PCR和基因测序检测证实挑取的白斑阳性单克隆存在完整、正确的单链抗体基因.提取阳性克隆中的重组杆状病毒... 通过构建pFastBacTM HT-A-scFv重组质粒,并将重组质粒化转DH10BacTM Escherichia coli感受态细胞,进行蓝白斑筛选,获得阳性克隆.PCR和基因测序检测证实挑取的白斑阳性单克隆存在完整、正确的单链抗体基因.提取阳性克隆中的重组杆状病毒穿梭载体(Bacmid-scFv)侵染sf9昆虫细胞,细胞发生明显病变特征.通过SDS-PAGE、Western blotting和间接竞争性ELISA等方法检测,发现单链抗体在sf9昆虫细胞中表达成功,测得纯化后蛋白浓度为103.000 0 μg/ml,Cry1B毒素对单链抗体的抑制中浓度(IC50)为1.010 0 μg/ml,最低检测线IC10为0.011 3μg/ml,线性检测范围为0.500 0~10.000 0 μg/ml.可溶性scFv对抗原类似物无交叉反应. 展开更多
关键词 Cry1B毒素 单链抗体 真核表达系统 酶联免疫分析
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转cry1Ab基因玉米对瓢虫科天敌种群动态的影响 被引量:7
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作者 刘慧 何康来 +1 位作者 白树雄 王振营 《生物安全学报》 2012年第2期130-134,共5页
【背景】瓢虫科天敌昆虫是玉米田中重要的天敌类群,可捕食多种农业害虫,对害虫有很好的控制作用。为了明确转基因玉米对瓢虫科天敌的潜在效应。【方法】在田间条件下,采用系统调查结合吸虫器方法,研究了cry1Ab基因玉米对玉米田主要瓢虫... 【背景】瓢虫科天敌昆虫是玉米田中重要的天敌类群,可捕食多种农业害虫,对害虫有很好的控制作用。为了明确转基因玉米对瓢虫科天敌的潜在效应。【方法】在田间条件下,采用系统调查结合吸虫器方法,研究了cry1Ab基因玉米对玉米田主要瓢虫科天敌种类丰富度和种群动态的影响。【结果】转cry1Ab基因玉米田与其对照田瓢虫类群和优势种群组成相同。春播时Bt玉米田与对照田以龟纹瓢虫为优势种,仅在玉米生长后期Bt玉米田中的龟纹瓢虫数量显著高于对照田,其他时期2种田间龟纹瓢虫的种群动态没有显著差异。夏播玉米田以龟纹瓢虫和异色瓢虫为主,在8月17日Bt玉米田中异色瓢虫数量显著高于对照田,在9月27日其异色瓢虫数量显著低于对照田,而其他时期Bt玉米田和对照田中异色瓢虫优势度以及田间种群动态没有显著差异。【结论与意义】转cry1Ab基因玉米对玉米田重要的瓢虫科天敌丰富度、优势度和种群数量没有不良影响。因此,该转基因玉米可用于农田生态系统的有害生物管理。 展开更多
关键词 转cry1Ab基因玉米 瓢虫 物种丰富度 优势度 种群动态
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Penetration of a Single Domain of Bacillus thuringiensis Cry1Ie-Domain I to a Lipid Membrane In vitro 被引量:1
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作者 GUO Shu-yuan LI Jie +1 位作者 CHEN Zhen HE Kang-lai 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2014年第5期1043-1050,共8页
Domain I of the activated Crystal protein from Bacillus thuringiensis has a seven a-helix bundle structure, which is responsible for membrane channel formation in its insecticidal mechanism. Crylle is toxic to Asian c... Domain I of the activated Crystal protein from Bacillus thuringiensis has a seven a-helix bundle structure, which is responsible for membrane channel formation in its insecticidal mechanism. Crylle is toxic to Asian corn borer, Ostrinia furnacalis (Guen6e), and plays important roles in insect biological control. The domain I from Crylle has been expressed and purified in its normal conformation, as embedded in the full length homologous toxin structure. The membrane insertion ability of this single domain was compared with the full length homologous toxin using a monolayer insertion experiment. The results indicated that the Crylle-domain I had the ability to insert into the lipid monolayer, and this ability is greater than that of the IE648 toxin. However, the state of insertion is not stable and remains for only a short period of time. The Crylle-domain I plays no role in receptor binding as it had a nonspecific binding with the brush border membrane vesicles of the Asian corn borer. 展开更多
关键词 Bacillus thuringiensis cryl Ie domain I of Cry protein monolayer insertion
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