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Cag A阳性幽门螺杆菌对胃癌细胞lncRNA DLEU2表达及上皮间质转化的影响 被引量：1
1
作者 曲雪 刘琦 +6 位作者 赵鑫 邢元欣 郏雁飞 郑燕 杨炜华 汪运山 韩淑毅 《山东医药》 CAS 2023年第1期1-5,共5页
目的探讨细胞毒素相关蛋白A(Cag A)阳性幽门螺杆菌(Hp)对胃癌细胞长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)表达及上皮间质转化的影响。方法体外培养胃癌细胞系HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞系GES1,采用RT-q... 目的探讨细胞毒素相关蛋白A(Cag A)阳性幽门螺杆菌(Hp)对胃癌细胞长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)表达及上皮间质转化的影响。方法体外培养胃癌细胞系HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞系GES1,采用RT-qPCR法检测DLEU2表达,并选择DLEU2表达最高的胃癌细胞进行后续实验。将Hp NCTC标准菌株26695或11637分别与正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞共培养0、3、9、12 h,采用RT-qPCR法检测DLEU2表达。采用Western blotting法检测与NCTC 26695或11637共培养3、9、12 h正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞Cag A表达以及共培养3、9、12 h神经钙黏着蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达。同时,分析与NCTC 26695或NCTC 11637共培养的胃癌细胞DLEU2、Cag A表达与N-cadherin、Vimentin表达的关系。结果HGC-27、AGS、MGC-803、MKN-28细胞DLEU2相对表达量均高于GES1细胞(P均<0.05)。在胃癌细胞中,以HGC-27细胞DLEU2相对表达量最高。因此,选择胃癌细胞HGC-27进行后续实验。NCTC 11637感染3、9、12 h时GES1细胞DLEU2相对表达量均高于NCTC 11637感染0 h时(P均<0.05),NCTC 11637感染12 h时HGC-27细胞DLEU2相对表达量高于NCTC 11637感染0 h时(P<0.05)。NCTC 11637感染12 h时HGC-27细胞和GES1细胞Cag A、N-cadherin、Vimentin相对表达量均高于NCTC 26695感染12 h时相应细胞(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,NCTC 26695或11637感染的HGC-27细胞DLEU2、Cag A表达与N-cadherin、Vimentin表达均呈正相关关系(P均<0.05)。结论Cag A阳性Hp能够引起胃癌细胞长链非编码RNA DLEU2异常表达,而DLEU2异常表达可促进胃癌细胞上皮间质转化。 展开更多
关键词 胃癌 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白A 长链非编码RNA 淋巴细胞白血病缺失基因2 上皮间质转化
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miRNA-543调控DAZAP2基因对胃癌细胞5-氟尿嘧啶耐药的影响及其机制 被引量：1
2
作者 王冰雨 檀碧波 +3 位作者 李勇 刘文博 苑佳欣 张再博 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期226-232,共7页
目的 检测微小RNA-543(miR-543)在胃癌中的表达及预后价值,进一步探讨miR-543对胃癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的影响和作用机制。方法 选取河北医科大学第四医院2019-06-01-2021-10-31收治的50例胃癌组织和癌旁正常黏膜组织作为研究对象... 目的 检测微小RNA-543(miR-543)在胃癌中的表达及预后价值,进一步探讨miR-543对胃癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的影响和作用机制。方法 选取河北医科大学第四医院2019-06-01-2021-10-31收治的50例胃癌组织和癌旁正常黏膜组织作为研究对象,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测50例胃癌和癌旁正常黏膜组织中miR-543的表达,记录患者术后接受替吉奥(5-FU衍生物)联合奥沙利铂(SOX)方案化疗的无病生存期(DFS)。培养正常胃上皮细胞株GES-1、胃癌细胞株AGS和对5-FU耐药细胞株AGS/5-FU,用qRT-PCR法检测miR-543的表达;在miR-543抑制物转染AGS/5-FU细胞株后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测AGS/5-FU对5-FU的敏感性;qRT-PCR和蛋白质印迹法检测转染前后AGS/5-FU细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、无精症相关蛋白2(DAZAP2)、p53、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和胸苷酸合成酶(TS)的表达。生物信息学分析miR-543的靶向基因,并用双荧光素酶报告基因分析对其进行验证。通过DAZAP2回复实验进一步验证miR-543的作用。采用配对t检验比较miR-543在胃癌组织与癌旁正常组织的表达差异;采用独立样本t检验比较抑制miR-543后胃癌5-FU敏感性的差异;采用单因素方差分析探究调控miR-543表达后,Bcl-2、Bax、DAZAP2、p53、MRP1、TS的表达差异。结果 miR-543在胃癌组织中的表达水平(1.031±0.408)高于癌旁正常组织(0.236±0.056),t=13.640,P<0.001;高表达miR-543的患者DFS短于低表达miR-543患者,P=0.008。qRT-PCR法结果显示:miR-543在AGS/5-FU细胞中的表达水平(7.223±1.260)高于GES-1(1.306±0.285)和AGS细胞(3.286±1.166),F=16.050,P=0.004;抑制AGS/5-FU细胞株中miR-543的表达后,AGS/5-FU细胞对5-FU的敏感性(0.452±0.168)增加,F=12.003,P=0.008。生物信息学分析结果显示,DAZAP2是miR-543的直接靶基因。蛋白质印迹法和qRT-PCR法结果显示,在抑制miR-543表达后,AGS/5-FU细胞中Bcl-2、TS表达减少,Bax、DAZAP2、p53表达增加,MRP1表达无明显变化。双荧光素酶报告基因分析证实miR-543对DAZAP2有直接调控功能。在AGS/5-FU细胞中抑制miR-543的同时过表达DAZAP2,发现对5-FU的敏感性增加,Bcl-2、TS、Bax、p53等蛋白的表达有所恢复。结论 miR-543可能通过抑制DAZAP2基因参与胃癌细胞5-FU耐药的形成。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA-543 氟尿嘧啶 耐药 无精症相关蛋白2
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Skp2蛋白和PTEN蛋白在子宫内膜疾病中的表达及相关性研究
3
作者 李美艳 原丹丹 +1 位作者 李福琴 赵琳琳 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第5期455-458,共4页
目的探讨Skp2和PTEN在子宫内膜组织中的表达及其在子宫内膜癌发生、发展过程中的作用及两者的关系。方法采用免疫组织化SP法检测42例子宫内膜癌、35例子宫内膜不典型增生,23例复杂性增生及15例正常内膜中Skp2蛋白和PTEN蛋白的表达情况,... 目的探讨Skp2和PTEN在子宫内膜组织中的表达及其在子宫内膜癌发生、发展过程中的作用及两者的关系。方法采用免疫组织化SP法检测42例子宫内膜癌、35例子宫内膜不典型增生,23例复杂性增生及15例正常内膜中Skp2蛋白和PTEN蛋白的表达情况,并分析两者的相关性。结果子宫内膜癌中Skp2蛋白表达水平显著高于正常子宫内膜、复杂增生及不典型增生的子宫内膜,差异有显著性(P<0.05);PTEN蛋白的表达完全相反,且二者的表达呈负相关。结论Skp2蛋白和PTEN蛋白在子宫内膜癌的发生、发展中发挥重要作用,Skp2和PTEN的联合检测有助于判断子宫内膜癌的恶性程度和预后。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 SKP2蛋白 PTEN蛋白 免疫组织化学
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lncRNA-CCAT2对宫颈癌CaSki细胞凋亡的影响及其机制 被引量：1
4
作者 王霞 姚玉君 +1 位作者 汤静 李开慧 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1247-1253,共7页
目的:研究长链非编码RNA(lncRNA)-结肠癌相关转录本2(CCAT2)对宫颈癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:将人宫颈癌CaSki细胞分为对照组、CCAT2过表达组、CCAT2干扰组、过表达NC组和干扰NC组。构建CCAT2过表达载体和干扰载体,分别转染CCAT... 目的:研究长链非编码RNA(lncRNA)-结肠癌相关转录本2(CCAT2)对宫颈癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:将人宫颈癌CaSki细胞分为对照组、CCAT2过表达组、CCAT2干扰组、过表达NC组和干扰NC组。构建CCAT2过表达载体和干扰载体,分别转染CCAT过表达组和CCAT2干扰组宫颈癌CaSki细胞。qRT-PCR法检测各组宫颈癌CaSki细胞中CCAT2 mRNA表达水平,MTT法检测各组宫颈癌CaSki细胞增殖率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,qRT-PCR法检测各组宫颈癌CaSki细胞中第十号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源基因(PTEN)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组宫颈癌CaSki细胞中PTEN、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。结果:与对照组比较,CCAT2过表达组宫颈癌CaSki细胞增殖率和细胞中CCAT2 mRNA及Bcl-2、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.05);细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白、PTEN mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,CCAT2干扰组宫颈癌CaSki细胞增殖率和细胞中CCAT2 mRNA及Bcl-2、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平明显降低(P<0.05);细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白、PTEN mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与对照组比较,过表达NC组和干扰NC组细胞增殖率、凋亡率和细胞中CCAT2 mRNA及PTEN、Bcl-2、Bax、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:lncRNA-CCAT2可抑制人宫颈癌细胞凋亡,其机制可能与PTEN/PI3K/AKT通路有关联。 展开更多
关键词 结肠癌相关转录本2 宫颈肿瘤 细胞凋亡 第十号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源基因 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B
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酶育牛黄对肉瘤S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及机制 被引量：2
5
作者 刘化侠 魏寅翼 +2 位作者 李蕾 胡晓旭 万学英 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第6期25-27,共3页
目的观察酶育牛黄(CBCG)对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其抑瘤的分子机制。方法取昆明种小鼠50只,建立肉瘤S180荷瘤模型,随机分为5组,各10只。CBCG高、中、低剂量组分别给予2、1、0.5 g/kg的CBCG灌胃,NCB组给予1 g/kg的天然牛黄灌胃,... 目的观察酶育牛黄(CBCG)对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其抑瘤的分子机制。方法取昆明种小鼠50只,建立肉瘤S180荷瘤模型,随机分为5组,各10只。CBCG高、中、低剂量组分别给予2、1、0.5 g/kg的CBCG灌胃,NCB组给予1 g/kg的天然牛黄灌胃,模型组给予0.1 g/L淀粉溶液灌胃。连续给药10 d后,处死小鼠剥取肿瘤,称重计算除模型组外各组小鼠抑瘤率。提取各组肿瘤组织蛋白,用Western blot法检测PI3K/AKT通路的PTEN、AKT、P-AKT(Thr308)、P-AKT(Ser473)及细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达量。结果随着CBCG剂量增加,抑瘤率逐渐增高(P均<0.05)。NCB组抑瘤率与CBCG高剂量组抑瘤率比较差异无统计学意义。与模型组相比,CBCG高、中、低剂量组PTEN、BAX表达增加,P-AKT(Thr308)/AKT、P-AKT(Ser473)/AKT值及Bcl-2表达降低(P均<0.05)。结论 CBCG在体内具有抑制肉瘤生长的作用,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT通路从而促进细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 酶育牛黄 人工牛黄 S180细胞 抑瘤率 第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白 B细胞淋巴瘤-2 Bcl-2相关X蛋白 磷酸化的丝苏氨酸激酶
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PTEN/PI3K信号通路在大鼠心肌肥厚中的表达 被引量：2
6
作者 李琼 郭志坤 张光谋 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期172-175,共4页
目的：观察PTEN/PI3K信号通路在大鼠心肌组织中的表达,探讨该通路在心肌肥厚发生、发展中的作用.方法：皮下注射异丙肾上腺素（ISO）建立大鼠心肌肥厚模型,测定大鼠体质量、心质量、心肌细胞横径和横截面积;采用免疫组织化学方法检测大... 目的：观察PTEN/PI3K信号通路在大鼠心肌组织中的表达,探讨该通路在心肌肥厚发生、发展中的作用.方法：皮下注射异丙肾上腺素（ISO）建立大鼠心肌肥厚模型,测定大鼠体质量、心质量、心肌细胞横径和横截面积;采用免疫组织化学方法检测大鼠心肌组织中肥大标志因子β-肌球蛋白（β-MHC）及PTEN/PI3K信号通路上PTEN、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、蛋白激酶B（PKB）、死亡相关因子（BAD）蛋白表达;利用计算机图像处理系统对各种蛋白进行定量分析.结果：模型组大鼠全心质量/体质量、左室质量/体质量、心肌细胞横径、心肌细胞截面积较对照组明显增加.模型组大鼠的心肌组织与对照组相比,β-MHC、PI3K与PKB表达水平均升高,PTEN和BAD表达水平明显降低.结论：PTEN在心肌肥厚中表达明显降低,起负性调节作用;PI3K/PKB信号通路激活,可能是导致心肌肥厚的机制之一,BAD可望成为生物学治疗靶点. 展开更多
关键词 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 死亡相关因子 心肌肥厚 大鼠
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当归贝母苦参丸含药血清对胃癌细胞SGC-7901抑制作用机制的研究 被引量：9
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作者 吴红彦 荣倩倩 +3 位作者 李海龙 马春林 师金凤 陈杰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期137-141,共5页
目的:研究不同浓度当归贝母苦参丸含药血清抑制胃癌细胞SGC-7901的机制。方法:将120只Wistar大鼠分为当归贝母苦参丸高、中、低剂量组(0.3,0.2,0.1 g·kg^(-1))和正常组,每组30只,ig 2次/d,连续给药7 d,制备含药血清,以空白血清处... 目的:研究不同浓度当归贝母苦参丸含药血清抑制胃癌细胞SGC-7901的机制。方法:将120只Wistar大鼠分为当归贝母苦参丸高、中、低剂量组(0.3,0.2,0.1 g·kg^(-1))和正常组,每组30只,ig 2次/d,连续给药7 d,制备含药血清,以空白血清处理胃癌细胞SGC-7901为空白组,实验组以当归贝母苦参丸含药血清高、中、低剂量组处理SGC-7901细胞后用RTq PCR技术检测环氧合酶-2(COX-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)mRNA表达水平、用免疫细胞化学技术检测COX-2,BAX,PTEN蛋白表达情况。结果:与正常组比较,高剂量组使SGC-7901细胞COX-2 mRNA的表达量下降68%,BAX和PTEN mRNA的表达量分别升高99.7%和85.6%(P<0.05),含药血清可以降低SGC-7901细胞COX-2的阳性表达率,升高其平均灰度值,升高BAX和PTEN的阳性表达率,减低其平均灰度值(P<0.05)。结论:当归贝母苦参丸含药血清能抑制胃癌细胞SGC-7901,BAX,PTEN,COX-2 mRNA和蛋白的表达。 展开更多
关键词 当归贝母苦参丸含药血清 胃癌 SGC-7901 环氧合酶-2 Bcl-2相关X蛋白 人第10号染色体缺失的磷酸酶
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