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Comparative transcriptomic analysis of ovary and testis reveals sex-related genes in roughskin sculpin Trachidermus fasciatus
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作者 Dongxiu XUE Sudong XIA +2 位作者 Tengfei XING Yuqian GAO Jinxian LIU 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2024年第5期1673-1682,共10页
The mechanisms underlying sex determination and differentiation have long intrigued researchers in the fields of development and evolutionary biology.The roughskin sculpin(Trachidermus fasciatus Heckel),displaying sex... The mechanisms underlying sex determination and differentiation have long intrigued researchers in the fields of development and evolutionary biology.The roughskin sculpin(Trachidermus fasciatus Heckel),displaying sexual dimorphism,provides an ideal model for studying the mechanisms.However,both genetic and genomic information concerning sex determination and differentiation,such as gonadal transcriptome data in roughskin sculpin,are lacking.Here,we present the first gonadal transcriptomes of roughskin sculpin and identify sex-related genes.We identified 8531 differentially expressed genes(DEGs),among them 4065 were upregulated in the ovary and 4466 upregulated in the testis.Several sex-related gene ontology(GO)terms were enriched in ovary-biased genes,including“binding of sperm to zona pellucida”,“egg coat formation”,“positive regulation of acrosome reaction”,“cell division”,and“cell cycle”,while the GO terms such as“spermatogenesis”,“sperm axoneme assembly”,“cilium assembly”,“cilium movement”,and“cilium movement involved in cell motility”were enriched in testis-biased genes.Moreover,six KEGG pathways were significantly enriched in the ovary,whereas only one was enriched in the testis.Of these DEGs,40 sex-related genes were identified,which including 26 testis-biased genes(such as Dmrtb 1,Gsdf,Sox 9 b,Wnt 4 b,Tcp 11 l 2,and Efhb),and 14 ovary-biased genes(such as Cyp 19 a 1 a,Foxh 1,Foxr 1,Gdf 3,Hsd 17 b 12,and Igf 2 bp 3).This gonadal transcript dataset would broaden our understanding of sex determination and differentiation mechanisms in roughskin sculpin,expand the genomic database,support future studies on sex-related gene functions,and facilitate molecular biology research into roughskin sculpin. 展开更多
关键词 Trachidermus fasciatus TRANSCRIPTOME OVARY TESTIS sex-related gene
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条石鲷(Oplegnathus fasciatus)雌核发育的人工诱导与鉴定
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作者 陈睿毅 刘明涛 +3 位作者 竺奇慧 李海东 胡伟华 徐冬冬 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期829-835,共7页
条石鲷(Oplegnathus fasciatus)是我国重要的经济鱼类,具有复性染色体性别决定型(X_1X_1X_2X_2/X_1X_2Y)。利用紫外线(UV)灭活的同源精子通过冷休克方法诱导了条石鲷的雌核发育,筛选精子紫外灭活剂量并优化冷休克相关参数。结果表明:条... 条石鲷(Oplegnathus fasciatus)是我国重要的经济鱼类,具有复性染色体性别决定型(X_1X_1X_2X_2/X_1X_2Y)。利用紫外线(UV)灭活的同源精子通过冷休克方法诱导了条石鲷的雌核发育,筛选精子紫外灭活剂量并优化冷休克相关参数。结果表明:条石鲷精子最适的灭活剂量为80 mJ/cm2雌核发育的最适条件为授精后2 min在3~4℃水温下处理10 min。条石鲷雌核发育子代经形态学和流式细胞仪鉴定为二倍体,进一步利用微卫星分析表明雌核发育后代的等位基因完全来自于母本没有父本基因参与。对子代的性比和生长进行了比较,结果表明条石鲷雌核发育后代均为雌性,15月龄后雌核发育后代比普通条石鲷具有更快的生长速度。研究结果为条石鲷单性苗种的培育及其性别决定机制的深入研究提供基础。 展开更多
关键词 条石鲷(Oplegnathus fasciatus) 雌核发育 冷休克 微卫星 复性染色体
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Morphological Characteristics, Ecological Habits and Utilization Value of Acrossocheilus fasciatus
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作者 Xia Yunxing Lu Wenxuan 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2023年第1期36-38,共3页
Acrossocheilus fasciatus is a small omnivorous benthic fish widely distributed in the middle and upper reaches of mountain streams and small rivers in hilly and mountainous areas,suitable for stocking in the forks of ... Acrossocheilus fasciatus is a small omnivorous benthic fish widely distributed in the middle and upper reaches of mountain streams and small rivers in hilly and mountainous areas,suitable for stocking in the forks of reservoirs,streams or rivers,and artificial culture in larger ponds and eel farms,etc.The paper describes the morphological characteristics,ecological habits,geographic distribution,resources and utilization value of A.fasciatus,in order to provide scientific and practical reference information for individuals or enterprises interested in A.fasciatus culture and promote the sustainable development of A.fasciatus culture industry. 展开更多
关键词 Acrossocheilus fasciatus Morphological characteristics Ecological habits Geographical distribution Resource and utilization value
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暗纹东方鲀幼鱼体质量与形态性状的相关与通径分析
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作者 孙侦龙 宗巍巍 +2 位作者 韩世询 吴爱君 叶建华 《水产养殖》 CAS 2024年第3期1-6,28,共7页
为了解暗纹东方鲀幼鱼形态性状与体质量之间的关系,随机选取40日龄暗纹东方鲀幼鱼328尾,测定其全长(X1)、体长(X2)、头长(X3)、吻长(X4)、口裂(X5)、眼间距(X6)、躯干长(X7)、体高(X8)、尾柄长(X9)、尾柄高(X10)10个形态性状和体质量(Y)... 为了解暗纹东方鲀幼鱼形态性状与体质量之间的关系,随机选取40日龄暗纹东方鲀幼鱼328尾,测定其全长(X1)、体长(X2)、头长(X3)、吻长(X4)、口裂(X5)、眼间距(X6)、躯干长(X7)、体高(X8)、尾柄长(X9)、尾柄高(X10)10个形态性状和体质量(Y),利用相关分析和通径分析,研究了影响体质量的主要形态性状。结果表明,40日龄暗纹东方鲀幼鱼各形态性状与体质量的相关性,均达到了极显著水平(P<0.01),X1对体质量的直接作用,远大于其他形态性状,是影响体质量最主要的因素,X4、X5、X6、X7、X8和X9通过X1间接地对体质量产生了重要影响。暗纹东方鲀幼鱼形态性状对体质量的最优多元回归方程为:Y=-6.083+0.086X1+0.129X4+0.192X5+0.103X6+0.047X7+0.123X8+0.075X9(R2=0.882)。提出,在对暗纹东方鲀以体质量为目标进行选育时,可以全长为主,吻长、口裂、眼间距、躯干长、体高、尾柄长等其他形态性状为辅进行选择。 展开更多
关键词 暗纹东方鲀 体质量 形态性状 相关分析 通径分析
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Establishment and Optimization of ISSR-PCR System in Trachidermus fasciatus Heckel 被引量:8
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作者 郁建锋 鲍峰 +1 位作者 韩晓磊 徐建荣 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第5期37-39,95,共4页
[Objective] The aim of this study is to establish and optimize the ISSR-PCR system in roughskin sculpin(Trachidermus fasciatus Heckel).[Method] By using the primer of ISSR-63,the concentrations of Taq DNA polymerase,M... [Objective] The aim of this study is to establish and optimize the ISSR-PCR system in roughskin sculpin(Trachidermus fasciatus Heckel).[Method] By using the primer of ISSR-63,the concentrations of Taq DNA polymerase,Mg2+,dNTPs and primer were optimized by orthogonal design for establishing the suitable ISSR-PCR system in roughskin sculpin;moreover,the suitable anneal temperature was yielded from gradient PCR on temperature.[Result]The optimized ISSR-PCR system(20 μl reaction volume)in roughskin sculpin was proved to be:2.5 mmol/L Mg2+,250 μmol/L dNTPs,0.25 μmol/L primer,1 U Taq DNA polymerase,30 ng DNA template and 1×PCR buffer;and suitable anneal temperature was determined to be 50.8 ℃.The established system was further confirmed by using 24 wild roughskin sculpin samples.[Conclusion]The results lay a foundation for the analysis of genetic diversity and germplasm resources of roughskin sculpin. 展开更多
关键词 Trachidermus fasciatus Heckel ORTHOGONAL DESIGN ISSR-PCR SYSTEM
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Cloning and Sequence Analysis of Beta-actin Gene Full Length cDNA from Trachidermus fasciatus 被引量:4
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作者 薛茂云 胡承俊 +4 位作者 张营 郁建锋 卢祥云 徐建荣 顾志良 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第6期121-124,共4页
[Objective] The purpose of this experiment was to reveal the sequence and characteristics of Trachidermus fasciatus beta-actin gene.[Method] Using total RNA of muscle in T.fasciatus as template,three cDNA fragments of... [Objective] The purpose of this experiment was to reveal the sequence and characteristics of Trachidermus fasciatus beta-actin gene.[Method] Using total RNA of muscle in T.fasciatus as template,three cDNA fragments of beta-actin gene in T.fasciatus were amplified by RT-PCR,5'-RACE and 3'-RACE.[Result] A full-length of 1905 bp beta-actin cDNA sequence in T.fasciatus,which includes a 1128 bp length open reading frame encoding a 375-amino acid peptide,was obtained.Sequence alignment of nucleotide and amino acid sequence revealed that T.fasciatus beta-actin shared high homology with that of Epinephelus coioides,Rachycentron canadum,Chrysophrys auratus and of relatively low homology with mammalian and bird.The phylogenetic analysis showed that T.fasciatus beta-actin had closest relationship with Epinephelus coioides.And RT-PCR analysis suggested that the beta-actin gene expressed in four tissues,i.e.,muscle,liver,intestine and brain.[Conclusion] The full length sequence of beta-actin gene with high conservation in T.fasciatus was obtained for the first time. 展开更多
关键词 Trachidermus fasciatus BETA-ACTIN Rapid amplification of cDNA end Tissue expression
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条石鲷自然群体和养殖群体形态差异分析
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作者 王嘉浩 胡桂森 +4 位作者 吴章 朱凯 徐开达 王好学 戴乾 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期817-826,共10页
为有效区分条石鲷自然群体和养殖群体,本研究随机抽取226尾条石鲷样本(自然群体126尾、养殖群体100尾),利用传统形态测量法和框架测量法分别测得7、36个可量性状,并对其进行差异性分析与逐步判别分析。差异性分析结果表明:采用传统形态... 为有效区分条石鲷自然群体和养殖群体,本研究随机抽取226尾条石鲷样本(自然群体126尾、养殖群体100尾),利用传统形态测量法和框架测量法分别测得7、36个可量性状,并对其进行差异性分析与逐步判别分析。差异性分析结果表明:采用传统形态测量法时,条石鲷6个可量性状(不包括体长)中有4个性状差异极显著(P<0.01)、2个性状差异显著(P<0.05);采用框架测量法时,36个可量性状中有31个性状差异极显著(P<0.01)、5个性状差异显著(P<0.05)。说明条石鲷自然群体和养殖群体的形态特征存在显著差异,差异主要集中在头部、躯干和腹鳍。逐步判别分析结果表明:基于传统形态测量法和框架测量法交叉验证后的判别正确率分别为97.8%和94.7%,基于2种方法相结合的综合分析交叉验证后的判别正确率为99.6%。上述研究结果表明,利用形态学方法对条石鲷自然群体和养殖群体进行判别是可行的,并且,结合多种形态可量性状的综合判别方式的判别结果更准确。 展开更多
关键词 条石鲷 群体判别 框架测量法 逐步判别分析
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条石鲷(Oplegnathus fasciatus)源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)的分离鉴定 被引量:8
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作者 王庚申 许文军 +2 位作者 谢建军 汪玮 施慧 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2017年第2期151-157,共7页
2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1–2 mm的白色类结节。从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量... 2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1–2 mm的白色类结节。从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量为5.93×10~4 CFU/g。形态学观察结果显示,菌株OF-1为革兰氏阴性、短杆状,在TCBS培养基上不生长。API 20E细菌鉴定系统、16S r RNA系统发育树分析结果证实,该菌株为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselaesubsp.piscicida)。该菌对庆大霉素、青霉素、氟哌酸、氧氟沙星、氨苄青霉素等药物高度敏感,对红霉素、链霉素、卡那霉素、苯唑青霉素等药物具有抗性。 展开更多
关键词 条石鲷 美人鱼发光杆菌杀鱼亚种 细菌鉴定
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条石鲷(Oplegnathus fasciatus)养殖群体与野生群体线粒体控制区序列遗传变异研究 被引量:7
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作者 肖志忠 肖永双 +7 位作者 任桂静 高天翔 涂登志 韩志强 马道远 徐世宏 刘清华 李军 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期249-254,共6页
采用线粒体(mtDNA)控制区序列分析方法,进行了条石鲷养殖群体(F1代和F2代)与野生群体的遗传变异比较研究。结果表明:在长度为484bp的mtDNA控制区片段中,条石鲷养殖群体F1代单倍型多样度水平(h=0.955±0.047)略低于野生群体(h=1.000&... 采用线粒体(mtDNA)控制区序列分析方法,进行了条石鲷养殖群体(F1代和F2代)与野生群体的遗传变异比较研究。结果表明:在长度为484bp的mtDNA控制区片段中,条石鲷养殖群体F1代单倍型多样度水平(h=0.955±0.047)略低于野生群体(h=1.000±0.034),却显著高于养殖F2代群体(h=0.797±0.070);条石鲷野生群体(π=0.021±0.012)、养殖群体F1代(π=0.018±0.010)和养殖群体F2代(π=0.014±0.008)的核苷酸多样度水平呈现明显的递减趋势;核苷酸不配对分布和两两序列相比较碱基差异结果显示条石鲷野生群体、养殖群体F1代和养殖群体F2代也呈现明显的递减趋势。分子方差分析(AMOVA)、两两群体相比较的ФST和确切P检验结果皆显示条石鲷养殖群体F1代和F2代与野生群体存在显著的遗传分化。单倍型最小跨度分析和NJ系统分析结果均未检测到显著的谱系结构。 展开更多
关键词 条石鲷 养殖群体 野生群体 线粒体控制区 遗传变异
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基于cyt b基因序列的光唇鱼群体遗传多样性和遗传结构分析
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作者 钟天星 袁一鑫 +7 位作者 王逸飞 杨金权 周佳俊 汪勇翔 张渝 涂晓贤 李家乐 任建峰 《四川动物》 北大核心 2024年第6期656-663,共8页
为了解光唇鱼Acrossocheilus fasciatus自然分布的不同地理群体遗传多样性和遗传结构,基于cyt b基因序列,对浙江省的苕溪、金华江、曹娥江、椒江和安徽省的新安江、青弋江共6个水系的116尾光唇鱼进行分析。结果显示,116条cyt b基因序列... 为了解光唇鱼Acrossocheilus fasciatus自然分布的不同地理群体遗传多样性和遗传结构,基于cyt b基因序列,对浙江省的苕溪、金华江、曹娥江、椒江和安徽省的新安江、青弋江共6个水系的116尾光唇鱼进行分析。结果显示,116条cyt b基因序列定义了12个单倍型,光唇鱼6个群体的单倍型多样性为0~0.648,核苷酸多样性为0~0.004 35,除曹娥江群体呈现高单倍型多样性和低核苷酸多样性的特点外,其他群体均呈现出低单倍型多样性和低核苷酸多样性的特点。遗传分化指数分析显示,除苕溪与椒江群体间属中度遗传分化外,其余各群体间均属于极大的遗传分化(P<0.01)。基于单倍型序列构建的系统发育树显示,新安江、金华江、曹娥江、苕溪和椒江5个群体的单倍型混杂在一起聚为一支,青弋江群体不同单倍型聚为一支。遗传距离分析结果显示,青弋江群体与其他群体间的遗传距离均大于0.03。综合遗传距离、遗传分化指数和单倍型系统发育树结果,青弋江群体与其他群体间产生了明显的遗传分化。核苷酸错配分布和中性检验结果显示,光唇鱼近期并未经历种群扩张事件。本研究结果为光唇鱼种质资源保护与利用、增殖放流和良种选育等相关工作提供了理论依据。 展开更多
关键词 光唇鱼 cyt b基因 遗传多样性 遗传结构
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中国近海条石鲷(Oplegnathus fasciatus)群体遗传多样性线粒体DNA序列分析 被引量:7
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作者 肖永双 程起群 +6 位作者 任桂静 李军 马道远 徐世宏 刘清华 肖志忠 韩志强 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期427-432,共6页
采用线粒体(mtDNA)DNACOI和Cytb基因片段序列分析方法,进行了中国近海条石鲷(Oplegnathus fasciatus)舟山和胶南群体遗传多样性及其遗传结构现状研究。结果表明,基于mtDNACOI分子标记揭示条石鲷舟山群体遗传多样性水平(h=0.814±0.0... 采用线粒体(mtDNA)DNACOI和Cytb基因片段序列分析方法,进行了中国近海条石鲷(Oplegnathus fasciatus)舟山和胶南群体遗传多样性及其遗传结构现状研究。结果表明,基于mtDNACOI分子标记揭示条石鲷舟山群体遗传多样性水平(h=0.814±0.060,π=0.009±0.005,k=5.653±2.789)显著高于胶南群体(h=0.742±0.116,π=0.003±0.002,k=1.970±1.196);MST分析、NJ系统分析和核苷酸不配对分布分析结果皆显示两群体内存在三个显著分化的单倍型类群,支系间的遗传距离为0.018—0.025;遗传分化指数结果(Fst=0.331,P=0.000)和确切P检验结果显示(P=0.000)两群体间存在显著遗传分化。基于mtDNACytb分子标记显示条石鲷群体遗传多样性总体上呈现较低水平(h=0.874±0.023,π=0.006±0.003,k=2.761±1.492),舟山群体核苷酸多样度水平显著高于胶南群体;NJ系统发育和群体遗传分化研究结果显示,条石鲷群体间未检测到显著的遗传分化。 展开更多
关键词 条石鲷 群体 遗传多样性 mtDNA COI和Cyt B基因 遗传分化
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低温胁迫对暗纹东方鲀肠道氧化应激、细胞凋亡及肠道微生物组成的影响 被引量:2
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作者 付东勇 张艺然 +6 位作者 褚鹏 王浩哲 张凯 毕宜慧 孙亦如 王涛 尹绍武 《水产学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期40-51,共12页
为了探究低温胁迫对暗纹东方鲀肠道氧化应激、细胞凋亡及肠道微生物组成的影响,实验测定了3个处理温度(25、19和13℃),4个取样时间点(0、6、24和96 h)下氧化应激、细胞凋亡与肠道微生物相关指标。结果显示,与对照组相比,随着温度降低肠... 为了探究低温胁迫对暗纹东方鲀肠道氧化应激、细胞凋亡及肠道微生物组成的影响,实验测定了3个处理温度(25、19和13℃),4个取样时间点(0、6、24和96 h)下氧化应激、细胞凋亡与肠道微生物相关指标。结果显示,与对照组相比,随着温度降低肠道绒毛发生坏死、增生和杯细胞肿大。总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性以及丙二醛(MDA)含量显著增加。肠道微生物组成多样性降低。肠道微生物丰度发生改变,如黄色杆菌属、副球菌属、乳球菌属和双歧杆菌属的丰度随温度降低而上升,梭菌属、气单胞菌属和嗜热芽孢杆菌属的丰度随温度上升而下降。细胞凋亡相关基因(caspase-3、caspase-7、caspase-9、p53、Bax和Bcl-2)的表达随温度降低升高。此外,实验发现副球菌属和嗜热芽孢杆菌属丰度的改变与肠道氧化应激、细胞凋亡均具有Pearson相关性,其可作为潜在微生物用来反映暗纹东方鲀是否处于氧化应激和细胞凋亡状态。本研究结果可为暗纹东方鲀健康养殖提供基础资料。 展开更多
关键词 暗纹东方鲀 低温 肠道微生物 氧化应激 细胞凋亡
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淡水驯化对松江鲈幼鱼鳃组织结构的影响
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作者 徐建 胡望娇 +2 位作者 冯广朋 季强 郑跃平 《广东农业科学》 CAS 2024年第8期115-124,共10页
【目的】松江鲈(Trachidermus fasciatus)是国家二级保护动物,属于广盐性的洄游性鱼类。研究松江鲈增殖放流前适宜的淡化模式。【方法】采用组织切片技术对急性淡水胁迫、不同淡化速度(每次降低5个盐度,并每12、24、48 h降低1次,记为A、... 【目的】松江鲈(Trachidermus fasciatus)是国家二级保护动物,属于广盐性的洄游性鱼类。研究松江鲈增殖放流前适宜的淡化模式。【方法】采用组织切片技术对急性淡水胁迫、不同淡化速度(每次降低5个盐度,并每12、24、48 h降低1次,记为A、B、C组),以及不同淡化幅度(每24 h降低1次,并每次降低2、3、5个盐度,记为D、E、B组)下松江鲈幼鱼鳃的显微结构变化进行研究。【结果】将处于盐度25的松江鲈幼鱼直接放入淡水中进行急性淡水胁迫,1 h时,鳃组织结构形态正常;12 h时,鳃丝出现表皮轻微脱落;24 h时,血细胞出现吸水胀破现象;3 d时,鳃丝和鳃小片的空泡数量显著增多;7 d时,鳃丝和鳃小片表皮脱落最为严重,鳃小片长度增加而宽度减少、末端弯曲,出现细胞溶解现象,形状不规则,空泡除在鳃小片基部出现外、位置也有所上升,血细胞数量减少,线粒体丰富细胞数量增多。盐度25时,A~C组鳃组织结构无明显变化。盐度降至15时,A组鳃丝结构破损现象较其他两组明显。盐度达淡水时,A组鳃组织结构破损严重,鳃小片长度增加但宽度减少,结构不完整,线粒体丰富细胞数量增多,血细胞数量较盐度15时减少;A组鳃丝和鳃小片结构较B、C组有明显差异,不完整程度更严重,B组和C组之间差异不明显,鳃组织结构破损程度相近。起始盐度25,淡水驯化1 h时,D、E组和B组之间的鳃组织结构差异不明显;12 h时,3组鳃组织中空泡数量增多;24 h时,B组和D组鳃中的空泡数量比E组多;3 d时,B组鳃组织较其他两组脱落区域更多;7 d时,E组线粒体丰富细胞及血细胞数量比B、D组多;B组鳃组织结构的不完整程度比D、E组更严重。【结论】随淡水驯化时间增加,松江鲈通过增加鳃小片长度,控制血细胞、线粒体丰富细胞数量等提高自身渗透能力,减少胁迫对鳃的危害。此外,降低淡化速度和幅度有助于松江鲈更好地适应盐度变化,建议选择每日降低2个盐度的淡化模式,以减轻淡水驯化对松江鲈鳃组织结构的损害。 展开更多
关键词 松江鲈 淡水驯化 盐度 组织结构 淡化速度 淡化幅度
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暗纹东方鲀TGF-β1基因的克隆、表达特征及生长性状相关SNP位点筛选
14
作者 马思思 喻伟峰 +5 位作者 张凯 张雯雯 唐晓东 刘雨曦 尹绍武 王涛 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2024年第2期129-139,共11页
为探究暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)TGF-β1基因与其生长性状的关联及作用,采用RACE技术克隆了暗纹东方鲀TGF-β1基因,分析了其基因结构与表达特征,并通过直接PCR扩增法对TGF-β1基因进行多片段比对,在此基础上筛选出与生长性状相关... 为探究暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)TGF-β1基因与其生长性状的关联及作用,采用RACE技术克隆了暗纹东方鲀TGF-β1基因,分析了其基因结构与表达特征,并通过直接PCR扩增法对TGF-β1基因进行多片段比对,在此基础上筛选出与生长性状相关的SNP位点。研究发现TGF-β1基因cDNA全长共2217 bp,包含5′UTR 51 bp,3′UTR 1014 bp,ORF 1152 bp,编码383个氨基酸。氨基酸序列比对分析表明,暗纹东方鲀TGF-β1基因与红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)同源性最高(92.82%)。进化树分析表明,暗纹东方鲀TGF-β1基因编码氨基酸序列与红鳍东方鲀聚为一支,与鲈形目鱼类亲缘关系最近(68.46%~73.33%)。qRT-PCR检测显示,TGF-β1基因在暗纹东方鲀8种不同组织(心脏、肝脏、脑、脾脏、肾脏、肌肉、中肠和鳃)都有表达,其中肾脏表达量最高,心脏和脾脏表达量次之。通过SNP位点不同基因型与个体生长性状的相关性分析,发现TGF-β1上的SNP g.3908 C>A位点与暗纹东方鲀多项生长性状有关,其中CC型是优势基因型,且CC型个体体宽、肥满度较高。研究结果证实TGF-β1基因与暗纹东方鲀生长性状有一定的相关性,可为暗纹东方鲀分子标记辅助育种提供基础资料。 展开更多
关键词 暗纹东方鲀 TGF-Β1 表达特征 生长性状 SNP
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暗纹东方鲀肠上皮细胞体外培养方法的建立及皮质醇对其生理生化的影响
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作者 刘雨曦 孙亦如 +4 位作者 王思进 马思思 喻伟峰 尹绍武 王涛 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第5期119-133,共15页
应激反应对暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)养殖业危害极大,而皮质醇(cortisol)是判断鱼类应激反应的重要标志物。肠道是鱼体与外界环境接触的媒介,肠道生理状态能反映鱼体的应激水平,但目前肠道在鱼类响应应激反应中的作用不详。本研... 应激反应对暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)养殖业危害极大,而皮质醇(cortisol)是判断鱼类应激反应的重要标志物。肠道是鱼体与外界环境接触的媒介,肠道生理状态能反映鱼体的应激水平,但目前肠道在鱼类响应应激反应中的作用不详。本研究以暗纹东方鲀肠上皮细胞为对象,分别采用胰蛋白酶和DMEM培养基、胰蛋白酶和1640培养基、Ⅰ型胶原酶和DMEM培养基、Ⅰ型胶原酶和1640培养基4种方法对其进行原代培养,旨在建立暗纹东方鲀原代肠上皮细胞体外培养方法,并在此基础上探讨皮质醇对暗纹东方鲀肠上皮细胞氧化应激、细胞凋亡和脂代谢的影响。利用CCK-8法检测肠上皮细胞活力,透射电镜观察皮质醇处理后细胞内线粒体的形态结构,荧光定量PCR(qRT-PCR)检测氧化应激相关基因、细胞凋亡相关基因及脂代谢相关基因在肠上皮细胞内的表达模式,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡等。结果显示,在4种培养方法中,采用胰蛋白酶消化和DMEM培养基进行培养的肠上皮细胞增殖率最高,贴壁情况最佳;与对照组相比,当皮质醇浓度高于2 000 nmol/L时,肠上皮细胞活力显著下降(P<0.05);透射电镜显示,所有皮质醇处理组肠上皮细胞内线粒体结构发生改变,线粒体数量增加;随皮质醇处理浓度的升高,肠上皮细胞内氧化应激相关基因(sod、cat和gsh-px)及促凋亡基因(caspase-3、caspa-se7、caspase-9、bax和p53)表达量和凋亡指数均显著上升,抗凋亡基因bcl-2表达量显著下降(P<0.05);脂肪合成相关基因(g6pd、6gpd、pparγ、fas和acc)表达量显著下降,脂肪分解相关基因(hsl、ppara、lpl和cpt-1)表达量显著上升(P<0.05);甘油三酯和总胆固醇含量显著下降,游离脂肪酸含量显著上升(P<0.05)。结果表明,皮质醇能够促进暗纹东方鲀肠上皮细胞的氧化应激和细胞凋亡,同时促进脂肪的分解并抑制脂肪的合成。本研究以期为暗纹东方鲀抗应激养殖提供一定的参考资料。 展开更多
关键词 暗纹东方鲀 肠上皮细胞 皮质醇 氧化应激 细胞凋亡 脂代谢
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松江鲈(Trachidermus fasciatus)泛素结合酶E2-D2基因的分子克隆及组织表达分析 被引量:10
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作者 陈学昭 张雷 +3 位作者 于珊珊 毕彩红 刘春影 祝茜 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期133-140,共8页
泛素结合酶(UbcE2)是蛋白泛素化过程中所必需的酶,在泛素转移和底物的特异性识别方面发挥着重要的作用。本实验利用RACE技术克隆获得了全长为993bp的松江鲈泛素结合酶E2-D2基因cDNA序列(命名为TfUbcE2-D2),其开放阅读框为444bp,编码147... 泛素结合酶(UbcE2)是蛋白泛素化过程中所必需的酶,在泛素转移和底物的特异性识别方面发挥着重要的作用。本实验利用RACE技术克隆获得了全长为993bp的松江鲈泛素结合酶E2-D2基因cDNA序列(命名为TfUbcE2-D2),其开放阅读框为444bp,编码147个氨基酸。通过SMART预测得知,TfUbcE2-D2含有一个UBCc结构域。同源比对结果表明该基因与其他物种的同源性为92.31%。实时荧光定量PCR显示,TfUbcE2-D2广泛表达于松江鲈各组织,在肾脏中的相对表达量最高,其次为鳃。鳗弧菌(Vibrio anguillarum)刺激后,TfUbcE2-D2在血液、脾脏、肝脏和鳃中表达均上调,其中,脾脏和鳃中的表达量上调约40倍。由以上实验结果推测,TfUbcE2-D2可能参与松江鲈的先天免疫防御。 展开更多
关键词 泛素结合酶 松江鲈 基因克隆 非特异性免疫
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致倦库蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)引诱产卵信息素的合成及其生物活性 被引量:8
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作者 张金桐 刘珣 +2 位作者 孔杰 张钟宁 白云秀 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1994年第1期45-50,共6页
致倦库蚊(Culexpipiensquinquefasciatus)产生的引诱产卵的信息素被鉴定为赤式-6-乙酰氧基-5-十六碳内酯。用环戊酮和十一碳醛经醇醛缩合产生2-(1-羟基十一烷基-1-)环戊酮,再通过拜尔-... 致倦库蚊(Culexpipiensquinquefasciatus)产生的引诱产卵的信息素被鉴定为赤式-6-乙酰氧基-5-十六碳内酯。用环戊酮和十一碳醛经醇醛缩合产生2-(1-羟基十一烷基-1-)环戊酮,再通过拜尔-维利格反应和乙酰化作用合成了这种内酯的赤式和苏式异构体的混合物。合成产物由等比例的四种异构体组成,包括具有活性的赤式-(5R,6S)和它的对映异构体,以及另外两个苏式异构体。用合成的信息素对四种(亚种)蚊虫做了引诱产卵的生物测定,发现该产物对同种不同亚种的淡色库蚊(Cx.pipienspallens)和致倦库蚊均有引诱雌蚊产卵的活性,且对前者的引诱力更强,并能保持至少10天以上;而对同属不同种的三带喙库蚊(Cx.tritaeniorhynchus)和另一个属的埃及伊蚊(Aedesaegypti)则无活性,表明该信息素具有种的(而非属的)特异性。 展开更多
关键词 致倦库蚊 引诱产卵 信息素 合成
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松江鲈(Trachiderm usfasciatus)髓样分化因子MyD88基因克隆与组织表达分析 被引量:2
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作者 毕彩红 张秋霞 +3 位作者 于珊珊 陈学昭 刘春影 祝茜 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期135-142,共8页
髓样分化因子(My D88)是TOLL样受体介导的信号通路中的一个关键接头分子,通过激活核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)而参与机体的先天免疫。克隆了松江鲈的My D88基因(命名为Tf My D88),并对该基因进行了生物信息学和表达模式... 髓样分化因子(My D88)是TOLL样受体介导的信号通路中的一个关键接头分子,通过激活核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)而参与机体的先天免疫。克隆了松江鲈的My D88基因(命名为Tf My D88),并对该基因进行了生物信息学和表达模式分析。结果显示,Tf My D88 c DNA序列全长1 555 bp,5'UTR长89 bp,3'UTR长599 bp;开放阅读框长度为867 bp,编码288个氨基酸。SMART软件预测Tf My D88分子的N端为一个保守的死亡结构域(death domain,DD),C端存在典型的TIR(Toll/interleukin-1 receptor)结构域。Tf My D88与其它脊椎动物My D88的氨基酸相似性达57.58%-82.64%,系统进化树分析表明Tf My D88与同属鲈形总目的花鲈和鳜鱼聚在一起,所有鱼类My D88聚为一支。Real-time PCR检测显示Tf My D88广泛表达于松江鲈各组织,但在鳃中的相对表达量最高;其次为脾脏和皮肤。LPS(lipopolysaccharide)刺激后,Tf My D88在松江鲈的血液、肝脏、皮肤、脾脏均出现明显上调。刺激2 h后,在血液Tf My D88表达量升高了近60倍,在皮肤中的表达量也升高了27倍。上述结果表明Tf My D88可能参与松江鲈先天免疫。 展开更多
关键词 松江鲈 MYD88 基因克隆 先天免疫 LPS
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Breeding strategy of Acrossocheilus fasciatus in the Puxi Stream of the Huangshan Mountain 被引量:9
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作者 Yunzhi YAN Lili GUO +2 位作者 Xiuying XIANG Yilong XI Yifeng CHEN 《Current Zoology》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第5期350-356,共7页
Breeding strategies of Acrossocheilus fasciatus were studied from 592 specimens collected monthly during May 2007 and April 2008 in the Puxi Stream of the Huangshan Mountain. Sex ratio of the studied population was 0.... Breeding strategies of Acrossocheilus fasciatus were studied from 592 specimens collected monthly during May 2007 and April 2008 in the Puxi Stream of the Huangshan Mountain. Sex ratio of the studied population was 0.90 : 1 ( ♀ : ♂ ), not significantly different from 1 : 1. Both sexes reached their first sexual maturity at age 2 (the second calendar year of their birth). Fifty percent of females and males reached maturity at a total length of 69.75 mm and 69.36 mm respectively, and the minimum total length was 61.54 mm and 58.96 mm, respectively. Based on the monthly changes in gonado-somatic index and egg- development process, the breeding season of the population was from May to August, with one obvious interval (in June) occurring in the breeding activity for the females. The nonsynchronous development of oocytes observed in mature ovaries indicated that A. fasciatus is a batch spawner. Absolute fecundity of A. fasciatus ranged from 308 to 2002 eggs with a mean of 857 eggs, increased significantly with total length, and was significantly different among three age groups. Relative fecundity ranged from 38.63 to 71.70 egg/g with a mean of 53.29 egg/g, and was not significantly different among the three age groups. It was suggested that these reproductive characteristics were adaptive strategies for A. fasciatus to acclimatize to lotic water where environmental factors were unstable but predictable [ Current Zoology 55 (5) : 350 - 356, 2009]. 展开更多
关键词 Acrossocheilus fasciatus Breeding strategy FECUNDITY Sexual maturity Spawning season
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光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)Leptin基因克隆及禁食-再投喂对其表达的影响 被引量:1
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作者 穆方申 苗亮 +3 位作者 李明云 侯红红 李笑萌 徐玉敏 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期822-829,共8页
瘦素(Leptin)是在动物摄食和能量代谢调节中具有重要作用的一种蛋白。为研究光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)中Leptin基因(AfLep)的结构和功能,作者克隆了其c DNA序列全长。结果显示AfLep由1315个核苷酸组成,含1个长度为516bp的开放... 瘦素(Leptin)是在动物摄食和能量代谢调节中具有重要作用的一种蛋白。为研究光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)中Leptin基因(AfLep)的结构和功能,作者克隆了其c DNA序列全长。结果显示AfLep由1315个核苷酸组成,含1个长度为516bp的开放阅读框,预测编码蛋白由171个氨基酸残基组成并具有长度为20aa的信号肽。系统进化树中AfLep与其他鲤科鱼类的Leptin蛋白聚为一簇,与齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)进化相关性最高。多重序列比对显示AfLep与齐口裂腹鱼Leptin蛋白相似性最高(86.7%),与鲤科其他鱼类间的相似性均在80%以上。AfLep具有脊椎动物Leptin蛋白的4个保守?螺旋结构,其三级结构与人Leptin相似。AfLep在光唇鱼肝脏中的表达量最高,其次是脑和肾,其他组织中仅有微弱表达。实时荧光定量PCR检测显示禁食后光唇鱼肝脏AfLep表达量降低(P<0.05),禁食1d、3d、7d时的表达量分别比与禁食前降低了58.25%、73.82%和92.05%;禁食1d和3d的鱼经再投喂后肝脏AfLep表达量均显著升高(P<0.05),但禁食7d的鱼再投喂后AfLep表达量仅略有升高(P>0.05)。上述结果表明AfLep参与了光唇鱼的摄食管理和能量代谢调控。 展开更多
关键词 光唇鱼 LEPTIN基因 组织表达 禁食-再投喂
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