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枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因的克隆及原核表达
被引量:
6
1
作者
任娟
孙佰平
+2 位作者
杜娟
张慧
赵思峰
《石河子大学学报(自然科学版)》
CAS
2012年第5期577-581,共5页
为了进一步明确枯草芽孢杆菌S44菌株的防病机理,克隆其Iturin A合成关键基因ituD,对该基因进行了原核表达。通过PCR技术克隆了枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因,序列分析结果表明,该序列全长为1203bp,编码400个氨基酸,与已报道的ituD氨基酸...
为了进一步明确枯草芽孢杆菌S44菌株的防病机理,克隆其Iturin A合成关键基因ituD,对该基因进行了原核表达。通过PCR技术克隆了枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因,序列分析结果表明,该序列全长为1203bp,编码400个氨基酸,与已报道的ituD氨基酸序列同源性为85%。构建了原核生物表达载体pET28a(+)-ituD,对不同的IPTG诱导浓度和诱导时间等条件的优化结果表明,37℃6h能诱导ituD融合蛋白的最大量表达,在0.5mmol/LIPTG浓度下可以成功表达出ituD蛋白。
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关键词
枯草芽孢杆菌
伊枯草菌素
itud基因
原核表达
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职称材料
枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因敲除突变株的构建
被引量:
1
2
作者
张慧
陈莉
赵思峰
《湖北农业科学》
北大核心
2014年第6期1436-1439,共4页
利用同源重组基因敲除方法构建了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S44 ituD基因同源突变株。菌落PCR、RT-PCR、SDS-PAGE结果均显示ituD基因缺失突变株构建成功。野生株与突变株的菌落形态、生长速率以及抑菌活性均有显著差异。抑菌活性...
利用同源重组基因敲除方法构建了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S44 ituD基因同源突变株。菌落PCR、RT-PCR、SDS-PAGE结果均显示ituD基因缺失突变株构建成功。野生株与突变株的菌落形态、生长速率以及抑菌活性均有显著差异。抑菌活性试验结果显示,突变株抑菌活性显著减弱,成功构建的ituD基因突变株为进一步研究ituD基因的生物学功能奠定了基础。
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关键词
枯草芽孢杆菌(Bacillus
subtilis)
itud基因
敲除突变株
抑菌活性
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职称材料
枯草芽孢杆菌S44抑菌化合物合成关键基因ituD的功能分析
被引量:
4
3
作者
张慧
杜娟
赵思峰
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2020年第10期2281-2285,共5页
【目的】通过对突变体及相关基因表达分析来研究ituD基因在菌株S44中的功能。【方法】采用qRT-PCR分析ituD的表达量,通过盆栽实验分析菌株对棉苗生长、病害防治、发病率的影响;测定土壤中菌含量,采用HPLC对土壤中的iturin A进行检测。...
【目的】通过对突变体及相关基因表达分析来研究ituD基因在菌株S44中的功能。【方法】采用qRT-PCR分析ituD的表达量,通过盆栽实验分析菌株对棉苗生长、病害防治、发病率的影响;测定土壤中菌含量,采用HPLC对土壤中的iturin A进行检测。【结果】qRT-PCR结果表明,S1株的ituD基因几乎没有表达,其抑菌活性丧失。在盆栽实验中,S44-A菌株能在土壤中定殖,14 d后在土壤中检测到iturin A;与S44-A相比S1存活量较少,并且在14 d后未检测到iturin A。【结论】ituD基因是S44菌株抑菌活性、植物根际定殖与调控的关键因子。
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关键词
Bacillus
subtilis
S44
itud基因
iturin
A
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职称材料
题名
枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因的克隆及原核表达
被引量:
6
1
作者
任娟
孙佰平
杜娟
张慧
赵思峰
机构
石河子大学绿洲农作物病害防控重点实验室
出处
《石河子大学学报(自然科学版)》
CAS
2012年第5期577-581,共5页
基金
国家自然科学基金(30800733)
新疆兵团重点科技攻关计划(2010GG21)
石河子大学重大科技攻关计划项目(GXJS2010-ZDGG04)
文摘
为了进一步明确枯草芽孢杆菌S44菌株的防病机理,克隆其Iturin A合成关键基因ituD,对该基因进行了原核表达。通过PCR技术克隆了枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因,序列分析结果表明,该序列全长为1203bp,编码400个氨基酸,与已报道的ituD氨基酸序列同源性为85%。构建了原核生物表达载体pET28a(+)-ituD,对不同的IPTG诱导浓度和诱导时间等条件的优化结果表明,37℃6h能诱导ituD融合蛋白的最大量表达,在0.5mmol/LIPTG浓度下可以成功表达出ituD蛋白。
关键词
枯草芽孢杆菌
伊枯草菌素
itud基因
原核表达
Keywords
Bacillus subtilis Iturin A
itud
prokaryotic expression
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因敲除突变株的构建
被引量:
1
2
作者
张慧
陈莉
赵思峰
机构
新疆绿洲农业病虫害治理与植保资源利用自治区高校重点实验室/石河子大学农学院
出处
《湖北农业科学》
北大核心
2014年第6期1436-1439,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30800733)
石河子大学自然科学创新团队项目(2011ZRKXTD-00204)
文摘
利用同源重组基因敲除方法构建了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S44 ituD基因同源突变株。菌落PCR、RT-PCR、SDS-PAGE结果均显示ituD基因缺失突变株构建成功。野生株与突变株的菌落形态、生长速率以及抑菌活性均有显著差异。抑菌活性试验结果显示,突变株抑菌活性显著减弱,成功构建的ituD基因突变株为进一步研究ituD基因的生物学功能奠定了基础。
关键词
枯草芽孢杆菌(Bacillus
subtilis)
itud基因
敲除突变株
抑菌活性
Keywords
Bacillus subtilis
itud
gene
knockout mutant
antifungal activity
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
枯草芽孢杆菌S44抑菌化合物合成关键基因ituD的功能分析
被引量:
4
3
作者
张慧
杜娟
赵思峰
机构
新疆绿洲农业病虫害治理与植保资源利用自治区高校重点实验室
重庆市农业科学院农业资源与环境研究所
出处
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2020年第10期2281-2285,共5页
基金
国家自然科学基金项目“滴灌条件下枯草芽孢杆菌S44防治加工番茄根腐病防病机理研究”(30800733)
重庆市农发资金基础科研项目(NKY-2019AC001,NKY-2020AC010)。
文摘
【目的】通过对突变体及相关基因表达分析来研究ituD基因在菌株S44中的功能。【方法】采用qRT-PCR分析ituD的表达量,通过盆栽实验分析菌株对棉苗生长、病害防治、发病率的影响;测定土壤中菌含量,采用HPLC对土壤中的iturin A进行检测。【结果】qRT-PCR结果表明,S1株的ituD基因几乎没有表达,其抑菌活性丧失。在盆栽实验中,S44-A菌株能在土壤中定殖,14 d后在土壤中检测到iturin A;与S44-A相比S1存活量较少,并且在14 d后未检测到iturin A。【结论】ituD基因是S44菌株抑菌活性、植物根际定殖与调控的关键因子。
关键词
Bacillus
subtilis
S44
itud基因
iturin
A
Keywords
Bacillus subtilis S44
itud
gene
Iturin A
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因的克隆及原核表达
任娟
孙佰平
杜娟
张慧
赵思峰
《石河子大学学报(自然科学版)》
CAS
2012
6
下载PDF
职称材料
2
枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因敲除突变株的构建
张慧
陈莉
赵思峰
《湖北农业科学》
北大核心
2014
1
下载PDF
职称材料
3
枯草芽孢杆菌S44抑菌化合物合成关键基因ituD的功能分析
张慧
杜娟
赵思峰
《西南农业学报》
CSCD
北大核心
2020
4
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职称材料
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