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枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因的克隆及原核表达 被引量:6
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作者 任娟 孙佰平 +2 位作者 杜娟 张慧 赵思峰 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第5期577-581,共5页
为了进一步明确枯草芽孢杆菌S44菌株的防病机理,克隆其Iturin A合成关键基因ituD,对该基因进行了原核表达。通过PCR技术克隆了枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因,序列分析结果表明,该序列全长为1203bp,编码400个氨基酸,与已报道的ituD氨基酸... 为了进一步明确枯草芽孢杆菌S44菌株的防病机理,克隆其Iturin A合成关键基因ituD,对该基因进行了原核表达。通过PCR技术克隆了枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因,序列分析结果表明,该序列全长为1203bp,编码400个氨基酸,与已报道的ituD氨基酸序列同源性为85%。构建了原核生物表达载体pET28a(+)-ituD,对不同的IPTG诱导浓度和诱导时间等条件的优化结果表明,37℃6h能诱导ituD融合蛋白的最大量表达,在0.5mmol/LIPTG浓度下可以成功表达出ituD蛋白。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 伊枯草菌素 itud基因 原核表达
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枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因敲除突变株的构建 被引量:1
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作者 张慧 陈莉 赵思峰 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第6期1436-1439,共4页
利用同源重组基因敲除方法构建了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S44 ituD基因同源突变株。菌落PCR、RT-PCR、SDS-PAGE结果均显示ituD基因缺失突变株构建成功。野生株与突变株的菌落形态、生长速率以及抑菌活性均有显著差异。抑菌活性... 利用同源重组基因敲除方法构建了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S44 ituD基因同源突变株。菌落PCR、RT-PCR、SDS-PAGE结果均显示ituD基因缺失突变株构建成功。野生株与突变株的菌落形态、生长速率以及抑菌活性均有显著差异。抑菌活性试验结果显示,突变株抑菌活性显著减弱,成功构建的ituD基因突变株为进一步研究ituD基因的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) itud基因 敲除突变株 抑菌活性
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枯草芽孢杆菌S44抑菌化合物合成关键基因ituD的功能分析 被引量:4
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作者 张慧 杜娟 赵思峰 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第10期2281-2285,共5页
【目的】通过对突变体及相关基因表达分析来研究ituD基因在菌株S44中的功能。【方法】采用qRT-PCR分析ituD的表达量,通过盆栽实验分析菌株对棉苗生长、病害防治、发病率的影响;测定土壤中菌含量,采用HPLC对土壤中的iturin A进行检测。... 【目的】通过对突变体及相关基因表达分析来研究ituD基因在菌株S44中的功能。【方法】采用qRT-PCR分析ituD的表达量,通过盆栽实验分析菌株对棉苗生长、病害防治、发病率的影响;测定土壤中菌含量,采用HPLC对土壤中的iturin A进行检测。【结果】qRT-PCR结果表明,S1株的ituD基因几乎没有表达,其抑菌活性丧失。在盆栽实验中,S44-A菌株能在土壤中定殖,14 d后在土壤中检测到iturin A;与S44-A相比S1存活量较少,并且在14 d后未检测到iturin A。【结论】ituD基因是S44菌株抑菌活性、植物根际定殖与调控的关键因子。 展开更多
关键词 Bacillus subtilis S44 itud基因 iturin A
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