In order to identify the molecular markers that can be widely used in the breeding of Brassica napus L.varieties with high seed oil content under different genetic backgrounds,we developed a Kompetitive Allele Specifi...In order to identify the molecular markers that can be widely used in the breeding of Brassica napus L.varieties with high seed oil content under different genetic backgrounds,we developed a Kompetitive Allele Specific PCR(KASP)marker for seed oil content on the basis of the results from available studies.The verification in the F_(2) population showed that the marker was closely linked to the quantitative trait locus(QTL)for oil content on chromosome A05.The findings helped to breed the‘Fengyou’varieties with high seed oil content in the middle reaches of the Yangtze River.展开更多
【目的】进一步完善桃花型基因型分类,开发桃花型相关分子标记,为观赏桃花的分子辅助育种提供理论支持。【方法】利用全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)、IGV可视化软件分析,以及竞争性等位基因特异性PCR(Kompetiti...【目的】进一步完善桃花型基因型分类,开发桃花型相关分子标记,为观赏桃花的分子辅助育种提供理论支持。【方法】利用全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)、IGV可视化软件分析,以及竞争性等位基因特异性PCR(Kompetitive allele-specific PCR,KASP)技术,在定位到的候选位点进行鉴定分析。【结果】GWAS定位分析在Pp08:14518604~14521291 bp存在一个ms179810转座子的缺失,x2验证结果表明,转座子的插入与缺失与花型性状无显著性关系。在转座子上游33980 bp处鉴定到一个单碱基核苷酸(SNP)变异,变异类型分为CC型、AC型、AA型3种,比对结果显示基因型为CC型、AC型,其表型为铃形,基因型为AA型,其表型为蔷薇形,在145份桃自然群体中鉴定准确率为98.62%。但是通过表型比对发现,基因型为CC时,铃形花冠直径为(1.54±0.46)cm,同时,基因型杂合的中蟠17号自交群体后代192株中基因型与表型准确率在98.44%。【结论】根据桃基因组中Pp08:14484624 bp处的变异类型以及桃花型的调查结果,首次将铃形花基因型细分为纯合铃形和杂合铃形,且开发了同时鉴定纯合铃形、杂合铃形及蔷薇形的分子标记。展开更多
【目的】植物根系对水分及营养的获取、作物的生长发育和产量的形成至关重要。挖掘小麦苗期根系性状显著关联的SNP位点,预测相关候选基因,为解析小麦根系建成遗传机制及选育具有优良根系构型的小麦品种奠定基础。【方法】以189份小麦品...【目的】植物根系对水分及营养的获取、作物的生长发育和产量的形成至关重要。挖掘小麦苗期根系性状显著关联的SNP位点,预测相关候选基因,为解析小麦根系建成遗传机制及选育具有优良根系构型的小麦品种奠定基础。【方法】以189份小麦品种组成的自然群体为供试材料,调查2种培养条件(霍格兰营养液和去离子水)下培育21 d的苗期根系总长度(TRL)、根系总表面积(TRA)、根系总体积(TRV)、根系平均直径(ARD)及根系干重(RDW)等5个根系性状,试验进行2次重复,同时结合小麦660K SNP芯片的分型结果进行全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)。此外,通过序列比对、结构域分析和注释信息预测候选基因,并采用竞争性等位基因特异性PCR(kompetitive allele specific PCR,KASP)技术开发根系性状的分子标记。【结果】霍格兰营养液培养条件下的根系性状变异范围较大,根系整体粗短;而去离子水条件下的根系细长、侧根较多。选用贝叶斯信息与连锁不平衡迭代嵌套式模型(BLINK)、压缩式混合线性模型(CMLM)、固定随机循环概率模型(FarmCPU)以及混合线性模型(MLM)4个模型,结合2种培养条件下的根系性状进行全基因关联分析,共检测到95个与小麦苗期根系性状显著关联的QTL位点(P<10-3),其中,有18个QTL在2个条件下同时被检测到,分布在7A、1B、2B、3B、7B、1D、2D及3D染色体,可解释8.68%—14.07%的表型变异。筛选获得的显著性位点中,有4个与前人的研究相近或一致,其余为新发现QTL位点。对共定位的SNP进行单倍型分析,有10个SNP能够将供试材料分为2种单倍型,且单倍型间的根系性状具有显著差异,同时,基于这些SNP开发KASP标记,筛选到与根系总体积及根系干重相关的2个KASP标记(XNR7143和XNR3707)。进一步挖掘共定位SNP位点上下游区间内的基因,筛选到12个可能与根系发育相关的候选基因,其中,TraesCS7A02G160600编码酰基载体蛋白合成酶,参与根系脂肪酸的合成;TraesCS1B02G401800编码突触融合蛋白,对植物重力向性具有重要作用;TraesCS7B02G417900编码醛脱氢酶,参与脱落酸的合成,从而调控作物根系发育。【结论】小麦根系性状在不同基因型间差异显著,在2个条件下同时检测到18个显著QTL位点,开发了2个根系分子标记(XNR7143和XNR3707),并筛选出12个与根系性状相关的候选基因。展开更多
目的建立1种简便易用的药物基因组学检测方法,并对其进行评价。方法基于竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(KASP)技术,重新设计通用荧光探针,通过华法林个体化用药相关基因CYP2C9*3(rs1057910)的阳性序列和临床生物样本进行验证。结果...目的建立1种简便易用的药物基因组学检测方法,并对其进行评价。方法基于竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(KASP)技术,重新设计通用荧光探针,通过华法林个体化用药相关基因CYP2C9*3(rs1057910)的阳性序列和临床生物样本进行验证。结果Cal Red 610、Quasar 670的KASP测定CYP2C9*3华法林个体化用药相关基因结果准确,每个反应中最低可检出31个拷贝,在小规模的初步验证中实现了100%的特异性和灵敏度。结论Cal Red 610、Quasar 670 KASP在CYP2C9*3华法林个体化用药相关基因多态性检测中,具有高准确性、高通量、检测浓度范围宽等特点,满足生物样本的低成本临床检测的需求,比传统的Fam/Hex荧光更具优势,避免了进一步推广中对特定试剂的依赖,为进一步降低成本奠定了基础。展开更多
文摘In order to identify the molecular markers that can be widely used in the breeding of Brassica napus L.varieties with high seed oil content under different genetic backgrounds,we developed a Kompetitive Allele Specific PCR(KASP)marker for seed oil content on the basis of the results from available studies.The verification in the F_(2) population showed that the marker was closely linked to the quantitative trait locus(QTL)for oil content on chromosome A05.The findings helped to breed the‘Fengyou’varieties with high seed oil content in the middle reaches of the Yangtze River.
文摘【目的】植物根系对水分及营养的获取、作物的生长发育和产量的形成至关重要。挖掘小麦苗期根系性状显著关联的SNP位点,预测相关候选基因,为解析小麦根系建成遗传机制及选育具有优良根系构型的小麦品种奠定基础。【方法】以189份小麦品种组成的自然群体为供试材料,调查2种培养条件(霍格兰营养液和去离子水)下培育21 d的苗期根系总长度(TRL)、根系总表面积(TRA)、根系总体积(TRV)、根系平均直径(ARD)及根系干重(RDW)等5个根系性状,试验进行2次重复,同时结合小麦660K SNP芯片的分型结果进行全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)。此外,通过序列比对、结构域分析和注释信息预测候选基因,并采用竞争性等位基因特异性PCR(kompetitive allele specific PCR,KASP)技术开发根系性状的分子标记。【结果】霍格兰营养液培养条件下的根系性状变异范围较大,根系整体粗短;而去离子水条件下的根系细长、侧根较多。选用贝叶斯信息与连锁不平衡迭代嵌套式模型(BLINK)、压缩式混合线性模型(CMLM)、固定随机循环概率模型(FarmCPU)以及混合线性模型(MLM)4个模型,结合2种培养条件下的根系性状进行全基因关联分析,共检测到95个与小麦苗期根系性状显著关联的QTL位点(P<10-3),其中,有18个QTL在2个条件下同时被检测到,分布在7A、1B、2B、3B、7B、1D、2D及3D染色体,可解释8.68%—14.07%的表型变异。筛选获得的显著性位点中,有4个与前人的研究相近或一致,其余为新发现QTL位点。对共定位的SNP进行单倍型分析,有10个SNP能够将供试材料分为2种单倍型,且单倍型间的根系性状具有显著差异,同时,基于这些SNP开发KASP标记,筛选到与根系总体积及根系干重相关的2个KASP标记(XNR7143和XNR3707)。进一步挖掘共定位SNP位点上下游区间内的基因,筛选到12个可能与根系发育相关的候选基因,其中,TraesCS7A02G160600编码酰基载体蛋白合成酶,参与根系脂肪酸的合成;TraesCS1B02G401800编码突触融合蛋白,对植物重力向性具有重要作用;TraesCS7B02G417900编码醛脱氢酶,参与脱落酸的合成,从而调控作物根系发育。【结论】小麦根系性状在不同基因型间差异显著,在2个条件下同时检测到18个显著QTL位点,开发了2个根系分子标记(XNR7143和XNR3707),并筛选出12个与根系性状相关的候选基因。
文摘目的建立1种简便易用的药物基因组学检测方法,并对其进行评价。方法基于竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(KASP)技术,重新设计通用荧光探针,通过华法林个体化用药相关基因CYP2C9*3(rs1057910)的阳性序列和临床生物样本进行验证。结果Cal Red 610、Quasar 670的KASP测定CYP2C9*3华法林个体化用药相关基因结果准确,每个反应中最低可检出31个拷贝,在小规模的初步验证中实现了100%的特异性和灵敏度。结论Cal Red 610、Quasar 670 KASP在CYP2C9*3华法林个体化用药相关基因多态性检测中,具有高准确性、高通量、检测浓度范围宽等特点,满足生物样本的低成本临床检测的需求,比传统的Fam/Hex荧光更具优势,避免了进一步推广中对特定试剂的依赖,为进一步降低成本奠定了基础。
