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基于生物信息学分析肝硬化与miR-125a-5p和miR-125b-5p的相关研究
1
作者 张一粟 侯永慧 +5 位作者 付亚雯 段小钰 扈婷婷 毕心然 赵爽彦 蔡宏懿 《生物医学》 2024年第1期110-120,共11页
目的:基于生物信息学分析肝硬化与miR-125a-5p和miR-125b-5p的功能富集通路以及关键基因,以期为肝硬化诊断与治疗提供新思路。方法:通过miRDB、miRWalk和TargetScan数据库获得miR-125a-5p和miR-125b-5p的靶基因,从GEO数据库获得肝硬化... 目的:基于生物信息学分析肝硬化与miR-125a-5p和miR-125b-5p的功能富集通路以及关键基因,以期为肝硬化诊断与治疗提供新思路。方法:通过miRDB、miRWalk和TargetScan数据库获得miR-125a-5p和miR-125b-5p的靶基因,从GEO数据库获得肝硬化相关数据集GSE14323和GSE25097,筛选正常组织样本和肝硬化组织样本差异表达基因,将GSE25097和GSE14323所得差异表达基因取交集,获得肝硬化数据集的共表达基因,将miR-125a-5p和miR-125b-5p的靶基因与肝硬化数据集GSE14323和GSE25097的共表达基因取交集得到核心基因,对核心基因进行GO和KEGG富集以及构建PPI网络互作图。结果:GO富集分析中主要在糖氧代谢过程和线粒体外膜的活性中富集,KEGG富集分析中主要在脂肪酸生物合成和类固醇生物代谢等中富集,通过构建PPI网络互作图,得到miR-125a-5p和miR-125b-5p与肝硬化相关的4个关键基因NPL、H6PD、KIAA0319L和RFX5。结论:得到的相关通路以及4个关键基因NPL、H6PD、KIAA0319L和RFX5以期为肝硬化发病机制以及肝硬化发生发展过程中相关分子靶点和早期筛查的手段提供新思路,从而指导疾病诊疗计划和管理。 展开更多
关键词 生物信息学 mir-125a-5p mir-125b-5p 肝硬化
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circFADS2靶向miR-125a-5p调控MPP+诱导的SK-N-SH细胞损伤的机制
2
作者 张永志 顾平(指导) +3 位作者 王文婷 刘惠苗 张赛 刘义晗 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1243-1247,共5页
目的:探究circFADS2靶向miR-125a-5p调控帕金森病(PD)细胞炎症反应和凋亡的机制。方法:100μmol/L MPP+诱导SK-N-SH细胞建立PD模型,分为Con组、PD组、PD+pcDNA组、PD+pcDNA-circFADS2组、PD+anti-miR-NC组、PD+anti-miR-125a-5p组、PD+p... 目的:探究circFADS2靶向miR-125a-5p调控帕金森病(PD)细胞炎症反应和凋亡的机制。方法:100μmol/L MPP+诱导SK-N-SH细胞建立PD模型,分为Con组、PD组、PD+pcDNA组、PD+pcDNA-circFADS2组、PD+anti-miR-NC组、PD+anti-miR-125a-5p组、PD+pcDNA-circFADS2+miR-NC组、PD+pcDNA-circFADS2+miR-125a-5p组。qRT-PCR检测circFADS2和miR-125a-5p表达;ELISA检测IL-1β、TNF-α含量;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circFADS2与miR-125a-5p的靶向关系。结果:与Con组相比,PD组circFADS2表达降低,miR-125a-5p表达、凋亡率、IL-1β、TNF-α含量、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达升高(P<0.05)。circFADS2过表达或干扰miR-125a-5p表达可降低MPP+诱导的SK-N-SH细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α含量、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达(P<0.05)。circFADS2靶向负调控miR-125a-5p表达,上调miR-125a-5p表达逆转了circFADS2过表达对PD细胞炎症反应和凋亡的作用。结论:circFADS2过表达通过降低miR-125a-5p表达抑制PD细胞炎症反应和凋亡。 展开更多
关键词 circFADS2 mir-125a-5p 帕金森病 炎症反应 凋亡
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CircLRP6调节miR-125a-5p/MCL1轴对食管鳞癌顺铂耐药性的影响
3
作者 林萍萍 李富博 +2 位作者 王东娟 郭研 董怡 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第17期2183-2189,共7页
目的探讨环状RNA脂蛋白受体6(circLRP6)对食管鳞癌(ESCC)顺铂(CDDP)耐药性的影响及潜在分子机制。方法建立KYSE30的CDDP抗性细胞株(KYSE30/CDDP-R),分为对照(Control)组、si-NC组、si-circLRP6组、si-circLRP6+anti-NC组、si-circLRP6+a... 目的探讨环状RNA脂蛋白受体6(circLRP6)对食管鳞癌(ESCC)顺铂(CDDP)耐药性的影响及潜在分子机制。方法建立KYSE30的CDDP抗性细胞株(KYSE30/CDDP-R),分为对照(Control)组、si-NC组、si-circLRP6组、si-circLRP6+anti-NC组、si-circLRP6+anti-miR-125a-5p组。采用RT-qPCR和Western blot检测组织/细胞中circLRP6、miR-125a-5p和髓样细胞白血病-1(MCL-1)的表达水平;CCK-8法检测KYSE30/CDDP-R细胞的CDDP敏感性;流式细胞术检测细胞凋亡。结果ESCC癌组织/细胞和CDDP耐药癌组织中circLRP6、MCL-1 mRNA水平升高,miR-125a-5p水平降低(P<0.001);circLRP6沉默可上调miR-125a-5p,抑制MCL-1表达,增强体内外CDDP抗性ESCC细胞对CDDP的敏感性,促进CDDP抗性ESCC细胞凋亡;抑制miR-125a-5p可减弱circLRP6沉默对CDDP抗性ESCC细胞中CDDP耐药性和细胞凋亡的影响。circLRP6可靶向负调控miR-125a-5p表达,MCL-1是miR-125a-5p的靶标。结论circLRP6沉默可能通过miR-125a-5p/MCL-1轴增强CDDP抗性ESCC细胞对CDDP的敏感性。 展开更多
关键词 环状RNA脂蛋白受体6 食管鳞癌 顺铂耐药 mir-125a-5p/MCL-1轴
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miR-125a-5p通过黏着斑通路对铝染毒GC2-spd细胞凋亡的影响
4
作者 黄艳新 陈文成 +3 位作者 彭慧鑫 韦光吉 庞艳芳 元辉雄 《右江医学》 2023年第5期397-402,共6页
目的 探讨miR-125a-5p在铝染毒小鼠精母细胞系(GC2-spd)模型中对黏着斑信号通路及GC2-spd细胞凋亡的影响。方法 建立铝染毒GC2-spd细胞模型,分为对照组(CG),铝染毒组(ALG),铝染毒组+miR-125a-5p inhibitor阴性对照组(ALG+inhibitor NC)... 目的 探讨miR-125a-5p在铝染毒小鼠精母细胞系(GC2-spd)模型中对黏着斑信号通路及GC2-spd细胞凋亡的影响。方法 建立铝染毒GC2-spd细胞模型,分为对照组(CG),铝染毒组(ALG),铝染毒组+miR-125a-5p inhibitor阴性对照组(ALG+inhibitor NC)及铝染毒组+miR-125a-5p inhibitor组(ALG+inhibitor);利用RT-qPCR检测ALG与CG细胞中miR-125a-5p的表达情况;利用Western blot检测CG组、ALG组、ALG+inhibitor NC组及ALG+inhibitor组Itga7、Pak4、Akt1、Bax及Caspase-9的表达情况;利用CCK8实验及流式细胞术实验检测各组GC2-spd细胞的活性和凋亡率。结果 RT-qPCR结果显示,与对照组比较,ALG组细胞中miR-125a-5p的表达显著升高;Western blot结果显示,抑制miR-125a-5p的表达后,可显著升高铝染毒GC2-spd细胞中Itga7、Pak4和Akt1的表达,降低Bax及Caspase-9的表达;CCK8和流式细胞术实验结果显示,抑制miR-125a-5p的表达后,可显著提高GC2-spd细胞的活性,降低细胞的凋亡率。结论 miR-125a-5p inhibitor可通过提高Itga7、Pak4和Akt1的表达,促进黏着斑信号通路激活,抑制细胞凋亡,提高细胞的活性,从而抑制铝染毒GC2-spd细胞的凋亡作用。 展开更多
关键词 mir-125a-5p 黏着斑通路 铝染毒 小鼠精母细胞系细胞
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circSHKBP1通过靶向miR-125a-5p调控结肠癌细胞增殖和凋亡
5
作者 杨廷旭 薛蕊芳 《世界华人消化杂志》 CAS 2023年第13期537-543,共7页
背景 结肠癌是临床上常见的一种恶性肿瘤,有研究报道,环状RNA(circular RNA,circR NA)参与结肠癌的发生发展.其中,circSHKBP1作为癌基因促进癌症进展,因此我们假设circSHKBP1也参与结肠癌的发展.目的 探讨circSHKBP1对结肠癌细胞增殖及... 背景 结肠癌是临床上常见的一种恶性肿瘤,有研究报道,环状RNA(circular RNA,circR NA)参与结肠癌的发生发展.其中,circSHKBP1作为癌基因促进癌症进展,因此我们假设circSHKBP1也参与结肠癌的发展.目的 探讨circSHKBP1对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能作用机制.方法 选取本院2020-03/2020-07的69例结肠癌组织及癌旁组织标本,qRT-PCR检测circSHKBP1、miR-125a-5p的表达量;体外培养人结肠癌细胞HT29,随机分组:sh-NC组、sh-circSHKBP1组、miR-NC组、miR-125a-5p组、sh-circSHKBP1+anti-miR-NC组、shcircSHKBP1+anti-miR-125a-5p组;采用MTT法、平板克隆形成、和流式细胞术检测细胞增殖、克隆形成及凋亡;采用双荧光素酶报告验证miR-125a-5p过表达对野生型(wild-type,WT)载体wt-circSHKBP1的荧光素酶活性;采用Western blot检测b细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)蛋白表达.结果 在结肠癌组织中circSHKBP1的表达上调(P<0.05),miR-125a-5p的表达下降(P <0.05);相对sh-NC组,沉默circSHKBP1显著降低结肠癌细胞的增殖率、提高凋亡率和Bax的表达,降低了细胞克隆形成数,减少Bcl-2的表达(P<0.05);miR-125a-5p过表达可降低wt-circSHKBP1的荧光素酶活性(P <0.05);与miR-NC组对照,miR-125a-5p组降低增殖率、提高凋亡率和Bax的表达,减少细胞克隆形成数,降低Bcl-2的表达(P<0.05);相对sh-circSHKBP1+anti-miR-NC组,shcircSHKBP1+anti-miR-125a-5p组提高了肿瘤细胞增殖率、降低了凋亡率和Bax的表达,增加了细胞克隆形成数,提高了Bcl-2的表达(P<0.05).结论 敲低circSHKBP1可通过靶向miR-125a-5p表达抑制结肠癌细胞增殖并促进细胞凋亡. 展开更多
关键词 结肠癌 circSHKBp1 mir-125a-5p 细胞增殖 凋亡
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CircSLC6A6调节miR-125a-5p/PUM2轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
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作者 王福萍 柴守辉 徐行丽 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期528-534,共7页
目的:探讨环状溶质载体家族6成员6(CircSLC6A6)调节微小RNA分子miR-125a-5p/pumilio同源物2(PUM2)轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响。方法:以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测体外培养的人子宫内膜上皮细胞... 目的:探讨环状溶质载体家族6成员6(CircSLC6A6)调节微小RNA分子miR-125a-5p/pumilio同源物2(PUM2)轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响。方法:以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测体外培养的人子宫内膜上皮细胞与人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A、KLE、Ishikawa中CircSLC6A6、miR-125a-5p与PUM2的表达。将体外培养的人子宫内膜癌细胞HEC-1-A随机分为5组:对照组、CircSLC6A6敲低组(转染CircSLC6A6 siRNA质粒)、miR-125a-5p抑制组(转染miR-125a-5p抑制剂)、阴性对照组(转染空载质粒和miR-125a-5p抑制阴性对照)、共转染(转染CircSLC6A6 siRNA质粒+miR-125a-5p抑制剂)组。以CCK-8法及细胞克隆实验、Hoechst 33258染色及流式细胞实验、以划痕实验及Transwell实验检测各组HEC-1-A细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况;以qRT-PCR实验检测各组HEC-1-A细胞miRv125a-5p及PUM2 mRNA表达;以免疫印迹实验检测各组HEC-1-A细胞凋亡蛋白(caspase-9、Bax)、上皮间质转化标志蛋白(Vimentin、E-cadherin)表达;以双荧光素酶报告基因实验检测HEC-1-A细胞中CircSLC6A6对miR-125a-5p和miR-125a-5p对PUM2的靶向调控作用。结果:(1)与人子宫内膜上皮细胞相比,人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A、Ishikawa、KLE中CircSLC6A6 mRNA、PUM2 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-125a-5p mRNA表达显著降低(P<0.05)。(2)与对照组相比,CircSLC6A6敲低组细胞呈现典型凋亡形态改变,细胞活力、相对细胞集落数、细胞迁移距离、侵袭细胞数、细胞PUM2 mRNA及Vimentin蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率、细胞miR-125a-5p及caspase-9、Bax、E-cadherin蛋白表达均升高(P<0.05);miR-125a-5p抑制组细胞各指标变化趋势与CircSLC6A6敲低组相反;阴性对照组细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05)。与CircSLC6A6敲低组相比,共转染组细胞的细胞核凋亡形态改变得到改善,各指标变化趋势与其相反,且差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在HEC-1-A细胞中CircSLC6A6可靶向下调miR-125a-5p的表达,而miR-125a-5p可靶向下调PUM2的表达。结论:CircSLC6A6通过靶向下调miR-125a-5p而上调PUM2,可能促使子宫内膜癌进展,敲低CircSLC6A6通过促进miR-125a-5p分泌而降低PUM2表达,可能抑制子宫内膜癌细胞增殖、集落形成和上皮间质转化,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 环状溶质载体家族6成员6 mir-125a-5p/pumilio同源物2轴 子宫内膜癌 增殖 凋亡 上皮间质转化
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不明原因复发性流产患者绒毛组织中hsa-miR-125a-5p及其靶基因表达的研究 被引量：4
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作者 张瑶楠 刘丹 +1 位作者 张广志 张蔚 《生殖医学杂志》 CAS 2023年第1期106-111,共6页
目的检测不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织中差异微小RNA(miRNA)hsa-miR-125a-5p及其可能靶基因基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达,探索hsa-miR-125a-5p与URSA发病的可能关系。方法选取2020年1月至2021年10月于北京市海淀区妇幼保健院... 目的检测不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织中差异微小RNA(miRNA)hsa-miR-125a-5p及其可能靶基因基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达,探索hsa-miR-125a-5p与URSA发病的可能关系。方法选取2020年1月至2021年10月于北京市海淀区妇幼保健院诊治的25例URSA患者为研究对象(URSA组),同期28例正常早孕妇女作为对照(对照组)。采用实时荧光定量PCR方法检测两组绒毛组织中hsa-miR-125a-5p的相对表达量和MMP-2 mRNA水平;采用免疫组化方法检测MMP-2的蛋白水平。结果URSA组绒毛组织hsa-miR-125a-5p的相对表达量显著高于对照组[(1.54±0.59)vs.(0.43±0.12),P<0.05],而MMP-2 mRNA[(0.22±0.21)vs.(2.61±1.22)]和蛋白表达水平[(11.15±3.11)vs.(71.67±18.05)]均显著低于对照组(P<0.05)。结论URSA患者绒毛组织中hsa-miR-125a-5p的表达异常,可能影响其靶基因MMP-2的正常表达,从而导致胚胎粘附和植入能力下降、滋养细胞侵袭能力受损,导致复发性流产发生。 展开更多
关键词 复发性流产 绒毛 微小RNA mir-125a-5p 基质金属蛋白酶2
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甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p与临床病理特征及预后的关系
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作者 朱甍 宋佳 郭建美 《临床误诊误治》 CAS 2023年第7期54-58,67,共6页
目的探究甲状腺癌患者核转录因子-κB(NF-κB)mRNA、miR-125a-5p与临床病理特征及预后的关系。方法选取2017年5月—2020年4月240例甲状腺癌手术患者作为观察组,另选取同期体检健康者60例作为对照组。比较2组NF-κB mRNA、miR-125a-5p水... 目的探究甲状腺癌患者核转录因子-κB(NF-κB)mRNA、miR-125a-5p与临床病理特征及预后的关系。方法选取2017年5月—2020年4月240例甲状腺癌手术患者作为观察组,另选取同期体检健康者60例作为对照组。比较2组NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平,分析甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平与临床病理特征的关系,比较复发与未复发患者临床资料,分析NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平与甲状腺癌术后复发的关系及NF-κB mRNA、miR-125a-5p间的相关性,采用受试者工作特征曲线评价NF-κB mRNA、miR-125a-5p检测对甲状腺癌术后复发的预测价值。结果观察组NF-κB mRNA水平高于对照组,miR-125a-5p水平低于对照组(P<0.05)。甲状腺癌患者NF-κB mRNA、miR-125a-5p水平在肿瘤大小、临床分期、血管间隙浸润及淋巴结转移方面比较差异有统计学意义(P<0.01)。甲状腺癌术后复发患者肿瘤大小>5 cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、血管间隙浸润及淋巴结转移比例和术后1周NF-κB mRNA水平均高于未复发患者,术后1周miR-125a-5p水平及NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值均低于未复发患者(P<0.05,P<0.01)。NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值是甲状腺癌术后复发的影响因素(P<0.01)。NF-κB mRNA、miR-125a-5p手术前后差值绝对值联合预测甲状腺癌术后复发的曲线下面积为0.927,高于各指标单独预测的曲线下面积(0.831、0.775)(P<0.05)。相关性分析可知,甲状腺癌患者NF-κB mRNA与miR-125a-5p呈负相关(r=-0.765,P<0.01)。结论甲状腺癌患者NF-κB mRNA水平上调,miR-125a-5p水平下调,临床检测手术前后差值绝对值,可预测其术后复发情况,便于术后早期制订辅助治疗方案。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 甲状腺切除术 单核细胞 核转录因子-ΚB mir-125a-5p 临床病理特征 预后 相关性
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miR-125a-5p基因敲除C57BL/6J小鼠的构建
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作者 王辞岚 李劲频 +3 位作者 傅金凤 陈柳伶 谭舒婷 刘竞丽 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第5期838-842,共5页
目的:构建miR-125a-5p基因敲除小鼠并进行基因鉴定,并探讨基因敲除小鼠体内miR-125a-5p对靶基因Foxp3的调控。方法:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以C57BL/6J小鼠为背景,对miR-125a-5p基因位点进行基因敲除,培育纯合miR-125a-5p基因敲除... 目的:构建miR-125a-5p基因敲除小鼠并进行基因鉴定,并探讨基因敲除小鼠体内miR-125a-5p对靶基因Foxp3的调控。方法:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以C57BL/6J小鼠为背景,对miR-125a-5p基因位点进行基因敲除,培育纯合miR-125a-5p基因敲除小鼠。采用裂解法提取鼠尾组织基因组DNA,进行PCR反应检测亲代纯合miR-125a-5p基因敲除小鼠基因型,并选用雌、雄均为纯合子的基因敲除鼠作为亲代种鼠进行配种繁殖。通过全自动蛋白表达分析系统检测小鼠脾脏组织Foxp3的蛋白表达。结果:成功构建miR-125a-5p基因敲除小鼠,琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物为240 bp或0 bp单条带的为纯合型基因敲除(KO)小鼠,鉴定获得668 bp或428 bp单条带的为野生型(WT)小鼠,与预期的目的基因片段分子量大小一致,成功鉴定了miR-125a-5p基因敲除小鼠的基因型。选用雌、雄均为纯合子的基因敲除鼠进行配种繁育,获得了一批miR-125a-5p敲除纯合子基因型小鼠。与WT小鼠相比,miR-125a-5p基因敲除小鼠的脾脏组织中Foxp3表达降低(P<0.05)。结论:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建了纯合miR-125a-5p基因敲除小鼠,miR-125a-5p基因的缺失参与靶基因Foxp3的表达调控,为进一步研究miR-125a-5p在自身免疫性疾病中的发生机制提供前期基础。 展开更多
关键词 mir-125a-5p CRISpR/Cas9基因编辑 基因鉴定 FOXp3
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MiR-125a-5p靶向胰岛素样生长因子1受体调节川崎病中内皮细胞的增殖和迁移
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作者 吕爱婷 何坤 +2 位作者 李莹莹 候维纳 孙琪青 《临床与病理杂志》 CAS 2023年第2期211-220,共10页
目的:探讨miR-125a-5p靶向胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)对川崎病内皮细胞增殖与迁移的影响。方法:培养人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAECs),将细胞分为对照组(... 目的:探讨miR-125a-5p靶向胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)对川崎病内皮细胞增殖与迁移的影响。方法:培养人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAECs),将细胞分为对照组(20%正常人血清)、20%川崎病血清组(20%川崎病患儿血清)、20%川崎病血清+抵制剂(inhibitor)正常对照(normal control,NC)组、20%川崎病血清+miR-125a-5p inhibitor组、20%川崎病血清+miR-125a-5p inhibitor+siRNA组、20%川崎病血清+miR-125a-5p inhibitor+si IGF1R组,除对照组添加20%正常人血清外,其余各组均添加20%川崎病患儿血清培养。定量RT-PCR法测定miR-125a-5p、IGF1R mRNA表达水平,蛋白质印迹法测定IGF1R蛋白表达;细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法测定HCAECs细胞增殖能力;Transwell法测定细胞迁移能力;蛋白质印迹法测定Ki-67、血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial-cadherin,VE-cad)、p120连环蛋白(p120-catenin,p120ctn)水平;构建野生型IGF1R重组质粒(pGL4-IGF1R-WT)和突变型IGF1R重组质粒(pGL4-IGF1R-MUT),将HCAECs细胞分为mimic-NC+pGL4-IGF1R-WT组、miR-125a-5p mimic+pGL4-IGF1R-WT组、mimic-NC+pGL4-IGF1R-MUT组、miR-125a-5p mimic+pGL4-IGF1R-MUT组,双荧光素酶报告实验测定miR-125a-5p与IGF1R mRNA的水平。结果:与对照组相比,20%川崎病血清组HCAECs细胞5-乙炔基-2’-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)结合率、miR-125a-5p水平、VE-cad、p120ctn表达均升高(均P<0.05),IGF1R mRNA与蛋白水平、HCAECs细胞光密度(optical density,OD)值、Ki-67均降低(均P<0.05);与20%川崎病血清组相比,20%川崎病血清+miR-125a-5p inhibitor组HCAECs细胞EdU结合率、miR-125a-5p水平、VE-cad、p120ctn表达均降低,IGF1R mRNA水平与蛋白水平、HCAECs细胞OD值、Ki-67均升高(均P<0.05);与20%川崎病血清+miR-125a-5p inhibitor组相比,20%川崎病血清+miR-125a-5p inhibitor+si IGF1R组HCAECs细胞EdU结合率miR-125a-5p水平、VE-cad、p120ctn表达均升高(均P<0.05),IGF1R mRNA与蛋白水平、HCAECs细胞OD值、Ki-67均降低(均P<0.05);与mimic-NC+pGL4-IGF1R-WT组对比,miR-125a-5p mimic+pGL4-IGF1R-WT组荧光素酶活性降低(P<0.05);与mimic-NC+pGL4-IGF1R-MUT组相比,miR-125a-5p mimic+pGL4-IGF1R-MUT组荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:川崎病内皮细胞损伤模型中miR-125-5p呈高表达,IGF1R呈低表达,miR-125-5p下调可靶向上调IGF1R表达,促进细胞增殖、迁移。 展开更多
关键词 mir-125a-5p 胰岛素样生长因子1受体 川崎病 内皮细胞 增殖 迁移
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重楼皂苷在miR-125a-5p靶向调控GAB2诱导乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制研究
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作者 吕世文 朱亚兰 王婧婧 《浙江医学》 CAS 2023年第20期2129-2135,2162,共8页
目的探讨重楼皂苷(RPS)在miR-125a-5p靶向调控Grb2相关结合蛋白2(GAB2)诱导乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制。方法取人乳腺癌细胞系MCF-7和人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A,采用qRT-PCR、Western blot法分别检测并比较两者miR-125a-5p... 目的探讨重楼皂苷(RPS)在miR-125a-5p靶向调控Grb2相关结合蛋白2(GAB2)诱导乳腺癌细胞增殖和凋亡中的作用及机制。方法取人乳腺癌细胞系MCF-7和人正常乳腺上皮细胞系MCF-10A,采用qRT-PCR、Western blot法分别检测并比较两者miR-125a-5p、GAB2表达水平。再将MCF-7细胞按随机数字表法分成6组:RPS 0μg/mL组、RPS 80μg/mL组、RPS 80μg/mL+阴性抗体组、RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p组、RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组和RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+si-GAB2组,每组设3个复孔;培养48 h后检测并比较miR-125a-5p、GAB2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平以及细胞增殖率、细胞凋亡率。将GAB2与空白质粒和过表达miR-125a-5p质粒共转染到MCF-7细胞中,采用荧光素酶Promega检测法检测miR-125a-5p与GAB2的靶向作用。结果与MCF-10A细胞比较,MCF-7细胞中miR-125a-5p表达水平较低(P<0.05),GAB2表达水平较高(P<0.05)。与RPS 0μg/mL组比较,RPS 80μg/mL组和RPS 80μg/mL+阴性抗体组miR-125a-5p、Bax表达水平和细胞凋亡率均明显升高(均P<0.05),细胞增殖率和Bcl-2表达水平均明显降低(均P<0.05);RPS 80μg/mL组和RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组GAB2表达水平均明显降低(均P<0.05)。与RPS 80μg/mL组、RPS 80μg/mL+阴性抗体组比较,RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p组miR-125a-5p表达水平均明显降低(均P<0.05);RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p组和RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组细胞增殖率和Bcl-2表达水平均明显升高(均P<0.05),细胞凋亡率和Bax表达水平均明显降低(均P<0.05)。与RPS 80μg/mL组、RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组比较,RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+si-GAB2组GAB2表达水平均明显降低(均P<0.05)。与RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p组、RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+阴性干扰组比较,RPS 80μg/mL+anti-miR-125a-5p+si-GAB2组细胞增殖率和Bcl-2表达水平均明显降低(均P<0.05),细胞凋亡率和Bax表达水平均明显升高(均P<0.05)。GAB2与miR-125a-5p的结合位点为CAGGGA,GAB2的突变位点为AGUCCC;miR-125a-5p与GAB2野生型结合能明显降低荧光活性比(P<0.05),但与GAB2突变型结合不影响荧光活性比(P>0.05)。结论RPS能够介导miR-125a-5p/GAB2轴发挥抗肿瘤活性,具体机制可能与miR-125a-5p发挥抑癌效应来负向调控GAB2蛋白表达,进而影响乳腺癌细胞的增殖和凋亡能力有关。 展开更多
关键词 重楼皂苷 乳腺癌 mir-125a-5p Grb2相关结合蛋白2 增殖 凋亡 作用机制
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miR-125a-5p通过靶向HIF1AN调控HIF-1α参与小胶质细胞活化 被引量：2
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作者 井紫薇 樊钊 +6 位作者 李光耀 李江静 吕苗苗 魏顺民 张霞婧 高昌俊 孙绪德 《空军军医大学学报》 CAS 2023年第4期311-316,322,共7页
目的 观察miR-125a-5p通过靶向HIF1AN调控HIF-1α在BV-2小胶质细胞炎症模型中对小胶质细胞的活化作用。方法 首先用LPS 150μg/L+IFN-γ 20μg/L建立BV-2小胶质细胞炎症模型;将BV-2小胶质细胞分为对照组(Con组)、小胶质细胞炎症模型组(L... 目的 观察miR-125a-5p通过靶向HIF1AN调控HIF-1α在BV-2小胶质细胞炎症模型中对小胶质细胞的活化作用。方法 首先用LPS 150μg/L+IFN-γ 20μg/L建立BV-2小胶质细胞炎症模型;将BV-2小胶质细胞分为对照组(Con组)、小胶质细胞炎症模型组(LPS+IFN-γ组),用实时荧光定量PCR检测miR-125a-5p、HIF1AN mRNA表达水平,用Western blotting检测iNOS和HIF-1α蛋白的表达。再通过调控miR-125a-5p、HIF-1α的表达,用荧光定量PCR法检测miR-125a-5p,HIF-1α、促炎因子(包括IL-1β、TNF-α)、M1极化标志物iNOS mRNA表达水平,用Western blotting法检测HIF1AN、HIF-1α的蛋白表达量。结果 与Con组相比,LPS+IFN-γ组miR-125a-5p,iNOS、IL-1β和TNF-α mRNA表达升高(P<0.05),HIF1AN mRNA表达下降(P<0.05),HIF-1α、iNOS蛋白表达升高(P<0.05)。上调miR-125a-5p后,与NC agomir+LPS+IFN-γ组相比,miR agomir+LPS+IFN-γ组miR-125a-5p,IL-1β、TNF-α和iNOS mRNA表达升高(P<0.05),HIF1AN蛋白表达下降(P<0.05),HIF-1α蛋白表达升高(P<0.05);下调miR-125a-5p表达后,与NC antagomir+LPS+IFN-γ组相比,miR antagomir+LPS+IFN-γ组miR-125a-5p,IL-1β、TNF-α和iNOS mRNA表达下降(P<0.05),HIF1AN蛋白表达上升(P<0.05),HIF-1α蛋白表达下降(P<0.05);敲低HIF-1α的表达后,结果显示,与NC siRNA+LPS+IFN-γ组相比,HIF-1α siRNA+LPS+IFN-γ组HIF-1α、IL-1β、TNF-α和iNOS mRNA表达下降(P<0.05)。结论 miR-125a-5p通过靶向HIF1AN调控HIF-1α参与了BV-2小胶质细胞活化。 展开更多
关键词 脂多糖 干扰素-Γ 小胶质细胞 神经炎症 mir-125a-5p HIF-1Α
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miR-125a-5p与肺结核关系的研究进展
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作者 刘荣 久太 《临床医学进展》 2023年第5期7410-7416,共7页
肺结核(pulmonary tuberculosis, PTB)指的是由结核分枝杆菌引发的肺部感染性疾病,是严重威胁人类健康的疾病。结核分枝杆菌感染后绝大多数感染者处于结核分枝杆菌潜伏感染(Latent tuberculo-sis infection, LTBI)状态,5%~10%的LTBI者... 肺结核(pulmonary tuberculosis, PTB)指的是由结核分枝杆菌引发的肺部感染性疾病,是严重威胁人类健康的疾病。结核分枝杆菌感染后绝大多数感染者处于结核分枝杆菌潜伏感染(Latent tuberculo-sis infection, LTBI)状态,5%~10%的LTBI者一生中会发展为活动性结核病。miR-125a-5p是一种微小RNA分子亚型,研究显示miR-125a-5p对肺结核的发生发展及转归具有重要作用。本文介绍了miR-125a-5p调控巨噬细胞极化及炎症反应,总结了miR-125a-5p与肺结核的关联性,认为miR-125a-5p对肺结核患者的诊治有一定指导意义。 展开更多
关键词 肺结核 潜伏期肺结核 mir-125a-5p 巨噬细胞 炎症反应
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幽门螺杆菌感染诱导的miR-125a-5p靶向EVA1A影响胃癌增殖和侵袭的机制研究
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作者 廖雪霞 彭鑫 +1 位作者 符鑫 吴德建 《河北医学》 CAS 2023年第11期1784-1789,共6页
目的:探讨幽门螺杆菌感染调控的miRNAs及其在胃癌生中的作用机制。方法:qRT-PCR检测HP感染阳性患者组织中miR-125a-5p和EVA1A的表达;HP感染胃癌细胞,细胞功能实验探究miR-125a-5p/EVA1A轴在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学功能。双... 目的:探讨幽门螺杆菌感染调控的miRNAs及其在胃癌生中的作用机制。方法:qRT-PCR检测HP感染阳性患者组织中miR-125a-5p和EVA1A的表达;HP感染胃癌细胞,细胞功能实验探究miR-125a-5p/EVA1A轴在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学功能。双荧光素酶实验验证miR-125a-5p与EVA1A的结合关系。结果:miR-125a-5p在HP感染阳性患者组织和Hp感染的胃癌细胞中下调。细胞功能实验表明过表达miR-125a-5p可以抑制胃癌细胞增殖和侵袭。miR-125a-5p靶向下调EVA1A的表达,过表达EVA1A可以逆转过表达miR-125a-5p对胃癌表型的影响。结论:幽门螺杆菌感染诱导的miR-125a-5p靶向EVA1A抑制胃癌增殖和侵袭,miR-125a-5p和EVA1A可能是胃癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 mir-125a-5p EVA1A 胃癌 增殖 侵袭
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血清Cx43 miR-125a-5p对四肢骨折延迟愈合临床诊断价值
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作者 郭月超 安文 张玉舰 《安徽医学》 2023年第3期273-278,共6页
目的 探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)、细胞间隙连接蛋白43(Cx43)在四肢骨折患者血清中的表达水平及与骨折延迟愈合的关系。方法 选取2018年1月至2021年12月秦皇岛市第一医院收治的188例四肢骨折患者为研究对象,其中骨折延迟愈合患... 目的 探讨微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)、细胞间隙连接蛋白43(Cx43)在四肢骨折患者血清中的表达水平及与骨折延迟愈合的关系。方法 选取2018年1月至2021年12月秦皇岛市第一医院收治的188例四肢骨折患者为研究对象,其中骨折延迟愈合患者30例作为延迟组,正常愈合患者158例为对照组。收集两组一般资料,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定两组对象血清miR-125a-5p、Cx43水平;利用受试者工作特征(ROC)曲线评价Cx43、miR-125a-5p水平对四肢骨折延迟愈合的预测价值;logistic回归分析影响四肢骨折延迟愈合发生的危险因素。结果 本研究中188例四肢骨折患者共有30例发生延迟愈合,发生率为15.96%;术后6周、术后12周时,延迟组血清Cx43表达水平低于对照组,miR-125a-5p水平高于对照组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,Cx43(OR=0.127,95%CI:0.021~0.775)、miR-125a-5p(OR=3.056,95%CI:1.092~8.552)、年龄(OR=1.142,95%CI:1.008~1.294)、吸烟(OR=1.537,95%CI:1.115~2.117)、骨折类型(OR=1.671,95%CI:1.084~2.577)、合并糖尿病(OR=2.024,95%CI:1.074~3.812)、合并骨质疏松(OR=1.525,95%CI:1.128~2.062)是影响四肢骨折延迟愈合发生的因素;ROC曲线结果显示,术后6周和术后12周血清Cx43、miR-125a-5p水平联合预测四肢骨折患者延迟愈合的曲线下面积(AUC)分别为0.944、0.964,均高于单一指标检测。结论 骨折延迟愈合患者血清中Cx43表达下调,miR-125a-5p表达上调,二者均是骨折延迟愈合的危险因素,联合检测二者表达水平对骨折延迟愈合有较高的预测价值。 展开更多
关键词 四肢骨折 细胞间隙连接蛋白43 微小RNa-125a-5p 延迟愈合
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TNF-α通过miR-125a-5p/JAK2/STAT3通路参与亚急性甲状腺炎发病的机制研究
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作者 周倩云 郝艳 徐燕 《生物医学工程与临床》 CAS 2023年第2期212-218,共7页
目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对甲状腺滤泡细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法 选择50例亚急性甲状腺炎患者(观察组),其中男性23例,女性27例;年龄29~57岁,平均年龄46.02岁。50例健康体检人群(正常对照组),其中男性24例,女性26例... 目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对甲状腺滤泡细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。方法 选择50例亚急性甲状腺炎患者(观察组),其中男性23例,女性27例;年龄29~57岁,平均年龄46.02岁。50例健康体检人群(正常对照组),其中男性24例,女性26例;年龄28~56岁,平均年龄45.86岁。用质量浓度10、50、100 ng/mL TNF-α处理甲状腺滤泡上皮FRTL-5细胞。FRTL-5细胞分别转染miR-125a-5p mimcs(miR-125a-5p组)、阴性对照miR-NC(miR-NC组),无任何处理的细胞作为Contol组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力,流式细胞术、TUNEL染色检测细胞凋亡,酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测血清TNF-α、细胞上清液白细胞介素6(IL-6)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞miR-125a-5p、IL-6水平,Western blot检测细胞JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平。结果观察组患者外周血TNF-α、IL-6、miR-125a-5p含量高于正常对照组,差异有显著统计学意义(t=74.390、15.140、205.400,P=0.000、0.000、0.000)。TNF-α处理后的细胞的光密度(OD)值降低、凋亡率升高,miR-125a-5p、IL-6水平升高,呈浓度依赖性。与miR-NC组比较,miR-125a-5p组细胞IL-6及miR-125a-5p水平升高,OD值降低、凋亡率升高(P <0.01)。与miR-NC组比较,miR-125a-5p组细胞p-JAK2/JAK2比值、p-STAT3/STAT3比值升高(P <0.01)。结论 TNF-α在亚急性甲状腺炎患者中高表达,过表达TNF-α可促进miR-125a-5p表达,进而激活JAK2/STAT3通路上调IL-6表达。 展开更多
关键词 亚急性甲状腺炎 肿瘤坏死因子α(TNF-α) mir-125a-5p 细胞凋亡
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血浆外泌体miR-125a-5p对宫颈癌的诊断价值
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作者 李亚 《中国处方药》 2023年第1期153-156,共4页
目的探索血浆外泌体miR-125a-5p对宫颈癌的诊断价值。方法选取2019年5月~2021年10月衡阳市中心医院收治的76例宫颈癌患者,50例正常女性人群(对照组)为研究对象。提取宫颈癌组和对照组血浆外泌体,透射电子显微镜观察外泌体形态,Nano Sigh... 目的探索血浆外泌体miR-125a-5p对宫颈癌的诊断价值。方法选取2019年5月~2021年10月衡阳市中心医院收治的76例宫颈癌患者,50例正常女性人群(对照组)为研究对象。提取宫颈癌组和对照组血浆外泌体,透射电子显微镜观察外泌体形态,Nano Sight纳米粒度仪检测外泌体颗粒浓度。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测血浆外泌体miR-125a-5p水平。分析宫颈癌患者miR-125a-5p表达水平与临床病理特征的关系。受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-125a-5p诊断宫颈癌的价值。结果宫颈癌组患者的血浆外泌体miR-125a-5p水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌患者血清外泌体miR-125a-5p的表达水平与年龄、病理类型、肿瘤直径、FIGO分期及HPV状态有关(P<0.05)。血清外泌体miR-125a-5p水平预测宫颈癌AUC为0.713(95%CI:0.561~0.865),截断值为1.28,灵敏度和特异度分别为59.1%、84.2%。结论宫颈癌患者血浆外泌体来源的miR-125a-5p表达水平明显降低,对宫颈癌早期诊断具有一定价值。 展开更多
关键词 宫颈癌 外泌体 mir-125a-5p 诊断
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miR-125a-5p靶向RRM2调控A549/DDP细胞的顺铂耐药性
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作者 姜永杰 庞敏 +2 位作者 龚海英 黄语嫣 蒋莉 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第2期227-234,共8页
目的:探究微小RNA-125a-5p(microRNA-125a-5p, miR-125a-5p)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响及其机制。方法:使用ENCORI在线数据库分析miR-125a-5p在非小细胞肺癌癌组织与癌旁组织中的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反... 目的:探究微小RNA-125a-5p(microRNA-125a-5p, miR-125a-5p)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响及其机制。方法:使用ENCORI在线数据库分析miR-125a-5p在非小细胞肺癌癌组织与癌旁组织中的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)的方法检测人肺上皮正常细胞(BEAS-2B)与非小细胞肺癌细胞系(A549、A549/DDP、SK-MES-1)中miR-125a-5p的表达水平;使用RT-qPCR与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测A549、A549/DDP细胞中核糖核苷酸还原酶M2(ribonucleotide reductase regulatory subunit M2,RRM2)的表达情况;生物信息学方法分析miR-125a-5p与RRM2的靶向调控序列;双荧光素酶基因报告实验与Western blot测定miR-125a-5p与RRM2在A549/DDP细胞中的调控关系;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的存活率与半数抑制浓度(half inhibitory concentration, IC_(50));流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:在非小细胞肺癌组织与细胞系中miR-125a-5p的表达水平显著降低(P<0.05);与A549细胞相比,A549/DDP细胞中RRM2的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-125a-5p部分恢复了顺铂对A549/DDP细胞的抑制作用,使细胞存活率显著降低(P<0.05),凋亡率显著增加(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-125a-5p能够靶向结合RRM2(P<0.05);过表达RRM2逆转了miR-125a-5p对A549/DDP的作用,降低了A549/DDP对顺铂的敏感性(P<0.05)。结论:miR-125a-5p可通过靶向下调RRM2基因的表达,从而部分恢复A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 微小RNa-125a-5p 核糖核苷酸还原酶M2 顺铂 非小细胞肺癌 耐药性
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miR-125a-5p通过靶向APAF1增强非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药性 被引量：4
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作者 李彦明 郝雁冰 +4 位作者 杨继雷 李传贵 陈万生 孙忠哲 容宇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期622-628,共7页
目的:探讨miR-125a-5p在诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞吉非替尼(gefitinib,Gef)耐药中的作用及其机制。方法:选用人NSCLC耐药细胞株A549/GR和NSCLC细胞株A549,将miR-125a-5p mimic、miR-125a-5p inhibitor、p... 目的:探讨miR-125a-5p在诱导非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞吉非替尼(gefitinib,Gef)耐药中的作用及其机制。方法:选用人NSCLC耐药细胞株A549/GR和NSCLC细胞株A549,将miR-125a-5p mimic、miR-125a-5p inhibitor、pcDNA3.1-APAF1、空载体pcDNA3.1转染至A549/GR细胞。用qPCR检测细胞中miR-125a-5p的表达水平,用MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测Gef对细胞增殖、迁移和凋亡的影响。用双荧光素酶报告基因实验验证miR-125a-5p与细胞凋亡蛋白酶活化因子1(apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1)的靶向关系,用Western blotting检测A549/GR细胞中APAF1蛋白水平,用比色法测定细胞中caspase-3及caspase-9表达水平。结果:A549/GR细胞中miR-125a-5p表达水平显著高于A549细胞(P<0.01)。敲降miR-125a-5p显著增强Gef对A549/GR细胞增殖、迁移的抑制作用(均P<0.05),并促进细胞凋亡(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-125a-5p靶向APAF1,并负调控其表达。进一步实验显示,miR-125a-5p通过靶向下调APAF1缓解Gef对A549/G细胞增殖、迁移的抑制作用及凋亡的促进作用(均P<0.05),减弱Gef引起的凋亡相关蛋白caspase-3及caspase-9表达的上调(均P<0.05)。结论:miR-125a-5p促进NSCLC细胞Gef耐药,其机制是通过靶向APAF1而促进细胞的增殖、迁移并抑制凋亡。 展开更多
关键词 吉非替尼 非小细胞肺癌 A549/GR细胞 获得性耐药 mir-125a-5p 蛋白酶活化因子1 增殖 迁移 凋亡
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miR-125a-5p靶向调控HER-2表达抑制乳腺癌细胞生物学活性 被引量：8
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作者 骆梅青 石洁琼 +2 位作者 徐胜源 黄玥 伍爱华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期500-505,共6页
目的 探讨miR-125a-5p对人表皮生长因子受体2(HER-2)基因的靶向调控作用以及对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、周期的影响。方法 收集2017年10月至2018年3月在我院保存的57例乳腺癌组织及对应癌旁组织,提取总RNA,实时荧光定量PCR(QPCR)检测... 目的 探讨miR-125a-5p对人表皮生长因子受体2(HER-2)基因的靶向调控作用以及对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、周期的影响。方法 收集2017年10月至2018年3月在我院保存的57例乳腺癌组织及对应癌旁组织,提取总RNA,实时荧光定量PCR(QPCR)检测miR-125a-5p表达。向MCF-7细胞转染miR-125a-5p mimics(miR-125a-5p组)或空质粒(阴性对照组),同时设置空白对照组。采用MTT法和流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡和周期。采用双荧光素酶报告实验验证HER-2与miR-125a-5p的靶向关系。采用QPCR和Western blotting检测各组转染48h后HER-2mRNA和蛋白表达。结果 乳腺癌组织中miR-125a-5p表达量为0.58±0.12,低于对应癌旁组织的0.98±0.17,差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-125a-5p表达与HER-2表达、肿瘤直径、TNM分期有关(P<0.05)。MCF-7细胞和MCF-10A细胞中miR-125a-5p的表达量分别为0.73±0.15和1.24±0.18,差异有统计学意义(P<0.05)。培养24、48、72、96后,miR-125a-5p组MCF-7细胞的增殖率分别为(87.65±5.79)%、(79.34±7.18)%、(70.17±6.21)%和(64.28±5.93)%,明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-125a-5p组细胞G0/G1期细胞比例为(61.95±3.49)%,S期细胞比例为(22.57±2.76)%,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-125a-5p组细胞凋亡率为(20.33±6.25)%,高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。miR-125a-5p可抑制野生型HER-23'-UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型HER-23'-UTR的荧光素酶活性无影响。miR-125a-5p组HER-2mRNA和蛋白表达水平分别为0.56±0.15和0.41±0.11,低于阴性对照组(P<0.05)。结论 上调miR-125a-5p可抑制HER-2的表达,从而抑制乳腺癌细胞增殖凋亡活性,其有望成为乳腺癌早期诊断和个体化治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 mir-125a-5p HER-2 增殖
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