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CircFoxo3调节miR-130a-5p/TEAD1轴对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡影响的实验研究
1
作者 曹彦花 乐金海 +4 位作者 陈新宇 刘建和 刘越美 李俊 李苏 《中国临床新医学》 2024年第1期65-73,共9页
目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(CircFoxo3)调节miR-130a-5p/TEA域转录因子1(TEAD1)轴对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠分为对照组、HF组、si-NC组、si-CircFoxo3组、agomir NC组、miR-130a-5p agomir组、si-CircFoxo3... 目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(CircFoxo3)调节miR-130a-5p/TEA域转录因子1(TEAD1)轴对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠分为对照组、HF组、si-NC组、si-CircFoxo3组、agomir NC组、miR-130a-5p agomir组、si-CircFoxo3+antagomir NC组、si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组,每组18只。除对照组外,其他组大鼠均通过腹腔注射盐酸阿霉素的方法构建HF大鼠模型。建模成功后进行药物处理,每3 d给药一次,持续3周。应用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测心肌组织中CircFoxo3、miR-130a-5p表达水平。应用彩色多普勒超声仪检测大鼠左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清人基质裂解素2(ST_(2))、N端脑钠肽前体(NT-pro BNP)水平。应用HE染色、Masson染色检测大鼠心肌组织病理变化和心肌纤维化情况。通过TUNEL染色检测心肌细胞凋亡水平。应用Western blot法检测大鼠心肌组织TEA域转录因子1(TEAD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1的关系。结果与对照组比较,HF组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化严重,LVESD、LVEDD水平上升,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p和Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、si-NC组比较,si-CircFoxo3组大鼠心肌组织病理损伤减轻,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、agomir NC组比较,miR-130a-5p agomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化有所改善,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-CircFoxo3组、si-CircFoxo3+antagomir NC组比较,si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化加剧,LVESD、LVEDD水平升高,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p、Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1存在靶向关系。结论沉默CircFoxo3可能通过海绵化上调miR-130a-5p来抑制TEAD1表达,进而抑制HF大鼠心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA叉头框蛋白O3 mir-130a-5p TEA域转录因子1 心力衰竭 凋亡
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lncRNA MAGI2-AS3靶向调控miR-130a-5p对柯萨奇病毒B3诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的影响
2
作者 朱康宁 郑培明 高岚 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期801-806,共6页
目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h... 目的:探讨lncRNA MAGI2-AS3靶向miR-130a-5p调控柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的分子机制。方法:对照组,用不含药物、病毒的DMEM处理H9C2细胞48 h。CVB3组,用含有100倍半数组织培养感染剂量CVB3的DMEM处理H9C2细胞48 h(感染)。CVB3+sh-NC组,H9C2细胞转染sh-NC慢病毒后感染CVB3。CVB3+sh-MAGI2-AS3组,H9C2细胞转染sh-MAGI2-AS3慢病毒后感染CVB3。CVB3+miR-NC组,H9C2细胞转染miR-NC后感染CVB3。CVB3+miR-130a-5p组,H9C2细胞转染miR-130a-5p mimic后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-NC共转染H9C2细胞后感染CVB3。sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组,sh-MAGI2-AS3、抗miR-130a-5p共转染H9C2细胞后感染CVB3。qRT-PCR检测MAGI2-AS3、miR-130a-5p相对表达量;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;ELISA法检测TNF-α、IL-6分泌水平;双荧光素酶报告实验验证MAGI2-AS3与miR-130a-5p靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Cleaved-Caspase-3蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,CVB3组MAGI2-AS3相对表达量、细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,而miR-130a-5p相对表达量、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。分别与CVB3+sh-NC组、CVB3+miR-NC组相比,CVB3+sh-MAGI2-AS3组、CVB3+miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。MAGI2-AS3可靶向调控miR-130a-5p表达。与sh-MAGI2-AS3+抗miR-NC组比较,sh-MAGI2-AS3+抗miR-130a-5p组细胞凋亡率、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平及TNF-α、IL-6分泌水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:沉默MAGI2-AS3可通过上调miR-130a-5p而抑制细胞凋亡、炎症反应,进而减轻CVB3诱导的H9C2细胞损伤。 展开更多
关键词 MAGI2-AS3 mir-130a-5p 柯萨奇病毒B3 大鼠 心肌细胞
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lncRNA MEG3靶向miR-130a-5p调控人视网膜色素上皮细胞损伤的研究
3
作者 曾清雨 汤中 +1 位作者 李生富 唐云骢 《安徽医学》 2023年第11期1302-1308,共7页
目的探讨lncRNA MEG3在年龄相关性黄斑变性(AMD)患者中的表达及其靶向miR-130a-5p对人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的影响。方法选取2020年6月至2021年8月永州职业技术学院附属医院收治的AMD患者38例以及同期的健康体检者38例,收集其空... 目的探讨lncRNA MEG3在年龄相关性黄斑变性(AMD)患者中的表达及其靶向miR-130a-5p对人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的影响。方法选取2020年6月至2021年8月永州职业技术学院附属医院收治的AMD患者38例以及同期的健康体检者38例,收集其空腹静脉血,qRT-PCR检测其血清lncRNA MEG3表达水平。不同浓度(0μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L)过氧化氢(H2O2)处理人RPE细胞系ARPE-19细胞构建RPE细胞损伤模型,并检测lncRNA MEG3在H2O2处理的ARPE-19细胞中表达。双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验分析lncRNA MEG3与miR-130a-5p的靶向关系。ARPE-19细胞分为对照组(常规培养,不进行任何特殊处理)、H2O2组(200μmol/L H2O2处理24 h)、Vector组(转染pcDNA3.1-NC 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3组(转染pcDNA3.1-lncRNA MEG324 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-lncRNA MEG3和miR-NC 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3+miR-130a-5p组(共转染pcDNA3.1-lncRNA MEG3和miR-130a-5p mimics 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h),qRT-PCR检测各组细胞中lncRNA MEG3、miR-130a-5p表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,2,7-二氯二氢代荧光黄二醋酸(DCFH-DA)荧光探针法、硫代巴比妥酸(TBA)法、水溶性四唑盐1(WST-1)法分别检测各组细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,ELISA法检测各组细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、β-淀粉样蛋白(Aβ)水平,Western blot检测各组细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)通路相关蛋白表达。结果与健康体检者比较,lncRNA MEG3在AMD患者血清中呈低表达(P<0.05)。与0μmol/L H2O2处理组比较,100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L H2O2处理ARPE-19细胞均可降低细胞存活率以及下调细胞中lncRNA MEG3表达水平(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验和RIP实验证实lncRNA MEG3与miR-130a-5p存在靶向关系。过表达lncRNA MEG3通过下调miR-130a-5p表达提供了H2O2诱导的ARPE-19细胞存活率、SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达水平,降低了细胞凋亡率及ROS、MDA、IL-6、TNF-α、Aβ水平(P<0.05)。结论lncRNA MEG3在AMD患者血清中呈低表达,上调lncRNA MEG3可靶向负调控miR-130a-5p表达,激活Nrf2/HO-1通路,减轻人RPE细胞氧化应激和炎症反应,保护细胞免受损伤。 展开更多
关键词 lncRNA MEG3 mir-130a-5p 年龄相关性黄斑变性 人视网膜色素上皮细胞 氧化应激 炎症反应
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lncRNA LINC00173通过调节miR-130a-5p抑制骨肉瘤发生发展的机制研究
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作者 林浩 徐德利 张凯 《蚌埠医学院学报》 CAS 2022年第12期1623-1627,共5页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00173通过调控miR-130a-5p抑制骨肉瘤发生发展的分子机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞系MG-63,分别将LINC00173过表达载体质粒或空载质粒转染至MG-63细胞,实时荧光定量PCR(qPCR)检测转染效率,采用细... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC00173通过调控miR-130a-5p抑制骨肉瘤发生发展的分子机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞系MG-63,分别将LINC00173过表达载体质粒或空载质粒转染至MG-63细胞,实时荧光定量PCR(qPCR)检测转染效率,采用细胞计数法(CCK-8)和Transwell实验分析MG-63细胞增殖、侵袭和迁移能力,双荧光素酶报告基因实验和qPCR检测LINC00173和miR-130a-5p的靶向调控关系。同时过表达LINC00173和miR-130a-5p,并检测MG-63细胞增殖、侵袭和迁移能力。结果:qPCR检测结果显示,与Mock组比较,pc-LINC00173组LINC00173在MG-63细胞中的表达量明显升高(P<0.01)。转染48 h和72 h后,pc-LINC00173组细胞增殖活力均低于Mock组和pcDNA组(P<0.01)。Transwell检测结果显示,pc-LINC00173组与Mock组比较侵袭和迁移细胞数明显减少(P<0.05)。LINC00173与miR-130a-5p之间存在特异性结合位点,与miR-NC组比较,转染miR-130a-5p mimics能够抑制LINC00173-Wt细胞的相对荧光素酶活性(P<0.01),与Mock组和pcDNA组比较,pc-LINC00173组MG-63细胞中miR-130a-5p的表达量均降低(P<0.01)。与pc-LINC00173组和pc-LINC00173+miR-NC组比较,pc-LINC00173+miR-130a-5p组MG-63细胞中miR-130a-5p的表达明显升高,吸光度值明显升高,侵袭和迁移细胞数明显增多(P<0.01)。结论:LINC00173能够抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能与靶向抑制miR-130a-5p的表达有关。 展开更多
关键词 骨肉瘤 长链非编码RNA LINC00173 mir-130a-5p
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菝葜皂苷元调控circ-PRKCI/miR-130a-5p抑制卵巢癌细胞CAOV3增殖、迁移及侵袭 被引量：2
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作者 郭红 黄艳丽 +2 位作者 邢辉 刘韵 江红 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2875-2878,共4页
目的探讨菝葜皂苷元对卵巢癌细胞CAOV3增殖、迁移及侵袭的影响及分子机制。方法卵巢癌细胞CAOV3随机分为对照组、菝葜皂苷元低、中、高剂量组、si-circ-PRKCI组、si-NC组、miR-130a-5p mimic组、miR-NC组、菝葜皂苷元+pcDNA-circ-PRKCI... 目的探讨菝葜皂苷元对卵巢癌细胞CAOV3增殖、迁移及侵袭的影响及分子机制。方法卵巢癌细胞CAOV3随机分为对照组、菝葜皂苷元低、中、高剂量组、si-circ-PRKCI组、si-NC组、miR-130a-5p mimic组、miR-NC组、菝葜皂苷元+pcDNA-circ-PRKCI组、菝葜皂苷元+miR-130a-5p inhibitor组;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖抑制率;平板克隆实验检测集落形成数;划痕实验检测细胞迁移距离;Transwell小室法检测细胞侵袭;Western blot法检测蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ-PRKCI和miR-130a-5p的表达水平;双荧光素酶报告实验检测circ-PRKCI和miR-130a-5p的靶向关系。结果不同剂量菝葜皂苷元处理CAOV3细胞后,CAOV3增殖抑制率升高,集落形成数及侵袭细胞数减少,迁移距离缩短,E-cadherin表达水平升高,N-cadherin表达水平降低,circ-PRKCI表达水平降低,miR-130a-5p表达水平升高,呈剂量依赖性(P<0.05)。干扰circ-PRKCI表达或过表达miR-130a-5p后,CAOV3增殖抑制率升高,集落形成数及侵袭细胞数减少,迁移距离缩短,E-cadherin表达水平升高,N-cadherin表达水平降低(P<0.05)。circ-PRKCI靶向调控miR-130a-5p。抑制miR-130a-5p或过表达circ-PRKCI可逆转菝葜皂苷元对CAOV3增殖迁移侵袭的抑制作用。结论菝葜皂苷元通过调控circ-PRKCI/miR-130a-5p抑制卵巢癌细胞CAOV3增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 菝葜皂苷元 circ-pRKCI mir-130a-5p 卵巢癌 增殖 迁移 侵袭
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计算机断层扫描联合血清三叶因子1、微RNA-130a-5p检测对肺癌的诊断价值分析
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作者 张静 杨晔 +1 位作者 董超 党荣广 《安徽医药》 CAS 2023年第5期989-992,共4页
目的 探究计算机断层扫描(CT)联合血清三叶因子1(TFF1)、微RNA-130a-5p(miR-130a-5p)检测对肺癌的诊断价值。方法 选取2015年2月至2016年9月石家庄市人民医院收治的94例肺癌病人为肺癌组,85例同期确诊的肺良性病变病人为良性病变组。对... 目的 探究计算机断层扫描(CT)联合血清三叶因子1(TFF1)、微RNA-130a-5p(miR-130a-5p)检测对肺癌的诊断价值。方法 选取2015年2月至2016年9月石家庄市人民医院收治的94例肺癌病人为肺癌组,85例同期确诊的肺良性病变病人为良性病变组。对所有受试者进行CT检查,并分析CT对肺癌病人的诊断效能;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TFF1水平;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清miR-130a-5p相对表达量;ROC曲线分析血清TFF1、miR-130a-5p对肺癌的诊断价值;分析CT、TFF1、miR-130a-5p单独检测及联合检测对肺癌的诊断价值。结果 CT诊断肺癌误诊16例,19例漏诊。CT诊断肺癌的灵敏度为79.79%,特异度为81.18%,准确度为80.45%,误诊率、漏诊率分别为18.82%与20.21%。与良性病变组相比,肺癌组病人血清TFF1显著上升,miR-130a-5p水平显著下降(P<0.05)。血清TFF1、miR-130a-5p对肺癌诊断价值的曲线下面积(AUC)分别为0.85、0.83,截断值分别为1.17μg/L、0.72。与联合检测相比,CT检测的灵敏度、准确度显著降低,漏诊率显著升高;血清miR-130a-5p检测的特异度、准确度均显著降低,误诊率显著升高(P<0.05)。结论 肺癌病人血清TFF1、miR-130a-5p呈异常表达,CT联合血清TFF1、miR-130a-5p可提高肺癌诊断的灵敏度和特异度,可为肺癌的诊治提供参考依据。 展开更多
关键词 肺肿瘤 计算机断层扫描 血清三叶因子1 微RNa-130a-5p
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经阴道彩色多普勒超声联合血清miR-130a,miR-425-5p水平检测对宫颈癌的诊断效能分析 被引量：4
7
作者 赵白信 于慧娟 +3 位作者 焦方杰 邢丽丽 黄蕾 姚辉梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2021年第3期43-47,共5页
目的分析经阴道彩色多普勒超声联合血清miR-130a,miR-425-5p水平检测对宫颈癌的诊断效能。方法选取2017年1月~2019年1月在郑州市第七人民医院诊治的宫颈癌患者58例和宫颈炎及宫颈上皮瘤变者77例分别为癌症组和疾病组,60例同期来院体检... 目的分析经阴道彩色多普勒超声联合血清miR-130a,miR-425-5p水平检测对宫颈癌的诊断效能。方法选取2017年1月~2019年1月在郑州市第七人民医院诊治的宫颈癌患者58例和宫颈炎及宫颈上皮瘤变者77例分别为癌症组和疾病组,60例同期来院体检结果正常的健康女性为对照组。对三组实施经阴道彩色多普勒超声检查,并使用实时荧光定量PCR法检测血清miR-130a,miR-425-5p水平。分析经阴道彩色多普勒超声联合血清miR-130a,miR-425-5p表达对宫颈癌的诊断效能。结果癌症组、疾病组和对照组的收缩期血流速度(peak systolic velocity,PSV)(12.01±2.85,9.53±1.98和8.52±1.23cm/s)依次降低,阻力指数(resistive index,RI)(0.42±0.10,0.58±0.12和0.66±0.14)依次升高,差异有统计学意义(F=43.178,60.098,均P<0.001);癌症组、疾病组和对照组的血清miR-130a(0.092±0.030,0.045±0.012和0.030±0.008),miR-425-5p(0.733±0.203,0.365±0.098和0.205±0.048)表达水平依次升高,差异有统计学意义(F=181.070,259.304,P<0.001)。受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)显示经阴道多普勒超声诊断宫颈癌的敏感度、特异度、准确度、曲线下面积(area under curve,AUC)分别为77.59%,87.01%,82.96%和0.889;血清miR-130a分别为79.31%,80.52%,80.00%和0.820;血清miR-425-5p分别为74.14%,77.92%,76.30%和0.785;联合诊断分别为74.14%,90.91%,83.70%和0.932,三者联合检测的AUC大于单独检测(P<0.05)。结论阴道彩色多普勒超声联合血清miR-130a和miR-425-5p的表达对宫颈癌具有较高的诊断效能。 展开更多
关键词 宫颈癌 阴道彩色多普勒超声 微小核糖核酸-130a 微小核糖核酸425-5p
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