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miR-145-5p在原发性高血压患者血清中的表达及其对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响
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作者 田朝霞 李卫萍 +2 位作者 赵娜 李红梅 王全义 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第5期504-508,共5页
目的探究miR-145-5p在原发性高血压(EH)患者血清中的表达及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法以2019年1月至2022年3月于山西医科大学汾阳学院就诊的160例EH患者及160例同期体检正常者为研究对象,RT-qPCR检测EH患者及同... 目的探究miR-145-5p在原发性高血压(EH)患者血清中的表达及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法以2019年1月至2022年3月于山西医科大学汾阳学院就诊的160例EH患者及160例同期体检正常者为研究对象,RT-qPCR检测EH患者及同期体检正常者血清中的miR-145-5p表达水平。体外培养HUVEC,将之分为对照组、miR-145-5p mimic组、mimic-NC组、miR-145-5p inhibitor及inhibitor-NC组,CCK-8法检测各组HUVEC增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双染法检测各组HUVEC凋亡情况;Western blot检测各组HUVEC增殖、凋亡相关蛋白[增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)]表达情况。结果miR-145-5p在EH患者血清中的表达水平明显低于体检正常者(P<0.05);与对照组、mimic-NC组比较,miR-145-5p mimic组HUVEC细胞增殖率及PCNA、Cyclin D1蛋白表达均增加,早期凋亡率、晚期凋亡率及Bax、Caspase-3蛋白表达均减少(P<0.05);与对照组、inhibitor-NC组比较,miR-145-5p inhibitor组HUVEC细胞增殖率及PCNA、Cyclin D1蛋白表达均减少(P<0.05),早期凋亡率、晚期凋亡率及Bax、Caspase-3蛋白表达均增加(P<0.05)。结论miR-145-5p在EH患者血清中呈低表达,过表达miR-145-5p可促进HUVEC增殖并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 mir-145-5p 原发性高血压 人脐静脉内皮细胞 增殖 凋亡
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miR-145-5p调控Survivin通过凋亡通路对食管癌生物学行为的影响
2
作者 郑竞雄 杨阳 +4 位作者 孙光蕊 赵宝山 侯继申 梁宗英 王敏 《河北医学》 CAS 2024年第3期386-392,共7页
目的:探讨miR-145-5p靶向调控Survivin及凋亡信号通路对食管癌凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测食管癌组织和细胞系中miR-145-5p、Survivin mRNA相对表达量。双荧光素酶报告基因分析验证miR-145... 目的:探讨miR-145-5p靶向调控Survivin及凋亡信号通路对食管癌凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测食管癌组织和细胞系中miR-145-5p、Survivin mRNA相对表达量。双荧光素酶报告基因分析验证miR-145-5p和Survivin的靶向调控关系。通过RT-qPCR法测定细胞转染后miR-145-5p和Survivin mRNA的相对表达量。Western blot检测凋亡通路中BCL2、MDM2和Caspase-3蛋白的表达。通过MTT、流式细胞术、划痕愈合实验及Transwell小室实验检测TE-1细胞存活能力、凋亡率、迁移率及侵袭能力。结果:与癌旁组织相比,miR-145-5p在癌组织中表达低,而Survivin表达高(P<0.05)。与正常食管黏膜上皮HEEC细胞相比,食管癌TE-1细胞中miR-145-5p低表达,Survivin高表达(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-145-5p和Survivin间存在靶向调控关系。与未转染和转染miR-145-5p对照物的TE-1细胞相比,转染miR-145-5p模拟物后可显著增加miR-145-5p的表达,抑制Survivin mRNA的表达,同时BCL2和MDM2蛋白的表达下降,Caspase-3表达上升,促进细胞凋亡,抑制了细胞活性、侵袭和迁移能力(P<0.05)。结论:通过miR-145-5p的负向调控,Survivin表达被抑制,凋亡通路被激活,从而促进细胞凋亡,抑制食管癌细胞存活,侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 mir-145-5p SURVIVIN MIRNA 食管癌 凋亡通路
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miR-145-5p对口腔鳞癌细胞增殖的调控作用及其机制
3
作者 赵微 李润滋 +6 位作者 张雨 张雨馨 沈千会 李嘉琪 罗菲 李敏惠 杨平 《成都医学院学报》 CAS 2024年第2期225-230,共6页
目的 探究miR-145-5p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及其机制。方法 利用GEO数据库构建OSCC的miRNA差异表达谱;通过生物信息学技术预测miR-145-5p靶基因并对其进行GO、KEGG及PPI分析;以人OSCC细胞株(HSC-3)为实验对象,将实... 目的 探究miR-145-5p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及其机制。方法 利用GEO数据库构建OSCC的miRNA差异表达谱;通过生物信息学技术预测miR-145-5p靶基因并对其进行GO、KEGG及PPI分析;以人OSCC细胞株(HSC-3)为实验对象,将实验分为CN组(未做处理)、NC组(转染mimic NC)和miR-145-5p组(转染miR-145-5p mimic),通过CCK-8法检测不同剂量(50、100、200 nmol/L)miR-145-5p对HSC-3细胞增殖的影响;JC-1和Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测miR-145-5p对HSC-3细胞的凋亡诱导情况;RT-qPCR检测miR-145-5p调控神经母细胞瘤鼠肉瘤同系物(NRAS)、C-JUN氨基端激酶(C-JUN)、信号转导和转录激活因子1(STAT1)的表达情况。结果 miRNA差异表达谱显示,miR-145-5p在OSCC中表达下调(P<0.05);GO和KEGG分析显示,miR-145-5p靶基因主要调控MAPK信号通路;PPI蛋白互作显示,NRAS是miR-145-5p的关键靶基因之一;CCK-8结果显示,50、100、200 nmol/L的miR-145-5p转染HSC-3细胞后,细胞活力较CN组降低(P<0.05);JC-1染色结果显示,miR-145-5p组HSC-3细胞线粒体膜电位低于CN组(P<0.05);Annexin V-FITC/PI染色结果显示,miR-145-5p组HSC-3细胞凋亡率较CN组明显增加(P<0.05);RT-qPCR结果显示,与CN组比较,miR-145-5p组NRAS表达降低(P<0.05),而MAPK信号通路关键转录因子C-JUN和STAT1表达升高(P<0.05)。结论 miR-145-5p可通过靶向NRAS,并经过MAPK信号通路诱导细胞凋亡,从而抑制OSCC细胞增殖。 展开更多
关键词 mir-145-5p 口腔鳞状细胞癌 神经母细胞瘤鼠肉瘤同系物 MApK信号通路 凋亡
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lncR FOXD2-AS1调控miR-145-5p对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响
4
作者 王巍 王志武 +3 位作者 于镓锐 董量 曹博 李剑锋 《山东医药》 CAS 2024年第10期45-48,共4页
目的 探讨长链非编码RNA(lncR)FOXD2-AS1调控微小RNA(miR)-145-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)等生物学特性的影响。方法 体外培养人NSCLC细胞系A549、H1299、SK-MES-1及人正常肺支气管上皮细胞系16H... 目的 探讨长链非编码RNA(lncR)FOXD2-AS1调控微小RNA(miR)-145-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)等生物学特性的影响。方法 体外培养人NSCLC细胞系A549、H1299、SK-MES-1及人正常肺支气管上皮细胞系16HBE,应用RT-qPCR检测各细胞系中lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p表达。选取lncR-FOXD2-AS1相对高表达的SK-MES-1作为敲低实验的研究对象,将SK-MES-1细胞按照转染处理的不同分为NC组(转染si-NC)和si-FOXD2-AS1组(转染si-FOXD2-AS1),转染后,RT-qPCR检测细胞中lncR-FOXD2-AS1、miR-145-5p表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Fibronectin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p的相互关系。结果 与16HBE细胞相比,lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中高表达(P<0.05),miR-145-5p在NSCLC细胞系中低表达(P均<0.05)。与NC组比较,si-FOXD2-AS1组细胞miR-145-5p表达升高(P<0.05),0、24、48 h时OD值降低(P均<0.05),迁移及侵袭穿膜细胞数减少(P均<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),N-cadherin、Fibronectin蛋白表达降低(P均<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-145-5p是lncR-FOXD2-AS1的靶基因。结论 lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中表达升高,敲低lncR-FOXD2-AS1通过靶向调控miR-145-5p抑制NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT进程。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA-FOXD2-AS1 微小RNA-145-5p 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 上皮-间质转化
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miR-145-5p在结直肠癌中的表达及对GTPBP2基因靶向调控的研究
5
作者 王永富 郑紫恒 许春进 《中国临床新医学》 2024年第5期511-516,共6页
目的探讨miR-145-5p在结直肠癌中的表达及对GTP结合蛋白2(GTPBP2)的调控作用。方法选择2022年1月至12月在新乡医学院附属商丘市第一人民医院行结直肠癌根治性切除术的44例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织。选择人正常结直肠黏膜细胞FHC... 目的探讨miR-145-5p在结直肠癌中的表达及对GTP结合蛋白2(GTPBP2)的调控作用。方法选择2022年1月至12月在新乡医学院附属商丘市第一人民医院行结直肠癌根治性切除术的44例结直肠癌患者的癌组织及癌旁组织。选择人正常结直肠黏膜细胞FHC、结直肠癌细胞HCT116进行基础实验。采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测癌组织、癌旁组织及细胞的miR-145-5p和GTPBP2 mRNA的表达水平。采用Western blot法检测细胞GTPBP2蛋白表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p与GTPBP2基因的靶向关系。分析结直肠癌组织miR-145-5p表达水平与患者临床病理特征的关联性。结果与癌旁组织相比,癌组织中miR-145-5p表达水平显著降低(t=8.189,P<0.001),GTPBP2 mRNA表达水平显著升高(t=11.230,P<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,结直肠癌组织miR-145-5p表达水平与GTPBP2 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.503,P<0.001)。miR-145-5p表达水平与结直肠癌远处转移、淋巴结转移以及TNM分期存在显著关联(P<0.05),但与患者性别、年龄、病灶部位、临床T分期、肿瘤直径的关联性不显著(P>0.05)。与FHC细胞相比,HCT116细胞miR-145-5p表达水平显著降低(P<0.001),GTPBP2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.001)。过表达miR-145-5p可下调HCT116细胞GTPBP2 mRNA和蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验结果提示miR-145-5p和GTPBP2基因之间存在靶向关系。结论miR-145-5p在结直肠癌中呈低表达,并与远处转移、淋巴结转移和TNM分期存在显著关联,其可能通过靶向调控GTPBP2表达而影响结直肠癌的发生、发展。 展开更多
关键词 结直肠癌 mir-145-5p GTp结合蛋白2 靶向调控
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茯苓酸调节miR-145-5p/KLF5轴对ox-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡的影响
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作者 吕静静 张溢寒 汪东东 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第20期3697-3703,共7页
目的:探讨茯苓酸调节miR-145-5p/Krüppel样转录因子5(KLF5)轴对氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞凋亡的影响。方法:将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分为对照组、ox-LDL组、ox-LDL+茯苓酸组、ox-LDL+茯苓酸+inhibit... 目的:探讨茯苓酸调节miR-145-5p/Krüppel样转录因子5(KLF5)轴对氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞凋亡的影响。方法:将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分为对照组、ox-LDL组、ox-LDL+茯苓酸组、ox-LDL+茯苓酸+inhibitor-NC组、ox-LDL+茯苓酸+miR-145-5p inhibitor组。分组处理后,CCK-8法、Edu染色检测细胞增殖;酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒检测白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-145-5p和KLF5 mRNA表达水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测细胞中KLF5、Bax、Bcl-2蛋白表达量。双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p和KLF5的关系。结果:与对照组相比,ox-LDL组HUVEC细胞活性、增殖率、SOD和GSH、miR-145-5p表达和Bcl-2蛋白表达水平下降,IL-1β、TNF-α、MDA、凋亡率、KLF5 mRNA表达、KLF5、Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。与ox-LDL组相比,ox-LDL+茯苓酸组和ox-LDL+茯苓酸+inhibitor-NC组HUVEC细胞活性、增殖率、SOD和GSH、miR-145-5p表达和Bcl-2蛋白表达水平升高,IL-1β、TNF-α、MDA、凋亡率、KLF5 mRNA表达、KLF5、Bax蛋白表达水平下降(P<0.05)。与ox-LDL+茯苓酸+inhibitor-NC组相比,ox-LDL+茯苓酸+miR-145-5p inhibitor组细胞活性、增殖率、SOD和GSH、miR-145-5p表达和Bcl-2蛋白表达水平下降,IL-1β、TNF-α、MDA、凋亡率、KLF5 mRNA表达、KLF5、Bax蛋白表达水平升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p和KLF5存在靶向调控关系。结论:茯苓酸可以减少ox-LDL诱导的血管内皮细胞的凋亡,其机制可能与调节miR-145-5p/KLF5轴有关。 展开更多
关键词 血管内皮细胞 细胞凋亡 茯苓酸 mir-145-5p Krüppel样转录因子5 氧化修饰的低密度脂蛋白 实验研究
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血必净通过调节miR-145-5p/LOX信号通路对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的影响
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作者 李英 冯凯 +4 位作者 王文霞 严丽娟 张国旗 刘志艳 周来来 《陕西中医药大学学报》 2024年第5期97-102,共6页
目的探讨血必净对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化损伤及凋亡的影响及其分子机制。方法培养H9C2细胞后将其随机分为对照组(Control)、模型组(Model)和血必净组(XBJ)3组,除Control组外,其余组的H9C2细胞用H_(2)O_(2)诱导构建氧化应激损伤... 目的探讨血必净对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化损伤及凋亡的影响及其分子机制。方法培养H9C2细胞后将其随机分为对照组(Control)、模型组(Model)和血必净组(XBJ)3组,除Control组外,其余组的H9C2细胞用H_(2)O_(2)诱导构建氧化应激损伤细胞模型,然后XBJ组用12.5 g·L^(-1)、25 g·L^(-1)和50 g·L^(-1)浓度的XBJ处理24 h。CCK-8法检测不同浓度的XBJ对细胞活力的影响;生化试剂盒检测肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及还原型谷胱甘肽(GSH)的活性;流式检测H9C2细胞凋亡率;qRT-PCR检测miR-145-5p、LOX mRNA的表达;Western blot检测赖氨酰氧化酶蛋白(lysyloxidase,LOX)的表达;双荧光素酶实验检测miR-145-5p与LOX的靶向结合关系。结果不同浓度XBJ处理后,细胞活性呈梯度性显著增高;与对照组相比,模型组细胞CK-MB、MDA的活性显著增加(P<0.01),SOD、GSH活性显著降低,细胞凋亡率显著提高,miR-145-5p表达水平显著降低,LOX水平显著增加(P<0.01);经血必净处理后上述指标的水平得到有效改善(P<0.05)。结论XBJ能通过提高抗氧化应激能力,抑制细胞凋亡并调控miR-145-5p/LOX信号通路保护H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 血必净 心肌细胞 氧化应激 细胞凋亡 mir-145-5p/LOX通路
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miR-770-5p和miR-145-5p在糖尿病肾脏疾病患者中的表达变化及临床意义
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作者 张冰斐 孙雪 《临床肾脏病杂志》 2024年第11期887-893,共7页
目的探究微小RNA(microRNA,miRNA)-770-5p和miR-145-5p在糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者中的表达变化及临床意义。方法选取2020年12月至2022年12月于国药东风总医院接受治疗的DKD患者132例作为DKD组,另选取同期在国... 目的探究微小RNA(microRNA,miRNA)-770-5p和miR-145-5p在糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)患者中的表达变化及临床意义。方法选取2020年12月至2022年12月于国药东风总医院接受治疗的DKD患者132例作为DKD组,另选取同期在国药东风总医院接受治疗的2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者132例作为T2DM组,选取同期在本院健康体检者132名作为对照组。采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(reverse transcription–qPCR,qRT-PCR)测定血清miR-770-5p、miR-145-5p表达水平;影响DKD预后的因素采用多因素Logistic回归分析;血清miR-770-5p、miR-145-5p对DKD预后的预测价值绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析。结果DKD组患者血清miR-770-5p、miR-145-5p表达水平高于对照组[(1.35±0.29)比(1.01±0.21)、(1.37±0.29)比(1.02±0.22),P<0.05]、T2DM组[(1.35±0.29)比(1.08±0.25)、(1.37±0.29)比(1.12±0.24),P<0.05],且T2DM组患者血清miR-770-5p、miR-145-5p表达水平高于对照组[(1.08±0.25)比(1.01±0.21)、(1.12±0.24)比(1.02±0.22),P<0.05]。晚期DKD组患者血清miR-770-5p、miR-145-5p表达水平高于早期DKD组[(1.45±0.33)比(1.18±0.26)、(1.47±0.31)比(1.21±0.26),P<0.05],中期DKD组[(1.45±0.33)比(1.33±0.27)、(1.47±0.31)比(1.35±0.29),P<0.05],且中期DKD组血清miR-770-5p、miR-145-5p表达水平高于早期DKD组[(1.33±0.27)比(1.18±0.26)、(1.35±0.29)比(1.21±0.26),P<0.05]。预后不良组血清miR-770-5p、miR-145-5p表达水平高于预后良好组[(1.53±0.32)比(1.28±0.28)、(1.58±0.34)比(1.29±0.27),P<0.05]。与预后良好组患者相比,预后不良组尿素氮、白蛋白、血肌酐有显著差异(P<0.05)。多因素Logistic结果显示,miR-770-5p、miR-145-5p、尿素氮、血肌酐是影响DKD患者预后的危险因素(OR>1,P<0.05),白蛋白是影响DKD患者预后的保护因素(OR<1,P<0.05)。血清miR-770-5p、miR-145-5p二者联合预测DKD患者预后的曲线下面积最高,优于血清miR-770-5p、miR-145-5p各自单独预测(Z_(二者联合-miR-770-5p)=3.632、P=0.003,Z_(二者联合-miR-145-5p)=2.370、P=0.018)。结论DKD患者血清miR-770-5p和miR-145-5p表达水平升高,与DKD病情严重程度及预后密切相关,二者联合评估DKD患者预后的价值更好。 展开更多
关键词 微小RNA-770-5p 微小RNA-145-5p 糖尿病肾脏疾病 预后
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lncRNA-UCA1、miR-145-5p在妊娠期糖尿病孕妇胎盘及脐血中的表达及意义
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作者 张鑫瑜 陈雪莲 赵卫秀 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第7期837-840,846,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(lncRNA-UCA1)、微小RNA-145-5p(miR-145-5p)在妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘组织、脐血中的表达水平及二者与胰岛素抵抗(IR)、新生儿体重的关系。方法选取2019年3月至2021年7月该院收治的8... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(lncRNA-UCA1)、微小RNA-145-5p(miR-145-5p)在妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘组织、脐血中的表达水平及二者与胰岛素抵抗(IR)、新生儿体重的关系。方法选取2019年3月至2021年7月该院收治的86例由口服葡萄糖耐量试验(OGTT)确定为GDM的孕妇作为GDM组,另选取同期86例经OGTT判定为正常糖耐量(NGT)的孕妇为对照组。比较对照组和GDM组胎盘组织、脐血中lncRNA-UCA1、miR-145-5p表达水平及IR相关指标及新生儿体重,分析GDM孕妇胎盘组织、脐血lncRNA-UCA1、miR-145-5p表达水平与稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、新生儿体重,以及胎盘组织、脐血lncRNA-UCA1表达水平与miR-145-5p的相关性。结果GDM组孕妇胎盘组织、脐血中lncRNA-UCA1表达水平低于对照组(P<0.05),miR-145-5p表达水平及空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、HOMA-IR均高于对照组(P<0.05)。GDM孕妇胎盘组织、脐血lncRNA-UCA1表达水平与HOMA-IR、新生儿体重呈负相关(P<0.05),miR-145-5p表达水平与HOMA-IR、新生儿体重呈正相关(P<0.05),GDM孕妇胎盘组织、脐血lncRNA-UCA1表达水平与miR-145-5p呈负相关(P<0.05)。结论GDM孕妇胎盘、脐血中lncRNA-UCA1表达水平较低,miR-145-5p表达水平较高,二者均与IR、新生儿体重密切相关。 展开更多
关键词 微小RNA-145-5p 长链非编码RNA尿路上皮癌胚抗原1 妊娠期糖尿病 胰岛素抵抗 新生儿体重
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急性脊髓损伤患者外周血miR-124-3p、miR-145-5p水平及意义
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作者 王瑞波 李燕平 +1 位作者 段登科 王自涛 《检验医学与临床》 CAS 2024年第19期2845-2849,共5页
目的探讨急性脊髓损伤(SCI)患者外周血微小RNA-124-3p(miR-124-3p)和微小RNA-145-5p(miR-145-5p)的水平及意义。方法选择2018年1月至2023年1月该院收治的112例急性SCI患者作为SCI组,选择同期在该院体检的102例体检健康受试者作为对照组... 目的探讨急性脊髓损伤(SCI)患者外周血微小RNA-124-3p(miR-124-3p)和微小RNA-145-5p(miR-145-5p)的水平及意义。方法选择2018年1月至2023年1月该院收治的112例急性SCI患者作为SCI组,选择同期在该院体检的102例体检健康受试者作为对照组。根据美国脊髓损伤学会评分(ASIA)分级,将SCI患者分为脊髓不完全损伤组(78例)和脊髓完全损伤组(34例),根据预后情况将患者分为预后良好组和预后不良组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测所有研究对象外周血miR-124-3p和miR-145-5p水平;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-124-3p、miR-145-5p水平对SCI患者预后不良的预测价值;采用多因素Logistic回归分析影响SCI患者预后不良的因素。结果与对照组相比,SCI组miR-124-3p水平降低、miR-145-5p水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与脊髓不完全损伤组相比,脊髓完全损伤组miR-124-3p水平降低,miR-145-5p水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组miR-124-3p水平降低、miR-145-5p水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-124-3p、miR-145-5p联合检测预测SCI患者预后不良的曲线下面积(AUC)优于miR-124-3p、miR-145-5p单项预测的AUC(Z=2.143,P=0.032;Z=2.952,P=0.003)。miR-145-5p水平升高是SCI患者预后不良的独立危险因素(P<0.05),miR-124-3p水平升高是SCI患者预后不良的保护因素(P<0.05)。结论SCI患者外周血miR-124-3p水平降低、miR-145-5p水平升高,其变化与脊髓损伤程度有关,且对患者预后有一定的预测价值。 展开更多
关键词 急性脊髓损伤 微小RNA-124-3p 微小RNA-145-5p 预后
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子宫腺肌病患者手术前后miR-143-5p/miR-145-5p的表达变化及与DUSP6的相关性
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作者 闫东科 张蕾 +3 位作者 李伟伟 门颖超 艾浩 李霞 《临床检验杂志》 CAS 2024年第9期669-672,共4页
目的探讨子宫腺肌病(AM)患者手术前后miR-143-5p、miR-145-5p和双特异性磷酸酶6(dualspecificity phosphatases 6,DUSP6)蛋白的表达水平变化,并分析各指标之间的相关性。方法收集锦州医科大学附属第三医院因AM切除全子宫+双侧输卵管切除... 目的探讨子宫腺肌病(AM)患者手术前后miR-143-5p、miR-145-5p和双特异性磷酸酶6(dualspecificity phosphatases 6,DUSP6)蛋白的表达水平变化,并分析各指标之间的相关性。方法收集锦州医科大学附属第三医院因AM切除全子宫+双侧输卵管切除(或双附件切除)患者手术前后及同期年龄、性别匹配的体检健康者(健康人对照组)全血标本各45例,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组miR-143-5p、miR-145-5p的表达水平,并采用ROC曲线评估各指标单独及联合检测筛查AM的临床效能。经miRTarBase、TargetScan、TargetMiner及miRDB在线软件预测miR-143-5p、miR-145-5p靶基因,采用ELISA法检测靶蛋白DUSP6的表达水平,并采用Pearson分析法对miR-143-5p、miR-145-5p与DUSP6之间的相关性进行分析。结果术前组miR-143-5p和miR-145-5p的表达水平均显著低于健康人对照组,差异有统计学意义(P<0.01);术后组miR-143-5p与miR-145-5p的表达水平均显著高于术前组(P<0.01),且术后组miR-143-5p的表达水平显著低于健康人对照组(P<0.01)。术后组DUSP6蛋白的表达水平显著低于术前组(P<0.01)。术前和术后组miR-145-5p和miR-143-5p与DUSP6蛋白的表达水平均呈负相关(术前_(miR-145-5p)r=-0.784,P=0.004;术后_(miR-145-5p)r=-0.689,P=0.024,术前_(miR-143-5p)r=-0.632,P=0.0032;术后_(miR-143-5p)r=-0.601,P=0.022)。miR-143-5p、miR-145-5p、DUSP6三者联合检测筛查AM的AUC^(ROC)为0.936,敏感性为0.863,特异性为0.978,均显著高于三者单项指标检测。miR-145-5p和miR-143-5p靶基因分别为DUSP6和MAPK13。结论miR-143-5p、miR-145-5p可通过直接和间接作用于靶基因DUSP6,参与AM的进展,miR-143-5p、miR-145-5p与DUSP6三者联合可作为筛查AM的潜在分子标志物。 展开更多
关键词 子宫腺肌病 血清 微小RNA-143-5p 微小RNA-145-5p 双特异性磷酸酶6
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lncRNA SNHG1靶向miR-145-5p/PDCD4轴对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响 被引量：1
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作者 李红英 张会军 +2 位作者 王军 穆秀娥 李红方 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期904-909,916,共7页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因1(SNHG1)靶向miR-145-5p/程序性细胞死亡因子4(PDCD4)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(NC组)、H/R组、si-NC组、si-SNHG1组、mimic NC组、miR-14... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因1(SNHG1)靶向miR-145-5p/程序性细胞死亡因子4(PDCD4)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(NC组)、H/R组、si-NC组、si-SNHG1组、mimic NC组、miR-145-5p mimic组、si-SNHG1+inhibitor NC组、si-SNHG1+miR-145-5p inhibitor组。除NC组外,其他组H9c2细胞均需转染对应物质后构建H/R模型。实时定量PCR(qRT-PCR)检测H9c2细胞中SNHG1、miR-145-5p表达;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡;试剂盒检测H9c2细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;Western blotting检测H9c2细胞中PDCD4、caspase 3、Bcl-2、Bax蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证SNHG1与miR-145-5p、miR-145-5p与PDCD4的关系。结果沉默SNHG1或过表达miR-145-5p可促进H/R诱导的H9c2细胞中miR-145-5p表达和细胞增殖,抑制PDCD4蛋白表达、细胞凋亡和氧化应激。miR-145-5p inhibitor减弱了沉默SNHG1对H/R诱导的H9c2细胞中miR-145-5p表达和细胞增殖的促进作用,以及对PDCD4蛋白表达、细胞凋亡、氧化应激的抑制作用。SNHG1靶向调控miR-145-5p/PDCD4轴。结论沉默SNHG1可能通过调控miR-145-5p/PDCD4轴抑制H/R诱导的H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 核内小RNA宿主基因1 mir-145-5p 程序性细胞死亡因子4 凋亡 心肌细胞
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莪术醇通过调节lncRNA NR2F1-AS1/miR-145-5p表达抑制前列腺癌细胞增殖及转移 被引量：1
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作者 汪洋 杨君 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期745-749,共5页
目的:探讨莪术醇对前列腺癌细胞增殖及转移的影响及其可能作用机制。方法:不同浓度的莪术醇处理人前列腺癌细胞LNCap,采用脂质体转染法将si-NC、si-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCap细胞,将pcDNA、pcDNA-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCa... 目的:探讨莪术醇对前列腺癌细胞增殖及转移的影响及其可能作用机制。方法:不同浓度的莪术醇处理人前列腺癌细胞LNCap,采用脂质体转染法将si-NC、si-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCap细胞,将pcDNA、pcDNA-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCap细胞后加入100μg/ml莪术醇处理;CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;qRT-PCR检测lncRNA NR2F1-AS1、miR-145-5p表达量;双荧光素酶报告实验验证lncRNA NR2F1-AS1与miR-145-5p的靶向关系。结果:莪术醇可降低细胞存活率,并可降低lncRNA NR2F1-AS1表达量,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而miR-145-5p表达量升高(P<0.05);lncRNA NR2F1-AS1可靶向调控miR-145-5p的表达(P<0.05);转染si-lncRNA NR2F1-AS1后细胞存活率降低(P<0.05),miR-145-5p表达量升高(P<0.05),克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05);转染pcDNA-lncRNA NR2F1-AS1可降低莪术醇对LNCap细胞增殖及转移的作用。结论:莪术醇可通过调节lncRNA NR2F1-AS1/miR-145-5p表达,抑制前列腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 莪术醇 前列腺癌 lncRNA NR2F1-AS1 mir-145-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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不同强度运动预防高脂膳食大鼠心肌脂质沉积效果及对miR-145-5p、KLF5、PPARα表达的影响 被引量：1
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作者 吴卫东 王伟欢 +1 位作者 刘帅 何玉秀 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期589-599,共11页
目的:观察12周中等强度持续运动(moderate-intensity continuous training,MICT)与高强度间歇运动(high intensity interval training,HIIT)预防高脂膳食大鼠心肌脂质沉积效果的异同,以及对miR-145-5p、KLF5、PPARα表达的影响,从而探... 目的:观察12周中等强度持续运动(moderate-intensity continuous training,MICT)与高强度间歇运动(high intensity interval training,HIIT)预防高脂膳食大鼠心肌脂质沉积效果的异同,以及对miR-145-5p、KLF5、PPARα表达的影响,从而探讨其可能机制。方法:5周龄雄性SD大鼠随机分为普通膳食安静组(C组)、高脂膳食安静组(F组)、高脂膳食MICT组(M组)、高脂膳食HIIT组(H组),每组8只。12周跑台训练干预结束后,超声心动图检测大鼠心脏结构与功能;光镜和透射电镜观察大鼠心肌脂质沉积;检测大鼠血清、心肌脂质含量;RT-PCR、Western Blot和免疫荧光双标记检测大鼠心肌miR-145-5p、KLF5、PPARα的表达情况。结果:(1)与C组比较,F组大鼠心肌结构、功能受损;心肌纤维松弛,脂质沉积增多;血清及心肌脂质含量增加(P<0.05);心肌组织miR-145-5P表达升高(P<0.05),KLF5、PPARαm RNA与蛋白表达水平降低(P<0.05);KLF5、PPARα阳性细胞数降低(P<0.01)。(2)与F组比较,M、H组大鼠心肌结构、功能均改善;心肌纤维紧密,脂质沉积减少;血清及心肌脂质含量减少(P<0.01);心肌组织miR-145-5P表达降低(P<0.05),KLF5、PPARαm RNA与蛋白表达水平增加(P<0.05);KLF5、PPARα阳性细胞数增加(P<0.01)。(3)与M组比较,H组大鼠心肌脂质沉积减少;血清HDL含量增加(P<0.01),心肌TG含量降低(P<0.05);KLF5、PPARα阳性细胞数增加(P<0.01)。结论:12周MICT与HIIT均能预防高脂膳食大鼠心肌脂质沉积,大鼠心肌miR-145-5p、KLF5、PPARα表达水平的变化可能是运动影响心肌脂质代谢的机制之一,HIIT预防效果较好,可能与该信号通路的活化程度有关。 展开更多
关键词 中等强度持续运动 高强度间歇运动 高脂膳食 心肌脂质沉积 mir-145-5p KLF5
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百令胶囊上调miR-145-5p逆转TGF-β_(1)/Smad3通路机制初探
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作者 冯平 姬泽萱 +1 位作者 陈丽萍 王布 《中国药业》 CAS 2023年第16期34-40,共7页
目的探讨百令胶囊(BLC)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺损伤的改善作用,以及对香烟烟雾提取物(CSE)作用下人支气管上皮细胞BEAS-2B生长的影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,灌胃生理盐水2 mL),模型组(B组,灌胃生理盐水2... 目的探讨百令胶囊(BLC)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺损伤的改善作用,以及对香烟烟雾提取物(CSE)作用下人支气管上皮细胞BEAS-2B生长的影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,灌胃生理盐水2 mL),模型组(B组,灌胃生理盐水2 mL),BLC组(C组,灌胃BLC 5.5 mg/kg),miR-145-5p inhibitorNC组(D组,灌胃BLC 5.5 mg/kg+尾静脉注射miR-145-5p inhibitorNC 6μL),miR-145-5p inhibitor组(E组,灌胃BLC 5.5 mg/kg+尾静脉注射miR-145-5p inhibitor 6μL),各12只。以香烟烟雾吸入法复制大鼠COPD模型。建模成功后灌胃相应药物或生理盐水(每日1次),尾静脉注射相应药物(每周1次),连续8周。以0(空白对照),3%,5%,10%,20%CSE,以及加5%,10%,20%,40%的BLC药物血清(BLC-S)孵育细胞48 h。检测大鼠潮气量(TV)、呼气峰流量(PEF)、分钟通气量(MV)、用力肺活量(FVC)和第0.3秒用力呼气容积(FEV_(0.3));观察肺组织病理形态;免疫组化法检测Smad3表达水平,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定转化生长因子(TGF)-β_(1)表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-145-5p mRNA表达水平。采用CCK-8法检测细胞活力。结果与B组比较,C组及D组大鼠TV,PEF,MV,FVC,FEV0.3均显著升高;与D组比较,E组大鼠上述指标均显著降低(P<0.05)。与B组比较,C组及D组大鼠肺组织病理形态显著改善,平均肺泡数显著增加,肺泡直径显著减小;与D组比较,E组大鼠肺组织病理形态未改善,且平均肺泡数显著减少,肺泡直径显著增长(P<0.05)。与5%CSE条件比较,5%CSE+20%BLC-S条件下的细胞活力显著增强(P<0.05)。与B组比较,C组及D组大鼠肺组织中Smad3,TGF-β_(1)的表达水平均显著降低,miR-145-5p mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与D组比较,E组大鼠肺组织中Smad3,TGF-β_(1)的表达水平均显著升高,miR-145-5p mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。与5%CSE条件比较,5%CSE+20%BLC-S条件下细胞Smad3和TGF-β_(1)的表达水平均显著降低,miR-145-5p mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与5%CSE+20%BLC-S+inhibitor NC条件比较,同水平inhibitor条件下细胞Smad3及TGF-β_(1)表达水平均显著升高(P<0.05)。结论BLC在体内和体外均显示出对香烟诱导COPD的保护作用,其机制可能与上调miR-145-5p水平逆转香烟暴露激活的TGF-β_(1)/Smad3信号通路有关。 展开更多
关键词 百令胶囊 mir-145-5p 慢性阻塞性肺疾病 TGF-β_(1)/Smad3信号通路 大鼠 人支气管上皮细胞BEAS-2B
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miR-145-5p靶向IGF 1R介导AKT通路抑制猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化 被引量：1
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作者 员佳乐 刘畅 +10 位作者 黄晓宇 刘巧霞 史明月 李文霞 牛瑾 王首元 高鹏飞 郭晓红 李步高 路畅 曹果清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1893-1904,共12页
旨在探讨miR-145-5p对猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。本研究采用qRT-PCR检测miR-145-5p的组织表达谱和发育性表达规律;选用1 d晋汾白猪趾长伸肌进行骨骼肌卫星细胞的分离与培养,分别转染miR-145-5p模拟物(mimics)及其对照组(mimics... 旨在探讨miR-145-5p对猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。本研究采用qRT-PCR检测miR-145-5p的组织表达谱和发育性表达规律;选用1 d晋汾白猪趾长伸肌进行骨骼肌卫星细胞的分离与培养,分别转染miR-145-5p模拟物(mimics)及其对照组(mimics NC),miR-145-5p抑制剂(inhibitor)及其对照组(inhibitor NC),每个处理3个重复,利用qRT-PCR、EdU和CCK-8方法检测增殖相关基因表达量、EdU阳性细胞数和细胞增殖活性;待猪骨骼肌卫星细胞分化后利用qRT-PCR、Western blot和免疫荧光染色方法探究分化相关基因mRNA和蛋白水平及肌管形成情况;采用双荧光素酶试验、qRT-PCR和Western blot探究miR-145-5p对下游IGF 1R和AKT通路的影响。结果显示,miR-145-5p基因在肝和肺中表达量最高,心和皮下脂肪中次之(P<0.05);随着日龄的增加,miR-145-5p在猪背最长肌中的表达量持续升高(P<0.05)。在猪骨骼肌卫星细胞体外培养过程中,转染miR-145-5p mimics极显著下调Ki 67和CDK 1的表达(P<0.01),显著下调PCNA和CDK 4的表达(P<0.05),阳性细胞指数极显著降低(P<0.01),细胞活性显著低于对照组(P<0.05)。在分化方面,过表达miR-145-5p极显著下调MyOD、MyOG和Myf 5的表达量(P<0.01),MyOD蛋白水平显著降低(P<0.05),MyHC阳性肌管面积少于对照组;转染miR-145-5p inhibitor则出现相反的结果。过表达miR-145-5p显著降低IGF1R mRNA和蛋白的相对表达量(P<0.05),显著降低AKT蛋白的磷酸化水平;而干扰miR-145-5p能极显著上调IGF1R mRNA和蛋白的相对表达量(P<0.01),并能挽救转染si-IGF1R对p-AKT蛋白的抑制作用(P<0.01)。本研究结果表明,miR-145-5p通过负调控IGF1R mRNA和蛋白的相对表达水平,并影响AKT通路,抑制猪骨骼肌卫星细胞的增殖和分化,进而参与骨骼肌的发育过程。研究结果丰富了猪肌肉生长发育的分子网络,并为肌肉性状的分子育种提供了靶标。 展开更多
关键词 mir-145-5p IGF 1R AKT通路 增殖和分化 骨骼肌卫星细胞
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miR-145-5p靶向FGF5对神经细胞缺血/再灌注损伤诱导的神经元细胞凋亡和氧化应激的影响 被引量：1
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作者 贾燕燕 张小林 +1 位作者 潘燕 赵迪 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第17期3170-3176,共7页
目的:探讨miR-145-5p靶向成纤维细胞生长因子5(FGF5)对神经细胞缺血/再灌注(I/R)损伤导的神经元细胞凋亡和氧化应激的影响。方法:采用氧糖剥夺/复氧(OGD/R)建立神经元细胞损伤模型,氧糖剥夺后复氧6、12、24 h检测氧化应激指标的含量,采... 目的:探讨miR-145-5p靶向成纤维细胞生长因子5(FGF5)对神经细胞缺血/再灌注(I/R)损伤导的神经元细胞凋亡和氧化应激的影响。方法:采用氧糖剥夺/复氧(OGD/R)建立神经元细胞损伤模型,氧糖剥夺后复氧6、12、24 h检测氧化应激指标的含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测miR-145-5p的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验分析miR-145-5p与FGF5的靶向关系,蛋白质印迹法检测miR-145-5p对FGF5表达水平的影响。miR-145-5p inhibitor与FGF5 siRNA单独或共转后OGD/R,检测氧化应激指标变化。结果:神经细胞经氧糖剥夺复氧后,细胞氧化应激损伤明显增加,乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量明显增加,超氧化物歧化酶(SOD)活性明显降低,miR-145-5p表达量及细胞凋亡率均增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。miR-145-5p与FGF5存在靶向关系,miR-145-5p inhibitor转染神经细胞后OGD/R,细胞氧化应激反应和凋亡被抑制,而FGF5siRNA逆转了miR-145-5p inhibitor对OGD/R细胞模型氧化应激、细胞凋亡和FGF5表达水平的影响。结论:miR-145-5p可通过靶向结合FGF5诱导HT22细胞凋亡和氧化应激损伤,miR-145-5p可能是I/R的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 缺血/再灌注损伤 mir-145-5p 成纤维细胞生长因子5 神经细胞 氧化应激 实验研究
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炭疽毒素受体2表达受miR-145-5p调控在胰腺癌的作用机制研究 被引量：2
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作者 马林 邓大炜 +4 位作者 兰川 刘胜 唐豪佑 黄孝彬 李建水 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期261-268,共8页
目的:探讨炭疽毒素受体2(anthrax toxin receptor 2,ANTXR2)在胰腺癌组织和细胞中的表达、临床意义和细胞功能,验证miR-145-5p在胰腺癌细胞中调控ANTXR2的作用机制。方法:分析GEO和TCGA数据库中胰腺癌的转录数据和临床数据。通过CCK-8... 目的:探讨炭疽毒素受体2(anthrax toxin receptor 2,ANTXR2)在胰腺癌组织和细胞中的表达、临床意义和细胞功能,验证miR-145-5p在胰腺癌细胞中调控ANTXR2的作用机制。方法:分析GEO和TCGA数据库中胰腺癌的转录数据和临床数据。通过CCK-8实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验进行细胞功能验证。采用miRNA靶点预测数据库反向预测可能通过ceRNA机制抑制ANTXR2表达的miRNA,并使用双荧光素酶报告实验进行验证。结果:ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中的表达均上调(均P<0.05),ANTXR2上调预示着原发肿瘤等级(P<0.05)、肿瘤细胞分化等级(P<0.05)和总体生存期(P<0.05,HR=1.72)均较差。ANTXR2可以促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭(均P<0.05)。ANTXR2是miR-145-5p下游的靶标(P<0.01),miR-145-5p可以通过抑制ANTXR2的表达抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论:ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中过表达,促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,且与患者预后有关。miR-145-5p通过调控ANTXR2的表达抑制其促癌作用。 展开更多
关键词 炭疽毒素受体2 mir-145-5p 增殖 迁移和侵袭 胰腺癌
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益肾通癃汤通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌作用机制研究 被引量：1
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作者 涂雅玲 刘德果 +2 位作者 羊羡 李博 陈其华 《Digital Chinese Medicine》 CSCD 2023年第1期86-96,共11页
目的探讨益肾通癃汤(YSTLD)通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌的作用机制。方法借助miRNA芯片技术检测YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后的miRNA表达谱的变化,筛选miRNA芯片结果中差异显著的miRNA,并通过实时荧... 目的探讨益肾通癃汤(YSTLD)通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌的作用机制。方法借助miRNA芯片技术检测YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后的miRNA表达谱的变化,筛选miRNA芯片结果中差异显著的miRNA,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)进行验证。慢病毒转染miR-145-5p入前列腺癌PC-3细胞,CCK8法及划痕实验检测miR-145-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖与迁移作用;qRT-PCR法及Wstern blot法检测miR-145-5p对TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路及凋亡相关基因caspase3、TNF-α、Bax、Bcl-2表达的影响;qRT-PCR及Wstern blot法检测YSTLD含药血清对miR-145-5p、TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路及凋亡相关基因caspase3、TNF-α、Bax、Bcl-2表达的影响。结果miRNA基因芯片检测发现YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后存在35种miRNA表达水平与对照组存在显著差异,其中以miR-145-5p差异最为显著,同时qRT-PCR验证发现YSTLD处理的PC-3细胞中的miR-145-5p水平显著高于DMSO对照组(P<0.05)。慢病毒转染miR-145-5p入前列腺癌PC-3细胞后,发现miR-145-5p能抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖与迁移。过表达miR-145-5p可上调前列腺癌PC-3细胞caspase3、TNF-α及Bax mRNA表达水平,下调p38 MAPK、p65 NF-κB及Bcl-2的mRNA表达水平(P<0.05),同时上调前列腺癌PC-3细胞caspase3蛋白表达水平,下调TLR4、p38 MAPK、p65 NF-κB的蛋白表达水平(P<0.05);YSTLD含药血清在干预前列腺癌PC-3细胞后,可上调前列腺癌PC-3细胞caspase3、TNF-α及Bax mRNA表达水平,下调p38 MAPK、p65 NF-κB、Bcl-2、TRAF1的mRNA表达水平(P<0.05),同时上调前列腺癌PC-3细胞caspase3蛋白表达水平,下调TLR4、p38 MARK、p65 NF-κB、TRAF1的蛋白表达水平(P<0.05)。结论YSTLD可通过上调miR-145-5p的表达水平,抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路促进前列腺癌PC-3细胞凋亡,这可能是YSTLD抗前列腺癌的重要机制。 展开更多
关键词 前列腺癌 益肾通癃汤 基因芯片技术 mir-145-5p TLR4/p38 MApK/NF-κB信号通路
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miR-145-5p通过靶向RAD18调控结直肠癌细胞的增殖与NK细胞的细胞毒作用
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作者 李丽 姚红亮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期681-688,共8页
目的:探索RAD18影响结直肠癌细胞增殖及调节NK细胞对结直肠细胞的杀伤作用及其可能的机制。方法:采用生物信息学技术分析结直肠癌组织中RAD18和miR-145-5p的表达及两者之间的调控关系、分析RAD18富集通路。采用qPCR法验证RAD18和miR-145... 目的:探索RAD18影响结直肠癌细胞增殖及调节NK细胞对结直肠细胞的杀伤作用及其可能的机制。方法:采用生物信息学技术分析结直肠癌组织中RAD18和miR-145-5p的表达及两者之间的调控关系、分析RAD18富集通路。采用qPCR法验证RAD18和miR-145-5p在结直肠癌细胞中的表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-145-5p与RAD18的调控关系。按转染物的不同将SW480、HCT-15细胞分为将si-RAD18组、si-NC组,另向SW480细胞分别转染inhibitor-NC+si-NC、miR-145-5p inhibitor+si-NC或miR-145-5p inhibitor+si-RAD18,采用CCK-8法、克隆形成实验分别检测敲降miR-145-5p和/或RAD18对细胞增殖、克隆形成的影响;将各组细胞分别与经IL-2激活的NK92细胞共培养,采用乳酸脱氢酶释放法、ELISA和免疫荧光染色法分别检测NK细胞的细胞毒性、细胞因子分泌及细胞表面穿孔素和颗粒酶B表达的影响。结果:RAD18在结直肠癌组织和细胞中呈高表达(均P<0.01)。敲降RAD18可以抑制结直肠癌细胞增殖能力(P<0.05)和促进NK细胞活力、细胞毒性、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF分泌及穿孔素和颗粒酶B的表达(均P<0.05)。双荧光素酶报告实验验证了RAD18-3’UTR与miR-145-5p的结合关系,miR-145-5p在结直肠癌组织和细胞中低表达(P<0.05或P<0.01)。miR-145-5p可以靶向下调RAD18的表达(P<0.05),过表达RAD18可以逆转miR-145-5p过表达对NK细胞杀伤效应的促进作用(均P<0.05)。结论:miR-145-5p可靶向下调RAD18的表达,miR-145-5p/RAD18轴能够影响结直肠癌细胞的增殖和NK细胞对其的细胞毒作用。 展开更多
关键词 结直肠癌 mir-145-5p RAD18 NK细胞 SW480细胞 HCT-15细胞
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