产前超声联合血清miR-148b、miR-375检测在胎儿先天性心脏病诊断中的应用价值

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作者 白子彤 朱毓 《河北医药》 CAS 2024年第15期2308-2311,共4页

目的 探讨微小RNA(miR)-148b、miR-375在胎儿先天性心脏病孕妇血清中的水平,及其联合产前超声在胎儿先天性心脏病诊断中的价值。方法 收集2019年1月至2023年1月进行产前筛查的疑似胎儿先天性心脏病的106例孕妇作为研究对象,根据产后随... 目的 探讨微小RNA(miR)-148b、miR-375在胎儿先天性心脏病孕妇血清中的水平,及其联合产前超声在胎儿先天性心脏病诊断中的价值。方法 收集2019年1月至2023年1月进行产前筛查的疑似胎儿先天性心脏病的106例孕妇作为研究对象,根据产后随访结果将其分为病例组(先天性心脏病,n=80)和对照组(均无先天性心脏病,n=26)。比较2组血清miR-148b、miR-375水平;ROC曲线分析血清miR-148b、miR-375对胎儿先天性心脏病的诊断效能;四表格法分析产前超声联合血清miR-148b、miR-375水平对胎儿先天性心脏病的诊断效能。结果 与对照组比较,病例组血清miR-148b水平显著降低,血清miR-375水平显著升高(P<0.05)。产前超声联合血清miR-148b、miR-375诊断胎儿先天性心脏病的准确率为93.40%,敏感性为92.50%,特异性为96.15%。其中,三项联合诊断的敏感性高于血清miR-148b、miR-375单独诊断(P<0.05),三项联合诊断的准确率和特异性高于产前超声、血清miR-148b、miR-375单独诊断(P<0.05)。结论 胎儿先天性心脏病的孕妇血清miR-148b水平显著降低,血清miR-375水平显著升高,产前超声联合血清miR-148b、miR-375对胎儿先天性心脏病具有较高的诊断价值。 展开更多

关键词 mir-148b mir-375 产前超声 胎儿先天性心脏病

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miR-148b-3p调控瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞增殖的机制研究 被引量：3

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作者 李心怡 李茜 +1 位作者 张伟 李小静 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第9期1534-1539,共6页

目的分析miR-148b-3p对瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞增殖的影响。方法通过Real-time PCR分析人瘢痕疙瘩来源成纤维细胞(HKF)和正常人成纤维细胞(NFs)中miR-148b-3p和SPARC的表达水平。通过Western blot检测细胞中富含半胱氨酸的酸性分泌蛋... 目的分析miR-148b-3p对瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞增殖的影响。方法通过Real-time PCR分析人瘢痕疙瘩来源成纤维细胞(HKF)和正常人成纤维细胞(NFs)中miR-148b-3p和SPARC的表达水平。通过Western blot检测细胞中富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)蛋白表达水平。利用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法和平板克隆形成分析miR-148b-3p和SPARC对HKF增殖的影响。使用在线分析软件预测miR-148b-3p的靶基因,随后构建荧光素酶报告基因质粒,通过荧光素酶报告基因法分析miR-148b-3p与靶基因的靶向结合位点。结果miR-148b-3p在HKF中低表达,SPARC在HKF中高表达。在HKF细胞中转染miR-148b-3p能够下调SPARC的表达,并抑制细胞增殖。在线分析软件预测miR-148b-3p能够靶向结合SPARC的3′-UTR;双荧光素酶报告基因的结果进一步证实miR-148b-3p能够靶向作用于SPARC的3′-UTR。在转染miR-148b-3p的HKF中再转染SPARC真核表达质粒,能够抵消miR-148b-3p的作用,恢复细胞增殖能力。结论miR-148b-3p通过靶向作用于SPARC的3′-UTR,抑制其表达,抑制HKF增殖。 展开更多

关键词 病理性瘢痕 mir-148b-3p 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白 增殖

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miR-148b-3p通过调节脂代谢基因对肝癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量：2

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作者 王迪迪 黄玉荣 +3 位作者 王建君 左常茜 何磊 杨杰 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第10期1129-1136,1144,共9页

目的探讨miR-148b-3p通过调节脂代谢基因对肝癌细胞增殖、转移及侵袭能力等恶性生物学行为的影响。方法通过癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库寻找miR-148b-3p、肝癌及脂代谢三者的交集基因,筛选miR-148b-3p治疗肝癌的潜在靶点基因;采用... 目的探讨miR-148b-3p通过调节脂代谢基因对肝癌细胞增殖、转移及侵袭能力等恶性生物学行为的影响。方法通过癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库寻找miR-148b-3p、肝癌及脂代谢三者的交集基因,筛选miR-148b-3p治疗肝癌的潜在靶点基因;采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-148b-3p在正常肝脏细胞LO2和肝癌细胞Huh7、Hep1中的表达水平,选取miR-148b-3p表达量最低的细胞Huh7作为研究对象;Huh7肝癌细胞分为对照组(转染miR-148b-3p NC)和实验组(转染miR-148b-3p mimics),CCK8实验和克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、以及油红O染色分别检测两组肝癌细胞的增值、迁移、侵袭能力及脂滴形成情况,采用RT-PCR和Western blot检测交集基因及脂肪生成指标基因FASN、PPAR-γ及SCD1的mRNA和蛋白表达水平。结果miR-148b-3p在Huh7细胞中mRNA相对表达量显著低于Hep1细胞(P<0.01)和LO2细胞(P<0.001);与对照组相比,实验组Huh7细胞的增殖受到抑制(P<0.05)、转移能力减弱(P<0.05)、侵袭能力降低(P<0.05),细胞脂滴形成明显减少(P<0.01);交集基因PRKAG2、INSIG2的mRNA水平的表达量明显升高(P<0.01、P<0.01)、CHD9表达量明显降低(P<0.001),脂代谢FASN、PPAR-γ、SCD1基因的mRNA水平明显降低(P<0.001、P<0.001、P<0.01);交集基因PRKAG2、INSIG2蛋白水平的表达量升高(P<0.01、P<0.05)、CHD9表达量降低(P<0.05),脂代谢FASN、PPAR-γ、SCD1基因蛋白水平的表达量均明显降低(P<0.01)。结论过表达miR-148b-3p可抑制肝癌细胞的增殖、转移和侵袭能力,其机制可能与miR-148b-3p抑制了肝癌细胞的脂代谢有关。 展开更多

关键词 肝癌 脂代谢 mir-148b-3p 增殖 迁移 侵袭

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心肌梗死患者血清miR-148b表达量与心肌损伤、心肌纤维化的相关性分析 被引量：5

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作者 王芳 丁小云 +5 位作者 党群 吕果 刘振国 李红军 耿李科 郭宁 《海南医学院学报》 CAS 2017年第14期1885-1888,共4页

目的:研究心肌梗死患者血清中miR-148b表达量与心肌损伤、心肌纤维化的相关性。方法:选择2013年3月~2016年10月期间在汉中市中心医院诊断为急性心肌梗死(AMI)的130例患者以及体检的100例健康者,分别作为AMI组和对照组,采集血清并采用荧... 目的:研究心肌梗死患者血清中miR-148b表达量与心肌损伤、心肌纤维化的相关性。方法:选择2013年3月~2016年10月期间在汉中市中心医院诊断为急性心肌梗死(AMI)的130例患者以及体检的100例健康者,分别作为AMI组和对照组,采集血清并采用荧光定量PCR试剂盒检测miR-148b的表达量,采用酶联免疫吸附试剂盒检测心肌损伤标志物、心肌纤维化标志物的含量。结果:AMI组患者血清中miR-148b的表达量以及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(cTnT)、心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、CTX-I、转化生长因子(TGF)-β1、GDF-15的含量显著高于对照组(P<0.05);miR-148b高表达AMI患者血清中CKMB、cTnT、H-FABP、PICP、PⅢNP、CTX-I、TGF-β1、GDF-15的含量显著高于miR-148b低表达的AMI患者(P<0.05)。结论:心肌梗死患者血清中高表达的miR-148b对心肌损伤、心肌纤维化具有促进作用。 展开更多

关键词 心肌梗死 mir-148b 心肌损伤 心肌纤维化

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miR-148b基因对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及免疫抑制因子的影响研究 被引量：3

5

作者 汤夏莲 陈平 +2 位作者 唐义平 张敏 曹晓红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1794-1797,1803,共5页

目的:探讨miR-148b基因对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及免疫抑制因子TGF-β1表达的影响。方法:小鼠肾小球系膜细胞(MMCs)分三组处理,即低糖+miR-148b scramble组(LG组)、高糖+miR-148b scramble组(HG组)和高糖+miR-148b inhibi... 目的:探讨miR-148b基因对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及免疫抑制因子TGF-β1表达的影响。方法:小鼠肾小球系膜细胞(MMCs)分三组处理,即低糖+miR-148b scramble组(LG组)、高糖+miR-148b scramble组(HG组)和高糖+miR-148b inhibitor组(HG+miR-148b inhibitor组),其中miR-148b scramble和miR-148b inhibitor的转染参照脂质体LipofectamineTM2000转染说明进行瞬时转染,收集转染48 h的细胞,通过qRT-PCR检测各组细胞中miR-148b的mRNA表达;CCK8及流式细胞仪分别检测细胞活力及凋亡率;Western blot检测免疫抑制因子TGF-β1及NF-κB信号通路p-IκBα及下游相关基因cyclin D1和Bax的蛋白表达。结果:高糖可上调miR-148b的表达,转染miR-148b inhibitor后miR-148b的表达明显降低;与LG组比较,HG组细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著升高,TGF-β1、p-IκBα、cyclin D1和Bax的蛋白表达均明显升高,与HG组比较,HG+miR-148b inhibitor组细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著降低,TGF-β1、p-IκBα、cyclin D1和Bax的蛋白表达均明显降低(P<0. 05)。结论:抑制肾小球系膜细胞miR-148b基因表达可抑制高糖诱导的细胞活力、凋亡率及免疫抑制因子TGF-β1表达的增加,机制可能与下调NF-κB信号通路有关。 展开更多

关键词 mir-148b基因 肾小球系膜细胞 高糖 凋亡 免疫

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SLE患者外周血单个核细胞中miR-148b、miR-152和靶基因dnmt1的表达及其临床意义 被引量：4

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作者 杜明 陶李 +2 位作者 王昱斌 李春莳 李光迪 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期966-971,983,共7页

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-148b、miR-152和其靶基因dnmt1的表达水平在发病机制中的作用以及与SLE实验室相关指标、临床疾病活动度的之间的关系。方法采用实时荧光定量PCR(qu... 目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-148b、miR-152和其靶基因dnmt1的表达水平在发病机制中的作用以及与SLE实验室相关指标、临床疾病活动度的之间的关系。方法采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,qPCR)方法检测74例SLE患者和44例健康者的PBMCs中miR-148b、miR-152、dnmt1的表达水平,统计学分析其与SLE疾病活动度及SLE相关检验指标的关系。结果 miR-148b、miR-152在SLE患者PBMCs中的表达水平显著高于健康对照(P<0.05),dnmt1在SLE患者PBMCs中的表达水平显著低于健康对照(P<0.05)。除miR-148b在低活动组与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05)外,miR-148b、miR-152和dnmt1在其他各组中的表达差异均有统计学意义。miR-152与ESR正相关(r=0.443,P=0.027);dnmt1与ANA抗体(r=-0.576,P=0.001)及SLEDAI评分均为负相关(r=-0.408,P=0.038)。结论 miR-148b、miR-152和dnmt1在SLE的发病机制中扮演着重要角色,可能作为疾病活动的参考指标,有助于指导疾病治疗和预后评估,并为SLE的治疗带来更多靶点。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 mir-148b mir-152 DNMT1

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miR-148b在非小细胞肺癌患者血清中的表达水平及其预后价值分析 被引量：5

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作者 吴洲清 毛明 陈家宽 《临床肺科杂志》 2019年第1期83-86,共4页

目的探讨miR-148b在非小细胞肺癌患者血清中的表达水平及其预后价值。方法选取本院确诊的非小细胞肺癌患者196例,同期选择门诊健康体检者48例作为对照组,采用逆转录实时荧光定量法测定血清miR-148b mRNA蛋白的表达。结果肺癌组miR-148b ... 目的探讨miR-148b在非小细胞肺癌患者血清中的表达水平及其预后价值。方法选取本院确诊的非小细胞肺癌患者196例,同期选择门诊健康体检者48例作为对照组,采用逆转录实时荧光定量法测定血清miR-148b mRNA蛋白的表达。结果肺癌组miR-148b mRNA表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);肺癌组miR-148b mRNA阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05); miR-148b mRNA的表达率与年龄、肿瘤最大径、肿瘤数目,相关性不明显,差异无统计学意义(P> 0. 05);与病理学分级、TNM分期、淋巴血管间隙浸润、淋巴结转移、复发相关明显,且病理学分期越高、TNM分期越高、淋巴血管间隙浸润、淋巴结转移和复发患者的miR-148b mRNA阳性表达率越低,差异有统计学意义(P <0. 05); miR-148b表达阳性组3年生存率及生存期均明显高于miR-148b阴性组,差异有统计学意义(p <0. 05)。结论 miR-148b在非小细胞肺癌患者血清中的表达量低于健康人群,miR-148b在非小细胞肺癌的发生发展过程中起抑制作用; miR-148b阳性表达者可能获得较好的预后。 展开更多

关键词 mir-148b 非小细胞肺癌 表达 预后

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miR-148b参与调控弥漫性大B细胞淋巴瘤药物敏感性的机制 被引量：2

8

作者 林晓骥 方玮玥 +6 位作者 董玉青 孙妮 苏童 杨向绸 郭文坚 何牧卿 姚荣欣 《温州医科大学学报》 CAS 2020年第1期12-18,共7页

目的:探讨mi R-148b是否通过调控Ezrin来调节弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞的药物敏感性。方法:诱导建立人DLBCL耐药细胞株CRL2631/CHOP,实时荧光定量PCR检测CRL2631细胞和CRL2631/CHOP细胞的miR-148b表达,Western blot检测2组细胞的E... 目的:探讨mi R-148b是否通过调控Ezrin来调节弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞的药物敏感性。方法:诱导建立人DLBCL耐药细胞株CRL2631/CHOP,实时荧光定量PCR检测CRL2631细胞和CRL2631/CHOP细胞的miR-148b表达,Western blot检测2组细胞的Ezrin蛋白表达;采用双荧光素酶实验检测miR-148b与Ezrin的靶向结合情况;采用miRNA模拟/干扰技术和CCK-8方法检测CRL2631/CHOP细胞和CRL2631细胞对CHOP的敏感性。结果:CRL2631/CHOP细胞mi R-148b表达水平显著低于CRL2631细胞(P=0.001);CRL2631/CHOP细胞Ezrin蛋白表达水平显著高于CRL2631细胞(P<0.05);双荧光素酶实验结果显示,Ezrin是miR-148b的直接靶基因;转染mi R-148b mimic后,CRL2631/CHOP细胞的Ezrin和MDR-1蛋白表达量下降(P<0.05),而CRL2631/CHOP细胞对CHOP敏感性增加(P<0.05);转染miR-148b inhibitor后,CRL2631细胞的Ezrin和MDR-1蛋白表达量上升(P<0.05),而CRL2631细胞对CHOP敏感性下降(P<0.05)。结论:mi R-148b通过调控Ezrin影响DLBCL细胞对CHOP的敏感性。 展开更多

关键词 弥漫性大b细胞淋巴瘤 mir-148b EZRIN CHOP 药物敏感性

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miR-148b在急性髓系白血病中的表达及与临床特征的关系 被引量：2

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作者 王晓雪 莫文斌 +1 位作者 王玥 李艳 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第7期1078-1082,共5页

目的:检测miR-148b在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中的表达水平,分析其与临床特征的关系。方法:收集急性髓系白血病患者40例,非恶性血液病患者(对照组)20例,提取骨髓有核细胞,RT-PCR检测miR-148b的表达水平,分析其表达... 目的:检测miR-148b在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中的表达水平,分析其与临床特征的关系。方法:收集急性髓系白血病患者40例,非恶性血液病患者(对照组)20例,提取骨髓有核细胞,RT-PCR检测miR-148b的表达水平,分析其表达水平与临床特征的关系。结果:miR-148b在急性髓系白血病患者较对照组表达明显下降。miR-148b相对低表达组的患者较相对高表达组患者外周血白细胞计数及骨髓原始细胞比例较高。疗效比较中,完全缓解率及总生存率比较两组未见明显差异,但是miR-148b高表达组较低表达组复发率低(P=0.038),无复发生存两组差异有统计学意义(P=0.029)。结论:miR-148b在急性髓系白血病患者中的表达水平较对照组显著降低。miR-148b的表达水平与AML临床特征具有一定的关联,对疾病复发具有重要意义。 展开更多

关键词 mir-148b 急性髓系白血病 预后

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miR-148b在肺腺癌中的表达及其功能分析 被引量：1

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作者 方喜生 刘国龙 +1 位作者 刘霞 吕琳 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2014年第10期881-885,共5页

目的探讨微小RNA-148b(miR-148b)在肺腺癌组织和细胞株中的表达及临床意义。方法采用实时定量PCR检测13例肺腺癌及癌旁组织中miR-148b的表达,并检测其在肺腺癌细胞株H1437、H1975、A549、PC14/B和正常人肺上皮细胞株HBE中的表达,选取肺... 目的探讨微小RNA-148b(miR-148b)在肺腺癌组织和细胞株中的表达及临床意义。方法采用实时定量PCR检测13例肺腺癌及癌旁组织中miR-148b的表达,并检测其在肺腺癌细胞株H1437、H1975、A549、PC14/B和正常人肺上皮细胞株HBE中的表达,选取肺腺癌细胞株miR-148b表达水平最低者分别转染miR-148b模拟物(mimics)和miR-148b control。通过MTT检测、低密度细胞集落形成实验、Transwell实验检测miR-148b对细胞增殖、集落形成和侵袭能力的影响。结果miR-148b在肺腺癌和癌旁组织中的相对表达量分别为0.61±0.42和0.91±0.32(P<0.05);与正常肺上皮细胞株HBE(相对表达量设为1.00)比较,4种肺腺癌细胞株H1437、H1975、A549、PC14/B中miR-148b的表达量分别为0.42±0.08、0.38±0.02、0.29±0.03和0.21±0.04(P<0.05),选取PC14/B细胞株进行后续实验。MTT检测显示,实验第3天,转染miR-148b mimics的PC14/B细胞吸光值明显低于转染miR-148b control组(P<0.05);低密度细胞集落形成实验中,与转染了miR-148b control的PC14/B细胞(相对克隆数设为100)相比,转染miR-148b mimics的PC14/B细胞的相对克隆数为47±8,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell实验显示,转染miR-148b mimics后穿过基底膜的相对PC14/B细胞数为82±22,与miR-148b control组(200±34)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-148b在肺腺癌组织和细胞中表达下调,且可抑制肺腺癌PC14/B细胞株的增殖、集落形成和侵袭能力。 展开更多

关键词 微小RNA 肺腺癌 mir-148b 增殖 侵袭

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多组学筛选及验证lncRNA CCAT1通过调节miR-148b-3p和FGF9促进结直肠癌发生及发展机制研究 被引量：3

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作者 才层 郑超 毛睿 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第9期1034-1043,共10页

目的通过生物信息学及分子生物学探讨lncRNA CCAT1对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖的影响,并进一步探讨其机制。方法应用R软件和Bioconductor软件包对9例CRC样本和9例正常样本进行差异表达基因(DEGs)分析,筛选差异表达lncRNA... 目的通过生物信息学及分子生物学探讨lncRNA CCAT1对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖的影响,并进一步探讨其机制。方法应用R软件和Bioconductor软件包对9例CRC样本和9例正常样本进行差异表达基因(DEGs)分析,筛选差异表达lncRNA和mRNA。进一步选择30例CRC组织及匹配的癌旁组织(2016年1月至2019年12月从新疆医科大学第一附属医院CRC外科手术中获得的标本),然后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CRC组织及CRC细胞中CCAT1、miR-148b-3p、FGF9的表达,采用蛋白免疫印迹试验(Western blotting)检测CRC细胞中FGF9的表达情况。细胞转染后,用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。采用Transwell迁移实验检测各处理组细胞迁移情况。通过双荧光素酶报告基因检测验证CCAT1与miR-148b-3p、miR-148b-3p与FGF9的靶向关系。结果与癌旁组织及人正常结直肠上皮细胞相比,CCAT1在CRC组织和细胞系中高表达且差异有统计学意义(P<0.05)。进一步分析发现,高表达CCAT1的CRC患者与低表达CCAT1的患者相比,肿瘤较大,TNM分期较晚,总生存率较低。生物学功能测定结果表明,CCAT1具有促进细胞增殖的作用。我们还发现miR-148b-3p可以作为CCAT1在CRC细胞中的作用靶点,miR-148b-3p的过表达可以有效抑制由CCAT1敲低诱导的CRC进程。此外,我们发现FGF9作为miR-148b-3p的靶点在CRC中发挥致癌作用。结论CCAT1可通过调控miR-148b-3p及其靶蛋白FGF9促进CRC细胞增殖,这将为CRC的预防及治疗提供一个有效的治疗靶点及理论依据。 展开更多

关键词 结直肠癌 CCAT1 mir-148b-5p FGF9

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miR-148b参与心肌梗死后心脏纤维化的作用及机制 被引量：1

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作者 赵娜 李娜 +4 位作者 刘小军 徐姣姣 夏东雨 牛小麟 刘仲伟 《心脏杂志》 CAS 2017年第2期149-153,共5页

目的探讨miR-148b参与大鼠心肌梗死后心脏纤维化的作用及可能机制。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支方法制作大鼠心肌梗死模型,RT-PCR法评价大鼠心脏miR-148b表达水平;应用生物信息学方法预测miR-148b靶基因;采用Western blot方法评... 目的探讨miR-148b参与大鼠心肌梗死后心脏纤维化的作用及可能机制。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支方法制作大鼠心肌梗死模型,RT-PCR法评价大鼠心脏miR-148b表达水平;应用生物信息学方法预测miR-148b靶基因;采用Western blot方法评价大鼠心脏同源性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homologue,PTEN)及α-平滑肌蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达水平;四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测心脏成纤维细胞增殖能力;应用天狼猩红染色评价心脏纤维化病理改变。结果大鼠心肌梗死组,梗死周边区纤维化程度显著增加,miR-148b表达显著上调(P<0.01);miR-148b与预测靶基因PTEN mRNA有结合位点;大鼠心肌梗死组,梗死周边区PTEN表达显著下调(P<0.01);在心脏成纤维细胞中过表达miR-148b,PTEN的蛋白表达水平显著下调(P<0.01),α-SMA蛋白表达水平显著上调(P<0.01),细胞增殖能力显著增强(P<0.05);在Ang II诱导心肌纤维化细胞模型中,抑制miR-148b,PTEN蛋白表达水平显著上调(P<0.05),α-SMA蛋白表达水平显著下调(P<0.01),心脏成纤维细胞增殖显著减少(P<0.01)。结论 miR-148b通过PTEN参与心肌梗死后心脏纤维化作用。 展开更多

关键词 心肌梗死 心脏纤维化 mir-148b PTEN

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广西巴马小型猪miR-148b慢病毒制备及靶基因通路预测分析 被引量：6

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作者 张名媛 郭晓萍 +4 位作者 孙晴超 司景磊 兰干球 郭亚芬 蒋钦杨 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1596-1604,共9页

【目的】构建广西巴马小型猪miR-148b慢病毒表达载体并对其靶基因进行预测及相关通路分析,为揭示miR-148b的作用机制打下基础。【方法】以广西巴马小型猪血液基因组DNA为模板,扩增miR-148b的前体及部分侧翼序列,使用T4连接酶将目的片段... 【目的】构建广西巴马小型猪miR-148b慢病毒表达载体并对其靶基因进行预测及相关通路分析,为揭示miR-148b的作用机制打下基础。【方法】以广西巴马小型猪血液基因组DNA为模板,扩增miR-148b的前体及部分侧翼序列,使用T4连接酶将目的片段连接至pLV-CMV-MCS-EF1载体上,构建获得pLV-miR-148b慢病毒表达载体;以pLVmiR-148b慢病毒表达载体转染293T细胞48 h后进行表达验证;利用miRDB、miRWalk 2.0和TargetScan 7.2三大数据库预测分析广西巴马小型猪miR-148b的靶基因,并以MirPath v.3分析miR-148b靶基因相关通路。【结果】广西巴马小型猪miR-148b片段大小为385 bp,与miRBase 21.0网站上已发布猪miR-148b成熟序列(前体和侧翼序列)的同源性达100%。构建获得的pLV-miR-148b慢病毒表达载体能在293T细胞中成功表达,且相对表达量极显著高于pLV-GFP慢病毒空载质粒转染组(P<0.01)。数据库预测分析得到18个广西巴马小型猪miR-148b的靶基因,分别为CLOCK(时间昼夜调控因子)、MIER1(转录调控因子)、MECP2(甲基化CpG结合蛋白)、ZNF704(锌指蛋白)、SPTY2D1(SPT2染色质蛋白)、QKI(RNA结合蛋白)、ZBTB20(锌指蛋白)、MGAT4A(钠/磷酸转运蛋白)、UHMK1(编码蛋白激酶)、PIK3C2A(磷酸肌醇-3-激酶2α肽)、C6orf62(6号染色体开放阅读框62抗体)、HECW2(E3泛素蛋白连接酶)、MAP1B(微管相关蛋白)、NHS(NHS肌动蛋白调节因子)、B4GALT6(β-1,4-半乳糖基转移酶)、ATP2A2(肌浆ATP酶/内质网Ca2+转运酶)、AP4E1(蛋白复合物接头分子)和BBX(锌指蛋白);且发现有11条靶基因相关通路,其中与疾病相关的通路有脂肪酸合成通路、细胞外基质受体相互作用通路、癌症的蛋白聚糖通路、神经胶质瘤通路、癌症的小分子核糖核酸通路、肾细胞癌通路、N-聚糖生物合成通路和致心律失常性右室心肌病通路。【结论】广西巴马小型猪miR-148b慢病毒表达载体能在293T细胞中成功表达,miR-148b存在18个靶基因和11条相关通路,且主要在脂肪酸合成、N-聚糖生物合成及致心律失常性右室心肌病等相关疾病通路上发挥作用。 展开更多

关键词 广西巴马小型猪 mir-148b 慢病毒载体 靶基因 相关通路预测

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MiR-148b-3p在肺腺癌中的表达及其与患者预后的相关性 被引量：4

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作者 黄泽凯 李少雷 +2 位作者 马媛媛 吴楠 杨跃 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期306-311,共6页

背景与目的 MiR-148b-3p是一种重要的微小RNA,已经被报道与多种癌症密切相关,但其在肺腺癌中的作用仍不清楚。本研究的目的是检测miR-148b-3p在肺腺癌中的表达水平,并分析其与临床病理特征及患者预后的相关性。方法收集2011年1月-2012... 背景与目的 MiR-148b-3p是一种重要的微小RNA,已经被报道与多种癌症密切相关,但其在肺腺癌中的作用仍不清楚。本研究的目的是检测miR-148b-3p在肺腺癌中的表达水平,并分析其与临床病理特征及患者预后的相关性。方法收集2011年1月-2012年12月在本科室经手术切除的肺腺癌患者的肿瘤标本123例,利用实时荧光定量PCR方法检测miR-148b-3p的表达量,分析其与患者临床病理特征的相关性。利用多因素Cox比例风险模型分析影响患者总生存的独立预测因子。利用Kaplan-Meier生存分析方法估计miR-148b-3p高表达组和低表达组患者的总生存期,并使用Log-rank检验方法进行显著性检验。结果在123例肺腺癌患者中,有71例高表达miR-148b-3p,52例低表达。miR-148b-3p与肿瘤的分化程度(P=0.001)、肿瘤大小(P=0.007)显著相关,而与年龄、性别、吸烟史、饮酒史、脉管癌栓、胸膜侵犯、淋巴结转移、远处转移和术后治疗不存在统计学显著的相关性。多因素Cox比例风险模型分析显示肿瘤大小(P=0.032)、淋巴结转移(P=0.005)和miR-148b-3p表达量(P=0.047)是影响患者总生存的独立预测因子。Kaplan-Meier生存分析显示miR-148b-3p高表达组患者的总生存显著优于miR-148b-3p低表达组患者(P=0.010)。结论 MiR-148b-3p在肺腺癌中与肿瘤的分化程度、肿瘤大小显著相关,并且是影响患者总生存的独立预测因子。MiR-148b-3p高表达组患者的总生存显著优于低表达组患者。因此,miR-148b-3p可能成为新的肺腺癌治疗靶标或预后生物标志物。 展开更多

关键词 mir-148b-3p 肺肿瘤 预后

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LncRNA人浆细胞瘤变体易位1介导miR-148b调控脂多糖诱导巨噬细胞自噬的机制研究 被引量：4

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作者 曹蔚堂 王文欣 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第7期698-705,共8页

目的目前LncRNA人浆细胞瘤变体易位1(LncRNA-PVT1)在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞自噬的相关机制尚不清楚。文章旨在探讨LncRNA-PVT1介导miR-148b对LPS诱导的巨噬细胞自噬的相关机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7,LPS刺激并分别转... 目的目前LncRNA人浆细胞瘤变体易位1(LncRNA-PVT1)在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞自噬的相关机制尚不清楚。文章旨在探讨LncRNA-PVT1介导miR-148b对LPS诱导的巨噬细胞自噬的相关机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7,LPS刺激并分别转染PVT1 siRNA、miR-148b mimics、PVT1,分为LPS组(细胞不进行转染)、LPS+si-NC组(转染PVT1质粒阴性对照)、LPS+PVT1 siRNA转染组(转染PVT1 siRNA质粒)、LPS+miR-NC组(转染miR-148b mimics阴性对照)、LPS+miR-148b mimics组(转染miR-148b mimics)、LPS+PVT1-NC+miR-148b mimics组(转染PVT1阴性对照和miR-148b mimics)、LPS+PVT1+miR-148b mimics组(转染PVT1和miR-148b mimics)。同时设置空白组,空白组RAW264.7细胞既不进行LPS处理也不进行转染。采用qRT-PCR检测细胞中LncRNA-PVT1、miR-148b的表达;CCK-8检测细胞活力;免疫荧光染色检测细胞中LC3的表达;ELISA检测细胞中炎症因子水平;双荧光素酶报告系统分析PVT1与miR-148b的靶向关系;蛋白免疫印迹法检测细胞中自噬蛋白表达。结果与空白组比较,LPS组PVT1 mRNA、LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.05),miR-148b、p62表达显著降低(P<0.05)。与LPS组、LPS+si-NC组比较,LPS+PVT1 siRNA组PVT1 mRNA、p62、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.05),miR-148b、LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著升高(P<0.05)。CCK-8实验结果显示,与空白组细胞活力(100.00±0.00)比较,LPS组(73.46±3.25)显著降低(P<0.05);与LPS组细胞活力(73.46±3.25)、LPS+si-NC组(74.15±4.42)比较,LPS+PVT1 siRNA组(90.38±2.16)显著升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果表明,PVT1与miR-148b存在靶向关系。与LPS组、LPS+miR-NC组比较,LPS+miR-148b mimics组LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著上调(P<0.05),p62、TNF-α、IL-6水平显著下调(P<0.05);与LPS+miR-148b mimics组、LPS+PVT1-NC+miR-148b mimics组比较,LPS+PVT1+miR-148b mimics组细胞LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著下调(P<0.05),p62、TNF-α、IL-6水平显著上调(P<0.05)。结论脓毒症中LncRNA-PVT1靶向miR-148b抑制巨噬细胞自噬,PVT1可能是脓毒症治疗的潜在研究靶点。 展开更多

关键词 脓毒症 LncRNA人浆细胞瘤变体易位1 mir-148b 脂多糖 巨噬细胞 自噬

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靶向激活miR-148b-3p对缺血性脑卒中小鼠脑功能的影响及机制 被引量：1

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作者 李明 刘勇 +4 位作者 董海 王彪 阎登富 刘磊 何仲春 《成都医学院学报》 CAS 2020年第4期432-437,共6页

目的观察激活miR-148b-3p对小鼠缺血性脑卒中的影响,探讨硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴在该影响中的作用。方法将50只健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)、栓塞模型组(M... 目的观察激活miR-148b-3p对小鼠缺血性脑卒中的影响,探讨硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴在该影响中的作用。方法将50只健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)、栓塞模型组(MCAO组)、NLRP3抑制剂组(MCC950组)、miR阴性对照转染组(NC agomiR组)、miR-148b-3p激动剂转染组(miR-148b-3p agomiR组),每组10只。假手术组仅做手术损伤;其他各组小鼠采用线栓致大脑中动脉阻塞(MCAO)法建立小鼠缺血性脑卒中模型,使小鼠接受脑缺血1 h和再灌注72 h。MCC950组于手术后即刻腹腔注射50 mg/kg体重的NLRP3抑制剂MCC950。Sham组和MCAO组于手术后即刻腹腔注射同等容积的磷酸缓冲盐溶液(PBS)。NC agomiR组、miR-148b-3p agomiR组在手术前60 min通过侧脑室注射30 pmol/g体重的agomiR阴性对照品或miR-148b-3p agomiR。再灌注72 h后评估小鼠脑功能缺陷程度,氯化三苯基四氮唑染色法检测脑梗死灶体积百分数,RT-PCR法检测脑组织miR-148b-3p表达量,蛋白质印迹技术检测脑组织TXNIP、NLRP3蛋白表达量。另外,在小鼠神经瘤母细胞N2a细胞系上,采用双荧光素酶实验验证miR-148b-3p对TXNIP mRNA的靶向调节作用。结果与Sham组比较,MCAO组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显增大,缺血区脑组织miR-148b-3p表达量减少,TXNIP、NLRP3蛋白表达量增多;与miR转染阴性对照组比较,miR-148b-3p激动剂转染组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显降低,缺血区脑组织miR-148b-3p表达量增多,TXNIP、NLRP3蛋白表达量减少;与MCAO组比较,MCC950组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显降低。荧光素酶实验显示,TXNIP是miR-148b-3p的1个直接调节靶。结论内源性miR-148b-3p的表达下调可能与小鼠缺血性脑卒中发生相关;激活miR-148b-3p则对小鼠缺血性脑卒中有一定保护性作用,其机制与其抑制促炎性TXNIP/NLRP3信号轴有关。 展开更多

关键词 mir-148b-3p 缺血性脑卒中 硫氧还蛋白互作蛋白 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3

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慢性乙型肝炎患者血清miR-21和miR-148b水平变化及其预测肝组织炎症分级和纤维化分期价值探讨 被引量：3

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作者 罗珂 丁莉 刘美 《实用肝脏病杂志》 CAS 2022年第3期335-338,共4页

目的探讨应用血清miR-21和miR-148b水平预测慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织病理学病变的价值。方法2016年7月~2021年6月我院诊治的CHB患者134例,行快速肝穿刺活检,评估肝组织炎症活动度分级(G)和肝纤维化分期(S)。采用实时定量逆转录PCR... 目的探讨应用血清miR-21和miR-148b水平预测慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织病理学病变的价值。方法2016年7月~2021年6月我院诊治的CHB患者134例,行快速肝穿刺活检,评估肝组织炎症活动度分级(G)和肝纤维化分期(S)。采用实时定量逆转录PCR法检测血清miR-21和miR-148b水平。应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)评估血清miR-21和miR-148b水平评估CHB患者肝组织炎症分级和纤维化分期的效能。结果经肝组织检查,在134例CHB患者中,发现肝组织炎症活动度分级包括G1级23例、G2级39例、G3级47例和G4级25例,肝纤维化分期包括S1期31例、S2期46例、S3期28例和S4期29例;G1级、G2级、G3级和G4级血清miR-21水平分别为(1.1±0.2)、(1.5±0.3)、(1.8±0.4)和(2.2±0.6),血清miR-148b水平分别为(2.4±0.5)、(2.0±0.3)、(1.6±0.5)和(1.2±0.4),组间差异有统计学意义(P<0.05);S1期、S2期、S3期和S4期血清miR-21水平分别为(0.9±0.4)、(1.4±0.3)、(1.9±0.5)和(2.7±0.5),血清miR-148b水平分别为(2.8±0.7)、(1.9±0.4)、(1.4±0.4)和(0.9±0.2),组间差异有统计学意义(P<0.05);分别以血清miR-21=1.5和miR-148b=2.0为截断点,其联合评估肝组织炎症分级大于或等于G2的AUC为0.875,显著高于两项指标单独评估(分别为0.769和0.781,P<0.05),其灵敏度、特异度和准确度分别为87.0%、82.9%和83.6%;分别以血清miR-21=1.4和miR-148b=1.9为截断点,其联合评估肝纤维化分期大于或等于S2的AUC为0.898,显著高于两项指标单独评估(分别为0.782和0.770,P<0.05),其灵敏度、特异度和准确度分别为87.1%、73.8%和76.9%。结论利用CHB患者血清miR-21高水平和miR-148b低水平的特点可以用于评估肝组织炎症分级和肝纤维化分期,值得深入研究。 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 肝组织病理学 mir-21 mir-148b 预测

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miR-148b-3p通过靶向自噬相关基因14(ATG14)抑制急性髓系白血病细胞增殖与自噬 被引量：2

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作者 蒋雪坷 敬一佩 +6 位作者 雷力 彭美茜 肖巧玲 任俊 陶永红 黄军鹏 张伶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期881-890,共10页

目的探讨微小RNA-148b-3p(miR-148b-3p)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和自噬的影响及其机制。方法基于基因表达数据集(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA),采用生物信息学软件分析miR-148b-3p在AML细胞中的表达及其与患者临床预后的关系;实时... 目的探讨微小RNA-148b-3p(miR-148b-3p)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和自噬的影响及其机制。方法基于基因表达数据集(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA),采用生物信息学软件分析miR-148b-3p在AML细胞中的表达及其与患者临床预后的关系;实时荧光定量PCR检测AML细胞中miR-148b-3p表达。用脂质体法将miR-148b-3p模拟物(miR-148b-3p mimic)和miR-148b-3p抑制物(miR-148b-3p inhibitor)分别瞬时转入THP-1和NB4细胞,采用CCK-8法和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法检测细胞增殖,Western blot法检测B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62和自噬相关基因14(ATG14)蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-148b-3p对ATG14的靶向结合,回复实验观察miR-148b-3p/ATG14轴对AML细胞表型的影响。结果AML患者细胞低表达miR-148b-3p,miR-148b-3p低表达的AML患者总体生存率较对照组显著降低;过表达miR-148b-3p可抑制THP-1细胞增殖和促进凋亡、并下调LC3Ⅱ、ATG14及上调P62蛋白水平,而抑制NB4细胞中miR-148b-3p表达则观察到相反的作用;此外,miR-148b-3p能显著降低野生型ATG14表达载体的荧光素酶活性,回复实验结果显示过表达ATG14可逆转miR-148b-3p上调对细胞增殖和自噬的抑制作用,而抑制ATG14表达则能减弱miR-148b-3p下调对细胞表型的促进作用。结论miR-148b-3p通过靶向结合ATG14抑制AML细胞的体外增殖和自噬。 展开更多

关键词 微小RNA-148b-3p(mir-148b-3p) 自噬相关基因14(ATG14) 急性髓系白血病(AML) 细胞增殖 细胞自噬

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miR-148b在急性髓系白血病患者及细胞系中的表达与生物学功能 被引量：7

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作者 王晓雪 富威 +1 位作者 梁颖 李艳 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第3期340-344,共5页

目的:检测miR-148b在急性髓系白血病患者和细胞系中的表达水平。初步研究miR-148b在急性髓系白血病中的生物学功能。方法:收集急性髓系白血病患者56例,非恶性血液病对照组20例,提取骨髓有核细胞;培养U937、Kasumi-1、THP-1三种AML细胞系... 目的:检测miR-148b在急性髓系白血病患者和细胞系中的表达水平。初步研究miR-148b在急性髓系白血病中的生物学功能。方法:收集急性髓系白血病患者56例,非恶性血液病对照组20例,提取骨髓有核细胞;培养U937、Kasumi-1、THP-1三种AML细胞系。RT-PCR检测miR-148b的表达水平。分别对U937细胞系及Kasumi-1细胞系转染miR-148b mimics和inhibitor。CCK-8法检测U937细胞及Kasumi-1细胞增殖情况,Annexin V/PI流式检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期。结果:miR-148b在急性髓系白血病患者及细胞系中较非恶性血液病对照组表达明显下降。U937细胞转染miR-148b mimics后,增殖受抑制,细胞凋亡增加,细胞阻滞在G_0-G_1期;Kasumi-1细胞转染miR-148b inhibitor后,增殖增加,细胞凋亡减少,G_0-G_1期细胞减少。结论:miR-148b在急性髓系白血病患者及细胞系中的表达水平均较正常对照显著降低。miR-148b在急性髓系白血病中起抑癌基因的作用,过表达miR-148b可以抑制细胞增殖,促进凋亡。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 增殖 凋亡 细胞周期

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p53通过调控miR-148b抑制肺癌细胞PC-9的增殖 被引量：2

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作者 傅寅佳 杨熹 +4 位作者 来森艳 曹小年 王桂华 胡俊波 李襄 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第12期1908-1911,共4页

目的:探讨p53在肺癌PC-9细胞中对微小RNA-148b(mi R-148b)表达的影响、相应分子机制及对细胞增殖能力的影响。方法:以肺癌PC-9细胞作为研究对象,瞬时转染p53真核表达载体,建立高表达p53的实验模型。通过荧光定量PCR检测p53在PC-9细胞中... 目的:探讨p53在肺癌PC-9细胞中对微小RNA-148b(mi R-148b)表达的影响、相应分子机制及对细胞增殖能力的影响。方法:以肺癌PC-9细胞作为研究对象,瞬时转染p53真核表达载体,建立高表达p53的实验模型。通过荧光定量PCR检测p53在PC-9细胞中对mi R-148b表达的影响。通过使用mi R-148b启动子荧光素酶报告基因表达载体,检测p53对mi R-148b启动子转录活性的影响。通过转染mi R-148b特异性抑制物(Inh-148b)低表达mi R-148b,使用CCK8法检测mi R-148b对p53在肺癌细胞增殖调控过程中的作用。结果:高表达p53可在肺癌PC-9细胞中促进mi R-148b的表达;高表达p53可增强mi R-148b启动子的活性;低表达mi R-148b可减弱p53对肺癌PC-9细胞增殖的抑制作用。结论:p53对肺癌细胞PC-9增殖的抑制作用部分依赖于mi R-148b。 展开更多

关键词 肺肿瘤 P53 微小RNA-148b 细胞增殖

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