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miR-148b基因对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及免疫抑制因子的影响研究 被引量：3
1
作者 汤夏莲 陈平 +2 位作者 唐义平 张敏 曹晓红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1794-1797,1803,共5页
目的:探讨miR-148b基因对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及免疫抑制因子TGF-β1表达的影响。方法:小鼠肾小球系膜细胞(MMCs)分三组处理,即低糖+miR-148b scramble组(LG组)、高糖+miR-148b scramble组(HG组)和高糖+miR-148b inhibi... 目的:探讨miR-148b基因对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、凋亡及免疫抑制因子TGF-β1表达的影响。方法:小鼠肾小球系膜细胞(MMCs)分三组处理,即低糖+miR-148b scramble组(LG组)、高糖+miR-148b scramble组(HG组)和高糖+miR-148b inhibitor组(HG+miR-148b inhibitor组),其中miR-148b scramble和miR-148b inhibitor的转染参照脂质体LipofectamineTM2000转染说明进行瞬时转染,收集转染48 h的细胞,通过qRT-PCR检测各组细胞中miR-148b的mRNA表达;CCK8及流式细胞仪分别检测细胞活力及凋亡率;Western blot检测免疫抑制因子TGF-β1及NF-κB信号通路p-IκBα及下游相关基因cyclin D1和Bax的蛋白表达。结果:高糖可上调miR-148b的表达,转染miR-148b inhibitor后miR-148b的表达明显降低;与LG组比较,HG组细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著升高,TGF-β1、p-IκBα、cyclin D1和Bax的蛋白表达均明显升高,与HG组比较,HG+miR-148b inhibitor组细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著降低,TGF-β1、p-IκBα、cyclin D1和Bax的蛋白表达均明显降低(P<0. 05)。结论:抑制肾小球系膜细胞miR-148b基因表达可抑制高糖诱导的细胞活力、凋亡率及免疫抑制因子TGF-β1表达的增加,机制可能与下调NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 mir-148b基因 肾小球系膜细胞 高糖 凋亡 免疫
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miR-208b-3p通过抑制线粒体基因表达加重心力衰竭小鼠能量代谢障碍
2
作者 周双珊 刘源 +2 位作者 银萍 石毓君 苏立 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第16期1857-1866,共10页
目的探究miR-208b-3p对主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)诱导的心力衰竭小鼠能量代谢的作用及机制。方法将24只小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=6)和手术组(n=18)。手术组采用TAC建立心力衰竭模型;假手术... 目的探究miR-208b-3p对主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)诱导的心力衰竭小鼠能量代谢的作用及机制。方法将24只小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=6)和手术组(n=18)。手术组采用TAC建立心力衰竭模型;假手术组采用TAC相同手术方式,但不结扎主动脉弓。于TAC术后第2周再随机分为Antagomir组(n=6)、Antagomir-NC组(n=6)及TAC组(n=6),Antagomir组、Antagomir-NC组尾静脉分别注射miR-208b-3p antagomir(800μg)及miR-208b-3p antagomir阴性对照(800μg)试剂,每周2次,连续4周。术后第6周行超声心动图评估各组小鼠心功能。HE染色及天狼星红染色观察小鼠心肌组织病理学形态。ATP检测试剂盒检测各组小鼠心肌组织ATP水平。RT-qPCR检测小鼠心肌组织miR-208b-3p、线粒体基因(ND1、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5、ND6、CO1、CO2、CO3、CYTB、ATP6、ATP8)及POLRMT、12SrRNA的表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-208b-3p与潜在靶基因POLRMT的相互结合作用。Western blot检测心肌组织POLRMT及ND1、CO2、CYTB、ATP8蛋白表达水平。结果与Sham组相比,TAC组小鼠心肌miR-208b-3p表达显著增加(P<0.05)。超声检测结果显示,Antagomir组小鼠心脏的射血分数、收缩与舒张功能较TAC组明显改善(P<0.05)。组织切片染色提示,Antagomir组小鼠的心肌细胞肥大、排列紊乱、心肌间质炎细胞浸润等有明显改善(P<0.05)。与TAC组相比,Antagomir组ATP水平明显升高(P<0.05);POLRMT及线粒体基因转录产物(12SrRNA和13个线粒体基因编码多肽)表达量均显著升高(P<0.05),但SDHA、SDHB无变化。双荧光素酶报告基因实验显示miR-208b-3p与POLRMT的CDS区有结合作用。Antagomir组小鼠心肌组织POLRMT、ND1、CO2、CYTB、ATP8蛋白水平表达较TAC组显著增加(P<0.05)。结论miR-208b-3p可通过靶向POLRMT抑制线粒体基因的表达,加剧线粒体能量代谢障碍,并加重心力衰竭小鼠心功能不全及心室重塑。 展开更多
关键词 mir-208b 心力衰竭 能量代谢 线粒体基因 POLRMT
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产前超声联合血清miR-148b、miR-375检测在胎儿先天性心脏病诊断中的应用价值
3
作者 白子彤 朱毓 《河北医药》 CAS 2024年第15期2308-2311,共4页
目的 探讨微小RNA(miR)-148b、miR-375在胎儿先天性心脏病孕妇血清中的水平,及其联合产前超声在胎儿先天性心脏病诊断中的价值。方法 收集2019年1月至2023年1月进行产前筛查的疑似胎儿先天性心脏病的106例孕妇作为研究对象,根据产后随... 目的 探讨微小RNA(miR)-148b、miR-375在胎儿先天性心脏病孕妇血清中的水平,及其联合产前超声在胎儿先天性心脏病诊断中的价值。方法 收集2019年1月至2023年1月进行产前筛查的疑似胎儿先天性心脏病的106例孕妇作为研究对象,根据产后随访结果将其分为病例组(先天性心脏病,n=80)和对照组(均无先天性心脏病,n=26)。比较2组血清miR-148b、miR-375水平;ROC曲线分析血清miR-148b、miR-375对胎儿先天性心脏病的诊断效能;四表格法分析产前超声联合血清miR-148b、miR-375水平对胎儿先天性心脏病的诊断效能。结果 与对照组比较,病例组血清miR-148b水平显著降低,血清miR-375水平显著升高(P<0.05)。产前超声联合血清miR-148b、miR-375诊断胎儿先天性心脏病的准确率为93.40%,敏感性为92.50%,特异性为96.15%。其中,三项联合诊断的敏感性高于血清miR-148b、miR-375单独诊断(P<0.05),三项联合诊断的准确率和特异性高于产前超声、血清miR-148b、miR-375单独诊断(P<0.05)。结论 胎儿先天性心脏病的孕妇血清miR-148b水平显著降低,血清miR-375水平显著升高,产前超声联合血清miR-148b、miR-375对胎儿先天性心脏病具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 mir-148b mir-375 产前超声 胎儿先天性心脏病
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热性惊厥患儿血清miR-148a-3p HMGB125(OH)D水平与癫痫发作的相关性 被引量：2
4
作者 张义堂 秦小菀 +7 位作者 石岩 侯海燕 殷雪 李哲 徐会民 刘麦叶 李万桢 宋春雨 《中国实用神经疾病杂志》 2023年第5期599-604,共6页
目的探讨热性惊厥患儿血清微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、25-羟维生素D(25(OH)D)水平与癫痫发作的相关性。方法回顾性分析2018-01—2022-03南阳市中心医院收治的122例热性惊厥患儿,根据热性惊厥患儿预后结局... 目的探讨热性惊厥患儿血清微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、25-羟维生素D(25(OH)D)水平与癫痫发作的相关性。方法回顾性分析2018-01—2022-03南阳市中心医院收治的122例热性惊厥患儿,根据热性惊厥患儿预后结局是否发生癫痫,分为热性惊厥癫痫组36例和热性惊厥非癫痫组86例,同期选择55例未发生惊厥的呼吸道感染仅发热的患儿为对照组,比较3组患儿的血清miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D水平。收集3组患儿临床资料进行多因素Logistic回归分析,绘制ROC曲线分析miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D对热性惊厥患儿癫痫发作的预测价值。结果热性惊厥癫痫组的血清miR-148a-3p表达量、HMGB1水平高于热性惊厥非癫痫组、对照组[(2.26±0.57)vs(1.71±0.43)vs(1.50±0.38);(7.45±1.87)μg/L vs(6.70±1.58)μg/L vs(5.33±1.29)μg/L;均P<0.05],血清25(OH)D水平低于热性惊厥非癫痫组、对照组[(26.83±6.79)μg/L vs(34.24±8.56)μg/L vs(42.16±4.15)μg/L;P<0.05]。惊厥类型、惊厥持续时间、退热后脑电图结果、miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D与癫痫发作存在相关关系(P<0.05)。miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D预测热性惊厥患儿癫痫发作的灵敏度为83.33%、77.78%、72.22%,特异度为74.42%、68.60%、63.95%。结论血清miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D水平与热性惊厥患儿癫痫发作有一定相关性,可作为临床辅助诊断标志物。 展开更多
关键词 热性惊厥 癫痫 mir-148a-3p 高迁移率族蛋白b1 25-羟维生素D
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LncRNA MEG8通过靶向miR-15a-5p调控MICA/B介导结直肠癌细胞免疫逃逸
5
作者 李鸷 吴迪 +2 位作者 田飞 刘洁 谢兴明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1217-1221,1127,共6页
目的:探究长链非编码RNA母系表达基因8(LncRNA MEG8)通过靶向miR-15a-5p调控MHCⅠ类相关蛋白A/B(MICA/B)介导的结直肠癌(CRC)细胞免疫逃逸机制。方法:RT-qPCR、Western blot检测CRC组织和细胞系MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋... 目的:探究长链非编码RNA母系表达基因8(LncRNA MEG8)通过靶向miR-15a-5p调控MHCⅠ类相关蛋白A/B(MICA/B)介导的结直肠癌(CRC)细胞免疫逃逸机制。方法:RT-qPCR、Western blot检测CRC组织和细胞系MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋白水平;双荧光素酶实验验证MEG8对miR-15a-5p的调控关系;采用脂质体转染法将NC、MEG8、miR-NC、miR-15a-5p分别或共转染至SW480、SW620细胞,记为NC组、MEG8组、MEG8+miR-NC组、MEG8+miR-15a-5p组;将NK细胞分别与SW480、SW620细胞共培养;ELISA检测共培养液中TNF-α、IFN-γ水平;CCK-8、EdU染色、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;RT-qPCR、Western blot检测细胞MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋白水平。结果:与癌旁组织或正常结肠上皮细胞相比,CRC组织和细胞系中MEG8、MICA、MICB、NKG2D mRNA和蛋白水平降低,miR-15a-5p水平升高(P<0.05)。MEG8靶向调控miR-15a-5p。共培养体系中,与NC组相比,MEG8组细胞MICA、MICB、NKG2D蛋白水平、共培养上清液中TNF-α、IFN-γ水平明显升高,培养1 d、2 d、3 d后,OD值、EdU阳性率、迁移和侵袭细胞数明显降低(P<0.05);过表达miR-15a-5p能部分逆转过表达MEG8对细胞MICA、MICB、NKG2D、TNF-α、IFN-γ水平和增殖、侵袭转移能力的影响(P<0.05)。结论:MEG8通过靶向miR-15a-5p调控MICA、MICB表达,促进NK细胞活性,抑制CRC细胞免疫逃逸。 展开更多
关键词 长链非编码RNA母系表达基因8 mir-15a-5p 结直肠癌 免疫逃逸 MHCⅠ类相关蛋白A/b
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SLE患者外周血单个核细胞中miR-148b、miR-152和靶基因dnmt1的表达及其临床意义 被引量：4
6
作者 杜明 陶李 +2 位作者 王昱斌 李春莳 李光迪 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期966-971,983,共7页
目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-148b、miR-152和其靶基因dnmt1的表达水平在发病机制中的作用以及与SLE实验室相关指标、临床疾病活动度的之间的关系。方法采用实时荧光定量PCR(qu... 目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中miR-148b、miR-152和其靶基因dnmt1的表达水平在发病机制中的作用以及与SLE实验室相关指标、临床疾病活动度的之间的关系。方法采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time,qPCR)方法检测74例SLE患者和44例健康者的PBMCs中miR-148b、miR-152、dnmt1的表达水平,统计学分析其与SLE疾病活动度及SLE相关检验指标的关系。结果 miR-148b、miR-152在SLE患者PBMCs中的表达水平显著高于健康对照(P<0.05),dnmt1在SLE患者PBMCs中的表达水平显著低于健康对照(P<0.05)。除miR-148b在低活动组与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05)外,miR-148b、miR-152和dnmt1在其他各组中的表达差异均有统计学意义。miR-152与ESR正相关(r=0.443,P=0.027);dnmt1与ANA抗体(r=-0.576,P=0.001)及SLEDAI评分均为负相关(r=-0.408,P=0.038)。结论 miR-148b、miR-152和dnmt1在SLE的发病机制中扮演着重要角色,可能作为疾病活动的参考指标,有助于指导疾病治疗和预后评估,并为SLE的治疗带来更多靶点。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 mir-148b mir-152 DNMT1
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弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量及临床意义探究
7
作者 贾光明 《当代医药论丛》 2024年第2期30-32,共3页
目的:探讨分析弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量及临床意义。方法:选取DLBCL患者76例(纳入DLBCL组)及淋巴结反应性增生(RHL)患者70例(纳入RHL组),采用实时荧光定量PCR法检测所有患者淋巴组织中miR-193... 目的:探讨分析弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量及临床意义。方法:选取DLBCL患者76例(纳入DLBCL组)及淋巴结反应性增生(RHL)患者70例(纳入RHL组),采用实时荧光定量PCR法检测所有患者淋巴组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达水平,并分析二者的表达水平与DLBCL临床特征的关系。结果:miR-193a-3p及miR-146b-5p在DLBCL组中的表达水平均低于RHL组(P<0.05),二者的表达水平与Ann-Arbo分期、国际预后指数(IPI)评分有关。miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达水平与DLBCL的临床分期呈负相关,随着miR-193a-3p、miR-146b-5p表达水平的降低,DLBCL临床分期越高(P<0.05)。淋巴组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p表达下调是DLBCL临床高分期的危险因子(OR>1,P<0.05)。结论:DLBCL组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p表达水平下调,可能参与了DLBCL的发生、发展,二者的表达水平与DLBCL的临床分期有关,可作为DLBCL临床诊治的重要参考依据。 展开更多
关键词 弥漫性大b细胞淋巴瘤 mir-193a-3p mir-146b-5p 抑癌基因
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广西巴马小型猪miR-148b慢病毒制备及靶基因通路预测分析 被引量：6
8
作者 张名媛 郭晓萍 +4 位作者 孙晴超 司景磊 兰干球 郭亚芬 蒋钦杨 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1596-1604,共9页
【目的】构建广西巴马小型猪miR-148b慢病毒表达载体并对其靶基因进行预测及相关通路分析,为揭示miR-148b的作用机制打下基础。【方法】以广西巴马小型猪血液基因组DNA为模板,扩增miR-148b的前体及部分侧翼序列,使用T4连接酶将目的片段... 【目的】构建广西巴马小型猪miR-148b慢病毒表达载体并对其靶基因进行预测及相关通路分析,为揭示miR-148b的作用机制打下基础。【方法】以广西巴马小型猪血液基因组DNA为模板,扩增miR-148b的前体及部分侧翼序列,使用T4连接酶将目的片段连接至pLV-CMV-MCS-EF1载体上,构建获得pLV-miR-148b慢病毒表达载体;以pLVmiR-148b慢病毒表达载体转染293T细胞48 h后进行表达验证;利用miRDB、miRWalk 2.0和TargetScan 7.2三大数据库预测分析广西巴马小型猪miR-148b的靶基因,并以MirPath v.3分析miR-148b靶基因相关通路。【结果】广西巴马小型猪miR-148b片段大小为385 bp,与miRBase 21.0网站上已发布猪miR-148b成熟序列(前体和侧翼序列)的同源性达100%。构建获得的pLV-miR-148b慢病毒表达载体能在293T细胞中成功表达,且相对表达量极显著高于pLV-GFP慢病毒空载质粒转染组(P<0.01)。数据库预测分析得到18个广西巴马小型猪miR-148b的靶基因,分别为CLOCK(时间昼夜调控因子)、MIER1(转录调控因子)、MECP2(甲基化CpG结合蛋白)、ZNF704(锌指蛋白)、SPTY2D1(SPT2染色质蛋白)、QKI(RNA结合蛋白)、ZBTB20(锌指蛋白)、MGAT4A(钠/磷酸转运蛋白)、UHMK1(编码蛋白激酶)、PIK3C2A(磷酸肌醇-3-激酶2α肽)、C6orf62(6号染色体开放阅读框62抗体)、HECW2(E3泛素蛋白连接酶)、MAP1B(微管相关蛋白)、NHS(NHS肌动蛋白调节因子)、B4GALT6(β-1,4-半乳糖基转移酶)、ATP2A2(肌浆ATP酶/内质网Ca2+转运酶)、AP4E1(蛋白复合物接头分子)和BBX(锌指蛋白);且发现有11条靶基因相关通路,其中与疾病相关的通路有脂肪酸合成通路、细胞外基质受体相互作用通路、癌症的蛋白聚糖通路、神经胶质瘤通路、癌症的小分子核糖核酸通路、肾细胞癌通路、N-聚糖生物合成通路和致心律失常性右室心肌病通路。【结论】广西巴马小型猪miR-148b慢病毒表达载体能在293T细胞中成功表达,miR-148b存在18个靶基因和11条相关通路,且主要在脂肪酸合成、N-聚糖生物合成及致心律失常性右室心肌病等相关疾病通路上发挥作用。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 mir-148b 慢病毒载体 靶基因 相关通路预测
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miR-153-3p靶向结合BCL2基因调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡和周期的实验研究
9
作者 李霞 穆建梅 +3 位作者 王志婕 闫小会 马瑞霞 陈晓平 《宁夏医学杂志》 CAS 2023年第5期385-388,F0002,共5页
目的探讨miR-153-3p调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡和周期的作用。方法利用生物信息学软件对miR-153-3p的候选靶基因进行预测。实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测miR-153-3p对细胞内mRNA和蛋白表达的影响。用密理博MUSETM细胞检测... 目的探讨miR-153-3p调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡和周期的作用。方法利用生物信息学软件对miR-153-3p的候选靶基因进行预测。实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测miR-153-3p对细胞内mRNA和蛋白表达的影响。用密理博MUSETM细胞检测仪对细胞周期和细胞凋亡情况进行检测。用CCK8法和克隆技术形成实验检测细胞增殖能力。结果生物信息学预测结果显示,miR-153-3p与BCL2分子之间存在一个高可信度的结合区。miR-153-3p mimic能上调miR-153-3p的表达,降低BCL2蛋白的表达。与对照组相比,过表达miR-153-3p的6-10B细胞的凋亡明显增加,增殖能力受到显著抑制。结论miR-153-3p通过下调BCL2的表达,能够促进鼻咽癌细胞凋亡,抑制其增殖。 展开更多
关键词 鼻咽癌 mir-153-3p bCL2基因 细胞凋亡和增殖 6-10b细胞
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miR-148b-3p通过靶向自噬相关基因14(ATG14)抑制急性髓系白血病细胞增殖与自噬 被引量：2
10
作者 蒋雪坷 敬一佩 +6 位作者 雷力 彭美茜 肖巧玲 任俊 陶永红 黄军鹏 张伶 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期881-890,共10页
目的探讨微小RNA-148b-3p(miR-148b-3p)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和自噬的影响及其机制。方法基于基因表达数据集(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA),采用生物信息学软件分析miR-148b-3p在AML细胞中的表达及其与患者临床预后的关系;实时... 目的探讨微小RNA-148b-3p(miR-148b-3p)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖和自噬的影响及其机制。方法基于基因表达数据集(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA),采用生物信息学软件分析miR-148b-3p在AML细胞中的表达及其与患者临床预后的关系;实时荧光定量PCR检测AML细胞中miR-148b-3p表达。用脂质体法将miR-148b-3p模拟物(miR-148b-3p mimic)和miR-148b-3p抑制物(miR-148b-3p inhibitor)分别瞬时转入THP-1和NB4细胞,采用CCK-8法和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法检测细胞增殖,Western blot法检测B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62和自噬相关基因14(ATG14)蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-148b-3p对ATG14的靶向结合,回复实验观察miR-148b-3p/ATG14轴对AML细胞表型的影响。结果AML患者细胞低表达miR-148b-3p,miR-148b-3p低表达的AML患者总体生存率较对照组显著降低;过表达miR-148b-3p可抑制THP-1细胞增殖和促进凋亡、并下调LC3Ⅱ、ATG14及上调P62蛋白水平,而抑制NB4细胞中miR-148b-3p表达则观察到相反的作用;此外,miR-148b-3p能显著降低野生型ATG14表达载体的荧光素酶活性,回复实验结果显示过表达ATG14可逆转miR-148b-3p上调对细胞增殖和自噬的抑制作用,而抑制ATG14表达则能减弱miR-148b-3p下调对细胞表型的促进作用。结论miR-148b-3p通过靶向结合ATG14抑制AML细胞的体外增殖和自噬。 展开更多
关键词 微小RNA-148b-3p(mir-148b-3p) 自噬相关基因14(ATG14) 急性髓系白血病(AML) 细胞增殖 细胞自噬
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miR-30b靶向Beclin1参与慢性肾脏病血管钙化 被引量：1
11
作者 马晓迎 生玉平 +4 位作者 王娜 张浩然 徐海平 孙福云 杨星梦 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期1900-1904,共5页
目的 探究miR-30b在慢性肾脏病(CKD)大鼠血管钙化(VC)中的作用及miR-30b与自噬基因Beclin1的靶向关系。方法 将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组(CKD)、miR-30b组(CKD+miR-30b模拟物)和miR-30b阴性对照(NC)组(CKD+miR-30b NC)。使用全... 目的 探究miR-30b在慢性肾脏病(CKD)大鼠血管钙化(VC)中的作用及miR-30b与自噬基因Beclin1的靶向关系。方法 将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组(CKD)、miR-30b组(CKD+miR-30b模拟物)和miR-30b阴性对照(NC)组(CKD+miR-30b NC)。使用全自动生化分析仪检测血清中血尿素氮(BUN)、血钙(Ca)、血磷(P)、血肌酐(Scr)的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织和肾主动脉组织的病理学变化;茜素红染色观察主动脉钙化结节情况;使用试剂盒检测血管壁钙含量及碱性磷酸酶(ALP)水平;反转录荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测主动脉miR-30b水平;Western印迹检测主动脉中Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达水平;透射电镜观察血管平滑肌细胞(VSMC)中自噬小体的变化;双荧光素酶测定miR-30b与Beclin1的靶向关系。结果 与对照组相比,模型组肾小球萎缩,间质增宽,肾小管扩张严重,炎性细胞浸润严重,血清中BUN、Ca、P、Scr水平、主动脉钙含量及ALP水平显著升高(P<0.05),自噬小体数量、miR-30b相对表达水平及Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组和miR-30b NC组相比,miR-30b组肾组织损伤明显减轻,血清中BUN、Ca、P、Scr水平、主动脉钙含量及ALP水平显著降低(P<0.05),细胞的自噬小体数量及Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 miR-30b可通过靶向Beclin1对CKD大鼠的血管钙化起到保护作用。 展开更多
关键词 mir-30b 慢性肾脏病 血管钙化 自噬基因bECLIN1
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miR-181b通过靶向调控N-myc下游调节基因2影响骨肉瘤细胞的迁移和侵袭 被引量：10
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作者 邵建立 李志忠 +3 位作者 王亮 焦根龙 周志刚 孙国栋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期321-326,共6页
目的探讨miR-181b对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响。方法培养骨肉瘤细胞,实时荧光定量PCR检测miR-181b在骨肉瘤细胞中的表达。抑制miR-181b的表达,Transwell检测对骨肉瘤迁移和侵袭的影响;生物信息学分析miR-181b靶基因并采用荧光素酶报... 目的探讨miR-181b对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响。方法培养骨肉瘤细胞,实时荧光定量PCR检测miR-181b在骨肉瘤细胞中的表达。抑制miR-181b的表达,Transwell检测对骨肉瘤迁移和侵袭的影响;生物信息学分析miR-181b靶基因并采用荧光素酶报告基因分析miR-181b和靶基因在骨肉瘤中是否直接作用,同时采用Western Blotting检测靶基因在骨肉瘤细胞中的表达以及Transwell检测靶基因对骨肉瘤迁移和侵袭的影响。结果实时荧光定量PCR结果表明miR-181b在骨肉瘤细胞中高表达。抑制miR-181b的表达能够抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭;生物信息学分析表明N-myc下游调节基因2(NDRG2)是miR-181b直接作用的靶基因,荧光素酶报告基因分析验证了该结果;Western blotting检测表明NDRG2在骨肉瘤中低表达,而抑制miR-181b能够显著提高NDRG2的表达。抑制miR-181b的表达的同时抑制靶基因NDRG2的表达,能够逆转抑制miR-181b的表达对骨肉瘤细胞的迁移和侵袭的影响,从而显著提高骨肉瘤细胞的迁移和侵袭。结论 miR-181b在骨肉瘤中过表达,NDRG2为miR-181b直接调控靶基因,抑制miR-181b能够提高NDRG2的表达从而抑制骨肉瘤细胞的迁移侵袭。 展开更多
关键词 mir-181b 骨肉瘤 N-myc下游调节基因2 迁移 侵袭
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miR-92b通过调控EZH2基因的表达抑制食管癌细胞Eca109的增殖和侵袭 被引量：11
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作者 刘飞 孟令娇 +5 位作者 刘世娜 谷丽娜 李娟 张建东 吴云艳 桑梅香 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期118-124,共7页
目的:探讨食管癌(esophageal carcinoma,EC)细胞中miR-92b对组蛋白甲基转移酶zeste同源物增强子2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因表达的调控作用,以及对EC细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:选取河北医科大学第四医院科研中心保存... 目的:探讨食管癌(esophageal carcinoma,EC)细胞中miR-92b对组蛋白甲基转移酶zeste同源物增强子2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因表达的调控作用,以及对EC细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:选取河北医科大学第四医院科研中心保存的2016年1月至2017年1月15例EC患者手术癌组织标本,通过生物信息学软件预测分析对EZH2可能调控的miRNAs,将预测的miRNAs mimic分别转染人EC细胞Eca109后,采用实时荧光定量PCR、Western blotting和双荧光素酶报告基因实验验证miRNAs对EZH2基因的靶向调控作用。同时将EZH2过表达质粒共转染至Eca109,然后采用CCK-8法、流式细胞术和Transwell细胞侵袭及迁移实验分别检测miRNAs和EZH2表达变化对EC细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结果:转染miR-92b的Eca109细胞中EZH2 mRNA与mimic-NC相比明显降低(P<0.01),转染miR-92b的Eca109细胞中EZH2蛋白表达水平明显低于转染mimic-NC组(0.525±0.052 vs 0.689±0.026,P<0.01)。生物信息学软件分析显示,miR-92b、let-7a及miR-25可与EZH2基因3’端非翻译区的结合位点相结合,但仅有miR-92b可以调控EZH2基因的表达,且miR-92b表达与EZH2 mRNA表达成负相关(P<0.01)。miR-92b mimic转染后EZH2 mRNA、蛋白及荧光素酶报告基因活性均明显下调(均P<0.01),对Eca109细胞凋亡无明显影响(P>0.05);miR-92b mimic转染能抑制ECa109细胞的增殖和侵袭及迁移能力(P<0.01)。而EC细胞转染EZH2过表达质粒后,miR-92b mimic对ECa109细胞增殖和侵袭及迁移能力的抑制作用明显减弱(P<0.01)。结论:miR-92b可抑制ECa109细胞的增殖和侵袭及迁移能力,其作用机制可能与靶向调控抑癌基因EZH2的表达有关。 展开更多
关键词 食管癌 mir-92b zeste同源物增强子2基因 增殖 侵袭 迁移
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心肌梗死患者血清miR-148b表达量与心肌损伤、心肌纤维化的相关性分析 被引量：5
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作者 王芳 丁小云 +5 位作者 党群 吕果 刘振国 李红军 耿李科 郭宁 《海南医学院学报》 CAS 2017年第14期1885-1888,共4页
目的:研究心肌梗死患者血清中miR-148b表达量与心肌损伤、心肌纤维化的相关性。方法:选择2013年3月~2016年10月期间在汉中市中心医院诊断为急性心肌梗死(AMI)的130例患者以及体检的100例健康者,分别作为AMI组和对照组,采集血清并采用荧... 目的:研究心肌梗死患者血清中miR-148b表达量与心肌损伤、心肌纤维化的相关性。方法:选择2013年3月~2016年10月期间在汉中市中心医院诊断为急性心肌梗死(AMI)的130例患者以及体检的100例健康者,分别作为AMI组和对照组,采集血清并采用荧光定量PCR试剂盒检测miR-148b的表达量,采用酶联免疫吸附试剂盒检测心肌损伤标志物、心肌纤维化标志物的含量。结果:AMI组患者血清中miR-148b的表达量以及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(cTnT)、心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、CTX-I、转化生长因子(TGF)-β1、GDF-15的含量显著高于对照组(P<0.05);miR-148b高表达AMI患者血清中CKMB、cTnT、H-FABP、PICP、PⅢNP、CTX-I、TGF-β1、GDF-15的含量显著高于miR-148b低表达的AMI患者(P<0.05)。结论:心肌梗死患者血清中高表达的miR-148b对心肌损伤、心肌纤维化具有促进作用。 展开更多
关键词 心肌梗死 mir-148b 心肌损伤 心肌纤维化
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神经鞘瘤中miR-10b基因表达和甲基化水平分析 被引量：3
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作者 郭建新 高珂 +4 位作者 祁磊 谢万福 徐高峰 冯怡 李瑞春 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期97-101,共5页
目的分析miR-10b小RNA在神经鞘瘤中的表达水平和该基因上游甲基化水平,并识别miR-10b在神经鞘瘤中的潜在靶基因。方法应用实时定量PCR定量miR-10b及潜在靶基因HOXB3、HOXD10、PTEN、PIK3CA、MAPRE1、HADC4在13例神经鞘瘤和6例正常前庭... 目的分析miR-10b小RNA在神经鞘瘤中的表达水平和该基因上游甲基化水平,并识别miR-10b在神经鞘瘤中的潜在靶基因。方法应用实时定量PCR定量miR-10b及潜在靶基因HOXB3、HOXD10、PTEN、PIK3CA、MAPRE1、HADC4在13例神经鞘瘤和6例正常前庭蜗神经的表达;进一步分析差异表达基因与神经鞘瘤临床特征的相关性;最后应用焦磷酸测序分析两组之间miR-10b基因上游甲基化水平差异。结果与正常神经相比,神经鞘瘤组织中miR-10b分子表达水平显著升高(P=0.000 3),而PTEN表达显著下降(P=0.004 7),两者显著负相关(P=0.001,r=-0.689)。此外,miR-10b基因启动子区内甲基化水平下调,并与该基因表达显著负相关(P=0.011,r=-0.571)。miR-10b高表达组与低表达组比较,肿瘤直径有差异(P=0.016);但发病年龄及1年后肿瘤复发率无差异(P>0.05)。结论神经鞘瘤中miR-10b启动子甲基化水平下降引起该基因持续高表达,而miR-10b可能靶向抑制PTEN表达。 展开更多
关键词 神经鞘瘤 mir-10b 甲基化 靶基因
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miR-148b在非小细胞肺癌患者血清中的表达水平及其预后价值分析 被引量：5
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作者 吴洲清 毛明 陈家宽 《临床肺科杂志》 2019年第1期83-86,共4页
目的探讨miR-148b在非小细胞肺癌患者血清中的表达水平及其预后价值。方法选取本院确诊的非小细胞肺癌患者196例,同期选择门诊健康体检者48例作为对照组,采用逆转录实时荧光定量法测定血清miR-148b mRNA蛋白的表达。结果肺癌组miR-148b ... 目的探讨miR-148b在非小细胞肺癌患者血清中的表达水平及其预后价值。方法选取本院确诊的非小细胞肺癌患者196例,同期选择门诊健康体检者48例作为对照组,采用逆转录实时荧光定量法测定血清miR-148b mRNA蛋白的表达。结果肺癌组miR-148b mRNA表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);肺癌组miR-148b mRNA阳性率低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05); miR-148b mRNA的表达率与年龄、肿瘤最大径、肿瘤数目,相关性不明显,差异无统计学意义(P> 0. 05);与病理学分级、TNM分期、淋巴血管间隙浸润、淋巴结转移、复发相关明显,且病理学分期越高、TNM分期越高、淋巴血管间隙浸润、淋巴结转移和复发患者的miR-148b mRNA阳性表达率越低,差异有统计学意义(P <0. 05); miR-148b表达阳性组3年生存率及生存期均明显高于miR-148b阴性组,差异有统计学意义(p <0. 05)。结论 miR-148b在非小细胞肺癌患者血清中的表达量低于健康人群,miR-148b在非小细胞肺癌的发生发展过程中起抑制作用; miR-148b阳性表达者可能获得较好的预后。 展开更多
关键词 mir-148b 非小细胞肺癌 表达 预后
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miR-148b参与调控弥漫性大B细胞淋巴瘤药物敏感性的机制 被引量：2
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作者 林晓骥 方玮玥 +6 位作者 董玉青 孙妮 苏童 杨向绸 郭文坚 何牧卿 姚荣欣 《温州医科大学学报》 CAS 2020年第1期12-18,共7页
目的:探讨mi R-148b是否通过调控Ezrin来调节弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞的药物敏感性。方法:诱导建立人DLBCL耐药细胞株CRL2631/CHOP,实时荧光定量PCR检测CRL2631细胞和CRL2631/CHOP细胞的miR-148b表达,Western blot检测2组细胞的E... 目的:探讨mi R-148b是否通过调控Ezrin来调节弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞的药物敏感性。方法:诱导建立人DLBCL耐药细胞株CRL2631/CHOP,实时荧光定量PCR检测CRL2631细胞和CRL2631/CHOP细胞的miR-148b表达,Western blot检测2组细胞的Ezrin蛋白表达;采用双荧光素酶实验检测miR-148b与Ezrin的靶向结合情况;采用miRNA模拟/干扰技术和CCK-8方法检测CRL2631/CHOP细胞和CRL2631细胞对CHOP的敏感性。结果:CRL2631/CHOP细胞mi R-148b表达水平显著低于CRL2631细胞(P=0.001);CRL2631/CHOP细胞Ezrin蛋白表达水平显著高于CRL2631细胞(P<0.05);双荧光素酶实验结果显示,Ezrin是miR-148b的直接靶基因;转染mi R-148b mimic后,CRL2631/CHOP细胞的Ezrin和MDR-1蛋白表达量下降(P<0.05),而CRL2631/CHOP细胞对CHOP敏感性增加(P<0.05);转染miR-148b inhibitor后,CRL2631细胞的Ezrin和MDR-1蛋白表达量上升(P<0.05),而CRL2631细胞对CHOP敏感性下降(P<0.05)。结论:mi R-148b通过调控Ezrin影响DLBCL细胞对CHOP的敏感性。 展开更多
关键词 弥漫性大b细胞淋巴瘤 mir-148b EZRIN CHOP 药物敏感性
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miR-155及其靶基因MyD88基因多态性与弥漫大B细胞淋巴瘤临床病理特征的关系 被引量：4
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作者 李焱 贾振薇 +2 位作者 孔晓阳 崔桂荣 刘晓燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期757-762,共6页
目的:探讨分析miR-155及其靶基因MyD88基因多态性与弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)临床病理特征的关系。方法:选择2015年3月-2017年8月本院收治的DLBCL患者135例,另外选择淋巴结反应性增生标本90例作为对照组。检测2组受试者miR-155相对表达... 目的:探讨分析miR-155及其靶基因MyD88基因多态性与弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)临床病理特征的关系。方法:选择2015年3月-2017年8月本院收治的DLBCL患者135例,另外选择淋巴结反应性增生标本90例作为对照组。检测2组受试者miR-155相对表达量及MyD88基因多态性,并分析miR-155及MyD88基因多态性与DLBCL临床病理特征的关系。结果:DLBCL患者miR-155相对表达量显著高于对照组(P <0.05)。DLBCL组患者MyD88 L265P位点突变率显著高于对照组(P <0.05)。MyD88 L265P位点突变型DLBCL患者miR-155相对表达量显著高于野生型患者(P <0.05)。DLBCL患者miR-155相对表达量、MyD88 L265P位点基因多态性与患者病变部位、分期、BCL-2蛋白表达以及MyD88蛋白表达有关(t=7.461、8.804、6.487、10.812;χ^(2)=10.681、8.599、7.251、23.008;P <0.05)。miR-155低表达DLBCL患者生存情况显著优于miR-155高表达患者(P <0.05)。MyD88 L265P位点野生型DLBCL患者生存情况显著优于突变型患者(P <0.05)。miR-155相对表达量与MyD88蛋白表达呈显著正相关(r=0.428,P=0.000)。结论:DLBCL患者表现为miR-155表达异常升高以及MyD88基因突变率升高,且miR-155表达与MyD88基因突变影响患者疾病进展及预后,可能成为DLBCL诊断、治疗及预后判断的潜在生物学指标。 展开更多
关键词 mir-155 MyD88基因多态性 弥漫大b细胞淋巴瘤 病理特征
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miR-148b在急性髓系白血病中的表达及与临床特征的关系 被引量：2
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作者 王晓雪 莫文斌 +1 位作者 王玥 李艳 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第7期1078-1082,共5页
目的:检测miR-148b在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中的表达水平,分析其与临床特征的关系。方法:收集急性髓系白血病患者40例,非恶性血液病患者(对照组)20例,提取骨髓有核细胞,RT-PCR检测miR-148b的表达水平,分析其表达... 目的:检测miR-148b在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中的表达水平,分析其与临床特征的关系。方法:收集急性髓系白血病患者40例,非恶性血液病患者(对照组)20例,提取骨髓有核细胞,RT-PCR检测miR-148b的表达水平,分析其表达水平与临床特征的关系。结果:miR-148b在急性髓系白血病患者较对照组表达明显下降。miR-148b相对低表达组的患者较相对高表达组患者外周血白细胞计数及骨髓原始细胞比例较高。疗效比较中,完全缓解率及总生存率比较两组未见明显差异,但是miR-148b高表达组较低表达组复发率低(P=0.038),无复发生存两组差异有统计学意义(P=0.029)。结论:miR-148b在急性髓系白血病患者中的表达水平较对照组显著降低。miR-148b的表达水平与AML临床特征具有一定的关联,对疾病复发具有重要意义。 展开更多
关键词 mir-148b 急性髓系白血病 预后
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miR-19b转基因小鼠的构建及表型分析 被引量：2
20
作者 胡晓山 余章斌 +3 位作者 李萌萌 朱金改 朱春 韩树萍 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期579-585,共7页
目的:构建心肌细胞特异性过表达miR-19b的转基因小鼠,并对其进行表型分析。方法:先确定载体插入的酶切位点,根据CloneEZRPCR Cloning Kit重组原理设计相应引物,以小鼠基因组为模板克隆出带有miR-19b前体序列(pre-miR-19b)的目的片段,... 目的:构建心肌细胞特异性过表达miR-19b的转基因小鼠,并对其进行表型分析。方法:先确定载体插入的酶切位点,根据CloneEZRPCR Cloning Kit重组原理设计相应引物,以小鼠基因组为模板克隆出带有miR-19b前体序列(pre-miR-19b)的目的片段,利用重组酶连接到带有alpha-MHC启动子的载体上。将所得载体线性化后,采用显微注射方法注射到小鼠胚胎干细胞内。再将所得的重组胚胎干细胞移植入假孕的C57BL/6J雌鼠子宫内,在所得的子代,即Founder小鼠中采用特异的引物鉴定出转基因小鼠,并选出相应的品系,进行表型分析。结果:成功构建miR-19b转基因小鼠,且miR-19b转基因小鼠舒张期室间隔厚度、舒张期左室游离壁厚度以及射血分数均有升高。结论:心肌特异性过表达miR-19b可以导致心脏肥大。 展开更多
关键词 转基因小鼠 心脏肥大 mir-19b 心血管疾病
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