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circ-EIF4G3负调控miR-17-5p对非小细胞肺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡的影响 被引量：1
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作者 夏奎 王安 钟昌秀 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第10期1956-1961,共6页
目的:探讨环状RNA-EIF4G3(circ-EIF4G3)对非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及其分子机制。方法:实时荧光定量PCR(qPCR)检测人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)和非小细胞肺癌细胞系(NCI-H1299、NCI-H520和NCI-H460)中circ-EIF4G3和... 目的:探讨环状RNA-EIF4G3(circ-EIF4G3)对非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及其分子机制。方法:实时荧光定量PCR(qPCR)检测人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)和非小细胞肺癌细胞系(NCI-H1299、NCI-H520和NCI-H460)中circ-EIF4G3和miR-17-5p的表达水平。采用脂质体转染技术将circ-EIF4G3小干扰RNA(siRNA)转染到NCI-H1299细胞,实验分为Mock组、si-NC组和si-circ-EIF4G 3组,细胞计数(CCK-8)法分析各组NCI-H1299细胞的增殖活力;流式细胞术分析细胞周期变化;Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹(Western blotting)法分析剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)的表达。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析circ-EIF4G3和miR-17-5p的靶向关系。结果:与BEAS-2B细胞相比,非小细胞肺癌细胞系中circ-EIF4G3的表达显著升高(P<0.05),而miR-17-5p的表达明显降低(P<0.05);与Mock组和si-NC组相比,si-circ-EIF4G3组NCI-H1299细胞中Cleaved Caspase-3的表达以及凋亡率显著升高,细胞增殖活力和circ-EIF4G3的表达明显降低,G0/G1期细胞比例明显增多(P<0.05);Mock组和si-NC组以上各项指标差异不明显(P>0.05);双荧光素酶报告基因实验和qPCR验证了circ-EIF4G3可靶向调控miR-17-5p。结论:抑制circ-EIF4G3可通过靶向调控miR-17-5p的表达抑制非小细胞肺癌细胞的增殖,阻滞细胞周期至G0/G1期,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 circ-EIF4G3 mir-17-5p 非小细胞肺癌细胞 增殖 凋亡
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竹节参皂苷Ⅳa调节miR-17-5p/MFN2信号通路改善非酒精性脂肪性肝炎 被引量：10
2
作者 李聪 刘小慧 +3 位作者 熊海容 李晓晓 罗悦 刘朝奇 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第19期4725-4731,共7页
该文研究了竹节参皂苷Ⅳa(Panax japonicus saponinⅣa,SPJ-Ⅳa)通过miR-17-5p/mitofusin 2(MFN2)信号通路改善非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的作用。采用高脂饮食(high-fat diet,HFD)联合CCl4诱导Balb/c雄性... 该文研究了竹节参皂苷Ⅳa(Panax japonicus saponinⅣa,SPJ-Ⅳa)通过miR-17-5p/mitofusin 2(MFN2)信号通路改善非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的作用。采用高脂饮食(high-fat diet,HFD)联合CCl4诱导Balb/c雄性小鼠NASH模型,并采用不同剂量SPJ-Ⅳa进行干预,处理5周后留取血清及肝脏,称量体质量及肝重,计算肝指数,检测血清生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)及葡萄糖(Glu)的含量,HE及Masson染色法观察肝脏形态学变化及纤维化病变情况,Real-time PCR法检测脂代谢相关基因[脂肪酸合成基因(fatty acid synthase gene,FASN)、碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein,chREBP)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl CoA carboxylase 1,ACC1)、肝X受体(liver X receptor,LXR)]、炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)、miR-17-5p及MFN2的表达情况,Wes-tern blot法检测MFN2蛋白表达水平。结果显示,与正常组相比,HFD+CCl4组中肝指数明显增加,生化指标ALT,TG,Glu的含量明显增高;形态学结果显示有大量脂肪空泡出现,表现出明显的脂肪变性,并可见明显的胶原纤维沉积;脂代谢相关基因、炎症因子IL-6和IL-1β及miR-17-5p mRNA表达水平明显增加,MFN2 mRNA表达水平明显降低;MFN2蛋白水平降低。经SPJ-Ⅳa干预后,生化指标ALT,TG,Glu的含量有所下降,脂肪变性有所减轻,胶原纤维沉积有所减少,脂代谢相关基因、炎症因子IL-6和IL-1β及miR-17-5p mRNA表达水平有所下降,MFN2 mRNA表达水平有所升高;MFN2蛋白水平也升高。该研究结果表明,miR-17-5p/MFN2信号通路可能参与了NASH的发生发展,且SPJ-Ⅳa对NASH有保护作用,其机制可能与调控miR-17-5p/MFN2信号通路有关。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝炎 CCL4 竹节参皂苷Ⅳa MFN2 mir-17-5p
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淫羊藿苷改善甲状腺功能减退模型大鼠的垂体发育
3
作者 白改改 赵玉娟 +3 位作者 魏家凯 黄文娣 安瑶 王志 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第28期4546-4553,共8页
背景:甲状腺功能减退常伴随着垂体合成分泌激素分泌不足,有研究表明淫羊藿苷对甲状腺功能减退引起的垂体激素分泌不足有确切疗效,但其作用机制还不清楚。目的:探究淫羊藿苷对大鼠甲状腺功能减退后垂体合成分泌激素的影响及机制。方法:(1... 背景:甲状腺功能减退常伴随着垂体合成分泌激素分泌不足,有研究表明淫羊藿苷对甲状腺功能减退引起的垂体激素分泌不足有确切疗效,但其作用机制还不清楚。目的:探究淫羊藿苷对大鼠甲状腺功能减退后垂体合成分泌激素的影响及机制。方法:(1)40只新生雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组及75,150,300 mg/kg淫羊藿苷组,每组8只,后4组给予丙基硫氧嘧啶1.5 mg/(kg·d)灌胃处理构建甲状腺功能减退大鼠模型,各淫羊藿苷剂量组给予75,150,300 mg/kg淫羊藿苷干预治疗,检测各组miR-17-5p、LIM同源框4(LIM homeobox 4,LHX4)、PROP成对同源1蛋白(prop paired end homology 1 protein,PROP1)和HESX1表达,以及垂体合成分泌激素含量。(2)采用锂盐处理共培养的大鼠甲状腺细胞和垂体前叶细胞,给予不同浓度淫羊藿苷(10,30,50,70,100μmol/L)干预,CCK-8试剂盒检测垂体前叶细胞活力;ELISA试剂盒检测促卵泡激素、生长激素和促甲状腺激素水平;实时荧光定量PCR检测miR-17-5p表达;Western印迹法检测PROP1和HESX1蛋白水平;采用双荧光素报告酶基因和RNA结合蛋白免疫沉淀实验检测miR-17-5p和LHX4的结合关系。结果与结论:(1)体内实验结果显示,150 mg/kg淫羊藿苷组较模型组促甲状腺激素含量降低(P<0.05),生长激素(P<0.01)和促卵泡激素(P<0.05)含量显著升高;此外,150mg/kg淫羊藿苷组较模型组血清游离三碘甲状腺原氨酸、血清游离甲状腺素、血清三碘甲状腺原氨酸和血清甲状腺素激素分泌水平增加;(2)用50,70,100μmol/L淫羊藿苷干预能够增强大鼠垂体前叶细胞活力(P<0.01),其中70μmol/L淫羊藿苷干预效果最佳(P均<0.01);(3)淫羊藿苷处理抑制了锂盐处理的大鼠垂体前叶细胞中miR-17-5p表达增加,上调PROP1和HESX1表达(P均<0.05);(4)锂盐处理组细胞上清液中生长激素和促卵泡激素含量明显降低,促甲状腺激素含量增加,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.01);(5)用不同浓度淫羊藿苷干预细胞后,生长激素和促卵泡激素含量增加(P<0.01),促甲状腺激素水平明显降低(P<0.05),70μmol/L时干预效果最佳(P<0.01);(6)与对照组相比,转染miR-17-5p mimic抑制锂盐处理的大鼠垂体前叶细胞活力(P<0.05),下调细胞中PROP1和HESX1的蛋白表达,增加促甲状腺激素含量(P<0.05),减少生长激素和促卵泡激素含量(P均<0.01),而转染miR-17-5p inhibitor与转染miR-17-5p mimic的作用相反;(7)LHX4是miR-17-5p的靶基因,过表达LHX4增加细胞活力,促进PROP1和HESX1蛋白表达(P均<0.01),减少促甲状腺激素含量(P<0.05),增加生长激素和促卵泡激素含量(P<0.01);(8)提示淫羊藿苷可能通过miR-17-5p/LHX4轴恢复失调的垂体合成分泌激素水平。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 甲状腺功能减退 mir-17-5p/lhx4轴 生长素 促甲状腺激素 促卵泡激素
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