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miR-18a-5p靶向调控RORA在结直肠癌增殖进展中的作用及临床意义
1
作者 陈一锋 王帅 +7 位作者 柴明明 张迪 王春霞 赵丽霞 张洪来 杨熊飞 张维胜 王涛 《肿瘤防治研究》 CAS 2024年第8期667-677,共11页
目的探讨miR-18a-5p和RORA在结直肠癌增殖中的作用机制及临床意义。方法采用qRT-PCR、FISH、IHC方法检测miR-18a-5p和RORA在结直肠癌细胞和组织中的表达情况。通过EdU和CFSE实验检测细胞增殖能力、FCM实验检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验... 目的探讨miR-18a-5p和RORA在结直肠癌增殖中的作用机制及临床意义。方法采用qRT-PCR、FISH、IHC方法检测miR-18a-5p和RORA在结直肠癌细胞和组织中的表达情况。通过EdU和CFSE实验检测细胞增殖能力、FCM实验检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。进一步通过双荧光素酶报告实验、细胞功能挽救实验、RT-PCR和Western blot实验验证miR-18a-5p对RORA的靶向调控作用。最后运用生物信息学探究miR-18a-5p调控RORA促进结直肠癌恶性增殖和侵袭进展的分子机制。结果miR-18a-5p在结直肠癌组织和细胞中高表达(P<0.05),并且能够促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。此外RORA是miR-18a-5p的靶基因,过表达RORA能够有效消减miR-18a-5p促结直肠癌细胞恶性生物学表型的作用(P<0.05)。RORA在结直肠癌组织中的表达与CD8+T细胞浸润及其表面标志蛋白CD8A的表达显著正相关(P<0.05)。结论miR-18a-5p可能通过靶向调控RORA促进结直肠癌的进展;miR-18a-5p/RORA调控通路可能参与了结直肠癌免疫微环境的塑造,是结直肠癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 mir-18a-5p RORA 结直肠癌 增殖
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齐墩果酸通过miR-18a-5p/STK4轴抑制白血病K562细胞恶性进展
2
作者 谢波 来永巍 +3 位作者 韩旭 徐岩 王迪迪 张鹏霞 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期708-720,共13页
慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是由于骨髓造血干细胞的恶性增生导致的疾病。虽然酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors,TKI)对慢性粒细胞性白血病的治疗取得长足进展,但耐药问题仍未解决。因此,寻找新的治疗... 慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)是由于骨髓造血干细胞的恶性增生导致的疾病。虽然酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitors,TKI)对慢性粒细胞性白血病的治疗取得长足进展,但耐药问题仍未解决。因此,寻找新的治疗药物和靶点十分关键。有研究表明,miRNAs与慢性粒细胞白血病在内的多种肿瘤有密切联系,齐墩果酸(oleanolic acid,OA)对白血病细胞有较好的抑制效果。通过对转录物组测序结果发现,齐墩果酸可以显著上调丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶4(serine/threonine-protein kinase 4,STK 4)的水平,而miR1a-5p是STK 4的靶miRNA。因此,本文旨在探究齐墩果酸是否可以通过miR-18a-5p/STK4影响K562细胞恶性进展。K562细胞经齐墩果酸处理后差异表达基因富集在凋亡相关通路上。EdU实验和CCK-8实验结果发现,齐墩果酸降低K562细胞增殖能力(P<0.05)。qRT-PCR,免疫荧光和Western印迹结果显示,齐墩果酸处理后,K562细胞中STK 4蛋白质水平表达显著上调(P<0.05),miR-18a-5p表达下调(P<0.05)。在细胞中转染miR-18a-5p mimics,能显著抑制STK 4的表达(P<0.05);转染miR-18a-5p inhibitor能显著增加STK 4的表达(P<0.05)。活性氧(reactive oxygen species、ROS)检测和线粒体膜电位检测结果显示,齐墩果酸可以促进K562细胞中ROS的增加,降低线粒体膜电位。过表达STK 4后,与Vector组相比,细胞的线粒体膜电位下降;敲降STK 4可以逆转齐墩果酸组导致的线粒体膜电位下降。流式细胞术检测显示,齐墩果酸能明显促进细胞凋亡的发生,而转染miR-18a-5p mimics后凋亡率显著下调(P<0.05);过表达STK 4可以促进细胞从早期凋亡向晚期凋亡转化,而同时转染miR-18a-5p mimics可以抑制这一现象。我们的研究结果证实,齐墩果酸可以通过维持miR-18a-5p的低表达和保持STK 4的高表达状态来促进K562细胞的凋亡。 展开更多
关键词 齐墩果酸 K562 mir-18a-5p 丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶4 细胞凋亡
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circDCUN1D4调节miR-18a-5p/FBP1轴对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响
3
作者 史春辉 蔺建平 吴超 《局解手术学杂志》 2024年第1期19-24,共6页
目的探讨环状RNA(circRNA)DCUN1D4调节微小RNA(miR)-18a-5p/果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)轴对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法选取人肺癌细胞系(H1975、H1650、A549、SPCA-1)和人正常肺表皮细胞(HPL-1),qRT-PCR检测各种细胞中cir... 目的探讨环状RNA(circRNA)DCUN1D4调节微小RNA(miR)-18a-5p/果糖-1,6-二磷酸酶1(FBP1)轴对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法选取人肺癌细胞系(H1975、H1650、A549、SPCA-1)和人正常肺表皮细胞(HPL-1),qRT-PCR检测各种细胞中circDCUN1D4、miR-18a-5p、FBP1 mRNA表达水平。取对数生长期的A549细胞并分为空白组、circDCUN1D4过表达质粒(circDCUN1D4)组、过表达质粒阴性对照(NC)组、circDCUN1D4+miR-18a-5p模拟物阴性对照(circDCUN1D4+mimics NC)组、circDCUN1D4+miR-18a-5p模拟物(circDCUN1D4+miR-18a-5p mimics)组。CCK-8法检测各组A549细胞活力,流式细胞术检测各组A549细胞凋亡水平,qRT-PCR检测各组A549细胞中circDCUN1D4、miR-18a-5p、FBP1 mRNA表达水平,Western blot检测各组A549细胞中FBP1、caspase-3、Ki67、增殖细胞核抗原(PCNA)及程序性死亡分子配体-1(PD-L1)表达水平,双荧光素酶实验验证miR-18a-5p分别与circDCUN1D4、FBP1的靶向关系。结果与HPL-1细胞相比,人肺癌细胞系中circDCUN1D4、FBP1 mRNA表达显著下降(P<0.05),miR-18a-5p表达显著增加(P<0.05)。miR-18a-5p分别与circDCUN1D4、FBP1存在靶向关系。与空白组、NC组相比,circDCUN1D4组细胞24 h和48 h的OD值、Ki67、PCNA、miR-18a-5p、PD-L1表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、circDCUN1D4、FBP1、caspase-3表达显著增加(P<0.05);过表达miR-18a-5p逆转了circDCUN1D4对肺癌细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05)。结论circDCUN1D4过表达可以促进肺癌细胞凋亡,抑制肺癌细胞增殖及免疫逃逸,其作用机制可能与调控miR-18a-5p/FBP1轴有关。 展开更多
关键词 circDCUN1D4 mir-18a-5p/FBP1轴 肺癌 增殖 凋亡 免疫逃逸
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lncRNA MGP-AS2通过miR-18a/Wnt/β-catenin轴抑制膀胱癌的进展
4
作者 胡国森 杨凌博 +1 位作者 李小辉 盖强强 《医学研究杂志》 2024年第9期38-44,共7页
目的探讨膀胱癌组织中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)MGP-AS2表达与膀胱癌患者生存期的关系,研究MGP-AS2对膀胱癌细胞生物学功能的影响及可能机制。方法采用TANRIC数据库分析膀胱癌组织中MGP-AS2表达及其与患者生存期的关... 目的探讨膀胱癌组织中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)MGP-AS2表达与膀胱癌患者生存期的关系,研究MGP-AS2对膀胱癌细胞生物学功能的影响及可能机制。方法采用TANRIC数据库分析膀胱癌组织中MGP-AS2表达及其与患者生存期的关系。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测MGP-AS2在膀胱癌细胞系中的表达水平。将MGP-AS2过表达质粒和阴性对照(negative control,NC)质粒分别转染至膀胱癌5637细胞,分别作为MGP-AS2组和NC组。平板克隆实验、细胞划痕实验以及Transwell实验分别分析过表达MGP-AS2对膀胱癌5637细胞增殖、迁移和侵袭的影响。双荧光素酶报告基因实验验证MGP-AS2和miR-18a之间的靶向结合。TANRIC数据库分析膀胱癌组织中MGP-AS2和miR-18a表达的相关性。RT-qPCR法检测过表达MGP-AS2对膀胱癌5637细胞中miR-18a表达的影响。Western blot法检测过表达MGP-AS2对膀胱癌5637细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达的影响。结果膀胱癌组织中MGP-AS2表达水平显著低于正常膀胱组织(P<0.01)。MGP-AS2高表达患者的总生存期和无病生存期均显著长于MGP-AS2低表达患者(P<0.01)。膀胱癌细胞系中MGP-AS2表达水平均低于SV-HUC-1细胞(P<0.05),MGP-AS2表达最低的膀胱癌细胞是5637细胞(P<0.01)。与NC组比较,过表达MGP-AS2可显著抑制膀胱癌5637细胞的增殖、迁移以及侵袭能力(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实MGP-AS2可靶向结合miR-18a(P<0.01)。与NC组比较,过表达MGP-AS2可下调miR-18a的表达(P<0.01)。过表达MGP-AS2后,膀胱癌5637细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白均下调(P<0.01)。结论膀胱癌中MGP-AS2呈低表达,MGP-AS2表达量与膀胱癌患者的预后相关,MGP-AS2可能通过吸附miR-18a抑制Wnt/β-catenin信号通路转导,从而抑制膀胱癌的进展。 展开更多
关键词 膀胱癌 MGP-AS2 mir-18a 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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MiR-18a-5p通过介导自噬加重同型半胱氨酸诱导的心肌损伤 被引量：3
5
作者 尹绢 胡龙龙 +3 位作者 韩雪玲 陈露 余玲玲 卢寅辉 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期24-33,共10页
目的:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平是心脑血管疾病的独立危险因素。MiR-18a-5p是微RNA(microRNA,miR)家族中的重要成员,与心血管疾病密切相关。本研究旨在探讨miR-18a-5p对Hcy损伤心肌细胞的影响。方法:对H9c2细胞进行miR-18a... 目的:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平是心脑血管疾病的独立危险因素。MiR-18a-5p是微RNA(microRNA,miR)家族中的重要成员,与心血管疾病密切相关。本研究旨在探讨miR-18a-5p对Hcy损伤心肌细胞的影响。方法:对H9c2细胞进行miR-18a-5p模拟物(mimic)/miR-18a-5p mimic阴性对照(negative control,NC)转染或与Hcy联合干预,另设未处理细胞作为对照组。采用实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription PCR,real-time RT-PCR)验证转染效率,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubuleassociated protein 1 light chain 3,LC3)-I、LC3-Ⅱ、Beclin1、p62、Bax、Bcl-2和Notch2的蛋白质表达水平,双荧光素酶报告分析检测miR-18a-5p与Notch2的相互作用。结果:与对照组相比,Hcy或转染miR-18a-5p mimic单独处理,或转染miR-18a-5p mimic/miR-18a-5p mimic NC与Hcy联合干预均显著降低H9c2细胞的活力,增加H9c2细胞的凋亡率和ROS的生成,上调Bax和Beclin1的蛋白质表达水平,下调Bcl-2、p62和Notch2的蛋白质表达水平,同时使LC3-Ⅱ/LC3-I值增加(均P<0.05)。与miR-18a-5p mimic NC和Hcy联合干预相比,miR-18a-5p mimic和Hcy联合干预的H9c2细胞上述指标的改变更显著,且2组之间差异有统计学意义(均P<0.05)。Notch2与miR-18a-5p存在靶向结合。结论:MiR-18a-5p通过增加心肌细胞内ROS的生成,诱导自噬和凋亡,加重Hcy诱导的心肌损伤。Notch2是miR-18a-5p的作用靶点。 展开更多
关键词 mir-18a-5p 心肌损伤 同型半胱氨酸 活性氧 自噬 NOTCH2
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肝癌患者血清miR-126、miR-155、miR-18b变化及其临床意义
6
作者 刘俊华 李广明 李琤 《实用癌症杂志》 2023年第12期2029-2033,共5页
目的探究肝癌患者血清miR-126、miR-155、miR-18b变化及其临床意义。方法选取120例HCC患者作为研究对象,另外选取同期120例肝脏良性病变患者作为对照组。采用荧光定量PCR法检测两组血清miR-126、miR-155、miR-18b水平,采用ROC曲线分析mi... 目的探究肝癌患者血清miR-126、miR-155、miR-18b变化及其临床意义。方法选取120例HCC患者作为研究对象,另外选取同期120例肝脏良性病变患者作为对照组。采用荧光定量PCR法检测两组血清miR-126、miR-155、miR-18b水平,采用ROC曲线分析miR-126、miR-155、miR-18b水平与HCC患者早期诊断及预后评估的关系。结果HCC组血清miR-126指标水平低于对照组,且miR-155、miR-18b指标水平高于对照组(P<0.05);血清miR-126、miR-155、miR-18b对于HCC患者早期诊断的联合测定AUC(0.920)高于miR-126、miR-155及miR-18b的单独测定的AUC(0.780、0.869、0.741)(P<0.05);预后良好组血清miR-126指标水平高于预后不良组,且miR-155、miR-18b指标水平低于预后不良组(P<0.05);血清miR-126、miR-155、miR-18b对HCC患者的预后评估的联合测定AUC(0.854)高于miR-126、miR-155及miR-18b的单独测定的AUC(0.754、0.746、0.676)(P<0.05);年龄、肿瘤直径、TNM分期及淋巴结转移是HCC患者预后复发的影响因素(P<0.05);miR-155≥0.402(OR=29.371,P=0.000)、miR-18b≥0.344(OR=4.609,P=0.016)均为影响HCC患者预后的独立危险因素,miR-126≥0.431(OR=0.010,P=0.000)为影响HCC患者预后的有利因素。结论miR-126、miR-155、miR-18b联合检测可作为HCC早期诊断和预后评估的有效指标。 展开更多
关键词 mir-126 mir-155 mir-18b 肝癌 诊断 预后
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高危型HPV感染对宫颈阴道微生态菌群及miR-222、miR-18a表达的影响 被引量：11
7
作者 李阳芳 程群仙 +4 位作者 徐灵 李航 杨杰 倪秀文 卢雨晴 《临床和实验医学杂志》 2023年第4期389-393,共5页
目的分析高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染对宫颈阴道微生态菌群及miR-222、miR-18a表达的影响。方法前瞻性选取2020年1月至2021年5月复旦大学附属闵行医院妇产科门诊随机行宫颈筛查的妇女共1500例,均行HPV检测,根据是否感染,分为HR-HPV... 目的分析高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染对宫颈阴道微生态菌群及miR-222、miR-18a表达的影响。方法前瞻性选取2020年1月至2021年5月复旦大学附属闵行医院妇产科门诊随机行宫颈筛查的妇女共1500例,均行HPV检测,根据是否感染,分为HR-HPV阴性组(n=1338)和HR-HPV阳性组(n=162)。采用PCR法检测宫颈和阴道脱落细胞中HR-HPV的感染情况;DNA探针技术检测阴道分泌物中加德纳细菌(BV)、霉菌(VVC)和滴虫(TV)感染情况;阴道微生态检测仪Unit-500检测过氧化氢(H_(2)O_(2))、唾液酸苷酶和白细胞酯酶;实时定量荧光PCR检测miR-222和miR-18a的表达;Spearman法分析阴道微生态和miR-222、miR-18a的相关性。采用单因素和多因素Logistic回归模型分析HR-HPV感染的影响因素。结果1500例筛查人群中,检出的HR-HPV感染者162例,HPV16检出率最高,为91例,占比56.17%。HR-HPV阳性组受试者菌群多样性Ⅱ~Ⅲ级比率、BV阳性率、H_(2)O_(2)阳性率为33.95%、30.86%、95.06%,均显著高于HR-HPV阴性组(25.64%、20.25%、89.91%),差异均有统计学意义(P<0.05),两组VVC、TV、唾液酸苷酶和白细胞酯酶比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HR-HPV阳性组中miR-222和miR-18a的表达量为2.73±0.46、3.11±0.52,明显高于HR-HPV阴性组(0.56±0.08、0.82±0.13),差异有统计学意义(P<0.05)。BV阳性率和miR-222、miR-18a呈正相关(r=0.397、0.256,P<0.05),H_(2)O_(2)阳性率与miR-222、miR-18a也呈正相关(r=0.321、0.373,P<0.05)。单多因素回归分析结果显示,BV阳性率、H_(2)O_(2)阳性率、miR-222、miR-18a是影响HR-HPV感染危险因素(OR=1.963,95%CI=1.032~3.735;OR=1.671,95%CI=0.584~4.779;OR=1.296,95%CI=0.802~2.094;OR=1.374,95%CI=1.003~2.753,P<0.05)。结论HR-HPV感染患者的微生态环境紊乱,miR-222、miR-18a的表达明显升高,且BV阳性率、H_(2)O_(2)阳性率、miR-222、miR-18a是影响HR-HPV感染危险因素。治疗中了解HR-HPV感染的危险因素,有利于针对HR-HPV感染患者制定个体化治疗方案。 展开更多
关键词 高危型人乳头瘤病毒 宫颈阴道微生态 mir-222 mir-18a
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miR-184在葡萄膜炎发病过程中对白细胞介素-18和TLR-8表达的调控作用机制
8
作者 王春燕 魏婧 郑艳菲 《生命科学仪器》 2023年第S01期28-28,30,共2页
目的:检测miR-1、miR184与多巴胺转运体在多巴胺细胞系SH-SY5Y内的表述,研究miR、miR-184在SH-SY5Y细胞系中对DAT基因表述的作用与其体制。方法:使用microRNA.org、miRBase、TargetScan.等网络数据库预估与文献检索相融合的模式,选择可... 目的:检测miR-1、miR184与多巴胺转运体在多巴胺细胞系SH-SY5Y内的表述,研究miR、miR-184在SH-SY5Y细胞系中对DAT基因表述的作用与其体制。方法:使用microRNA.org、miRBase、TargetScan.等网络数据库预估与文献检索相融合的模式,选择可以作用于DAT基因的候补miRNAs,并化学合成候补miRNAs模拟物转染到SH-SY5Y细胞内。依次转染后12h与24h后,提炼NC-mimics组、NC-inhibitor组、miRNAs mimics组与miRNAs inhibitor组细胞总RNA与蛋白;使用实时荧光定量RT-PCR检测各组细胞内的候补miRNA、DATmRNA表述情况;使用Western Blot检测各组细胞内DAT蛋白表述水平。结果:(1)通过生物信息理论检测融合检索资料选择出的候补miRANs是miR-1、miR-184;(2)miRNAs表述水平:miR-1 mimics 12h组与miR-1 mimics 24h组的miR-1表述量明显超过对照组(Ps<0.001),miR-1 inhibitor 12h组、miR-1 inhibitor 24h组合对照组比较没有明显差异(Ps>0.05);miR-184 mimics24h处理组中miR-184的表述量和对照组比较都有明显差异(P<0.01),miR-184 inhibitor 12h、miR-184 mimics12h与miR-184 inhibitor 24h处理组与对照组比较并无明显差异(Ps>0.05);(3)DATmRNA表述水平:miR-1 mimics 12h处理组内DAT mRNA的表述量和对照组比较有明显差异(P<0.05),miR-1 mimics 24h、miR-1 inhibitor 12h组与miR-1inhibitor 24h组DAT mRNA的表述量和对照组比较都缺乏明显差异(Ps>0.05),miR-184 mimics 12h组、miR-184 inhibitor 12h组与miR-184 inhibitor 24h组DAT mRNA的表述量和对照组比较都缺乏明显差异(Ps<0.05)。结论miR-1、miR-184参加SH-SY5Y细胞内DAT基因表述的控制,过表达的miR-1与miR-184都能压抑SH-SY5Y细胞内的DAT蛋白的表述。 展开更多
关键词 mir-184 葡萄膜炎 白细胞介素-18和TLR-8 调控作用机制
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miR-18a通过阻断TLR4/NF-κB通路减轻小鼠过敏性鼻炎的炎症和组织损伤 被引量：1
9
作者 杨君 李清韵 +1 位作者 王露 谢慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期680-685,共6页
目的探究微小RNA-18a(miR-18a)在小鼠过敏性鼻炎发病过程中的作用。方法22只BALB/c小鼠被随机分为空白组、模型组及miR-18a组。模型组和miR-18a组小鼠采用腹腔注射卵清蛋白(OVA)混悬液的方法制备过敏性鼻炎模型,miR-18a组小鼠同时给予... 目的探究微小RNA-18a(miR-18a)在小鼠过敏性鼻炎发病过程中的作用。方法22只BALB/c小鼠被随机分为空白组、模型组及miR-18a组。模型组和miR-18a组小鼠采用腹腔注射卵清蛋白(OVA)混悬液的方法制备过敏性鼻炎模型,miR-18a组小鼠同时给予过表达miR-18a的慢病毒载体质粒。采用行为学评分及HE染色评价各组小鼠过敏症状及形态学变化,ELISA检测血浆白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,免疫荧光组织化学染色检测小鼠鼻黏膜组织CD45^(+)细胞浸润情况,流式细胞术检测鼻腔灌洗液CD45^(+)细胞数量,荧光定量PCR检测鼻黏膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平,Western blot法检测鼻黏膜组织Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)、NF-κB抑制物α(IκBα)、磷酸化的IκBα(p-IκBα)的蛋白表达。结果与空白组相比,模型组小鼠血浆IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著增高,鼻黏膜组织及鼻腔灌洗液CD45^(+)细胞数量增多,鼻黏膜组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平及TLR4、NF-κB p65、p-IκBα表达水平升高;与模型组相比,miR-18a组小鼠血浆中IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低,鼻黏膜组织及鼻腔灌洗液CD45^(+)细胞数量减少,鼻黏膜组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平及TLR4、NF-κB p65、p-IκBα表达水平降低。结论miR-18a能够通过阻断TLR4/NF-κB通路抑制小鼠过敏性鼻炎的发生和发展。 展开更多
关键词 mir-18a 过敏性鼻炎 炎症因子 Toll样受体4(TLR4) 核因子κB抑制物α(IκBα)
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circVRK1/miR-18b-5p轴调控结直肠癌细胞增殖、迁移和凋亡
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作者 应成龙 陈华斌 吴剑 《中国现代医生》 2023年第1期60-66,共7页
目的探讨circVRK1/miR-18b-5p轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法实时定量聚合酶链式反应检测53例结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中circVRK1和miR-18b-5p表达。体外培养结直肠癌LoVo细胞,双荧光素酶报告基因实验验证circVRK1... 目的探讨circVRK1/miR-18b-5p轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法实时定量聚合酶链式反应检测53例结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中circVRK1和miR-18b-5p表达。体外培养结直肠癌LoVo细胞,双荧光素酶报告基因实验验证circVRK1与miR-18b-5p的调控关系。分别转染pcDNA-circVRK1、miR-18b-5p inhibitor,或共转染pcDNA-circVRK1与miR-18b-5p mimic至LoVo细胞,采用CCK-8法、克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术、蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、迁移、凋亡、蛋白(cleaved-caspase3、Bax、Bcl-2)表达。结果结直肠癌组织中的circVRK1表达量显著低于癌旁组织(P<0.05),miR-18b-5p表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。circVRK1可靶向结合miR-18b-5p,且过表达circVRK1抑制LoVo细胞中miR-18b-5p的表达。过表达circVRK1或敲减miR-18b-5p后,LoVo细胞的抑制率、凋亡率、cleaved-caspase3、Bax蛋白表达升高(P<0.05),克隆形成数、划痕愈合率、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。过表达miR-18b-5p导致过表达circVRK1对LoVo细胞增殖、迁移和凋亡的影响降低。结论结直肠癌组织中circVRK1呈低表达;过表达circVRK1可通过靶向抑制miR-18b-5p降低结直肠癌细胞的增殖和迁移能力,并加剧结直肠癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 circVRK1 mir-18b-5p 增殖 迁移 凋亡
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miR-18a对于成肌细胞胶原蛋白表达的影响
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作者 刘戈辉 杨玉凤 +2 位作者 刘佳夷 姜志艳 刘春城 《科学技术与工程》 北大核心 2023年第6期2339-2346,共8页
细胞外基质是骨骼肌微环境的重要组成,基质中胶原蛋白的过量表达,会导致骨骼肌纤维化,因此研究miR-18a对于成肌细胞胶原蛋白表达的影响具有重要意义。利用实时荧光定量PCR、细胞划痕、组织切片苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin stai... 细胞外基质是骨骼肌微环境的重要组成,基质中胶原蛋白的过量表达,会导致骨骼肌纤维化,因此研究miR-18a对于成肌细胞胶原蛋白表达的影响具有重要意义。利用实时荧光定量PCR、细胞划痕、组织切片苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, HE)染色等方法检测了肌肉损伤修复模型中miR-18a及胶原蛋白基因的表达变化以及在成肌细胞C2C12中过表达miR-18a模拟物后对胶原蛋白基因表达、细胞迁移和成肌细胞转分化的影响。结果表明,miR-18a及胶原蛋白的表达量会响应骨骼肌的损伤修复过程。在成肌细胞中,miR-18a的过表达会抑制胶原蛋白相关基因的表达。但miR-18a的过表达并不影响成肌细胞的迁移和向骨的转分化。因此miR-18a对于细胞外基质相关基因的研究,可以为骨骼肌损伤修复的治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 细胞外基质 mir-18a 肌肉损伤修复 迁移 转分化
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鼻咽癌中miR-18a和缺氧诱导因子-1α的表达及其与放疗敏感性和预后的相关性
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作者 夏新叶 张远航 +1 位作者 李向垒 姜清芳 《实用癌症杂志》 2023年第9期1444-1448,共5页
目的探究鼻咽癌中miR-18a和缺氧诱导因子-1α的表达及其与放疗敏感性和预后的相关性。方法选取鼻咽癌患者91例。根据放疗敏感性的不同将患者分为放疗敏感组(n=24)和放疗抵抗组(n=67)。结果miR-18表达水平与鼻咽癌患者年龄、性别、T分期... 目的探究鼻咽癌中miR-18a和缺氧诱导因子-1α的表达及其与放疗敏感性和预后的相关性。方法选取鼻咽癌患者91例。根据放疗敏感性的不同将患者分为放疗敏感组(n=24)和放疗抵抗组(n=67)。结果miR-18表达水平与鼻咽癌患者年龄、性别、T分期、M分期、N分期以及临床分期等临床参数无关(P>0.05);HIF-1α表达水平与鼻咽癌患者年龄、性别、T分期、M分期以及N分期等临床参数无关(P>0.05),但是与临床分期有关(P<0.05)。统计学分析两组年龄、性别、T分期、M分期、N分期以及临床分期的差异无统计学意义(P>0.05),化疗敏感组miR-18a、HIF-1α的表达水平明显低于化疗抵抗组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果发现,miR-18a、HIF-1α表达水平与放疗敏感性有关(P<0.05)。统计学分析发现复发、远处转移以及死亡患者的miR-18a、HIF-1α表达水平明显高于无复发、远处转移以及生存患者(P<0.05)。结论鼻咽癌患者miR-18a和缺氧诱导因子-1α水平与放疗敏感性有关,为今后探索鼻咽癌的预后指标提供了一定的参考依据。 展开更多
关键词 鼻咽癌 mir-18a 缺氧诱导因子-1Α 放疗敏感性
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miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建 被引量：3
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作者 常利红 黄子真 +4 位作者 黄健聪 王君 陈晓红 赖晓萍 张革化 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期119-129,共11页
【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获... 【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获得重组miR-18a过表达及抑制表达的慢病毒载体,感染人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2,嘌呤霉素筛选获得稳定干扰miR-18a表达及过表达miR-18a的细胞系,PCR及western blot鉴定。【结果】成功构建真核表达的慢病毒miR-18a干扰载体及过表达载体,滴度均为3×10~8TU/mL;转染miR-18a抑制表达的慢病毒载体的CNE1和CNE2中ATM表达增高;与对照病毒转染相比,转染miR-18a过表达慢病毒载体的CNE1(20.3倍,P<0.01)和CNE2(122.5倍,P<0.01)中miR-18a表达显著增高,靶蛋白ATM表达下调。【结论】成功构建人miR-18a慢病毒抑制表达和过表达载体,并获得相应的慢病毒稳转人鼻咽癌细胞株。 展开更多
关键词 mir-18a 慢病毒 过表达载体 抑制载体 鼻咽癌细胞
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MiR-18b-5p对大肠癌PTEN/PI3K/Akt2信号通路的调控 被引量：9
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作者 李一鸣 赵娇 +2 位作者 刘娟 杨霄 叶梅 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第15期2092-2096,共5页
目的:探讨miR-18b-5p对大肠癌PTEN/PI3K/Akt2信号转导通路的调控。方法:qRT-PCR方法检测33例大肠癌患者癌组织中miR-18b-5p表达水平,将患者临床病理特征与癌组织miR-18b-5p表达水平进行独立样本t检验和多元线性回归分析。应用microrna.... 目的:探讨miR-18b-5p对大肠癌PTEN/PI3K/Akt2信号转导通路的调控。方法:qRT-PCR方法检测33例大肠癌患者癌组织中miR-18b-5p表达水平,将患者临床病理特征与癌组织miR-18b-5p表达水平进行独立样本t检验和多元线性回归分析。应用microrna.org预测miR-18b-5p靶基因,miR-18b-5p类似物、抑制物转染肠癌细胞SW480及HCT116,qRT-PCR检测细胞PTEN、PI3K、Akt2 mRNA表达水平。结果:在大肠癌患者癌组织中,miR-18b-5p表达水平显著增高,为癌旁组织的3.6倍(P<0.01),其表达水平与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期相关。Microrna.org预测PTEN可能是miR-18b-5p的靶基因,大肠癌细胞转染类似物后PTEN含量明显降低,其下游基因PI3K、Akt2表达增高。结论:miR-18b-5p下调抑癌基因PTEN表达,诱导PI3K/Akt2信号转导通路持续活化,促进了大肠癌的发生发展。 展开更多
关键词 大肠癌 mir-18b-5p PTEN/PI3K/Akt2
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MiR-18a通过靶定ATM调节白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性 被引量：5
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作者 肖悦 胡蓉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期999-1004,共6页
目的:研究miR-18a调控白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性的分子机制。方法:构建稳定过表达miR-18a的HL-60-pc DNA3.1-miR-18a细胞系,检测其对VP-16和VCR的敏感性;构建ATM 3'UTR区的荧光素酶报告载体,验证miR-18a对ATM的靶向作... 目的:研究miR-18a调控白血病细胞HL-60对VP-16和VCR化疗敏感性的分子机制。方法:构建稳定过表达miR-18a的HL-60-pc DNA3.1-miR-18a细胞系,检测其对VP-16和VCR的敏感性;构建ATM 3'UTR区的荧光素酶报告载体,验证miR-18a对ATM的靶向作用;Western blot检测过表达miR-18a的HL-60细胞内ATM的表达水平;siRNA敲减HL-60细胞中ATM水平,CCK-8检测细胞对VP-16和VCR的敏感性;在稳定过表达miR-18a的HL-60细胞内转染miR-18a inhibitor,Western blot检测ATM的表达水平,并检验细胞对VP-16和VCR的敏感性变化。结果:过表达miR-18a后,用相同浓度的VP-16和VCR处理时HL-60细胞存活率降低;荧光素酶活性检测表明,miR-18a能够抑制ATM的荧光素酶活性;过表达miR-18a后HL-60细胞内ATM的表达降低;敲减ATM后的HL-60细胞经VP-16和VCR处理后存活率降低;转染miR-18a inhibitor后,ATM表达水平显著上调,经VP-16和VCR处理的细胞存活率明显高于对照组。结论:miR-18a能够通过靶定ATM而调控白血病细胞HL-60对VP-16和VCR的敏感性。 展开更多
关键词 mir-18a ATM 白血病 VP-16 VCR
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术后结合替莫唑胺对神经胶质瘤患者血清miR-181b及miR-497的影响 被引量：2
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作者 叶云 支枫 马涛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1226-1228,1251,共4页
目的:分析神经胶质瘤患者术后结合替莫唑胺对血清mi R-181b及mi R-497表达的影响。方法:将收治的76例神经胶质瘤术后患者随机分为A、B两组。其中A组(38例)采用司莫司汀方法治疗,B组(38例)采用司莫司汀联合替莫唑胺的方法治疗。观察比较... 目的:分析神经胶质瘤患者术后结合替莫唑胺对血清mi R-181b及mi R-497表达的影响。方法:将收治的76例神经胶质瘤术后患者随机分为A、B两组。其中A组(38例)采用司莫司汀方法治疗,B组(38例)采用司莫司汀联合替莫唑胺的方法治疗。观察比较两组患者的临床疗效,术后1、2、3年生存率,Karnofsky评分。同时收集患者治疗前、治疗后的血清样本,以检测mi R-181b及mi R-497表达的变化。结果:B组患者的客观有效率明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);B组中位生存期以及术后1、2、3年生存率明显高于A组(P<0.05);B组术后的Karnofsky评分显著高于A组(P<0.05)。术后血清mi R-181b浓度明显提高[术后(162.34±51.79)fmol/L vs.术前(91.37±40.41)fmol/L,P<0.05];术后血清mi R-497明显提高[术后(166.23±53.68)fmol/L vs.术前(88.36±36.72)fmol/L,P<0.05]。结论:术后结合替莫唑胺能够提高神经胶质瘤患者血清mi R-181b及mi R-497的表达,延长患者生存期。 展开更多
关键词 替莫唑胺 神经胶质瘤 mir-181b mir-497
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miR-18a和雌激素受体α在单发及多发子宫肌瘤中的表达 被引量：3
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作者 廖治 肖洪涛 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第9期54-56,共3页
目的检测单发及多发子宫肌瘤组织中miR-18a及雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)的表达,探讨miR-18a与ERα的关系及2者在单发及多发子宫肌瘤发生中的作用。方法采用原位杂交法检测miR-18a在单发及多发子宫肌瘤组织石蜡切片中... 目的检测单发及多发子宫肌瘤组织中miR-18a及雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)的表达,探讨miR-18a与ERα的关系及2者在单发及多发子宫肌瘤发生中的作用。方法采用原位杂交法检测miR-18a在单发及多发子宫肌瘤组织石蜡切片中的表达;采用免疫组化法检测ERα在单发及多发子宫肌瘤组织石蜡切片的表达。采用相关分析研究miR-18a和ERα的表达相关性。结果多发子宫肌瘤组织中的ERα表达水平均明显高于单发子宫肌瘤组织(P<0.05);但miR-18a水平明显低于单发子宫肌瘤组织(P<0.05);相关分析结果表明,2者表达呈负相关(r单发=-0.4421,r多发=-0.4181)。结论多发性子宫肌瘤中miR-18a的表达更低,ERα表达更高。miR-18a可作为治疗多发性子宫肌瘤的新靶标。 展开更多
关键词 mir-18a 雌激素受体Α 多发子宫肌瘤 单发子宫肌瘤
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miR-18a对结肠癌血管生成的影响 被引量：2
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作者 罗芳 胡铁辉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期37-41,共5页
目的探讨miR-18a对结肠癌血管生成的影响及其机制。方法以用合成的miR-18a模拟物转染人结肠癌细胞系SW620细胞。应用MTT法检测过表达miR-18a对细胞增殖活性的影响。分别用稳转miR-18a的SW620细胞接种建立裸鼠人结肠癌移植瘤模型。每周... 目的探讨miR-18a对结肠癌血管生成的影响及其机制。方法以用合成的miR-18a模拟物转染人结肠癌细胞系SW620细胞。应用MTT法检测过表达miR-18a对细胞增殖活性的影响。分别用稳转miR-18a的SW620细胞接种建立裸鼠人结肠癌移植瘤模型。每周测量瘤体积。5周后麻醉处死裸鼠。免疫组化法检测增殖细胞核标志物Ki 67和血管内皮细胞标志物CD31的表达。应用Western blotting法检测血管生成相关的mTOR通路中mTOR下游靶蛋白S6K1和4E BP1的磷酸化情况,并检测肿瘤组织血管生成相关因子缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长凶子(VEGF)的表达。结果 miR-18a过表达显著降低SW620细胞的增殖能力(P<0.01)。并且,该基因对裸鼠人结肠癌移植瘤有明显的生长抑制作用,SW620组瘤体显著减小,抑瘤率达71.8%(P<0.01)。免疫组化检测显示,miR-18a显著抑制细胞增殖核抗原蛋白Ki-67(P<0.01)和血管内皮细胞标记物CD31(P<0.05)的表达。Western blot法检测显示,miR-18a显著抑制S6K(IP<0.01)和4E-BP(IP<0.05)的磷酸化,而且抑制肿瘤组织中HIF-1α(P<0.05)和VEGF蛋白(P<0.01)的表达。结论过表达miR-18a抑制结肠癌生长和血管生成,这可能与其抑制mTOR/VEGF通路有关,提示过表达miR-18a可能成为结肠癌治疗的新方法。 展开更多
关键词 mir-18a 结肠癌 血管生成
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miR-18b对胃癌细胞凋亡的影响 被引量：3
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作者 王昌正 吴本俨 +1 位作者 王卫华 张文辉 《中华保健医学杂志》 2011年第5期367-369,共3页
目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-18b(miR-18b)对胃癌细胞系SGC-7901凋亡的影响,并对其机制进行初步研究。方法 miR-18b inhibitor对SGC-7901细胞进行转染;流式细胞仪进行细胞凋亡检测;Western blot检测P53、Bcl-2的表达变化。结果在SG... 目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-18b(miR-18b)对胃癌细胞系SGC-7901凋亡的影响,并对其机制进行初步研究。方法 miR-18b inhibitor对SGC-7901细胞进行转染;流式细胞仪进行细胞凋亡检测;Western blot检测P53、Bcl-2的表达变化。结果在SGC-7901细胞中抑制miR-18b的表达,能够促进细胞凋亡,并能降低凋亡相关蛋白P53、Bcl-2的表达。结论 miR-18b在胃癌的发生、发展中起一定作用,其可能通过调节P53、Bcl-2的表达而影响细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA mir-18b 细胞凋亡
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miR-18a表达在HPV感染及宫颈癌发生发展中的意义 被引量：9
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作者 危敏 余海浪 +2 位作者 王涵多 雷洁 韩璐好 《中国妇幼健康研究》 2019年第2期198-202,共5页
目的研究宫颈脱落细胞中miR-18a的表达水平在人乳头状瘤病毒(HPV)感染及宫颈癌发生发展中的意义。方法收集2015年6月至2017年6月深圳市南山区妇幼保健院及广州南方医院门诊及住院患者宫颈脱落细胞标本,通过HPV DNA分型检测将宫颈脱落细... 目的研究宫颈脱落细胞中miR-18a的表达水平在人乳头状瘤病毒(HPV)感染及宫颈癌发生发展中的意义。方法收集2015年6月至2017年6月深圳市南山区妇幼保健院及广州南方医院门诊及住院患者宫颈脱落细胞标本,通过HPV DNA分型检测将宫颈脱落细胞标本分为HPV未感染组(NE-HPV)、低危型HPV感染组(LR-HPV)、高危型HPV感染组(HR-HPV),采用荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测各组间miR-18a相对表达量;收集HR-HPV感染阳性的宫颈脱落细胞标本,依据病理检查结果分为宫颈上皮内瘤变(CIN)组及宫颈癌组各30例,对照组选取年龄、体重配对的30例宫颈上皮细胞正常无化生的标本,采用qRT-PCR检测各组间miR-18a相对表达量,分析miR-18a表达与HPV感染及宫颈癌发生发展的关系。结果 HR-HPV感染组宫颈脱落细胞中miR-18a相对表达量高于LR-HPV组与NE-HPV组,差异均有统计学意义(t值分别为11.144、18.482,均P<0.05);宫颈癌组、CIN组中miR-18a表达较对照组显著增高(t值分别为25.02、15.355,均P<0.05),但宫颈癌组与CIN组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线显示宫颈脱落细胞中miR-18a用于诊断CIN的曲线下面积(AUC)为0.699(95%CI:0.606～0.791,P<0.001),用于诊断宫颈癌的AUC为0.801(95%CI:0.724～0.879,P<0.001)。结论 HR-HPV感染者宫颈脱落细胞中miR-18a相对表达量明显升高,并与宫颈癌的发生发展密切相关。宫颈脱落细胞中miR-18a可能作为宫颈癌或癌前病变潜在标志物用于早期无创诊断。 展开更多
关键词 mir-18a 人乳头状瘤病毒 宫颈脱落细胞 宫颈上皮内瘤变 宫颈癌
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