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miR-192、miR-196a表达与HER-2阴性晚期胃癌患者化疗疗效的相关性
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作者 谷振芳 徐保彬 +2 位作者 张春梅 李伟 周亚青 《中华保健医学杂志》 2024年第4期467-469,共3页
目的 观察人类表皮生长因子受体-2(HER-2)阴性胃癌患者肿瘤组织及血清中miR-192、miR-196a表达水平与氟尿嘧啶类联合奥沙利铂化疗方案近期疗效的关系。方法 收集2020年5月~2023年4月济宁医学院附属医院行Xelox方案或SOX方案化疗晚期胃... 目的 观察人类表皮生长因子受体-2(HER-2)阴性胃癌患者肿瘤组织及血清中miR-192、miR-196a表达水平与氟尿嘧啶类联合奥沙利铂化疗方案近期疗效的关系。方法 收集2020年5月~2023年4月济宁医学院附属医院行Xelox方案或SOX方案化疗晚期胃癌患者93例,根据近期疗效分为敏感组及耐药组。对两组患者肿瘤组织及血浆中miR-192、miR-196a表达量进行比较,采用Spearman法分析表达量与近期疗效的相关性。结果 与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-192及miR-196a均过表达[(0.165±0.061)vs.(0.043±0.009)、(0.338±0.084)vs.(0.057±0.021)],差异有统计学意义(t=19.081、31.297,P<0.05)。敏感组患者组织及血浆中miR-192表达均高于耐药组[(0.214±0.066)vs.(0.119±0.058)、(0.137±0.041)vs.(0.069±0.019)],miR-196a表达均低于耐药组[(0.294±0.071)vs.(0.367±0.093)、(0.229±0.065)vs.(0.273±0.072)],差异有统计学意义(t=7.355、10.713、4.110、3.027,P<0.05)。miR-192表达与化疗敏感度呈正相关,组织及血浆表达相关系数分别为0.577、0.482,miR-196a表达水平与化疗敏感度呈负相关,组织及血浆表达相关系数分别为-0.474、-0.413。患者胃癌组织及血浆中的miR-192、miR-196a呈正相关,相关系数分别为0.784、0.698。结论 HER-2阴性胃癌患者肿瘤组织及血清中miR-192表达水平与SOX、Xelox化疗方案近期疗效正相关,miR-196a的表达水平与SOX、Xelox化疗方案近期疗效负相关。检测血浆miR-192和miR-196a的表达有可能实现耐药的动态监测。 展开更多
关键词 mir-192 mir-196a 胃癌 化疗 相关性
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miR-421和miR-196b-3p在胃癌癌前病变和早期胃癌诊断中的潜在价值 被引量:2
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作者 王文怡 余静恬 甘程 《检验医学与临床》 2024年第6期726-732,共7页
目的研究血浆miR-421和miR-196b-3p作为诊断胃癌癌前病变和早期胃癌新型潜在生物标志物的临床意义。方法(1)发现集:于2018年12月1日至12月31日采集早期胃癌患者(早期胃癌组)、癌前病变患者(癌前病变组)和健康志愿者(NC组)的血浆标本各3... 目的研究血浆miR-421和miR-196b-3p作为诊断胃癌癌前病变和早期胃癌新型潜在生物标志物的临床意义。方法(1)发现集:于2018年12月1日至12月31日采集早期胃癌患者(早期胃癌组)、癌前病变患者(癌前病变组)和健康志愿者(NC组)的血浆标本各3例,用作miRNA微阵列分析。借用TCGA数据证实候选miRNA在癌症组织中的表达。(2)验证集:于2019年1月1日至2023年1月1日共采集90例胃癌患者(胃癌组)、89例癌前病变患者(癌前病变组)和45例健康志愿者(NC组)的血浆标本。通过定量实时聚合酶链反应测定候选miRNA水平。比较各组候选miRNA及常规肿瘤标志物[铁蛋白、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、CA211、CA50、CA125、CA199、CA153、CA242、CA724]水平;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析比较候选miRNA与常规肿瘤标志物的诊断价值。结果(1)发现集:通过miRNA微阵列筛选,与NC组相比,miR-421和miR-196b-3p水平在早期胃癌组和癌前病变组明显上调(P<0.05)。TCGA数据证实,与正常胃黏膜相比,miR-421在胃癌组织中呈高表达(P<0.001)。(2)验证集:与NC组相比,癌前病变组和胃癌组血浆miR-421、miR-196b-3p水平明显上调(P<0.05),且胃癌组血浆miR-421、miR-196b-3p水平高于癌前病变组(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,血浆miR-421对胃癌的诊断价值最高,曲线下面积(AUC)为0.931(95%CI:0.889~0.972),高于CEA、CA125、CA199、CA724、CA211、CA50诊断胃癌的AUC(P<0.05);miR-196b-3p诊断胃癌的AUC[0.804(95%CI:0.733~0.875)]也高于CEA、CA125、CA199和CA724诊断胃癌的AUC(P<0.05);miR-421和miR-196b-3p也可用于早期胃癌诊断,AUC分别为0.942(95%CI:0.886~0.997)和0.809(95%CI:0.708~0.910);血浆miR-421和miR-196b-3p诊断癌前病变的AUC分别为0.788(95%CI:0.714~0.863)和0.648(0.556~0.741),miR-421诊断癌前病变的AUC均高于miR-196b-3p、铁蛋白、CA50诊断癌前病变的AUC(P<0.05)。血浆miR-421和miR-196b-3p在胃癌Ⅰ期病例中的水平与Ⅱ、Ⅲ/Ⅳ期相比,差异无统计学意义(P>0.05),但在胃癌发病早期(Ⅰ~Ⅱ期)的水平明显高于NC组和癌前病变组(P<0.05)。结论血浆miR-421和miR-196b-3p在早期胃癌患者中过表达,有希望成为诊断癌前病变和早期胃癌的新型生物标志物。 展开更多
关键词 早期诊断 癌前病变 mir-421 mir-196b-3p miRNA微阵列 胃癌
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慢性肾脏病患者治疗前后血清miR-30a-5p和miR-196a水平变化及价值 被引量:1
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作者 朱媛媛 徐天 +2 位作者 于茜 孙伟 顾万建 《临床检验杂志》 CAS 2023年第5期340-344,共5页
目的检测并分析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者治疗前、连续治疗不同随访时间点血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平动态变化,探讨其作为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的价值。方法收集江苏省中医院肾内科2015年4月至2... 目的检测并分析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者治疗前、连续治疗不同随访时间点血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平动态变化,探讨其作为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的价值。方法收集江苏省中医院肾内科2015年4月至2016年2月就诊的20例CKD患者治疗前以及连续治疗并随访3~6个月的血清标本,记录患者血生化及尿液指标,同时收集23例体检健康者血清标本作为对照。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平。采用非参数检验、Spearman秩相关分析血清miR-30a-5p和miR-196a-5p的水平变化及临床应用价值。结果与健康人对照相比,CKD患者治疗前血清miR-30a-5p[0.563(0.324,1.737)vs 0.270(0.127,0.435),U=100.5,P=0.004]和miR-196a-5p[0.423(0.154,1.270)vs 0.121(0.056,0.168),U=74,P=0.0003]水平显著升高。与CKD患者治疗前相比,CKD患者血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平从治疗后第3个月开始呈持续降低趋势,至第6个月,其miR-30a-5p[0.344(0.128,0.672)vs 0.563(0.324,1.737),P=0.020],miR-196a-5p[0.227(0.079,0.474)vs 0.423(0.154,1.270),P=0.030]水平与治疗前比较差异有统计学意义。Spearman相关性分析显示,血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平与估算的肾小球滤过率(eGFR)呈显著负相关(r=-0.223,P=0.013;r=-0.191,P=0.035)。结论CKD患者血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平检测有助于反映肾脏功能,具备成为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的潜能。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 辅助诊断 mir-30a-5p mir-196a-5p 分子标志物
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miR-196b-5p促进成肌细胞增殖分化 被引量:2
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作者 吴玲玲 张小玉 +3 位作者 李晓 靳建军 杨公社 史新娥 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期435-446,共12页
MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,在动植物中参与转录后基因表达调控。大量研究表明,miRNA调控骨骼肌的发育,主要表现在肌卫星细胞的激活及增殖、分化、肌管的形成等生物学过程。本实验室... MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,在动植物中参与转录后基因表达调控。大量研究表明,miRNA调控骨骼肌的发育,主要表现在肌卫星细胞的激活及增殖、分化、肌管的形成等生物学过程。本实验室前期对大白猪背最长肌(longissimus dorsi,LD)和比目鱼肌(soleus muscle,Sol)进行miRNA测序,筛选鉴定到一个在不同骨骼肌中差异表达并且序列高度保守的miR-196b-5p,目前miR-196b-5p在骨骼肌方面的研究尚未见报道。本研究进一步设计合成miR-196b-5p mimics和inhibitor对C2C12细胞进行miR-196b-5p过表达及干扰表达,利用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR检测、流式细胞术、免疫荧光染色等方法探究miR-196b-5p对成肌细胞增殖分化的影响,并利用生物信息学预测和双荧光素酶报告系统鉴定了miR-196b-5p的靶基因。结果显示,过表达miR-196b-5p显著增加细胞周期基因Cyclin B、Cyclin D和Cyclin E的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);流式细胞周期检测结果显示,过表达miR-196b-5p显著增加S期细胞比例(P<0.05),表明miR-196b-5p能够加快细胞周期进程;EdU染色结果显示,过表达miR-196b-5p显著促进细胞增殖能力;相反,抑制miR-196b-5p的表达可以显著减弱成肌细胞增殖能力。进一步的功能研究发现,过表达miR-196b-5p能够显著增加成肌标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达水平(P<0.05);MyHC免疫荧光染色结果显示miR-196b-5p可以促进成肌细胞肌管形成,表明miR-196b-5p可以促进成肌细胞分化。生物信息学预测和双荧光素酶实验证明miR-196b-5p可以靶向Sirt1基因,抑制该基因的表达。改变Sirt1表达,不能够挽救miR-196b-5p影响细胞周期的表型,可以减弱miR-196b-5p对成肌细胞分化的促进作用,表明miR-196b-5p通过靶向Sirt1促进成肌细胞分化。 展开更多
关键词 mir-196b-5p 成肌细胞 增殖 分化 SIRT1
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miR-196a在剑白香猪不同颜色皮肤组织中的表达及靶基因预测
5
作者 蒙泽飞 陈伟 +4 位作者 陈龙 杨帅 刘英渠 朱红橙 罗文怡 《贵州畜牧兽医》 2023年第6期9-13,共5页
为探究miR-196a在剑白香猪不同颜色皮肤组织中的表达及其靶基因的富集情况,试验采集剑白香猪的白色和黑色皮肤组织,采用qRT-PCR技术检测2种颜色皮肤组织中miR-196a的表达水平,运用MEGA11软件比对分析miR-196a与其他物种间的保守性,通过... 为探究miR-196a在剑白香猪不同颜色皮肤组织中的表达及其靶基因的富集情况,试验采集剑白香猪的白色和黑色皮肤组织,采用qRT-PCR技术检测2种颜色皮肤组织中miR-196a的表达水平,运用MEGA11软件比对分析miR-196a与其他物种间的保守性,通过在线软件PicTar、TargetScan预测其靶基因,利用DAVID数据库对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果:miR-196a在剑白香猪白色皮肤组织中的表达量极显著高于黑色皮肤组织(P<0.01);GO功能分析表明,生物过程、细胞定位、分子功能分别富集于38、13、27个条目;KEGG通路富集分析表明,miR-196a靶基因主要富集于蛋白质消化吸收、癌症miRNAs、黑色素生成等通路,其中黑色素生成通路包括NRAS、ADCY9、CALM3基因。结论:推测miR-196a与剑白香猪皮肤颜色遗传相关。 展开更多
关键词 剑白香猪 皮肤组织 mir-196a表达 靶基因预测
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miR-196b靶向ERG促进肺腺癌的增殖和迁移
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作者 刘邦卿 李剑锋 +2 位作者 刘晓辉 张劲男 梁金屏 《昆明医科大学学报》 CAS 2023年第10期83-91,共9页
目的探究miR-196b影响肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)进展的机制。方法通过TCGA数据库分析miR-196b在LUAD组织中的表达水平,利用TargetScan预测其下游靶基因并用双荧光素酶实验进行验证,qRT-PCR检测miR-196b和ETS相关基因(ETS-relate... 目的探究miR-196b影响肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)进展的机制。方法通过TCGA数据库分析miR-196b在LUAD组织中的表达水平,利用TargetScan预测其下游靶基因并用双荧光素酶实验进行验证,qRT-PCR检测miR-196b和ETS相关基因(ETS-related gene,ERG)在LUAD细胞系中的表达情况,MTT、划痕愈合和Transwell实验分别检测不同处理后LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭能力的变化情况。结果miR-196b在LUAD中高表达(P=3.50e-17)并靶向负调控ERG,过表达miR-196b能够促进LUAD细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05),回复实验证实miR-196b/ERG调控轴能够影响LUAD细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。结论miR-196b靶向ERG促进LUAD进展的分子机制,对开发LUAD新的临床治疗方法具有潜在意义。 展开更多
关键词 mir-196b ERG 肺腺癌 增殖 迁移
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miR-196a通过PI3K/AKT信号通路促进口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭
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作者 宋洪宁 崔硕 +1 位作者 雷印涛 刘敏 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第17期4255-4260,共6页
目的通过实验分析正常人口腔角质形成细胞(HOK)和口腔鳞状细胞癌细胞系(SCC)9细胞中miR-196a表达的差异性,并对miR-196a在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路促进肿瘤发生进行研究。方法通过qRT... 目的通过实验分析正常人口腔角质形成细胞(HOK)和口腔鳞状细胞癌细胞系(SCC)9细胞中miR-196a表达的差异性,并对miR-196a在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路促进肿瘤发生进行研究。方法通过qRT-聚合酶链反应(PCR)法分析HOK、SCC9细胞中miR-196a的相对表达量;对SCC9转染miR-196a inhibitor,MTT、Transwell侵袭实验分为空白对照(control)组、阴性对照(inbibitor-NC)组、miR-196a inhibitor组,检测转染后细胞增殖、侵袭能力的改变,通过Western印迹研究经转染后PI3K/AKT信号通路相关蛋白的变化;采用生物信息学、Western印迹方法预测分析靶标蛋白叉头盒蛋白(FOXO)1。结果SCC9细胞中miR-196a的表达量显著高于HOK(P<0.05);转染miR-196a inhibitor后,SCC9细胞增殖、侵袭能力均显著下降(P<0.05);Western印迹检测发现,与inhibitor-NC组相比,miR-196a inhibitor组p-AKT、p-PI3K明显下降(P<0.05);在FOXO13′UTR处存在与miR-196a相结合的位点,与inhibitor-NC组相比,miR-196a inhibitor组FOXO1值显著升高,p-FOXO1值显著下降(P<0.05)。结论miR-196a在SCC9细胞中呈现高表达,抑制其表达能显著降低SCC9细胞的增殖、侵袭能力,在OSCC起促癌作用,且miR-196a可能借助PI3K/AKT信号通路发挥作用,并与FOXO1蛋白存在靶向关系。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌(OSCC) mir-196a 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路
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miR-196b调控PI3K/Akt通路对宫颈癌细胞顺铂耐药的影响研究 被引量:4
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作者 张玉清 邢惠海 +2 位作者 刘立秋 王敬 徐书方(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期2865-2870,共6页
目的:探讨miR-196b对宫颈癌细胞顺铂耐药性及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的影响。方法:体外培养人宫颈癌细胞株HeLa、顺铂耐药细胞株HeLa/DDP,检测HeLa、HeLa/DDP对顺铂的耐药性;将HeLa/DDP细胞分为:空白对照(仅用转染... 目的:探讨miR-196b对宫颈癌细胞顺铂耐药性及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的影响。方法:体外培养人宫颈癌细胞株HeLa、顺铂耐药细胞株HeLa/DDP,检测HeLa、HeLa/DDP对顺铂的耐药性;将HeLa/DDP细胞分为:空白对照(仅用转染试剂处理)+DDP组、阴性对照(转染miR-196b NC)+DDP组、miR-196b inhibitor(转染miR-196b inhibitor)+DDP组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-196b水平,蛋白印迹(WB)法检测Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、PI3K、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达,采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的IC_(50),流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:与HeLa细胞相比,HeLa/DDP细胞miR-196b表达显著升高(P<0.05),随顺铂浓度增加(0.01、0.1、1、5、10、20、40、80、100μmol/L)HeLa/DDP、HeLa细胞活力下降,经计算HeLa对顺铂的IC_(50)为4.86μmol/L,HeLa/DDP对顺铂的IC_(50)为68.13μmol/L,与HeLa相比,HeLa/DDP对顺铂的IC_(50)显著升高(P<0.05);与空白对照+DDP组、阴性对照+DDP组比较,miR-196b inhibitor+DDP组HeLa/DDP细胞中miR-196b表达水平,Akt、p-Akt、PI3K、p-mTOR蛋白水平及顺铂IC_(50)显著下降(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。结论:下调miR-196b表达可能通过下调PI3K/Akt通路相关蛋白表达,降低宫颈癌细胞对顺铂的耐药性。 展开更多
关键词 mir-196b 宫颈癌细胞 耐药性 顺铂 机制
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miR-196b慢病毒表达载体的构建和功能鉴定 被引量:4
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作者 刘玥 帅春 +2 位作者 尹虹 宋艳斌 马文丽 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第5期674-678,共5页
目的构建携带miR-196b的慢病毒表达载体,为研究miR-196b在慢性粒细胞白血病中的功能及其对慢粒发生发展的作用奠定基础。方法以人骨髓细胞基因组DNA为模板,PCR法扩增miR-196b的前体序列,慢病毒表达载体plVTHM构建重组载体plVTHM-miR-19... 目的构建携带miR-196b的慢病毒表达载体,为研究miR-196b在慢性粒细胞白血病中的功能及其对慢粒发生发展的作用奠定基础。方法以人骨髓细胞基因组DNA为模板,PCR法扩增miR-196b的前体序列,慢病毒表达载体plVTHM构建重组载体plVTHM-miR-196b,并包装病毒和进行滴度测定。用病毒液感染K562细胞,通过荧光观察转染效率和报告基因表达效率,用流式细胞仪分选感染后绿色荧光蛋白阳性的K562细胞,再用实时荧光定量PCR测定细胞内miR-196b的表达水平。最后用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况。结果成功构建了plVTHM-miR-196b慢病毒表达载体;载体中绿色荧光蛋白有较好的表达活性;与对照组细胞相比,试验组miR-196b表达水平有显著提升(P<0.05);K562细胞稳定过表达miR-196b后增殖水平显著下降(P<0.05)。结论成功构建了miR-196b过表达载体,并在K562细胞内稳定高表达,miR-196b有抑制K562细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 mir-196b 慢病毒表达载体 载体构建
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miR-196a2成熟区单核苷酸多态性对靶基因LSP1表达的影响 被引量:3
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作者 陈佳萍 胡志斌 +5 位作者 田甜 周小毅 苗瑞芬 靳光付 马红霞 沈洪兵 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期762-766,共5页
目的:研究miR-196a2成熟区单核苷酸多态性rs11614913(T/C)对预测靶基因LSP1表达的影响。方法:构建含有不同基因型miR-196a2的真核表达载体pCDNA3.1-miR196a2-C和pCDNA3.1-miR196a2-T;同时利用化学合成含有不同基因型的成熟miR-196a2探针... 目的:研究miR-196a2成熟区单核苷酸多态性rs11614913(T/C)对预测靶基因LSP1表达的影响。方法:构建含有不同基因型miR-196a2的真核表达载体pCDNA3.1-miR196a2-C和pCDNA3.1-miR196a2-T;同时利用化学合成含有不同基因型的成熟miR-196a2探针miR-196a2-C和miR-196a2-U。将靶基因LSP1的3’UTR序列克隆至pMIR-REPORTTM Luciferase载体中而获得LSP1报告基因载体pMIR-LSP1。采用所构建的miR-196a2真核表达载体以及化学合成的成熟miR-196a2探针分别与靶基因LSP1报告基因载体组建两套转染体系,分别共转染于HEK293、A549和CHO三种细胞后进行荧光素酶活性分析。结果:miR-196a2真核表达载体与靶基因LSP1报告基因表达载体共转染于HEK293、A549和CHO三种细胞后进行荧光素酶活性分析,pCDNA3.1-miR196a2-C等位基因荧光素酶相对活性与pCDNA3.1-miR196a2-T等位基因相比均有显著降低(P<0.05);含不同基因型的化学合成的成熟miR-196a2探针与靶基因LSP1报告质粒共转染HEK293、A549和CHO三种细胞,miR-196a2-C等位基因荧光素酶活性与miR196a2-T等位基因相比也有显著降低(P<0.05)。结论:荧光素酶活性强弱间接反映了miR-196a2与靶基因LSP1结合能力的大小,当miR-196a2成熟区rs11614913位点为C时,miR-196a2可能更为有效地与预测靶基因LSP1结合,从而在转录后水平调控靶基因表达。 展开更多
关键词 mir-196a2 单核苷酸多态性 LSP1
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miR-196a调控p27^kip1促进非小细胞肺癌细胞增殖的机制研究 被引量:2
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作者 刘向华 林梦洁 +4 位作者 尹凌帝 孙倩 孙明 德伟 刘志军 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2013年第11期961-965,共5页
目的探讨miR-196a在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中的表达,以及抑制或过表达miR-196a对NSCLC细胞增殖能力的影响及其作用的靶基因。方法实时定量PCR(QPCR)技术检测NSCLC组织及细胞系中miR-196a的表达水平,通过转染miR-196a inhibit... 目的探讨miR-196a在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中的表达,以及抑制或过表达miR-196a对NSCLC细胞增殖能力的影响及其作用的靶基因。方法实时定量PCR(QPCR)技术检测NSCLC组织及细胞系中miR-196a的表达水平,通过转染miR-196a inhibitors及miR-196a mimics抑制或上调miR-196a的表达水平,并通过QPCR检测转染效率。用MTT和克隆形成实验检测上调或下调miR-196a对SPC-A1或A549细胞增殖能力的影响;生物信息学及Western blotting方法分析验证miR-196a对靶基因p27kip1的调控作用。结果与正常肺组织及细胞相比,在NSCLC组织和细胞中miR-196a的表达出现显著上调,SPC-A1细胞和A549细胞中转染miR-196a inhibitors或miR-196a mimics能显著抑制或上调miR-196a的表达;抑制miR-196a的表达能降低SPC-A1细胞增殖能力,而上调miR-196a的表达则能促进A549细胞增殖。miR-196a能够负性调控p27kip1的表达。结论 NSCLC组织及细胞中miR-196a的表达上调能够抑制p27kip1的表达,并显著促进NSCLC细胞增殖,影响NSCLC的发生与发展。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 MIRNA mir-196a 细胞增殖 P27KIP1
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葛根素通过下调miR-196a-3p促进大鼠成骨细胞增殖和分化的机制 被引量:4
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作者 王海珍 王丽娟 贠云飞 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期1714-1718,共5页
目的研究葛根素是否通过下调miR-196a-3p促进大鼠成骨细胞增殖和分化及其潜在作用机制。方法将大鼠成骨细胞CP-R091分为:对照组、葛根素组、转染组和葛根素+转染组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,RT-qPCR检测细胞中miR-196a-3... 目的研究葛根素是否通过下调miR-196a-3p促进大鼠成骨细胞增殖和分化及其潜在作用机制。方法将大鼠成骨细胞CP-R091分为:对照组、葛根素组、转染组和葛根素+转染组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,RT-qPCR检测细胞中miR-196a-3p表达,Western印迹检测细胞中Runx2蛋白及细胞分化相关蛋白骨桥蛋白(OPN)、碱性磷酸酶(ALP)表达。结果与对照组比较,葛根素处理后CP-R091细胞增殖活性增强(P<0.05),细胞中miR-196a-3p表达水平降低(P<0.05),OPN和ALP蛋白表达水平升高(P<0.05);与anti-miR-NC组比较,抑制miR-196a-3p表达后CP-R091细胞增殖活性增强(P<0.05),细胞中OPN和ALP蛋白表达水平升高(P<0.05);与葛根素+miR-NC组比较,葛根素+miR-196a-3p组CP-R091细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞中OPN、ALP蛋白表达降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-196a-3p靶向负调控Runx2的表达;与pcDNA3.1组比较,过表达Runx2后CP-R091细胞增殖活性增强(P<0.05),细胞中OPN和ALP蛋白表达升高(P<0.05);与葛根素+si-NC组比较,葛根素+si-Runx2组CP-R091细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞中OPN、ALP蛋白表达降低(P<0.05)。结论葛根素下调miR-196a-3p并通过靶向Runx2促进大鼠成骨细胞增殖和分化。 展开更多
关键词 成骨细胞 葛根素 mir-196a-3p 增殖 分化
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miR-196、CA125水平与老年胆囊癌患者诊断及预后的关系 被引量:1
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作者 崔大鹏 张迎春 +2 位作者 刘振显 连晶晶 刘博 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期280-283,共4页
目的探讨miR-196、癌抗原(CA)125水平对老年胆囊癌的诊断价值和预后的关系。方法老年(>60岁)胆管癌患者共93例,另外选取90例老年良性胆囊疾病患者和102例健康志愿者,收集患者的临床资料。通过静脉穿刺采集全血样品。通过酶联免疫吸... 目的探讨miR-196、癌抗原(CA)125水平对老年胆囊癌的诊断价值和预后的关系。方法老年(>60岁)胆管癌患者共93例,另外选取90例老年良性胆囊疾病患者和102例健康志愿者,收集患者的临床资料。通过静脉穿刺采集全血样品。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的CA125水平,通过qRT-PCR分析miR-196的表达情况。结果胆囊癌患者CA125水平明显高于其他两组(P<0.05)。不同病理分期的患者CA125水平无显著差异(P>0.05)。胆囊癌患者血清miR-196表达显著高于其他组(P<0.01)。分期为Ⅱ期患者的miR-196表达水平显著低于其他分期患者(P<0.05)。CA125水平的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.919(95%CI:0.889~0.949),截断值为30 U/ml,敏感度为87.1%,特异性为83.9%;miR-196评分的ROC曲线下面积为0.875(95%CI:0.835~0.915),截断值为2.537,敏感度为87.1%,特异性为76.6%。Kaplan-Meier生存分析表明,CA125水平高组无病生存率明显低于CAP125水平低组(P=0.009)。miR-196高表达患者的无病生存率明显低于miR-196低表达患者(P<0.001)。结论miR-196、CA125作为重要的肿瘤标志物,具有作为老年胆囊癌的诊断标志物,并且与患者的预后具有密切关系。 展开更多
关键词 肿瘤标志物 胆囊癌 CA125 mir-196
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长链非编码RNA GAS5通过调控miR-196b-5p抑制非小细胞肺癌细胞增殖侵袭迁移的机制 被引量:1
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作者 刘向前 赵天增 杨金华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期161-164,共4页
目的研究长链非编码RNA(LncRNA)GAS5对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,探讨其作用机制。方法运用qRT-PCR检测非小细胞肺癌细胞A549和肺支气管正常细胞16HBE中LncRNA GAS5、miR-196b-5p的表达;将miR-196b-5p组(转染miR-196b-5p ... 目的研究长链非编码RNA(LncRNA)GAS5对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,探讨其作用机制。方法运用qRT-PCR检测非小细胞肺癌细胞A549和肺支气管正常细胞16HBE中LncRNA GAS5、miR-196b-5p的表达;将miR-196b-5p组(转染miR-196b-5p mimics)、miR-NC组(转染miR-NC)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-196b-5p组(转染anti-miR-196b-5p)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-GAS5+miR-196b-5p组(pcDNA3.1-GAS5和miR-196b-5p mimics共转染)均用脂质体法转染至A549细胞。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的增殖;Transwell法检测各组细胞的迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性。结果与肺支气管正常细胞16HBE相比,非小细胞肺癌细胞A549中LncRNA GAS5的表达显著降低,miR-196b-5p的表达显著升高(P<0.05);过表达GAS5、抑制miR-196b-5p均可显著抑制A549细胞增殖、迁移、侵袭;LncRNA GAS5靶向miR-196b-5p,且过表达miR-196b-5p可逆转LncRNA GAS5对A549细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论LncRNA GAS5可抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与靶向负调控LncRNA GAS5有关,将可为非小细胞肺癌的靶向治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA GAS5 mir-196b-5p 非小细胞肺癌 增殖 迁移 侵袭
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miR-196a高表达在肾脏损伤中作用的分子生物学机制 被引量:4
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作者 李慧聪 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期2472-2475,共4页
目的探讨高表达的miR-196a在肾脏损伤中作用的分子生物学机制。方法通过抑制miR-196a表达,观察其表达水平对人肾小管上皮细胞(HKC)转分化的影响,验证miR-196a与其预测靶基因蛋白二硫化物异构酶(PDI)A3的配对关系。建立小鼠单侧输尿管梗... 目的探讨高表达的miR-196a在肾脏损伤中作用的分子生物学机制。方法通过抑制miR-196a表达,观察其表达水平对人肾小管上皮细胞(HKC)转分化的影响,验证miR-196a与其预测靶基因蛋白二硫化物异构酶(PDI)A3的配对关系。建立小鼠单侧输尿管梗阻模型,经尾静脉注射LNA修饰的anti-miR-196a寡核苷酸,观察抑制miR-196a表达后对肾小管间质病变和硫氧还原蛋白(Trx)的影响。结果体外细胞实验显示,转化生长因子(TGF)-β1能够上调miR-196a表达,诱导肾小管上皮细胞发生上皮间充质转分化,阻断miR-196a可部分逆转上皮间充质转分化,而PDIA3为miR-196a对应的直接靶基因。体内动物实验显示,模型组出现明显肾小管间质纤维化病变,5、10 mg/kg anti-miR-196a干预组肾小管间质损伤评分明显低于模型组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中以5 mg/kg干预组逆转肾小管间质纤维化作用更明显。模型组小鼠梗阻侧肾组织miR-196a相对表达量明显高于假手术组,5、10 mg/kg干预组小鼠miR-196a相对表达量明显低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5、10 mg/kg干预组α-血管平滑肌肌动蛋白(SMA)、波形蛋白(Vimentin)相对表达量明显低于模型组、阴性对照组;PDIA3蛋白表达明显高于模型组、阴性对照组;差异均有统计学意义(均P<0.05)。以Trx为抗氧化应激标志物,模型组小鼠肾组Trx表达量明显低于假手术组和空白对照组;5、10 mg/kg干预组Trx表达量明显高于模型组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-196a在小鼠肾小管间质纤维化过程中发挥重要作用,PDIA3是其直接靶基因;PDIA3表达下调减弱相应的抗氧化应激能力是miR-196a参与肾脏损伤的机制之一。 展开更多
关键词 肾脏损伤 肾间质纤维化 mir-196a PDIA3 氧化应激
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miR-196b通过调控BACH1对绒毛膜癌细胞增殖、侵袭和迁移的作用机制研究 被引量:1
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作者 张雪梅 高琴 杨学 《中国性科学》 2022年第5期101-105,共5页
目的探讨miR-196b/BTB-CNC同源体1(BACH1)分子轴对绒毛膜癌细胞增殖、侵袭和迁移的调控机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人绒毛膜癌JEG-3细胞中miRNAs的表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-196b和BACH1的靶向性。... 目的探讨miR-196b/BTB-CNC同源体1(BACH1)分子轴对绒毛膜癌细胞增殖、侵袭和迁移的调控机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人绒毛膜癌JEG-3细胞中miRNAs的表达水平,双荧光素酶报告基因验证miR-196b和BACH1的靶向性。外源性调节miR-196b和BACH1的表达水平后,通过噻唑蓝(MTT)和Transwell实验分别检测JEG-3细胞增殖、侵袭和迁移;通过流式细胞术检测JEG-3细胞的凋亡率;通过Western blotting检测JEG-3细胞中BACH1的表达。结果qRT-PCR结果显示,JEG-3细胞中miR-196b、miR-495、miR-218及miR-378-5p异常低表达(P<0.05),且miR-196b的表达水平最低。双荧光素酶报告基因结果显示,BACH1是miR-196b的靶基因(P<0.05)。过表达miR-196b或敲降BACH1可显著抑制JEG-3细胞增殖、侵袭、迁移,并促进其凋亡(P<0.05);进一步同时敲降miR-196b和BACH1后,JEG-3细胞增殖、侵袭、迁移水平及凋亡率与对照(NC)组差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-196b靶向下调BACH1抑制JEG-3细胞增殖、侵袭、迁移,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 绒毛膜癌 mir-196b BTB-CNC同源体1 增殖 侵袭 迁移 凋亡
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miR-196a2单核苷酸多态与乳腺癌易感性关系 被引量:2
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作者 王新 何宝江 周昱 《黑龙江医药科学》 2011年第5期46-46,共1页
miRNA是一类长约21-24bp、内源性、非编码、单链RNAs,进化上高度保守,广泛存在于动、植物细胞中。可以调节基因表达[1]。miRNAs可以与靶mRNAs互补序列配对结合,有效并且稳定地降低mRNAs的翻译活性。哺乳动物成熟miRNAs大多通过不完全互... miRNA是一类长约21-24bp、内源性、非编码、单链RNAs,进化上高度保守,广泛存在于动、植物细胞中。可以调节基因表达[1]。miRNAs可以与靶mRNAs互补序列配对结合,有效并且稳定地降低mRNAs的翻译活性。哺乳动物成熟miRNAs大多通过不完全互补配对与靶mRNA 3′-UTRs结合,调节靶基因的表达,有时也可以直接将靶mRNAs切断。生物信息学数据表明一条单链miRNA可以[2] 展开更多
关键词 乳腺癌 mir-196a2 易感性
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miR-196b、miR-25在儿童急性髓细胞白血病中的表达及临床意义
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作者 徐丽华 胡绍燕 +2 位作者 岑建农 杨乃超 洪丹 《实用临床医药杂志》 CAS 2014年第24期11-15,共5页
目的探讨初诊AML患儿miR-196b、miR-25的表达及其临床意义。方法从骨髓标本库中随机抽取2012-2013年收集的20例初诊AML以及20例非白血病对照标本,利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-196b、miR-25的相对表达量。结果 miR-196... 目的探讨初诊AML患儿miR-196b、miR-25的表达及其临床意义。方法从骨髓标本库中随机抽取2012-2013年收集的20例初诊AML以及20例非白血病对照标本,利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-196b、miR-25的相对表达量。结果 miR-196b的相对表达量在患者和对照组间有显著差异(P<0.05);在危险度分组中,miR-196b在高危组、中危组和低危组有显著差异(P<0.05);在WBC<10万/mm3和≥10万/mm3组间,miR-196b表达有显著差异(P<0.05);在一疗程缓解组/未缓解组,miR-25表达有显著差异(P<0.05);在染色体核型预后良好组/预后不良组间,miR-196b表达水平具有显著差异(P<0.05),核型不良组miR-196b表达水平增高;而miR-25呈低表达现象,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论 miR-196b在初诊AML患儿中明显高表达,高表达的miR-196b与不良预后相关;miR-25的表达水平增高提示着良好的早期治疗反应和预后。这些miRNAs有望成为儿童AML早期诊断、治疗及判断预后的独特生物标记物。 展开更多
关键词 mir-196b mir-25 急性髓细胞白血病 儿童
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miR-196a2基因多态性在广西人群中的分布
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作者 罗宏成 温旺荣 +3 位作者 李珉珉 韦颖 谭昙 韦叶生 《分子诊断与治疗杂志》 2016年第3期160-164,共5页
目的探讨广西人群miR-196a2 T>C(rs11614913)等位基因及基因型频率分布情况,分析其与不同民族种族之间的差异性。方法利用单碱基延伸PCR技术(polymerase chain reactionsingle base extension,PCR-SBE)和DNA测序技术,检测303例广西... 目的探讨广西人群miR-196a2 T>C(rs11614913)等位基因及基因型频率分布情况,分析其与不同民族种族之间的差异性。方法利用单碱基延伸PCR技术(polymerase chain reactionsingle base extension,PCR-SBE)和DNA测序技术,检测303例广西人群中miR-196a2 T>C的基因型,并比较其与人类基因组计划(human genome project,Hapmap)数据库中公布的非洲人、欧洲人、日本人和中国北京人群的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)数据,揭示这5个不同民族种族人群的等位基因及基因型频率分布规律。结果 miR-196a2T>C等位基因和基因型频率在广西男女间分布无差异性(P>0.05)。广西人群miR-196a2 T>C多态性基因型及等位基因频率与非洲人、欧洲人、日本人比较有统计学差异意义(P<0.05),但与北京人群无差异性(P均>0.05)。结论广西人群miR-196a2T>C存在基因多态性,与别的民族种族人群比较有明显的差异性,这种差异性对于基因组水平上疾病的研究可能会起到积极重要作用。 展开更多
关键词 mir-196a2 单核苷酸多态性 种族
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