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骨髓间充质干细胞来源的miR-199a-5p通过抑制ZIK1/MAP3K11调节肾细胞癌细胞的增殖和侵袭 被引量：1
1
作者 志宏 刘锁 +3 位作者 塔娜 白乌恩毕力格 王磊 王超奇 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第12期2135-2140,共6页
目的:研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)来源的外泌体(exsome)中miR-199a-5p对肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞增殖和侵袭的影响。方法:分离骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BM-MSCs-Exo),电子... 目的:研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)来源的外泌体(exsome)中miR-199a-5p对肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)细胞增殖和侵袭的影响。方法:分离骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BM-MSCs-Exo),电子显微镜观察外泌体形态,Western blot方法检测外泌体标志蛋白CD9和CD63。CCK-8法检测RCC细胞在不同条件下的增殖速度,Transwell法检测RCC细胞的侵袭能力,q-PCR法检测miR-199a-5p以及ZIK1和MAP3K11的mRNA表达,双荧光素酶实验验证miR-199a-5p以及ZIK1和MAP3K11基因的3’UTR区域靶向结合。结果:BM-MSCs-Exo电镜下呈圆形囊泡状,直径约100 nm,且高表达CD9和CD63,RCC细胞摄取BM-MSCs-Exo后增殖和侵袭能力均被抑制,过表达miR-199a-5p的BM-MSCs-Exo能显著抑制RCC细胞的增殖和侵袭能力,抑制BM-MSCs-Exo中的miR-199a-5p后能缓解BM-MSCs-Exo对RCC的抑制作用,且发现过表达miR-199a-5p的BM-MSCs-Exo能显著降低ZIK1和MAP3K11的mRNA表达,而在BM-MSCs-Exo中抑制miR-199a-5p有相反作用。结论:BM-MSCs-Exo通过向RCC细胞转运miR-199a-5p抑制ZIK1和MAP3K11的表达,进而抑制RCC细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 肾细胞癌 骨髓间充质干细胞 外泌体 mir-199a-5p
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miR-199a-5p在肝脏组织中的表达及其作用的初步研究
2
作者 潘锦堃 李超普 +3 位作者 张许 季学涛 薛瑶 李仲 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第11期1510-1516,共7页
目的:探究不同营养状态下miR-199a-5p在肝脏中的表达水平,以及其对肝细胞甘油三酯(triglyceride,TAG)含量的影响及其潜在机制。方法:RT-qPCR检测高脂饮食小鼠肝脏组织中miR-199a-5p的表达;分别使用miR-199a-5p模拟物、抑制剂、阴性对照... 目的:探究不同营养状态下miR-199a-5p在肝脏中的表达水平,以及其对肝细胞甘油三酯(triglyceride,TAG)含量的影响及其潜在机制。方法:RT-qPCR检测高脂饮食小鼠肝脏组织中miR-199a-5p的表达;分别使用miR-199a-5p模拟物、抑制剂、阴性对照和pcDH-CD36-flag质粒转染Hepa1-6和AML12细胞,通过RT-qPCR和Western blot检测脂代谢相关标志物表达变化,采用试剂盒检测TAG含量;通过miRDB(microRNA Target Prediction Database)预测miR-199a-5p的靶基因并通过双荧光素酶报告实验进行验证。结果:高脂饮食和饥饿状态下C57BL/6J小鼠肝脏中miR-199a-5p的表达水平升高;过表达miR-199a-5p能够降低肝细胞内TAG,而miR-199a-5p抑制剂会增加细胞内TAG含量;miR-199a-5p通过作用于脂肪酸转位酶CD36基因的3′非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)降低其蛋白表达。结论:在肝脏脂质积累过程中,miR-199a-5p的表达水平增加,并且miR-199a-5p可能通过靶向CD36降低肝细胞内TAG含量。 展开更多
关键词 mir-199a-5p 肝脏 甘油三酯 CD36
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LINC00662通过调控miR-199a-5p/MAP3K1通路对胃癌侵袭、转移的影响
3
作者 于鹏杰 才保加 +1 位作者 朱生茂 蒲永强 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期890-897,共8页
目的探讨LINC00662通过调控miR-199a-5p/丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)通路对胃癌侵袭、转移的影响。方法收集2018年6月至2020年6月期间我院胃癌患者癌组织及癌旁组织,实时定量PCR检测胃癌组织及癌旁组织中LINC00662、miR-199a-5... 目的探讨LINC00662通过调控miR-199a-5p/丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)通路对胃癌侵袭、转移的影响。方法收集2018年6月至2020年6月期间我院胃癌患者癌组织及癌旁组织,实时定量PCR检测胃癌组织及癌旁组织中LINC00662、miR-199a-5p、MAP3K1 mRNA表达。取对数生长期的SGC-7901细胞,利用LipofectamineTM2000转染试剂盒进行转染,并分为si-NC组、si-LINC00662组、si-LINC00662+anti-miR-NC组、si-LINC00662+anti-miR-199a-5p组、si-LINC00662+miR-NC组、si-LINC00662+miR-199a-5p组、miR-NC组、miR-199a-5p组、空载体组、LINC00662过表达组、anti-miR-NC组、anti-miR-199a-5p组,另取未转染的SGC-7901细胞作为空白组。Transwell实验检测各组细胞的侵袭与迁移;划痕实验检测各组细胞迁移能力;Western blotting检测各组细胞中MAP3K1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)表达;双荧光素酶报告基因实验验证LINC00662与miR-199a-5p、miR-199a-5p与MAP3K1的靶向关系。结果与癌旁组织比较,胃癌组织中LINC00662、MAP3K1 mRNA表达水平显著升高,miR-199a-5p表达水平显著降低(均P<0.05)。与空白组和si-NC组比较,si-LINC00662组SGC-7901细胞中LINC00662表达水平显著降低,侵袭、迁移细胞数目显著减少,划痕愈合率显著降低,MAP3K1、MMP-2、MMP-9、N-cadherin相对表达量显著降低,miR-199a-5p表达水平显著升高(均P<0.05)。与si-LINC00662组和si-LINC00662+anti-miR-NC组比较,si-LINC00662+anti-miR-199a-5p组SGC-7901细胞中miR-199a-5p表达水平显著降低,侵袭、迁移细胞数目显著升高,划痕愈合率显著升高,MAP3K1、MMP-2、MMP-9、N-cadherin相对表达量显著升高(均P<0.05)。与si-LINC00662组和si-LINC00662+miR-NC组比较,si-LINC00662+miR-199a-5p组SGC-7901细胞中miR-199a-5p表达水平显著升高,侵袭、迁移细胞数目显著降低,划痕愈合率显著降低,MAP3K1、MMP-2、MMP-9、N-cadherin相对表达量显著降低(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实LINC00662靶向负调控miR-199a-5p表达,miR-199a-5p靶向负调控MAP3K1表达。结论胃癌组织中LINC00662高表达,si-LINC00662通过调控miR-199a-5p/MAP3K1通路抑制胃癌细胞侵袭、转移。 展开更多
关键词 LINC00662 mir-199a-5p 丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1 胃癌 细胞侵袭 细胞迁移
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马齿苋提取物调控miR-199a-5p对人瘢痕疙瘩成纤维细胞生长和胶原合成的影响 被引量：1
4
作者 张佳音 饶美荣 +1 位作者 钟咪 曾芬 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期969-972,共4页
目的探讨马齿苋提取物调控miR-199a-5p对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)生长和胶原合成的影响。方法将HKF细胞分为对照组、马齿苋提取物(50、100、200μg/mL)组、miR-NC组、miR-199a-5p组、anti-miR-NC+200μg/mL马齿苋提取物组、anti-miR-1... 目的探讨马齿苋提取物调控miR-199a-5p对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)生长和胶原合成的影响。方法将HKF细胞分为对照组、马齿苋提取物(50、100、200μg/mL)组、miR-NC组、miR-199a-5p组、anti-miR-NC+200μg/mL马齿苋提取物组、anti-miR-199a-5p+200μg/mL马齿苋提取物组。CCK-8法检测HKF细胞活力,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-qPCR法检测细胞miR-199a-5p表达,Western blot法检测细胞Col-Ⅰ、Col-Ⅲ蛋白表达。结果与对照组比较,马齿苋提取物组细胞活力、S期细胞比例、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ蛋白表达降低(P<0.05),miR-199a-5p表达、G_(0)/G_(1)期细胞比例升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-199a-5p组细胞活力、S期细胞比例、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ蛋白表达降低(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞比例升高(P<0.05)。与anti-miR-NC+200μg/mL马齿苋提取物组比较,anti-miR-199a-5p+200μg/mL马齿苋提取物组细胞活力、S期细胞比例、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ蛋白表达升高(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞比例降低(P<0.05)。结论马齿苋提取物可能通过上调miR-199a-5p表达抑制HKF细胞生长和胶原合成。 展开更多
关键词 马齿苋提取物 瘢痕疙瘩成纤维细胞 mir-199a-5p 增殖 胶原合成
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miR-199a-5p、IFN-γ、IL-12在老年慢性HBV感染患者不同免疫状态下的评估价值
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作者 段瑞娴 王艳 +1 位作者 王熙苑 贾雁琳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期2623-2626,共4页
目的分析老年慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者不同免疫状态下血清miR-199a-5p、干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-12表达及其对不同免疫状态下老年慢性HBV感染的评估价值。方法106例老年慢性HBV感染患者依据免疫状态的不同分为再活动期49... 目的分析老年慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者不同免疫状态下血清miR-199a-5p、干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-12表达及其对不同免疫状态下老年慢性HBV感染的评估价值。方法106例老年慢性HBV感染患者依据免疫状态的不同分为再活动期49例,免疫控制期57例。另选取同期接受检查的健康志愿者55例为对照组。以实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)测定所有研究对象血清中miR-199a-5p水平,采用酶联免疫吸附试验测定血清IFN-γ、IL-12水平。以Spearman相关性分析血清miR-199a-5p、IFN-γ、IL-12水平与老年慢性HBV感染患者免疫状态的相关性,以受试者工作特征(ROC)曲线分析患者血清miR-199a-5p、IFN-γ、IL-12水平对老年慢性HBV感染患者不同免疫状态的评估价值。结果研究组血清miR-199a-5p、IFN-γ、IL-12水平显著高于对照组(P<0.05);再活动期患者血清miR-199a-5p、IFN-γ、IL-12水平显著高于免疫控制期患者(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,血清miR-199a-5p、IFN-γ、IL-12水平与老年慢性HBV感染患者免疫状态呈正相关(r=0.468、0.496、0.435,均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-199a-5p、IFN-γ、IL-12水平单独及联合评估老年慢性HBV感染患者免疫状态的曲线下面积(AUC)分别为0.669、0.802、0.646、0.841,检测灵敏度分别为50.00%、90.48%、38.10%、69.05%,特异性分别为77.55%、59.18%、91.84%、87.76%,联合评估效能显著优于各指标单独评估。结论老年慢性HBV感染患者不同免疫状态下血清中miR-199a-5p、IFN-γ、IL-12水平表达不同,检测其水平可评估患者免疫状态,且三者联合评估的效能更佳,可为临床治疗提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎病毒感染 免疫状态 mir-199a-5p 干扰素-γ 白细胞介素-12
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miR-223、miR-200b、miR-199a-5p在缺血性脑卒中患者中的表达及相关性研究 被引量：1
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作者 马斌 苟鑫 +3 位作者 黄晓丽 周淏 罗向阳 封凯旋 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2023年第1期51-54,63,共5页
目的 探讨微小RNA(miR)-223、miR-200b、miR-199a-5p在缺血性脑卒中(IS)患者中的表达及相关性。方法 选取2019年3月—2021年3月上海市第六人民医院金山分院IS患者132例为研究对象,根据90 d后改良Rankin量表(mRS)评分分为预后不良组(n=51... 目的 探讨微小RNA(miR)-223、miR-200b、miR-199a-5p在缺血性脑卒中(IS)患者中的表达及相关性。方法 选取2019年3月—2021年3月上海市第六人民医院金山分院IS患者132例为研究对象,根据90 d后改良Rankin量表(mRS)评分分为预后不良组(n=51,mRS评分>2分)和预后良好组(n=81,mRS评分≤2分)。比较两组基线资料,美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、mRS评分,血清miR-223、miR-200b、miR-199a-5p,分析上述血清指标与NIHSS、mRS评分的相关性,探讨IS预后不良的影响因素,评价上述血清指标对IS预后的预测价值及不同表达与IS预后的关系。结果 预后不良组血清miR-223、miR-199a-5p表达高于预后良好组,血清miR-200b表达低于预后良好组(P<0.05);miR-223、miR-199a-5p与NIHSS、mRS评分呈正相关,miR-200b与NIHSS、mRS评分呈负相关(P<0.05);将卒中分型、NIHSS评分、血小板计数、发病至治疗时间等其他因素控制后,血清miR-223、miR-200b、miR-199a-5p与IS预后不良(mRS评分)显著相关(P<0.05);血清miR-223、miR-200b、miR-199a-5p联合预测IS预后不良的曲线下面积(AUC)最大,为0.928;miR-223、miR-199a-5p高表达者预后不良发生率高于低表达者,miR-200b低表达者预后不良发生率高于高表达者(P<0.05)。结论 血清miR-223、miR-199a-5p过表达和miR-200b表达缺失均与IS患者神经功能缺损程度及神经功能恶化有关,可为患者预后预测提供参考依据。 展开更多
关键词 微小RNa-223 微小RNa-200b 微小RNa-199a-5p 缺血性脑卒中 神经功能缺损程度 预后
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舒芬太尼通过miR-199a-5p减轻缺氧复氧H9C2细胞凋亡自噬的机制研究 被引量：1
7
作者 黄永珍 刘德胜 吕惠贤 《中国医院用药评价与分析》 2023年第7期800-804,810,共6页
目的:观察舒芬太尼对缺氧复氧(H/R)心肌细胞H9C2凋亡、自噬的影响,并探究其作用机制。方法:建立H/R H9C2细胞损伤模型,用10μmol/L舒芬太尼处理H9C2细胞再行H/R。采用脂质体法将H/R+SUF+antagomiRNA组(转染antagomiRNA,用10μmol/L舒芬... 目的:观察舒芬太尼对缺氧复氧(H/R)心肌细胞H9C2凋亡、自噬的影响,并探究其作用机制。方法:建立H/R H9C2细胞损伤模型,用10μmol/L舒芬太尼处理H9C2细胞再行H/R。采用脂质体法将H/R+SUF+antagomiRNA组(转染antagomiRNA,用10μmol/L舒芬太尼处理)、H/R+SUF+antagomiR-199a-5p组(转染antagomiR-199a-5p,用10μmol/L舒芬太尼处理)转染H9C2细胞并行H/R处理。采用细胞计数试剂盒(CCK8)检测培养12、24和48 h的细胞活力。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭双染法、蛋白质印迹法检测细胞凋亡率、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、波形蛋白(survivin)、线粒体自噬相关蛋白(PINK1)、自噬标记物(LC3-Ⅱ/Ⅰ)和细胞色素C(Cyt C)的蛋白表达。结果:与H9C2组相比,H/R组细胞在48、72 h的活力均显著降低;与H/R+ddH_(2)O组相比,H/R+SUF组细胞在48、72 h的细胞活力显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05),因此选用培养48 h的细胞用于后续研究。与H9C2组相比,H/R组H9C2细胞凋亡率显著升高,Caspase-3、PINK1、LC3-Ⅱ/Ⅰ和细胞质Cyt C蛋白表达水平显著升高,survivin、线粒体Cyt C蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与H/R+ddH_(2)O组相比,H/R+SUF组H9C2细胞凋亡率显著降低,Caspase-3、PINK1、LC3-Ⅱ/Ⅰ和细胞质Cyt C蛋白表达水平显著降低,survivin、线粒体Cyt C蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。H/R组miR-199a-5p的表达水平显著高于H9C2组,H/R+SUF组miR-199a-5p的表达水平则显著低于H/R+ddH_(2)O组,差异均有统计学意义(P<0.05);特异性抑制miR-199a-5p的表达明显增强了舒芬太尼对H/R H9C2细胞的凋亡自噬抑制作用。结论:舒芬太尼可抑制H/R心肌细胞的凋亡和自噬,其作用机制与调控miR-199a-5p的表达水平有关。 展开更多
关键词 舒芬太尼 缺氧复氧心肌细胞 凋亡 自噬 mir-199a-5p
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sPE患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达变化及与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系
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作者 张丽萍 李霞 谢艳 《山东医药》 CAS 2023年第36期15-19,共5页
目的观察重度子痫前期(sPE)患者血清微小核糖核酸-199a-5p(miR-199a-5p)、微小核糖核酸-142-3p(miR-142-3p)表达变化,并分析其与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系,为围产儿结局的改善提供参考。方法选取sPE患者200例(观察组)和产检... 目的观察重度子痫前期(sPE)患者血清微小核糖核酸-199a-5p(miR-199a-5p)、微小核糖核酸-142-3p(miR-142-3p)表达变化,并分析其与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系,为围产儿结局的改善提供参考。方法选取sPE患者200例(观察组)和产检健康孕妇200例(对照组),采用RT-PCR法测算两组血清miR-199a-5p、miR-142-3p,酶联免疫吸附试验检测两组血清可溶性细胞内皮因子(sEng)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF),Pearson相关分析法分析观察组血清miR-199a-5p、miR-142-3p与血管内皮功能相关指标的相关性。根据围产儿结局将观察组分为结局不良组(29例)和结局良好组(171例),采用单因素分析法及多因素Logistic回归分析法分析患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达与围产儿结局的关系。结果与对照组比较,观察组血清miR-199a-5p表达及VEGF水平降低,血清miR-142-3p表达及sEng、sFlt-1、ET-1水平升高(P均<0.05)。观察组血清miR-199a-5p表达与sEng、sFlt-1、ET-1水平呈负相关,与VEGF水平呈正相关(P均<0.05);血清miR-142-3p表达与sEng、sFlt-1、ET-1水平呈正相关,与VEGF水平呈负相关(P均<0.05)。结局不良组和结局良好组年龄、早发型sPE比例、并发水肿比例、并发子痫比例、并发胎盘早剥比例、并发产后出血比例、血清miR-142-3p表达变化、血清miR-199a-5p表达变化比较,P均<0.05;多因素Logistic回归分析显示,早发型sPE、胎盘早剥、miR-142-3p高表达是sPE围产儿结局不良的危险因素(P均<0.05),miR-199a-5p高表达是sPE围产儿结局不良的保护因素(P<0.05)。结论sPE患者血清miR-199a-5p表达降低、miR-142-3p表达升高,与血管内皮损伤有关,miR-142-3p高表达是sPE围产儿结局不良的危险因素,miR-199a-5p高表达是sPE围产儿结局不良的保护因素。 展开更多
关键词 重度子痫前期 微小核糖核酸-199a-5p 微小核糖核酸-142-3p 血管内皮损伤 围产儿结局
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环状RNA FAT1(hsa_circ_0001461)通过调控miR-181d-5p/miR-199a-5p促进口腔鳞状细胞癌进展
9
作者 陈吉俊 王梁 +2 位作者 马诞骅 高红燕 石宇远 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第2期196-206,共11页
目的:探讨环状RNA FAT1(hsa_circ_0001461)-miR-181d-5p/miR-199a-5p轴在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞生物学功能中的作用及机制。方法:收集30例OSCC患者的临床组织,采用实时定量PCR检测circFAT1、miR-181d-5... 目的:探讨环状RNA FAT1(hsa_circ_0001461)-miR-181d-5p/miR-199a-5p轴在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞生物学功能中的作用及机制。方法:收集30例OSCC患者的临床组织,采用实时定量PCR检测circFAT1、miR-181d-5p及miR-199a-5p在OSCC组织和细胞中的表达。通过StarBase和双荧光素酶报告基因实验验证miR-181d-5p/miR-199a-5p与circFAT1的靶向关系。利用CCK-8、Transwell、流式细胞术检测circFAT1-miR-181d-5p/miR-199a-5p轴对于OSCC细胞活力、迁移、侵袭、凋亡和周期的影响。采用免疫印迹法结合LY294002处理检测PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结果:在OSCC中circFAT1表达升高,miR-181d-5p、miR-199a-5p表达下降(P<0.001)。circFAT1可以同时靶向miR-181d-5p和miR-199a-5p(P<0.01)。沉默circFAT1、过表达miR-181d及miR-199a-5p抑制了OSCC细胞活力、迁移、侵袭和周期进展、诱导凋亡,同时抑制PI3K/Akt/mTOR通路的激活;过表达circFAT1、抑制miR-181d-5p及miR-199a-5p则发挥相反作用(P<0.05)。miR-181d-5p、miR-199a-5p可部分逆转circFAT1对OSCC细胞生物学功能的影响(P<0.05)。LY294002预处理逆转了过表达circFAT1对PI3K/Akt/mTOR通路和细胞活力的影响(P<0.05)。结论:circFAT1通过调控miR-181d-5p和miR-199a-5p促进OSCC细胞恶性进展。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 hsa_circ_0001461 mir-181d-5p mir-199a-5p 环状RNA
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miR-199a-5p通过靶向JunB介导心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的作用机制
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作者 郑茜 张勇 +1 位作者 杨东伟 王东伟 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第4期636-642,共7页
目的:观察miR-199a-5p对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、Antagomir对照组、Antagomir组、Agomir对照组及Agomir组。除假手术组(18只)外,其余组大鼠采用... 目的:观察miR-199a-5p对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:将120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、Antagomir对照组、Antagomir组、Agomir对照组及Agomir组。除假手术组(18只)外,其余组大鼠采用持续14 d结扎左冠状动脉前降支诱导构建心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,成功诱导94只心力衰竭大鼠,剔除4只,随机分组,每组大鼠18只。分别给予Antagomir对照组、Antagomir组、Agomir对照组及Agomir组大鼠心肌内注射2×1010PFU/mL miR-199a-5p Antagomir对照液、Antagomir液、Agomir对照液及Agomir稀释液各100μL,假手术组与模型组大鼠均等量注射生理盐水。2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色法检测心肌组织病理损伤情况;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)染色法检测心脏缺血部位细胞凋亡水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组大鼠心肌组织中miR-199a-5p、转录因子活化蛋白激酶B(JunB)基因相对表达水平;双荧光素酶试验验证miR-199a-5p与JunB的靶向关系;免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠心肌组织内活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-Caspase 3)、JunB、淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积增加,组织结构不完整,心肌细胞排列错乱不规则,炎性细胞浸润,细胞间有明显凋亡,miR-199a-5p基因及Cleaved-Caspase 3、Bax蛋白表达水平升高,JunB mRNA及JunB、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,Antagomir对照组及Agomir对照组大鼠心肌病理组织学变化、相关基因和蛋白相对表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Antagomir组大鼠心肌组织病理情况显著改善,miR-199a-5p基因及Cleaved-Caspase 3、Bax蛋白表达水平降低,JunB mRNA及JunB、Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05);Agomir组大鼠心肌组织病理损伤加重,miR-199a-5p基因及Cleaved-Caspase 3、Bax蛋白表达水平升高,JunB mRNA及JunB、Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。JunB为miR-199a-5p的靶基因。结论:miR-199a-5p可诱导心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡,可能与靶向抑制JunB表达有关。 展开更多
关键词 心力衰竭 mir-199a-5p 转录因子活化蛋白激酶B 靶向 心肌细胞凋亡 大鼠 实验研究
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LncRNA LUCAT1通过靶向miR-199a-5p调控宫颈癌细胞活性、侵袭迁移及其分子机制 被引量：10
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作者 胡春艳 朱根海 +1 位作者 邢艾文 崔开颖 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第13期3257-3261,共5页
目的研究长链非编码RNA肺癌相关转录产物(LUCAT)1对宫颈癌细胞的活性、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法运用qRT-PCR法检测宫颈癌细胞Hela、正常宫颈细胞Ect1/E6E7中LUCAT1、miR-199a-5p的表达;将si-con组(转染si-con)、si-LUCAT1组... 目的研究长链非编码RNA肺癌相关转录产物(LUCAT)1对宫颈癌细胞的活性、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法运用qRT-PCR法检测宫颈癌细胞Hela、正常宫颈细胞Ect1/E6E7中LUCAT1、miR-199a-5p的表达;将si-con组(转染si-con)、si-LUCAT1组(转染si-LUCAT1)、miR-199a-5p组(转染miR-199a-5p模拟物)、miR-NC组(转染miR-NC)、si-con+anti-miR-199a-5p组(共转染si-con和anti-miR-199a-5p)、si-LUCAT1+anti-miR-199a-5p组(共转染si-LUCAT1和anti-miR-199a-5p),均用脂质体法转染至Hela细胞;噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的活性;Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性。结果与正常宫颈细胞Ect1/E6E7相比,宫颈癌细胞Hela中LUCAT1表达显著升高,miR-199a-5p表达显著降低;敲减LUCAT1、过表达miR-199a-5p均可明显抑制Hela细胞的活性、迁移和侵袭;miR-199a-5p可抑制野生型LUCAT1细胞的荧光活性,且LUCAT1可负向调控miR-199a-5p的表达;抑制miR-199a-5p可逆转敲减LUCAT1对Hela细胞的活性、迁移、侵袭的抑制作用。结论LUCAT1可促进宫颈癌细胞的活性、迁移、侵袭,其机制可能与靶向miR-199a-5p有关,将可为宫颈癌的治疗提供靶点。 展开更多
关键词 LUCAT1 mir-199a-5p 宫颈癌 迁移 侵袭
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七氟烷预处理上调miR-199a-5p对脊髓缺血/再灌注损伤的保护作用 被引量：9
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作者 鲍宁 马虹 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1230-1234,共5页
目的研究miR-199a-5p在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血/再灌注损伤(SCIRI)中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为:假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、七氟烷+模型组(SEVO+I/R组)。Sham组给予同样的手术,但不吸入七氟烷或夹闭主动脉弓;I/R组无... 目的研究miR-199a-5p在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血/再灌注损伤(SCIRI)中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为:假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、七氟烷+模型组(SEVO+I/R组)。Sham组给予同样的手术,但不吸入七氟烷或夹闭主动脉弓;I/R组无创动脉夹夹闭主动脉弓14 min后再灌注,以建立SCIRI模型;SEVO+I/R组,建立SCIRI模型前吸入2.4%的七氟烷3 h。Basso Beattie Bresnahan评分法评价神经运动功能;TUNEL染色观察细胞凋亡情况;伊文思蓝(EB)测定血-脊髓屏障(BSCB)通透性;realtime qPCR检测miR-199a-5p含量;Western blot测定脊髓组织中caspase-9和Bcl-2水平。结果与假手术组比较,I/R组神经运动功能评分降低,细胞凋亡率增加,BSCB通透性增加,miR-199a-5p表达降低,caspase-9表达增加,Bcl-2表达减少;与I/R组比较,SEVO+I/R组神经运动功能评分增加,细胞凋亡率减少,BSCB通透性减少,miR-199a-5p表达增加,caspase-9表达减少,Bcl-2表达增加。结论七氟烷预处理可能通过增加miR-199a-5p,减少BSCB通透性及细胞凋亡,保护大鼠SCIRI。 展开更多
关键词 七氟烷预处理 缺血/再灌注损伤 脊髓 mir-199a-5p 凋亡 血脊屏障
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MiR-199a-5p通过靶向DRAM1调控急性髓系白血病对阿柔比星的敏感性 被引量：4
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作者 李旸 孙颖 +3 位作者 苗苗 石雪 杨威 刘卓刚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1096-1104,共9页
目的:比较miR-199a-5p在急性髓系白血病(AML)耐药细胞株K562/ADM以及敏感细胞株K562中的表达,研究其对AML耐药的调控效应并探索其机制。方法:采用MTT法检测阿柔比星(ADM)对K562/ADM和K562细胞的生长抑制率并计算IC50。采用实时荧光定量R... 目的:比较miR-199a-5p在急性髓系白血病(AML)耐药细胞株K562/ADM以及敏感细胞株K562中的表达,研究其对AML耐药的调控效应并探索其机制。方法:采用MTT法检测阿柔比星(ADM)对K562/ADM和K562细胞的生长抑制率并计算IC50。采用实时荧光定量RT-PCR的方法检测2种细胞株(K562/ADM和K562)以及患者骨髓标本(复发难治AML患者和化疗后完全缓解AML患者)中miR-199a-5p的表达。通过细胞转染的方法在K562/ADM细胞中转入miR-199a-5p mimic使其表达上调,在K562细胞中转入miR-199a-5p inhibitor使其表达下调,采用CCK-8法检测ADM对2种细胞的增殖抑制率,实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测转染后2种细胞中DRAM1基因和蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-5p与DRAM13′UTR是否存在直接结合位点。采用siRNA的方法下调K562/ADM细胞中DRAM1表达,CCK-8法检测ADM对细胞增殖抑制率的变化。结果:ADM对K562/ADM和K562细胞的IC50分别为146.14±0.079和3.08±0.056μg/ml。miR-199a-5p在复发难治AML患者骨髓中的表达明显低于完全缓解患者,在K562/ADM细胞中的表达明显低于K562细胞(P<0.05)。当K562/ADM细胞中miR-199a-5p表达上调时,ADM对细胞的增殖抑制率升高,DRAM1基因和蛋白表达明显下降。当K562细胞中miR-199a-5p表达下调时,ADM对细胞的增殖抑制率明显下降,DRAM1基因和蛋白表达明显升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-199a-5p与DRAM1的3′UTR区存在直接结合位点。K562/ADM细胞中DRAM1在基因和蛋白水平表达均明显高于K562细胞(P<0.05)。当K562/ADM细胞中DRAM1基因表达下调后,细胞对ADM的敏感性显著升高(P<0.05)。结论:miR-199a-5p在耐药白血病细胞中呈低表达。miR-199a-5p表达能够调控AML细胞对ADM的敏感性。DRAM1是miR-199a-5p调控AML耐药的功能性靶基因。 展开更多
关键词 mir-199a-5p DRAM1 化疗耐药 急性髓系白血病
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lncRNA LUCAT1通过靶向调控miR-199a-5p/HIF-1α促进肾透明细胞癌786-O细胞的增殖和迁移 被引量：7
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作者 林其玲 陈畅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期273-281,共9页
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)786-O细胞的增殖和迁移能力的影响及其作用机制。方法:选取2... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)786-O细胞的增殖和迁移能力的影响及其作用机制。方法:选取2013年6月至2017年6月宜昌市第一人民医院泌尿外科行手术切除的40例ccRCC患者癌组织及相应的癌旁组织样本,组织均经病理检查诊断明确。ccRCC细胞株786-O、ACHN、UM-RC-2及正常肾上皮细胞系KiMA培养完成后,用qPCR法检测cc RCC组织和细胞株中miR-199-a-5p、HIF-1α和LUCAT1T mRNA的表达,用CCK-8实验检测786-O细胞的增殖能力,Transwell法检测786-O细胞的迁移能力,双荧光素酶报告基因实验验证LUCAT1与miR-199a-5p的靶向作用关系,Western blotting实验检测LUCAT1、miR-199a-5p对HIF-1α蛋白表达的影响。结果:LUCAT1在ccRCC组织和细胞系786-O、ACHN和UM-RC-2中呈高表达(均P<0.01),敲低LUCAT1后可明显抑制786-O细胞的增殖和迁移(均P<0.01)。miR-199a-5p在ccRCC组织和细胞系中呈低表达(均P<0.01),StarBase数据库分析结果显示LUCAT1含有miR-199a-5p的保守目标位点,miR-199a-5p对LUCAT1-Wt的报告活性具有明显的抑制作用(P<0.01);敲低LUCAT1可明显降低miR-199a-5p的表达(P<0.01)。LUCAT1在转染miR-199a-5p模拟物的786-O细胞中呈低表达,但在LUCAT1+miR-199a-5p模拟物共转染的786-O细胞中出现逆转(P<0.05或P<0.01)。转染miR-199a-5p模拟物的786-O细胞中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平升高,而LUCAT1过表达可逆转该效应(P<0.05或P<0.01)。转染miR-199a-5p模拟物抑制786-O细胞的增殖和迁移,而转染LUCAT1可部分消除转染miR-199a-5p模拟物对786-O细胞增殖和迁移的影响(P<0.05或P<0.01)。结论:lncRNA LUCAT1通过靶向调节miR-199a-5p/HIF-1α的表达从而在ccRCC中发挥促癌效应。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 肺癌相关转录物1 mir-199a-5p HIF-1Α 肾透明细胞癌 786-O细胞 增殖 迁移
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Caveolin-1和miR-199a-5p在缺血性脑卒中患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中的表达及其意义 被引量：4
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作者 李鹏飞 李帆 +1 位作者 高峰 张春兵 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期1558-1562,共5页
目的探讨缺血性脑卒中(IS)患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中miR-199a-5p和膜微囊蛋白(Cav)-1的表达水平及临床意义。方法初发IS患者(发病24 h内)外周血标本24例,同时收集在体检中心体检的健康人外周血标本22例。Ficoll淋巴细胞分离... 目的探讨缺血性脑卒中(IS)患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中miR-199a-5p和膜微囊蛋白(Cav)-1的表达水平及临床意义。方法初发IS患者(发病24 h内)外周血标本24例,同时收集在体检中心体检的健康人外周血标本22例。Ficoll淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC)。荧光定量PCR检测PBMC中miR-199a-5p和Cav-1的表达水平。采用改良Zea Longa线栓法构建SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)模型。再灌注24 h后进行神经功能评分,收集脑皮质和脾脏组织。荧光定量PCR检测脑皮质和脾脏miR-199a-5p和Cav-1表达水平。结果 IS患者外周血PBMC中miR-199a-5p表达明显升高(P<0.001),Cav-1 mRNA表达显著下降(P<0.05)。与假手术组比较,MCAO模型组脑皮质和脾脏miR-199a-5p明显升高(P<0.001,P<0.01),Cav-1 mRNA表达显著下降(P<0.001,P<0.01)。结论 miR-199a-5p和Cav-1可能为IS患者重要的炎症指标。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 mir-199a-5p 膜微囊蛋白-1
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miR-199a-5p调控DDR1抑制人脑胶质瘤细胞增殖和迁移 被引量：4
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作者 闫兆月 高玉帅 +1 位作者 贾玉龙 步星耀 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期687-692,共6页
目的初步探究miR-199a-5p对人脑胶质瘤细胞增殖和迁移的影响。方法选取U251细胞为实验对象,构建miR-199a-5p过表达U251细胞株。实验分组:对照组(无转染的U251细胞,Control)、阴性对照组(转染空载体质粒U251细胞,NC)以及实验组(转染miR-1... 目的初步探究miR-199a-5p对人脑胶质瘤细胞增殖和迁移的影响。方法选取U251细胞为实验对象,构建miR-199a-5p过表达U251细胞株。实验分组:对照组(无转染的U251细胞,Control)、阴性对照组(转染空载体质粒U251细胞,NC)以及实验组(转染miR-199a-5p成熟模拟物,mimics)。实时荧光定量PCR检测各组细胞miR-199a-5p表达;CCK-8检测转染miR-199a-5p后细胞增殖;细胞划痕实验与Transwell迁移实验检测各组U251迁移情况;Western blot检测DDR1表达;构建DDR1过表达U251细胞株,检测DDR1过表达对转染miR-199a-5p的U251细胞增殖和迁移的影响。结果mimics组细胞miR-199a-5p水平高于control组(P<0.01),细胞活力降低(P<0.01),增殖能力减弱(P<0.01)。转染miR-199a-5p组细胞DDR1表达水平降低(P<0.01)。与mimins组相比,转染pcDNA3.1-DDR1组能够上调DDR1(P<0.01),增加细胞活力,促进细胞增殖(P<0.05或P<0.01)。结论miR-199a-5p能够下调DDR1表达,抑制人脑胶质瘤细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 胶质瘤 增殖 迁移 mir-199a-5p 盘状结构域受体1 U251
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柚皮苷调控miR-199a-5p/ECE1分子轴促进骨损伤修复 被引量：7
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作者 刘冲 曹慧 +1 位作者 杨彩彩 王震 《昆明医科大学学报》 CAS 2020年第6期32-38,共7页
目的探讨柚皮苷通过调控mi R-199a-5p/ECE1分子轴对骨损伤修复的影响。方法 Western blotting检测ECE1及成骨分化相关标志物的表达水平;RT-qPCR检测mi RNAs相对表达水平;双荧光素酶报告基因验证mi R-199a-5p和ECE1靶向关系;MTT检测MC3T3... 目的探讨柚皮苷通过调控mi R-199a-5p/ECE1分子轴对骨损伤修复的影响。方法 Western blotting检测ECE1及成骨分化相关标志物的表达水平;RT-qPCR检测mi RNAs相对表达水平;双荧光素酶报告基因验证mi R-199a-5p和ECE1靶向关系;MTT检测MC3T3-E1细胞增殖活力;碱性磷酸酶(ALP)检测MC3T3-E1细胞成骨分化能力;茜素红染色检测MC3T3-E1细胞矿化情况。结果柚皮苷处理显著促进MC3T3-E1细胞增殖活力、成骨分化指标Runx2、OPN、BMPs、OC等的表达、ALP活性以及细胞钙化能力水平(P<0.01)。其中20ng/m L浓度处理的效果最优。RT-qPCR检测结果显示,柚皮苷能显著上调mi R-199a-5p的表达水平。双荧光素酶报告基因检测结果表明ECE1是mi R-199a-5p的一个靶基因;并且,mi R-199a-5p靶向下调ECE1的表达。进一步实验表明,敲降mi R-199a-5p显著降低柚皮苷对MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和钙矿化的促进作用(P<0.01);敲降ECE1显著促进了柚皮苷对MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和生物矿化能力的促进作用(P<0.01);柚皮苷处理加同时敲降mi R-199a-5p和ECE1组MC3T3-E1细胞增殖活力、ALP活性和钙矿化能力与柚皮苷组无显著差异(P>0.05)。对细胞成骨分化标志的检测也证明了上述结果。由此可知,柚皮苷通过上调mi R-199a-5p对ECE1靶向下调作用,进而促进MC3T3-E1细胞增殖活力、成骨分化和矿化能力。结论柚皮苷处理显著促进了MC3T3-E1细胞的成骨分化水平;这种作用是通过上调mi R-199a-5p/ECE1分子轴实现的。 展开更多
关键词 骨损伤修复 柚皮苷 mir-199a-5p ECE1 成骨分化
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猪miR-199a-5p对脂质生成的影响及其靶基因的预测和分析 被引量：1
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作者 邢宝松 王璟 +5 位作者 陈俊峰 任巧玲 马强 郭红霞 潘传英 曹海 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第1期55-63,共9页
本研究旨在分析miR-199a-5p对猪肌内脂肪细胞脂质生成的影响及作用机制。采集淮南猪不同育肥时期(育肥前期、中期和后期)的背最长肌和皮下脂肪组织,通过实时荧光定量PCR分析其表达变化趋势;合成miR-199a-5p的mimics,转染猪原代肌内脂肪... 本研究旨在分析miR-199a-5p对猪肌内脂肪细胞脂质生成的影响及作用机制。采集淮南猪不同育肥时期(育肥前期、中期和后期)的背最长肌和皮下脂肪组织,通过实时荧光定量PCR分析其表达变化趋势;合成miR-199a-5p的mimics,转染猪原代肌内脂肪细胞,诱导分化后通过油红O染色观察过表达miR-199a-5p对脂质生成的影响;结合之前筛选到的脂肪型和瘦肉型猪差异表达mRNAs、lncRNAs和circRNAs,使用miRanda软件筛选miR-199a-5p的靶分子,并用GO和KEGG富集分析法对这些mRNAs、lncRNAs的共表达基因和circRNAs的来源基因进行功能分析。结果显示,随着育肥进程,miR-199a-5p在背最长肌中表达量持续上调,而在皮下脂肪组织中表达量先下调后上调;过表达miR-199a-5p可抑制肌内脂肪细胞的脂质生成。共筛选到9个mRNAs、5个lncRNAs和1258个circRNAs包含miR-199a-5p结合位点,GO分析主要富集于内质网和肌动蛋白结合,KEGG分析发现主要富集于糖、脂质和蛋白质代谢。提示miR-199a-5p可能通过与lncRNAs和circRNAs互作间接调控靶基因,参与调控肌肉发育、脂质生成和代谢,可作为影响肉质性状的候选miRNA。 展开更多
关键词 mir-199a-5p 脂质生成 lncRNAs circRNAs
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miR-199a-5p在宫颈癌患者癌组织及血清中的表达及临床意义 被引量：2
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作者 李爱丽 孙孝贤 +1 位作者 尚睿 张斐然 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第18期2218-2222,共5页
目的 探讨miR-199a-5p在宫颈癌患者癌组织及血清中的表达及临床意义。方法 选取2016年6月至2018年10月河北省邯郸市中心医院收治的宫颈癌患者100例为宫颈癌组,另选取同期体检的健康女性100例为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qP... 目的 探讨miR-199a-5p在宫颈癌患者癌组织及血清中的表达及临床意义。方法 选取2016年6月至2018年10月河北省邯郸市中心医院收治的宫颈癌患者100例为宫颈癌组,另选取同期体检的健康女性100例为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)分别检测宫颈癌患者癌组织、对应癌旁组织,以及两组血清中miR-199a-5p的相对表达水平;对比分析miR-199a-5p在不同样本中的表达及其与患者临床特征的关系;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-199a-5p诊断宫颈癌的临床价值;采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-199a-5p与宫颈癌患者3年总生存率的关系。结果 宫颈癌患者癌组织中miR-199a-5p的相对表达水平明显高于癌旁组织,宫颈癌组血清miR-199a-5p的相对表达水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同淋巴结转移情况和国际妇产科联盟(FIGO)分期的宫颈癌患者癌组织及血清中miR-199a-5p的相对表达水平差异有统计学意义(P<0.05);而在年龄、肿瘤最大径、绝经、病理分型、分化程度方面,宫颈癌患者癌组织及血清中miR-199a-5p的相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈癌患者癌组织、血清中miR-199a-5p诊断宫颈癌的曲线下面积(AUC)分别为0.808(95%CI:0.651~0.961)、0.748(95%CI:0.537~0.960),诊断效能较高。生存分析结果表明,宫颈癌患者癌组织和血清miR-199a-5p低表达者3年总生存率均显著高于miR-199a-5p高表达者(P<0.05)。结论 miR-199a-5p在宫颈癌患者癌组织及血清中表达均明显上调,且其相对表达水平与宫颈癌淋巴结转移、FIGO分期以及患者生存率有关,miR-199a-5p可作为宫颈癌早期诊断及预后评估的又一指标。 展开更多
关键词 mir-199a-5p 宫颈癌 组织 血清 生存分析
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miR-199a-5p在血管紧张素Ⅱ致心肌肥大细胞中的表达变化
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作者 刘红梅 陈新 +2 位作者 孙丹云 唐渊 李晓辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1017-1020,共4页
目的研究miR．199a-Sp在血管紧张素Ⅱ（AngII）导致肥大心肌细胞中的表达变化。方法雄性sD大鼠30只，采用完全随机方法将其分为假手术组、模型组、氯沙坦组[10mg／（kg·d）]，每组10只。制备腹主动脉缩窄致心肌肥大模型，在术后第2... 目的研究miR．199a-Sp在血管紧张素Ⅱ（AngII）导致肥大心肌细胞中的表达变化。方法雄性sD大鼠30只，采用完全随机方法将其分为假手术组、模型组、氯沙坦组[10mg／（kg·d）]，每组10只。制备腹主动脉缩窄致心肌肥大模型，在术后第28天，检测心脏质量指数和左心室质量指数，HE染色观察左心室心肌细胞肥大情况，qRT—PCR方法测定左心室miR-199a-Sp表达。取10只1-3dSD乳鼠，消化获得心肌细胞，分为对照组、模型组（1×10^-7mol／LAngII）和氯沙坦组（1×10^-7mol／LAngⅡ＋1×10“mol／L氯沙坦钾），qRT．PCR方法测定心肌细胞miR-199a-Sp表达；分别转染miR-199a-Sp模拟物或者抑制物，观察[^3H]-亮氨酸的掺人情况。结果腹主动脉缩窄大鼠左心室心肌细胞明显肥大，左心室miR-199a-5p表达显著升高（P〈0．05），AngⅡ受体拮抗剂氯沙坦可显著逆转上述变化。体外实验发现氯沙坦可显著降低AngII刺激致乳鼠心肌细胞所致的miR-199a-5p显著升高（P〈0．05），采用转染miR-199a-Sp抑制物的方法抑制miR-199a-Sp表达可显著抑制AngII刺激所致的心肌细胞[^3H]-亮氨酸掺入（P〈0．01）；且转染miR-199a-Sp模拟物增加miR-199a-Sp表达可显著增加[^3H]．亮氨酸掺入（P〈0．01）。结论miR-199a-Sp是介导AngⅡ致心肌细胞肥大的重要调节分子，可能在该信号通路中发挥重要作用。 展开更多
关键词 腹主动脉缩窄 心肌肥大 血管紧张素II 心肌细胞 mir-199a-5p
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