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NEAT1、miR-27a-3p在阿尔茨海默病患者血清和脑脊液中的表达关系
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作者 何丽杰 张春艳 王静 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期207-212,共6页
目的:探究长链非编码RNA核富含丰富的转录本1(long chain non-coding RNA nuclear-enriched abundant transcript 1, LncRNA NEAT1)、miR-27a-3p在阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)患者血清和脑脊液中的表达关系及意义。方法:选择2... 目的:探究长链非编码RNA核富含丰富的转录本1(long chain non-coding RNA nuclear-enriched abundant transcript 1, LncRNA NEAT1)、miR-27a-3p在阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)患者血清和脑脊液中的表达关系及意义。方法:选择2019年10月至2021年9月天津市第五中心医院神经内科收治的AD患者66例作为病例组,根据临床痴呆评定量表(clinical dementia rating, CDR)评分分为轻度组(≤1分,n=41)与中重度组(>1分,n=25);另取同期门诊其他就诊患者血清和脑脊液标本66例志愿者作为对照组。收集所有受试者的一般资料并评估认知程度,采用实时荧光定量PCR检测血清和脑脊液miR-27a-3p、NEAT1表达水平,酶联免疫吸附试验检测脑脊液β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1,BACE1)、β淀粉样蛋白(amyloid β,Aβ)40和Aβ42水平,采用Spearman法分析血清miR-27a-3p、NEAT1水平与简易精神状态检测量表的相关性,采用Pearson法分析血清miR-27a-3p、NEAT1水平与Aβ沉积平均标准摄取值比率(standardized uptake value ratio, SUVR)及脑脊液miR-27a-3p、NEAT1、BACE1、Aβ42、Aβ40水平的相关性。结果:MMSE评分[21 (17,25),9(7,11)vs. 27 (21,34)]、MoCA评分[17 (12,21),10 (7,13)vs. 27 (21,31)]、血清miR-27a-3p水平(0.55±0.13,0.46±0.06 vs. 0.97±0.22)、脑脊液miR-27a-3p(0.48±0.10,0.35±0.10 vs. 1.03±0.31)、Aβ42水平[(303.55±36.77) ng/L,(231.45±34.14) ng/L vs.(499.99±53.63) ng/L]及Aβ42/Aβ40比值(0.030±0.008, 0.022±0.007 vs. 0.048±0.010)轻度组、中重度组AD患者均低于对照组(P均<0.05),且中重度组AD患者较轻度组低(P均<0.05);血清NEAT1水平(2.31±0.64,3.13±0.76 vs. 1.05±0.20)、SUVR(1.50±0.29,1.76±0.52 vs. 0.74±0.15)及脑脊液NEAT1(3.51±1.24,4.30±1.65 vs. 1.01±0.23)、BACE1水平[(55.78±5.98)μg/L,(72.32±16.08)μg/L vs.(21.39±3.73)μg/L]轻度组、中重度组AD患者均高于对照组(P均<0.05),且中重度组AD患者较轻度组高(P均<0.05)。AD患者血清NEAT1水平与SUVR及脑脊液NEAT1、BACE1呈正相关(r=0.350,0.606,0.341,P<0.05),与MMSE评分、MoCA评分呈负相关(r=-0.473,-0.482,P均<0.05);血清miR-27a-3p水平与脑脊液miR-27a-3p水平、MMSE评分、MoCA评分呈正相关(r=0.695,0.424,0.412,P<0.05),与SUVR及脑脊液BACE1水平呈负相关(r=-0.521、-0.447,P均<0.05)。结论:NEAT1、miR-27a-3p在AD患者血清及脑脊液中表达趋势具有一致性,NEAT1水平均升高,miR-27a-3p水平均降低,二者水平呈负相关,与AD患者脑中Aβ沉积程度有关,并参与AD的病情进展。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 长链非编码RNA核富含丰富的转录本1 mir-27a-3p Β淀粉样蛋白 相关性
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慢性间歇低氧和复氧对大鼠胰岛素抵抗及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响
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作者 周雪利 李华 +5 位作者 陈青宇 靳美娜 李海波 白炜 贾楚璇 魏翠英 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1729-1737,共9页
目的探讨慢性间歇低氧(CIH)和复氧对大鼠胰岛素抵抗(IR)及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响。方法从基因表达数据库(GEO)中下载CIH条件下miRNA数据集,运用DESeq2筛选差异表达最显著的miRNA作为研究对象,使用miRNA walk... 目的探讨慢性间歇低氧(CIH)和复氧对大鼠胰岛素抵抗(IR)及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响。方法从基因表达数据库(GEO)中下载CIH条件下miRNA数据集,运用DESeq2筛选差异表达最显著的miRNA作为研究对象,使用miRNA walk网站对差异miRNA的靶基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,并Cytoscape软件构建miRNA-mRNA-pathway调控网络。将48只雄性SD大鼠随机分为对照(CON)组和CIH组,24只/组,CON组常氧环境饲养12周,CIH组先予CIH环境饲养8周,再恢复常氧饲养4周。两组均在基线、8周、12周时留取血样和骨骼肌组织,检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,HE染色观察骨骼肌病理改变并计算肌纤维横截面积,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blotting法检测骨骼肌miR-27a-3p、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、胰岛素受体1(IRS1)、p-IRS1、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸激酶B(AKT)、p-AKT表达,比较组间差异。结果生信分析发现,GEO数据库未筛选出CIH状态下肌肉组织相关的miRNA数据集,仅得到肾脏组织差异表达miRNA的GSE202480数据集,从CON组和CIH组样本中筛选出165个差异表达的miRNA,选最显著miR-27a-3p作为研究对象。GO和KEGG分析显示,差异miRNA的靶基因主要参与肌肉调节和胰岛素信号传导。miRNA-mRNA-pathway调控网络显示miR-27a-3p是PPAR信号通路和PI3K/AKT信号通路的关键调控因子。动物实验发现,基线时,两组各项观察指标均无统计学意义(P>0.05);8周时,与CON组相比,CIH组FBG、FINS、HOMA-IR、PPARγ显著升高(P<0.05或P<0.01),肌纤维排列疏松,肌纤维横截面积、miR-27a-3p、p-IRS1/IRS1、PI3K、p-AKT/AKT显著降低(P<0.05或P<0.01),GLUT4表达呈升高趋势但无统计学意义(P>0.05);12周时,两组各项观察指标均无统计学意义(P>0.05)。结论CIH可导致大鼠IR增加和骨骼肌病理改变,而复氧可以逆转;CIH可致骨骼肌miR-27a-3p表达下调,PPARγ表达上调,IRS1/PI3K/AKT胰岛素信号转导受到抑制,而复氧干预可以逆转;miR-27a-3p可能通过调控PPARγ/IRS1/PI3K/AKT信号通路参与了CIH所致的IR。 展开更多
关键词 慢性间歇低氧-复氧 胰岛素抵抗 GEO mir-27a-3p IRS1/pI3K/AKT通路
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miR-27a-3p激活MAPK信号通路促进人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖
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作者 李俊 巩晶晶 +5 位作者 孙国斌 郭睿 丁杨 强立娟 张晓莉 方占海 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第8期1609-1617,共9页
背景:目前多项研究证实了丝裂原活化蛋白激酶信号通路参与了细胞的增殖过程,且miRNA参与增生性瘢痕的发生发展,因此深入探讨了miR-27a-3p和丝裂原活化蛋白激酶信号通路在病理性瘢痕形成中的作用。目的:探究miR-27a-3p通过丝裂原活化蛋... 背景:目前多项研究证实了丝裂原活化蛋白激酶信号通路参与了细胞的增殖过程,且miRNA参与增生性瘢痕的发生发展,因此深入探讨了miR-27a-3p和丝裂原活化蛋白激酶信号通路在病理性瘢痕形成中的作用。目的:探究miR-27a-3p通过丝裂原活化蛋白激酶信号通路对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法:收集皮肤标本并分别分离出原代成纤维细胞,倒置显微镜观察原代细胞,免疫荧光予以验证;采用qRT-PCR检测miR-27a-3p在组织中的相对表达水平;利用数据库预测miR-27a-3p的靶基因,再将预测的靶基因进行基因本体功能富集分析及京都基因与基因组百科全书生物通路富集分析;设置分组为:空白对照组、阴性对照组、miR-27a-3p过表达组、miR-27a-3p抑制组、miR-27a-3p过表达+p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂组、miR-27a-3p过表达+细胞外信号调节蛋白激酶抑制剂组、miR-27a-3p过表达+c-Jun氨基末端激酶抑制剂组,Western blot检测细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38激酶总量及其磷酸化水平,采用CCK-8法和EdU检测细胞增殖情况。结果与结论:①与正常皮肤成纤维细胞相比,增生性瘢痕成纤维细胞的增殖活性更强(P<0.05),增殖速度也更快(P<0.001);②与正常皮肤相比,miR-27a-3p在增生性瘢痕中呈高表达(P<0.001);③与阴性对照组相比,过表达miR-27a-3p能促进细胞的增殖活性(P<0.001)和增殖水平(P<0.001);④与阴性对照组相比,敲低miR-27a-3p能抑制细胞的增殖活性(P<0.05)和增殖水平(P<0.001);⑤与阴性对照组相比,过表达miR-27a-3p促进细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶的磷酸化水平(P<0.05);与阴性对照组相比,敲减miR-27a-3p能抑制细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶的磷酸化水平(P<0.05);⑥与miR-27a-3p过表达组相比,细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶的特异性抑制剂可逆转miR-27a-3p对成纤维细胞的增殖活性(P<0.01)和增殖水平(P<0.001);⑦提示miR-27a-3p通过激活丝裂原活化蛋白激酶信号通路促进人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。 展开更多
关键词 mir-27a-3p 丝裂原活化蛋白激酶 增生性瘢痕 成纤维细胞 增殖
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BMSC-derived Exosomes Ameliorate Peritoneal Dialysis-associated Peritoneal Fibrosis via the Mir-27a-3p/TP53 Pathway 被引量:1
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作者 Jun-li ZHAO Lin ZHAO +3 位作者 Qiu-nan ZHAN Miao LIU Ting ZHANG Wen-wen CHU 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2024年第2期333-345,共13页
Objective:Peritoneal fibrosis(PF)is the main cause of declining efficiency and ultrafiltration failure of the peritoneum,which restricts the long-term application of peritoneal dialysis(PD).This study aimed to investi... Objective:Peritoneal fibrosis(PF)is the main cause of declining efficiency and ultrafiltration failure of the peritoneum,which restricts the long-term application of peritoneal dialysis(PD).This study aimed to investigate the therapeutic effects and mechanisms of bone marrow mesenchymal stem cells-derived exosomes(BMSC-Exos)on PF in response to PD.Methods:Small RNA sequencing analysis of BMSC-Exos was performed by second-generation sequencing.C57BL/6J mice were infused with 4.25%glucose-based peritoneal dialysis fluid(PDF)for 6 consecutive weeks to establish a PF model.A total of 36 mice were randomly divided into 6 groups:control group,1.5%PDF group,2.5%PDF group,4.25%PDF group,BMSC-Exos treatment group,and BMSC-Exos+TP53 treatment group.Reverse transcription quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR)was performed to measure the expression level of miR-27a-3p in BMSC-Exos and peritoneum of mice treated with different concentrations of PDF.HE and Masson staining were performed to evaluate the extent of PF.The therapeutic potential of BMSC-Exos for PF was examined through pathological examination,RT-qPCR,Western blotting,and peritoneal function analyses.Epithelial-mesenchymal transition(EMT)of HMrSV5 was induced with 4.25%PDF.Cells were divided into control group,4.25%PDF group,BMSC-Exos treatment group,and BMSC-Exos+TP53 treatment group.Cell Counting Kit-8 assay was used to measure cell viability,and transwell migration assay was used to verify the capacity of BMSC-Exos to inhibit EMT in HMrSV5 cells.Results:Small RNA sequencing analysis showed that miR-27a-3p was highly expressed in BMSC-derived exosomes compared to BMSCs.The RT-qPCR results showed that the expression of miR-27a-3p was upregulated in BMSC-Exos,but decreased in PD mice.We found that PF was glucose concentration-dependently enhanced in the peritoneum of the PD mice.Compared with the control mice,the PD mice showed high solute transport and decreased ultrafiltration volume as well as an obvious fibroproliferative response,with markedly increased peritoneal thickness and higher expression ofα-SMA,collagen-I,fibronectin,and ECM1.The mice with PD showed decreased miR-27a-3p.Peritoneal structural and functional damage was significantly attenuated after BMSC-Exos treatment,while PF and mesothelial damage were significantly ameliorated.Additionally,markers of fibrosis(α-SMA,collagen-I,fibronectin,ECM1)and profibrotic cytokines(TGF-β1,PDGF)were downregulated at the mRNA and protein levels after BMSC-Exos treatment.In HMrSV5 cells,BMSC-Exos reversed the decrease in cell viability and the increase in cell migratory capacity caused by high-glucose PDF.Western blotting and RT-qPCR analysis revealed that BMSC-Exos treatment resulted in increased expression of E-cadherin(epithelial marker)and decreased expression ofα-SMA,Snail,and vimentin(mesenchymal markers)compared to those of the 4.25%PDF-treated cells.Importantly,a dual-luciferase reporter assay showed that TP53 was a target gene of miR-27a-3p.TP53 overexpression significantly reversed the decreases in PF and EMT progression induced by BMSC-Exos.Conclusion:The present results demonstrate that BMSC-Exos showed an obvious protective effect on PD-related PF and suggest that BMSC-derived exosomal miR-27a-3p may exert its inhibitory effect on PF and EMT progression by targeting TP53. 展开更多
关键词 peritoneal fibrosis bone marrow mesenchymal stem cell-derived exosomes mir-27a-3p Tp53 epithelialmesenchymal transition
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高血压并发冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清miR-27a-3p和HOXC6水平表达与冠状动脉病变的相关性研究
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作者 孙实 李想 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第3期67-71,182,共6页
目的探讨高血压并发冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血清微小核糖核酸-27a-3p(miR-27a-3p)和同源异型盒C6(homeobox C6,HOXC6)水平表达与冠状动脉病变的相关性,为高血压并发冠心病的防治提供一定参考。方法选取北大荒集团总医院2... 目的探讨高血压并发冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血清微小核糖核酸-27a-3p(miR-27a-3p)和同源异型盒C6(homeobox C6,HOXC6)水平表达与冠状动脉病变的相关性,为高血压并发冠心病的防治提供一定参考。方法选取北大荒集团总医院2021年6月~2023年6月接诊的246例高血压患者为研究对象,其中129例高血压并发冠心病患者作为并发组,117例单纯高血压患者作为未并发组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real timePCR,qRT-PCR)检测血清miR-27a-3p和HOXC6表达水平;运用Spearman法分析高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p和HOXC6水平与冠状动脉病变的相关性;多因素Logistic回归分析高血压并发冠心病的影响因素;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-27a-3p,HOXC6水平对高血压并发冠心病的预测价值。结果并发组高血压病程(6.69±1.35年)、总胆固醇(total cholesterol,TC)(5.96±0.86mmol/L)、低密度脂蛋白-胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)(3.36±0.51mmol/L)均显著高于未并发组(5.87±1.32年,5.42±0.67mmol/L,2.98±0.48mmol/L),并发组血清miR-27a-3p(1.35±0.34),HOXC6(1.29±0.33)水平均显著高于未并发组(1.06±0.23,1.03±0.25),差异具有统计学意义(t=4.808,5.454,6.001,7.755,6.911,均P<0.05);轻度组、中度组、重度组患者血清miR-27a-3p(0.54±0.13,1.19±0.31,2.18±0.55)和HOXC6(0.47±0.12,1.12±0.31,2.13±0.52)表达水平逐渐升高,差异具有统计学意义(F=191.026,191.026,均P<0.05)。高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p,HOXC6与SYNTAX评分具呈正相关性(r=0.563,0.517,均P<0.05);血清miR-27a-3p[OR(95%CI:1.627(1.177~2.248)]、HOXC6[OR(95%CI):1.715(1.069~2.750)]是影响高血压并发冠心病的独立危险因素(P<0.05);血清miR-27a-3p和HOXC6联合预测高血压并发冠心病的AUC为0.896(95%CI:0.851~0.931),优于各自单独诊断(Z=2.133,2.815,均P<0.05)。结论高血压并发冠心病患者血清miR-27a-3p,HOXC6水平均显著升高,且与冠状动脉病变密切相关,二者联合对高血压并发冠心病具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 微小核糖核酸-27a-3p 同源异型盒C6 高血压 冠状动脉粥样硬化性心脏病 冠状动脉病变
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miR-27a-3p靶向Rnd3对氧糖剥夺/复氧诱导的神经细胞凋亡的影响
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作者 李俊杰 白文娅 +2 位作者 陈文栋 杨伟 邵建林 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第23期3051-3057,共7页
目的探讨miR-27a-3p调控Rho家族GTP酶3(Rnd3)在氧糖剥夺/复氧(OGD/R)神经细胞凋亡中的作用及机制。方法体外培养大鼠PC12神经细胞,氧糖剥夺2 h后分别复氧3、6、9和12 h,检测各时刻细胞活力、miR-27a-3p和Rnd3 mRNA的表达筛选最适复氧时... 目的探讨miR-27a-3p调控Rho家族GTP酶3(Rnd3)在氧糖剥夺/复氧(OGD/R)神经细胞凋亡中的作用及机制。方法体外培养大鼠PC12神经细胞,氧糖剥夺2 h后分别复氧3、6、9和12 h,检测各时刻细胞活力、miR-27a-3p和Rnd3 mRNA的表达筛选最适复氧时间点。采用慢病毒分别转染miR-27a-3p Mimic、miR-27a-3p Inhibitor及二者的阴性对照、转染shRnd3及其阴性对照、或共转染shRnd3和miR-27a-3p Inhibitor入细胞后,CCK-8法检测细胞的活力;流式细胞术检测细胞的凋亡率;RT-qPCR检测miR-27a-3p和Rnd3 mRNA的表达;Western blot检测凋亡相关蛋白和Rnd3蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-27a-3p和Rnd3的靶向关系。结果上调miR-27a-3p提高了细胞活力,降低了细胞的总凋亡率、抑制了促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3(C-caspase-3)、Bax和促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,差异有统计学意义(P<0.05);下调miR-27a-3p则出现相反的结果。双荧光素酶报告基因实验显示Rnd3是miR-27a-3p的靶基因。下调Rnd3提高了细胞活力,降低了细胞的总凋亡率、抑制了促凋亡蛋白C-caspase-3、Bax和促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。然而,miR-27a-3p Inhibitor逆转了shRnd3的保护作用。结论miR-27a-3p通过靶向抑制Rnd3抑制细胞凋亡减轻PC12神经细胞的OGD/R损伤。 展开更多
关键词 mir-27a-3p 氧糖剥夺/复氧 Rnd3 细胞凋亡
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miR-27a-3p介导TLR4/TRIF信号通路对脑出血大鼠神经的保护作用
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作者 王晓利 张江涛 +3 位作者 张晓坤 程明艳 王晓成 姜浩 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期2500-2503,共4页
目的分析miR-27a-3p介导Toll样受体(TLR)4/β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)信号通路对脑出血大鼠神经的保护作用。方法选取80只SD级雄性大鼠,20只作为正常组,其余60只建立大鼠脑出血模型后随机分为模型组、上调组、下调组各20只,做miR-... 目的分析miR-27a-3p介导Toll样受体(TLR)4/β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)信号通路对脑出血大鼠神经的保护作用。方法选取80只SD级雄性大鼠,20只作为正常组,其余60只建立大鼠脑出血模型后随机分为模型组、上调组、下调组各20只,做miR-27a-3p转染,鉴定miR-27a-3p转染率、脑组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量、神经功能缺损情况、TLR4/TRIF信号通路蛋白表达情况。结果与模型组相比,上调组miR-27a-3p表达量升高,下调组miR-27a-3p表达量降低,具有统计学差异(P<0.05),证明miR-27a-3p转染成功。相比于正常组,模型组、上调组、下调组TNF-α、IL-1β含量、神经功能缺损评分、TLR4、TRIF、TRAM含量升高,具有统计学差异(P<0.05);相比于模型组,下调组TNF-α、IL-1β含量、神经功能缺损评分、TLR4、TRIF、TRAM含量升高,上调组TNF-α、IL-1β含量、神经功能缺损评分、TLR4、TRIF、TRAM含量降低,具有统计学差异(P<0.05);且下调组TNF-α、IL-1β含量、神经功能缺损评分、TLR4、TRIF、TRAM含量高于上调组,具有统计学差异(P<0.05)。结论miR-27a-3p可介导TLR4/TRIF信号通路对脑出血大鼠神经起到保护作用。减少大鼠脑内炎症反应。 展开更多
关键词 mir-27a-3p Toll样受体(TLR)4/β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)信号通路 脑出血 神经保护
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LRTN4RL1-AS通过miR-27a-3p靶向PPARγ调节奶牛乳腺细胞乳脂合成 被引量:1
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作者 贾鸿儒 杨超群 +3 位作者 王萌 吴章情 昝林森 杨武才 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1465-1477,共13页
旨在探究lncRNA-LRTN4RL1-AS/miR-27a-3p/PPARγ轴在奶牛乳脂合成中的作用及其调控机制。本研究以奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)为试验对象,对处理组与对照组进行3个生物学重复,通过实时荧光定量(real time ... 旨在探究lncRNA-LRTN4RL1-AS/miR-27a-3p/PPARγ轴在奶牛乳脂合成中的作用及其调控机制。本研究以奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)为试验对象,对处理组与对照组进行3个生物学重复,通过实时荧光定量(real time quantitative PCR,RT-qPCR)、WB(Western blot)、油红O染色和甘油三酯检测、双荧光素酶报告等技术检测lncRNA-LRTN4RL1-AS对BMECs中甘油三酯积累及脂质合成相关基因表达量的影响,验证LRTN4RL1-AS-miR-27a-3p-PPARγ存在内源竞争RNA(competing endogenous RNAs,ceRNA)的靶向关系。结果表明,LRTN4RL1-AS主要在细胞质中表达,干扰LRTN4RL1-AS后显著抑制了BMECs的脂滴形成和甘油三酯积累(P<0.05),显著下调脂质合成相关基因CEBPα(P<0.01)、CEBPβ(P<0.01)和PPARγ(P<0.05)表达,且显著上调脂质分解基因HSL表达(P<0.05);双荧光素酶报告试验发现,转染mimics-miR-27a-3p,LRTN4RL1-AS突变型组荧光素酶活性显著高于LRTN4RL1-AS野生型组(P<0.01),证实LRTN4RL1-AS与miR-27a-3p之间存在靶向结合关系;共转染试验发现,inhibitor-miR-27a-3p逆转了干扰LRTN4RL1-AS对乳脂合成的抑制作用(P<0.05),同时降低了si-LRTN4RL1-AS对PPARγ基因的表达抑制。结果显示,LRTN4RL1-AS通过竞争性结合miR-27a-3p调控PPARγ表达来调节BMECs乳脂合成。 展开更多
关键词 乳脂肪 lncRNA ppARΓ mir-27a-3p
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老年动脉瘤性蛛网膜下腔出血介入栓塞术治疗患者血清miR-124、miR-27a-3p与预后的关系 被引量:3
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作者 李伦 段建 幸文利 《山东医药》 CAS 2023年第23期65-68,共4页
目的观察老年动脉瘤性蛛网膜下腔出血(SAH)患者介入栓塞术治疗前后血清miR-124、miR-27a-3p水平变化,并探讨其与患者预后的关系。方法选取老年动脉瘤性SAH经颅内动脉瘤介入栓塞术治疗患者200例,根据术后28 d生存情况分为生存组182例和... 目的观察老年动脉瘤性蛛网膜下腔出血(SAH)患者介入栓塞术治疗前后血清miR-124、miR-27a-3p水平变化,并探讨其与患者预后的关系。方法选取老年动脉瘤性SAH经颅内动脉瘤介入栓塞术治疗患者200例,根据术后28 d生存情况分为生存组182例和死亡组18例。采用实时荧光定量PCR法检测两组术前及术后3、7 d的血清miR-124、miR-27a-3p。绘制术后3、7 d血清miR-124、miR-27a-3p预测患者死亡的受试者工作特征(ROC)曲线,分析其预测价值。根据临界值,比较术后3、7 d不同血清miR-124、miR-27a-3p水平患者的28 d生存率,多因素Logistic回归分析其对患者预后的影响。结果与术前比较,两组术后3、7 d血清miR-124水平均升高、miR-27a-3p水平均降低,且死亡组变化更明显(P均<0.05)。术后3 d血清miR-124、miR-27a-3p预测患者死亡的AUC均小于术后7 d,术后7 d血清miR-124、miR-27a-3p联合预测患者死亡的AUC为0.906(95%CI:0.834~0.954),敏感度及特异度分别为94.44%、76.67%。根据临界值,术后3 d不同血清miR-124、miR-27a-3p水平者28 d生存率比较差异无统计学意义(P均>0.05),术后7 d血清miR-124>10.31、miR-27a-3p≤0.06者28 d生存率均低于血清miR-124≤10.31、miR-27a-3p>0.06者(P均<0.05)。术后3、7 d miR-124水平升高、miR-27a-3p水平降低均是患者死亡的独立影响因素(P均<0.05)。结论老年动脉瘤性SAH患者介入栓塞术后血清miR-124水平升高、miR-27a-3p水平降低,且死亡患者变化更明显,二者联合检测有助于评估患者的生存情况。 展开更多
关键词 颅内动脉瘤介入栓塞术 mir-27a-3p mir-124 生存分析 动脉瘤性蛛网膜下腔出血
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血清miR-27a-3p与miR-141-3p在老年高血压性脑出血患者中的表达及其与预后的关系 被引量:3
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作者 刘晓雨 吕涌涛 +4 位作者 赵修敏 冯肖亚 刘磊 朱百科 张军 《国际老年医学杂志》 2023年第4期403-407,共5页
目的探究血清miR-27a-3p与miR-141-3p在老年高血压性脑出血患者中的表达及其与预后的关系。方法选取山东省立第三医院2020年4月~2021年9月收治的124例老年高血压性脑出血患者作为观察组,按照格拉斯哥昏迷(GCS)评分将患者分为轻度组(GCS ... 目的探究血清miR-27a-3p与miR-141-3p在老年高血压性脑出血患者中的表达及其与预后的关系。方法选取山东省立第三医院2020年4月~2021年9月收治的124例老年高血压性脑出血患者作为观察组,按照格拉斯哥昏迷(GCS)评分将患者分为轻度组(GCS 13~14分,55例)、中度组(GCS 9~12分,46例)及重度组(GCS 3~8分,23例),根据出院后3个月的格拉斯哥预后(GOS)评分将观察组分为预后良好组(GOS>4分,65例)和预后不良组(GOS≤4分,59例)。另选取同期在本院接受体检的55例健康志愿者作为对照组。对比观察组与对照组的miR-27a-3p、miR-141-3p、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素1β(IL-1β)水平。采用Pearson相关系数分析miR-27a-3p、miR-141-3p与TNF-α、VEGF、IL-1β之间的相关性;采用logistic多因素回归分析影响老年高血压性脑出血患者预后的不良因素。结果观察组miR-27a-3p、miR-141-3p水平低于对照组,TNF-α、VEGF及IL-1β水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度组miR-27a-3p、miR-141-3p水平低于轻度组和中度组(P<0.05),TNF-α、VEGF及IL-1β水平高于轻度组和中度组(P<0.05);中度组miR-27a-3p、miR-141-3p水平低于轻度组,TNF-α、VEGF及IL-1β高于轻度组(P<0.05);观察组miR-27a-3p与miR-141-3p呈正相关(P<0.05),miR-27a-3p与TNF-α、VEGF及IL-1β呈负相关(P<0.05),miR-141-3p与TNF-α、VEGF及IL-1β呈负相关(P<0.05);logistic回归分析显示,小脑及脑干出血是影响老年高血压性脑出血患者预后的独立危险因素(P<0.05),miR-27a-3p>0.165、miR-141-3p>1.035是老年高血压性脑出血患者预后的保护性因素(P<0.05)。结论血清miR-27a-3p与miR-141-3p在老年高血压性脑出血患者中的水平较低,对患者病情判断以及预后评估具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 mir-27a-3p mir-141-3p 高血压性脑出血 预后
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lncRNA MEG3靶向调节miR-27a-3p抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的实验研究
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作者 张新如 胡广军 +3 位作者 宗殿亮 孙清森 赵俊卿 谷斌 《中国现代普通外科进展》 CAS 2023年第9期678-681,687,共5页
目的:探究lncRNA MEG3对胃癌(GC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:qRT-PCR检测人正常胃上皮细胞GES-1和GC细胞(BGC823、MGC803、SGC7901、AGS、MKN28、MKN451)中MEG3及miR-27a-3p表达差异;将AGS细胞分为对照组、GV144组、GV144-... 目的:探究lncRNA MEG3对胃癌(GC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法:qRT-PCR检测人正常胃上皮细胞GES-1和GC细胞(BGC823、MGC803、SGC7901、AGS、MKN28、MKN451)中MEG3及miR-27a-3p表达差异;将AGS细胞分为对照组、GV144组、GV144-MEG3组、GV144-MEG3+miR-27a-3p NC组、GV144-MEG3+miR-27a-3p mimics组;比较各组AGS细胞中MEG3及miR-27a-3p表达情况;检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,Western blot检测ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证MEG3与miR-27a-3p的靶向关系。结果:与GES-1细胞相比,GC细胞中MEG3水平降低,miR-27a-3p水平升高(P<0.05);与对照组相比,GV144-MEG3组MEG3水平升高,miR-27a-3p、ki-67、MMP-2、MMP-9水平及增殖、迁移和侵袭能力降低(P<0.05);上调miR-27a-3p表达可减弱MEG3过表达对AGS细胞恶性行为的抑制作用。miR-27a-3p是MEG3的靶基因。结论:过表达MEG3可能通过靶向下调miRNA-27a-3p表达抑制AGS细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码RNA人母系表达基因3 mir-27a-3p 胃癌 增殖 迁移 侵袭
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循环miR-27a-3p水平与新发皮质下小梗死严重程度及短期神经功能预后的关系 被引量:1
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作者 周婵娟 龙发青 +1 位作者 王文菊 赵仕玉 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第18期2232-2237,共6页
目的 探讨循环microRNA(miRNA)-27a-3p水平与新发皮质下小梗死(RSSI)严重程度及患者短期神经功能预后的相关性。方法 选取2018年5月至2021年6月海南省东方市人民医院收治的153例RSSI患者作为RSSI组,另外纳入头部磁共振成像(MRI)检查无... 目的 探讨循环microRNA(miRNA)-27a-3p水平与新发皮质下小梗死(RSSI)严重程度及患者短期神经功能预后的相关性。方法 选取2018年5月至2021年6月海南省东方市人民医院收治的153例RSSI患者作为RSSI组,另外纳入头部磁共振成像(MRI)检查无异常的健康志愿者150例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测循环miR-27a-3p表达水平。结果 RSSI组患者循环miR-27a-3p水平显著高于健康对照组(P<0.05)。经Spearman秩相关系数和多元线性回归分析,RSSI患者循环miR-27a-3p水平与梗死体积、MRI总负荷、白质高信号(WMH)、血管周围间隙增大(EPVS)呈正相关(P<0.05)。RSSI患者循环miR-27a-3p水平与发病14 d时美国国立卫生研究院卒中量表评分变化(ΔNIHSS)、NIHSS改善率也呈正相关(P<0.05),而与基线NIHSS无相关性(P>0.05)。结论 循环miR-27a-3p反映了RSSI的严重程度,可作为短期神经功能预后的预测因子。在脑小血管病影像学特征上,它可以反映WMH和EPVS的严重程度,对脑血管疾病的诊断和治疗具有一定指导意义。 展开更多
关键词 微小RNa-27a-3p 脑小血管病 新发皮质下小梗死 神经功能预后
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miR-27a-3p靶向SnoN抑制高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞EMT的作用 被引量:12
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作者 彭君 彭家清 +2 位作者 秦鹏 罗先荣 张敏 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期45-51,共7页
目的研究miR-27a-3p对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞EMT的影响并探讨其机制。方法运用qRT-PCR检测HK2细胞中miR-27a-3p的表达;将HG+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、HG+anti-miR-27a-3p组(转染anti-miR-27a-3p)、HG+pcDNA组(转染pcD... 目的研究miR-27a-3p对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞EMT的影响并探讨其机制。方法运用qRT-PCR检测HK2细胞中miR-27a-3p的表达;将HG+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、HG+anti-miR-27a-3p组(转染anti-miR-27a-3p)、HG+pcDNA组(转染pcDNA)、HG+pcDNA-SnoN组(转染pcDNA-SnoN),均用脂质体转染至HK2细胞,并用D-葡萄糖(30 mmol/L)处理48 h;Western blot检测各组细胞中E-cadherin、N-cadherin、SnoN、TGF-β1、p-Smad2的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果与低糖对照组相比,HG组细胞中miR-27a-3p显著升高,SnoN显著降低,E-cadherin、p-Smad2显著降低,N-cadherin、TGF-β1表达显著升高,(P<0.05);抑制miR-27a-3p、过表达SnoN均可上调E-cadherin,下调N-cadherin,抑制HK2细胞EMT;SnoN是miR-27a-3p的靶点。过表达SnoN可下调TGF-β1,上调p-Smad2,失活TGF-1信号通路。结论miR-27a-3p可抑制高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞EMT,其机制可能与靶向SnoN失活TGF-β1信号通路有关,将可为糖尿病肾病的治疗提供依据。 展开更多
关键词 mir-27a-3p SNON EMT TGF-β1信号通路
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miR-27a-3p对肝癌细胞化疗敏感性的影响及机制探讨 被引量:7
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作者 杨颖 杨志芳 +7 位作者 才层 张瑞丽 路鹏霏 贾春丽 李志鹏 毛睿 张华 包永星 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期788-794,共7页
背景与目的:肝细胞肝癌是一种临床上常见的恶性肿瘤,由于其对化疗药物的耐受,常导致预后较差。microRNA(miRNA,miR)是一类长链非编码小RNA,参与肿瘤的多种生物学功能。miR-27a-3p作为代谢相关的miRNA被广泛地研究,而与化疗敏感性之间关... 背景与目的:肝细胞肝癌是一种临床上常见的恶性肿瘤,由于其对化疗药物的耐受,常导致预后较差。microRNA(miRNA,miR)是一类长链非编码小RNA,参与肿瘤的多种生物学功能。miR-27a-3p作为代谢相关的miRNA被广泛地研究,而与化疗敏感性之间关系的报道较少。通过探讨miR-27a-3p参与肝癌化疗敏感性及其可能机制,为肝癌化疗提供新的理论依据。方法:应用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析miR-27a-3p在肝细胞肝癌患者癌组织与癌旁组织中的表达。采用LipofectamineTM 3000脂质体瞬时转染方法,将miR-27a-3p过表达质粒和阴性对照质粒(miR-control)转染肝癌细胞株HepG2,将敲低质粒miR-inhibitor-27a-3p和阴性对照质粒(miR-inhibitor-control)转染PLC细胞,分别加入不同浓度的顺铂(cisplatin,DDP)处理48 h,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白[质]印迹法(Western blot)技术检测磷脂酰肌醇3激酶和蛋白激酶B(phosphoinosmde-3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路相关的蛋白表达。结果:miR-27a-3p在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.05);在HepG2过表达细胞中,MTT结果显示,实验组miR-27a+DDP细胞对DDP的半数抑制浓度(IC50)为(1.02±0.03)μg/mL,较对照组miR-control+DDP(1.27±0.08)μg/mL、空白对照组+DDP(1.73±0.08)μg/mL均降低(P<0.05);细胞凋亡分析结果显示,实验组miR-27a+DDP的凋亡率[(31.03±0.20)%]显著高于对照组+DDP[(18.51±2.96)%]和空白对照组+DDP[(8.73±1.58)%](P<0.05);Western blot检测结果显示,miR-27a+DDP组的PI3K表达水平(0.28±0.01)较DDP组[(0.43±0.01)]、miR-27a组(0.57±0.11)及miR-control组(0.72±0.01)降低(P<0.05);miR-27a+DDP组的p-AKT的表达水平(0.29±0.01)与DDP组(0.46±0.05)、miR-27a组(0.67±0.01)及miR-control组(0.10±0.01)相比明显降低(P<0.05);而miR-27a+DDP组的C-caspase的表达水平(0.69±0.01)则高于DDP组(0.51±0.01)、miR-27a组(0.35±0.01)及miR-control组(0.18±0.01),差异有统计学意义(P<0.05)。进一步将miR-27a-3p在PLC细胞中敲低,并于DDP中刺激培养,MTT、细胞凋亡和Western blot实验结果显示,与HepG2过表达细胞的结果趋势相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-27a-3p可能通过调节PI3K/AKT信号通路调控肝癌细胞株对DDP的化疗敏感性,有望成为增强肝癌DDP化疗敏感性的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 肝癌细胞 mir-27a-3p pI3K/AKT通路 顺铂 化疗敏感性
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HPV16阳性和阴性患者宫颈癌组织中miR-27a-3p和HOXB8蛋白的表达差异及其机制研究 被引量:10
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作者 李会影 王慧智 张子旸 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第23期3169-3174,共6页
目的:探讨mi R-27a-3p和同源盒B8(HOXB8)蛋白在人乳头瘤病毒16型阳性[HPV16(+)]和阴性[HPV16(-)]患者宫颈癌组织中表达的差异及其机制。方法:选取2012年1月-2016年1月于我院就诊的宫颈癌患者120例,根据其是否感染HPV16分为HPV16(+)组(60... 目的:探讨mi R-27a-3p和同源盒B8(HOXB8)蛋白在人乳头瘤病毒16型阳性[HPV16(+)]和阴性[HPV16(-)]患者宫颈癌组织中表达的差异及其机制。方法:选取2012年1月-2016年1月于我院就诊的宫颈癌患者120例,根据其是否感染HPV16分为HPV16(+)组(60例)和HPV16(-)组(60例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测两组患者宫颈癌组织中mi R-27a-3p和HOXB8 m RNA的表达水平,采用蛋白印迹法检测HOXB8蛋白的表达水平,采用巢式降落式甲基化特异性聚合酶链反应法检测mi R-27a-3p启动子区DNA甲基化水平,采用染色质免疫共沉淀-定量聚合酶链反应法检测mi R-27a-3p启动子区组蛋白甲基化水平;培养人宫颈癌细胞系Si Ha细胞株,考察转染mi R-27a-3p模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)后mi R-27a-3p和HOXB8 m RNA的表达水平。结果:HPV16(+)组患者宫颈癌组织中mi R-27a-3p的表达水平显著低于HPV16(-)组患者,HOXB8 m RNA和蛋白表达水平、mi R-27a-3p启动子区DNA甲基化水平和组蛋白甲基化水平均显著高于HPV16(-)组患者,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。在Si Ha细胞转染mi R-27a-3p mimic后,mi R-27a-3p的表达水平显著升高,而HOXB8 m RNA的表达水平显著降低;转染mi R-27a-3p inhibitor后,mi R-27a-3p的表达水平显著降低,而HOXB8 m RNA的表达水平则显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:HPV16可能通过启动子区DNA甲基化和组蛋白甲基化下调mi R-27a-3p的表达,从而影响宫颈癌的发生与发展,HOXB8蛋白可能是其作用靶点。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16型 宫颈癌 mir-27a-3p 同源盒B8蛋白 DNA甲基化 组蛋白甲基化
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miR-27a-3p抑制β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅲ表达对胃癌SGC-7901细胞的影响 被引量:4
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作者 曹建平 佘兰 赵娟霞 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第5期463-467,共5页
目的目前关于胃癌中miRNAs靶向调控β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅲ(B4GALT3)表达的具体机制尚不明确。文中旨在分析miR-27a-3p对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移及侵袭的影响,探讨其分子机制。方法生物信息学预测B4GALT3基因的靶miRNAs,针对B4GALT... 目的目前关于胃癌中miRNAs靶向调控β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅲ(B4GALT3)表达的具体机制尚不明确。文中旨在分析miR-27a-3p对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移及侵袭的影响,探讨其分子机制。方法生物信息学预测B4GALT3基因的靶miRNAs,针对B4GALT3′UTR与靶miRNA结合位点构建荧光素酶报告基因载体,检测其相对荧光素酶的活性;将miR-27a-3p mimic、mimic NC、control(空白对照)、miR-27a-3p inhibitor、inhibitor NC分别瞬转入SGC-7901细胞后,Western blot检测各转染细胞B4GALT3的表达情况;采用MTT、迁移、侵袭实验检测细胞的增殖、迁移、侵袭能力。结果与正常胃黏膜GES-1细胞比较,B4GALT3在胃癌各个细胞系中表达显著上调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-27b-3p能使野生型B4GALT3的荧光素酶的活性显著性降低(P<0.001),说明miR-27a-3p与B4GALT3存在靶向关系。Western blot检测结果显示,瞬转miR-27a-3p mimic后,B4GALT3蛋白水平下降(P<0.05);瞬转miR-27a-3p inhibitor后,B4GALT3表达升高(P<0.01),说明miR-27a-3p对B4GALT3有负性调控作用。24、48、72、96、120 h,与mimic NC、空白对照比较,miR-27a-3p mimic的细胞增殖显著升高(P<0.05);与inhibitor NC、空白对照比较,miR-27a-3p inhibitor的细胞增殖显著降低(P<0.05)。miR-27a-3p mimic的迁移细胞数量[(319.3±13.9)个]较mimic NC[(218.0±10.7)个]明显增加(P<0.000);侵袭细胞数量[(402.0±15.0)个]较mimic NC[(241.0±17.3)个]明显增加(P<0.000)。miR-27a-3p inhibitor迁移细胞数量[(115.6±13.8)个]较inhibitor NC[(214.6±6.8)个]明显减少,迁移能力明显降低(P<0.000)。结论miR-27a-3p通过抑制B4GALT3表达,促进胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭能力,为寻找胃癌治疗靶点提供了实验依据。 展开更多
关键词 胃癌 mir-27a-3p β-1 4-半乳糖基转移酶Ⅲ 生物信息学
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miR-27a-3p靶向表皮生长因子受体减轻脑出血引起的脑损伤
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作者 王晓辉 刘小玲 +2 位作者 胡军 王乐 蒋锋 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第12期1568-1575,共8页
目的探究miR-27a-3p减轻大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)引起的脑损伤的分子机制。方法将36只建模成功的SD大鼠随机分为模型组、miR-27a-3p干预组(miR-27a-3p组)和miR-27a-3p+pcDNA3.1-EGFR干预组(pcEGFR组),每组12只;另取12... 目的探究miR-27a-3p减轻大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)引起的脑损伤的分子机制。方法将36只建模成功的SD大鼠随机分为模型组、miR-27a-3p干预组(miR-27a-3p组)和miR-27a-3p+pcDNA3.1-EGFR干预组(pcEGFR组),每组12只;另取12只健康SD大鼠作为假手术组。通过自体尾动脉血注入法构建ICH大鼠模型,假手术组健康SD大鼠只进针不注血,miR-27a-3p组ICH大鼠转染miR-27a-3p,pcEGFR组ICH大鼠转染miR-27a-3p+pcDNA3.1-EGFR。采用定量实时聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测大鼠脑组织或血清中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的mRNA和miR-27a-3p的相对表达情况;采用Western blotting分析Occludin、Claudin-5和EGFR蛋白表达水平。采用免疫荧光染色对过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)阳性细胞进行定量分析;使用TUNEL染色分析血肿周围区域的细胞凋亡情况;通过免疫组织化学方法分析大鼠脑组织OX-42的蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清中miR-27a-3p水平降低(P<0.001);血肿周围组织中miR-27a-3p水平降低(P<0.01)。与模型组比较,miR-27a-3p组大鼠的Occludin和Claudin-5蛋白表达水平升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠TUNEL阳性凋亡神经元数量、MPO阳性细胞数量和血肿周围区域OX-42阳性细胞数量均升高(P<0.01);与模型组比较,miR-27a-3p组大鼠TUNEL阳性凋亡神经元数量、MPO阳性细胞数量和血肿周围区域OX-42阳性细胞数量均降低(P<0.05)。qRT-PCR和脑含水量检测结果显示,与模型组比较,miR-27a-3p组大鼠EGFR的mRNA表达水平和脑含水量均降低(P<0.05);与miR-27a-3p组比较,pcEGFR组大鼠EGFR的mRNA表达水平和脑含水量均升高(P<0.05)。结论miR-27a-3p可显著减轻ICH诱导的脑水肿、白细胞浸润和神经元凋亡。外源性miR-27a-3p可能通过靶向紧密连接复合物和EGFR蛋白维持血脑屏障正常生理功能。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 血脑屏障 脑出血 mir-27a-3p
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LINC01089通过调控miR-27a-3p/TET1轴抑制胰腺癌细胞的增殖和迁移
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作者 白鲲鹏 曹举潮 江奕恒 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第5期732-738,共7页
目的:本研究旨在探究胰腺癌中长链非编码RNA 01089(LINC01089)/miR-27a-3p/TET1轴在胰腺癌进展中的作用及其机制。方法:通过GEPIA数据库分析LINC01089在胰腺癌中的表达及其与预后的相关性。使用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC01... 目的:本研究旨在探究胰腺癌中长链非编码RNA 01089(LINC01089)/miR-27a-3p/TET1轴在胰腺癌进展中的作用及其机制。方法:通过GEPIA数据库分析LINC01089在胰腺癌中的表达及其与预后的相关性。使用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC01089、miR-27a-3p、TET1 mRNA在胰腺癌组织和正常组织中的表达;CCK-8、BrdU和划痕愈合实验检测LINC01089和miR-27a-3p对细胞增殖和迁移的影响。机制上,我们通过StarBase和TargetScan数据库预测、双荧光素酶报告基因验证LINC01089和miR-27a-3p、miR-27a-3p和TET1之间的调控关系。采用Western blot检测LINC01089和miR-27a-3p对TET1表达的影响。结果:GEPIA数据库显示LINC01089在胰腺癌中低表达,其低表达与患者整体生存期(overall survival,OS)和无病生存期(diease free survival,DFS)相关。本研究中,我们发现与正常组织相比,癌组织中LINC01089表达显著下调,并与患者不良预后相关;功能实验显示LINC01089抑制胰腺癌细胞的增殖和迁移。相关机制实验表明LINC01089通过吸附miR-27a-3p上调TET1的表达在胰腺癌中发挥抑制作用。结论:LINC01089通过靶向调控miR-27a-3p促进TET1的表达,从而抑制胰腺癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 胰腺癌 LINC01089 mir-27a-3p TET1 增殖 迁移
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miR-27a-3p通过Wnt3a/β-catenin信号通路抑制肺成纤维细胞I、III型胶原合成 被引量:12
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作者 刘理静 钱红 +2 位作者 胡柯 张自珍 贺兼斌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期229-234,共6页
目的探讨microRNA-27a-3p(miR-27a-3p)对肺成纤维细胞I型胶原(ColⅠ)和III型胶原(ColⅢ)合成的影响及分子机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,转染miR-27a-3p模拟物/抑制物,实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-27a-3p水平;qPCR和Western b... 目的探讨microRNA-27a-3p(miR-27a-3p)对肺成纤维细胞I型胶原(ColⅠ)和III型胶原(ColⅢ)合成的影响及分子机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,转染miR-27a-3p模拟物/抑制物,实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-27a-3p水平;qPCR和Western blot测定ColⅠ、ColⅢ、Wnt3a表达;Western blot分析细胞核内β-catenin水平。生物信息学预测miR-27a-3p与Wnt3a 3′-非翻译区(3′-UTR)靶向结合情况,并用双荧光素酶报告基因检测miR-27a-3p模拟物对Wnt3a 3′-UTR野生型和突变型荧光素酶活性的影响。给予Wnt3a/β-catenin信号通路抑制剂Dkk1预处理MRC-5细胞6 h,再用miR-27a-3p抑制物转染细胞48 h,qPCR和Western blot检测ColⅠ、ColⅢ表达。结果 miR-27a-3p模拟物明显增加miR-27a-3p水平,降低ColⅠ、ColⅢ、Wnt3a和β-catenin表达,其抑制物的作用则相反,与对照组比较,差异均有显著性(P<0.01)。Wnt3a 3′-UTR存在1个miR-27a-3p的结合位点,miR-27a-3p过表达减少野生型Wnt3a 3′-UTR荧光素酶活性(P<0.01),但对其突变型荧光素酶活性无影响(P>0.05)。Dkk1预处理几乎完全逆转miR-27a-3p抑制物对ColⅠ、ColⅢ合成的诱导作用(P<0.05)。结论 miR-27a-3p抑制肺成纤维细胞ColⅠ、ColⅢ生物合成,其机制与拮抗Wnt3a/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 mir-27a-3p WNT3A Β-CATENIN Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 肺纤维化
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miR-27a-3p通过阻断Wnt3a/β-catenin途径抑制大鼠肺纤维化 被引量:11
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作者 刘理静 钱红 +4 位作者 胡柯 王乐 张自珍 尹辉明 贺兼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1015-1020,共6页
目的探讨微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制。方法雄性SD大鼠45只,随机分为对照组、miR-27a-3p激动剂(miR-27a-3p agomir)组和miR-27a-3p拮抗剂(miR-27a-3p antagomir)组,每组15只。经气管... 目的探讨微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制。方法雄性SD大鼠45只,随机分为对照组、miR-27a-3p激动剂(miR-27a-3p agomir)组和miR-27a-3p拮抗剂(miR-27a-3p antagomir)组,每组15只。经气管内注入博莱霉素A5建立PF模型,给药后次日分别予生理盐水、miR-27a-3p agomir、miR-27a-3p antagomir尾静脉注射,每3 d注射1次,共9次。第28天收集血液,ELISA检测血清1型前胶原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原蛋白氨基端前肽(P3NP)水平;处死大鼠,取肺组织,HE染色和Masson染色评价PF病变程度,实时荧光定量PCR检测miR-27a-3p、1型胶原蛋白(Col1)、Col3的mRNA水平,Western blot法检测Col1、Col3、Wnt3a、β联蛋白(β-catenin)的蛋白水平。结果miR-27a-3p agomir处理明显增加肺组织miR-27a-3p表达,miR-27a-3p antagomir则降低miR-27a-3p表达,提示miR-27a-3pagomir/antagomir转染效率较高。与对照组相比,miR-27a-3p agomir显著减轻大鼠肺泡炎症和PF程度,而miR-27a-3p antagomir则明显加重大鼠肺泡炎症和PF程度。miR-27a-3p agomir组血清P1CP、P3NP水平降低、下调肺组织Col1、Col3、Wnt3a、β-catenin水平,miR-27a-3p antagomir组则作用相反。结论 miR-27a-3p通过抑制Wnt3a/β-catenin信号通路,下调Col1、Col3表达,发挥抗PF作用。 展开更多
关键词 mir-27a-3p 肺纤维化 1型胶原蛋白(Col1) 3型胶原蛋白 WNT3A β联蛋白(β-catenin)
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