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miR-4756在前列腺癌组织中的甲基化水平及对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响
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作者 彭善君 翁彪 +1 位作者 唐迪 刘伟伟 《中国性科学》 2024年第9期23-28,共6页
目的分析miR-4756在前列腺癌组织中的甲基化水平并探讨其对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法采用iMETHYL数据库分析前列腺癌组织中miR-4756的甲基化情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测前列腺癌22Rv1、DU-145... 目的分析miR-4756在前列腺癌组织中的甲基化水平并探讨其对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法采用iMETHYL数据库分析前列腺癌组织中miR-4756的甲基化情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测前列腺癌22Rv1、DU-145、PC-3、C4-2B细胞中miR-4756的表达。采用5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)试剂处理前列腺癌细胞,以qRT-PCR检测5-Aza-CdR对前列腺癌细胞中miR-4756表达的影响。采用miR-4756模拟物转染22Rv1细胞上调miR-4756的表达。采用克隆形成实验和划痕愈合实验检测上调miR-4756对22Rv1细胞增殖和迁移的影响。采用双荧光素酶报告实验验证miR-4756和磷脂酰肌醇蛋白聚糖-6(GPC6)的靶向关系。qRT-PCR和Western blot检测上调miR-4756对22Rv1细胞中GPC6基因表达的影响。Western blot检测上调miR-4756对22Rv1细胞中Wnt信号通路蛋白Wnt1、Wnt2、ROR1、ROR2表达的影响。结果前列腺癌组织中miR-4756甲基化水平高于癌旁组织(P<0.01)。与人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)比较,前列腺癌细胞中miR-4756表达降低(P<0.01)。5-Aza-CdR试剂能够促进前列腺癌细胞中miR-4756的表达(P<0.01)。miR-4756组22Rv1细胞克隆形成数目低于对照组(P<0.01)。miR-4756组22Rv1细胞迁移率低于对照组(P<0.01)。miR-4756能够靶向结合GPC6信使RNA(mRNA)(P<0.01)。与对照组22Rv1细胞比较,miR-4756组22Rv1细胞中GPC6基因表达明显受到抑制(P<0.01)。与对照组比较,上调miR-4756抑制22Rv1细胞中GPC6蛋白表达量,Wnt信号通路蛋白Wnt1、Wnt2、ROR1、ROR2表达降低(P<0.01)。结论前列腺癌组织中miR-4756甲基化水平高于癌旁组织,上调miR-4756通过靶向下调前列腺癌22Rv1细胞中GPC6表达抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 前列腺癌 甲基化 mir-4756 磷脂酰肌醇蛋白聚糖-6
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