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miR-489通过调控TWIST1的表达抑制结肠癌干细胞表型和上皮间质转换 被引量:2
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作者 任莉 厉英超 +2 位作者 贾皑 张丽 米琛 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第1期51-56,共6页
目的探讨miR-489在结肠癌干细胞表型和上皮间质转换中的作用和调控机制。方法 RT-q PCR检测多个人结肠癌细胞系(HT29、SW480、SW620和HCT116)和正常肠道上皮细胞HIEC中miR-489表达;采用基因转染技术提高结肠癌细胞中miR-489表达,Western... 目的探讨miR-489在结肠癌干细胞表型和上皮间质转换中的作用和调控机制。方法 RT-q PCR检测多个人结肠癌细胞系(HT29、SW480、SW620和HCT116)和正常肠道上皮细胞HIEC中miR-489表达;采用基因转染技术提高结肠癌细胞中miR-489表达,Western blot检测过表达miR-489对结肠癌干细胞标志物CD133、CD44、Ep CAM、ALDH1和上皮细胞标志物E-cadherin、间质细胞标志物vimentin和N-cadherin的表达;RT-q PCR和Western blot检测TWIST1 mRNA和蛋白表达水平。结果 4个结肠癌细胞系中的miR-489相对表达量显著低于正常肠道上皮细胞HIEC中的表达(P<0.05)。在HT29和HCT116细胞中过表达miR-489,4个结肠癌干细胞标志物表达降低(P<0.05);上皮细胞标志物表达增加(P<0.05);间质细胞标志物表达减少(P<0.05)。TWIST1是miR-489潜在靶基因,在2个细胞系中过表达miR-489,TWIST1 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论 miR-489在结肠癌细胞中低表达,过表达miR-489可能通过调控TWIST1抑制结肠癌干细胞表型和上皮间质转换。 展开更多
关键词 mir-489 TWIST1 结肠癌 肿瘤干细胞 上皮间质转换
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miR-489通过打靶PAK5抑制黑色素瘤的迁移
2
作者 郭冰玉 回蔷 +1 位作者 常鹏 陶凯 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期355-357,363,共4页
目的 探讨miR-489对黑色素瘤迁移的抑制作用。方法 通过Transwell实验检测miR-489对黑色素瘤迁移的影响;荧光素酶报告基因实验检测A375细胞中miR-489对PAK5的靶向作用;进一步通过Western blotting以及实时PCR检测miR-489对于A375细胞... 目的 探讨miR-489对黑色素瘤迁移的抑制作用。方法 通过Transwell实验检测miR-489对黑色素瘤迁移的影响;荧光素酶报告基因实验检测A375细胞中miR-489对PAK5的靶向作用;进一步通过Western blotting以及实时PCR检测miR-489对于A375细胞中PAK5的影响。结果 Transwell实验发现miR-489过表达后可以显著抑制A375细胞的迁移,当miR-489受到抑制后,A375细胞的迁移受到促进。荧光素酶报告基因实验证明,miR-489可以直接作用于PAK5。Western blotting和实时PCR检测发现,过表达miR-489可以抑制A375细胞中PAK5蛋白的表达;当miR-489受到抑制后蛋白表达有所增加。结论 miR-489可以通过打靶PAK5抑制黑色素瘤细胞的迁移。 展开更多
关键词 mir-489 黑色素瘤 A375 迁移 PAK5
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miR-489抑制黑色素瘤细胞的增殖
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作者 郭冰玉 回蔷 +1 位作者 常鹏 陶凯 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1029-1031,1042,共4页
目的检测miR-489对黑色素瘤细胞增殖的影响。方法在黑色素瘤细胞A375中分别过表达或沉默miR-489后,通过MTT实验观察miR-489对细胞增殖的影响。进一步通过Western blotting和实时PCR检测miR-489对A375细胞中增殖相关蛋白CDK2和cyclin E... 目的检测miR-489对黑色素瘤细胞增殖的影响。方法在黑色素瘤细胞A375中分别过表达或沉默miR-489后,通过MTT实验观察miR-489对细胞增殖的影响。进一步通过Western blotting和实时PCR检测miR-489对A375细胞中增殖相关蛋白CDK2和cyclin E的影响。结果 MTT检测发现,miR-489过表达后可以显著抑制A375细胞增殖,miR-489受到抑制后A375细胞的增殖受到促进。Western blotting和实时PCR检测发现,过表达miR-489可以抑制A375细胞中增殖相关蛋白CDK2和cyclin E蛋白的表达;miR-489受到抑制后蛋白表达增加。结论 miR-489对黑色素瘤细胞的增殖有一定的抑制作用,可能作为黑色素瘤诊疗的新靶点。 展开更多
关键词 mir-489 黑色素瘤 A375细胞 增殖
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miR-489抑制结直肠癌细胞的侵袭转移 被引量:1
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作者 任莉 冯文科 +2 位作者 郝志明 李汉超 赵倩 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第20期3221-3224,共4页
目的:探究miR-489在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达情况及其临床意义,并进一步探究miR-489对CRC细胞的侵袭迁移的作用。方法:应用Real-time PCR检测miR-489在CRC组织和细胞系中的表达情况;分析miR-489与CRC临床病理特征的关系... 目的:探究miR-489在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达情况及其临床意义,并进一步探究miR-489对CRC细胞的侵袭迁移的作用。方法:应用Real-time PCR检测miR-489在CRC组织和细胞系中的表达情况;分析miR-489与CRC临床病理特征的关系;应用Transwell实验探究miR-489对CRC细胞的侵袭与迁移能力的影响;Western blot探究miR-489对CRC细胞上皮-间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的作用。结果:Real-time PCR结果显示miR-489在CRC组织和细胞系中均为显著性低表达(P<0.05);统计学分析显示miR-489的表达量与CRC的静脉浸润、浸润深度以及淋巴结转移呈显著相关(P<0.05);Transwell实验结果显示miR-489能够抑制CRC细胞的侵袭与迁移;Western blot结果显示miR-489能够抑制CRC细胞的EMT。结论:miR-489在CRC中为低表达,其能够通过抑制CRC细胞的侵袭、迁移与EMT发挥其抗CRC作用。 展开更多
关键词 mir-489 结直肠癌 侵袭 迁移 上皮-间质转化
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过表达miR-489-3p通过靶向调控MCM2抑制肺癌细胞增殖、促进细胞凋亡的分子机制 被引量:1
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作者 张明晖 孙雅丽 +2 位作者 赵妍 牛意 白玉勤 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第14期3064-3069,共6页
目的探讨miR-489-3p对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及潜在的作用机制。方法将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-489-3p组(转染miR-489-3p mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-微小染色体维持蛋白(MCM)2组(转染si-MCM2)、anti-miR-NC组(转染anti-miR... 目的探讨miR-489-3p对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及潜在的作用机制。方法将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-489-3p组(转染miR-489-3p mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-微小染色体维持蛋白(MCM)2组(转染si-MCM2)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-489-3p组(转染anti-miR-489-3p)、miR-489-3p+pcDNA组(共转染miR-489-3p和pcDNA)、miR-489-3p+pcDNA-MCM2组(共转染miR-489-3p和pcDNA-MCM2)、miR-NC+WT-MCM2组(共转染miR-NC和WT-MCM2)、miR-NC+MUT-MCM2组(共转染miR-NC和MUT-MCM2)、miR-489-3p+WT-MCM2组(共转染miR-489-3p和WT-MCM2)、miR-489-3p+MUT-MCM2组(共转染miR-489-3p和MUT-MCM2),均用脂质体法转染至肺癌A549细胞;运用qRT-PCR检测miR-489-3p和MCM2 mRNA的表达水平;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果相较于正常肺上皮细胞BEAS-2B,肺癌细胞A549、H1299、SPC-A1中miR-489-3p表达水平均显著降低,MCM2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。miR-489-3p过表达、MCM2抑制表达均可抑制A549细胞增殖活力,促进细胞凋亡;抑制细胞周期蛋白(Cyclin)D1、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白表达水平,促进p21、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved caspase)-3、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白表达。miR-489-3p可靶向调控MCM2表达;MCM2过表达逆转了miR-489-3p过表达对肺癌A549细胞增殖抑制和凋亡促进的作用。结论miR-489-3p可抑制肺癌A549细胞的增殖、促进其凋亡,其机制可能与靶向MCM2有关,将可为肺癌的预防和治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 mir-489-3p MCM2 肺癌 增殖 凋亡
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Expression and predictive value of miR-489 and miR-21 in melanoma metastasis 被引量:2
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作者 Hao Mo Jian Guan +4 位作者 Zhen-Chao Yuan Xiang Lin Zhen-Jie Wu Bin Liu Ju-Liang He 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2019年第19期2930-2941,共12页
BACKGROUND Melanoma is a highly malignant skin tumour, and is one of the most rapidly growing malignant tumors in recent years. According to statistics, the morbidity of cancer increases with age, accounting for 1.6% ... BACKGROUND Melanoma is a highly malignant skin tumour, and is one of the most rapidly growing malignant tumors in recent years. According to statistics, the morbidity of cancer increases with age, accounting for 1.6% of new cancer cases and 0.6% of deaths worldwide. Melanoma has a serious impact on society and families, thus it is of great significance to find biological markers related to the diagnosis and treatment of melanoma.AIM To explore the expression and predictive value of mir-489 and mir-21 in melanoma metastasis.METHODS A total of 60 patients with malignant melanoma treated at our hospital from June2017 to December 2018 were selected as a research group, while 40 healthy subjects were selected as a control group. qRT-PCR technique was used to detect miR-489 and miR-21 in serum of the two groups. ROC curve was drawn to evaluate the predictive value and diagnostic efficiency. Spearman test was used for correlation analysis. Logistic single-and multiple-factor analyses were performed to identify the risk factors related to melanoma metastasis.RESULTS The expression of miR-489 in the research group was significantly lower than that in the control group(P < 0.001). However, the expression of miR-21 in the research group was significantly higher than that in the control group(P < 0.001).The expression of miR-489 and miR-21 was related to TNM stage and metastasis(P < 0.001). In the diagnosis of melanoma patients, the sensitivity, specificity, and AUC of miR-489 alone were 75.56%, 80.00%, and 0.852, respectively. The sensitivity, specificity, and AUC of miR-21 alone were 77.78%, 82.22%, and 0.844,respectively. MiR-489 was negatively correlated with TNM stage of melanoma(r=-0.612, P < 0.001), while miR-21 was positively correlated with TNM stage(r =0.609, P < 0.001). Logistic single-and multiple-factor regression analyses showed that TNM stage, miR-489, and mir-21 were independent risk factors for malignant melanoma metastasis.CONCLUSION MiR-489 and miR-21 may participate in the process of melanoma occurrence,development, and metastasis, and can be used as potential serum biomarkers for melanoma metastasis diagnosis and disease assessment. 展开更多
关键词 mir-489 mir-21 MELANOMA METASTASIS PREDICTIVE VALUE
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miR-489和肿瘤关系的研究进展
7
作者 黄玉洁 李文 甄艳 《中国现代医药杂志》 2015年第10期100-103,共4页
随着医学的发展,尤其是近年来人们在生物体内发现了非编码单链小分子RNA,即micro RNA(mi RNA),其内源长度为20~23个核苷酸,mi RNA被RNA聚合酶Ⅱ催化形成原始转录产物pri-mi RNA,经历2次连续的剪切后pri-mi RNA转化为成熟的mi RNAs[1,2]:
关键词 RNA mir-489 转录产物 SMAD CDDP 结构域 乳腺癌细胞 下游靶 信号通路 酪氨酸残基
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miR-489对矽尘诱导小鼠肺纤维化成熟期的治疗作用 被引量:10
8
作者 靳苏香 吴秋云 +1 位作者 严玮文 倪春辉 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 2017年第5期337-341,共5页
目的探讨上调miR-489是否对矽尘诱导的小鼠肺纤维化成熟期有一定治疗作用。方法雄性C57BL/6小鼠32只分为生理盐水组、矽尘组、矽尘+miRNA对照组、矽尘+miR-489组。每组8只。经气管一次灌注SiO2粉尘悬液的方法建立小鼠矽肺模型,并于... 目的探讨上调miR-489是否对矽尘诱导的小鼠肺纤维化成熟期有一定治疗作用。方法雄性C57BL/6小鼠32只分为生理盐水组、矽尘组、矽尘+miRNA对照组、矽尘+miR-489组。每组8只。经气管一次灌注SiO2粉尘悬液的方法建立小鼠矽肺模型,并于染尘后第28、35、42和49天经尾静脉注射miRNA对照和miR-489 agomir,第56天收集肺组织,观察肺纤维化病理改变、胶原含量,检测肺组织miR-489、E-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白、纤连蛋白及转化生长因子(TGF-β1)的水平。结果与矽尘+miRNA对照组比较,矽尘+miR-489组可显著上调肺组织中miR-489水平,差异有统计学意义(P〈0.05)。病理切片显示矽尘+miR-489组肺组织炎症反应、肺泡结构破坏和纤维化结节形成出现减轻,矽尘+miR-489组肺损伤的严重程度和分布范围肺纤维化评分均低于矽尘+miRNA对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。与矽尘+miRNA对照组比较,矽尘+miR-489组肺组织中胶原沉积和羟脯氨酸含量降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。与矽尘+miRNA对照组比较,矽尘+miR-489组肺组织α-SMA、波形蛋白、纤连蛋白、TGF-β1蛋白水平降低,而E-钙黏蛋白水平升高,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论上调小鼠体内miR-489水平对矽尘诱导的肺纤维化发挥一定治疗作用,这可能与其降低TGF-β1的释放有关。 展开更多
关键词 肺纤维化 矽肺 小鼠 mir-489
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miR-489在肿瘤中作用的研究进展 被引量:1
9
作者 孙丹 于萌 +1 位作者 黄志弘 朱育焱 《生命的化学》 CAS CSCD 2017年第3期329-335,共7页
mi RNA是一类长度约为22 nt的内源性小分子非编码RNA,几乎参与了机体生命活动的所有过程。近年来研究发现,多种肿瘤组织中mi R-489表达下调,其通过转录后抑制靶基因,如HER2、AKT3、SPIN1等的表达,参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移... mi RNA是一类长度约为22 nt的内源性小分子非编码RNA,几乎参与了机体生命活动的所有过程。近年来研究发现,多种肿瘤组织中mi R-489表达下调,其通过转录后抑制靶基因,如HER2、AKT3、SPIN1等的表达,参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移等多种病理过程,并与肿瘤的耐药及发生、发展密切相关。因此,了解mi R-489的表达、调控及其在肿瘤等疾病中的作用及机制,可为其进一步的临床应用奠定基础。本文就mi R-489与恶性肿瘤关系的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 MIRNA 肿瘤 靶基因表达调控 mir-489
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miR-489协同卡铂通过抑制XIAP的表达发挥抗乳腺癌作用
10
作者 郑璐 胡静 +1 位作者 陈雪 许权 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期319-324,共6页
目的研究miR-489对卡铂的协同抗乳腺癌效应及机制。方法 MTT细胞活力试验检测卡铂和miR-489对T-47D细胞的杀伤活性。生物信息学、Western blot试验及荧光素酶报告基因试验验证X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protei... 目的研究miR-489对卡铂的协同抗乳腺癌效应及机制。方法 MTT细胞活力试验检测卡铂和miR-489对T-47D细胞的杀伤活性。生物信息学、Western blot试验及荧光素酶报告基因试验验证X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)是否为miR-489的靶点。分离去除T-47D细胞中的线粒体,Western blot试验检测miR-489、卡铂及XIAP质粒处理后T-47D细胞Smac/DIABLO的释放和caspase-9及caspase-3的活化。免疫共沉淀试验检测XIAP与Smac/DIABLO的相互作用。流式细胞术检测T-47D细胞的凋亡情况。结果 miR-489处理能显著增强卡铂对T-47D细胞的杀伤活性。XIAP是miR-489的靶点。miR-489不影响卡铂依赖的线粒体中Smac/DIABLO的释放,但能通过下调XIAP的表达减弱XIAP与Smac/DIABLO的相互作用。另外,转染XIAP质粒能显著抑制miR-489对卡铂的协同抗乳腺癌效应,XIAP质粒能显著抑制miR-489联合卡铂对T-47D细胞凋亡的诱导。XIAP质粒能显著抑制miR-489联合卡铂对T-47D细胞caspase-9及caspase-3的活化。结论 miR-489抑制XIAP的表达发挥对卡铂的协同抗乳腺癌作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 mir-489 X连锁凋亡抑制蛋白 卡铂 凋亡
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miR-489通过靶向twist1调控卵巢癌细胞顺铂耐药的研究
11
作者 粟芳 吴斌 岳琳 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第23期2840-2844,共5页
目的探究miR-489调控卵巢癌细胞顺铂耐药性的可能机制。方法A2780细胞分为inhibitor-control组、inhibitor组、inhibitor+si-NC组、inhibitor+si-twist1组,ARCP细胞分为mimic-control组、mimic组。inhibitor-control组细胞转染miR-489... 目的探究miR-489调控卵巢癌细胞顺铂耐药性的可能机制。方法A2780细胞分为inhibitor-control组、inhibitor组、inhibitor+si-NC组、inhibitor+si-twist1组,ARCP细胞分为mimic-control组、mimic组。inhibitor-control组细胞转染miR-489抑制剂的阴性对照,inhibitor组细胞转染miR-489抑制剂,inhibitor+si-NC组细胞转染miR-489抑制剂和twist1小干扰RNA的阴性对照,inhibitor+si-twist1组细胞转染miR-489抑制剂和twist1小干扰RNA,mimic-control组细胞转染miR-489模拟物的阴性对照,mimic组细胞转染miR-489模拟物。以逆转录聚合酶链反应检测miR-489和twist1 mRNA的表达,以细胞计数法-8检测细胞活力,以蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶-3(caspase-3)、裂解的caspase-3(cleaved caspase-3)和twist1蛋白表达。用生物信息学与双荧光素酶报告基因实验分析miR-489和twist1的靶向关系。结果inhibitor-control组、inhibitor组、mimic-control组、mimic组中miR-489表达量分别为2.16±0.27,0.93±0.10,0.96±0.20,2.15±0.26,细胞活力分别为(42.70±2.99)%,(68.45±6.20)%,(73.44±5.05)%,(39.83±5.10)%,cleaved caspase-3蛋白表达量分别为0.57±0.04,0.30±0.03,0.19±0.03,0.48±0.05,以上数据,inhibitor组与inhibitor-control组相比,mimic组与mimic-control组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。inhibitor-control组、inhibitor+si-NC组和inhibitor+si-twist1组中twist1 mRNA表达量分别为0.96±0.17,2.75±0.29,1.05±0.18,细胞活力分别为(40.90±3.28)%,(74.34±5.01)%,(44.60±3.02)%,cleaved caspase-3表达量分别为0.58±0.06,0.23±0.03,0.51±0.03。inhibitor+si-NC组的上述指标与inhibitor-control组相比,inhibitor+si-twist1组的上述指标与inhibitor+si-NC组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌组织中miR-489与twist1的表达呈负相关,且miR-489靶向调控twist1的表达。结论miR-489可调控卵巢癌细胞的顺铂耐药,其可能的机制是miR-489与twist1的3′UTR结合抑制其表达而降低癌细胞对顺铂的耐药。 展开更多
关键词 微小RNA-489(mir-489) 卵巢癌 顺铂
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山奈素通过下调circ-RPL15抑制肺癌细胞A549的增殖和迁移 被引量:1
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作者 郑晟超 毛佳斌 何大强 《温州医科大学学报》 2021年第12期960-967,共8页
目的:探索山奈素是否通过circ-RPL15影响肺癌细胞A549的生物行为。方法:使用25、50和75μg/m L山奈素处理肺癌细胞A549。在细胞A549中沉默circ-RPL15,或过表达circ-RPL15并使用75μg/m L山奈素处理。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各... 目的:探索山奈素是否通过circ-RPL15影响肺癌细胞A549的生物行为。方法:使用25、50和75μg/m L山奈素处理肺癌细胞A549。在细胞A549中沉默circ-RPL15,或过表达circ-RPL15并使用75μg/m L山奈素处理。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组肺癌细胞A549活力变化,平板克隆法检测细胞克隆形成,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹(Western blot)法检测裂解-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)蛋白的表达,使用Transwell法检测细胞迁移,并使用实时定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测circ-RPL15、mi R-489-3p表达。双荧光素酶报告实验分析circ-RPL15对miR-489-3p的靶向调控。结果:与对照组相比,不同质量浓度(25、50和75μg/mL)山奈素作用于肺癌细胞A549后,细胞活力、克隆形成数、迁移数、circ-RPL15表达量降低,而凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白和miR-489-3p的表达量升高(P <0.05),且均呈浓度依赖性。沉默circ-RPL15增强肺癌细胞A549的miR-489-3p表达量、凋亡率和Cleaved-caspase3蛋白的表达量,并减弱细胞活力、克隆形成数、迁移数(P<0.05)。circ-RPL15靶向调控mi R-489-3p。过表达circ-RPL15逆转了山奈素作用的肺癌细胞增殖、凋亡和迁移情况(P<0.05)。结论:山奈素通过下调circ-RPL15并靶向调控miR-489-3p,抑制肺癌细胞的增殖和迁移,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 肺癌细胞A549 山奈素 细胞迁移 细胞凋亡 circ-RPL15 mi R-489-3p
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