microRNA-22-3p低表达上调幼年哮喘气道重塑大鼠的NK1R表达

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作者 宋建刚 高永伟 +3 位作者 刘庆 贾鲲鹏 庞随军 李元霞 《西部医学》 2021年第1期4-9,共6页

目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照... 目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照组注射生理盐水并吸入空气;模型组应用卵白蛋白(OVA)雾化吸入法建立哮喘大鼠模型;模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组,在大鼠每次激发前1 h内分别尾静脉注射1 mL的mimic、mimic-NC、inhibitor、inhibitor-NC。H&E染色法观察小鼠气道重塑变化,RT-qPCR检测miR-22-3p的水平变化。荧光素酶基因报告检测方法在大鼠气道平滑肌细胞RASMCs中验证miR-22-3p靶向NK1R。使用Western blot和免疫组织化学法检测NK1R的表达水平。结果与对照组比较,模型组发生明显的气道重塑现象,且气道组织中miR-22-3p水平降低(P<0.05)。在RASMCs细胞中,NK1R的3′UTR和miR-22-3p的直接结合,导致荧光素酶活性强度降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组的NK1R的mRNA和蛋白的表达水平明显上调(P<0.01)。与模型+mimic-NC组比较,模型+mimic组miR-22-3p的水平上调,而NK1R的表达下调(均P<0.05)。与模型+inhibitor-NC组比较,模型+inhibitor组miR-22-3p的水平下调,而NK1R水平上调(均P<0.05)。结论哮喘诱发大鼠气道NK1R的表达增加,miR-22-3p直接靶向调节抑制哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平,下调miR-22-3p解除对NK1R的抑制从而上调NK1R水平。 展开更多

关键词 microrna-22-3p 幼年大鼠 哮喘 神经激肽受体1 气道平滑肌重塑

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长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22调控微小RNA-27b-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

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作者 周金阔 张晋弘 +3 位作者 史晓晶 刘广顺 姜磊 刘倩峰 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期52-59,共8页

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)22调控微小RNA(miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞(CA... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)22调控微小RNA(miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞(CAL-27、SCC-25和HSC-3),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测癌组织、癌旁组织、HOK细胞和3种OSCC细胞中SNHG22、miR-27b-3p表达情况。对SCC-25细胞进行转染并将其分为Ctrl组(未进行转染)、si-SNHG22组、si-NC组、miR-27b-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、si-SNHG22+inhibitor-NC组和si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组,检测各组SCC-25细胞增殖情况[细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测增殖率、流式细胞术检测增殖指数(PI)];Transwell实验检测各组SCC-25细胞侵袭情况;划痕愈合实验检测各组SCC-25细胞迁移情况;双荧光素酶实验验证SNHG22与miR-27b-3p的靶向作用关系。结果与癌旁组织比较,OSCC癌组织中SNHG22表达显著升高,miR-27b-3p表达显著降低(P<0.05);与HOK细胞比较,CAL-27、SCC-25和HSC-3细胞中SNHG22表达显著升高,miR-27b-3p表达显著降低,且SCC-25细胞中SNHG22与miR-27b-3p的表达与HOK细胞差异最大(P<0.05)。与Ctrl组比较,si-SNHG22组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著减少(P<0.05),miR-27b-3p inhibitor组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著增加(P<0.05);与si-SNHG22组比较,si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著增加(P<0.05)。双荧光素酶实验显示SNHG22与miR-27b-3p存在靶向作用关系。结论SNHG22在OSSC中高表达,miR-27b-3p在OSSC中低表达,SNHG22可能通过海绵化miR-27b-3p促进SCC-25细胞增殖、侵袭和迁移,SNHG22/miR-27b-3p轴可能是OSCC一个新的诊断和治疗靶点。 展开更多

关键词 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22 微小RNA-27b-3p 口腔鳞状细胞癌 增殖 侵袭 迁移

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骨髓间充质干细胞来源外泌体的微小RNA-22-3p参与抑制环磷酰胺诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制研究

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作者 吴洁 刘彦礼 +4 位作者 秦艺璐 张胜辉 张瑞云 秦玉飞 范文强 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第4期39-44,共6页

目的分析骨髓间充质干细胞来源的外泌体微小RNA-22-3p(miR-22-3p)对卵巢早衰的影响。方法选取接受体外受精或者第二代试管婴儿治疗的卵巢早衰患者以及接受同样治疗的因男性因素不孕的正常志愿者提供卵泡液;通过差速离心法分离骨髓间充... 目的分析骨髓间充质干细胞来源的外泌体微小RNA-22-3p(miR-22-3p)对卵巢早衰的影响。方法选取接受体外受精或者第二代试管婴儿治疗的卵巢早衰患者以及接受同样治疗的因男性因素不孕的正常志愿者提供卵泡液;通过差速离心法分离骨髓间充质干细胞来源外泌体;分离外泌体的形态学、粒子大小以及标志蛋白通过透射电子显微镜、NanoSight LM10分析仪以及蛋白免疫印迹方法进行分析。将颗粒细胞经环磷酰胺(CTX)、外泌体、miR-22-3p模拟物以及相应对照处理,分为CTX组、Control组、外泌体孵育组、PBS处理组、CTX+miR-22-3p组、CTX+miR-NC组、CTX+Exosomes组以及CTX+PBS组;采用蛋白免疫印迹法和定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测基因表达水平;利用二苯基四氮唑溴盐(MTT)试剂以及流式分析仪检测细胞活力和凋亡。结果提取的外泌体具有典型的杯状囊泡,外泌体标志蛋白簇状分化抗原63(CD63)和簇状分化抗原9(CD9)表达在所提取的细胞上清外泌体中,外泌体粒子大小为80~150 nm;miR-22-3p在卵巢早衰患者和CTX诱导的卵巢颗粒细胞中显著低表达(P<0.05),在骨髓间充质干细胞来源外泌体孵育卵巢颗粒细胞中显著高表达(P<0.05);颗粒细胞活力在CTX组低于对照组,但在CTX+miR-22-3p组或CTX+Exosomes组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);颗粒细胞凋亡率在CTX组高于对照组,但在CTX+miR-22-3p组或CTX+Exosomes组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞来源的外泌体miR-22-3p抑制CTX诱导的卵巢颗粒细胞损伤。 展开更多

关键词 卵巢早衰 环磷酰胺 微小RNA-22-3p 外泌体 骨髓间充质干细胞

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lncRNA MALAT1调节miR-22-3p/NLRP3轴对LPS诱导的急性肺损伤的影响 被引量：1

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作者 王小花 林坚 +4 位作者 邢东文 王华 游海星 李平 赵光峰 《广东医学》 CAS 2023年第3期297-306,共10页

目的探究长链非编码RNA MALAT1通过miR-22-3p/NLRP3信号轴促进脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的分子机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、ALI组、sh-NC组、sh-MALAT1组,每组9只。通过气管内灌... 目的探究长链非编码RNA MALAT1通过miR-22-3p/NLRP3信号轴促进脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的分子机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、ALI组、sh-NC组、sh-MALAT1组,每组9只。通过气管内灌注LPS法建立ALI大鼠模型,假手术组气管内灌注等量的PBS作为阴性对照,sh-NC组、sh-MALAT1组在LPS诱导前48 h,通过静脉分别注射2×10^(7) TU/mL的sh-NC慢病毒或相同剂量的sh-MALAT1慢病毒。通过HE染色法观察肺组织的组织病理学改变;通过TUNEL染色法观察肺组织的细胞凋亡情况。通过双荧光素酶报告基因系统验证MALAT1与miR-22-3p、NLRP3与miR-22-3p的调控关系;通过实时荧光定量PCR技术和免疫印记技术检测肺组织和细胞中MALAT1、miR-22-3p、NLRP3、ASC、caspase-1的表达水平;通过酶联免疫吸附试验检测支气管肺泡灌洗液和细胞培养基中白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌情况;通过CCK-8技术检测A549细胞增殖情况;通过流式细胞术检测A549细胞凋亡情况。结果与假手术组相比,LPS诱导的ALI大鼠肺组织和A549细胞中MALAT1、NLRP3、ASC、caspase-1的mRNA水平显著升高,miR-22-3p水平显著降低(P<0.05)。此外,与假手术组相比,LPS诱导的ALI大鼠肺组织的组织病理损伤水平、炎症反应和细胞凋亡率升高(P<0.05)。与ALI组、sh-NC组相比,抑制MALAT1表达可改善LPS诱导的ALI大鼠肺组织和细胞中的炎症反应和细胞凋亡(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,MALAT1与miR-22-3p、NLRP3与miR-22-3p存在相互调控关系。与ALI组、sh-NC组相比,sh-MALAT1组肺组织中MALAT1、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA水平降低(P<0.05),miR-22-3p水平升高(P<0.05)。同时,BALF上清液中IL-1β、IL-18、TNF-α水平降低(P<0.05)。此外,下调MALAT1的同时抑制miR-22-3p表达后,细胞中miR-22-3p和Bcl-2表达水平显著降低,细胞增殖水平亦显著降低(P<0.05)。结论降低MALAT1的表达可通过促进miR-22-3p的表达,从而抑制NLRP3的蛋白水平,并最终抑制LPS诱导的ALI模型中的炎症反应和细胞凋亡。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 转移相关肺腺癌转录本1 微小RNA-22-3p 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 肺泡上皮细胞 炎症损伤 凋亡

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微小RNA-22-3p调控Kruppel样因子6表达对骨髓间充质干细胞心肌样分化的影响

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作者 钟晓鸣 张蕾 +5 位作者 姚新亮 刘洪洋 张媛 万琪琳 李彦明 程冠昌 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-8,共8页

目的探究微小RNA-22-3p(miR-22-3p)调控Kruppel样因子6(KLF6)表达对骨髓间充质干细胞(BMSC)心肌样分化的影响。方法分离并培养大鼠BMSC,将第3代BMSC分为对照组、5-氮杂胞苷(5-AZA)组、模拟物阴性对照组、miR-22-3p模拟物组、miR-22-3p... 目的探究微小RNA-22-3p(miR-22-3p)调控Kruppel样因子6(KLF6)表达对骨髓间充质干细胞(BMSC)心肌样分化的影响。方法分离并培养大鼠BMSC,将第3代BMSC分为对照组、5-氮杂胞苷(5-AZA)组、模拟物阴性对照组、miR-22-3p模拟物组、miR-22-3p模拟物+空载质粒组、miR-22-3p模拟物+KLF6过表达质粒组;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-22-3p及KLF6表达;免疫荧光化学染色法检测细胞结蛋白(Desmin)、肌钙蛋白T(cTnT)、间隙连接蛋白43(Cx43)表达;Western blot检测Desmin、cTnT、Cx43、KLF6蛋白表达;流式细胞术检测BMSC凋亡情况;采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-22-3p和KLF6的靶向关系。结果与对照组比较,5-AZA组BMSC中miR-22-3p(q=7.971,P<0.001)、Desmin(q=7.876,P<0.001)、cTnT(q=10.272,P<0.001)、Cx43表达(q=6.256,P<0.001)以及细胞凋亡率(q=12.708,P<0.001)显著增加,而KLF6 mRNA(q=20.850,P<0.001)及蛋白表达(q=11.080,P<0.001)显著降低;与5-AZA组和模拟物阴性对照组比较,miR-22-3p模拟物组BMSC中miR-22-3p(q=3.591,P<0.001;q=11.650,P<0.001)、Desmin(q=5.975,P<0.001;q=13.579,P<0.001)、cTnT(q=7.133,P<0.001;q=17.548,P<0.001)、Cx43表达(q=4.571,P=0.037;q=11.068,P<0.001)显著增加,而KLF6 mRNA(q=7.384,P<0.001;q=28.234,P<0.001)及蛋白表达(q=4.594,P=0.036;q=15.945,P<0.001)显著降低,miR-22-3p模拟物组细胞凋亡率显著低于5-AZA组(q=8.216,P<0.001);与miR-22-3p模拟物+空载质粒组比较,miR-22-3p模拟物+KLF6过表达质粒组KLF6 mRNA(q=23.891,P<0.001)及蛋白表达(q=13.378,P<0.001)显著增加,Desmin(q=9.505,P<0.001)、cTnT(q=10.985,P<0.001)、Cx43表达(q=8.301,P<0.001)显著降低,细胞凋亡率增加(q=4.713,P=0.029)。双荧光素酶报告基因实验发现KLF6是miR-22-3p的潜在靶基因。结论miR-22-3p通过抑制KLF6表达来促进BMSC心肌样分化。 展开更多

关键词 微小RNA-22-3p Kruppel样因子6 骨髓间充质干细胞 心肌样分化

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重症急性胰腺炎患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p与并发肺损伤的相关性 被引量：3

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作者 沈琪琦 童小文 +1 位作者 王伟 吴洪 《西部医学》 2021年第7期987-991,共5页

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p与并发肺损伤(ALI)的相关性。方法选择2017年7月~2020年2月本院收治的124例SAP患者作为研究对象,按照是否合并ALI分为单纯SAP组(78例)、SAP合并ALI组(46例);另选择同期体检... 目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p与并发肺损伤(ALI)的相关性。方法选择2017年7月~2020年2月本院收治的124例SAP患者作为研究对象,按照是否合并ALI分为单纯SAP组(78例)、SAP合并ALI组(46例);另选择同期体检的50例健康志愿者作为对照组。采集患者外周静脉血,采用实时荧光反转录定量聚合酶链式反应检测miR-21-3p、miR-22-3p表达,收集SAP患者临床资料。结果单纯SAP组、SAP合并ALI组患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p显著高于对照组(P<0.05);SAP合并ALI组高于单纯SAP组(P<0.05)。不同CT分级、伴有胸水与否、急性生理学与慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p水平比较差异具统计学意义(P<0.05);CT分级为E级、合并胸水、APACHEⅡ评分≥15分患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p水平高于CT分级为D级、无胸水、APACHEⅡ评分<15分的患者(P<0.05)。Logistic回归分析显示,CT分级、胸水、外周血miR-21-3p、miR-22-3p表达水平与SAP患者并发ALI相关(P<0.05)。外周血miR-21-3p、miR-22-3p诊断ALI曲线下面积(AUC)为0.770、0.812,当截点值为2.668、1.815时,约登指数最大;两者联合诊断AUC为0.869。结论SAP患者外周血miR-21-3p、miR-22-3p与ALI并发密切相关,临床可检测其水平明确SAP程度及是否发生ALI,对指导临床治疗具有重要价值。 展开更多

关键词 急性胰腺炎 肺损伤 微小RNA miR-21-3p miR-22-3p 相关性

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miR-22-3p在妊娠期糖尿病患者胎盘外泌体中的表达及其对血管内皮细胞功能的影响 被引量：2

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作者 郑芳 肖新益 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第8期1477-1484,共8页

目的:探讨miR-22-3p在妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘外泌体中的表达及其对血管内皮细胞增殖、小管形成能力的影响和相关机制。方法:收集GDM患者与正常妊娠孕产妇的外周静脉血及胎盘组织,并从外周血中分离、鉴定胎盘外泌体。体外培养人脐静... 目的:探讨miR-22-3p在妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘外泌体中的表达及其对血管内皮细胞增殖、小管形成能力的影响和相关机制。方法:收集GDM患者与正常妊娠孕产妇的外周静脉血及胎盘组织,并从外周血中分离、鉴定胎盘外泌体。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用脂质体转染技术对细胞中miR-22-3p进行过表达或敲低;采用高糖处理转染后的HUVEC,并将其分为阴性对照组(NC),高糖组(HG),高糖+miR-22-3pmimic组(HG+miR-22-3p mimic组);高糖+miR-22-3p inhibitor组(HG+miR-22-3p inhibitor组),HG+miR-NC组。CCK-8及小管形成实验分别检测上述各组HUVEC的增殖活性及成管能力;生物信息学分析并应用双荧光素酶基因报告实验检测miRNA-22-3p与神经导向因子Netrin-1的靶向调控关系;免疫组织化学染色检测Netrin-1在胎盘组织中的表达及定位;Speaman分析胎盘外泌体中miR-22-3p含量与胎盘组织中Netrin-1蛋白表达的相关性。结果:成功分离了胎盘外泌体;与正常妊娠组相比,miR-22-3p在GDM组胎盘外泌体中的表达增加;与NC组相比,HG组,HG+miR-22-3p mimic组、HG+miR-22-3p inhibitor和HG+miR-NC组细胞增殖活力及成管形成能力增加。而与HG组相比,miR-22-3p mimic组HUVEC的上述功能明显增加,但miR-22-3p inhibitor组却显著降低。双荧光素酶基因报告实验表明miR-22-3p能够靶向调控Netrin-1表达,且Netrin-1在GDM组胎盘组织中表达较正常妊娠组降低,Spearman分析发现在GDM组中胎盘外泌体miR-22-3p含量与Netrin-1表达水平呈负相关。结论:GDM胎盘外泌体中异常高表达的miR-22-3p可能通过抑制Netrin-1蛋白表达,上调内皮细胞的增殖及成管形成能力,从而促进GDM的发生发展。 展开更多

关键词 妊娠期糖尿病 胎盘外泌体 microrna-22-3p 血管内皮细胞

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微小RNA-22-3p负性调控人腹膜间皮细胞NLRP3的表达及功能

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作者 伍军 李相友 +5 位作者 封宝红 李菊霜 朱戈丽 张艳霞 毕智敏 巩雪敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2068-2073,共6页

目的:探讨微小RNA-22-3p(miR-22-3p)对人腹膜间皮细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达及功能的影响。方法:将NLRP3基因的3'-非翻译区(3'-UTR)序列及其突变体克隆到双萤光素酶报告基因载体psiCHECK2中,构建野生型... 目的:探讨微小RNA-22-3p(miR-22-3p)对人腹膜间皮细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达及功能的影响。方法:将NLRP3基因的3'-非翻译区(3'-UTR)序列及其突变体克隆到双萤光素酶报告基因载体psiCHECK2中,构建野生型及突变型重组双萤光素酶报告质粒,与miR-22-3p mimic和miR-22-3p in⁃hibitor共转染LPS预处理的人腹膜间皮细胞株HMrSV5,检测萤光素酶活性;HMrSV5细胞随机分为以下6组:miR-22-3p NC+LPS组、miR-22-3p NC+LPS+ATP组、miR-22-3p mimic+LPS组、miR-22-3p mimic+LPS+ATP组、miR-22-3p inhibitor+LPS组和miR-22-3p inhibitor+LPS+ATP组。RT-qPCR和Western blot检测NLRP3 mRNA和蛋白的表达,ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)的表达和caspase-1的活性,Western blot检测caspase-1 p20蛋白的表达。结果:NLRP3-3'-UTR野生型与miR-22-3p mimic共转染HMrSV5细胞后,萤光素酶活性较对照组降低(P<0.05);NLRP3-3'-UTR野生型与miR-22-3p inhibitor共转染HMrSV5细胞后,萤光素酶活性较对照组升高(P<0.05)。与miR-22-3p NC+LPS组比较,miR-22-3p mimic+LPS组NLRP3的mRNA和蛋白表达、IL-1β和caspase-1 p20的水平均下降且cas⁃pase-1活性减弱(P<0.05),而miR-22-3p inhibitor+LPS组NLRP3的mRNA和蛋白表达、IL-1β和caspase-1 p20的水平均上升且caspase-1的活性增强(P<0.05)。与miR-22-3p NC+LPS+ATP组比较,miR-22-3p inhibitor+LPS+ATP组NLRP3的mRNA和蛋白表达、IL-1β和caspase-1 p20的水平均上升且caspase-1的活性增强(P<0.05)。结论:miR-22-3p可负性调控人腹膜间皮细胞NLRP3的表达及功能。 展开更多

关键词 微小RNA-22-3p 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 人腹膜间皮细胞 腹膜透析 终末期肾脏病

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微小RNA-22-3p在尖锐湿疣患者皮损中表达的临床意义 被引量：3

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作者 王荣坤 林简 《中国性科学》 2020年第10期142-146,共5页

目的检测尖锐湿疣皮损中微小RNA-22-3p(miR-22-3p)的表达,分析其临床意义,关注与细胞增殖、凋亡和血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法选取2018年11月至2019年7月三亚市人民医院确诊为尖锐湿疣的65例患者作为研究对象并设为研究组,选... 目的检测尖锐湿疣皮损中微小RNA-22-3p(miR-22-3p)的表达,分析其临床意义,关注与细胞增殖、凋亡和血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法选取2018年11月至2019年7月三亚市人民医院确诊为尖锐湿疣的65例患者作为研究对象并设为研究组,选择同期因非皮肤病行手术切除后留取切缘处正常皮肤组织的65例患者设为对照组。采用PCR法检测两组患者中miR-22-3p的表达。采用免疫组化法检测尖锐湿疣中VEGF的表达、白细胞分化抗原31(CD31)标记的微血管密度(MVD)。采用Western Blot法检测尖锐湿疣中增殖细胞核抗原(PCNA)和B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)的表达。结果两组患者miR-22-3p的表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05),研究组患者miR-22-3p的表达在不同人乳头状瘤病毒(HPV)分型的表达中比较,差异具有统计学意义(P<0.05),而在不同性别、年龄及发病时间的表达中比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相关分析显示,miR-22-3p与PCNA(r=-0.55,P<0.05)、miR-22-3p与Bcl-2(r=-0.50,P<0.05)、miR-22-3p与VEGF(r=-0.55,P<0.05)、miR-22-3p与MVD(r=-0.50,P<0.05)均具有负相关性。结论尖锐湿疣中miR-22-3p的异常表达,与尖锐湿疣的形成和HPV的分型有关,miR-22-3p低表达不仅与细胞增殖和凋亡有关,还可以促进间质的血管新生。 展开更多

关键词 尖锐湿疣 微小RNA-22-3p 增殖 凋亡 血管内皮生长因子

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miR-22-3p靶向负调控eIF4E对儿童骨肉瘤细胞增殖影响的研究 被引量：1

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作者 姚红月 李岩 +1 位作者 陈美雪 王金凤 《陕西医学杂志》 CAS 2020年第1期16-19,共4页

目的:观察微小RNA-22-3p(miR-22-3p)与真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)的靶向关系,分析其对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法:选择骨肉瘤细胞系SAOS-2和成骨细胞系OB-3进行研究,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-22-3p与eIF4E的结合情况。... 目的:观察微小RNA-22-3p(miR-22-3p)与真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)的靶向关系,分析其对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法:选择骨肉瘤细胞系SAOS-2和成骨细胞系OB-3进行研究,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-22-3p与eIF4E的结合情况。建立空白对照组、空载体转染组、miR-22-3p转染组、miR-22-3p和eIF4E共转染组,采用CCK-8法检测细胞活性,采用Western Blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。应用实时荧光定量PCR法(qPCR)检测miR-22-3p在27例儿童骨肉瘤组织中的表达,应用免疫组化法检测组织中eIF4E和Ki67的表达。结果:骨肉瘤细胞系中miR-22-3p的表达明显低于正常成骨细胞系。双荧光素酶报告基因实验显示miR-22-3p能引起转染pGL3-eIF4E-WT细胞系中荧光素酶活性降低。与空白对照组及空载体转染组相比,miR-22-3p转染组细胞活性下降,PCNA表达下降,miR-22-3p和eIF4E共转染组能逆转上述表达水平。MiR-22-3p在骨肉瘤的不同肿物最大径和病理分级分组的表达中差异有统计学意义(P<0.05)。MiR-22-3p与eIF4E、miR-22-3p与Ki67均具有负相关性,eIF4E与Ki67具有正相关性。结论:miR-22-3p靶向负调控eIF4E调节骨肉瘤细胞的增殖。儿童骨肉瘤中miR-22-3p低表达是肿瘤进展的重要危险因素。 展开更多

关键词 骨肉瘤 miR-22-3p 真核细胞翻译起始因子4E 细胞增殖 细胞凋亡

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胎儿颈项透明层厚度检测联合母体血浆miR-22-3p、RIPK1浓度对胎儿先天性心脏病的诊断价值 被引量：1

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作者 侯广霞 臧鹏程 +1 位作者 赵丽 董晓菁 《岭南心血管病杂志》 CAS 2022年第6期550-554,共5页

目的 探究胎儿颈项透明层(nuchal translucency,NT)厚度联合母体血浆微小RNA-22-3p(micro RNA-22-3p,miR-22-3p)、受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(receptor-interacting serine/threonine protein kinase 1,RIPK1)对胎儿先天性心脏... 目的 探究胎儿颈项透明层(nuchal translucency,NT)厚度联合母体血浆微小RNA-22-3p(micro RNA-22-3p,miR-22-3p)、受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(receptor-interacting serine/threonine protein kinase 1,RIPK1)对胎儿先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)的诊断价值。方法 选择2018年3月至2020年10月在北部战区总医院产科确诊怀有CHD胎儿的孕妇57例为观察对象(CHD组),选择同期怀有健康胎儿的孕妇60名为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测孕妇血浆中miR-22-3p浓度,酶联免疫吸附法检测孕妇血浆中RIPK1浓度,超声检查胎儿NT厚度,Pearson法分析miR-22-3p、RIPK1的相关性,受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析胎儿NT厚度联合血浆miR-22-3p、RIPK1对胎儿CHD的预测价值。结果 两组孕妇年龄、孕周及胎儿性别之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组[(2.14±0.32)mm、(2.23±0.54)ng/mL、1.05±0.14]比较,CHD组胎儿NT厚度[(2.93±0.45)mm]增加,血浆RIPK1[(5.68±1.73)ng/mL]浓度显著升高,miR-22-3p(0.67±0.10)浓度显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示,CHD组血浆RIPK1与miR-22-3p浓度呈负相关性(r=-0.448,P<0.05);NT厚度、血浆RIPK1、miR-22-3p联合预测胎儿CHD的敏感度为89.47%,特异度为85.00%,曲线下面积为0.933。结论 CHD胎儿NT厚度增加,母体血浆中miR-22-3p浓度降低,RIPK1浓度升高;胎儿NT厚度联合母体血浆miR-22-3p、RIPK1浓度检测对胎儿CHD具有一定诊断价值。 展开更多

关键词 先天性心脏病 颈项透明层厚度 微小RNA-22-3p 受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1 血浆

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涎腺腺样囊性癌中miR-22-3p 的表达及与VEGF-C和MLVD的关系

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作者 麦明思 赵焱 +3 位作者 马锴 王菡 李欢 陈谦 《西部医学》 2020年第12期1850-1854,共5页

目的检测涎腺腺样囊性癌中微小RNA-22-3p(miR-22-3p)的表达,探讨其临床意义及与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和微淋巴管密度(MLVD)的关系。方法选取我院2011年1月~2014年7月收治的61例涎腺腺样囊性癌患者为研究对象,留取肿瘤组织(观察组... 目的检测涎腺腺样囊性癌中微小RNA-22-3p(miR-22-3p)的表达,探讨其临床意义及与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和微淋巴管密度(MLVD)的关系。方法选取我院2011年1月~2014年7月收治的61例涎腺腺样囊性癌患者为研究对象,留取肿瘤组织(观察组)和距肿物边缘>2 cm的正常涎腺组织(对照组)。应用实时荧光定量PCR法检测两组中miR-22-3p的表达,免疫组化方法检测观察组中VEGF-C和D2-40的表达,Western Blot法检测观察组中VEGF-C的表达。结果观察组中miR-22-3p的表达明显低于对照组,且观察组中miR-22-3p的表达在不同肿瘤直径、血管淋巴管累犯、有无远处转移、淋巴结转移和不同TNM分期中差异均有统计学意义(均P<0.05),而在不同性别、年龄、神经累犯中差异均无统计学意义(均P>0.05)。生存分析显示,miR-22-3p低表达患者的生存时间短。miR-22-3p与VEGF-C、MLVD呈负相关。结论miR-22-3p在涎腺腺样囊性癌中低表达,可能与病变的进展及淋巴管生成有关。miR-22-3p可能是涎腺腺样囊性癌独立的预后因子。 展开更多

关键词 腺样囊性癌 miR-22-3p 血管内皮生长因子-C 淋巴管生成 预后

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儿童结肠息肉中NLRP3、miR-22-3p表达及对疾病进展的影响

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作者 郭小刚 罗培燕 彭雷 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第3期297-301,共5页

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)及微小RNA-22-3p(miR-22-3p)在儿童结肠息肉组织中的表达及对儿童结肠息肉疾病进展的影响。方法选取结肠息肉患儿98例,其中幼年性息肉患儿52例、腺瘤性息肉患儿46例,另选取相对应患儿... 目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)及微小RNA-22-3p(miR-22-3p)在儿童结肠息肉组织中的表达及对儿童结肠息肉疾病进展的影响。方法选取结肠息肉患儿98例,其中幼年性息肉患儿52例、腺瘤性息肉患儿46例,另选取相对应患儿正常结肠组织作为对照;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-22-3p相对表达量,免疫组化法检测NLRP3表达,卡方检验分析不同临床病理特征结肠息肉组织中NLRP3及miR-22-3p表达;单因素及多因素logistic回归分析影响儿童结肠息肉疾病进展的因素。结果正常结肠组织、幼年性息肉组织、腺瘤性息肉组织中NLRP3阳性表达率依次升高,miR-22-3p相对表达量依次降低,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05);腺瘤性息肉、息肉多发、息肉直径≥2.5 cm的结肠息肉患儿中NLRP3阳性表达、miR-22-3p低表达的比例升高(P<0.05);NLRP3是影响结肠息肉发展为腺瘤性的独立危险因素(P<0.05),miR-22-3p是影响结肠息肉发展为腺瘤性的保护因素(P<0.05)。结论结肠息肉组织中NLRP3高表达、miR-22-3p低表达,且二者与结肠息肉疾病进展有关。 展开更多

关键词 儿童 幼年性息肉 腺瘤性息肉 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 微小RNA-22-3p

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靶向激活miR-148b-3p对缺血性脑卒中小鼠脑功能的影响及机制 被引量：1

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作者 李明 刘勇 +4 位作者 董海 王彪 阎登富 刘磊 何仲春 《成都医学院学报》 CAS 2020年第4期432-437,共6页

目的观察激活miR-148b-3p对小鼠缺血性脑卒中的影响,探讨硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴在该影响中的作用。方法将50只健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)、栓塞模型组(M... 目的观察激活miR-148b-3p对小鼠缺血性脑卒中的影响,探讨硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴在该影响中的作用。方法将50只健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)、栓塞模型组(MCAO组)、NLRP3抑制剂组(MCC950组)、miR阴性对照转染组(NC agomiR组)、miR-148b-3p激动剂转染组(miR-148b-3p agomiR组),每组10只。假手术组仅做手术损伤;其他各组小鼠采用线栓致大脑中动脉阻塞(MCAO)法建立小鼠缺血性脑卒中模型,使小鼠接受脑缺血1 h和再灌注72 h。MCC950组于手术后即刻腹腔注射50 mg/kg体重的NLRP3抑制剂MCC950。Sham组和MCAO组于手术后即刻腹腔注射同等容积的磷酸缓冲盐溶液(PBS)。NC agomiR组、miR-148b-3p agomiR组在手术前60 min通过侧脑室注射30 pmol/g体重的agomiR阴性对照品或miR-148b-3p agomiR。再灌注72 h后评估小鼠脑功能缺陷程度,氯化三苯基四氮唑染色法检测脑梗死灶体积百分数,RT-PCR法检测脑组织miR-148b-3p表达量,蛋白质印迹技术检测脑组织TXNIP、NLRP3蛋白表达量。另外,在小鼠神经瘤母细胞N2a细胞系上,采用双荧光素酶实验验证miR-148b-3p对TXNIP mRNA的靶向调节作用。结果与Sham组比较,MCAO组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显增大,缺血区脑组织miR-148b-3p表达量减少,TXNIP、NLRP3蛋白表达量增多;与miR转染阴性对照组比较,miR-148b-3p激动剂转染组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显降低,缺血区脑组织miR-148b-3p表达量增多,TXNIP、NLRP3蛋白表达量减少;与MCAO组比较,MCC950组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显降低。荧光素酶实验显示,TXNIP是miR-148b-3p的1个直接调节靶。结论内源性miR-148b-3p的表达下调可能与小鼠缺血性脑卒中发生相关;激活miR-148b-3p则对小鼠缺血性脑卒中有一定保护性作用,其机制与其抑制促炎性TXNIP/NLRP3信号轴有关。 展开更多

关键词 miR-148b-3p 缺血性脑卒中 硫氧还蛋白互作蛋白 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3

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重症急性胰腺炎合并腹腔感染外周血ICAM-1及miR-22-3p、miR-21-3p表达及其预测价值 被引量：1

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作者 张云祥 吴琴华 +2 位作者 吴玉塘 陈志钊 蔡凯晋 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第17期2639-2642,共4页

目的分析血清细胞黏附分子-1(ICAM-1)、外周血微小核糖核酸-22-3p(miR-22-3p)、miR-21-3p表达对重症急性胰腺炎患者合并腹腔感染的预测价值.方法选择2021年1月-2022年8月福建医科大学附属第二医院收治的90例重症急性胰腺炎合并腹腔感染... 目的分析血清细胞黏附分子-1(ICAM-1)、外周血微小核糖核酸-22-3p(miR-22-3p)、miR-21-3p表达对重症急性胰腺炎患者合并腹腔感染的预测价值.方法选择2021年1月-2022年8月福建医科大学附属第二医院收治的90例重症急性胰腺炎合并腹腔感染患者为感染组,同期102例单纯重症急性胰腺炎患者为未感染组,统计两组外周血ICAM-1、miR-22-3p、miR-21-3p表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析预测重症急性胰腺炎患者合并腹腔感染的临床价值,并比较住院期间重症急性胰腺炎合并腹腔感染不同预后患者表达水平.结果感染组患者外周血ICAM-1、miR-22-3p、miR-21-3p表达水平高于未感染组(P<0.05);三指标联合检测预测重症急性胰腺炎患者腹腔感染的曲线下面积(AUC)为0.923、敏感度为92.22%、特异度为81.37%;死亡组患者三指标表达水平高于存活组(P<0.05).结论外周血ICAM-1、miR-22-3p、miR-21-3p对重症急性胰腺炎患者合并腹腔感染具有较好的预测价值,且可对患者预后产生影响. 展开更多

关键词 重症急性胰腺炎 腹腔感染 细胞黏附分子-1 微小核糖核酸-22-3p 微小核糖核酸-21-3p 预测价值 受试者工作特征曲线

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微小RNA-22-3p靶向α-烯醇化酶对神经胶质瘤细胞迁移和黏附的影响 被引量：4

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作者 孙鹏 牛江涛 +5 位作者 梁洪磊 卫润斐 罗文凯 冯要钦 李辉 魏新亭 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期676-679,共4页

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-22-3p靶向α-烯醇化酶(ENO1)对对神经胶质瘤细胞迁移和黏附的影响。方法选取2015年6月到2018年6月安阳市人民医院手术治疗的91例患者的神经胶质瘤组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-22-3p靶向α-烯醇化酶(ENO1)对对神经胶质瘤细胞迁移和黏附的影响。方法选取2015年6月到2018年6月安阳市人民医院手术治疗的91例患者的神经胶质瘤组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析神经胶质瘤组织和癌旁组织中miR-22-3p表达水平。采用脂质体转染miR-22-3p模拟物和对照质粒于神经胶质瘤U251细胞,分别命名为miR-22-3p组和miRNA对照组。采用荧光定量PCR检测miR-22-3p组和miRNA对照组细胞中miR-22-3p表达水平。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)测定两组细胞增殖能力;采用基质胶黏附实验测定两组细胞黏附能力变化;采用Transwell检测两组细胞迁移能力。生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-22-3p的靶基因。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-22-3p靶基因蛋白质表达水平。组间数据比较采用t检验。结果与癌旁组织miR-22-3p表达水平(1.25±0.20)比较,神经胶质瘤组织中mRNA-22-3p表达水平(0.47±0.16)显著下降,差异有统计学意义(t=2.999,P<0.05)。转染48 h后,miR-22-3p组细胞miR-22-3p表达水平(2.47±0.17)较miRNA对照组(1.23±0.21)显著下降,差异有统计学意义(t=2.419,P<0.05)。miR-22-3p组细胞增殖能力(1.27±0.29)比miRNA对照组(2.07±0.23)显著下降,差异有统计学意义(t=1.940,P<0.05)。miR-22-3p组细胞黏附率[(0.19±0.09)%]比miRNA对照组细胞黏附率[(0.84±0.13)%]显著下降,差异有统计学意义(t=1.599,P<0.05)。miR-22-3p组细胞迁移数量[(174.08±10.98)个]比miRNA对照组细胞迁移数量[(69.48±7.01)个]显著增加,差异有统计学意义(t=2.011,P<0.05)。ENO1是miR-22-3p的靶基因。miR-22-3p组细胞ENO1蛋白表达水平(0.32±0.11)比miRNA对照组细胞(0.96±0.17)明显下降,差异有统计学意义(t=3.001,P<0.05)。结论 miR-22-3p在脑胶质瘤发生发展过程中发挥重要作用,通过靶向ENO1蛋白调控着胶质瘤细胞增殖、黏附和迁移。 展开更多

关键词 神经胶质瘤 微小RNA-22-3p α-烯醇化酶 增殖 黏附 迁移

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微小RNA-22-3p介导真核翻译起始因子4E调控骨肉瘤细胞增殖的研究 被引量：2

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作者 高彬 程连杰 韩钦一 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期501-503,共3页

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-22-3p与真核翻译起始因子4E(eIF4E)的靶向关系,分析其对增殖的调控作用。方法选择人正常成骨细胞株NHOst、骨肉瘤细胞株U20S(购自中国科学院上海细胞生物学研究所),应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞株中mi... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-22-3p与真核翻译起始因子4E(eIF4E)的靶向关系,分析其对增殖的调控作用。方法选择人正常成骨细胞株NHOst、骨肉瘤细胞株U20S(购自中国科学院上海细胞生物学研究所),应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞株中miR-22-3p的表达,采用双荧光素酶基因报告实验检测miR-22-3p与eIF4E结合情况。建立空白对照组、空载体转染组、miR-22-3p转染组、miR-22-3p和eIF4E共转染组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞的活性,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期素D1(Cyclin D1)的表达。采用定量聚合酶链反应(qPCR)法检测miR-22-3p在23例骨肉瘤组织中的表达,采用免疫组织化学方法检测骨肉瘤组织中eIF4E、细胞核增殖抗原(Ki-67)的表达。组间定量资料的比较采用t检验、方差分析(SNK法进行两两比较),对数据行Spearman相关分析及K-M生存分析。结果骨肉瘤细胞株中miR-22-3p的表达明显低于正常成骨细胞株;双荧光素酶基因报告实验发现miR-22-3p能引起转染pGL3-eIF4E-WT的细胞中荧光素酶活性降低。与空白对照组及空载体转染组比较,miR-22-3p转染组细胞活性明显下降,PCNA和Cyclin D1的表达显著下降,miR-22-3p和eIF4E共转染组均能逆转上述表达水平。骨肉瘤组织中miR-22-3p表达范围是0.6~3.6,平均1.9±0.2,miR-22-3p与eIF4E、miR-22-3p与Ki-67均呈负相关(r=-0.510、-0.530,P<0.05),eIF4E与Ki-67呈正相关(r=0.500,P<0.05)。miR-22-3p在不同肿物最大径、病变分级的分组中差异有统计学意义(P<0.05),miR-22-3p与生存时间明显相关。结论miR-22-3p在骨肉瘤中低表达,靶向负调控eIF4E的表达,调节细胞的增殖。miR-22-3p可能是肿瘤进展及预后不良的危险因素。 展开更多

关键词 骨肉瘤 微小RNA-22-3p 真核翻译起始因子4E 细胞增殖

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子宫内膜癌患者组织中lncRNA NNT-AS1、miR-22-3p表达水平及相关性分析 被引量：2

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作者 王媛媛 王亚莉 +3 位作者 张娟 黄颖 汪晶 宋成文 《中国优生与遗传杂志》 2022年第12期2165-2170,共6页

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶-反义RNA1(NNT-AS1)、微小RNA-22-3p(miR-22-3p)在子宫内膜癌(EC)中表达的相关性及二者与患者临床病理特征、预后的关系。方法 收集2015年1月至2016年11月期间于中部战区总医院进行手... 目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶-反义RNA1(NNT-AS1)、微小RNA-22-3p(miR-22-3p)在子宫内膜癌(EC)中表达的相关性及二者与患者临床病理特征、预后的关系。方法 收集2015年1月至2016年11月期间于中部战区总医院进行手术的104例EC患者切除的EC组织和癌旁正常组织,同时收集整理患者国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、肌层浸润深度等临床资料。检测组织中lncRNA NNT-AS1、miR-22-3p的相对表达水平;EC组织中lncRNA NNT-AS1与miR-22-3p表达的相关性采用Pearson相关分析;EC组织中lncRNA NNT-AS1和miR-22-3p表达与患者预后的关系采用Kaplan-Meier法分析;多因素Cox回归分析EC患者预后的影响因素。结果 与癌旁正常组织相比,EC组织中lncRNA NNT-AS1表达水平明显较高,miR-22-3p表达水平明显较低(P<0.05)。FIGO分期为Ⅲ+Ⅳ期、发生淋巴结转移、浸润深度≥1/2的EC患者miR-22-3p低表达、lncRNANNT-AS1高表达的比例高于FIGO分期为Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、浸润深度<1/2的EC患者(P<0.05)。Pearson相关分析显示,EC组织中lncRNA NNT-AS1相对表达水平与miR-22-3p呈负相关(r=-0.355,P<0.05)。EC组织中miR-22-3p高表达患者5年总生存率高于miR-22-3p低表达患者,lncRNANNT-AS1高表达患者5年总生存率低于lncRNANNT-AS1低表达患者(P<0.05)。lncRNA NNT-AS1、FIGO分期是EC患者死亡的独立危险因素(P<0.05),miR-22-3p是EC患者死亡的保护因素(P<0.05)。结论 EC组织中lncRNA NNT-AS1与miR-22-3p表达水平呈负相关,且二者均与患者FIGO分期等临床病理特征及预后有密切联系。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 长链非编码RNA NNT-AS1 微小RNA-22-3p 相关性 预后

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叶青素通过微小RNA-22-3p减轻缺氧和复氧所致肾细胞凋亡

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作者 袁洪萍 王晶 周裔 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期2367-2370,共4页

目的观察叶青素对缺氧和复氧的人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡的影响并确定其下游靶点。方法将人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2分为7组,分别为对照组、缺氧和复氧模组(HR)组、HR+5 mg/L组、HR+10 mg/L组、HR+20 mg/L组、HR+NC组、HR+Mimic... 目的观察叶青素对缺氧和复氧的人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡的影响并确定其下游靶点。方法将人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2分为7组,分别为对照组、缺氧和复氧模组(HR)组、HR+5 mg/L组、HR+10 mg/L组、HR+20 mg/L组、HR+NC组、HR+Mimics组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验、流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)实验检测HK-2细胞增殖和凋亡。通过数据库预测微小RNA(miR)-22-3p转录因子,然后通过蛋白质印迹法(Western blot)实验和qRT-PCR实验分别检测CCCTC结合因子(CTCF)和miR-22-3p水平。通过单因素方差分析对相关结果进行统计分析。结果与HR组比较,叶青素显著提高缺氧和复氧处理的HK-2细胞的细胞活力(叶青素5 mg/L:61.72±4.93比43.94±4.42,P<0.01;叶青素10 mg/L:76.14±4.48比43.94±4.42,P<0.01;叶青素20 mg/L:85.62±4.97比43.94±4.42,F=53.794,P<0.01)。此外,和HR组比较,叶青素显著抑制缺氧和复氧处理的HK-2细胞的凋亡率(叶青素5 mg/L:30.62±2.41比40.08±4.41,F=63.998,P<0.05;叶青素10 mg/L:22.32±2.85比40.08±4.41,P<0.01;叶青素20 mg/L:13.88±2.09比40.08±4.41,P<0.01)以及TUNEL阳性细胞比(叶青素5 mg/L:21.19±1.86比27.62±3.10,P<0.05;叶青素10 mg/L:14.78±1.89比27.62±3.10,P<0.01;叶青素20 mg/L:10.11±2.19比27.62±3.10,F=53.112,P<0.01)。进一步检测发现叶青素减轻缺氧和复氧导致的miR-22-3p(对照组:1±0.05,H/R组:0.27±0.06,叶青素5 mg/L:0.46±0.05,叶青素10 mg/L:0.63±0.05,叶青素20 mg/L:0.80±0.06,均P<0.01)和CTCF降低(对照组:1.00±0.04,H/R组:0.19±0.05,叶青素5 mg/L:0.39±0.07,叶青素10 mg/L:0.56±0.04,叶青素20 mg/L:0.72±0.06,F=102.400,均P<0.01)。HR+Mimics组HK-2细胞细胞活力显著高于HR组(79±3.85比42.78±4.45,F=117.224,P<0.01),同时细胞凋亡率显著低于HR组(18.2±2.28比41.26±3.59,F=104.770,P<0.01),TUNEL阳性细胞比显著低于HR组(16.38±2.46比29.28±3.14,F=54.042,P<0.01)。结论叶青素通过CTCF介导的miR-22-3p上调减轻缺氧和复氧诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡。 展开更多

关键词 叶青素 缺氧/复氧 微小RNA-22-3p 凋亡 肾脏

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