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环状RNA hsa_circ_0085576调控微小RNA-498/B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响
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作者 李立恒 王蕊 +5 位作者 王晓明 张智轶 张璇 安峰 王芹 张凡 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期60-67,共8页
目的探究环状RNA hsa_circ_0085576对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa_circ_0085576、微小RNA-498(miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠... 目的探究环状RNA hsa_circ_0085576对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa_circ_0085576、微小RNA-498(miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI-1)的表达水平。使用CCK-8、划痕实验、Transwell实验以及qRT-PCR、蛋白印迹法分别检测SCC-15细胞增殖活力、迁移及侵袭能力以及相关基因和蛋白的相对表达量。结果OSCC细胞中hsa_circ_0085576与BMI-1表达上调,miR-498表达下调(P<0.05)。下调hsa_circ_0085576表达或过表达miR-498后SCC-15细胞的增殖活性、划痕愈合率、侵袭细胞数目以及细胞周期蛋白D1、波形蛋白表达水平下调,miR-498和E-钙黏蛋白表达水平上调(P<0.05);抑制miR-498表达可减弱下调hsa_circ_0085576表达对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用;上调BMI-1表达可减弱过表达miR-498对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论下调hsa_circ_0085576表达可通过激活miR-498/BMI-1轴抑制OSCC细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 环状RNA hsa_circ_0085576 微小RNA-498 B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1 口腔鳞状细胞癌
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miR-498过表达对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响及其机制
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作者 袁洛花 李文丽 +3 位作者 刘海兵 范嘉佳 彭中华 邹剑 《山东医药》 CAS 2024年第1期25-29,共5页
目的探讨微小RNA-498(miR-498)过表达对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法体外传代培养人永生化鼻咽上皮细胞系NP69及人鼻咽癌细胞系CNE-2Z、CNE-1、HNE-1、SUNE-1,采用RT-qPCR法检测各细胞miR-498表... 目的探讨微小RNA-498(miR-498)过表达对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化(EMT)的影响及其机制。方法体外传代培养人永生化鼻咽上皮细胞系NP69及人鼻咽癌细胞系CNE-2Z、CNE-1、HNE-1、SUNE-1,采用RT-qPCR法检测各细胞miR-498表达,选择miR-498表达最低的鼻咽癌细胞进行后续实验。取传3代、对数生长期、生长状态良好的鼻咽癌细胞,随机分为miR-498 mimics组和NC mimics组,分别转染miR-498 mimics、NC mimics。转染6 h更换新鲜培养基继续培养24 h,收集细胞。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用平板克隆形成实验检测集落形成能力,采用Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力,采用Western blotting法检测EMT相关上皮型钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(Fibronectin)以及高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达。结果CNE-1、HNE-1、CNE-2Z、SUNE-1细胞miR-498相对表达量均低于NP69细胞(P均<0.05)。以CNE-2Z细胞miR-498相对表达量最低,故选择该细胞系进行后续实验。经验证,miR-498 mimics组miR-498相对表达量高于NC mimics组(P<0.05)。miR-498 mimics组培养0、24、48、72 h细胞增殖活性均低于NC mimics组(P均<0.05);miR-498 mimics组集落形成能力以及细胞侵袭和迁移能力均低于NC mimics组(P均<0.05);miR-498 mimics组Vimentin、Fibronectin、HMGA2蛋白相对表达量均低于NC mimics组,E-cadherin蛋白相对表达量高于NC mimics组(P均<0.05)。结论鼻咽癌细胞miR-498低表达;miR-498过表达则能抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭、迁移以及EMT,其机制可能与靶向调控HMGA2表达有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 微小RNA-498 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 上皮间质转化
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CircYPEL2通过miR-498/MSMO1轴调节宫颈癌细胞的放射敏感性
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作者 王静 易宣洪 +2 位作者 汪萍 黄晓智 熊伟 《中国妇幼健康研究》 2023年第10期60-69,共10页
目的研究环状RNA yippee样2(CircYPEL2)通过miR-498/甲基甾醇单加氧酶1(MSMO1)轴调节宫颈癌细胞放射敏感性的机制。方法检测人宫颈癌细胞株C33A及其放射线抵抗细胞C33A-RR中CircYPEL2、miR-498、MSMO1的表达。将体外培养的C33A-RR细胞... 目的研究环状RNA yippee样2(CircYPEL2)通过miR-498/甲基甾醇单加氧酶1(MSMO1)轴调节宫颈癌细胞放射敏感性的机制。方法检测人宫颈癌细胞株C33A及其放射线抵抗细胞C33A-RR中CircYPEL2、miR-498、MSMO1的表达。将体外培养的C33A-RR细胞随机分为对照组、放射组、放射+阴性对照组、放射+CircYPEL2敲低组、放射+CircYPEL2敲低+miR-498 inhibitor组,分组转染后,检测各组细胞CircYPEL2、miR-498及MSMO1的表达、增殖、凋亡及蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(CCND1)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达。检测C33A-RR中CircYPEL2对miR-498的靶向调节与miR-498对MSMO1的靶向调节。结果与C33A细胞相比,C33A-RR细胞中CircYPEL2的表达、MSMO1 mRNA与蛋白表达升高(t值分别为-8.125、-11.600、-11.267,P<0.05),miR-498表达降低(t=8.104,P<0.05)。对照组、放射组、放射+阴性对照组、放射+CircYPEL2敲低组、放射+CircYPEL2敲低+miR-498 inhibitor组之间的CircYPEL2、miR-498、MSMO1 mRNA表达、MSMO1蛋白表达、细胞增殖率、集落生成率、凋亡细胞比例、细胞凋亡率比较差异均有统计学意义(F值分别为44.747、34.977、16.762、7.460、18.603、16.039、161.266、174.878,P<0.05);C33A-RR细胞增殖与凋亡相关蛋白表达比较,各组PCNA、CCND1、Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白比较差异均有统计学意义(F值分别为15.777、13.693、81.133、78.133、51.587,P<0.05)。进一步比较发现,与对照组相比,放射组细胞各指标无明显变化(P>0.05);与对照组、放射组分别相比,放射+阴性对照组细胞各指标无明显变化(P>0.05);放射+CircYPEL2敲低组细胞增殖率、集落生成率、CircYPEL2表达、MSMO1 mRNA及蛋白表达、PCNA及CCND1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),凋亡细胞比例、细胞凋亡率、miR-498表达、Bax及caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)。miR-498 inhibitor可减弱CircYPEL2敲低对放射下细胞各指标的作用。CircYPEL2可靶向下调C33A-RR细胞的miR-498表达,而miR-498可靶向下调C33A-RR细胞MSMO1表达。结论敲低CircYPEL2可通过上调miR-498而降低MSMO1表达,从而增强宫颈癌细胞的放射敏感性,最终促进其凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA yippee样2 miR-498/甲基甾醇单加氧酶1 宫颈癌 放射敏感性
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hsa_circ_0007534/miR-498对NSCLC细胞增殖和迁移及侵袭的作用机制 被引量:2
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作者 漆毅 姚檬娜 +2 位作者 隋洪婷 林志国 岳丽玲 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第6期605-611,共7页
目的环状RNA(circRNA)是人类癌症的关键调节因子,circRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床价值和功能研究非常有限。文章旨在评估hsa_circ_0007534对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法将A549细胞接种于12孔板中(1×... 目的环状RNA(circRNA)是人类癌症的关键调节因子,circRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床价值和功能研究非常有限。文章旨在评估hsa_circ_0007534对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法将A549细胞接种于12孔板中(1×105个/孔),待细胞生长融合度约70%时,将细胞依次分为:NC组(不做任何处理)、NC-siRNA组(转染NC-siRNA)、hsa_circ_0007534-siRNA-3组(转染hsa_circ_0007534-siRNA-3)、hsa_circ_0007534-siRNA-3+NC-inhibitor组(转染hsa_circ_0007534-siRNA-3和NC-inhibitor)及hsa_circ_0007534-siRNA-3+miR-498-inhibitor组(转染hsa_circ_0007534-siRNA-3和miR-498-inhibitor)。qRT-PCR检测中hsa_circ_0007534、miR-498的相对表达水平,CCK-8和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,免疫印迹(Western blot)检测Ki-67、E-cadherin及N-cadherin蛋白水平。裸鼠异种移植肿瘤记录肿瘤组织的重量和体积,免疫组化检测肿瘤组织中Ki-67、E-cadherin及N-cadherin的表达。结果hsa_circ_0007534与miR-498存在靶向结合位点。与hsa_circ_0007534-WT+NC-mimics组细胞双荧光素酶活性(1.02±0.10)相比,hsa_circ_0007534-WT+miR-498-mimics组(0.46±0.08)显著降低(P<0.01)。与NC-siRNA组相比,hsa_circ_0007534-siRNA-3组A549细胞中miR-498相对表达水平、E-cadherin阳性细胞率增高(P<0.05),细胞增殖活力及集落形成数量、迁移及侵袭数量、Ki-67和N-Cadherin蛋白水平、肿瘤组织重量和体积、Ki-67与N-Cadherin阳性细胞率均显著降低(P<0.05);与hsa_circ_0007534-siRNA-3+NC-inhibitor组相比,hsa_circ_0007534-siRNA-3+miR-498-inhibitor组A549细胞中miR-498相对表达水平、E-cadherin阳性细胞率降低(P<0.05),细胞增殖活力及集落形成数量、迁移及侵袭数量、Ki-67和N-Cadherin蛋白水平、肿瘤组织重量和体积、Ki-67与N-Cadherin阳性细胞率均显著升高(P<0.05)。结论下调hsa_circ_0007534通过靶向上调miR-498抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 hsa_circ_0007534 非小细胞肺癌 微小RNA-498 增殖 迁移 侵袭
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血清ESM-1、miR-498水平变化与肺腺癌患者预后的关系
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作者 王丽宁 温婷 《海南医学》 CAS 2022年第9期1137-1140,共4页
目的研究血清内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、微小RNA-498(miR-498)水平变化与肺腺癌患者预后的关系。方法选取宝鸡市人民医院2017年5月至2020年1月收治的94例肺腺癌患者作为研究对象,根据患者出院后随访一年情况分为预后良好组(n=57)和... 目的研究血清内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、微小RNA-498(miR-498)水平变化与肺腺癌患者预后的关系。方法选取宝鸡市人民医院2017年5月至2020年1月收治的94例肺腺癌患者作为研究对象,根据患者出院后随访一年情况分为预后良好组(n=57)和预后较差组(n=37)。比较两组患者治疗前后血清ESM-1、miR-498水平;同时分析患者不同临床特征与血清ESM-1、miR-498水平的关系,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清ESM-1、miR-498对患者预后较差的预测价值。结果治疗后,预后较差组患者血清ESM-1水平为(38.31±5.54)ng/mL,明显高于预后良好组的(32.75±5.42)ng/mL,miR-498水平为(2.17±0.53)ng/mL,明显低于预后良好组的(2.88±0.41)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);TNM分期>Ⅱ期患者的血清ESM-1水平为(40.99±5.48)ng/mL,明显高于≤Ⅱ期患者的(31.96±5.47)ng/mL,有淋巴结转移患者的血清ESM-1水平为(39.84±5.42)ng/mL,明显高于无淋巴结转移患者的(30.98±5.56)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);TNM分期>Ⅱ期患者的血清miR-498水平为(2.46±0.47)ng/mL,明显低于≤Ⅱ期患者的(2.67±0.41)ng/mL,有淋巴结转移患者的血清miR-498水平为(2.38±0.48)ng/mL,明显低于无淋巴结转移患者的(2.78±0.38)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示:血清ESM-1和miR-498是影响患者预后的独立危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,血清ESM-1对肺腺癌患者预后的预测灵敏度、特异度、阳性预测值以及阴性预测值明显优于miR-498,血清ESM-1与miR-498联合检测对患者预后的预测灵敏度、特异度、阳性预测值以及阴性预测值明显优于各项指标单独检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清ESM-1、miR-498水平与肺腺癌患者预后紧密相关,两种指标联合检测对肺腺癌患者预后具有较好的评估价值。 展开更多
关键词 血清内皮细胞特异性分子-1 微小RNA-498 肺腺癌 预后 预测价值
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lncRNA CASC11靶向调节miR-498对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响
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作者 赵维波 孔令甲 +1 位作者 岳宗柱 朱玉森 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2023年第2期213-222,共10页
该文探讨长链非编码RNA(lnc RNA)癌症易感性候选物11(CASC11)对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及分子机制。体外培养正常人胃黏膜细胞系(GES-1)和人GC细胞系(MKN-45、KATOⅢ、MKN7和HGC-27),实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(... 该文探讨长链非编码RNA(lnc RNA)癌症易感性候选物11(CASC11)对胃癌(GC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及分子机制。体外培养正常人胃黏膜细胞系(GES-1)和人GC细胞系(MKN-45、KATOⅢ、MKN7和HGC-27),实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-q PCR)检测细胞中CASC11、miR-498(micro RNA-498)和LIN28B m RNA的表达情况。将MKN7细胞分为对照组(NC组)、si-NC组、si-CASC11组、si-CASC11+anti-NC组、si-CASC11+anti-miR-498组,使用Lipofectamine3000转染试剂将si-CASC11、si-NC、miR-498 inhibitor、inhibitor-NC转染到细胞中。转染后,RTq PCR检测细胞中CASC11、miR-498、LIN28B mRNA的表达情况,Western blot检测细胞中LIN28B蛋白的表达情况,CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力。双荧光素酶和RNA免疫沉淀(RIP)实验验证CASC11和miR-498的相互关系。BALB/c裸鼠移植瘤实验检测沉默CASC11在体内的抑瘤作用。结果显示,CASC11和LIN28B在GC细胞中过表达,miR-498在GC细胞中低表达(P<0.05)。敲低CASC11可显著上调miR-498表达,抑制LIN28B的m RNA和蛋白表达,抑制GC细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导GC细胞凋亡(P<0.05);体内实验证实,敲低CASC11可抑制体内裸鼠移植瘤的生长(P<0.05)。下调miR-498,可增加LIN28B表达水平,减弱CASC11沉默对GC细胞恶性生物学行为和体内移植瘤生长的抑制作用(P<0.05)。双荧光素酶和RIP实验证实miR-498是CASC11的潜在靶标。该研究得出,CASC11可能通过充当miR-498的海绵来促进LIN28B表达,从而影响GC细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA癌症易感性候选物11 microrna-498 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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