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日本血吸虫pcDNA3.1(+)/MLP核酸疫苗的构建及其对家兔保护性免疫作用的研究 被引量：4
1
作者 刘彦 肖建华 +2 位作者 廖力 张愉快 曾谷清 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期299-302,314,共5页
目的　体外扩增日本血吸虫中国大陆株粘蛋白样蛋白抗原的部分基因序列 ,构建日本血吸虫pcDNA3 1(+) /MLP核酸疫苗 (SJP) ,免疫新西兰家兔 ,观察它在肌肉组织中的表达、及其对家兔的保护性免疫作用。方法　分子克隆常规操作构建SJP疫苗 ... 目的　体外扩增日本血吸虫中国大陆株粘蛋白样蛋白抗原的部分基因序列 ,构建日本血吸虫pcDNA3 1(+) /MLP核酸疫苗 (SJP) ,免疫新西兰家兔 ,观察它在肌肉组织中的表达、及其对家兔的保护性免疫作用。方法　分子克隆常规操作构建SJP疫苗 ,免疫家兔 ,家兔肌肉组织体外扩增查MLP基因 ,并通过免疫组化观察重组蛋白在局部肌组织中的表达 ;做血清抗体及细胞因子分析 ,计算减虫率及减卵率。结果　经酶切、PCR及测序鉴定表明所构建的SJP中含有目的基因序列 ;免疫家兔 8周后可以在免疫家兔肌肉中检测到MLP基因 ,免疫组化结果阳性 ;可诱导IgA、IgG1及INF -γ变化 ,减虫率为2 4 10 % ,减卵率为 2 8 10 %。结论　成功地构建了含目的基因的核酸疫苗SJP ,SJP免疫家兔后 ,肌组织有重组蛋白的表达 ,并可产生一定的免疫保护性作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 pcDNA3.1(+)/mlp 核酸疫苗 构建 兔 保护性免疫 粘蛋白样蛋白基因
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半滑舌鳎黏蛋白样蛋白基因克隆及其组织分布和时序表达
2
作者 金歌 费金鹏 +3 位作者 胡秀彩 谭静 吕爱军 孙敬锋 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期19-26,共8页
以创伤弧菌(Vibrio vulnificus)ST-6菌株腹腔注射半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,采用RT-PCR方法扩增、克隆半滑舌鳎黏蛋白样蛋白(CsMLP)基因及其序列,利用实时荧光定量PCR技术研究CsMLP基因的组织分布和创伤弧菌感染后在... 以创伤弧菌(Vibrio vulnificus)ST-6菌株腹腔注射半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,采用RT-PCR方法扩增、克隆半滑舌鳎黏蛋白样蛋白(CsMLP)基因及其序列,利用实时荧光定量PCR技术研究CsMLP基因的组织分布和创伤弧菌感染后在皮肤中的时序表达水平。结果表明:CsMLP基因片段长度为2989 bp,推测编码996氨基酸(aa),含有VWD(98~273 aa)、C8(318~379 aa)和CK(908~982 aa)3个黏蛋白特异性结构域。氨基酸序列同源性分析结果表明,半滑舌鳎CsMLP与黄金鲈(Perca flavescens)、石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)、斑马鱼(Danio rerio)、非洲爪蟾(Xenopus laevis)和人(Homo sapiens)的序列同源性分别为56.18%、44.07%、33.15%、26.91%和22.63%。CsMLP基因在鳃和皮肤表达水平较高,在脾脏、肠道和肝脏中表达水平较低;CsMLP在创伤弧菌感染皮肤12 h后显著性上调表达,36 h后显著性下调表达。本结果为半滑舌鳎黏蛋白功能及其黏膜免疫应答机制研究提供参考。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 mlp 基因克隆 组织分布 时序表达
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