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日本沼虾表皮Serpin基因克隆及免疫功能的初步研究
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作者 宁黔冀 彭彦新 +1 位作者 岳凯迪 李亦君 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第2期123-129,I0006,I0007,共9页
丝氨酸蛋白酶级联反应介导的黑化是甲壳动物重要的免疫反应,丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine proteinase inhibitor,Serpin)是黑化反应的重要调节因子,而甲壳动物表皮Serpin的有关研究较少.为了探索表皮Serpin在日本沼虾(Macrobrachium nippo... 丝氨酸蛋白酶级联反应介导的黑化是甲壳动物重要的免疫反应,丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine proteinase inhibitor,Serpin)是黑化反应的重要调节因子,而甲壳动物表皮Serpin的有关研究较少.为了探索表皮Serpin在日本沼虾(Macrobrachium nipponense)免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,利用PCR、RACE和生物信息学从日本沼虾表皮克隆并鉴定了1个新的Serpin基因,命名为MnSerpin,利用RT-qPCR和RNAi等方法,研究了该基因时空表达模式、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒后表皮MnSerpin的转录水平以及日本沼虾死亡率的变化.结果显示,MnSerpin cDNA全长2181 bp,编码419个氨基酸,具有Serpin结构域.MnSerpin在腹背部表皮、鳃、血细胞、胃、心、肝胰腺等多种组织均有表达;表皮MnSerpin的表达与蜕皮周期有关,与蜕皮间期(C期)相比,在蜕皮后早期(A期)最高,增加6.06倍(P<0.01).嗜水气单胞菌攻毒后,表皮MnSerpin的相对表达量在6 h达到了峰值,比对照组增加3.77倍(P<0.01).在腹背部第二节的关节膜内注射3μg dsRNA溶液,每12 h注射1次,共注射3次,最后一次注射后12 h,干扰效率最高,表皮MnSerpin的相对表达量同比下降58%(P<0.01).在干扰效率最高的时间点攻毒,120 h内,干扰组虾的累计死亡率比未干扰组增加16%(P<0.01).结果表明,日本沼虾表皮MnSerpin是重要的免疫因子,MnSerpin的表达存在组织以及蜕皮周期不同阶段的差异,该基因表达下调能显著增加嗜水气单胞菌感染虾的死亡率. 展开更多
关键词 日本沼虾(Macrobrachium nipponense) 表皮 MnSerpin RNAI
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Genetic Structure of the Oriental River Prawn (Macrobrachium nipponense) from the Yangtze and Lancang Rivers, Inferred from COI Gene Sequence 被引量:32
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作者 杨频 张浩 +4 位作者 陈立侨 叶金云 禹娜 顾志敏 宋大祥 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期113-118,共6页
This study analyzed nueleotide sequences from the mitochondrial eytochrome oxidase submit (COI) gene region (450 bp) to investigate the genetic structure of the oriental river prawn ( Macrobrachium nipponense ) ... This study analyzed nueleotide sequences from the mitochondrial eytochrome oxidase submit (COI) gene region (450 bp) to investigate the genetic structure of the oriental river prawn ( Macrobrachium nipponense ) among nine populations from the Yangtze and Lancang Rivers. A total of 79 individuals were collected for this work. Eighty-nine nucleotides were found to be variable, resulting in 46 haplotypes. Among the nine populations, the population from Kunming shows the greatest level of variability (h = 1.000, π = 0.028), whereas the population from Cbongqing exhibits the lowest level of variability (h = 0.700,π = 0.008). Analysis of molecular variance suggested that of the total genetic diversity, 9.66% was attributable to inter-population diversity and the remainder (90.34%) to differences within populations. A molecular phylogenetic tree constructed using the Neighbor-joining (N J) method showed that the 46 haplotypes were assigned to two clades associated with geographic regions. These results provide basic information for the conservation and sustainable exploitation of this species. 展开更多
关键词 Macrobrachium nipponense COI gene Genetic structure Genetic variation HAPLOTYPE
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盐度对青虾幼虾生长及其异速生长的影响
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作者 王泽飞 王文超 +3 位作者 周子琦 谢楠 陶贤继 冯建彬 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2024年第6期57-63,共7页
为探讨盐度对青虾(Macrobrachium nipponense)幼虾生长及其异速生长的影响,本研究将1月龄青虾幼虾分别养殖在盐度0、7和14的水体中,每隔15 d分别随机抽样90尾并测定个体的体长、体质量等形态性状,计算并比较不同盐度中青虾幼虾生长速度... 为探讨盐度对青虾(Macrobrachium nipponense)幼虾生长及其异速生长的影响,本研究将1月龄青虾幼虾分别养殖在盐度0、7和14的水体中,每隔15 d分别随机抽样90尾并测定个体的体长、体质量等形态性状,计算并比较不同盐度中青虾幼虾生长速度。结果显示:在60 d的养殖过程中,青虾幼虾在盐度0中的平均体长、体质量均显著高于盐度7、14;第15、60天时,青虾幼虾在盐度0中的体长、体质量相对增长率均显著高于盐度7、14;不同盐度梯度下青虾幼虾个体生长速度均存在显著差异,体长、体质量的差异随养殖时间的增加而显著加大,其中盐度0中个体间异速生长差异程度最大,盐度14中个体间异速生长差异程度较小。综上所述,青虾幼虾在不同盐度中均存在异速生长现象,青虾幼虾在盐度14中个体间异速生长最小。 展开更多
关键词 青虾(Macrobrachium nipponense) 幼虾 盐度 生长 异速生长
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饲料中添加白术提取物对日本沼虾生长、健康和抗病力的影响 被引量:1
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作者 白茹雪 花罗海 +8 位作者 刘昊昆 张月星 朱晓鸣 杨云霞 韩冬 金俊琰 张志敏 田继业 解绶启 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期86-98,共13页
文章研究了饲料中添加不同水平的白术提取物(Extraction of Atractylodes macrocephala Koidz,EAMK)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)生产性能、器官指数、血液生化指标、抗氧化能力、消化系统健康和抗病力的影响。实验以初始体重... 文章研究了饲料中添加不同水平的白术提取物(Extraction of Atractylodes macrocephala Koidz,EAMK)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)生产性能、器官指数、血液生化指标、抗氧化能力、消化系统健康和抗病力的影响。实验以初始体重为(0.21±0.05)g的日本沼虾为研究对象,设置6个饲料处理,白术提取物添加量为0、100、200、400、600和1200 mg/kg(Control、A100、A200、A400、A600和A1200)。每个饲料处理设6个重复,每个养殖缸放入60尾虾,实验周期为75d,每天记录采食量。养殖实验期间监测水体温度为(20±3)℃,pH为7.8—8.2,亚硝酸盐为0.16—0.2 mg/L,氨氮为0.02—0.1 mg/L,溶氧>6.0 mg/L。在实验结束后,分析日本沼虾生长性能、血清生化指标、肠道消化酶和免疫指标及肝胰腺抗氧化能力,观察日本沼虾的组织结构,用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行攻毒并记录存活率。结果表明:饲料中添加200 mg/kg的白术提取物可以显著提高日本沼虾的增重率(WGR)和特定生长率(SGR),并显著降低饲料系数(FC;P<0.05)。各处理组间的肝体比、出肉率和体成分均无显著性差异(P>0.05);A100组的血清葡萄糖(Glu)含量显著高于对照组(P<0.05),并能显著降低谷丙转氨酶(ALT)活性(P<0.05);各白术提取物处理组的血清甘油三酯(TG)和总胆固醇含量(TC)均显著低于对照组(P<0.05);A400组的肝胰腺GSH-Px活性显著高于A100组和对照组(P<0.05),A600组的肝胰腺CAT活性显著高于其他各组(P<0.05),A200和400组的肠道iNOS的活性显著高于对照组(P<0.05);A400组的日本沼虾肠绒毛显著高于对照组(P<0.05),并且减轻了肝细胞的空泡化,促进了鳃的完整性;A100处理组的嗜水气单胞菌攻毒后存活率显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,白术提取物可以提高日本沼虾的生长性能和抗氧化能力,提高抗病力,在日本沼虾饲料中适宜添加量为100—400 mg/kg。 展开更多
关键词 白术提取物 生长性能 免疫 肠道健康 日本沼虾
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日本沼虾StAR基因克隆及其低氧胁迫下表达分析 被引量:1
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作者 郑诚 薛程 +1 位作者 赵倩倩 孙盛明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期64-75,共12页
为了研究类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)在日本沼虾应答低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验应用c DNA末端快速扩增(RACE)PCR技术克隆了日本沼虾StAR全长cDNA序列,并利用在线软件对其序列特征... 为了研究类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)在日本沼虾应答低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验应用c DNA末端快速扩增(RACE)PCR技术克隆了日本沼虾StAR全长cDNA序列,并利用在线软件对其序列特征进行生物信息学分析,采用半定量RT-PCR方法分析StAR在日本沼虾不同组织的分布情况,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与免疫印迹(Western blot)技术对其在不同低氧胁迫阶段中的表达规律进行检测,观察低氧胁迫下精巢组织中StAR蛋白免疫组化定位。结果显示,日本沼虾StAR其cDNA全长3 361 bp (NCBI登录号:MW263908),包括5′-UTR 323 bp,3′-UTR 2 129 bp,开放阅读框909 bp,编码302个氨基酸。氨基酸序列比对及系统进化分析结果显示,日本沼虾StAR基因与三疣梭子蟹等甲壳动物StAR聚类一支,具有最近的亲缘关系。半定量RT-PCR检测结果显示,StAR在日本沼虾不同组织中均有表达,其表达量在肝胰腺和心脏组织中最低,在精巢组织中表达处于较高水平。使用qRT-PCR技术检测日本沼虾精巢中StAR在低氧胁迫下时空表达情况,结果表明,与对照组相比,低氧处理组精巢中StAR基因表达量在1~48 h均显著上调,而在低氧处理组96 h显著降低。此外,本实验对StAR进行了原核表达及抗血清制备,采用Western blot检测StAR蛋白表达丰度基本与基因表达模式相似,免疫组化结果显示,StAR蛋白在精细胞与间质细胞中均有表达。综上所述,长期低氧胁迫显著降低了StAR基因的转录表达水平,并且该基因可能在类固醇合成路径及精子发生过程中均发挥重要作用。本研究结果为进一步解析日本沼虾类固醇激素合成分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 日本沼虾 STAR 克隆 低氧 表达分析
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日本沼虾Bax基因克隆及其在低氧胁迫过程中的作用 被引量:1
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作者 赵倩倩 孙西超 +2 位作者 郑诚 薛程 孙盛明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期65-78,共14页
为探究细胞凋亡相关基因Bax(B-cell lymphoma-2 associated X protein)在日本沼虾低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验采用cDNA末端快速扩增(RACE)PCR技术获得日本沼虾细胞凋亡相关基因Bax的cDNA全长序列,采用半定量RT-PCR与实时荧光定量PC... 为探究细胞凋亡相关基因Bax(B-cell lymphoma-2 associated X protein)在日本沼虾低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验采用cDNA末端快速扩增(RACE)PCR技术获得日本沼虾细胞凋亡相关基因Bax的cDNA全长序列,采用半定量RT-PCR与实时荧光定量PCR(qPCR)分析其在日本沼虾不同组织、不同低氧阶段的表达情况,同时采用Western blot与免疫组化分析了低氧下日本沼虾Bax蛋白的表达与定位。日本沼虾Bax基因cDNA全长2287 bp(NCBI登录号:MZ823353),包括5'非编码区(UTR)为42 bp,3'UTR为814 bp,开放阅读框(ORF)1431 bp,编码476个氨基酸。通过软件和生物信息网站对其序列进行分析,氨基酸相似度比对显示,日本沼虾细胞凋亡基因Bax富含高度保守的BH1、BH2及BH3结构域。系统进化树分析显示,日本沼虾Bax基因与斑节对虾等甲壳动物Bax聚为一支,具有最近的亲缘关系。RT-PCR结果表明,日本沼虾Bax基因在肝胰腺中表达量最高,在脑中表达量最低。在低氧胁迫1~96 h时,日本沼虾鳃和肝胰腺组织Bax基因表达量均显著高于对照组,这与日本沼虾Bax蛋白表达丰度基本相似。通过构建原核表达载体获得体外重组蛋白Bax,并将纯化重组蛋白免疫兔子获得抗血清。免疫组化结果显示,鳃和肝胰腺Bax蛋白阳性信号主要定位在鳃上皮细胞和肝细胞中。最后,采用流式细胞仪分析表明,日本沼虾血细胞凋亡率在低氧胁迫96 h时显著高于对照组,这与日本沼虾Bax基因转录水平和蛋白表达丰度相吻合。研究表明,日本沼虾Bax基因在日本沼虾不同组织应答低氧胁迫分子过程中均具有促凋亡作用。本研究可为探明日本沼虾不耐低氧的分子机制提供理论参考。 展开更多
关键词 日本沼虾 BAX 细胞凋亡 低氧 原核表达
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河虾过敏原原肌球蛋白的基因克隆与原核表达
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作者 骆叶晴 郑双艳 +4 位作者 孙耀斌 陈娇 刘鑫 陈红兵 谢彦海 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第13期89-95,共7页
为了探寻天然原肌球蛋白的可替代物作为诊断和治疗虾类过敏的基础材料,本研究从河虾中提取总RNA,利用cDNA末端快速扩增技术克隆河虾过敏原原肌球蛋白基因的全长序列。以此序列设计表达引物,构建表达载体,最后通过异丙基-β-D-硫代半乳糖... 为了探寻天然原肌球蛋白的可替代物作为诊断和治疗虾类过敏的基础材料,本研究从河虾中提取总RNA,利用cDNA末端快速扩增技术克隆河虾过敏原原肌球蛋白基因的全长序列。以此序列设计表达引物,构建表达载体,最后通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达重组原肌球蛋白。结果显示,河虾的原肌球蛋白基因cDNA序列全长1658 bp,开放阅读框855 bp,编码284个氨基酸,预测蛋白等电点4.70,预测分子质量32.8 kDa。河虾原肌球蛋白cDNA序列已上传至GenBank数据库,登录号为OP974621。本研究成功构建河虾原肌球蛋白重组表达质粒pET-30a-TM,并用IPTG进行体外诱导表达,最佳诱导条件为IPTG浓度1 mmol/L、37℃诱导4 h。可溶性分析结果表明重组原肌球蛋白主要以可溶性形式存在于细胞破碎液的上清液中,分子质量约38 kDa。 展开更多
关键词 河虾 原肌球蛋白 基因克隆 原核表达 重组蛋白
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青虾(Macrobrachium nipponense)幼虾趋光性初步研究 被引量:3
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作者 马盛群 李爱顺 +1 位作者 周国勤 茆建强 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2014年第5期27-31,共5页
以青虾(Macrobrachium nipponense)幼虾平均体长(13.55±1.96)mm为样本,研究了对7种单色光谱、全色光谱的趋光特性和性别间的差异。实验水簇箱设可更换滤光片的固定光源和捕获趋光幼虾网具,记录5 min内的趋光频率并捕获30 min时的... 以青虾(Macrobrachium nipponense)幼虾平均体长(13.55±1.96)mm为样本,研究了对7种单色光谱、全色光谱的趋光特性和性别间的差异。实验水簇箱设可更换滤光片的固定光源和捕获趋光幼虾网具,记录5 min内的趋光频率并捕获30 min时的趋光幼虾样本,检测所获样本体长与性别。实验结果表明:(1)410 nm和全色光谱组的幼虾趋光频率最高,555 nm组最低;(2)随光照时间延长幼虾趋光行为减弱,表现出光感疲劳现象;(3)450 nm组的捕获样本中,雌性数占80%,雌雄比4.0达到实验最大值,全色光组的雌性数仅占42.3%,雌雄比0.73为实验最小值;(4)610 nm组捕获样本平均体长最大,410 nm组的平均体长最小,表明发育早期幼虾对短波长敏感,而发育中期的幼虾则对长波长敏感。 展开更多
关键词 青虾幼虾(Macrobrachium nipponense) 性别 光波长 趋光性
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饲料中添加过氧化氢酶对日本沼虾生长性能、抗氧化能力、免疫性能和肠道菌群结构的影响
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作者 李姗姗 王俊保 +5 位作者 简永慧 宋嘉欣 周东生 郑金仙 孔有琴 丁志丽 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期464-477,共14页
本试验旨在研究饲料中添加不同水平过氧化氢酶(CAT)对日本沼虾生长性能、抗氧能力、免疫性能和肠道菌群结构的影响。试验共配制6种饲料,分别在基础饲料中添加0(CAT1,对照组)、75(CAT2组)、150(CAT3组)、300(CAT4组)、600(CAT5组)和1200 ... 本试验旨在研究饲料中添加不同水平过氧化氢酶(CAT)对日本沼虾生长性能、抗氧能力、免疫性能和肠道菌群结构的影响。试验共配制6种饲料,分别在基础饲料中添加0(CAT1,对照组)、75(CAT2组)、150(CAT3组)、300(CAT4组)、600(CAT5组)和1200 U/kg(CAT6组)的CAT,饲喂1080只初始体重为(0.10±0.03)g的日本沼虾,每组3个重复,每个重复60只虾。试验期为8周。结果显示:1)各试验组日本沼虾的存活率未受到饲料CAT添加水平的显著影响(P>0.05),但当饲料添加150 U/kg CAT时,日本沼虾的增重率显著高于对照组(P<0.05)。2)各试验组日本沼虾肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)活性均无显著差异(P>0.05);CAT2、CAT3和CAT4组肝胰腺丙二醛(MDA)含量显著低于其余各组(P<0.05);随着饲料中CAT添加水平的增加,肝胰腺CAT活性呈现出先上升后下降的趋势,并在CAT2组其活性达到最高。同时,日本沼虾肝胰腺中多酚氧化酶(PPO)活性随着饲料中CAT添加水平呈先增加后降低趋势,CAT3和CAT4组肝胰腺PPO活性显著高于CAT5组(P<0.05);肝胰腺碱性磷酸酶(AKP)活性具有一定的波动,CAT3组肝胰腺AKP活性显著高于CAT1、CAT2和CAT4组(P<0.05)。3)日本沼虾各组之间肠道菌群的α多样性均无显著差异(P>0.05)。对日本沼虾肠道菌群进行β多样性分析发现,在门水平上,日本沼虾肠道菌群优势菌门为变形菌门、厚壁菌门和蓝藻菌门,CAT3和CAT4组中变形菌门的相对丰度显著低于对照组(P<0.05),而厚壁菌门相对丰度显著高于对照组(P<0.05);在属水平上,日本沼虾肠道菌群优势菌属为Tyzzerella、气单胞菌属和不动杆菌属,CAT4组中Tyzzerella相对丰度显著高于对照组(P<0.05),而CAT3、CAT4和CAT5组中气单胞菌属相对丰度显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,饲料中添加150~300 U/kg的CAT可提高日本沼虾生长性能、抗氧化能力和免疫性能,增加肠道有益菌群的丰度,促进日本沼虾的健康养殖。 展开更多
关键词 过氧化氢酶 日本沼虾 肠道菌群 抗氧化
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四川省不同流域日本沼虾群体遗传多样性分析
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作者 张露 周剑 +7 位作者 柯红雨 黄志鹏 赵仲孟 赵瀚 段元亮 牟成艳 李华东 李强 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1124-1130,共7页
【目的】四川省河流众多,野生日本沼虾资源丰富,深入了解四川省日本沼虾种质资源现状,开展不同流域日本沼虾遗传多样性评估具有重要意义。【方法】基于线粒体Cytb序列,对四川省巴河(BH)、涪江(FJ)、嘉陵江(JLJ)、岷江(MJ)和思蒙河(SMH)... 【目的】四川省河流众多,野生日本沼虾资源丰富,深入了解四川省日本沼虾种质资源现状,开展不同流域日本沼虾遗传多样性评估具有重要意义。【方法】基于线粒体Cytb序列,对四川省巴河(BH)、涪江(FJ)、嘉陵江(JLJ)、岷江(MJ)和思蒙河(SMH)5个日本沼虾野生群体的遗传多样性进行分析。【结果】所有群体的201尾日本沼虾中共检测出36种单倍型,单倍型多样性(H_(d))值为0.345~0.959,Hd均值为0.802,其中JLJ群体的Hd值最高(0.959),而MJ、SMH和BH群体的Hd值相对较低,H_(d)值均小于0.5。所有群体的核苷酸多样性(P_(i))值为0.00225~0.01547,P_(i)均值为0.01583,其中JLJ群体的P_(i)值最高(0.01547),BH群体的P_(i)值最低(0.00225)。日本沼虾的遗传变异主要来自群体间(68.20%),群体间存在显著的遗传分化,系统发育树分析显示所有群体呈现3个较明显分支。单倍型MJ网络图显示所有单倍型也呈现3个明显谱系,其中谱系A包含优势单倍型Hap 14,谱系B包含优势单倍型Hap 16,谱系C包含优势单倍型Hap 1。【结论】日本沼虾群体遗传多样性总体上处于较高水平,但不同流域的群体间遗传多样性水平差异较大,其中MJ、BH和SMH群体的遗传多样性相对较低,对这些流域内日本沼虾种质资源的保护有待进一步加强。本研究为四川省日本沼虾种质资源的保护与合理开发利用提供了参考依据,有利于促进四川省日本沼虾产业的可持续发展。 展开更多
关键词 日本沼虾 细胞色素B基因 遗传多样性
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日本沼虾表皮酚氧化酶原激活因子基因的克隆及功能
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作者 彭彦新 岳凯迪 +1 位作者 杜娟 宁黔冀 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期57-65,共9页
为了探索表皮酚氧化酶原激活因子(prophenoloxiase activating factors,PPAFs)在甲壳动物免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,本实验利用PCR和RACE技术从日本沼虾表皮克隆并鉴定了一个新的PPAF基因,命名为MnPPAF1 (GenBank登录号为OP7... 为了探索表皮酚氧化酶原激活因子(prophenoloxiase activating factors,PPAFs)在甲壳动物免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,本实验利用PCR和RACE技术从日本沼虾表皮克隆并鉴定了一个新的PPAF基因,命名为MnPPAF1 (GenBank登录号为OP784577),利用生物信息学、实时荧光定量PCR (qPCR)和RNA干扰(RNAi)等方法,研究了该基因序列特征、时空表达模式、嗜水气单胞菌攻毒后表皮MnPPAF1的转录水平、酚氧化酶(phenoloxidase,PO)活性以及日本沼虾死亡率的变化。结果显示,MnPPAF1 cDNA全长1 718 bp,编码460个氨基酸,具有夹子结构域丝氨酸蛋白酶(clip-domain serine proteinases,Clip-SPs)和胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶(trypsin-like serine proteases,Tryp-SPs)结构域。MnPPAF1在腹背部的表皮、血细胞、鳃、胃、心脏、肝胰腺等多种组织均有表达;表皮MnPPAF1的表达与蜕皮周期有关,与蜕皮间期(C期)相比,蜕皮前晚期(D4期) MnPPAF1表达量增加857%。嗜水气单胞菌攻毒后,表皮MnPPAF1表达水平在6 h达到了峰值,较对照组增加227%,而表皮PO活性在12 h达到峰值,同比增加24%。在腹背部第2节注射3μg dsRNA溶液,每12小时注射1次,共注射3次,最后1次注射后12 h,干扰效率最高,表皮MnPPAF1表达同比下降71.79%,至24 h,表皮PO活性降低72.31%。在干扰效率最高的时间点攻毒,在120 h,攻毒+干扰组虾的累计死亡率比攻毒+未干扰组增加26%。结果表明,MnPPAF1是表皮重要的免疫因子,参与调节酚氧化酶原系统的激活,该基因表达下调能显著增加嗜水气单胞菌感染虾的死亡率。本研究为阐明表皮在甲壳动物免疫系统中的作用积累了资料。 展开更多
关键词 日本沼虾 表皮 MnPPAF1 RNAI 嗜水气单胞菌
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日本沼虾(Macrobrachium nipponense)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶初步纯化及部分性质 被引量:13
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作者 黄小红 王寿昆 +1 位作者 黄一帆 陈宏惠 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期804-808,共5页
以日本沼虾内脏为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、DEAE-32离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得比活力为3000Umg^-1、纯化倍数为8.88倍的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂(NAGase).以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡... 以日本沼虾内脏为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、DEAE-32离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得比活力为3000Umg^-1、纯化倍数为8.88倍的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂(NAGase).以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学,结果表明,酶的最适pH为6.0,最适温度为53℃.该酶在pH4.5—9.3区域较稳定,当pH〉9.3很快失活;在50℃以下处理30min,酶活力保持稳定,高于50℃,酶稳定性较差,75℃酶完全失活.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.165mmolL^-1,最大反应速度‰为6.55μmolL^-1min^-1.酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为63.55kJmol^-1. 展开更多
关键词 日本沼虾 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase) 分离纯化 性质
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日本鳗鲡(Anguilla japonica)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的捕食效应 被引量:8
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作者 王志铮 杨磊 +2 位作者 朱卫东 王海强 施建军 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期107-113,共7页
采用捕食者-猎物间捕食效应研究方法,研究了日本鳗鲡对3种体长规格日本沼虾的捕食效应。结果表明:(1)日本鳗鲡与日本沼虾的主要活动时段均为17:00至翌日5:00,期间日本沼虾的活动量随其体长规格的增大而减少,日本鳗鲡的主要捕食时段为0:0... 采用捕食者-猎物间捕食效应研究方法,研究了日本鳗鲡对3种体长规格日本沼虾的捕食效应。结果表明:(1)日本鳗鲡与日本沼虾的主要活动时段均为17:00至翌日5:00,期间日本沼虾的活动量随其体长规格的增大而减少,日本鳗鲡的主要捕食时段为0:00—5:00,其对体长2.4cm左右的日本沼虾有较强的追捕行为;(2)日本鳗鲡对日本沼虾的捕食选择性仅表露于同一实验容器单元内日本沼虾体长规格组成差异较为悬殊的组别中,且对其中体长规格明显偏小的个体具较强的捕食选择性;(3)日本鳗鲡捕食日本沼虾的功能反应属Holling-Ⅱ型,日本沼虾总体被捕食情形与各实验体长规格间无显著差异,其功能反应、种内干扰反应和种间相互干扰反应模型依次为Na=(0.1104×N0/1+0.0048×N0)、E=0.0998×P-0.8582和Na=(0.143×p0.0664×N0/1+0.0048×N0)。 展开更多
关键词 日本鳗鲡 日本沼虾 体长 捕食作用
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日本沼虾(Macrobrachium nipponense)孵化前后复眼发育的超微结构研究 被引量:3
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作者 张晓辉 卢建平 +2 位作者 杜建明 张海琪 黄家庆 《浙江农业学报》 CSCD 2007年第2期84-88,共5页
利用电镜技术研究日本沼虾孵化前后复眼发育的超微结构,结果显示:(1)复眼内小眼折光系统包括角膜、角膜细胞及晶锥,晶锥周围有虹膜色素细胞分布。从产卵后第16 d到第Ⅰ期状幼体,小眼角膜厚度和晶锥直径逐渐增大,角膜细胞内细胞器数量逐... 利用电镜技术研究日本沼虾孵化前后复眼发育的超微结构,结果显示:(1)复眼内小眼折光系统包括角膜、角膜细胞及晶锥,晶锥周围有虹膜色素细胞分布。从产卵后第16 d到第Ⅰ期状幼体,小眼角膜厚度和晶锥直径逐渐增大,角膜细胞内细胞器数量逐渐增多;晶锥内电子致密颗粒区域由6块融合为4块,晶锥末端附近出现第8个小网膜细胞。(2)小眼感光系统由8个小网膜细胞组成,小网膜细胞伸出微绒毛组成“十足目型”感杆束,感杆束周围围绕一层较薄细胞质,胞质内外可见胞饮小泡及膜下储泡囊。随着胚胎发育,感杆束直径逐渐增大,小网膜细胞内线粒体、内质网等细胞器数量逐渐增多,并出现多囊体、板膜体、色素颗粒等结构。(3)胚胎发育过程中,小网膜细胞分化过程如下:产卵后第16 d,感杆束周围7个小网膜细胞间空隙较大,中间被第8个小网膜细胞4个分叶隔开,细胞内出现远端色素颗粒;第Ⅰ期状幼体,第8个小网膜细胞位置上升,其它7个小网膜细胞相互间排列紧密,细胞内出现大量近端色素颗粒。 展开更多
关键词 日本沼虾 复眼 发育 超微结构
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日本沼虾(Macrobrachium nipponense)成体组织三种同工酶的研究 被引量:10
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作者 潘伟槐 祝尧荣 +1 位作者 黄文光 孙银燕 《绍兴文理学院学报(自然科学版)》 2001年第4期43-46,共4页
采用不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法,分析了日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的眼睛、腹肌、心脏、肝脏、性腺5种新鲜组织中的乳酸脱氢酶(LDH)、α-酯酶(α-EST)及超氧化物歧化酶(SOD).结果显示,不同组织酶谱是不相同的,具... 采用不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法,分析了日本沼虾(Macrobrachium nipponense)的眼睛、腹肌、心脏、肝脏、性腺5种新鲜组织中的乳酸脱氢酶(LDH)、α-酯酶(α-EST)及超氧化物歧化酶(SOD).结果显示,不同组织酶谱是不相同的,具有明显的组织特异性及一定的性别差异,同时在繁殖期和非繁殖期,LDH表现出明显的差异.同时探讨了有关酶与机能的关系. 展开更多
关键词 日本沼虾 成体组织 同工酶 电泳法 乳酸脱氢酶 α-酯酶 超氧化物歧化酶
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放养模式对日本沼虾生长性状与肌肉营养成分的影响
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作者 唐金玉 覃宝利 +1 位作者 叶建勇 戴杨鑫 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期254-263,共10页
对3种放养处理[T1,与中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和少量鱼类共养;T2,与沙塘鳢(Odontobutis obscura)共养;T3,与鳙(Aristichthys nobilis)共养]条件下日本沼虾(Macrobrachium nipponense)虾体的生长性状和肌肉营养成分进行分析与比较... 对3种放养处理[T1,与中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和少量鱼类共养;T2,与沙塘鳢(Odontobutis obscura)共养;T3,与鳙(Aristichthys nobilis)共养]条件下日本沼虾(Macrobrachium nipponense)虾体的生长性状和肌肉营养成分进行分析与比较,以期为淡水经济虾类养殖模式的优化提供参考。结果发现:日本沼虾的全长、头胸甲长、体长和体重在不同放养模式下差异显著(P<0.05),肌肉中的粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和水分含量分别为16.54%~17.97%、1.86%~2.25%、0.95%~1.12%和78.69%~80.56%,粗灰分含量在各处理间差异显著。共检出氨基酸17种,其中,必需氨基酸7种,必需氨基酸指数为70.88~73.13,不同处理间丙氨酸含量差异显著;共检出脂肪酸16种,不同处理间脂肪酸种类组成和C18:2 n-6、多不饱和脂肪酸的含量差异显著;检测的9种矿物质元素(Na、K、Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Mn、Cr)中,Na、Mn、Fe、Zn含量在不同处理间差异显著。研究表明,放养模式对日本沼虾的生长性状和肌肉营养具有显著影响,可能与不同放养结构和管理措施造成的养殖环境和食物资源差异有关,生产中需根据放养模式调节营养成分的添加。相较之下,日本沼虾与中华绒螯蟹和少量鱼类共养时,虾肉的鲜美程度、营养价值和保健价值相对更高,可选择该模式来改善养殖虾的营养品质。 展开更多
关键词 日本沼虾 放养模式 生长性状 肌肉营养组成 营养价值
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超高效液相色谱-串联质谱法定量检测日本沼虾不同组织中氨基脲含量
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作者 徐磊 孙博怿 +3 位作者 王俊 吴琦芳 高晟 周冬仁 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第2期83-92,共10页
目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定日本沼虾(Macrobrachium nipponense)不同组织部位中不同形态氨基脲(semicarbazide,SEM)的检测方法。方法样品用... 目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定日本沼虾(Macrobrachium nipponense)不同组织部位中不同形态氨基脲(semicarbazide,SEM)的检测方法。方法样品用66.7%甲醇溶液洗脱后,经盐酸酸化水解,2-硝基苯甲醛过夜衍生,调pH至7.3~7.4后,用乙酸乙酯提取,分析物采用UPLC-MS/MS定性检测,稳定同位素内标法进行定量测定。结果SEM在0.25~20.00μg/kg范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,肌肉、头壳、背壳、头足胸、眼柄和鳃6个组织的方法检出限为0.25μg/kg(S/N≥3),定量限为0.50μg/kg(S/N≥10),肝胰腺的方法检出限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg,相对标准偏差不大于5.20%。虾壳中SEM含量最高,肌肉中含量最低,肌肉中SEM主要以游离态形式存在,虾壳中SEM主要以结合态形式存在。结论本方法灵敏度高、重现性好,可用于日本沼虾不同组织中不同形态SEM的定量测定。日本沼虾不同组织中SEM的存在形态与含量均存在巨大差异。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱法 日本沼虾 氨基脲
原文传递
日本沼虾(Macrobrachium nipponense)组蛋白酶B基因克隆及其在组织和卵巢发育过程中的表达 被引量:2
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作者 赵卫红 陈立侨 +2 位作者 王资生 张凤英 齐志涛 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期862-869,共8页
组蛋白酶B广泛存在于生物体内,与免疫、消化和繁殖等生理功能息息相关。为了研究组蛋白酶B在甲壳动物体内的作用尤其在卵巢发育过程中的作用,本研究采用3’RACE和5’RACE技术,首次克隆获得日本沼虾(Macrobrachium nipponense)组蛋白酶B... 组蛋白酶B广泛存在于生物体内,与免疫、消化和繁殖等生理功能息息相关。为了研究组蛋白酶B在甲壳动物体内的作用尤其在卵巢发育过程中的作用,本研究采用3’RACE和5’RACE技术,首次克隆获得日本沼虾(Macrobrachium nipponense)组蛋白酶B(简称Mn CB)基因c DNA全长,并采用实时荧光定量(q PCR)测定了Mn CB在日本沼虾不同组织中和卵巢发育过程中m RNA的表达量。序列结果分析表明:Mn CB序列含有12 bp的5’-UTR,996 bp的ORF和702 bp的3’-UTR。ORF共编码331个氨基酸的多肽,此多肽由16个氨基酸的信号肽、63个氨基酸的前导肽和252个氨基酸的成熟肽组成,其理论p I为6.36,分子量为36.5KDa。q PCR的结果表明:Mn CB在测定的所有组织中均有表达,在心脏中表达量最高,肌肉、肝胰腺和胸神经节中表达量中等,肠、鳃和血细胞中的表达量较低。Mn CB的表达量在卵巢的发育过程中逐步升高,卵巢发育至初级卵黄发生期(Ⅲ期)Mn CB的表达量显著增加(P<0.05),次级卵黄发生期(Ⅳ期)表达量继续增加,并增至最大值,Ⅳ期与Ⅲ期表达量差异不显著(P>0.05),成熟期(V期)表达量显著下降(P<0.05)。上述研究结果表明Mn CB广泛存在于日本沼虾的组织中,并且参与卵黄蛋白原或卵黄蛋白的水解。 展开更多
关键词 日本沼虾 组蛋白酶B RACE 基因表达
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青虾(Macrobrachium nipponense)对四种药物敏感性的研究 被引量:2
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作者 施培松 黄峰 杨受保 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期446-449,共4页
用4种药物对青虾做了敏感性试验,结果表明,青虾对4种药物的敏感性为:P(敌百虫)>P(富氯)>P(孔雀石绿)>P(高锰酸钾),各种药物对青虾的安全浓度依次分别为0.022mg/L、0.672mg/L、2.416mg/L、2.900mg/L。
关键词 青虾 敏感性 安全浓度
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日本沼虾(Macrobrachium nipponense)胚胎及幼体复眼发育的研究Ⅰ.外形和组织结构研究 被引量:1
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作者 张晓辉 卢建平 +3 位作者 黄家庆 杜建明 郑天伦 郑重莺 《浙江农业学报》 CSCD 2006年第2期77-81,共5页
用光镜研究了日本沼虾胚胎及幼体复眼外形和组织结构发育过程。外形发育研究结果表明:受精卵发育到第8d,胚胎中出现点状复眼色素;9—11d。点状色素逐渐连成线状,厚度逐渐增加;12—13d,色素区明显。经戊二醛固定复眼区为枯红色;第... 用光镜研究了日本沼虾胚胎及幼体复眼外形和组织结构发育过程。外形发育研究结果表明:受精卵发育到第8d,胚胎中出现点状复眼色素;9—11d。点状色素逐渐连成线状,厚度逐渐增加;12—13d,色素区明显。经戊二醛固定复眼区为枯红色;第14d,小眼开始出现,随着胚胎发育,色素区越来越明显,小眼数量也越来越多,至第1期溞状幼体,复眼内小眼发育已较完善。组织结构研究结果表明:受精卵发育第8d,胚胎内复眼原基区可见两层细胞,表层为眼基细胞,内部为神经细胞;9—10d,眼基细胞开始纵向分裂,形成放射状细胞簇;第16d,复眼内小眼结构已十分复杂,小眼由角膜、角膜细胞、晶锥、晶锥细胞、虹膜色素细胞、小网膜细胞等组成。 展开更多
关键词 日本沼虾 复眼 外形 组织结构
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