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题名视网膜发育基因Six3表达载体的构建
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作者
孙雪荣
葛坚
章晓霜
邓飞
胡惠玲
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机构
中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室
湛江师范学院体育科学学院
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出处
《海南医学院学报》
CAS
2011年第3期289-291,共3页
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基金
国家自然科学基金(30973266
30672275)
+1 种基金
眼科学国家重点实验室青年基金(QN-01)
湛江师范学院博士专项基金(ZL1014)~~
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文摘
目的:Six3在视网膜发育中起着关键性的调节作用,然而商品化的Six3表达载体尚鲜见,本研究拟以pBaBb-puro为骨架,构建Six3真核表达载体。方法:以新生乳鼠眼cDNA为模板,通过PCR扩增出Six3编码序列,经酶切后,用T4 DNA连接酶将其与pBaBb-puro进行连接,经过转化、筛选后,进行酶切和测序鉴定。结果:经RT-PCR扩增获得了含1002bp的Six3基因编码序列,经过酶切、连接、转化后,挑选12个菌落进行PCR检测,筛查到9个菌落含有重组质粒,对其中2个菌落进一步行酶切和测序鉴定,结果与理论预期完全相符。结论:成功构建了pBaBb-puro-Six3真核表达载体,为进一步研究Six3的功能奠定了基础。
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关键词
Six3
视网膜
pbabb-puro
表达载体
鼠
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Keywords
Six3
Retina
pbabb-puro
Expression vector
Rat
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分类号
R774.1
[医药卫生—眼科]
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