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水稻OsNCED3基因的RNAi载体构建
被引量:
2
1
作者
冯光秀
陈惠
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2012年第1期47-50,58,共5页
水稻OsNCED3基因是水稻抗逆过程中重要的基因之一。以水稻中花10号幼苗为材料,提取基因组DNA。设计引物扩增区段cDNA并引入相应的酶切位点,以基因组DNA作为模板,进行RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段的PCR扩增。将PCR产物连接到pMD19-T...
水稻OsNCED3基因是水稻抗逆过程中重要的基因之一。以水稻中花10号幼苗为材料,提取基因组DNA。设计引物扩增区段cDNA并引入相应的酶切位点,以基因组DNA作为模板,进行RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段的PCR扩增。将PCR产物连接到pMD19-T载体上,经酶切和PCR检测后进行测序。测序结果表明:RNAi-Os-NCED3顺式和反式目的片段均已正确的连接到pMD19-T载体上。然后将RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段通过酶切和连接,连接到含有发夹结构的质粒pFGC5941上。PCR及双酶切结果显示,构建的pFGC5941-OsNCED3即RNAi-OsNCED3载体结构完整。
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关键词
水稻
RNAI
OsNCED3
pfgc5941
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职称材料
甘蓝型油菜3个AP3重复基因植物反义表达载体的构建及遗传转化
2
作者
邓喜
李晓晨
+2 位作者
马欣荣
毛德华
赵云
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期393-397,共5页
利用pFGC5941构建了甘蓝型油菜3个AP3重复基因的植物反义表达载体pFGC5941-BnAP3-2、pFGC5941-BnAP3-3和pFGC5941-BnAP3-4.采用快速冻融法,将载体导入农杆菌EHA105,转化甘蓝型油菜下胚轴.在5mg/L PPT的MS培养基中筛选,获得反义BnAP3-2...
利用pFGC5941构建了甘蓝型油菜3个AP3重复基因的植物反义表达载体pFGC5941-BnAP3-2、pFGC5941-BnAP3-3和pFGC5941-BnAP3-4.采用快速冻融法,将载体导入农杆菌EHA105,转化甘蓝型油菜下胚轴.在5mg/L PPT的MS培养基中筛选,获得反义BnAP3-2基因的抗性再生植株31株,反义BnAP3-3基因的抗性再生植株20株,反义BnAP3-4基因的抗性再生植株42株.PCR鉴定结果显示,获得BnAP3-2反义的转基因植株12株,BnAP3-3反义的转基因植株7株,BnAP3-4反义的转基因植株16株.半定量PCR分析结果显示,三个外源AP3基因的反义链已在油菜叶片中表达.
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关键词
BnAP3
pfgc5941
载体构建
遗传转化
反义技术
原文传递
题名
水稻OsNCED3基因的RNAi载体构建
被引量:
2
1
作者
冯光秀
陈惠
机构
山西师范大学
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2012年第1期47-50,58,共5页
基金
国家自然科学基金(No.30170236)
重点实验室资助:中国农业大学生命科学研究中心植物生理与生物化学国家重点实验室
文摘
水稻OsNCED3基因是水稻抗逆过程中重要的基因之一。以水稻中花10号幼苗为材料,提取基因组DNA。设计引物扩增区段cDNA并引入相应的酶切位点,以基因组DNA作为模板,进行RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段的PCR扩增。将PCR产物连接到pMD19-T载体上,经酶切和PCR检测后进行测序。测序结果表明:RNAi-Os-NCED3顺式和反式目的片段均已正确的连接到pMD19-T载体上。然后将RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段通过酶切和连接,连接到含有发夹结构的质粒pFGC5941上。PCR及双酶切结果显示,构建的pFGC5941-OsNCED3即RNAi-OsNCED3载体结构完整。
关键词
水稻
RNAI
OsNCED3
pfgc5941
Keywords
Oryza sativa
RNAi
OsNCED3
pfgc5941
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
甘蓝型油菜3个AP3重复基因植物反义表达载体的构建及遗传转化
2
作者
邓喜
李晓晨
马欣荣
毛德华
赵云
机构
四川大学生命科学学院
中国科学院成都生物研究所
四川省种子管理站
出处
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第2期393-397,共5页
基金
国家自然基金科学(30571174
30871540)
文摘
利用pFGC5941构建了甘蓝型油菜3个AP3重复基因的植物反义表达载体pFGC5941-BnAP3-2、pFGC5941-BnAP3-3和pFGC5941-BnAP3-4.采用快速冻融法,将载体导入农杆菌EHA105,转化甘蓝型油菜下胚轴.在5mg/L PPT的MS培养基中筛选,获得反义BnAP3-2基因的抗性再生植株31株,反义BnAP3-3基因的抗性再生植株20株,反义BnAP3-4基因的抗性再生植株42株.PCR鉴定结果显示,获得BnAP3-2反义的转基因植株12株,BnAP3-3反义的转基因植株7株,BnAP3-4反义的转基因植株16株.半定量PCR分析结果显示,三个外源AP3基因的反义链已在油菜叶片中表达.
关键词
BnAP3
pfgc5941
载体构建
遗传转化
反义技术
Keywords
BnAP3,
pfgc5941
, construction, transfer, antisense technology
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水稻OsNCED3基因的RNAi载体构建
冯光秀
陈惠
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2012
2
下载PDF
职称材料
2
甘蓝型油菜3个AP3重复基因植物反义表达载体的构建及遗传转化
邓喜
李晓晨
马欣荣
毛德华
赵云
《四川大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
原文传递
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