Brazzein基因的合成及pGAPZαA-Bra表达载体的构建

1

作者 王长远 张丽萍 +1 位作者 刘松财 汤丹 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第15期6230-6232,共3页

[目的]为Brazzein基因在酵母SMD1168中转化和表达奠定基础。[方法]利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)合成Brazzein基因,将其连接到pMD18-T载体上,构建克隆载体pMD18-T-Bra。分别用XhoI和XbaI限制内切酶对克隆质粒pMD18-T-Bra和酵母表达载体pGAPZ... [目的]为Brazzein基因在酵母SMD1168中转化和表达奠定基础。[方法]利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)合成Brazzein基因,将其连接到pMD18-T载体上,构建克隆载体pMD18-T-Bra。分别用XhoI和XbaI限制内切酶对克隆质粒pMD18-T-Bra和酵母表达载体pGAPZαA进行酶切,并在T4DNA连接酶作用下,将回收的目的基因连接到pGAPZαA载体上,构建重组质粒pGAPZαA-Bra。[结果]通过PCR扩增获得了约188 bp的Brazzein类似物的编码序列,将其克隆到pMD18-T质粒,用XhoI和XbaI双酶切后,连接到pGAPZαA载体,成功构建了重组表达载体pGAPZαA-Bra。Brazzein基因其中各碱基未发生突变,整个表达载体阅读框正确无误。[结论]利用基因工程的方法生产Brazzein是可行的。 展开更多

关键词 BRAZZEIN 克隆 pgapzαa-bra表达载体

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结合利用pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的多拷贝载体并在毕赤酵母中表达 被引量：2

2

作者 冯菲 王雪妍 +3 位作者 陈晓飞 宁萌 周伏忠 刁文涛 《河南科学》 2017年第1期83-87,共5页

结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的可线性化多拷贝表达载体,并转化毕赤酵母表达目的蛋白.首先将目的蛋白基因构建到组成型表达载体pGAPZαA中,然后依据载体自身特性,用同尾酶BglⅡ和Bam HⅠ切取其表达盒并连接到甲醇诱导型... 结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA构建目的蛋白的可线性化多拷贝表达载体,并转化毕赤酵母表达目的蛋白.首先将目的蛋白基因构建到组成型表达载体pGAPZαA中,然后依据载体自身特性,用同尾酶BglⅡ和Bam HⅠ切取其表达盒并连接到甲醇诱导型载体pPICZαA中的Bam HⅠ位点处,经多次重复后获得目的蛋白多拷贝表达载体,线性化后电转化毕赤酵母表达目的蛋白.灵芝免疫调节蛋白LZ8是一个已成功在毕赤酵母中表达的蛋白,作为检验该方法的样本其基因被首先构建到载体pGAPZαA中得到质粒pGAPZαA-LZ8,切取其表达盒构建到载体pPICZαA中,经过4次重复得到了多拷贝表达载体pPICZαA-[GAPZαA-LZ8]4,然后利用pPICZαA特有的限制性内切酶位点SacⅠ进行线性化,最终电转化到毕赤酵母GS115中进行组成型表达蛋白LZ8,其表达量达到pGAPZαA-LZ8转化菌株表达量的2~3倍.经检验,结合利用载体pGAPZαA和pPICZαA可以构建目的蛋白的多拷贝表达载体,并且可以对载体进行线性化而不影响转化酵母时的转化效率. 展开更多

关键词 pgapzαA pPICZαA 多拷贝 毕赤酵母

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新城疫病毒JZ05株F基因重组pGAPZα的构建 被引量：1

3

作者 程太平 刘超 荣俊 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第11期2639-2642,共4页

以RT-PCR扩增新城疫病毒JZ05株F基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶KpnⅠ和XbaⅠ对目的基因片段及质粒pGAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化Eacterium coli DH5α。以PCR方法确定JZ05 F1的阳性重组子为2个,JZ05 F2的阳性重组子为4个。对阳... 以RT-PCR扩增新城疫病毒JZ05株F基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶KpnⅠ和XbaⅠ对目的基因片段及质粒pGAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化Eacterium coli DH5α。以PCR方法确定JZ05 F1的阳性重组子为2个,JZ05 F2的阳性重组子为4个。对阳性重组子进行酶切鉴定及序列分析,结果发现,重组质粒pGAPZαA-F1、pGAPZαA-F2及质粒pGAPZαA的酶切电泳条带与试验设计大小相符;基因测序得到的重组子中F1和F2序列长度分别为1 198 bp、269 bp,与新城疫病毒JZ05株F基因序列比对,其序列长度和核苷酸排列完全一致。这表明重组质粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正确的,为以酵母表达系统表达F1和F2、研究强毒株与弱毒株F蛋白的抗原性差异程度及研制重组亚单位疫苗打下了基础。 展开更多

关键词 新城疫病毒 F基因 质粒pgapzαA 重组

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新城疫病毒La Sota株F基因重组pGAPZα的构建 被引量：1

4

作者 刘超 程太平 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第2期45-47,共3页

根据新城疫病毒(NDV)La Sota株F基因序列和毕赤酵母表达载体pGAPZαA多克隆位点序列,设计并合成3对引物,以RT-PCR技术获得NDV La Sota株融合蛋白(F)基因的F1片段和F2片段。将目的基因和质粒pGAPZαA均以KpnⅠ和XbaⅠ进行酶切,以DNA连接... 根据新城疫病毒(NDV)La Sota株F基因序列和毕赤酵母表达载体pGAPZαA多克隆位点序列,设计并合成3对引物,以RT-PCR技术获得NDV La Sota株融合蛋白(F)基因的F1片段和F2片段。将目的基因和质粒pGAPZαA均以KpnⅠ和XbaⅠ进行酶切,以DNA连接酶进行连接并转化Escherichia coliDH5α,转化子经PCR鉴定和酶切鉴定,结果表明构建的重组质粒中含有目的基因片段。将目的基因片段的测序结果与NDV La Sota株F基因序列比对,长度和核苷酸序列一致。 展开更多

关键词 新城疫病毒 F基因 质粒pgapzαA 重组

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新城疫病毒Mukteswar株F基因重组pGAPZα-F的构建

5

作者 程太平 荣俊 刘超 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1079-1082,共4页

以RT-PCR扩增新城疫病毒Mukteswar株F基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶KpnⅠ和XbaⅠ对目的基因片段及质粒pGAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化E.coliDH5α。以PCR方法确定Mukteswar F1和Mukteswar F2的阳性重组子均为4个。对阳性重组子... 以RT-PCR扩增新城疫病毒Mukteswar株F基因F1片段和F2片段,以核酸内切酶KpnⅠ和XbaⅠ对目的基因片段及质粒pGAPZαA进行酶切,连接酶切产物,转化E.coliDH5α。以PCR方法确定Mukteswar F1和Mukteswar F2的阳性重组子均为4个。对阳性重组子进行酶切鉴定及序列分析,结果,重组质粒pGAPZαA-F1、pGAPZαA-F2及质粒pGAPZαA的酶切电泳条带与试验设计大小相符;基因测序得到的重组子中F1和F2序列长度分别为1 198 bp、269 bp,与新城疫病毒Mukteswar株F基因序列比对,其序列长度和核苷酸排列完全一致。结果表明重组质粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正确的,为以酵母表达系统表达F1和F2,研究Mukteswar株与基因Ⅶ型毒株之间F蛋白的抗原性差异程度打下基础。 展开更多

关键词 新城疫病毒Mukteswar株 F基因 质粒pgapzαA 重组

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猪瘟病毒C株E2基因克隆及重组pGAPZα的构建

6

作者 程太平 刘超 荣俊 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第1期52-54,共3页

从猪瘟弱毒活疫苗中提取猪瘟病毒(CSFV)RNA,采用RT-PCR技术,得到E2基因的cDNA,连接到pMD-18T载体上进行测序。将E2基因的cDNA及质粒pGAPZαA分别以内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ进行顺序酶切,连接酶切产物并转化Escherichia coliDH5α。经过抗生... 从猪瘟弱毒活疫苗中提取猪瘟病毒(CSFV)RNA,采用RT-PCR技术,得到E2基因的cDNA,连接到pMD-18T载体上进行测序。将E2基因的cDNA及质粒pGAPZαA分别以内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ进行顺序酶切,连接酶切产物并转化Escherichia coliDH5α。经过抗生素Zeocin筛选、PCR鉴定和重组质粒的酶切分析,将E2基因的测定序列与GenBank中的CSFV C株E2基因序列(序列号Z46258)比对,核苷酸同源性为99.46%;获得6个阳性重组子的克隆株。结果表明,重组质粒pGAPZα-E2中目的基因E2的核苷酸序列和大小、插入方向和位置是正确的。 展开更多

关键词 CSFV E2基因 基因克隆 重组pgapzα

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耐热性α-半乳糖苷酶突变体的筛选及酶学性质研究

7

作者 马焕 张秀江 +5 位作者 胡虹 冯菲 解复红 向凌云 武艳芳 刁文涛 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第9期80-84,共5页

研究旨在改造株链球菌来源的α-半乳糖苷酶基因Gal_(2)7A,获得耐热性高的突变体。在常规PCR体系中加入不同水平的MnCl_(2),将基因克隆至载体pGAPZαA并成功构建表达酶产物的重组质粒pGAPZαA-Gal_(2)7A。将线性化的重组质粒电转至毕赤酵... 研究旨在改造株链球菌来源的α-半乳糖苷酶基因Gal_(2)7A,获得耐热性高的突变体。在常规PCR体系中加入不同水平的MnCl_(2),将基因克隆至载体pGAPZαA并成功构建表达酶产物的重组质粒pGAPZαA-Gal_(2)7A。将线性化的重组质粒电转至毕赤酵母GS115,在含有100 g/L博来霉素的YPDS平板上筛选耐热性提高的突变体,通过pNPG的方法测定重组酶的酶学性质为最适温度65℃,最适pH值6.5,Ag^(2+)、Hg^(2+)对重组酶的酶学活性具有明显的抑制作用,Cu^(2+)对重组酶的酶活性具有促进作用。研究表明,试验成功构建耐热α-半乳糖苷酶高效表达菌株29和54,在55℃保温10 min与同等条件下的野生型进行对比,加热前后的保留酶活比的增幅大于45%。 展开更多

关键词 Α-半乳糖苷酶 耐温性 重组质粒pgapzαA-Gal27A 保留酶活比 酶学性质

原文传递

甜味蛋白Brazzein基因酵母表达系统的建立 被引量：5

8

作者 史勇 张明军 +3 位作者 张英 李莉 汤丹 刘松财 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期43-46,共4页

根据甜味蛋白Brazzein基因成熟区的氨基酸序列,结合毕赤酵母的密码子偏爱性以及Brazzein蛋白质结构的相关研究,对甜味蛋白Brazzein基因进行改造,使表达的目的蛋白中包含3个突变氨基酸(29Asp→Lys,31His→Ala,41Glu→Lys)。采用重叠PCR(S... 根据甜味蛋白Brazzein基因成熟区的氨基酸序列,结合毕赤酵母的密码子偏爱性以及Brazzein蛋白质结构的相关研究,对甜味蛋白Brazzein基因进行改造,使表达的目的蛋白中包含3个突变氨基酸(29Asp→Lys,31His→Ala,41Glu→Lys)。采用重叠PCR(SOE-PCR)合成目的基因并克隆到pMD18-T载体,经测序鉴定,序列正确的质粒用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切。将回收得到的目的基因连接到经同样双酶切处理的pGAPZαA载体上,经PCR、酶切和测序鉴定,证明已成功构建pGAPZαA-Bra真核表达载体。将构建好的重组载体pGAPZαA-Bra用AvrⅡ线性化,电转进入巴斯德毕赤酵母中。筛选ZeocinTM阳性克隆菌,进行蛋白表达,SDS-PAGE结果表明蛋白表达成功。 展开更多

关键词 甜味蛋白 BRAZZEIN基因 pgapzαa-bra 巴斯德毕赤酵母

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HPV16(新疆株)E6在Pichia pastoris酵母中的分泌表达 被引量：3

9

作者 刘忠渊 张富春 +2 位作者 赵干 蔡伦 张爱莲 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第1期4-6,共3页

目的 :利用酵母Pichiapastoris真核蛋白表在系统 ,表达HPV16 (新疆株 )E6 (HPV16XJE6 )蛋白。方法 :根据HPV16XJE6基因序列设计引物 ,并分别在 5′引物和 3′引物中引入了EcoRI和XbaI酶切位点 ,经PCR扩增后与pMD18-T载体相连 ,再将HPV16... 目的 :利用酵母Pichiapastoris真核蛋白表在系统 ,表达HPV16 (新疆株 )E6 (HPV16XJE6 )蛋白。方法 :根据HPV16XJE6基因序列设计引物 ,并分别在 5′引物和 3′引物中引入了EcoRI和XbaI酶切位点 ,经PCR扩增后与pMD18-T载体相连 ,再将HPV16XJE6从T载体上切下并克隆至穿梭质粒pGAPZαA上 ,获得的重组穿梭质粒pGAPZαA -E6经线性化后 ,采用LiCl法将重组穿梭质粒转入酵母细胞内 ,Zeocin+筛选鉴定 ,经小瓶发酵后 ,取上清作SDSPAGE检测。结果 :HPV16XJE6成功地在酵母真核表达系统获得表达 ,表达产物的分子量为 2 0kD ,为深入研究HPV16XJE6蛋白功能奠定了理论基础。 展开更多

关键词 HPV16 E6 新疆株 穿梭质粒 pgapzαA 酵母菌SMD1168 分泌表达

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蝉抗菌肽基因密码子优化及其毕赤酵母表达载体构建 被引量：1

10

作者 刘德辉 黄毓茂 +1 位作者 徐蕙 焦颖 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第10期44-46,共3页

根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过SOEing法合成改造后的抗菌肽Cryptonin基因片段。基因克隆到pGAPZα-A质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pGAPZ-αA-Cryptonin。经酶切分析、PCR和测序鉴定证明载体构建成功。表达载... 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过SOEing法合成改造后的抗菌肽Cryptonin基因片段。基因克隆到pGAPZα-A质粒中,获得分泌型重组酵母表达载体pGAPZ-αA-Cryptonin。经酶切分析、PCR和测序鉴定证明载体构建成功。表达载体的正确构建为Cryptonin的高效表达和生物学活性研究奠定基础。 展开更多

关键词 Cryptonin 密码子优化 pgapzα-A载体 载体构建

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碱性果胶酶基因在毕赤酵母中的非诱导表达

11

作者 张爱平 蔡少丽 +3 位作者 杨鹤 郑海英 柯崇榕 黄建忠 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期33-36,共4页

为了使碱性果胶酶基因能在毕赤酵母中获得非诱导表达,利用聚合酶链式反应(PCR)技术,以实验室保藏菌株毕赤酵母EIM-60基因组为模板,设计引物扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的基因PGL,大小约为1 206 bp。酶切后连接到毕赤酵母组成型表达载体p... 为了使碱性果胶酶基因能在毕赤酵母中获得非诱导表达,利用聚合酶链式反应(PCR)技术,以实验室保藏菌株毕赤酵母EIM-60基因组为模板,设计引物扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的基因PGL,大小约为1 206 bp。酶切后连接到毕赤酵母组成型表达载体pGAPZαA的多克隆位点上,成功构建了重组载体pGAPZαA-PGL,将其电转化入毕赤酵母GS115进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达,分子量为44.3 ku。通过考马斯亮蓝法蛋白浓度试剂盒测定其蛋白含量为0.430 g/L,通过BandScan软件分析目的蛋白占总蛋白的41.4%,即0.178 g/L。 展开更多

关键词 碱性果胶酶 pgapzαA 毕赤酵母 异源表达

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鸡源志贺菌IpaC基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

12

作者 韩志霞 马金玉 +4 位作者 王雪云 蒋大伟 刘芳 许兰菊 李克宇 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第8期39-42,共4页

为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,分别构建真核表达载体pGAPZαA-IpaC和pGAPZαA-IpaC#,然后将线性化重组... 为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,分别构建真核表达载体pGAPZαA-IpaC和pGAPZαA-IpaC#,然后将线性化重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子用SDS-PAGE及Westernblot检测其表达产物。结果表明,经SDS-PAGE及Westernblot检测,仅在pGAPZαA-IpaC#/X-33重组菌表达产物菌体沉淀中检测到大小为70ku的目的蛋白,实现了鸡源志贺菌IpaC#基因在毕赤酵母中的胞内表达,从而验证毕赤酵母表达系统与外源基因序列的相关性,为进一步提高鸡源志贺菌IpaC基因在毕赤酵母中的高效表达提供科学依据,对研究该病的发病机制具有重要意义。 展开更多

关键词 鸡源志贺菌 IpaC基因 毕赤酵母 优化密码子 pgapzαA 真核表达

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甜味蛋白Brazzein基因合成及其在酵母中表达的初步研究

13

作者 张丽萍 王长远 刘松财 《农产品加工（下）》 2008年第10期4-7,共4页

采用pGAPZαA为表达载体,SMD1168毕赤酵母为受体系统,构建分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌。按照毕赤酵母偏爱密码子设计Brazzein基因,共设计4对引物,采用SOE-PCR法合成Brazzein基因,构建克隆载体pUC57-Bra与酵母表达载体pGAPZαA-Bra... 采用pGAPZαA为表达载体,SMD1168毕赤酵母为受体系统,构建分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌。按照毕赤酵母偏爱密码子设计Brazzein基因,共设计4对引物,采用SOE-PCR法合成Brazzein基因,构建克隆载体pUC57-Bra与酵母表达载体pGAPZαA-Bra。将重组质粒线性化,电转导入Pichia.pastoris SMD1168中,用高浓度的Zeocin筛选高拷贝转化子。将重组菌株接种于YPD培养基诱导表达,进行SDS-PAGE分析。成功构建了分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌,SDS-PAGE表明,目标蛋白的相对分子量与理论值一致,诱导72h后的目的蛋白表达量达0.12g/L。 展开更多

关键词 BRAZZEIN基因 pGAP ZαA表达载体 毕赤酵母

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深黄被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因在毕赤氏酵母SMD1168中表达的研究

14

作者 王长远 全越 +2 位作者 沈冰蕾 姚笛 于长青 《农产品加工（下）》 2016年第7期1-3,8,共4页

引物根据△6-脂肪酸脱氢酶（D6D）基因以及酵母蛋白表达载体pGAPZctA的多克隆位点进行引物设计，并在上游插入ECoRI位点、下游插入XhoI位点，从深黄被孢霉中克隆D6D基因，构建pMD18-T-D6D载体与pGAPZtxA—D6D载体。将重组质粒线性化，... 引物根据△6-脂肪酸脱氢酶（D6D）基因以及酵母蛋白表达载体pGAPZctA的多克隆位点进行引物设计，并在上游插入ECoRI位点、下游插入XhoI位点，从深黄被孢霉中克隆D6D基因，构建pMD18-T-D6D载体与pGAPZtxA—D6D载体。将重组质粒线性化，并将其电转导入到毕赤氏酵母（PichiapastorisSMD1168）中，Zeocin抗生素筛选高拷贝转化子，对重组菌进行诱导表达。经过Tricine—SDS—PAGE分析和蛋白质免疫印迹（Westernbloting）试验，证明△6-脂肪酸脱氢酶融合蛋白具有免疫学活性。结果成功构建了重组酵母pGAPZdA—SMD1168，为利用基因工程菌生产y-亚麻酸（GLA）奠定理论基础。 展开更多

关键词 深黄被孢霉 △6-脂肪酸脱氢酶 毕赤氏酵母SMD1168 pgapzctA表达载体

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甜味蛋白Brazzein在毕赤氏酵母中表达的初步研究 被引量：6

15

作者 王长远 张丽萍 +1 位作者 刘松财 汤丹 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期43-48,共6页

目的:采用pGAPZαA为表达载体,SMD1168毕赤酵母为受体系统,构建分泌型的甜味蛋白Brazzein毕赤酵母重组菌。方法:按照毕赤酵母偏爱密码子设计Brazzein基因,共设计4对引物。在上、下游引物分别引入XbaI与XhoI酶切识别位点,采用SOE-PCR法合... 目的:采用pGAPZαA为表达载体,SMD1168毕赤酵母为受体系统,构建分泌型的甜味蛋白Brazzein毕赤酵母重组菌。方法:按照毕赤酵母偏爱密码子设计Brazzein基因,共设计4对引物。在上、下游引物分别引入XbaI与XhoI酶切识别位点,采用SOE-PCR法合成Brazzein基因,构建克隆载体pUC57-Bra与酵母表达载体pGAPZαA-Bra。将重组质粒线性化,电转导入毕赤酵母(Pichia. pastoris SMD1168)中,用高浓度的抗生素Zeocin筛选高拷贝转化子。将重组菌株接种于YPD培养基诱导表达,进行SDS-PAGE分析。结果:成功构建了分泌型的Brazzein毕赤酵母重组菌。SDS-PAGE表明,目标蛋白的相对分子质量与理论值一致,在诱导72h后目的蛋白表达量达0.12g/L。对纯化后的蛋白进行生物活性测定,经鉴定具有一定的甜味,表达的Brazzein蛋白生物学活性良好。 展开更多

关键词 BRAZZEIN基因 pgapzαA表达载体 毕赤酵母

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米曲霉乳糖酶在毕赤酵母中的高效表达 被引量：3

16

作者 侯重文 钊倩倩 +2 位作者 刘飞 朱希强 王凤山 《药物生物技术》 CAS 2014年第1期22-25,共4页

成功将米曲霉(Aspergillus oryzae)乳糖酶基因(lac gene)克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体中,实现该乳糖酶的有效分泌和高效表达。以米曲霉cDNA文库为模板,通过PCR扩增得到米曲霉乳糖酶基因。将含有该米曲霉乳糖酶基因的表达载... 成功将米曲霉(Aspergillus oryzae)乳糖酶基因(lac gene)克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体中,实现该乳糖酶的有效分泌和高效表达。以米曲霉cDNA文库为模板,通过PCR扩增得到米曲霉乳糖酶基因。将含有该米曲霉乳糖酶基因的表达载体pGAPZαA-lac以电转化方式转入到毕赤酵母表达系统,获得高效表达米曲霉乳糖酶的重组菌株GalC131。该工程菌株在YPD培养基中发酵72 h,发酵液中目的蛋白含量高,乳糖水解酶活达到530 U/mL,并且此工程菌株分泌表达的目的蛋白易于纯化,有利于工业化应用。 展开更多

关键词 米曲霉 乳糖酶 毕赤酵母 pgapzα载体 基因工程 克隆和表达 胞外分泌

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