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题名禽呼肠孤病毒σNS非结构蛋白基因的克隆和表达
被引量：7
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作者
谢丽基
谢芝勋
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机构
广西大学动物科技学院
广西兽医研究所
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出处
《中国兽医科技》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第12期964-968,共5页
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基金
广西留学回国人员基金项目(桂科回0144014和0342006)
广西科技攻关项目(0235001-4)
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文摘
采用RT-PCR技术扩增了禽呼肠孤病毒(ARV)S1133株与广西分离株R2 σNS非结构蛋白基因,将σNS基因克隆到质粒表达载体pGEX-4T-1上,获得的重组质粒经PCR、酶切鉴定以及测序分析,σNS基因的插入位置、大小和阅读框均正确,将阳性克隆命名为pGEX-S1133-σNS和pGEX-R2-σNS.构建好的重组质粒经37 ℃ 1 mmol/L IPTG诱导、SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,显示目的蛋白以包涵体方式表达,其蛋白质分子质量约为66.2 ku,约占菌体总量的31.5%～34.8%.Western-blotting分析表明,目的蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有较好的抗原性.
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关键词
禽呼肠孤病毒
σNS基因
克隆表达
pgex-4x-1
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Keywords
avian reovirus
σNS gene
expression
pgex-4T-1
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分类号
S852.659.4
[农业科学—基础兽医学]
Q876
[生物学]
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